铁矾醋酸洋红染色液
常用染色液配方
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
实验室常用染色液配方
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾 2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red)2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
植物染色体核型分析常用方法概述
贵州农业科学 2006, 34( 1) : 98~ 102 Guizho u A g ricultur al Sciences
1. 5 材料的染色 对材料的染色是指用颜料对材料进行处理, 仅使
染色体染色, 而染色质不染色或染色很淡, 以便观察和 分析。可分为常规染色法和分带染色法。
1. 5. 1 常规染色法 常规染色法是指用颜料对材料 进行处理, 染色体被染成一致的颜色。主要方法如下:
( 1) 醋酸洋红溶液染色[ 2, 3, 32] : 此法简单易行, 较为 常用。先将材料置于载玻片上, 用不锈钢刀片切去根 冠和伸长区, 留下分生区, 然后加一滴醋酸洋红, 待根 尖被染至暗红色时, 进行常规压片。如果想使染色的 效果更好, 可以在压片后置于酒精灯上加热数秒, 但不 能使染液沸腾。如染色过深, 可在盖玻片的一侧滴加 适量 45% 的醋酸, 另一侧用滤纸吸取染 液, 以达到褪 色的目的。
第1期
刘永安 等 植物染色体核型分析常用方法概述
99
速度较慢, 需处理较长的时间。进行预处理时所用的 化学药剂及主要方法如下:
( 1) 用低 浓度的 秋水仙 素溶液 对材 料进行 预处 理 。常用浓度 为 [ 4, 16, 20, 26, 30, 31, 84, 82, 85] 0. 01% ~ 0. 2% 。 秋水仙素有很强的毒性, 如果秋水仙素用量过大或处 理时间过长, 会引起染色体收缩过度或产生多倍体, 而 且秋水仙素的价格较贵。但由于用秋水仙素进行预处
报告铁矾醋酸洋红染色液.doc
铁矾醋酸洋红染色液简介:Leagene 铁矾醋酸洋红染色液又称明矾胭脂红染色液,主要由高浓度乙酸、洋红(也称胭脂红)等组成,pH 呈酸性。
铁矾醋酸洋红染色液主要用于花粉、动植物组织切片等样本中细胞学的染色,尤其适用于小麦花粉、洋葱根尖表皮细胞等,能够较为清楚的显示染色体、细胞核(被染成深红色),细胞质呈浅红色。
该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:自备材料:1、 载玻片2、 盖玻片3、 光学显微镜操作步骤(仅供参考):1、花粉类颗粒:取少量花粉物质置于载玻片,滴加适量铁矾醋酸洋红染色液,充分混合,立即盖片染色后,吸去多余液体,显微镜下观察。
2、动植物切片:常规处理(如脱蜡至水),滴铁矾醋酸洋红染色液染色,自来水冲洗,封片,显微镜下观察。
3、局部新鲜植物组织(如洋葱表皮),直接浸染于铁矾醋酸洋红染色液, 自来水冲洗2~3min ,置于载玻片并盖上盖玻片,显微镜观察。
4、如果效果不佳,在酒精灯上迅速来回轻烤几次,以破坏染色质,使细胞核着色。
考前须知:1、 染完色后,应立即显微镜下观察。
2、 由于本试剂含有高浓度弱酸,有刺激性气味,请注意自我保护。
3、 注意密闭保存,否那么染色效率会下降。
4、 为了您的平安和安康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号 名称 DA0043 Storage 铁矾醋酸洋红染色液 100ml RT 避光 使用说明书 1份有效期:12个月有效。
相关:编号名称CS0001 ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)DA0065 台盼蓝染色液(0.4%)DM0007 瑞氏-姬姆萨复合染色液PW0053Western抗体洗脱液(碱性)TC0699 植物总糖和复原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法)TC0733 乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)。
压片法制片
压片法制片在生物技术上,除用切片法观察细胞外,还可用压片法,尤其是观察细胞中的染色体数目,用压片法最为合适,不仅省事,结果也比切片法好。
压片法是将材料置载玻片上,用解剖刀或解剖针拨开,加染液一滴,盖以盖玻片,施以压力,使材料破碎,细胞分散,然后进行观察。
压片法种类很多,下面介绍两种:(1).醋酸——洋红法此法多用作制取幼小花药,观测花粉母细胞有丝分裂的压片。
