常用色谱柱简介
色谱柱的类型
![色谱柱的类型](https://img.taocdn.com/s3/m/54fc9f1c657d27284b73f242336c1eb91a3733fd.png)
色谱柱的类型在化学分析领域,色谱是测定物质成分的一种重要方法。
色谱柱是色谱技术中的核心部件,不同种类的色谱柱可以用于不同类型的分析。
下面介绍常见的几种色谱柱类型。
1. 气相色谱柱气相色谱柱是指在分析过程中气体或气态样品通过柱子中的填充物,用吸附、分子筛、离子交换、反相等作用原理分离分析样品成分的柱子。
气相色谱柱主要用于分离气体混合物中的成分,常用于食品、环境、石油化学、天然气等领域的分析。
2. 液相色谱柱液相色谱柱是指在分析过程中液体或液态样品通过柱子中的填充物,根据不同的作用原理分离分析样品成分的柱子。
液相色谱柱可以根据柱子内填充物的不同分为正相柱和反相柱,它们主要用于分离非挥发性物质,也可以用于复杂样品中成分的分离。
3. 离子交换色谱柱离子交换色谱柱是指利用离子间的静电作用力分离样品中的离子。
离子交换色谱柱内填充有离子交换树脂,能够根据不同的离子交换性质,分离出离子。
离子交换色谱柱广泛用于食品、环境、药品、化学品等领域的分析。
4. 大孔介质柱大孔介质柱是指柱子内部具有大的孔径和表面积,可以用来分离大分子混合物。
大孔介质柱主要用于分离蛋白质、多肽和其他大分子化合物。
5. 微柱分离柱微柱分离柱是一种针对微流控系统的色谱柱,其用途在于研究微纳米尺度下的分离特性和分析过程。
微柱分离柱的特点是针尖和针孔的直径都非常小,使得色谱分离能够在非常小的尺度内进行。
总之,不同种类的色谱柱具有不同的分析效果和适用范围。
在具体使用时应根据分析要求和样品特点选择合适的色谱柱进行分析。
常用色谱柱比较
![常用色谱柱比较](https://img.taocdn.com/s3/m/dc1cc4e6998fcc22bcd10d4f.png)
一、高性能色谱柱特点:柱效高,价格高,通用性好,使用寿命长,pH范围宽,一般这类色谱柱可用于解决一些疑难杂症,并不是平时经常使用的色谱柱。
1、waters公司Xbridge 色谱柱:2005年推出,应用杂化颗粒技术。
优点:pH 1-12, 在高pH状态下,没有能与此色谱柱匹敌的,目前市场的宽pH色谱柱在高pH的状态下(9-12)普遍寿命很短,如Gemini,资生堂公司Capcell,YMC Pro-C18,包括waters的第一代杂化柱Xterra都是寿命不长,Zorbax Extend更是不堪。
柱效与一流的硅胶柱相当,甚至有过之无不及,杂化颗粒柱和聚合物色谱柱的问题在于柱效,Xterra和常见的PSDVB的色谱柱都有不错的pH范围,但是柱效低的问题无法解决,这是聚合物填料一般比较软且不耐压的原因造成。
在如此宽的pH范围,最大的好处是可以在化合物的保留平台区去开发方法(pH1-3, pH9-12),这样能得到更稳定更容易重现的方法,对酸性,中性,尤其是碱性化合物都能得到理想的峰形。
缺点:价格高,不是大多数中国客户可以接受的,大多数客户的色谱柱报废了主要是盐或者样品堵了色谱柱,因为这个原因,昂贵的Xbridge很有可能2-3个月就被客户报废掉了。
点评:Waters公司的色谱柱,基本上都是属于高端的产品,质优价高,不能作为日常实验用色谱柱也在常理之中。
因其自身拥有色谱填料的生产能力,所以其色谱柱的重现性较好。
2、Phenomenex公司的Gemini 色谱柱:采用硅胶球聚合物包被技术。
优点:pH1-12,因为聚合物涂层抑制了碱性溶液水解硅胶,所以可以承受一定的碱性条件,由于是硅胶球颗粒,所以柱效不错,比Xterra或者PSDVB这类色谱柱柱效好。
单价不低,¥3200。
缺点:聚合物涂层稳定性比较差,所以当涂层损失时,色谱柱会很坏被碱性溶液溶解,这也是其寿命远不及Xbridge的原因。
另外涂层损失也会影响结果重现性。
色谱柱的分类及依据
![色谱柱的分类及依据](https://img.taocdn.com/s3/m/c2a0e5b9a1116c175f0e7cd184254b35eefd1aff.png)
色谱柱的分类及依据介绍如下:
色谱柱是色谱技术中的重要组成部分,它通常由填充物和柱壁组成,用于分离和纯化混合物中的化合物。
根据填充物的不同,色谱柱可以分为以下几类:
1.气相色谱柱
气相色谱柱是一种常用于分离气体混合物的色谱柱。
其填充物通常为无机物或有机物,如硅胶、活性炭、聚四氟乙烯和聚酰亚胺等。
气相色谱柱的选择应考虑到填充物的极性、热稳定性和化学惰性等因素。
2.液相色谱柱
液相色谱柱通常用于分离液体混合物中的化合物。
其填充物通常为无机物或有机物,如硅胶、氨基硅胶、聚苯乙烯和聚酰胺等。
液相色谱柱的选择应考虑到填充物的极性、孔径大小、表面积和耐化学性等因素。
3.离子交换色谱柱
离子交换色谱柱是一种用于分离和纯化离子的色谱柱。
其填充物通常是带有离子基团的树脂,如强碱性阳离子交换树脂和强酸性阴离子交换树脂等。
离子交换色谱柱的选择应考虑到填充物的离子官能团、离子交换容量和选择性等因素。
4.大孔径色谱柱
大孔径色谱柱是一种用于分离大分子化合物的色谱柱。
其填充物通常是具有大孔径的凝胶,如琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶等。
大孔径色谱柱的选择应考虑到填充物的孔径大小、交联度和表面积等因素。
综上所述,色谱柱的分类主要根据填充物的不同,填充物的选择应考虑到化学性质、孔径大小、表面积、选择性和稳定性等因素。
正确选择合适的色谱柱可以提高色谱分离的效率和精度,从而获得更加准确和可靠的分析结果。
