碧云天 细胞凋亡-一步法TUNEL检测试剂盒
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒显色法-碧云天
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)产品简介：碧云天生产的显色法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。
对于待检测的细胞或组织样品，经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤，即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。
细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。
基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP)，随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合，最后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞，从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞，这就是本试剂盒通过TUNEL(T dT-mediated d U TP N ick-E nd L abeling)法检测细胞凋亡的原理。
本试剂盒有如下优点。
(1) 高灵敏度：可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。
(2) 特异性好：TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。
(3) 快速：仅需约2-3个小时即可完成。
(4) 应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。
这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。
tunel法检测细胞凋亡实验步骤
tunel法检测细胞凋亡实验步骤细胞凋亡是一种重要的生物学过程，它在多种生理和病理情况下发挥着关键作用。
为了研究细胞凋亡的机制和调控，科学家们发展了多种方法来检测细胞凋亡。
其中一种常用的方法是使用tunel法。
本文将介绍tunel法检测细胞凋亡的实验步骤。
实验步骤如下：1. 细胞培养和处理我们需要选择一种适合的细胞系进行实验。
常用的细胞系有HEK293、HeLa和Jurkat等。
将细胞培养在含有适当培养基和补充物的培养皿中，并在37摄氏度、5%二氧化碳的培养箱中培养至细胞密度适当。
在进行实验之前，需要根据实验设计的需要处理细胞。
例如，可以给予细胞不同的处理，如药物刺激、放射线照射或感染病毒等。
2. 固定细胞将处理后的细胞用适当的缓冲液进行固定。
常用的缓冲液有4%的乙醛或4%的甲醛等。
将缓冲液加入培养皿中，使细胞完全覆盖，并在室温下固定15分钟。
3. 洗涤细胞将固定的细胞用磷酸盐缓冲液（PBS）洗涤3次，每次5分钟。
洗涤的目的是去除固定液中的残留物质，以减少后续步骤中的非特异性背景。
4. 使细胞透膜使用蛋白酶K或蛋白酶XXIV等酶将细胞膜上的蛋白质降解，使细胞透膜。
将适量的酶加入细胞中，根据实验的需要，可以调整酶的浓度和作用时间。
一般来说，酶的浓度为20μg/ml，作用时间为30分钟。
5. tunel反应使用tunel试剂盒进行细胞凋亡检测。
tunel试剂盒中含有标记有荧光物质的dUTP，可以与DNA断裂的末端结合。
按照试剂盒说明书的要求，将tunel试剂加入细胞中，与细胞中的DNA断裂末端发生连接反应。
反应时间一般为1-2小时。
6. 洗涤和染色将反应结束后的细胞用PBS洗涤3次，每次5分钟。
然后，可以选择使用荧光染料（如DAPI）染色，以标记细胞核。
将染色液加入细胞中，孵育15分钟后再次用PBS洗涤。
7. 显微镜观察和图像获取将处理后的细胞放置在显微镜载玻片上，并使用合适的显微镜观察细胞。
可以调整显微镜的放大倍数和焦距，以获得清晰的图像。
TUNEL细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤
TUNEL细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤--------------------------------------------------------------------------------凋亡细胞的原位末断转移酶标记法（TUNEL法）细胞凋亡的多步骤机制作用的最终环节是；细胞内源性核酸内切酶的激活而导致核染色质DNA双链的断裂。
大量DNA片段暴露出的3 羟基在末断转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶的作用下，与生物素或地高辛标记的核苷酸结合，最终借助与卵白素或抗地高辛抗体结合的荧光素或HRP，使凋亡细胞被特异性地标记和显示出来。
TUNEL细胞凋亡试剂盒由美国罗氏公司提供试剂1：酶浓缩溶液（Enzyme Solution）试剂2：标记溶液（Lable Solution）试剂3：转化剂-POD（Converter-POD）酶标记抗荧光素抗体（即用型）试验所需其它试剂：非石蜡切片:·冲洗缓冲液:磷酸盐缓冲液（PBS）·阻断溶液:0.3%H2O2甲醇溶液·固定溶液:4%多聚甲醛（溶剂pH7.4新鲜配制的PBS溶液）·渗透液:0.1%Triton甔-100（溶于新鲜配制的0.1%枸橼酸钠溶液）Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚)名：曲拉通X-100，乳化剂OP分子式：C34H62O11石蜡切片:·二甲苯和乙醇（100%、95%、90%、80%、70%用蒸馏水稀释）·冲洗缓冲液:磷酸盐缓冲液（PBS）·蛋白酶K 工作液10~20mg/ml溶于10mM Tris/HCl（pH7.4~7.8）根据需要选择:·渗透液:0.1%TritonX-100（溶于新鲜配制的0.1%枸橼酸钠溶液）·胃酶溶液（0.25%-0.5%溶于HCl ，pH2）或胰酶·0.1M枸橼酸缓冲液，pH6，微波修复材料：微波炉，微波输出功率850W-2000W2 .选用中性甲醇固定的活检及实验动物标本，常规脱水，二甲苯透明，石蜡包埋。
TUNEL细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤精
TUNEL细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤精TUNEL（Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling）细胞凋亡试剂盒是一种常用的检测细胞凋亡的方法。
本文将介绍TUNEL细胞凋亡试剂盒的内容及操作步骤。
1.引物溶液：含有dUTP（脱氧尿苷三磷酸）的荧光标记的核苷酸。
2.终止缓冲液：用于停止反应和洗涤。
3. TUNEL酶溶液：含有DNA连接酶（terminal deoxynucleotidyl transferase），用于在DNA断裂的末端添加dUTP标记。
4.正对照组：包括经过DNA内切酶处理的组织切片或细胞，用于确定试剂盒的反应情况。
步骤一：取材将需要检测的组织切片或细胞标本取出，放入离心管或培养皿中。
步骤二：固定用4%的冷乙醇或4%的帕拉醛对组织切片或细胞标本进行固定，固定时间为10-30分钟。
步骤三：洗涤用PBS（磷酸盐缓冲液）洗涤固定的样本3次，每次洗涤5分钟。
步骤四：蛋白酶消化对组织切片或细胞标本进行蛋白酶消化，以去除背景蛋白质干扰。
