选修1生物技术实践知识点整理
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选修1《生物技术实践》知识点归纳实验1 大肠杆菌的培养和分离 1.微生物是指结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物，包括病毒、原核生物、原生生物和某些真菌。
细菌是单细胞的原核生物，有细胞壁（肽聚糖）、细胞膜、细胞质，无成型的细胞核,只有一环状DMA分子(拟核)。
以分裂(二分裂)的方式繁殖,分裂速度很快。
用革兰氏染色法将细菌分为革兰氏阳性菌(革兰氏染液染色后,再脱色处理,细菌仍保留染色液的颜色)和革兰氏阴性菌两大类,区别在细胞壁的成分不同。
大肠杆菌是革兰氏阴性(细胞壁薄,有荚膜)、兼性厌氧的肠道杆菌。
2.细菌的分离方法有两种:划线分离法和涂布分离法。
是消除污染杂菌的通用方法,也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。
划线分离就是用接种环蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线,在划线的过程中菌液逐渐减少,细菌也逐渐减少,。
划线最后,可使细菌间的距离加大。
将接种后的固体培养基培养10~20小时后,一个细菌细胞就会繁殖成许多细菌细胞,形成菌落,不会重叠。
在斜面上划线,则每个斜面的菌群就是有一个细菌产生的后代。
用于基因工程的大肠杆菌的工程菌,可以用划线分离法获得产物表达能力高的菌株。
由于工程菌的质粒中通常有抗性基因(如抗氨苄青霉素基因),如在培养基中加入一定量的氨苄青霉素,由于非工程菌的其他杂菌都没有抗性基因,所以在划线后只有存在抗性基因的工程菌能生存下来。
涂布分离时,需要先将培养的菌液稀释,通常稀释10-5~10-7倍之间,然后取0.1mL不同稀释度的稀释菌液放在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养,在适当的稀释度下,可产生相互分开的菌落，每个培养基里有20个以内的单菌落为最合适。
优点：划线分离法，方法简单；涂布分离法，单菌落更易分开，但操作复杂。
在培养微生物时,必须进行无菌操作。
其首要条件是各种器皿必须是无菌的,各种培养基也必须是无菌的,转移培养基、倒平板、接种、平板划线、平板稀释涂布等操作中的每一步都要做到无菌(防止杂菌污染)。
高中生物浙科版选修一知识点归纳
高中生物浙科版选修一知识点归纳选修一生物技术实践知识点总结第一部分微生物的利用一、微生物实验室培养的基本操作程序1、器具的灭菌：P20-21，灭菌前，试管加棉花塞或塑料盖、三角瓶用封口膜或6层纱布封口……最后各种用品均需用牛皮纸或报纸包好，用高压蒸汽灭菌法（121C，1kg/cm2压力）灭菌15min。
值得注意的是，实验中所需的棉花不能用脱脂棉，因脱脂棉易吸水，吸水后容易引起污染。
灭菌后，通常将实验用具放入60～80℃的烘箱中烘干，以除去灭菌时的水分。
在进行实验操作前，将需要使用的用具从烘箱中取出，放到超净台上。
在超净台工作之前，应先打开超净台的紫外灯和过滤风，工作时关闭紫外灯。
塞子制作的好坏是控制污染发生的关键。
2、培养基的配制：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
①培养基种类尺度培养基类型固体培养基液体培养基合成培养基天然培养基鉴别培养基配制特点加入琼脂不加入琼脂由已知成分配制而成由天然身分派制而成添加某种唆使剂或化学药剂主要应用菌种分离,鉴定,计数、保存菌种的扩大培养菌种的鉴别菌种的分离按物理性质分按化学组身分按用途分②微生物培养的培养基：LB培养基。
配制培养基时需考虑营养物质的配比外，还需要考虑微生物生长对pH、氧气、渗透压等的要求。
“细菌喜荤，霉菌喜素”，通常细菌培养基要用卵白胨和酵母提取物来配制，还要加入一定量的氯化钠，以维持一定的渗透压；霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。
此外．细菌通常要求在中性偏碱的环境中生长，霉菌要求在中性偏酸的环境中生长。
选择培养基添加（或短少）某种化学身分3、培养基的灭菌：通常用高压蒸汽灭菌法灭菌。
但假如培养基中有葡萄糖，为防止葡萄糖分解碳化，要用500g/cm压力（90C以上）灭菌30min。
有些不能加热灭菌的化合物，如尿素（加热会分解）等，只能用G6玻璃砂漏斗过滤，但玻璃砂漏斗使用前也要在121℃下用纸包好灭菌。
高中生物选修一生物技术实践 知识点总结
高中生物选修一生物技术实践知识点总结专题一传统发酵技术的应用课题一果酒和果醋的制作1、发酵：通过微生物技术的培养来生产大量代谢产物的过程。
2、有氧发酵：醋酸发酵谷氨酸发酵无氧发酵：酒精发酵乳酸发酵3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌酵母菌的生殖方式：出芽生殖(主要) 分裂生殖孢子生殖4、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。
C6H12O6＋6O2→6CO2＋6H2O5、在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