常见气相色谱柱分类及适用范围
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常见气相色谱柱分类及适用范围在气相色谱分析中,色谱柱的选择是非常重要的。
根据填料的极性不同,色谱柱可以分为非极性、弱极性、中等极性和强极性。
以下是一些常见的色谱柱及其适用范围。
非极性色谱柱包括DB(HP)-1、AC1、SPB-1、CPSIL5、DM-1、RT-1、HP-101、AC1、SP-2100、DB(HP)-5、AC5、SPB-5和DM-5.这些柱子都是由100%聚二甲基硅氧烷制成的,适用于分离非极性化合物。
中等极性色谱柱包括CPSiL8、Rtx-5、DB(HP)-1701、AC10、DB-1701、SPB-1701、RT-1701和CP-Sil19CB。
这些柱子的填料具有中等极性,适用于分离中等极性化合物。
极性色谱柱包括DB(HP)–FFAP、SP-1000、Supecl-NUKOL、AC20、HP-Wax、DB-Wax、AC20、SPB-608和HP-608.这些柱子的填料具有高极性,适用于分离极性化合物。
填料的极性可以通过极性指数来表示。
非极性柱子的极性指数通常在1左右,弱极性柱子的极性指数在5左右,中等极性柱子的极性指数在50左右,而强极性柱子的极性指数则在几百到几千之间。
总之,在选择色谱柱时,需要根据待分离化合物的性质和极性来选择合适的柱子。
以下是经过格式修正和改写后的文章:非极性色谱柱适用于许多化合物,如碳氢化合物、氨基酸、基油、多核芳烃、酚、酯、药物和醇等。
其操作温度范围为50℃至300℃,或者是-350℃至50℃,或者是-280℃至350℃。
弱极性色谱柱常使用的两种商品名分别为AC5和OV-5,它们的化学成分分别为XXX和5%Phenyl1%XXX。
这两种色谱柱的区别不是很明显,通常混称使用。
中等极性色谱柱有两种常见的商品名,分别为OV-17和AC10.OV-17的化学成分为XXX和50%二苯基(50%)二甲基聚硅氧烷,而AC10的化学成分为14%XXX和14%氰丙基苯基(其中7%氰丙基7%苯基)(86%)二甲基聚硅氧烷。
气相色谱柱类型
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气相色谱柱类型
气相色谱柱是气相色谱仪的关键部件,它的类型和选择对气相色谱分析的准确性和效率有很大的影响。
以下是常见的气相色谱柱类型:
1. 常规柱:常规柱是最常用的气相色谱柱类型,它具有较高的分离效率和较宽的分离范围。
2. 高分辨率柱:高分辨率柱具有更高的分离效率和更窄的分离范围,适用于对样品进行高分辨率分析。
3. 毛细管柱:毛细管柱具有更高的分离效率和更窄的分离范围,适用于对样品进行高灵敏度分析。
4. 固定相柱:固定相柱具有更高的分离效率和更窄的分离范围,适用于对样品进行特定组分的分析。
5. 反向柱:反向柱具有更高的分离效率和更窄的分离范围,适用于对样品进行反向分析。
6. 多柱串联柱:多柱串联柱可以实现多级分离,适用于对样品进行复杂组分的分析。
选择气相色谱柱类型时,应考虑样品的特性、分离要求和分析目的,以选择最合适的柱类型。
凝胶色谱柱和c18色谱柱
![凝胶色谱柱和c18色谱柱](https://img.taocdn.com/s3/m/64f8d31ebf23482fb4daa58da0116c175f0e1e35.png)
凝胶色谱柱和c18色谱柱
凝胶色谱柱和C18色谱柱是两种常用的色谱柱,它们在分离和纯化蛋白质、多肽和其他生物分子方面具有重要作用。
1. 凝胶色谱柱:
凝胶色谱柱的核心是凝胶颗粒,这些颗粒是多孔的,具有很高的表面积。
这些颗粒的孔径大小不一,大分子会进入小孔,而小分子则会进入大孔。
因此,不同大小的分子会以不同的速度通过凝胶色谱柱,从而实现分离。
凝胶色谱柱主要用于蛋白质、多肽、核酸等生物分子的分离和纯化。
由于其具有高分辨率和高效率,凝胶色谱柱已成为生物化学实验室的必备设备。
2. C18色谱柱:
C18色谱柱是一种常用的反相色谱柱,它以C18硅胶为基质,通过键合相技术将C18链固定在硅胶表面。
由于C18键合相具有亲脂性,因此C18色谱柱对脂溶性化合物具有很好的保留能力。
C18色谱柱主要用于分离和纯化脂溶性化合物,如脂溶性维生素、甾醇、类胡萝卜素、农药残留物等。
此外,C18色谱柱也可用于分离肽类、蛋白质等生物分子。
总之,凝胶色谱柱和C18色谱柱在分离和纯化生物分子方面具有重要作用。
选择哪种色谱柱取决于要分离的物质类型和实验条件。
色谱柱基础知识简介
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色谱柱的再生
• 反相柱的再生。采用以甲醇:水=95:5(V/V),纯甲 醇,二氯甲烷等溶剂作流动相,顺次冲洗,每种 流动相流经色谱柱的量为20一30倍色谱柱体积然 后再以相反顺序冲洗色谱柱。 • 正相柱再生。顺次以正己烷、异丙醇、二氯甲烷、 甲醇作流动相冲洗色谱柱每步注意平衡溶剂的顺 序,不要颠倒每种流动相流经色谱柱的量为20— 30倍柱体积(因异丙醇的粘度较大,冲洗过程中请 随时注意调整冲洗的流速),用甲醇冲洗完后,再 以相反的顺序冲洗色谱柱。要注意上述溶剂必需 严格脱水。
高效液相色谱柱知识介绍
2013.12
2014-1-6
1
色谱柱的发展现状