消化时间和消化酶的浓度需要根据实验条件进行优化。
步骤五：洗涤用PBS洗涤样本3次，每次洗涤5分钟。
步骤六：加入TUNEL酶溶液将TUNEL酶溶液滴加到样本上，保持湿润。
反应时间为1-2小时，可以根据实验需要进行优化。
步骤七：终止反应加入终止液停止反应，并用PBS洗涤样本3次，每次洗涤5分钟。
步骤八：显微镜观察将样本用荧光或显色试剂染色，然后用荧光显微镜或普通显微镜观察，并拍摄照片。
步骤九：分析数据使用图像分析软件对显微镜拍摄的照片进行图像分析，在感兴趣区域计算标记的细胞数量，并计算相对细胞凋亡率。
值得注意的是，在进行TUNEL细胞凋亡试剂盒检测时，需要根据实验需要进行优化，如反应时间、荧光染色时间、荧光强度测量等。
此外，为了准确地判断细胞中的凋亡现象，可以与其他细胞凋亡指标一起使用，如Annexin V染色、Caspase活性检测等。
TUNEL法检测细胞凋亡
TUNEL法检测细胞凋亡细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。
基因组DNA 断裂时，暴露的3'-0H 可以在末端脱氧核苷酸转移酶（Terminal Deox yn ucleotidyl Tran sferase,TdT）的催化下加上荧光素（FITC）标记的dUTP （fluorescein-dUTP），从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL 法检测细胞凋亡的原理。
TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂（和细胞凋亡时的断裂方式不同）。
这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。
针对问题2（TUNEL法的实验原理是什么？）：基本原理：对不同组织切片先增加细胞膜通透性，然后让rTDT和bio标记的dUTP进入细胞内，在rTDT的辅助下dUTP与核断裂的DNA 3 -0H结合，再用HRP标记的链霉亲和素与dUTP 上的biot in 结合（每个链霉亲和素至少可以再结合3个biot in 分子），最后用DAB过氧化氢与SP上的辣根过氧化物酶HRP发生氧化、环化反应，形成苯乙肼聚合物而呈现棕褐色，最终通过计数每张切片上不同视野中TUNEL阳性细胞的比例来判断细胞凋亡发生情况。
■1. TUNEL工作原理：简单说就是一一TUNEL细胞凋亡检测试剂盒是用来检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA的断裂情况。
其原理是；生物素（biot in ）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（T dT En zyme）的作用下，可以连接到凋亡细胞中断裂的DNA的3' - 0H末端，并可与连接了的辣根过氧化酶的链霉亲和素（Streptavidin-HRP ）特异结合，在辣根过氧化酶底物二氨基联苯胺（DAB的存在下，产生很强的颜色反应（呈深棕色），特异准确地定位正在凋亡的细胞，因而在普通显微镜下即可观察和计数凋亡细胞；由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-0H形成，很少能够被染色。
TUNEL细胞凋亡检测(荧光标记)操作流程
一、TUNEL实验试剂(1)DeadEnd™Fluorometric TUNEL System试剂盒购自Promega公司(产品编号G3250)(2)二甲苯购自国药集团化学试剂有限公司（产品编号80139118，CAS号108-38-3，500ml）(3)无水乙醇购自中国上海生工生物有限公司（产品编号ET0737-500ml）(4) 过氧化氢购自上海生工生物有限公司(产品编号H1976-500ml)(5) Proteinase K购自上海生工生物工程技术服务公司(产品编号BSP169-2ml)(6)多聚甲醛购自上海生工生物有限公司（产品编号PB0684-500g）(7) Propidium iodide购自Sigma（产品编号P4170-10MG）(8) SlowFade® Gold antifade reagent购自Life Technologies（产品编号36936）二、具体实验步骤A. 石蜡包埋组织预处理：1.二甲苯5min (500ml二甲苯)2.二甲苯5min（500ml二甲苯）3.无水乙醇5min（500ml无水乙醇）4.无水乙醇5min（500ml无水乙醇）5.80%乙醇5min（500x0.8=400ml无水乙醇）6.70%乙醇5min（500x0.7=350ml无水乙醇）7.PBS 5min（500ml）8.PBS 5min（500ml）9.PBS 5min（500ml）10.4%多聚甲醛in PBS，15min11.PBS 5min（500ml）12.PBS 5min（500ml）13.Proteinase K in PBS (100ul每个样品，共6ml), 8-10min14.PBS 5min（500ml）15.PBS 5min（500ml）16.4%多聚甲醛in PBS，5min17.PBS 5min18.PBS 5min共105分钟，实际约2个小时B. 凋亡检测1.每个样品，100ul平衡缓冲液覆盖细胞，室温5-10分钟2.在平衡细胞的同时，在冰上解冻核苷混合物，并且依照表1，准备足够量的用于所有实验的和可选阳性对照反应（见4.E节）的rTdT孵育缓冲液。
一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒
一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒产品简介：碧云天生产的一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。
对于经过固定和洗涤的细胞或组织，只要经过一步染色反应，洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。
细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。
基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上绿色荧光探针荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP)，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL(T dT-mediated d U TP N ick-E nd L abeling)法检测细胞凋亡的原理。
注：FITC是fluorescein isothiocyanate的缩写，实际上大多数情况下所谓的FITC即为fluorescein。
本试剂盒有如下优点。
(1) 高灵敏度：可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。
(2) 特异性：TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。
(3) 快速：仅需约1-2个小时即可完成。
(4) 方便：只需一步染色反应，洗涤后即可观察，不必使用二抗等进行多步操作。
(5) 应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。
这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。
细胞凋亡-DNA Ladder抽提试剂盒
细胞凋亡－DNA Ladder抽提试剂盒产品简介：碧云天生产的细胞凋亡－DNA Ladder抽提试剂盒，是针对细胞凋亡过程中产生的核小体间DNA链断裂而设计的。