C6H12O6→2C2H5OH＋2CO26、20℃左右最适宜酵母菌繁殖酒精发酵时一般将温度控制在18℃-25℃7、在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色.在缺氧呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。
8、醋酸菌是单细胞细菌(原核生物),代谢类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂9、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
2C2H5OH＋4O2→CH3COOH＋6H2O10、控制发酵条件的作用①醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。
②醋酸菌最适生长温度为30～35℃，控制好发酵温度，使发酵时间缩短，又减少杂菌污染的机会。
③有两条途径生成醋酸：直接氧化和以酒精为底物的氧化。
11、实验流程：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒（→醋酸发酵→果醋）12、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。
在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。
先在试管中加入发酵液2ｍL，再滴入物质的量浓度为3mol/L 的H2SO43滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，观察颜色13、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的；出料口是用来取样的。
高中生物选修一生物技术实践知识点总结
高中生物选修一生物技术实践知识点总结专题一传统发酵技术的应用课题一果酒和果醋的制作1、发酵：通过微生物技术的培养来生产大量代谢产物的过程。
2、有氧发酵：醋酸发酵谷氨酸发酵·无氧发酵：酒精发酵乳酸发酵3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌·酵母菌的生殖方式：出芽生殖(主要) 分裂生殖孢子生殖4、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。
C6H12O6＋6O2→6CO2＋6H2O5、在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
C6H12O6→2C2H5OH＋6CO26、20℃左右最适宜酵母菌繁殖酒精发酵时一般将温度控制在18℃-25℃7、在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色.在缺氧呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。
8、醋酸菌是单细胞细菌(原核生物),代谢类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂9、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O 10、控制发酵条件的作用①醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。
②醋酸菌最适生长温度为30～35℃，控制好发酵温度，使发酵时间缩短，又减少杂菌污染的机会。
③有两条途径生成醋酸：直接氧化和以酒精为底物的氧化。
11、实验流程：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒（→醋酸发酵→果醋）12、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。
在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。
先在试管中加入发酵液2ｍL，再滴入物质的量浓度为3mol/L的H2SO43滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，观察颜色13、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的；出料口是用来取样的。
高中生物选修一生物技术实践 知识点总结
高中生物选修一生物技术实践知识点总结妥玉宝专题一传统发酵技术的应用课题一果酒和果醋的制作1、发酵：通过微生物技术的培养来生产大量代谢产物的过程。
2、有氧发酵：醋酸发酵谷氨酸发酵·无氧发酵：酒精发酵乳酸发酵3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌·酵母菌的生殖方式：出芽生殖(主要)分裂生殖孢子生殖4、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。
C6H12O6＋6O2＋6H2O→6CO2＋12H2O+能量5、在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