而对食道压片有时染色不好(但对洋葱食道染色较好)。
其步骤如下:a.将花药或根尖(先切成0.5cm长),投入卡诺氏固定液中固定1刻钟至l小时,然后移至70%酒精中保存。
b.挑紧固留存的材料放进盐酸酒精离解液(95%酒精一份,淡盐酸一份,将二者混合即为成)中5~8分钟。
或复置1n盐酸(挑比重1.19的盐酸82.5毫升,搅拌至1000毫升即为成)中于60℃的水浴温度下,处置6~8分钟,至透明化年才。
c.用清水冲洗干净解离液。
d.挑晒干的材料,放到载玻片上,用醋酸洋红染液(或醋酸苏木精染液)染色5~10分钟。
e.然后将材料移至另一清洁的载玻片上。
重新用染液装片,覆以盖玻片,以铅笔的橡皮头端轻轻压盖玻片,使材料呈现分散的薄层,置镜下观察。
(2).铁矾——苏木精法此法一般用于细胞有丝分裂中的染色体计数,由于染色体被染成紫兰黑色,用于显微照相,效果较好。
(由于各种植物有自己的特殊性,因此,取材的时间、取材的部位、预处理的时间、固定的时问、水解的时间、染色的时间等,都有可能不同。
在此只作了大致的介绍,具体材料还需作预备实验进行摸索。
另外还要注意,各次水洗一定要洗干净沾在材料上的药液,以免影响下一个步骤的结果。
)染色步骤如下(以蚕豆根尖作材料为例):a.贴近生活:将蚕豆种子萌生。
等待种子根长至1cm左右,在上午8时~11时之间,切开长约0.5cm的食道,展开预处理。
b.预处理:目的使分裂细胞的染色体缩短和比较分散,便于压片观察。
预处理是在固定以前进行,方法是将材料切下放入以下溶液:0.05~0.2%秋水仙碱水溶液中处置2~5小时;或:对二氯苯饱和水溶液中处理3-5小时;或:8-羟基奎啉(0.004~0.005%),处置2~12小时;或:富民隆乳剂(0.01%),处理24~48小时;或:在0~3℃下冷藏处置24小时。
染色液配方
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
常用染色液的配制
常用染色液的配制常用染色液的配制1.吕氏(Loefflev)美蓝染色液A液:2%美蓝(Methylene blue)95%酒精溶液B液:10%KOH溶液取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。
2.石炭酸复红染色液A液:4%碱性复红(basic fuchsin)95%酒精溶液将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解、配成A液。
B液:5%石炭酸溶液取A液10ml、B液90ml混合即可。
一般可将此溶液稀释5-10倍使用。
但稀释液易变质失效,一次不宜多配。
3.革兰氏(gram)染色液(1)草酸铵结晶紫染液:A液:1%结晶紫(Crystal violet)95%酒精溶液B液:1%草酸铵(Ammonium oxalate)溶液取A液20mlB液80ml,静置48/小时后使用。
(2)路哥氏(Lugol)碘液:碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液另,待碘全部溶解后,加够水即成。
(3)95%酒精溶液(4)蕃红(沙黄)复染液:2.5%蕃红(Safranlne O)95%酒精溶液。
取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。
4.芽孢染色液(1)5%孔雀绿(Malachite green)溶液。
(2)0.5%蕃红溶液。
(3)苯酚品红溶液称取11g碱性品红溶于100ml无水酒精中。
再取上述溶液10ml与100ml 5%的苯酚溶液混合,过滤备用。
(4)黑色素(nigrosin)溶液10%黑色素溶液,置沸水浴中30min后,滤纸过滤二次,补加水到100ml,然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。
5.荚膜染色液(1)黑色素水溶液将黑色素在蒸馏水中煮沸5min,配成5%溶液,然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。
(2)蕃红染色液与革兰氏染色液中的蕃红复染液相同。
6.鞭毛染色液A液:单宁酸5.0g、FeC131.5g、蒸馏水100ml,福尔马林(15%)2.0ml、NaOH(1%)1.0ml。
实验室常用染色液配方
实验室常用染色液配方实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B 液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾 2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red)2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
