第二十章 高效液相色谱法

第十八章 高效液相色谱法

思考题和习题

1．简述高效液相色谱法和气相色谱法的主要异同点。

2．何谓化学键合相？常用的化学键合相有哪几种类型？分别用于哪些液相色谱法中？

3．什么叫正相色谱？什么叫反相色谱？各适用于分离哪些化合物？

4．简述反相键合相色谱法的分离机制。

5．离子色谱法、反相离子对色谱法与离子抑制色谱法的原理及应用范围有何区别？

6．亲合色谱的分离机制是什么？有何特点？

7．速率理论方程式在HPLC 中与在GC 中有何异同？如何指导HPLC 实验条件的选择？

8．试讨论影响HPLC 分离度的各种因素，如何提高分离度？

9．试讨论反相HPLC 的分离条件的选择。

10．在正、反相HPLC 中流动相的强度是否相同？

11．什么叫梯度洗脱？它与GC 的程序升温有何异同？

12．蒸发光散射检测器的原理及特点是什么？

13．常用的HPLC 定量分析方法是什么？哪些方法需要用校正因子校正峰面积？哪些方法可以不用校正因子？

14．指出苯、萘、蒽在反相色谱中的洗脱顺序并说明原因。

15．宜用何种HPLC 方法分离下列物质？

（1）乙醇和丁醇；（2）Ba 2+和Sr 2+；（3）正戊酸和正丁酸；（4）高摩尔质量的葡糖苷。

16．欲测定二甲苯的混合试样中的对－二甲苯的含量。称取该试样110.0 mg ，加入对－二甲苯的对照品30.0 mg ，用反相色谱法测定。加入对照品前后的色谱

峰面积(mm 2)值为，对－二甲苯：对A 40.0，'对A 104.2；间－二甲苯：间A 141.8，

'间

A 156.2。试计算对－二甲苯的百分含量。 （20.0%） 17．计算例2中炔雌醇的校正因子及含量。 （3.02, 0.0369mg/片）

18．测定黄芩颗粒中的黄芩素的含量，实验方法同例1。测得对照品溶液（5.98µg/ml ）和供试品溶液的峰面积分别为：706436和458932，求黄芩颗粒中黄芩素的含量。 （1.55%）

19．测定生物碱试样中黄连碱和小檗碱的含量，称取内标物、黄连碱和小檗碱对照品各0.2000g 配成混合溶液。测得峰面积分别为3.60, 3.43和4.04cm 2。称取0.2400g 内标物和试样0.8560g 同法配制成溶液后，在相同色谱条件下测得峰面积为4.16, 3.71和4.54cm 2。计算试样中黄连碱和小檗碱的含量。

（黄连碱26.2%，小檗碱27.3%）

20．计算在反相色谱中甲醇－乙腈－水（60:10:30）的强度因子。如果改用四氢呋喃－甲醇－水，水的含量不变，为了保持相同的洗脱强度，甲醇的比例是多少? (2.12，68.7%)

21．用15cm 长的ODS 柱分离两个组分。柱效n =2.84×104m –1；测得t 0=1.31min ；组分的10.41R t min ；2R t =4.45min 。(1)求k 1、k 2、α、R 值。(2)若增

加柱长至30cm ，分离度R 可否达1.5?

((1)k 1=2.13、k 2=2.40、α=1.13、R =1.33，(2)R =1.88，能)