• 高效液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期 发展起来的分离分析技术,是现代分离测 定的重要手段。问世以来,因其具有分离 效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能 分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活 性物质的特点而被广泛应用于生物化学、 药物及临床分析。
2014-1-6 17
• 离子交换柱的再生。长时间在高pH值和高 离子强度缓冲溶液中使用,将导致色谱柱 离子交换能力降低。用稀酸缓冲溶液冲洗, 可使阳离子柱再生;反之,用稀碱缓冲溶液 冲洗,可使阴离子柱再生。 • 其他色谱柱的再生 。
2014-1-6
18
谢谢
2014-1-6
19
2014-1-6
4
色谱柱的构成
• 色谱柱由柱管、压帽、卡套(密 封环)、筛板(滤片)、接头、螺 丝等组成。柱管多用不锈钢制 成,压力不高于70kkg/cm2时, 也可采用厚壁玻璃或石英管, 管内壁要求有很高的光洁度 。 • 色谱柱两端的柱接头内装有筛 板,是烧结不锈钢或钦合金, 孔径0.2一20µm(5一10µm),取 决于填料粒度,目的是防止填 料漏出
色谱柱类型
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色谱柱类型
色谱柱可分正相模式色谱柱、反相模式色谱柱和亲水模式柱。
一、正相模式色谱柱
正相模式色谱柱采用极性固定相(如乙二醇、氨基与腈基等键合相);常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)。
二、反相模式色谱柱(RPC)
反相模式色谱柱:一般用非极性固定相,以硅胶为基质键合不同的基团(如C18、C8);适用于分离非极性和极性较弱的化合物。
在现代液相色谱中应用最多,据统计它占整个HPLC应用的80%左右。
由于超临界色谱的崛起,一些过去用正相色谱的实验逐渐被超临界色谱所代替,所以反相色谱柱的应用将会更加广泛。
随着色谱柱填料的快速发展,某些无机样品或易解离样品的分析也可用反相色谱法。
为控制样品在分析过程的解离,常用缓冲盐控制流动相的pH值。
硅胶基质键合相(C8和C18)色谱柱使用的pH值通常为2.5~7.5(2~8),太高的pH值会使硅胶溶解,太低的pH值会使键合的烷基脱落。
近年来技术的更新,利用包被、空间位阻、杂化颗粒等新技术,已经可以使硅胶基质的色谱柱使用范围扩大到pH为1~12,流动相为较强酸性或碱性时,可选择宽pH值的色谱柱。
三、亲水模式色谱柱(HILIC)
亲水(HILIC)模式不同于反相色谱技术,流动相为反相色
谱的流动相,它提供了相对于反相的互补选择性,通常可保留传统反相色谱方法无法保留的高极性化合物。
需要注意的是HILIC模式中硅胶基质无键合相的色谱柱,流动相pH适用范围。
色谱柱介绍
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C8、 C4柱
4.常见色谱柱介绍
SiO2
CH3
O Si CH2 CH3
7
CH3
C8、C4等短链烷基键合相适合做极性小以减弱保留,缩短 分析时间。另一方面又可以分析氨基酸,小肽等生物分子。
4.常见色谱柱介绍
4.3 苯基柱
SiO2
CH3
O Si CH2
3
CH3
柱上键和固定相有苯基,也属于反相柱,不过由于苯基有不同的物理特性,例 如空间位阻,具有π电子,所以对某些化合物有较好的分离。与C18、 C8和 C4相比,苯基与带芳香环化合物形成p-p 共轭相互作用,增强此类化合物的相 对保留。这种优良的选择性与对非极性化合物保留能力较弱的特点相结合,使 得-Phenyl相成为分离、分析同时含极性和非极性复杂混合物的最佳选择。
3.色谱柱化学性能
用窄的内径,小的粒径会引起高柱压, 柱压是同时影响增加分离度和减少分析时间的主要障碍。分离度、分析时间及柱压三者相互制约, 选择好其中两者,则第3个因素也就选好了
常见规格色谱柱:
类型 微孔柱 分析柱 半制备柱 制备柱
内径D (cm) 0.1, 0.21
0.3 – 0.46 0.8 – 1.0 2.0 – 5.0
OH
R
侧链基团:二异丁基或二异丙基
提供空间位阻可避免硅胶在低PH 下水解、破坏。
1.PH范围:1-8 2.使用了空间位阻大的硅烷 3. 未封端
优点:可以在低PH下分析酸性、碱性 和中性组分,峰形优异。
5.不同品牌色谱柱介绍
Agilent Eclipse XDB,
Si O
O
O Si
CH3 Si CH3
4.常见色谱柱介绍
氰基柱的适用范围:
各类色谱柱
![各类色谱柱](https://img.taocdn.com/s3/m/34b011f4de80d4d8d05a4fd2.png)
四、低价色谱柱特点:一般价格在¥1000-2000之间,通用性好,低价但不一定 低性能,是目前国内客户使用最广泛的色谱柱,尤其是制药企业的客户,因为拥 有很高的性价比,用坏了也不用太心疼,所以目前国内市场至少有每年2万支左右
的市场, • • 1、迪马钻石色谱柱 评分90 优点:属于高纯硅胶柱,柱压低,峰形好,尤其用于
第九页,编辑于星期五:一点 三十五分。
• 聚合体薄膜像一层胶囊一样, 将残存的硅醇 基和金属不纯物的影响减小到极限; 耐碱性的聚合体薄膜扩展了适用范围 (pH 210) ;
第十页,编辑于星期五:一点 三十五分。
• 5、Agilent ZorbaxExtend 评分50 采用双配 位键和相技术。pH2-10 优点:不详缺点: 在各公司的高pH使用时间测定表,基本上 都会拉上Extend,大多数公司的数据都说 明该款色谱柱的耐高pH能力很差,甚至不 如一些高纯硅胶柱 .
