脲酶快速检测方法(1)

大豆制品中尿素酶活性的测定方法

方法一尿素酶活性快速测定法——酚红法（粗略法）

1. 原理：尿素酶 +

尿素 氨气（用酚红作指示剂） 2.试剂

（1） 0.1N 氧化钠：称0.4g 氢氧化钠溶于100ml 水中。

（2） 0.1N 硫酸：将1.4ml 浓硫酸溶于l000ml 水中（先加水后加入硫酸） 3.尿素—酚红溶液：

0.14g 酚红溶于35ml 水中+7ml0.1N 氢氧化钠

混合 0.1N 硫酸滴定 琥珀色 21g 尿素溶于300ml 水中

方法：将一匙粉碎过的黄豆粕放入小玻皿中，将已调好的尿素——酚红溶液加入小玻皿中的豆粕上，直至完全锦湿，停留5min ，观察豆粕的红色反应。 稀硫酸0.2N

尿素—酚红试剂：将1.2g 酚红溶解于30ml0.2N 的氢氧化钠中，用蒸馏水将之稀释至约300ml,加入90g 尿素（分析纯）并溶解之，用蒸馏水稀释至2L ，加入14ml1.0N 硫酸或70ml0.2N 的硫酸；用蒸馏水稀释至最后体积3L ；溶液应具有明亮的琥珀色。（过段时间溶液变为深桔红色，可滴入稀硫酸溶液搅拌之，直至溶液再次成为琥珀色。 方法：将一匙粉碎过的黄豆粕放入小玻皿中，将已调好的尿素——酚红溶液加入小玻皿中的豆粕上，直至完全锦湿，停留5min ，观察豆粕的红色反应。

溶液保质期最好3个月，最好一个月内用完。