高中生物备课素材:如何通过实验观察减数分裂
如何通过实验观察减数分裂?减数分裂是生物学《必修2·遗传与进化》中第二章第一节内容,是整本教材内容的基础,唯有充分理解减数分裂的过程及意义,才能有效学习和认识生物的遗传与进化。
在显微镜下,学生通过观察减数分裂过程中各分裂相,可清晰地观察到减数分裂过程中染色体的形态变化,深刻认识减数分裂的动态过程。
而在教材中,只有减数分裂的模拟实验,虽能满足教学要求,但缺乏对学生动手操作能力的培养,欠缺实验方法及详细的操作步骤。
那么,如何通过实验观察减数分裂?试题解析试题1:下列有关几个实验的叙述正确的是()A.观察蝗虫精母细胞减数分裂时看到有四分体的细胞是处于减数第一次分裂的前期B.建立减数分裂中染色体变化的模型时两条相同颜色的染色体代表同源染色体C.制作DNA双螺旋结构模型时先要进行设计再选择多种类型的核苷酸为材料D.根据调查的数据,就能确定各种遗传病的类型和发病的根本原因解析:本题考查了减数分裂过程中染色体的行为变化以及遗传病的调查等方面的知识。
在减数分裂过程中,四分体出现在减数第一次分裂的前期,A正确;同源染色体是形态、大小相同,一条来自于父方、一条来自于母方的两条染色体,应该用两条颜色不同的染色体代表同源染色体,B错误;DNA是由四种脱氧核苷酸组成的,因此制作DNA双螺旋结构模型时要设计四种类型的核苷酸为材料,C错误;根据调查的数据,只能获得该遗传病的发病率,D错误。
故答案为A。
试题2:下图为“观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片”实验的相关照片,图中MⅠ代表减数第一次分裂,MⅡ代表减数第二次分裂。
下列叙述正确的是()A.该实验过程中要进行解离、漂洗、染色、制片等操作B.该实验可直接用高倍镜进行观察C.可在显微镜视野下观察到乙图变化的连续过程D.可在图乙的MⅠ①中找到图甲的结构解析:该实验是观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片,所以不需要进行解离、漂洗、染色、制片等操作,A错误;该实验先在低倍镜下观察找到目标,再换高倍镜观察,B错误;制作装片后细胞已经死亡,因此不能观察到乙图变化的连续过程,C错误;减数第一次分裂中期有可能发生同源染色体的非姐妹染色单体交叉互换现象,故可在图乙的MⅠ①中找到图甲的结构,D正确。
生物学--生物染色剂
生物染色剂斐林试剂:检测可溶性还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖),沸水浴加热,出现砖红色沉淀。
苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ:检测脂肪,苏丹Ⅲ遇到脂肪出现橘黄色,苏丹Ⅳ遇到脂肪出现红色。
双缩脲试剂:检测蛋白质,出现紫色甲基绿:检测DNA在细胞中分布,遇到DNA出现绿色。
吡罗红:检测RNA在细胞中分布,遇到RNA出现红色。
二苯胺:检测DNA的存在,DNA遇到二苯胺,水浴加热出现蓝色。
健那绿:检测细胞中的线粒体,线粒体遇到健那绿呈现蓝绿色。
碘液:检测淀粉,淀粉遇到碘液出现蓝色。
澄清石灰水:检测CO2,二氧化碳可以使澄清的石灰水变浑浊。
溴麝香草酚蓝水溶液:检测二氧化碳,二氧化碳可以使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝色变成绿色再变成黄色。
重铬酸钾溶液:检测酒精,可以在酸性条件下与酒精发生反应出现灰绿色。
龙胆紫或者醋酸洋红:检测细胞核中的染色质,可以将染色质染成深色。
高中生物学重要的酶(部分)限制性核酸内切酶:将DNA分子的双链骨架切割,一种限制性核酸内切酶识别一种序列,而且从特定的位点切割。
限制性核酸内切酶破坏DNA分子的骨架上的磷酸二酯键。
DNA连接酶:将被限制酶切割的双链DNA片断连接起来。
DNA连接酶连接DNA分子的骨架上的磷酸二酯键。
DNA聚合酶:在DNA复制的时候需要,将单个脱氧核苷酸一个一个的连接起来,DNA聚合酶连接DNA骨架上的磷酸二酯键。
解旋酶:将DNA的双螺旋解开,解旋酶破坏的是氢键。
(也可以用高温解旋)RNA聚合酶:催化DNA转录为mRNA分子。
胰蛋白酶:将动物细胞间隙的蛋白质水解,使组织分散成游离细胞。
逆转录酶:催化RNA逆转录形成DNA分子。
生物染色剂高中几种染色剂的使用原理、使用方法归纳1。