C6H12O6→2C2H5OH＋2CO2+能量6、20℃左右最适宜酵母菌繁殖酒精发酵时一般将温度控制在18℃-25℃7、在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色.在缺氧呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。
8、醋酸菌是单细胞细菌(原核生物),代谢类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂9、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
C6H12O6＋2O2→2CH3COOH＋2CO2＋2H2OC2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O10、控制发酵条件的作用①醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。
②醋酸菌最适生长温度为32℃，控制好发酵温度，使发酵时间缩短，又减少杂菌污染的机会。
③有两条途径生成醋酸：直接氧化和以酒精为底物的氧化。
11、实验流程：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒（→醋酸发酵→果醋）12、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。
在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。
先在试管中加入发酵液2ｍL，再滴入物质的量浓度为3mol/L的H2SO43滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，观察颜色13、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的；出料口是用来取样的。
高中生物选修一《生物技术实践》
高中生物选修一《生物技术实践》一、传统发酵技术1.果酒制作：1）原理：酵母菌的无氧呼吸反应式：C6H12O6 2C2H5OH+2CO2+能量。
2）菌种来源：附着在葡萄皮上的野生酵母菌或人工培养的酵母菌。
3）条件：18-25℃，密封，每隔一段时间放气（CO2）4）检测：在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈灰绿色。
2、果醋制作：1）原理：醋酸菌的有氧呼吸。
O2，糖源充足时，将糖分解成醋酸O2充足，缺少糖源时，将乙醇变为乙醛，再变为醋酸。
C2H5OH+O2CH3COOH+H2O2）条件：30-35℃，适时通入无菌空气。
3、腐乳制作：1）菌种：青霉、酵母、曲霉、毛霉等，主要是毛霉（都是真菌）。
2）原理：毛霉产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和aa ；脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸。
3）条件：15-18℃，保持一定的湿度。
4）菌种来源：空气中的毛霉孢子或优良毛霉菌种直接接种。
5）加盐腌制时要逐层加盐，随层数加高而增加盐量，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。
4、泡菜制作：1）原理：乳酸菌的无氧呼吸，反应式：C6H12O62C3H6O3+能量2）制作过程：①将清水与盐按质量比4：1配制成盐水，将盐水煮沸冷却。
煮沸是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。
②将新鲜蔬菜放入盐水中后，盖好坛盖。
向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证乳酸菌发酵的无氧环境。
3）亚硝酸盐含量的测定：①方法：比色法；②原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。
二、微生物的培养与应用1、培养基的种类：按物理性质分为固体培养基和液体培养基，按化学成分分为合成培养基和天然培养基，按用途分为选择培养基和鉴别培养基。
2、培养基的成分一般都含有水、碳源、氮源、无机盐P143、微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。
4、培养基还需满足微生物对PH、特殊营养物质以及O2的要求。
高中生物选修一生物技术实践 知识点总结
高中生物选修一生物技术实践知识点总结一、果酒和果醋的制作1.发酵: 通过微生物技术的培养来生产大量代谢产物的过程。
2.有氧发酵: 醋酸发酵·无氧发酵: 酒精发酵乳酸发酵3.酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌·酵母菌的生殖方式: 出芽生殖(主要) 分裂生殖孢子生殖4.在有氧条件下, 酵母菌进行有氧呼吸, 大量繁殖。
C6H12O6＋6H2O＋ 6O2→6CO2＋12H2O5.在无氧条件下, 酵母菌能进行酒精发酵。
C6H12O6→2C2H5OH＋2CO26、最适宜酵母菌繁殖是20℃左右, 酒精发酵时一般将温度控制在18℃-25℃7、在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色.在缺氧、呈酸性的发酵液中, 酵母菌可以生长繁殖, 而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。
