亮氨酸氨基肽酶(LAP)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书 微量法
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC4025规格:100T/48S产品内容:试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存;临用前加入3mL丙酮溶解。
产品说明:S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。
S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。
自备实验用品及仪器:天平、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、甲苯、丙酮、30目筛(或更小)。
操作步骤:一、样本处理土样自然风干,过30-50目筛。
二、测定步骤1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,波长调至405nm,蒸馏水调零。
2、加样表:测定管对照管土样(g)0.030.03甲苯(μL)1515震荡混匀,室温静置15min。
试剂一(μL)255255试剂二(μL)30-30℃水浴反应1h后立刻煮沸5min。
流水冷却至室温。
试剂二(μL)-3014000g常温离心10min,取200μL上清于405nm处测定吸光值,分别记为A测定管、A对照管,计算ΔA=A测定管-A对照顾管。
三、酶活计算公式(1)按微量比色皿计算:酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol对硝基苯胺为一个酶活力单位。
S-LAP活性(U/g)=△A÷(ε×d)×109×V反总÷W÷T=0.507×△A÷W。
ε:对硝基苯胺摩尔消光系数:9.87×103L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,300μL=3×10-4L;W:土样质量,g;T:反应时间,60min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。
亮氨酸氨基肽酶测定试剂盒(L-亮氨酰-P-硝基苯胺底物法)产品技术要求华宇亿康
亮氨酸氨基肽酶测定试剂盒(L-亮氨酰-P-硝基苯胺底物法)适用范围:本试剂用于体外定量测定人血清中亮氨酸氨基肽酶(LAP)的活性。
1.1 产品型号/规格试剂1:1×8mL、试剂2:1×2mL;试剂1:1×16mL、试剂2:1×4mL;试剂1:1×20mL、试剂2:1×5mL;试剂1:1×32mL、试剂2:1×8mL;试剂1:1×40mL、试剂2:1×10mL;试剂1:2×40mL、试剂2:2×10mL;试剂1:4×40mL、试剂2:4×10mL;试剂1:2×40mL、试剂2:1×20mL;试剂1:4×40mL、试剂2:2×20mL;试剂1:8×40mL、试剂2:8×10mL;试剂1:1×80mL、试剂2:1×20mL;试剂1:2×80mL、试剂2:2×20mL;试剂1:4×80mL、试剂2:4×20mL;试剂1:8×80mL、试剂2:8×20mL;试剂1:1×60mL、试剂2:1×15mL;试剂1:2×60mL、试剂2:2×15mL;试剂1:3×60mL、试剂2:3×15mL;试剂1:8×50mL、试剂2:2×50mL;试剂1:6×70mL、试剂2:3×35mL;试剂1:5×40mL、试剂2:1×50mL;试剂1:4×50mL、试剂2:1×50mL;试剂1:3×60mL、试剂2:1×45mL;试剂1:8×20mL、试剂2:8×5mL;试剂1:1×20L、试剂2:1×5L;试剂1:1×10L、试剂2:1×2.5L;试剂1:1×4L、试剂2:1×1L;试剂1:1×1L、试剂2:1×250mL。
亮氨酸氨基肽酶(LAP)活性检测试剂盒说明书 微量法
亮氨酸氨基肽酶(LAP)活性检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC4145规格:100T/96S产品内容:试剂一:液体120mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存;临用前加入2.5mL丙酮溶解。
产品说明:LAP是一种膜结合酶,广泛存在于肝、胆、胰等组织中,参与组织蛋白和某些肽类的降解更新。
各类肝病患者因肝细胞损伤,血清LAP的活性均有不同程度的升高,LAP可以作为各类肝病的一项初步检测指标,特别是肝癌鉴别诊断的指标。
LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算LAP活性。
自备实验用品及仪器:天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、丙酮、匀浆器/研钵。