可以非常有效地抽提最小片断为180-200bp的DNA ladder，同时又可以抽提到50kb以上的基因组DNA。
DNA ladder也称DNA fragmentation，是细胞凋亡的一个重要指标。
通常观察到DNA ladder，就可以判定细胞发生了凋亡。
本试剂盒足够抽提50个细胞或组织样品。
保存条件：-20℃保存，一年有效。
10M 醋酸铵和TE也可以室温保存。
注意事项：需自备Tris平衡苯酚、氯仿和无水乙醇。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：1. 样品收集a) 对于组织样品：切下组织，并剪切成小块，置液氮中冻结，研碎或捣碎。
或直接冰浴上匀浆。
b) 对于贴壁细胞：胰酶消化后，PBS或生理盐水洗一次，1000-2000g离心1-2分钟，弃上清，收集细胞。
c) 对于悬浮细胞：1000-2000g离心1-2分钟，弃上清，收集细胞。
2. DNA ladder抽提a) 每1毫升样品裂解液中加入5微升蛋白酶K，混匀。
b) 对于上述收集好的样品，每5毫克组织或者106个细胞中加入500微升添加了蛋白酶K的样品裂解液，V ortex混匀，充分裂解组织或细胞。
c) 50℃水浴消化过夜(通常12-20小时皆可)。
d) 加入500微升Tris平衡苯酚。
e) V ortex剧烈混匀，使有机相和水相充分混合，以达到抽提效果。
4℃，12,000g离心5分钟。
f) 缓慢吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体)，剩余的水相用等体积Tris平衡酚再抽提一次(同步骤e)。
g) 缓慢吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体)，剩余的水相用等体积氯仿再抽提一次(同步骤e)。
h) 慢慢吸出约300微升上清液，加入60微升10M醋酸铵和600微升无水乙醇，颠倒数次混匀，此时可见DNA沉淀产生。
普利莱 TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒（绿色 FITC 标记荧光检测法，通用型）说明书
62053186T UNEL细胞凋亡检测试剂盒（绿色FITC标记荧光检测法，通用型）C0001C0002描述：细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的阶段性过程。
染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段，然后大约30%的染色体DNA在Ca2+和Mg2+依赖的核酸内切酶作用下，在核小体单位之间被随机切断，形成180-200bp核小体DNA多聚体。
因此在细胞凋亡晚期，DNA会被降解为180-200 bp的片段，断裂的基因组DNA上暴露出大量的3'-OH末端。
末端脱氧核糖核苷酸转移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT）是一种不依赖于模板的DNA聚合酶，可以催化脱氧核苷酸结合到断裂的DNA分子3'-OH末端。
因此TUNEL(TdT mediated dUTP Nick End Labeling)细胞凋亡检测试剂盒可以用来检测组织细胞在凋亡晚期过程中细胞核DNA的断裂情况。
其原理是在TdT酶的作用下，在基因组DNA断裂时暴露出的3´-OH末端掺入荧光素标记的dUTP（FITC-12-dUTP），从而可以用荧光显微镜或流式细胞仪检测（FITC激发450-500nm，发射515-565nm）。
本试剂盒应用范围广，适用于石蜡组织切片，冰冻组织切片、细胞爬片、细胞涂片等的细胞凋亡检测。
储存与运输：冰袋（wet ice）运输；本试剂盒储存在-20℃，FITC-12-dUTP Labeling Mix需避光储存于-20℃，有效期12个月。
组成实验前准备：Component Number Component50T100T R1Recombinant TdT Enzyme50µL2×50µLR2FITC-12-dUTP Labeling Mix250µL2×250µLR3Equilibration Buffer5×1mL10×1mLR4Proteinase K（200µg/mL）1mL2×1mL产品说明书1份1.PBS磷酸盐缓冲液2.固定液：溶于PBS或其他缓冲体系的4%多聚甲醛，pH7.43.破膜液：溶于0.1%柠檬酸钠的0.1%Triton X-1004.配制含0.2%Triton X-100的PBS；配制含0.1%Triton X-100及5mg/mL BSA的PBS5.如需染核，需自备DAPI（2µg/mL）或PI（1µg/mL）6.如需阳性对照实验，需自备DNase I7.如果用流式细胞仪，自备PI染液和RNase A（DNase free）8.操作时请穿实验服，佩戴一次性手套。
C1052 细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒产品简介：碧云天生产的细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一种采用经典的碘化丙啶染色(Propidium staining，即PI staining)方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的检测试剂盒。
碘化丙啶(Propidium，简称PI)是一种双链DNA的荧光染料。
碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。
细胞内的DNA被碘化丙啶染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，然后根据DNA含量的分布情况，可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。
碘化丙啶染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。
凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片断在染色过程中丢失，因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染，即荧光强度小于1，在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰，即凋亡细胞峰。
细胞发生凋亡时，由于胞浆和染色质浓缩、核碎裂，产生凋亡小体，使细胞的光散射性质发生变化。
在细胞凋亡的早期，细胞对前向角光散射的能力显著降低，对侧向光散射的能力增加或没有变化。
在细胞凋亡的晚期，前向和侧向光散射的信号均降低。
因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察细胞凋亡情况。
本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测。
如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测，则必须把组织消化成单细胞状态，才可以进行检测。
本试剂盒足够检测50个样品，每个样品的细胞数量可以为10-100万。
保存条件：-20ºC保存，一年有效。
C1052-2碘化丙啶染色液(20X)需避光保存。
本试剂盒可4ºC保存，一个月内有效。
碧云天 细胞凋亡试剂盒(C1062)
7. Ji YB, Qu ZY, Zou X. Juglone-induced apoptosis in human gastric cancer SGC-7901 cells via the mitochondrial pathway. Exp Toxicol Pathol. 2009 Oct 6.
Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒
产品编号 C1062
产品名称 Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒
包装 20次
产品简介：
Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit)是用FITC标记的重组人Annexin V来检测细 胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷酯酰丝氨酸的一种细胞凋亡检测试剂盒。可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光 检测设备进行检测。
C. 取5-10万重悬的细胞，1000g离心5分钟，弃上清，加入195μl Annexin V-FITC结合液轻轻重悬细胞。 D. 加入5μl Annexin V-FITC，轻轻混匀。 E. 室温(20-25℃)避光孵育10分钟。可以使用铝箔进行避光。 F. 1000g离心5分钟，弃上清，加入190μl Annexin V-FITC结合液轻轻重悬细胞。 G. 加入10μl碘化丙啶染色液，轻轻混匀，冰浴避光放置。 H. 随即进行流式细胞仪检测，Annexin V-FITC为绿色荧光，PI为红色荧光。如果用于荧光显微镜下检测，1000g离心5
C1082 TUNEL检测阳性对照制备试剂盒
TUNEL检测阳性对照制备试剂盒产品编号产品名称包装C1082 TUNEL检测阳性对照制备试剂盒 10次产品简介：¾碧云天生产的TUNEL检测阳性对照制备试剂盒可以用于TUNEL检测阳性对照的制备，制备后的阳性对照可以用于一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(C1086/C1088)的荧光，也可以用于显色法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(C1091/C1098)的显色检测。
¾DNase I可以剪切基因组DNA，使基因组DNA产生片段化(fragmentation)。
基因组被片段化的细胞在用TUNEL法检查时会呈阳性染色。
¾本试剂盒足够制备10个阳性对照。
包装清单：产品编号产品名称包装I 10µlC1082-1 DNaseC1082-2 Reaction Buffer (10X) 200µl— 说明书1份保存条件：-20℃保存。
注意事项：¾需自备用于TUNEL检测的组织切片、或培养细胞的片子。
需自备TUNEL检测试剂盒。
¾为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：1.参考TUNEL检测试剂盒的相关说明，把培养细胞或组织切片处理至进行荧光标记或生物素标记之前的一个步骤。
2.用双蒸水或MilliQ级纯水稀释适量Reaction Buffer至1X。
3.在样品上滴加50-100微升1X Reaction Buffer，室温孵育5分钟。
4.离心沉淀DNase I。
在100微升1X Reaction Buffer中精确加入1微升DNase I，混匀，滴加到样品上。
5.室温(25℃)孵育10分钟。
如果室温稍低于25℃，可以适当延长孵育时间；反之如果室温稍高于25℃，可以适当缩短孵育时间。
6.用PBS或HBSS洗涤3次。
7.随后参考TUNEL检测试剂盒进行荧光标记或生物素标记。
细胞凋亡检测实验室所需试剂耗材清单
细胞凋亡检测实验室所需试剂耗材清单本文档列出了细胞凋亡检测实验所需的试剂和耗材清单。
以下是所需的实验材料的详细列表：试剂- 細胞凋亡檢測試劑盒：用於檢測細胞凋亡的試劑盒。
建議使用商業可購得的試劑盒，如TUNEL、Annexin V或Caspase-3活性解析試劑盒等。
根據實驗需要選擇適當的試劑盒。
- Annexin V：經鑫可購得的染料，用於檢測細胞凋亡的外標蛋白Annexin V。
建議根據實驗需要購買。
- Propidium Iodide（PI）染劑：用於檢測細胞死亡的染劑。
建議根據實驗需要選擇適當的染劑。
- DAPI（4',6-Diamidino-2-Phenylindole）：核染料，用於標記細胞核。
建議購買商業可購得的DAPI染劑。
- Acridine orange（AO）染劑：核染料，可以用於細胞凋亡的檢測。
建議根據實驗需要選擇適當的AO染劑。
- RNase A：用於去除核酸中的RNA，以得到更准確的結果。
建議根據實驗需要選擇適當製造商提供的RNase A。
- TUNEL試劑盒：用於標識細胞DNA斷裂的染劑盒。
建議購買商業可購得的TUNEL試劑盒。
- Caspase-3活性解析試劑盒：用於分析Caspase-3活性的試劑盒。
建議購買商業可購得的Caspase-3試劑盒。
耗材- 細胞培養耗材：包括培養皿、培養筆、移液器、培養基等。
根據實驗需求購買所需的細胞培養耗材。
- 1.5毫升離心管：用於離心細胞。
建議購買1.5毫升容量的離心管。
- 96孔板：用於分析樣本。
建議購買96孔板。
- 過濾噴嘴：用於過濾溶液。
建議根據需要購買合適的過濾噴嘴。
- 無菌吸管：用於裝載反應溶液。
建議購買商業可購得的無菌吸管。
請注意，以上所列的試劑和耗材只是組織凋亡檢測實驗所需的基本材料，根據您的具體實驗需求可能會有所不同。
建議您根據您的實驗計劃和要求，向可信賴的供應商查詢更詳細和具體的配套清單。
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和方式
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和方式细胞凋亡中染色体的断裂是个渐进的分阶段的进程，染色体首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。
然后大约30 ﹪的染色体在Ca²和Mg²依赖的核酸内切酶作用下，在核小体单位之间被随机切断，形成180～200bp核小体多聚体。
双链断裂或只要一条链上出现缺口而产生的一系列的3’-OH结尾可在脱氧核糖核苷酸结尾转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸化酶或生物素形成的衍生物标记到的3’-末端，从而可进行凋亡细胞的检测，这种方式一般称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）。
由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有的断裂，因此没有3’-OH形成，很少能够被染色。
低分子量的分离后，也可利用聚合酶进行缺口翻译（nick translation），使低分子量的标记或染色，然后分析凋亡细胞。