8、醋酸菌是单细胞细菌(原核生物),代谢类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂9、当氧气、糖源都充足时, 醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时, 醋酸菌将乙醇变为乙醛, 再将乙醛变为醋酸。
C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O10、控制发酵条件的作用①醋酸菌对氧气的含量特别敏感, 当进行深层发酵时, 即使只是短时间中断通入氧气, 也会引起醋酸菌死亡。
②醋酸菌最适生长温度为30～35℃, 控制好发酵温度, 使发酵时间缩短, 又减少杂菌污染的机会。
11.实验流程: 挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒（→醋酸发酵→果醋）12、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生, 可以用重铬酸钾来检验。
在酸性条件下, 重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。
13、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的；出料口是用来取样的。
排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连接, 其目的是防止空气中微生物的污染。
高中生物选修一生物技术实践必背知识点
专题四选修一生物技术实践必背知识实验一大肠杆菌的培养和分离【考点一】培养基1、培养基配置①微生物的生命活动需要五大营养要素：水、无机盐、碳源、氮源、生长因子；②有的物质既是碳源又是氮源（为微生物生长提供碳元素和氮元素），如：蛋白质、蛋白胨；③有的既是碳源又是生长因子（是微生物生长不可缺少的微量有机物），如：酵母提取物；④“细菌喜荤，霉菌喜素”；细菌喜37℃的温度；霉菌喜25-30℃的温度；⑤细菌的培养基：蛋白胨、酵母提取物、一定量的氯化钠，以维持一定的渗透压；通常在中性偏碱的环境中生长；⑥霉菌的培养基：一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可；通常在中性偏酸的环境中生长；⑦在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要适宜的pH、温度以及特殊营养物质，以满足微生物生长对的要求。
2、培养基的种类及用途：①液体培养基：呈现液态，用于扩大培养和工业生产；②固体培养基：配制时需加入琼脂（凝固剂），呈固态，用于菌种分离、鉴定、计数等；③我们一般用LB液体培养基来扩大培养大肠杆菌，用LB固体培养基来分离大肠杆菌。
【考点二】灭菌和消毒1、无菌技术：人们利用微生物完成一定的反应，必须要求某种微生物是没有被其他微生物污染的，因此，在培养微生物时必须进行无菌操作；2、灭菌是用物理或化学的方法，杀死或除去环境中的一切微生物的方法。
杀死病原菌的方法叫消毒。
如：实验室要对使用前和使用后的培养基、各种容器进行灭菌；要对实验服、对病人的排泄物和衣物进行消毒。
3、干热灭菌法：是利用火焰将接种环和试管上的微生物烧死（又称灼烧灭菌法），或在140-160℃的烘箱中加热2-3h，将微生物的营养体和芽孢杀死。
4、加压蒸气灭菌法（高压蒸气灭菌法）：这是生产和实验室常用的灭菌法，将灭菌锅内通入压力达到1000g/cm2的高压蒸气，锅内温度达121℃，持续15-30min，即可达到灭菌目的；注意：当培养基内有葡萄糖时，为防止葡萄糖分解碳化，要用500g/cm2压力（90℃以上）灭菌30min。
最全面生物选修一生物技术实践知识点归纳总结2021
生物选修一传统发酵技术地生物技术实践知识点总结专题一* 几种常用发酵菌种地比较菌种项目生物学分类代谢类型繁殖方式生产应用发酵条件最适温度酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌真核生物异养兼性厌氧适宜条件下出芽生殖酿酒前期需氧，后期不需氧18℃～25℃原核生物异养需氧二分裂生殖酿醋一直需氧30℃～35℃真核生物异养需氧孢子生殖制作腐乳一直需氧15℃～18℃原核生物异养厌氧二分裂生殖制作泡菜不需氧常温腌制右控制8 天左腌制右10 天左时间控制10～ 12天7～ 8天盐酒用其他条件封闭充气口适时充气控制盐水比例课题一果酒与果醋地制作1、再有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。
C 6H12O6＋ 6O2→ 6CO2＋6H2O2、再发酵过程中, 随着酒精浓度地提高, 红葡萄皮地色素也进入发酵液, 使葡萄酒呈现深红色. 再缺氧呈酸性地发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。
3、醋酸菌为单细胞细菌.，当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中地糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