操作步骤:一、样本处理:组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,然后,10000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
细胞:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
液体:直接检测。
二、测定操作:1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,波长调至405nm,分光光度计蒸馏水调零。
2、加样表:在微量玻璃比色皿/96孔板中分别加入下列试剂试剂名称(μL)测定管空白管试剂一10样品上清10试剂一170170试剂二2020在微量玻璃比色皿/96孔板中分别加入上述试剂,充分混匀后于405nm处测定30s时的吸光值A1,迅速置于37℃水浴3min(有控温功能的酶标仪可以将温度调至37℃),拿出迅速擦干测定210s时的吸光值A2,计算△A测定管=A2测定-A1测定,△A空白管=A2空白-A1空白,△A=△A测定管-△A空白管。
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)检测
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)检测
土壤亮氨酸氨基肽酶(Soil leucine aminopeptidase, S-LAP)是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的蛋白酶,广泛分布于土壤微生物,其活性变化与机体某些病理状态密切相关。
土壤亮氨酸氨基肽酶的测定原理:S-LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算土壤亮氨酸氨基肽酶活性。
迪信泰检测平台采用生化法,可高效、精准的检测土壤亮氨酸氨基肽酶活性变化。
此外,我们还提供其他土壤酶类检测服务,以满足您的不同需求。
生化法测定土壤亮氨酸氨基肽酶样本要求:
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期:2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)
2. 相关参数(中英文)
3. 图片
4. 原始数据
5. 土壤亮氨酸氨基肽酶活性信息。
碱性蛋白酶(AKP)活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4478
碱性蛋白酶(AKP)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号:UPLC-MS-4478规格:50T/24S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体35mL×1瓶4℃保存试剂一粉剂×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存试剂三液体50mL×1瓶4℃保存试剂四液体10mL×1瓶4℃保存标准品液体1mL×1支4℃保存溶液的配制:1、试剂一:临用前加入10mL蒸馏水,充分溶解;2、试剂二:临用前加入10mL提取液,沸水浴中搅拌溶解。
3、标准品:20μmol/mL标准酪氨酸。
产品说明:AKP是指在碱性条件下催化蛋白质肽键水解的酶类,属于丝氨酸蛋白酶。
此外,该酶还能够水解酯键、酰胺键,具有转酯及转肽的功能。
该酶是主要工业用酶之一,广泛应用于制药、丝绸、食品、制革等行业。
在碱性条件下,AKP水解酪蛋白生成酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸生成钨蓝;钨蓝在680nm有特征吸收峰,测定680nm吸光度增加速率,来计算AKP活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:研钵/匀浆器、台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1.5 mL EP管、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)称约0.1g组织,加入1mL提取液,冰上充分研磨,10000rpm4℃离心10min,取上清,即粗酶液,置冰上待测。
或直接称取0.1g酶制品,加入1mL提取液,置冰上待测。
二、测定步骤1、分光光度计预热30min以上,调节波长至680nm,蒸馏水调零。
2、试剂一、试剂二和试剂三置于40℃水浴保温30min以上。
3、标准溶液的配制:临用前将20μmol/mL标准液用蒸馏水稀释80倍至0.25μmol/mL标准溶液使用,现用现配。
血清亮氨酸氨基肽酶(LAP)—生化检测项目
血清亮氨酸氨基肽酶(LAP)
一、检测原理
亮氨酸氨基肽酶作用于底物L-亮氨酸对硝基苯酚分解出对硝基苯胺,在405nm波长处测定每分钟吸光度的变化率,而求得样品中LAP的活性。
二、参考区间
血清:20—48U/L