第八页,编辑于星期五:一点 三十五分。
• 4、资生堂Capcell 评分70 采用硅胶球聚合 物包被技术。pH1-10,优点:其实采用了 和Gemini同样的技术,只是参数指标比 phenomenex低调。有非官方消息称其实是 phenomenex购买的资生堂的该项技术。缺 点:市场推广远差于phenomenex, 单价偏 高,¥5000以内。
第五页,编辑于星期五:一点 三十五分。
• Merck Chromolith整体化色谱柱是利用极高纯度且不含金属的烷 氧基硅为材料,采用新的溶胶技术制备得到的整体多孔硅胶棒。 这种硅胶棒具有典型的双孔结构,即大孔和中孔结构。 其中大 孔的孔径是2um,相互交联形成了密集的大孔网络,保证流动相 可以快速通过,却不会造成大的反压;填料骨架上130Å的中孔 保证了填料具有比颗粒型色谱柱更高的比表面积,从而可以使该 色谱柱在保证高柱效低反压条件下使用高流速。
制备色谱柱型号
![制备色谱柱型号](https://img.taocdn.com/s3/m/359c884c773231126edb6f1aff00bed5b9f373c7.png)
制备色谱柱的型号多种多样,具体取决于不同的应用和需求。
以下是一些常见的制备色谱柱型号及其特点:
1. 正相色谱柱:通常采用硅胶或氧化铝作为填料,适用于分离极性物质和官能团较为活泼的化合物。
常
用的正相色谱柱有:① Baseline正相色谱柱,适用于一般的有机化合物分离;② C18十八烷基键合球形硅胶色谱柱,适用于一般的有机化合物和生物大分子的分离。
2. 反相色谱柱:通常采用C18、C8、C4等烷基键合硅胶作为填料,适用于分离极性较弱的物质和蛋白
质、多肽等生物大分子。
常用的反相色谱柱有:① C18反相色谱柱,适用于一般的有机化合物和生物大分子的分离;② C8反相色谱柱,适用于分离极性较弱的有机化合物;③ C4反相色谱柱,适用于分离极性更弱的有机化合物。
3. 离子交换色谱柱:通常采用阴离子或阳离子交换剂作为填料,适用于分离带有电荷的离子化合物。
常
用的离子交换色谱柱有:①阴离子交换色谱柱,适用于分离带有负电荷的离子化合物;②阳离子交换色谱柱,适用于分离带有正电荷的离子化合物。
4. 凝胶色谱柱:通常采用多孔性的凝胶作为填料,适用于分离分子量较大的化合物。
常用的凝胶色谱柱
有:① Sephadex G系列凝胶色谱柱,适用于一般的凝胶过滤分离;② Superdex系列凝胶色谱柱,适用于分离生物大分子和多聚物。
常用色谱柱简介
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常用色谱柱简介一气相色谱毛细柱(键合,聚二甲基硅氧烷)HP-1,DB-1,P-1,CP-SIL5CB,Ultra-1,007-1,RTx-1,AT-1类似固定相:SE-30,SP-2100,OV-1,OV-101,使用温度:-60℃-320℃应用范围:烷烃,芳烃,多环芳烃,醇,酚,酮,酯,醛,胺,卤代烃,吡啶,糖衍生物,氨基酸衍生物,维生素衍生物,镇痛药,农药,溶剂,胆固SPB-50型中等极性柱醇,香料,咖啡,食品添加剂等。
(键合, 50%二苯基,50%二甲基聚硅氧烷)对照品牌:HP-50,HP-17,DB-17,RTx-50,AT-50 SPB-5型弱极性柱类似固定相:OV-17, SP-2250,使用温度:30℃-310℃(键合,5%苯基,95%甲基聚硅氧烷)应用范围:烷烃,低沸点芳烃,多环芳烃,醇,甘对照品牌:HP-5,DB-5,BP-5,CP-SIL 8CB,油三酸酯,喹啉,卤素化合物,香料,农药,酯,Ultra-2, ,RTx-5,AT-5镇痛药,除草剂等。
类似固定相:SE-54,SE-52,OV-73 使用温度:-60℃-320℃PTE-5,PTE-5QTM型弱极性柱应用范围:烷基苯,多环芳烃,醇,酚,酮,脂肪(MS专用柱,键合,5%苯基,95%甲基聚硅氧烷)酸酯,苯二甲酸酯,硝基芳烃,芳胺,烷基胺,联对照品牌:HP-5 MS,DB-5 MS, DB-5.625,XTI-5,苯胺,卤代烃,多氯联苯,,糖类衍生物,维生素衍BPX625,半挥发污染物分析柱(US EPA方法525,生物,有机酸,镇痛药,农药,抗组胺药,溶剂,625.5,625)生物碱,防腐剂,香料等。
类似固定相:SE-54,SE-52 使用温度:-60℃-320℃应用范围:多氯联苯,胺,有机磷,有机氯农药,SUPELCOWAX 10型极性柱含氯除草剂,酚,苯胺,香料等。
(键合,聚乙二醇二万)对照品牌:HP-Wax,DB-Wax,BP-20,CP-Wax 52CB,SPB-1701型中等极性柱HP-INNO Wax,AT-Wax(键合, 14%氰丙基,86%二甲基聚硅氧烷)类似固定相:PEG-20M, CARBOWAX-20M,使用温对照品牌:HP-1701,DB-1701,RTx-1701,AT-1701,度:35℃-280℃BP-10,CPSil19CB应用范围:低沸点芳烃,醇,酮,酸,酯,醛,醚,类似固定相:OV-1701,SP-2250 使用温度:室温-280乙二醇,丙二醇,甘油,吡啶,胺,亚硝胺,卤代℃烃,胆汁酸衍生物,冰片,薄荷,精油,香料,酒,应用范围:醇,卤素化合物,有机氯农药,酸性药苯乙烯,茶,溶剂等。
欧洲药典中使用的色谱柱
![欧洲药典中使用的色谱柱](https://img.taocdn.com/s3/m/aba72db77d1cfad6195f312b3169a4517723e5c0.png)
欧洲药典中使用的色谱柱
标题:欧洲药典中使用的色谱柱
在药物分析和质量控制中,色谱柱是色谱法中最重要的部分之一。
欧洲药典中详细规定了药物分析中使用的色谱柱的种类、性能和测试方法。
本文将介绍欧洲药典中常用的几种色谱柱。
1.硅胶色谱柱
硅胶色谱柱是最常用的色谱柱之一,主要基于硅胶颗粒作为固定相。
这种色谱柱具有高分离性能和稳定性,可用于分离多种类型的化合物,包括脂肪酸、类固醇、抗生素和蛋白质等。
欧洲药典中对硅胶色谱柱的粒径、孔径和表面酸性等性能进行了详细的规定。
2.聚合物色谱柱