C2H5O H＋O2→C H3C O O H＋H2O4、实验流程：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵果酒果醋7、酒精检验：再酸性条件下，8. 实验装置重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。
充气口为再醋酸发酵时连接充气泵进行充气用地；排气口为再酒精发酵时用来排出二氧化碳地；出料口为用来取样地。
排气口要通过一个长而弯曲地胶管与瓶身相连接，其目地为防止空气中微生物地污染。
开口向下地目地为有利于二氧化碳地排出。
使用该装置制酒时，应该关闭充气口；制醋时，应该充气口连接气泵，输入氧气。
课题二腐乳地制作1、多种微生物参与了发酵，起主要作用地为毛霉。
毛霉为一种丝状真菌。
生殖方式为孢子生殖。
2、原理：毛霉等微生物产生地蛋白酶能将豆腐中地蛋白质分解成小分子地肽与氨基酸；脂肪酶可将脂肪3、实验流程：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制4、所用豆腐地含水量为70％左右，水分过多则腐乳不易成形。
人教版生物选修1《生物技术实践》知识归纳图解
选修1《生物技术实践》知识归纳图解果酒和果醋的制作挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵醋酸发酵注意：①要先清洗后除枝梗(避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会，同时，防止葡萄汁流失)②不能反复冲洗(避免菌种流失)注意：选择新鲜的葡萄注意：①榨汁机要清洗干净，并晾干(防杂菌污染)②避免将果核压破(因果核含有多种有害葡萄酒风味的物质)原理：主要菌种是酵母菌。
酵母菌是异养兼性厌氧微生物C6H12O6→Ｃ2H5OH＋C02温度：20℃左右最适合酵母菌繁殖，一般控制在18℃～25℃。
果酒果醋注意：①发酵装置要清洗干净，并用体积分数为70％的酒精消毒②发酵瓶装入葡萄汁后留有l/3的空间(目的是先让酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖，耗尽氧气后再进行酒精发酵；其次，防止发酵过程中产生的CO2造成发酵液的溢出)③如用带盖的瓶子制葡萄酒，每隔12 h左右将瓶盖拧松一次(注意不是打开瓶盖，防杂菌污染)，之后再将瓶盖拧紧(目的:排出多余的气体放炸裂)④装入葡萄汁封闭充气口(无氧环境和放杂菌污染)⑤发酵过程中，随着酒精度数的提高，葡萄酒呈现深红色(因红葡萄皮的色素也进入发酵液)⑥酒精的鉴定:与酸性重铬酸钾→呈灰绿色对照组→2mL白酒实验组→2mL发酵液试管甲→2mL发酵前液试管乙→2mL发酵后液3mL/L的H2SO43滴→混匀→重铬酸钾3滴→观察3mL/L的H2SO43滴→混匀→重铬酸钾3滴→观察原理：主要菌种是醋酸杆菌(异养需氧型)①当氧气糖源均充足时，糖→醋酸②当氧气充足、缺少糖源时，乙醇→乙醛→醋酸温度：30℃～35℃。
注意：需适时通入空气高考警示：①由于醋酸菌和乳酸菌属于原核生物，所以在利用者两类微生物时，其环境中一定不能加入抗生素。
②酵母菌在营养和氧气充足时进行出芽生殖1（一）培养基的基本知识1．培养基的营养成分营养物质定义作用主要来源及所涉及的微生物碳源凡是能提供微生物所需碳元素的物质构成生物细胞、生物体及细胞代谢产物，有些能为异养生物提供能源无机化合物：C02、NaHC03等(自养生物)有机化合物：糖类、脂质、花生粉饼、石油等(异养生物)氮源凡是能提供微生物所需氮元素的物质合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物，也可为异养微生物提供能源无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐，自养生物有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等，异养生物水分生物体内含量最高的组成成分，分为结合水和自由水良好的溶剂、细胞生活及生化反应的介质、参与物质运输及参与生化反应的反应物培养基、大气、代谢产物无机盐为微生物提供除C、H、0以外的各种元素细胞组成成分，生命调节物质，自养菌的能源或其他营养来源，酶的激活剂培养基、大气等环境生长因子微生物正常生长繁殖，必不可少的微量有机物可作为酶与核酸等的组成成分维生素、氨基酸、碱基等高考警示钟自养微生物与异养微生物所需的营养物质不同(1)自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物，而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物，因此可根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。
生物选修一生物技术实践知识点总结
生物选修一<生物技术实践>知识点总结专题一传统发酵技术的应用*菌种项目酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物学分类真核生物原核生物真核生物原核生物代谢类型异养兼性厌氧异养需氧异养需氧异养厌氧繁殖方式适宜条件下出芽生殖二分裂生殖孢子生殖二分裂生殖生产应用酿酒酿醋制作腐乳制作泡菜发酵条件前期需氧，后期不需氧一直需氧一直需氧不需氧最适温度18℃～25℃30℃～35℃15℃~18℃常温时间控制10~12天7～8天腌制8天左右腌制10天左右其他条件封闭充气口适时充气控制盐酒用量控制盐水比例课题一果酒和果醋的制作1、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸,大量繁殖。