甲基绿和吡罗红:实验原理:甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色.利用甲基绿,吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布.试剂及配制方法(1)试剂质量分数为0.9%的NaCl溶液,质量分数为8%的盐酸,乙酸钠,乙酸,蒸馏水,吡罗红甲基绿混装粉。
常见染色剂
检验痰液中的弹性组织
密封保存
医药紫药水
番红染液
染色导管
0.2%考马斯亮蓝R250
紫色粉末,微溶于热水和醇,不溶于冷水
蛋白质染色
凝胶电泳
植物细胞骨架的观察
密封保存
0.2%考马斯亮蓝G250
溶于醇和热水,微溶于冷水
甲基绿—哌洛宁染液
核染色剂
细菌染色
细胞核分离与鉴定
密封保存
不可久置
0.2%(或1%)詹纳斯绿B染液(janus green)
碱性复红
褐球固氮菌荚膜染色
复红(酸性)
绿色金属光泽的深红色
检定游离氯,结缔组织染色
姬姆萨染色液(giemsa)
沙眼衣原体的4种不同类型包含体;肺炎支原体
动物精母细胞减数分裂染色体制片与观察
乳酸石炭酸棉蓝染色液
霉菌菌丝和孢子均可染成蓝色
1%瑞氏染色液
对原生质的染色有区别嗜中性、碱性、酸性部分的作用
血液的染色
染色剂名称
化学性质
作用
典型实验
备注
碘-碘化钾
遇淀粉变蓝色
对细胞内淀粉的检验
细胞内后含物质的测定
苏丹Ⅲ
红棕色粉末,溶于氯仿、冰乙酸,稍溶于乙醚、醇、丙酮、石油醚、不挥发油、热甘油和挥发油、不溶于水
对细胞内脂肪及类似物质的检验
细胞内后含物质的测定
密封保存
4%铁矾
色譜分析试剂
胞间连丝观察
0.5%苏木精
氧化苏木精
品红的盐酸盐
1%醋酸洋红
蝗虫精巢的压片法观察动物精母细胞减数分裂染色体
密封避光保存
洋红(胭脂红)
鲜红色片状,能溶于硼砂液,其碱性溶液为深红色,部分溶于热水,不溶于冷水或稀酸
生物学常用染色液汇总
常用染料介绍(一)天然染料1、苏木精苏木精是从南美的苏木(热带豆科植物)干枝中用乙醚浸制出来的一种色素,是最常用的染料之一。
苏木精不能直接染色,必须暴露在通气的地方,使他变成氧化苏木精(又叫苏木素)后才能使用,这叫做“成熟”。
苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色力愈强。
被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。
所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。
常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。
苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染细胞核的优良材料,他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。
分化时组织所染的颜色因处理的情况而异,用酸性溶液(如盐酸—酒精)分化后呈红色,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。
2、洋红洋红又叫胭脂红或卡红。
一种热带产的雌性胭脂虫干燥后,磨成粉末,提取出虫红,再用明矾处理,除去其中杂质,就制成洋红。
单纯的洋红不能染色,要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。
常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸,碱性溶液有氨水、硼砂等。
洋红使细胞核的优良染料,染色的标本不易褪色。
用作切片或组织块染都适宜,尤其适宜于小型材料的整体染色。
用洋红配成的溶液染色后能保持几年。
洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。
(二)人工染料人工染料,即苯胺染料或煤焦油染料,种类很多,应用极广。
它们的缺点是经日光照射容易褪色,苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。
在制片中注意掌握酸碱度,并避免日光直射,也能经几年不褪色。
1、酸性品红酸性品红是酸性染料,呈红色粉末状,能容于水,略溶于酒精(0.3%)。
他是良好的细胞制染色剂,在动物制片上应用很广,在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
他跟甲基绿同染,能显示线粒体。
组织切片在染色前先浸在带酸性的水中,可增强它的染色力。
酸性品红容易跟碱起作用,所以染色过度,易在自来水中褪色。
2、刚果红刚果红是酸性染料,呈枣红色粉末状,能溶于水喝酒精,遇酸呈蓝色。
遗传学实验复习
16、果蝇伴性遗传为什么要做正反交?