聚合物色谱柱是基于聚合物颗粒作为固定相的色谱柱。
这种色谱柱具有广泛的适用性和高分离性能,可用于分离各种类型的化合物,包括脂溶性和水溶性化合物。
欧洲药典中规定了聚合物色谱柱的种类和性能,包括粒径、孔径和极性等参数。
3.凝胶色谱柱
凝胶色谱柱是基于凝胶颗粒作为固定相的色谱柱。
这种色谱柱适用于分离大分子量和具有复杂结构的化合物,如蛋白质、多糖和核酸等。
欧洲药典中对凝胶色谱柱的种类和性能进行了详细的规定,包括粒径、孔径和交联程度等参数。
4.反相色谱柱
反相色谱柱是基于反向吸附原理的色谱柱。
这种色谱柱适用于分离具有疏水性和亲脂性的化合物,如脂溶性维生素和抗生素等。
欧洲药典中对反相色谱柱的种类和性能进行了详细的规定,包括表面活性剂的类型和浓度、粒径和孔径等参数。
总之,欧洲药典中规定的色谱柱种类繁多,根据不同的分离需求选择合适的色谱柱是药物分析和质量控制的关键。
本文仅介绍了其中几种常用的色谱柱,对于更加详细的规定可以参考欧洲药典中的相关章节。
常用的凝胶色谱柱
![常用的凝胶色谱柱](https://img.taocdn.com/s3/m/c345ac5f793e0912a21614791711cc7931b778f6.png)
常用的凝胶色谱柱常用的凝胶色谱柱有以下几种:1. Sephadex系列:Sephadex是一种基于芦荟胶的凝胶,常用于分离蛋白质、核酸、多糖等生物大分子。
根据颗粒大小的不同,常见的Sepharose型号包括Sephadex G-25、Sephadex G-50、Sephadex G-75等。
2. Sepharose系列:Sepharose是一种基于琼脂糖的凝胶,常用于亲和色谱和凝胶过滤等分离纯化方法中。
常见的Sepharose型号包括Sepharose 4 Fast Flow、Sepharose CL-4B、Sepharose FF等。
3. Superdex系列:Superdex是一种基于聚丙烯的凝胶,常用于蛋白质和核酸的分子量测定和分离纯化。
常见的Superdex型号包括Superdex 75、Superdex 200、Superdex 30等。
4. Bio-Gel P系列:Bio-Gel是一种基于聚加醇的凝胶,它具有微细的孔隙结构,可用于蛋白质、核酸和多糖等生物大分子的分离和纯化。
常见的Bio-Gel P型号包括Bio-Gel P-100、Bio-Gel P-30等。
5. Polyacrylamide凝胶:Polyacrylamide是一种常用的凝胶材料,可用于分离许多不同大小和电荷的生物大分子。
常见的凝胶类型包括聚丙烯酰胺凝胶(Polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)、非变性聚丙烯酰胺凝胶(Non-denaturing polyacrylamide gel electrophoresis,Non-denaturing PAGE)和变性聚丙烯酰胺凝胶(Denaturing polyacrylamide gel electrophoresis,Denaturing PAGE)等。
这些常用的凝胶色谱柱在生物科学研究和生物制药工业中广泛应用,在分离和纯化生物大分子方面具有重要作用。
常用色谱柱简介(严选内容)
![常用色谱柱简介(严选内容)](https://img.taocdn.com/s3/m/205721a551e79b8968022658.png)
常用色谱柱简介气相色谱毛细柱(键合,聚二甲基硅氧烷)HP-1,DB-1,P-1,CP-SIL5CB,Ultra-1,007-1,RTx-1,AT-1类似固定相:SE-30,SP-2100,OV-1,OV-101,使用温度:-60℃-320℃应用范围:烷烃,芳烃,多环芳烃,醇,酚,酮,酯,醛,胺,卤代烃,吡啶,糖衍生物,氨基酸衍生物,维生素衍生物,镇痛药,农药,溶剂,胆固SPB-50型中等极性柱醇,香料,咖啡,食品添加剂等。
(键合, 50%二苯基,50%二甲基聚硅氧烷)对照品牌:HP-50,HP-17,DB-17,RTx-50,AT-50 SPB-5型弱极性柱类似固定相:OV-17, SP-2250,使用温度:30℃-310℃(键合,5%苯基,95%甲基聚硅氧烷)应用范围:烷烃,低沸点芳烃,多环芳烃,醇,甘对照品牌:HP-5,DB-5,BP-5,CP-SIL 8CB,油三酸酯,喹啉,卤素化合物,香料,农药,酯,Ultra-2, ,RTx-5,AT-5镇痛药,除草剂等。
类似固定相:SE-54,SE-52,OV-73 使用温度:-60℃-320℃PTE-5,PTE-5QTM型弱极性柱应用范围:烷基苯,多环芳烃,醇,酚,酮,脂肪(MS专用柱,键合,5%苯基,95%甲基聚硅氧烷)酸酯,苯二甲酸酯,硝基芳烃,芳胺,烷基胺,联对照品牌:HP-5 MS,DB-5 MS, DB-5.625,XTI-5,苯胺,卤代烃,多氯联苯,,糖类衍生物,维生素衍BPX625,半挥发污染物分析柱(US EPA方法525,生物,有机酸,镇痛药,农药,抗组胺药,溶剂,625.5,625)生物碱,防腐剂,香料等。
类似固定相:SE-54,SE-52 使用温度:-60℃-320℃应用范围:多氯联苯,胺,有机磷,有机氯农药,SUPELCOWAX 10型极性柱含氯除草剂,酚,苯胺,香料等。
(键合,聚乙二醇二万)对照品牌:HP-Wax,DB-Wax,BP-20,CP-Wax 52CB,SPB-1701型中等极性柱HP-INNO Wax,AT-Wax(键合, 14%氰丙基,86%二甲基聚硅氧烷)类似固定相:PEG-20M, CARBOWAX-20M,使用温对照品牌:HP-1701,DB-1701,RTx-1701,AT-1701,度:35℃-280℃BP-10,CPSil19CB应用范围:低沸点芳烃,醇,酮,酸,酯,醛,醚,类似固定相:OV-1701,SP-2250 使用温度:室温-280乙二醇,丙二醇,甘油,吡啶,胺,亚硝胺,卤代℃烃,胆汁酸衍生物,冰片,薄荷,精油,香料,酒,应用范围:醇,卤素化合物,有机氯农药,酸性药苯乙烯,茶,溶剂等。