TUNEL或缺口翻译法实际上是分子生物学与形态学相结合的研究方法，对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色，能准确的反映细胞凋亡最典型的生物化学和形态特征，可用于石蜡包埋组织切片、冰冻组织切片、培育的细胞和从组织中分离的细胞的细胞凋亡测定，并可检测出极少量的凋亡细胞，灵敏度远比一般的组织化学和生物化学测定法要高，因而在细胞凋亡的研究中已被普遍采用。
一、过氧化物酶标记测定法原理：脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[（digoxigenin）-11-dUTP]在TdT酶的作用下，可以掺入到凋亡细胞双链或单链的3-OH结尾，与dATP形成异多聚体，并可与连接了报告酶（过氧化物酶或碱性磷酸酶）的抗地高辛抗体结合。
在适合底物存在下，过氧化物酶可产生很强的颜色反映，特异准确的定位出正在凋亡的细胞，因此可在普通光学显微镜下进行观察。
毛地黄植物是地高辛的唯一来源。
在所有动物组织中几乎不存在能与抗地高辛杭体结合的配体，因而非特异性反应很低。
一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(红色TRITC标记荧光检
一步法TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒（红色TRITC 标记荧光检测法，通用型）说明书修订日期：2016.07.08Catalog No.：KGA7061/KGA7062/KGA7063Storage ：-20℃for 12months,避光For Research Use Only （科研专用）一、TUNEL 检测原理凯基一步法TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒(TRITC 红色荧光标记，通用型)提供一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法，可检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA 的断裂情况，其原理是红色荧光素（Tetramethylrhodamine ，TRITC ）标记的dUTP 在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme ）的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂DNA 的3′－OH 末端，可用荧光显微镜检测。
由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA 的断裂，因而没有3′-OH 形成，很少能够被标记。
本试剂盒适用于组织样本（石蜡包埋、冰冻和超薄切片）和细胞样本（细胞涂片或爬片）的凋亡原位检测。
对于经过固定和洗涤的细胞或组织，只要经过一步染色反应，洗涤后就可以通过荧光显微镜检测到凋亡细胞。
二、TUNEL 试剂盒组分组份Cat:KGA706120assaysCat:KGA706250assays Cat:KGA7063100assays 储存条件10×Proteinase K 200μl 500μl 1000μl -20°C DNase Ⅰ(50U/µl)200μl 500μl 1.0ml DNase ⅠBuffer 200μl 500μl 1.0ml Equilibration Buffer 1.0ml 2.5ml 5.0ml TdT Enzyme 80μl 200μl 400μl Biotin-11-dUTP 20μl 50μl 100μl -20°C ，避光Streptavidin-TRITC 100μl 250μl 500μl 2-8°C ，避光Labeling Buffer1.0ml2.5ml5.0ml2-8°C 运输及保存条件：2-8℃低温运输，收到后-20℃避光保存，保质期一年。
碧云天细胞凋亡-一步法TUNEL检测试剂盒
一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒产品简介：碧云天生产的一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。
对于经过固定和洗涤的细胞或组织，只要经过一步染色反应，洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。
细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。
基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上绿色荧光探针荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP)，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL(T dT-mediated d U TP N ick-E nd L abeling)法检测细胞凋亡的原理。
注：FITC是fluorescein isothiocyanate的缩写，实际上大多数情况下所谓的FITC即为fluorescein。
本试剂盒有如下优点。
(1) 高灵敏度：可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。
(2) 特异性：TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。
(3) 快速：仅需约1-2个小时即可完成。
(4) 方便：只需一步染色反应，洗涤后即可观察，不必使用二抗等进行多步操作。
(5) 应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。
这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。
TUNEL 法测凋亡操作步骤
TUNEL 法测凋亡操作步骤一、TUNEL检测原理TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒是采用非同位素方法来检测细胞在凋亡过程中DNA 的断裂情况，可在原位快速准确地检测单个凋亡细胞。
本试剂盒适用于组织样本（石蜡包埋、冰冻和超薄切片）和细胞样本（细胞涂片）的凋亡原位检测。
其原理是细胞凋亡发生时，内源性核酸酶激活，使DNA的双链断裂或一条链出现缺口，产生一系列3’-OH末端，在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）作用下，组织细胞原位DNA切口可被标记上生物素-dUTP，即TUNEL（Terminal deoxynucleotidyl TransferaseBiotin-dUTP Nick End Labeling），可与连接了的辣根过氧化酶的链霉亲和素（Streptavidin-HRP）特异结合，在辣根过氧化酶底物二氨基联苯胺（DAB）的存在下，显示为棕色（过氧化物酶活性），特异准确地定位正在凋亡的细胞，在普通显微镜下即可观察和计数凋亡细胞；由于正的或正在增殖的细胞几乎没有DNA 的断裂，因而没有3'-OH 形成，很少能够被染色。