因为正反交结果不同,是伴性遗传的典型特点,正反交后代雌雄性状表现是区分伴性遗传和常染色体遗传的一个重要特征。
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10、经过预处理和未经处理的片子有何不同?为什么?
预处理的作用:为了阻止纺锤体的活动以获得较多的中期分裂相,同时染色体相对缩短,便于染色体分散和计数。
11、固定、解离、染色、烤片、压片的作用分别是什么?它们对时间有什么要求?
固定:用药物将活细胞迅速杀死,使得染色体基本保持原有形态,一般为2-24小时。
人工诱发:抑制细胞分裂时纺锤体的形成,使染色体向两级的移动被阻止,而停留在分裂中期,这样细胞不能继续分裂,从而产生染色体数目加倍的核。
5、染色体组型分析的染色体形态依据是?
染色体的数目,大小和着丝粒位置,臂比、次缢痕、随体等形态特征。
6、染色体组型分析的粘贴依据?
对染色体进行测量,根据测量数据将染色体配对,并依据从大到小,短臂向上,长臂向下的顺序,把染色体的着丝粒排在一条直线上。如果染色体长度相同,则以短臂长度为标准,从大到小排列,有特殊标记的以及性染色体可单独排列。
-至此,有丝分裂全过程就被认为划分为前期、中期、后期、末期和间期5个时期,有丝分裂全过程的描述得到了统一。
有丝分裂的过程:
间期:包括G1、S、G2期。
G1期,合成细胞生长必需的蛋白质、糖类和脂质等生化物质;染色质去凝集,为DNA合成做准备,因此又称DNA合成预备期或复制前期。有些细胞暂时离开了细胞周期进入G0期,停止分裂;一旦得到信号指令便又会返回细胞周期,分裂增殖。G0期细胞多发生于G1期,人体绝大多数细胞是处于G0期。像肝细胞,当它受到外部因素刺激后,如切割掉部分肝,便可使细胞从G0期返回到细胞周期中。
实验室常用染色液配方
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffl er)美蓝染色液A液:美蓝(Methyl ene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basicfuchsi n) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclke r改订)A液:结晶紫(Crysta i violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘 1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safran in O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malach ite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigros in) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congored)2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
常用染色液的配制
常用染色液的配制附录二:常用固定液和染色液的配制常用染色液的配制1. 番红水液番红0.1g溶入蒸馏水,定溶至100ml。
2. 番红酒液番红0.5g或1g溶入50%酒精,定溶至100ml。
3. 固绿染液固绿0.1g溶入95%酒精,定溶至100ml。
4. 碘-碘化钾染液碘化钾溶入100ml蒸馏水,再加入1g碘,溶解后即可使用。
5. 苏丹Ⅲ(或Ⅳ)染液将0.1g苏丹Ⅲ或Ⅳ溶解在50ml丙酮中,再加入70%酒精50ml。
6.改良苯酚品红染液原液A:将3g碱性品红溶入100ml 70%酒精,此液可长期保存。
原液B:将10mlA液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。
原液C:将55mlB液加入到6ml的冰醋酸和6ml的38%的甲醛中。