三、临床意义
1、LAP是一种蛋白酶,肝内含量丰富。
肝内外胆淤时,LAP 活力显著增高,尤其是恶性胆淤时,其活力随病情进展而持续增高,对肝内梗阻及胰腺癌的诊断有价值。
2、增高主要见于:肝坏疽、肝炎、乳腺癌、肝癌、胆道癌、卵巢癌、子宫内膜癌等
3、LAP在人体中广泛存在,在毒性物质或疾病影响到富含LAP的近端小管时,尿LAP活性最高。
肾小球基底膜通透性增高、肾小管上皮细胞损害、肾脏损伤和肾肿瘤时LAP增高。
4、肿瘤化疗后尿LAP增高提示肿瘤复发。
亮氨酸氨基肽酶的测定
亮氨酸氨基肽酶的测定亮氨酸氨基肽酶(LAP)是一种存在于人体内的酶类,其具有分解氨基酸的作用,并且在人体的许多重要生理过程中发挥着重要的作用。
因此,检测亮氨酸氨基肽酶的水平非常重要,这不仅可以用来评估病人的疾病风险,还可以监测患者的治疗效果和疾病的进展情况。
下面将介绍如何进行亮氨酸氨基肽酶的测定。
第一步是样本采集和准备。
对于检测亮氨酸氨基肽酶的浓度,血液是最常用的样本类型。
采集样本的最佳时间通常是在晨起后 12 小时内,以避免饮食对测试结果的影响。
收集的血液样本需要分离血清,可在离心机上以高速离心的方式分离血清。
分离后的血清样本需标记并存放在 -70℃以下的冰箱中,以在今后进行测定时使用。
第二步是实验制备。
准备好的血清样本可以使用亮氨酸氨基肽酶试剂盒进行测定。
试剂盒通常会包含所有测定所需的化学药品和设备,其中包括亮氨酸氨基肽酶检测试剂和标准品。
根据试剂盒的说明书,制备一系列逐渐升高的标准品。
通常,标准品的浓度范围应与预计的样品浓度范围相同,这有助于确保测试的准确性。
第三步是测定样本。
通过精确吸取不同浓度的血清样本和标准品,将它们添加到试剂盒内的样板孔中。
在加入样本之前,确保所有的药品和设备态下装配好,这样可避免测定过程中受到外界因素的影响。
将药品混匀后,在规定时间内使用微量板读取器测量样板孔中的吸光度值,并采用相关公式计算样品和标准品中亮氨酸氨基肽酶的浓度。
最后一步是结果解释。
将测定结果与诊断标准相比较,以确定样品中亮氨酸氨基肽酶的含量是否超出正常范围。
当样品中亮氨酸氨基肽酶含量超出正常范围时,可能会提示存在某些肝、胰、胃、前列腺和乳腺等肿瘤等疾病,需要进一步的检查和诊断。
总之,测定亮氨酸氨基肽酶浓度是一项重要的临床检查,能够帮助医生及早诊断病情、掌握病情进展,为疾病的治疗提供重要参考。
但是,测定结果也受到许多因素的影响,因此需要严格遵守实验规程和操作规范。
亮氨酸氨基肽酶
亮氨酸氨基肽酶
亮氨酸氨基肽酶(Leucine Aminopeptidase,LAP)是世界上一种细胞修复的重要内分泌酶,它可以定向切除细胞膜上的多肽。
这种酶被小肠细胞合成,并被用来促进蛋白质的分解和代谢,而且还能抑制特定类型的肿瘤细胞的生长。
LAP可以在体内共调节许多不同的生物作用,其中包括:抑制激素类药物的生物合成,情绪管理,抵抗上呼吸道病原体,促进胃酸分泌,参与肝脏代谢,减少血液凝块,促进血小板功能,抗肥胖,促进小肠空肠活动,增强免疫力,减少运动后的疲劳,以及促进血糖代谢和有氧代谢。
更重要的是,LAP还能抗击癌症,具体表现为减缓癌症的发展速度,增强抗癌药物对癌细胞的杀伤作用,并能够增强对抗癌药物的抗性。
它还可以通过阻断癌症细胞新陈代谢和抑制癌细胞复制来降低癌症的发生率。
LAP的抗癌作用应该得到足够的重视,目前众多研究表明,LAP存在能够抗击癌症的具体活性。
值得注意的是,LAP的抗癌作用力可以通过比较各种不同的癌症细胞类型来体现。
因此,根据癌症病人的具体病情,可以拟定一个合理的治疗方案,分别采用基于LAP和其他抗癌药物结合的治疗方法。
总之,亮氨酸氨基肽酶(LAP)是一种有许多有益作用的重要内分泌酶。
它可以调节许多生理过程,其中包括抑制癌细胞生长和发展。
在认识到它的多种优点之后,越来越多的专家正在研究它在临床治疗中的应用。
亮氨酸氨基肽酶测定试剂盒(L-亮氨酸-p-硝基苯胺底物法)产品技术要求baiding
亮氨酸氨基肽酶测定试剂盒(L-亮氨酸-p-硝基苯胺底物法)适用范围:用于体外定量测定人血清中的亮氨酸氨肽酶的活性。
1.1规格
1.2组成
2.1 外观
2.1.1试剂1:无色液体,无浑浊,无不溶物。
2.1.2试剂2:无色至淡黄色液体。
2.1.3包装外观应整洁,标签字迹清晰,不易脱落。
2.2 净含量
液体试剂的净含量不低于标示体积。
2.3 试剂空白
2.3.1试剂空白吸光度
试剂空白吸光度≤0.3 。
2.3.2试剂空白吸光度变化率
试剂空白吸光度变化率(ΔA/分)≤0.002。
2.4 分析灵敏度
样本浓度为50 U/L时,ΔA/分≥0.010。
2.5 线性区间
在[14,300]U/L范围内,线性相关系数r≥0.990,测试浓度在[14,50]U/L 时,绝对偏差不超过±5U/L,测试浓度在(50,300]U/L时,相对偏差不超过±10%。
2.6 精密度
2.6.1 批內精密度
用高、中、低3个浓度的样本测试试剂盒,各重复测试10次,其变异系数(CV)应不大于6%。
2.6.2批间差
用样本分别测试3个不同批次的试剂盒,每个批次测试3次,其相对极差(R)应不大于10%。