二、试剂盒组份组份10 assays25 assays 储存条件A：Equilibration Buffer 1.0 mL 2.5 mL -20 ℃B：Biotinylated Nucleotide Mix 10 μL 25 μL -20 ℃C：TdT Enzyme 10 μL 25 μL -20 ℃D：500×Proteinase K 10 μL 25 μL -20 ℃20×SSC 15 mL 38mL 4 ℃E：Streptavidin-HRP 10 μL 25 μL 4 ℃F：20×DAB Substrate Buffer 50 μL 125 μL 4 ℃G：20×DAB Chromogen 50 μL 125 μL 4 ℃H：20×Hydrogen Peroxide 50 μL 125 μL4 ℃三、操作流程1.操作流程概览2.细胞样本制备准备：● PBS：8.0g NaCl， 0.2 g KCl， 1.44g Na2HPO4，0.24g KH2PO4，溶于800ml去离子水中，HCl调pH至7.4，加水定容至1L。
碧云天elisa试剂盒说明书
碧云天elisa试剂盒说明书实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被人热休克蛋白70（HSP-70）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人热休克蛋白70（HSP-70）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样本处理及要求1、血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000g离心20分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2、血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃1000g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3、组织匀浆：用预冷的PBS (0。
01M, pH=7。
4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。
推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。
为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。
最后将匀浆液于5000g离心5，10分钟，取上清检测。
4、细胞培养物上清或其它生物标本：请1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
需要而未提供的试剂和器材酶标仪（450nm）高精度加样器及枪头：0。
5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水试剂盒组成备注：1、标准品浓度依次为：160、80、40、20、10、5pg、mL2、经过大量正常标本检验，标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内，实验过程中直接取50μL样本上样即可。
TUNEL细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤
TUNEL细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤一、试剂盒内容2.终止缓冲液：用于停止DNA链的合成反应，防止假阳性结果的产生。
3.蛋白酶K：用于溶解细胞质膜和核膜，使DNA暴露出来。
4.异硫氰酸荧光素（FITC）标记转移酶：用于检测dUTP与DNA标记的连接。
5.正控组织切片或细胞悬液：用于检验试剂盒的敏感性和特异性。
二、操作步骤1.细胞处理将要测试的细胞分成实验组和对照组，分别处理。
实验组是要测试凋亡的细胞，对照组是不会凋亡的细胞。
2.固定细胞用4%的乙醛或无氧乙醛等适当浓度的固定液固定细胞。
涂片上的细胞需要进行细胞穿孔，可以使用0.1%的Triton X-100进行细胞穿孔。
3.蛋白酶K消化将蛋白酶K溶解在PBS缓冲液中，加入溶液中胶原酶和蛋白酶蚀解，接着加入盛有细胞的离心管中。
将离心管放入37℃恒温水浴中，反应20-30分钟。
4.清洗细胞用PBS缓冲液洗涤细胞3次。
每次用PBS缓冲液冲洗细胞5分钟。
5.脱水将细胞离心，抽去PBS缓冲液，然后使用3%的过氧化氢来进行脱水。
6.TUNEL染色将细胞加入等量的TUNEL试剂液，轻轻混合后，将离心管放入37℃恒温水浴中，反应30-60分钟。
7.洗涤细胞用PBS缓冲液洗涤细胞3次。
每次用PBS缓冲液冲洗细胞5分钟。
8.反应终止使用终止缓冲液反应终止DNA链合成反应，将离心管放入室温中静置10分钟。
9.洗涤细胞用PBS缓冲液洗涤细胞3次。
每次用PBS缓冲液冲洗细胞5分钟。
10.展片与观察将细胞滴在载玻片上，并加入封片缓冲液。
在载玻片上覆盖盖玻片，用显微镜观察。
通过上述步骤，可以使用TUNEL细胞凋亡试剂盒对细胞进行凋亡分析。
该试剂盒可根据DNA末端的3'-OH羟基与终止缓冲液中标记的dUTP之间的连接，用显微镜观察细胞内是否存在凋亡现象。
荧光标记的dUTP可通过荧光显微镜直接观察，而酶标记的dUTP则需要加入相应的底物，通过酶的催化反应后可通过光学密度法或荧光显微镜来定量测定。
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一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒产品简介：碧云天生产的一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。
对于经过固定和洗涤的细胞或组织，只要经过一步染色反应，洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。
细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。
基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上绿色荧光探针荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP)，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL(T dT-mediated d U TP N ick-E nd L abeling)法检测细胞凋亡的原理。
注：FITC是fluorescein isothiocyanate的缩写，实际上大多数情况下所谓的FITC即为fluorescein。
本试剂盒有如下优点。
(1) 高灵敏度：可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。