染色液:取C液20ml,加45%冰醋酸80ml,充分混匀,再加入1g 山梨醇,放置14天后使用,可保存3年。
7. 间苯三酚染液将5g间苯三酚溶入100ml 95%酒精(若溶液呈黄色,即为失效)。
8. 中性红染液将0.1g中性红溶入100ml蒸馏水,用时稀释10倍。
9. 钌红染液将5~10mg钌红溶入25~50ml蒸馏水,现用现配。
10.龙胆紫染液将0.2g龙胆紫溶入100ml蒸馏水。
现常用结晶紫代替。
必要时可将医用紫药水稀释5倍后代用。
11.铁醋酸洋红染液先将100ml 45%醋酸水溶液置入200ml的锥形瓶中煮沸,移去火苗,然后慢慢地分多次加入1g洋红粉末(切记不可一次倒入)。
待全部倒入后,再煮沸1~2min,并悬入一生锈的小铁钉于染液中,过1min 后取出,使染色剂略含铁质,以增加染色性能。
静置12h后过滤于棕色瓶中备用(置于避光处)。
12.苏木精染液苏木精的配方很多,常用的有如下3种:配方Ⅰ:苏木精水溶液0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中,静置24h后可使用。
配方Ⅱ:代氏苏木精(Delarfield’s haematoxylin)甲液:苏木精1g + 无水酒精6ml乙液:硫酸铝铵(铵矾)10g + 蒸馏水100ml丙液:甘油25ml + 甲醇25ml分别配制甲、乙两液,将甲液一滴滴地加入乙液中,充分搅拌后,放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口,置于温暖和光线充足处7~10天,再加入丙液,混匀后静置1~2月,至颜色变为深紫色后,过滤备用,可长期保存。
醋酸洋红液为什么是碱性染料?
醋酸洋红液为什么是碱性染料?醋酸洋红液为什么是碱性染料?一:醋酸洋红的PH值小于7高中生物学课本在描述染色质时指出:染色质(体)容易被碱性染料染成深色.实验中对染色质(体)进行染色.须使用龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液等碱性染色剂.这些染色剂是以龙胆紫或洋红溶解于醋酸溶液中制得.配制后的龙胆紫溶液pH值约小于7(呈酸性).二:醋酸洋红是碱性染色剂那么为什么把龙胆紫溶液称为碱性染色剂呢?作为染色剂必须具备两个条件:一是具有颜色,二是要与被染组织间有亲和力.染料的颜色和它与组织间的亲和力是由染料本身的分子结构决定的.产生颜色的发色基团和与组织间产生亲和力的助色基团共同决定了染色剂的染色性质.作为染料物质.除了有发色基团外.还需要有一种使化合物发生电离作用的助色基团.如染料化合物中往往由硝基(-NO2).偶氮基(-N=N-).乙烯基等形成了发色基团.而由-OH.-SO3H.-COOH等酸性基团和-NH2.-NHCH3.-N(CH3)2等碱性基团构成了助色基团.它们的存在使染料物质离子化.极性增强.促进染料与组织间发生作用.产生染色效果.我们把助色基团中具有酸性或碱性基团的染料分别称为酸性或碱性染色剂.如硝基是一种发色基团.当苯环中的3个氢原子被3个硝基取代后就成为三硝基苯的黄色化合物.三硝基苯不是染料.仅有一个发色基团.它不溶解于水.也不能电离.既不酸也不碱.不能与酸或碱形成盐类.如果三硝基苯分子中.用羟基再置换一个氢原子.就成为三硝基苯酚.即苦味酸.它即是一种黄色染料.有电离作用.与强碱能形成盐.这里的羟基便是助色基团.由此可知.苦味酸的颜色是由发色基团(硝基)所致.而它的染色性能则是由助色基团(羟基)形成的.如用氨基代替硝基.就形成无色化合物.不是染料.由此可见.作为染料.必须有发色基团和助色基团相互配合.缺一不可.如伊红Y含有一个(-COOH)助色基团.在水中电离时放出氢离子.本身带负电荷.配制成伊红Y染料时.与强碱NaOH作用生成盐(-COONa).此物质的Na+反而在溶液中呈碱性.所以不能认为酸性染料在溶液中就是酸性.所以.酸性(碱性)染色剂的界定并非由染料溶液的pH值决定的.而是根据染料物质中助色基团电离后所带的电荷来决定.一般来说.助色基团带正电荷的染色剂为碱性染色剂.反之则为酸性染色剂。