气相色谱柱类型及适用范围
![气相色谱柱类型及适用范围](https://img.taocdn.com/s3/m/768c1625f4335a8102d276a20029bd64783e62b7.png)
气相色谱柱类型及适用范围在气相色谱分析中,不同的样品需要使用不同类型的色谱柱以获得最佳的分离效果。
以下是常见的气相色谱柱类型及其适用范围:1.极性柱:极性色谱柱是一种具有极性的固定相,适用于分析极性化合物。
它们通常具有较高的极性和亲水性,适用于分析含有强极性基团或亲水性的化合物,如醇、酮、酸、胺等。
2.中性柱:中性色谱柱是一种非极性的固定相,适用于分析非极性化合物。
它们通常具有较低的极性和疏水性,适用于分析不含强极性基团或亲水性的化合物,如烃、酯、卤代烃等。
3.弱极性柱:弱极性色谱柱是一种介于极性和非极性之间的固定相,适用于分析弱极性化合物。
它们通常具有较低的极性和一定的亲水性,适用于分析弱极性基团或具有一定亲水性的化合物,如酚、腈等。
4.强极性柱:强极性色谱柱是一种具有强极性的固定相,适用于分析强极性化合物。
它们通常具有较高的极性和亲水性,适用于分析含有强极性基团或亲水性的化合物,如胺、硫醇等。
5.硅胶柱:硅胶色谱柱是一种以硅胶为固定相的色谱柱,适用于分析非极性化合物。
它们通常具有较低的极性和疏水性,适用于分析烃、酯、卤代烃等非极性化合物。
6.氧化铝柱:氧化铝色谱柱是一种以氧化铝为固定相的色谱柱,适用于分析非极性化合物。
它们通常具有较低的极性和疏水性,适用于分析烃、酯等非极性化合物。
7.氨基柱:氨基色谱柱是一种具有氨基基团的固定相,适用于分析胺、硫醇等强极性化合物。
它们通常具有较高的极性和亲水性,适用于分析含有强极性基团或亲水性的化合物。
8.氰基柱:氰基色谱柱是一种以氰基为固定相的色谱柱,适用于分析腈等弱极性化合物。
它们通常具有较低的极性和一定的亲水性,适用于分析弱极性基团或具有一定亲水性的化合物。
综上所述,不同类型的色谱柱具有不同的适用范围,选择合适的色谱柱对于获得准确的分析结果至关重要。
在进行分析时,应根据样品的性质和目标选择合适的色谱柱,以达到最佳的分析效果。
简述色谱柱的类型及特点
![简述色谱柱的类型及特点](https://img.taocdn.com/s3/m/6cbc934700f69e3143323968011ca300a6c3f6a3.png)
简述色谱柱的类型及特点
色谱柱是现代色谱分析中最重要的部分之一,根据不同的原理和功能,可以将其分为多种类型。
本篇文章将简述色谱柱的类型及其特点。
一、气相色谱柱
气相色谱柱是指用于气相色谱分析的色谱柱。
它们通常使用非极性或
低极性的填充物,能够有效分离大多数有机化合物。
气相色谱柱常用
于环境分析、石油化学、医学、食品科学等领域,具有分离效率高、
分离速度快的特点。
二、液相色谱柱
液相色谱柱是指用于液相色谱分析的色谱柱。
它们通常使用极性或中
性的填充物,可以分离多种有机分子、生物分子、无机分子等。
液相
色谱柱广泛应用于化学、医学、生物学、环境科学等领域,具有分离
效率高、分离精度高、分析速度快的特点。
三、离子交换色谱柱
离子交换色谱柱是指用于离子交换色谱分析的色谱柱。
它们通常使用
固定载体上的功能基团吸附和固定样品中的离子。
离子交换色谱柱应
用广泛,能够对药物、含氮等复杂物质进行分离和纯化。
四、凝胶过滤色谱柱
凝胶过滤色谱柱是指用于蛋白质和多肽分析的色谱柱。
它们通常通过一种特殊的凝胶过滤机制将样品分离出来,应用广泛于生物技术、医学、药学等领域。
五、亲和色谱柱
亲和色谱柱是指根据其样品特异性吸附效果而设计的一种分离方法。
亲和色谱柱常用于分离和纯化蛋白质、多肽、核酸等生物大分子。
以上是色谱柱的常见类型及其特点。
科学家们根据不同的样品特点和分析要求,选择不同种类的色谱柱进行分析,为科学研究提供了重要的工具。
通用色谱柱
![通用色谱柱](https://img.taocdn.com/s3/m/5adfc2865ebfc77da26925c52cc58bd631869323.png)
通用色谱柱
通用色谱柱是一种可以用于多种分析和分离应用的色谱柱,适用于广泛的化学物质和样品类型。
通用色谱柱通常具有较好的化学稳定性、分离效果和耐久性,能够满足大多数常见分析需求。
以下是一些常见的通用色谱柱类型:
1.反相色谱柱(Reverse Phase Column):反相色谱柱是最常
用的通用色谱柱类型之一。
它们具有亲水性固定相,适用
于非极性和中等极性化合物的分离,如有机化合物、药物、天然产物等。
2.正相色谱柱(Normal Phase Column):正相色谱柱具有疏
水性固定相,适用于极性化合物的分离,如氨基酸、脂肪
酸、天然产物等。
3.离子交换色谱柱(Ion Exchange Column):离子交换色谱柱
基于样品中的离子与柱填料固定相之间的电荷相互作用,
适用于酸、碱、金属离子以及其他带电物质的分离和分析。
4.尺寸排阻色谱柱(Size Exclusion Column):尺寸排阻色谱
柱以样品分子的大小和形状差异进行分离,适用于蛋白质、聚合物、核酸等的分析。
5.亲合色谱柱(Affinity Column):亲合色谱柱基于分析物与
柱填料固定相之间的特定化学亲和性进行分离,适用于蛋
白质、抗原、抗体等的分离和纯化。
这些是常见的通用色谱柱类型,但实际选择应根据需要分析分离的目标化合物和样本特性来确定。
建议根据分析需求、样品特性和仪器设备的兼容性等因素,选择适合的通用色谱柱型号和规格。
色谱柱短柱长柱
![色谱柱短柱长柱](https://img.taocdn.com/s3/m/93056ec6846a561252d380eb6294dd88d0d23d03.png)
色谱柱短柱长柱色谱柱是分离和分析化合物的关键工具之一。
选择合适的柱子长度对于分析结果及分离效果至关重要。
目前市面上常见的色谱柱有短柱和长柱两种,下面将详细讨论它们的优缺点和适用场景。
短柱一般指长度在10-30cm之间的柱子,适用于大多数快速分析或质量控制应用。