(2) 特异性：TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。
(3) 快速：仅需约1-2个小时即可完成。
(4) 方便：只需一步染色反应，洗涤后即可观察，不必使用二抗等进行多步操作。
(5) 应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。
这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。
极少数细胞凋亡时没有DNA断裂，此时不适用TUNEL法检测。
在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。
在需要严格判断细胞凋亡的情况下，最好同时检测多个凋亡指标。
本试剂盒足够检测20个样品。
保存条件：-20℃保存，荧光标记液需避光保存。
注意事项：需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS，用于封片的抗荧光淬灭封片液(P0126)，用于固定的4%多聚甲醛或向碧云天订购免疫染色固定液(P0098)，同时需自备含0.1％ Triton X-100的PBS或向碧云天订购免疫染色洗涤液(P0106)。
如果用于石蜡切片的检测，需自备蛋白酶K，二甲苯。
蛋白酶K(ST533)可以向碧云天订购。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：1.对于贴壁细胞或细胞涂片：a.PBS或HBSS洗涤一次。
b.如果细胞贴得不牢，可以干燥样品使细胞贴得更牢。
c.用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。
d.用PBS或HBSS洗涤一次。
e.加入含0.1％ Triton X-100的PBS或碧云天生产的免疫染色洗涤液(P0106)，冰浴孵育2分钟。
f.转步骤5。
2.对于悬浮细胞或细胞悬液：a.收集细胞(不超过200万细胞)，PBS或HBSS洗涤一次。
b.用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。
为防止细胞聚集成团，宜在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动的同时进行固定。
c.用PBS或HBSS洗涤一次。
d.用含0.1％ Triton X-100的PBS或碧云天生产的免疫染色洗涤液(P0106)重悬细胞，冰浴孵育2分钟。
e.转步骤5。
3.对于石蜡切片：a.二甲苯中脱蜡5-10分钟。
换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟。
无水乙醇5分钟。
90%乙醇2分钟。
70%乙醇2分钟，蒸馏水2分钟。
b.滴加20 g/ml不含DNase的蛋白酶K，20-37℃作用15-30分钟(不同组织的最佳作用温度和时间需自行摸索)。
c.PBS或HBSS洗涤3次。
注意：这一步必须把蛋白酶K洗涤干净，否则会严重干扰后续的标记反应。
d.转步骤5。
4.对于冷冻切片：a.用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。
b.PBS或HBSS洗涤2次，每次10分钟。
c.加入含0.1％ Triton X-100的PBS或碧云天生产的免疫染色洗涤液(P0106)，冰浴孵育2分钟。
d.转步骤5。
5.配制TUNEL检测液：6.a.用PBS或HBSS洗涤2次。
b.在样品上加50μl TUNEL检测液，37℃避光孵育60分钟。
注意：孵育时需注意在周围用浸足水的纸或药棉等保持湿润，以尽量减少TUNEL检测液的蒸发。
c.PBS或HBSS洗涤3次。
d.用抗荧光淬灭封片液封片后荧光显微镜下观察。
可以使用的激发波长范围为450-500nm，发射波长范围为515-565nm(绿色荧光)。
7. 对于悬浮细胞或细胞悬液：a.用PBS或HBSS洗涤2次。
b.加入50μl TUNEL检测液，37℃避光孵育60分钟。
c.PBS或HBSS洗涤2次。
d.用250-500μl PBS或HBSS悬浮。
e.此时可以用流式细胞仪进行检测或涂片后在荧光显微镜下观察。
可以使用的激发波长范围为450-500nm，发射波长范围为515-565nm(绿色荧光)。
常见问题：1.出现非特异性荧光标记。
a.有些细胞或组织，例如平滑肌细胞或组织，nuclease或polymerase的酶活性水平较高，易导致出现非特异性的荧光标记。
解决方法是，取细胞或组织后立即固定并且要充分固定，以阻止这些酶导致假阳性。
b.使用了不适当的固定液，例如一些酸性固定液，导致出现假阳性。
建议采用推荐的固定液。
c.TUNEL检测反应时间过长，或TUNEL检测反应过程中反应液渗漏，细胞或组织表面不能保持湿润，也可能出现非特异性荧光。
注意控制反应时间，并确保TUNEL检测反应液能很好地覆盖样品。
2.荧光背景很高。
a.支原体污染。
请使用支原体染色检测试剂盒检测是否为支原体污染。
支原体染色检测试剂盒(C0296)可以向碧云天订购。
b.高速分裂和增殖的细胞，有时也会出现细胞核中的DNA断裂。
c.TUNEL反应过强。
可以用试剂盒提供的TdT酶稀释液稀释TdT酶2-5倍后再按照说明书操作。
稀释后的TdT酶需当日使用。
d.红细胞中血红蛋白导致的自发荧光产生严重干扰。
此时宜选择其它细胞凋亡检测试剂盒。
3.标记效率低。
a.使用乙醇或甲醇固定会导致标记的效率较低。
b.固定时间过长，导致交联程度过高。
此时宜减少固定时间。
c.荧光淬灭。
Fluorescence在普通光照10分钟就会严重淬灭。
解决方法是需注意避光操作。
d.碘化丙啶双染时，如果碘化丙啶染色过深会导致观察到的本试剂盒的TUNEL染色效果减弱。
碘化丙啶可以接受fluorescein激发产生的荧光，从而起到淬灭作用。
解决方法是用较低浓度的碘化丙啶染色，例如0.5μg/ml碘化丙啶。