附录一染色液的配制免费
附录一染色液的配制免费附录一染色液的配制1、吕氏(Loefflev)美蓝染色液A液:2%美蓝(Methylene blue)95%酒精溶液B液:10%KOH溶液取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。
2、石炭酸复红染色液A液:4%碱性复红(basic fuchsin)95%酒精溶液B液:5%石炭酸溶液将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解、配成A液。
取A液10ml、B液90ml混合即可。
一般可将此溶液稀释5-10倍使用。
但稀释液易变质失效,一次不宜多配。
3、革兰氏(gram)染色液(1)草酸铵结晶紫染液:A液:1%结晶紫(Crystal violet)95%酒精溶液B液:1%草酸铵(Ammonium oxalate)溶液取A液20mlB液80ml,静置48/小时后使用。
(2)路哥氏(Lugol)碘液:碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液另,待碘全部溶解后,加够水即成。
(3)95%酒精溶液(4)沙黄(蕃红)复染液:2.5%沙黄(Safranlne O)95%酒精溶液。
取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。
4、芽孢染色液(1)5%孔雀绿(Malachite green)溶液。
(2)0.5%沙黄溶液。
5、荚膜染色液将黑色素在蒸馏水中煮沸5min,配成5%溶液,然后加入福尔马林(40%甲醛)0.5%(V/V)作防腐剂。
(2)沙黄染色液与革兰氏染色液中的沙黄复染液相同。
6、鞭毛染色液A液:单宁酸5.0g、FeC131.5g、蒸馏水100ml,福尔马林(15%)2.0ml、NaOH(1%)1.0ml。
配好后应当日使用,次日即效果差,第三日则不能使用。
B液:2%AgNO3溶液待AgNO3溶解后,取出10ml备用。
向其余的90ml AgNO3中滴入浓NH4OH,使之成为很浓厚的悬浮液,再继续滴加NH4OH,直到新形成的沉淀又重新刚刚溶解为止。
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铁矾醋酸洋红染色液
简介:
Leagene 铁矾醋酸洋红染色液又称明矾胭脂红染色液,主要由高浓度乙酸、洋红(也称胭脂红)等组成,pH 呈酸性。
铁矾醋酸洋红染色液主要用于花粉、动植物组织切片等样本中细胞学的染色,尤其适用于小麦花粉、洋葱根尖表皮细胞等,能够较为清楚的显示染色体、细胞核(被染成深红色),细胞质呈浅红色。
该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
自备材料:
1、载玻片
2、盖玻片
3、光学显微镜
操作步骤(仅供参考):
1、花粉类颗粒:取少量花粉物质置于载玻片,滴加适量铁矾醋酸洋红染色液,充分混合,立即盖片染色后,吸去多余液体,显微镜下观察。
2、动植物切片:常规处理(如脱蜡至水),滴铁矾醋酸洋红染色液染色,自来水冲洗,封片,显微镜下观察。
3、部分新鲜植物组织(如洋葱表皮),直接浸染于铁矾醋酸洋红染色液,自来水冲洗2~3min,置于载玻片并盖上盖玻片,显微镜观察。
4、如果效果不佳,在酒精灯上迅速来回轻烤几次,以破坏染色质,使细胞核着色。
注意事项:
1、染完色后,应立即显微镜下观察。
2、由于本试剂含有高浓度弱酸,有刺激性气味,请注意自我保护。
3、注意密闭保存,否则染色效率会下降。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号
名称DA0043Storage
铁矾醋酸洋红染色液
100ml RT 避光使用说明书1份
有效期:12个月有效。
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