短柱常用于常规的定量和质量控制,用途广泛,可适用于不同的样品类型和分析目的。
短柱的最大优点是分离速度快,结果快速出现。
在保证分离效果的同时,短柱的高通量使得分析速度大大提高,从而在高样品流量和多样品快速分析方面具有很强的优势。
短柱的不足之处是它只有有限的分离能力。
由于短柱的柱段有限,相对于长柱,不同组分作用时间较短,容易出现峰重叠的情况。
因此,在分析相似性物质的时候,可能不能实现完全分离,以获得更好的分析精度。
此外,短柱的分离能力受限,就意味着不能分离出比较极性的化合物。
相反,长柱一般指长度在30-150cm之间的柱子,适用于分离复杂的混合物。
长柱的分离效果比短柱更好,对于分析目的具有更强的可靠性和精度。
长柱具有更好的峰分离度和更高的分辨率,使其在化合物、结构等方面具有优势。
如果需要使用某些不同性质的柱,长柱则非常适合,因为其柱段多,可以组合使用不同的柱段,从而增强了其分离效果。
尽管长柱在分离效果方面比短柱表现得更好,但由于其多个柱段,分析时间长。
长柱分析时间较长,其分析能力很大程度上取决于分离时间,许多样品分析时间可达几个小时以上。
这可能对分析的效率带来负面影响,导致分析时间延长,样品消耗增多。
总的来说,无论是短柱还是长柱,都有自己的优缺点。
根据样品性质和分离要求,选择合适的柱子长度和类型将大大提高色谱分析的效率和准确性。
在分析快速且准确的实验方案中,短柱是一种有效的选择;而对于分析时间不敏感且要求高分辨率的实验,长柱则是不错的选择。
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常用色谱柱简介气相色谱毛细柱(键合,聚二甲基硅氧烷)HP-1,DB-1,P-1,CP-SIL5CB,Ultra-1,007-1,RTx-1,AT-1类似固定相:SE-30,SP-2100,OV-1,OV-101,使用温度:-60℃-320℃应用范围:烷烃,芳烃,多环芳烃,醇,酚,酮,酯,醛,胺,卤代烃,吡啶,糖衍生物,氨基酸衍生物,维生素衍生物,镇痛药,农药,溶剂,胆固SPB-50型中等极性柱醇,香料,咖啡,食品添加剂等。
(键合, 50%二苯基,50%二甲基聚硅氧烷)对照品牌:HP-50,HP-17,DB-17,RTx-50,AT-50 SPB-5型弱极性柱类似固定相:OV-17, SP-2250,使用温度:30℃-310℃(键合,5%苯基,95%甲基聚硅氧烷)应用范围:烷烃,低沸点芳烃,多环芳烃,醇,甘对照品牌:HP-5,DB-5,BP-5,CP-SIL 8CB,油三酸酯,喹啉,卤素化合物,香料,农药,酯,Ultra-2, ,RTx-5,AT-5镇痛药,除草剂等。
类似固定相:SE-54,SE-52,OV-73 使用温度:-60℃-320℃PTE-5,PTE-5QTM型弱极性柱应用范围:烷基苯,多环芳烃,醇,酚,酮,脂肪(MS专用柱,键合,5%苯基,95%甲基聚硅氧烷)酸酯,苯二甲酸酯,硝基芳烃,芳胺,烷基胺,联对照品牌:HP-5 MS,DB-5 MS, DB-5.625,XTI-5,苯胺,卤代烃,多氯联苯,,糖类衍生物,维生素衍BPX625,半挥发污染物分析柱(US EPA方法525,生物,有机酸,镇痛药,农药,抗组胺药,溶剂,625.5,625)生物碱,防腐剂,香料等。
类似固定相:SE-54,SE-52 使用温度:-60℃-320℃应用范围:多氯联苯,胺,有机磷,有机氯农药,SUPELCOWAX 10型极性柱含氯除草剂,酚,苯胺,香料等。
(键合,聚乙二醇二万)对照品牌:HP-Wax,DB-Wax,BP-20,CP-Wax 52CB,SPB-1701型中等极性柱HP-INNO Wax,AT-Wax(键合, 14%氰丙基,86%二甲基聚硅氧烷)类似固定相:PEG-20M, CARBOWAX-20M,使用温对照品牌:HP-1701,DB-1701,RTx-1701,AT-1701,度:35℃-280℃BP-10,CPSil19CB应用范围:低沸点芳烃,醇,酮,酸,酯,醛,醚,类似固定相:OV-1701,SP-2250 使用温度:室温-280乙二醇,丙二醇,甘油,吡啶,胺,亚硝胺,卤代℃烃,胆汁酸衍生物,冰片,薄荷,精油,香料,酒,应用范围:醇,卤素化合物,有机氯农药,酸性药苯乙烯,茶,溶剂等。
物,有机磷,除草剂等。
Nukol型极性柱SPB-608型柱(键合, 改性聚乙二醇)(农残/除草剂分析专用柱)对照品牌:HP-FFAP,DB-FFAP,AT-1000,BP-21对照品牌:HP-608,DB608,BP608类似固定相:FFAP,SP-1000,OV-351使用温度:使用温度:室温-300℃60℃-200℃应用范围:多氯联苯,有机磷农药,有机氯农药,应用范围:脂肪酸,低沸点芳烃,醇,酯,酚,腈,除草剂,拟除虫菊酯等。
固体固定相及分类,什么是固定液,对固定液有哪些要求指直接装填到色谱柱中作为固定相的具有活性的多孔性固体物质。
固体固定相大体可分为三类:第一类是吸附剂。
如:分子筛、硅胶、活性炭、氧化铝等;第二类是高分子聚合物。
如国内的GDX型高分子多孔微球,国外Porapak系列等;第三类是化学键合固定相。
在气相色谱中,通常是将固定液涂敷在载体表面上。
采用化学键合固定相分析极性或非极性物质通常都能够得到对称峰,柱效很高,固定相的热稳定性也有所改善。
一般是一种高沸点的有机物的液膜,通过对不同组份的不同分子间的作用,使组份在色谱柱中得到分离。
对气相色谱用的固定液,一般有如下几点要求:1、在操作温度下蒸气压低,热稳定性好,与被分析物理或载气不产生不可逆反应;2、在操作温度下呈液态,而且粘度愈低愈好。
物质在高粘度的固定液中传质速度慢,柱效率因而降低。
这决定固定液的最低使用温度;3、能牢固地附着在载体上,并形成均匀和结构稳定的薄层;4、被分离的物质必须在其中有一定的溶解度,不然就会很快地被载气带走而不能在两相之间进行分配;5、对沸点相近而类型不同的物质有分离能力,即保留一种类型化合物的能力大于另一种类型。
这种分离能力即是固定液的选择性。