C6H12O6＋6O2→6CO2＋6H2O在无氧条件下,酵母菌能进行酒精发酵. C6H12O6→2C2H5OH＋6CO22、在发酵过程中，随着酒精浓度的提高，红葡萄皮的色素也进入发酵液，使葡萄酒呈现深红色。
在缺氧呈酸性的发酵液中,酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约.3、醋酸菌是单细胞细菌.，当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸.C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O4、实验流程:挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵↓↓果酒果醋7、酒精检验：在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色.8. 实验装置充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的;出料口是用来取样的.排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连接,其目的是防止空气中微生物的污染.开口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。
使用该装置制酒时，应该关闭充气口；制醋时，应该充气口连接气泵，输入氧气。
课题二腐乳的制作1、多种微生物参与了发酵，起主要作用的是毛霉。
毛霉是一种丝状真菌。
生殖方式是孢子生殖.2、原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸.3、实验流程:让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制4、所用豆腐的含水量为70%左右，水分过多则腐乳不易成形.＊5。
高中生物选修一生物技术实践知识点总结
高中生物选修一生物技术实践知识点总结专题一传统发酵技术的应用课题一果酒和果醋的制作1、发酵：通过微生物技术的培养来生产大量代谢产物的过程。
2、有氧发酵：醋酸发酵谷氨酸发酵·无氧发酵：酒精发酵乳酸发酵3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌·酵母菌的生殖方式：出芽生殖(主要) 分裂生殖孢子生殖4、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。
C6H12O6＋6O2→6CO2＋6H2O5、在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
C6H12O6→2C2H5OH＋6CO26、20℃左右最适宜酵母菌繁殖酒精发酵时一般将温度控制在18℃-25℃7、在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色.在缺氧呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。
8、醋酸菌是单细胞细菌(原核生物),代谢类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂9、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O10、控制发酵条件的作用①醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。
②醋酸菌最适生长温度为30～35℃，控制好发酵温度，使发酵时间缩短，又减少杂菌污染的机会。
③有两条途径生成醋酸：直接氧化和以酒精为底物的氧化。
11、实验流程：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒（→醋酸发酵→果醋）12、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。
在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。
先在试管中加入发酵液2ｍL，再滴入物质的量浓度为3mol/L的H2SO43滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，观察颜色13、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的；出料口是用来取样的。
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选修1《生物技术实践》第一部分微生物的利用实验 1 大肠杆菌的培养和分离一、大肠杆菌1．大肠杆菌属于革兰氏阴性细菌，为兼性厌氧的肠道杆菌。
2．用途：是基因工程技术中被广泛采用的工具。
二、本实验的内容是将大肠杆菌扩大培养和划线分离。
分离后，一个菌体便会形成一个菌落，这是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。