使用本产品的文献：1. Wang Z, Tang X, Li Y, Leu C, Guo L, Zheng X, Zhu D.20-Hydroxyeicosatetraenoic acid inhibits the apoptotic responses in pulmonary artery smooth muscle cells.Eur J Pharmacol. 2008 Jun 24;588(1):9-17.2. Li Y, Li Q, Wang Z, Liang D, Liang S, Tang X, Guo L, Zhang R, Zhu D.15-HETE suppresses K(+) channel activity and inhibits apoptosis in pulmonary artery smooth muscle cells.Apoptosis. 2009 Jan;14(1):42-51.3. Zhang YE, Wang JN, Tang JM, Guo L Y, Yang JY, Huang YZ, Tan Y, Fu SZ, Kong X, Zheng F.In vivo protein transduction: delivery of PEP-1-SOD1 fusion protein into myocardium efficiently protects against ischemic insult.Mol Cells. 2009 Feb;27(2):159-66. Epub 2009 Feb 20.4. Li Q, Zhou Y, Yao C, Ma X, Wang L, Xu W, Wang Z, Qiao Z.Apoptosis caused by Hsp90 inhibitor geldanamycin in Leishmania donovani during promastigote-to-amastigote transformation stage.Parasitol Res. 2009 Nov;105(6):1539-48. Epub 2009 Aug 19.5. Zhang L, Ma J, Li Y, Guo L, Ran Y, Liu S, Jiang C, Zhu D.15-Hydroxyeicosatetraenoic acid (15-HETE) protects pulmonary artery smooth muscle cells against apoptosis via HSP90.Life Sci. 2010;87(7-8):223-31. Epub 2010 Jul 6.6. Bai F, Sun B, Woo NY, Zhang XH.Vibrio harveyi hemolysin induces ultrastructural changes and apoptosis in flounder (Paralichthys olivaceus) cells.Biochem Biophys Res Commun. 2010;395(1):70-5. Epub 2010 Mar 27.7. Ma Y, Wang B, Li W, Ying G, Fu L, Niu R, Gu F.Reduction of intersectin1-s induced apoptosis of human glioblastoma cells.Brain Res. 2010;1351:222-8. Epub 2010 May 21.8. Wang H, Zhao H, Ye Y, Xiong N, Huang J, Yao D, Shen Y, Zhao X.Focal cerebral ischemia induces Alzheimer's disease-like pathological change in rats.J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci. 2010;30(1):29-36. Epub 2010 Feb 14.9. Ma J, Zhang L, Li S, Liu S, Ma C, Li W, Falck JR, Manthati VL, Reddy DS, Medhora M, Jacobs ER, Zhu D.8,9-Epoxyeicosatrienoic acid analog protects pulmonary artery smooth muscle cells from apoptosis via ROCK pathway.Exp Cell Res. 2010;316(14):2340-53. Epub 2010 May 21.10.Wang S, Wang Y, Jiang J, Wang R, Li L, Qiu Z, Wu H, Zhu D.15-HETE protects rat pulmonary arterial smooth muscle cells from apoptosis via the PI3K/Akt pathway.Prostaglandins Other Lipid Mediat. 2010;91(1-2):51-60. Epub 2010 Jan 8.11.Yin Z, Chen X, Chen JL, Shen WL, Hieu Nguyen TM, Gao L, Ouyang HW.The regulation of tendon stem cell differentiation by the alignment of nanofibers.Biomaterials. 2010;31(8):2163-75. Epub 2009 Dec 7.12.Zhang L, Liang Y, Liu Y, Xiong CL.The role of brain-derived neurotrophic factor in mouse oocyte maturation in vitro involves activation of protein kinase B.Theriogenology. 2010;73(8):1096-103. Epub 2010 Feb 19.13.Zhou Q, Xiong Y, Cheng Y, Du Y, Zhang J, Mu J, Guo Q, Wang H, Ma D, Li X.Effects of Tissue Factor Pathway Inhibitor-2 Expression on Biological Behavior of BeWo and JEG-3Cell Lines.Clin Appl Thromb Hemost. 2011 Dec 26.14.Li XY, Jing CQ, Lei WL, Li J, Wang JJApoptosis caused by imidazolium-based ionic liquids in PC12 cells.Ecotoxicol Environ Saf. 2012 Jul 6.15.Hu J, Cheng D, Gao X, Bao J, Ma X, Wang HVitamin C Enhances the In vitro Development of Porcine Pre-implantation Embryos by ReducingOxidative Stress.Reprod Domest Anim. 2012 Jan 13.16.Cui Z, Ren S, Lu J, Wang F, Xu W, Sun Y, Wei M, Chen J, Gao X, Xu C, Mao JH, Sun Y.The prostate cancer-up-regulated long noncoding RNA PlncRNA-1 modulates apoptosis andproliferation through reciprocal regulation of androgen receptor. Urol Oncol. 2012 Jan 19. [Epub ahead of print]。