使用担体为何要进行处理?一般处理的方法有哪些以及担体的选择常用的担体表面并非惰性,它具有不同程度的催化作用和吸附性(特别是固定液含量低时和分离极性物质时)造成峰拖尾和柱效下降,保留值改变等影响,因而需要预处理。
现将一般处理方法简述如下:1、酸洗法:用浓盐酸加热处理担体20-30分钟,然后用自来水冲洗至中性,再用甲醇漂洗,烘干备用。
此法主要除去担体表面的铁等无机物杂质。
2、碱洗法:用10%的氢氧化钠或5%的氢氧化钾-甲醇溶液浸泡或回流担体,然后用水冲洗至中性,再用甲醇漂洗,烘干备用。
碱洗的目的是除去表面的三氧化二铝等酸性作用点,但往往在表面上残留微量的游离碱,它能分解或吸附一些非碱性物质,使用时要注意。
3、硅烷化:用硅烷化试剂和担体表面的硅醇、硅醚基团起反应,除去表面的氢键结合能力,可以改进担体的性能。
常用的硅烷化试剂有二甲基二氯硅烷和六甲基二硅胺。
4、釉化:把欲处理的担体在2、3%的碳酸钠-碳酸钾(1:1)水溶液中浸泡一天,烘干后先在870度下煅烧3、5小时,然后升温到980度煅烧约40分钟。
经过这样处理,担体表面形成一层玻璃化的釉质,故称“釉化担体”。
这种担体的吸附性能小,强度大,当固定液中加入少量的去尾剂后,能分析如醇、酸等极性较强的物质。
但对非极性物质柱效能则稍有下降。
此外甲醇和甲酸等物质在釉化担体上有一定的不可逆化学吸附,在定量分析时应予以注意。
其他纯化方法:凡是用化学反应来除去活性作用点或用物理复盖以达到纯化担体表面性质的方法都可以使用。
十六、常用的担体目数为多少?答:常用的4-6毫米内径的色谱柱:对于较长色谱柱,选用担体目数一般为40-80目;对于较短色谱柱选用担体目数一般为80-100目(每英寸内的筛孔数目为目)各种担体,名目繁多。
在常用硅藻土担体中: 红色担体(如6201、201),可用于非极性或弱极性物质的分离。
白色担体(如101)可用于极性物质或碱性物质。
釉化红色担体(如301)可用于中等极性物质。
硅烷化白色担体可用于强极性氢键型物质如废水测定。
分离酸性物质,如酚类,要用酸洗处理的担体。
分离碱性物质,如乙醇胺,要用碱洗处理的担体。
微量分析要用硅烷化的担体。
有些特殊的情况下要用特殊的担体,如氟担体分离异氰酸酯类。
但是在普通的常量分析中,对担体可以不必过份讲究,甚至如耐火砖粉粒,玻璃珠砂和海沙也可以使用气相色谱中什么叫担体?对担体有哪些要求以及分类担体是一种多孔性化学惰性固体,在气相色谱中用来支撑固定液。
对担体有如下几点要求:1、表面积较大,一般应在0、5-2米/克之间;2、具有化学惰性和热稳定性;3、有一定的机械强度,使涂渍和填充过程不引起粉碎;4、有适当的孔隙结构,利于两相间快速传质;5、能制成均匀的球状颗粒,利于气相渗透和填充均匀性好;6、有很好的浸润性,便于固定液的均匀分布。
完全满足上述要求的担体是困难的,人们在实践中只能找出性能比较优良的担体。
担体通常分为硅藻土和非硅藻土两大类,每一类又有种种小类。
1、硅藻土类型:(1)白色的:表面积小,疏松,质脆,吸附性能小,经适当处理,可分析强极性组分;(2)红色的:有较大的表面积和较好的机械强度,但吸附性较大。
2、非硅藻土类型:(1)氟担体:表面惰性好,可用来分析高极性和腐蚀性物质,但装柱不易,柱效率低些。
(2)玻璃微球:表面积小,用它做担体柱温可以大大降低,而分离完全且快速。
但涂渍困难,柱效低。
(3)多孔性高聚物小球:机械强度高,热稳定性好,吸附性低,耐腐蚀,分离效率高,是一种性能优良的新型色谱固定相。
(4)炭分子筛:中性,表面积大,强度高,祛寿命长,在微量分析上有无比的优越性。
(5)活性炭:可以单独做为固定相。
(6)沙:主要用于分离金属。
常用担体有:101担体:为白色硅藻土担体;102担体:为白色硅藻土担体;celite545:为白色硅藻土担体;201担体:为红色硅藻土担体;6201担体:为红色硅藻土担体;C-22保温砖:为红色硅藻土担体;chromosorb:为红色硅藻土担体。
色谱柱管材料应根据什么原则选择?常用的柱管是由什么材质制成的对色谱柱管材质,应按如下要求选择:1、应与固定相、试样、载气不起化学反应。
2、要易于加工成型。
管内壁应光滑,横截面应均匀呈圆形。
一般色谱柱管形状呈U型或螺旋形,大多由铜、不锈钢,玻璃等材质制成新柱管应先用稀酸或稀碱(1:1盐酸或氢氧化钠)洗涤,以除去油污等脏垢,而后用自来水冲洗,继而用蒸馏水冲洗至中性,再用干净的空气吹洗并烘干后,即可使用了。
气相色谱分析中柱长、柱内径、柱温、载气流速、固定相、进样等操作条件对分离的影响?操作条件对于色谱分离有很大影响。
1、柱长,柱内径:一般讲,柱管增长,可改善分离能力,短则组分馏出的快些;柱内径小分离效果好,柱内径大处理量大,但柱内径过大,将导致担体不能均匀地分布在色谱柱中。
分析用柱管一般内径为3-6毫米,柱长为1-4米。
2、柱温:是一个重要的操作变数,直接影响分离效能和分析速度。
选择柱温的根据是混合物的沸点范围,固定液的配比和鉴定器的灵敏度。
提高柱温可缩短分析时间;降低柱温可使色谱柱选择性增大,有利于组分的分离和色谱柱稳定性提高,柱寿命延长。
一般采用等于或高于数十度于样品的平均沸点的柱温为较合适,对易挥发样用低柱温,不易挥发的样品采用高柱温。
3、载气流速:载气流速是决定色谱分离的重要原因之一。
一般讲流速高色谱峰狭,反之则宽些,但流速过高或过低对分离都有不利的影响。
流速要求要平稳,常用的流速范围每分钟在10-100亳升之间。
4、固定相:固定相是由固体吸附剂或涂有固定液的担体构成。
(1)固体吸附剂或担体粗细:一般采用40-60目、60-80目、80-100目。
当用同等长度的柱子,颗粒细的分离效率就要比粗的好些。
(2)固定液含量:固定液含量对分离效率的影响很大,它与担体的重量比一般用15%-25%。
比例过大有损于分离,比例过小会使色谱峰拖尾。
5、进样:一般讲进样快,进样量小,进样温度高其分离效果好。
对进液体样,速度要快,汽化温度要高于样品中高沸点组分的沸点值,一次汽化,保证色谱峰形不致展宽、使柱效高。
当进样量在一定限度时,色谱峰的半峰宽是不变的。
若进样量过多就会造成色谱柱超载。
一般讲柱长增加四倍,样品的许可量增加一倍。