本实验用LB液体培养基（通用的细菌培养基）扩大培养大肠杆菌，培养后用LB固体平面培养基进行划线分离。
三、细菌的培养和分离1．细菌的培养：（ 1 ）繁殖方式：细菌以分裂的方式繁殖，分裂速度很快，约20min 分裂一次。
（2）培养的方法：需要将已有细菌的培养物转移到新的培养基中，一般用接种环来转移带菌的培养物。
2．细菌的分离分离的方法与特点：划线分离法：操作简单。
（接种环）涂布分离法：操作复杂，单菌落更易分开。
（玻璃刮刀）四、灭菌操作1．灭菌操作的原因：获得纯净的培养物的关键是防止外来杂菌的入侵污染。
2．无菌操作的条件：（1）各种器皿必须是无菌的。
（首要条件）（2）各种培养基必须是无菌的。
“细菌喜荤，霉菌喜素”细菌培养基要用蛋白胨和酵母提取物来配制，还要加入一定量的氯化钠，以维持一定的渗透压。
在中性偏碱的环境中生长（制备培养基时需调节培养基的酸碱度）。
霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。
在中性偏酸的环境中生长（制备培养基时需调节培养基的酸碱度）。
如果培养基中有葡萄糖，为防止葡萄糖分解碳化，要用500g/cm2压力(90 C以上)灭菌30min.3．灭菌的方法：是指杀灭病原微生物的方法。
( 1)灼烧灭菌(2)干热灭菌：160-170 C下加热1-2h。
(3)高压蒸气灭菌：100kPa、121 C (1kg/cm 2)下维持15min.(4)过滤灭菌：G6玻璃砂漏斗过滤(用于有些不能加热灭菌的化合物，如尿素加热会分解)4．消毒的方法：是指杀灭或清除环境中一切微生物(包括芽胞、孢子)的方法(1)煮沸消毒法：100 C煮沸5-6min(2)巴氏消毒法：70-75 C下煮30min或80 C 下煮15min(3)化学药剂消毒法：用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒; 氯气消毒水源( 4) 紫外线消毒五、大肠杆菌的培养和分离实验1 ．实验步骤：(1)培养基灭菌：将50mlLB液体培养基、50mlLB固体培养基加上封口膜和培养皿用牛皮纸包好进行高压蒸汽灭菌。
(封口膜的作用是既通气又不使菌进入)(2)倒平板：将有培养基的三角瓶和培养皿放到超净台上，打开紫外灯和过滤风(3)接种：接种环接种，在37C振荡培养12h( 4)划线分离：在酒精灯火焰上灼烧接种环，接种环只在菌液中蘸菌液一次，然后在固体培养基的平板上连续划线，盖好培养皿，将培养皿倒置，放在37 C恒温培养箱中培养12-24h ，可看到在划线的末端出现不连续的单个菌落。
(5)菌种保存：用接种环取出单菌落，用划线法接种在斜面上，37 C培养24h后，置于4 C冰箱中保存实验2分离以尿素为氮源的微生物、脲和脲酶1•脲或称尿素，是蛋白质降解的产物。
2•脲酶：有些细菌可以尿素为氮源，这些细菌含有脲酶(1 )可降解尿素的酶(2)作用原理：细菌合成的脲酶能将尿素分解成N H,致使pH升高，使酚红指示剂变红。
(NftX 二0 + HO —2NH5+ Oh二、实验设计及步骤1 •实验中的对照设置：实验组：以全营养LB固体培养基进行培养(蛋白胨，酵母提取物，氯化钠，琼脂糖，水)对照组：以尿素固体培养基进行培养(葡萄糖，氯化钠，KHPO,酚红，琼脂糖，水)加入通过G6玻璃漏斗过滤(使之无菌)的10ml尿素溶液(内含2g脲)2. 实验步骤：(1)制备培养基：将已灭菌的LB固体培养基和尿素固体培养基在酒精灯旁分别倒入两个培养皿中，在水平的超净台上摇匀，平放至凝固。
(2)制备细胞悬液：用1g 土样配制不同浓度的细胞悬液(加无菌水稀释)。
(3)用涂布分离法分离细菌：将不同浓度的土壤稀释液分别加入到有LB培养基和尿素培养基的培养皿中，再将保存在70%酉精中的玻璃刮刀放在酒精灯火焰上，待刮刀上火焰熄灭。
在酒精灯火焰旁打开培养皿，将菌液涂布到整个平面上。
(4)培养：倒置培养皿，在37 C恒温培养箱中培养24-48h(5)观察：培养基中的菌落数。
实验4果汁中的果胶和果胶酶、果胶1 •化学组成：半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯2 •作用：（1）植物细胞壁的主要成分（2）将植物细胞粘合在一起（去掉果胶植物组织变得松散）3 •鉴别方法：果胶不溶于酒精二、果胶酶1. 来源：黑曲霉、苹果青霉等微生物2.作用：巣胶萌（里胶甲酯塘）果胶------------ > 半乳糖酵酸+半乳糖醛酸甲酯3. 应用:（1）应用原理：水解果胶，使水果组织的分散性加大。
（2）果汁生产：提高出汁率和澄清度。
三、探究制作果汁的最佳条件实验流程:95%的乙醇用于检验是否有果胶如果有浑浊（或者沉淀），说明果胶还没有被完全水解。
如果澄清，说明果胶被完全水解实验6 a-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测、酶1功能：是生物体内各种化学反应的催化剂2. 特性：专一性和高效性3•应用的特点：在水溶液中很不稳定，且不利于工业化使用。
二、固定化酶1. 概念：将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。
2•酶固定化的方法：吸附法、共价偶连法、交联法、包埋法等。
将固定化酶装柱，当底物经过该柱时，在酶的作用下转变为产物。
三、a -淀粉酶的固定化1. 固定化原理：利用吸附法将a -淀粉酶固定在石英砂上。
一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示剂溶液测试，流出物呈红色表明水解产物糊精生成淀粉口空糊精满碘靠蕭低谴碓显红色这里使用的是枯草杆菌的 a -淀粉酶，其作用的最适温度为50~75C ;最适PH为5.5~7.52•固定化过程:(1)在烧杯中将5mg a -淀粉酶溶于4ml蒸馏水中(由于酶不纯，可能有些不溶物) 。
(2)再加入5g石英砂，不时搅拌(3)30min后装入1支下端接有气门心并用夹子封住的注射器中(石英砂体积约4ml)(4)用10倍体积的蒸馏水洗涤此注射器以除去未吸附的游离淀粉酶，流速为1ml/min3. 步骤:(1) 淀粉溶液流经固定化酶柱：将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上，用滴管滴加淀粉溶液，使淀粉溶液以0.3ml/min的流速过柱。
(2) 接取流出物：在流出5ml后接收0.5ml流出液。
(3) 流出物的鉴定：加入1~2滴KI-I 2溶液,观察颜色.用水稀释1倍后再观察颜色。
(4) 洗涤、保存固定化酶柱：用10倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱,放置在4C 冰箱中保存。
(5) 几天后取出冰箱中该固定化酶柱，再重复上述实验，看是否有相同的结果。
(可重复使用) 控制流速的目的是使淀粉溶液与淀粉酶充分接触。
洗涤固定化酶柱的目的是洗去残留的反应物和产物。
实验8果酒及果醋的制作一、用葡萄制作葡萄酒1实验原理：(1 )与制作葡萄酒有关的微生物：酵母菌(2)制作葡萄酒所需原料：葡萄(3)制作原理：酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵C6H2Q —2G^ 2 + 2C 2H5OH(4)当培养液中乙醇的浓度超过16%寸，酵母菌会死亡。
2. 实验步骤：(1)冲洗：洗净成熟葡萄，并在高锰酸钾溶液中浸泡，然后用水洗净。
(2)榨汁：用榨汁机以低速将葡萄打成浆状(3)制作酵母悬液：干酵母加水制成糊状，加少许(一小撮)蔗糖，混匀，放置片刻，至酵母悬液中出现气泡。
(4)装入发酵瓶：将葡萄浆放入发酵瓶中，装量不要超过 2 / 3,然后加入酵母悬液，搅拌均匀，瓶上加软木塞或橡胶塞，塞上带有弯曲玻璃管(加水，防止Q进入，空气中杂菌污染)。
(5)酒精发酵：在25-30 oC条件下放置2-3天，若温度偏低，则发酵时间延长；若温度高于30o C,要采取降温措施，否则酒的风味不佳。
(6)过滤、分装、保存：用两层纱布过滤发酵液，除去葡萄皮和籽。
同时可以用洗干净的手挤压滤渣，以获得尽可能多的葡萄酒，分装到1-2L细口瓶中，加盖密封，静置。
待沉淀后，上清液即为葡萄酒。
用这种简单工艺制造的葡萄酒，常温下可保存1-2年。
二、用果汁制作果酒1•制作果酒材料(1) 苹果(最好)、梨、柑橘或其他水果(2) 新鲜酵母或干酵母2. 实验步骤:（1）制取果汁：苹果切成大块，放在多功能榨汁机打碎，用两层纱布过滤果汁（2）配料（以1L为例）:向2L发酵瓶中加200g蔗糖，然后倒入果汁，转动发酵瓶使蔗糖完全溶解，最后倒入酵母悬液（约1g干酵母），混匀，加盖。
（3）发酵：3天后可见气泡，10天后剧烈的发酵停止，此时即可取出果酒过滤和分装。
（4）静置：静置5-6个月，上清液即为果酒，可用虹吸法取出三、用果酒制作果醋实验原理：（1）与制作果醋有关的微生物：醋化醋杆菌如能获得醋化醋杆菌的菌种，可在下列液体培养基中培养繁殖，配方：1L中含蛋白胨3g,酵母提取物5g，甘露醇25g（2）制作原理：醋杆菌在有氧的条件下才能将乙醇氧化为醋酸。
醋杆菌所产生的醋酸可使培养液中醋酸的含量高达13%C2H5OH + O 2 -GH——* 3COOH + H 2O2.实验步骤：（1 ）连接发酵装置：在装置的甲瓶中加入800mL酒一水混合物（用铝箔将上口盖住）。
装盒的乙瓶（发酵瓶）中装入锯末（八分满），下口用双孔橡胶塞连接发酵瓶和外界空气及锥形瓶（丙瓶）。
（2）加入醋化醋杆菌：将适量醋化醋杆菌的培养物加在200mL酒一水混合物中混匀，并将pH调至7.0后倒入乙瓶中，使锯末均匀湿透。
（3）发酵并检测pH :将水族箱通气泵的出气管与乙瓶上塞棉花的玻璃管相连，通气.不必太快，发酵48h,检测PH,若明显酸性，则进入下一步.（4 ）调节活塞，控制流量：调节甲瓶下口的双通活塞和乙瓶下口的螺旋夹，保持液体流量相同。
（5）检测pH,监控发酵情况：每天用pH试纸检测流出液的pH,直至pH不在减少，或者甲瓶中的液体全部流入乙瓶时，停止实验。
实验10 泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定一、泡菜腌制1．有关微生物：泡菜制作时起主要作用的微生物是假丝酵母和乳酸菌。
2．泡菜制作原理：在无氧的条件下，微生物利用菜种的糖和其他营养物质进行发酵，发酵产物有有机酸和醇类物质，其中也有亚硝酸（HNO2）。
3．泡菜制作流程：（1）预处理：将菜洗净并切成小块，洗净泡菜坛，并加热水洗内壁。
（2）加料入坛：将蔬菜、盐水、糖、白酒、调味品等放入坛内。
如果希望发酵快些，可以将蔬菜在开水中浸1min 后入坛，再加一些白酒（抑制杂菌生长）。
（3）密封发酵：将坛口用水封好（防止外界空气进入），腌制 1 周。
（加入泡菜汁更好，相当于接种已经扩增的发酵菌，减少腌制时间）（ 4 ）成品。