2.7 准确度
回收率在85%-115%范围内。
2.8 稳定性
原包装试剂盒在2℃~8℃避光保存下有效期为12个月,有效期满后3个月内测试,应满足2.3、2.4、2.5、2.6.1和2.7的要求。
亮氨酸氨肽酶测定试剂盒(L-亮氨酰-p-硝基苯胺底物法)产品技术要求丹大
亮氨酸氨肽酶测定试剂盒(L-亮氨酰-p-硝基苯胺底物法)组成:适用范围:用于体外定量测定人血清中亮氨酸氨基肽酶的活性。
规格1(试剂1:15ml;试剂2:5ml);规格2(试剂1:30ml;试剂2:10ml);规格3(试剂1:45ml;试剂2:15ml);规格4(试剂1:60ml;试剂2:20ml);规格5(试剂1:60ml×2;试剂2:20ml×2);规格6(试剂1:60ml×3;试剂2:20ml×3);试剂盒组成见表1表1 亮氨酸氨肽酶测定试剂盒组成2.1外观试剂盒外观应整洁,液体无渗漏,文字符号标识清晰;试剂1为无色透明液体,不得有沉淀和絮状物;试剂2为淡黄色液体,不得有沉淀絮状物.2.2 装量每瓶不少于标示值。
2.3试剂空白吸光度用指定的空白样品测试试剂(盒),在光径1cm下,在波长405nm处测定试剂空白吸光度A≤0.8,试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.005。
2.4分析灵敏度试剂测定50 U/L被测物,吸光度变化率△A/min≥0.01。
2.5线性范围2.5.1在[5,200]U/L内,相关系数R≥0.990。
2.5.2在[5,50]U/L内,线性绝对偏差不超过±5U/L;(50,200] U/L内,线性相对偏差不超过±10%。
2.6精密度2.6.1重复性重复测试(20±4)U/L和(60±12)U/L的样本,所得结果的变异系数(CV%)应不大于5%。
2.6.2批间差测定(20±4)U/L样本,所得结果的批间相对极差(R)应不大于10%。
2.7准确度回收率应在85%-115%范围内。
2.8稳定性试剂有效期为12个月,取到效期后一个月内进行检测,测定结果应符合2.3-2.6.1、2.7项要求。
索莱宝(Solarbio)AKP ALP活性检测试剂盒说明书
组织及血液碱性磷酸酶(AKP/ALP )活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号:BC2140规格:50T/24S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体30 mL×1瓶4℃保存试剂一液体10 mL×1瓶4℃保存试剂二液体10 mL×1瓶4℃保存试剂三液体30 mL×1瓶4℃保存标准液液体1 mL×1支4℃保存溶液的配制:1、标准液:10 μmol/mL 酚标准液,临用前蒸馏水稀释至2.5μmol/mL 备用。
产品说明:AKP/ALP 是一种含锌的糖蛋白酶,在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。
AKP/ALP 广泛分布于人体各脏器中,以肝脏为主。
在碱性环境中,AKP/ALP 催化磷酸苯二钠生成游离酚;酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应红色亚醌衍生物,在510nm 有特征光吸收;通过测定510nm 吸光度增加速率,来计算AKP 活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)称取约0.1g 组织,加提取液1mL 充分研磨,4℃,10000rpm 离心10min ,取上清液待测。
血液可直接用于测定,或者适当稀释后用于测定。
二、操作步骤1、可见分光光度计预热30min 以上,调节波长到510nm,蒸馏水调零。
2、操作表试剂名称(μL )测定管对照管空白管标准管蒸馏水--20-标准品---20上清液20---试剂一200200200200试剂二200200200200混匀后置于37℃水浴中保温15min试剂三600600600600上清液-20--混匀后于510nm测定吸光度,分别记为A测定管、A对照管、A空白管、A标准管。
酰基转移酶(AAT)活性检测试剂盒说明书 10T 可见分光光度法
酰基转移酶(AAT)活性检测试剂盒说明书10T可见分光光度法注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC2350规格:10T/9S产品内容:提取液:液体10mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体10mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存。
临用前加蒸馏水0.6mL充分溶解,4℃保存。
试剂三:液体1mL×1支,4℃保存。
试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。
临用前加入试剂一0.6mL充分溶解,4℃避光保存;产品说明:AAT是一个多功能蛋白大家族,主要负责催化生物体内各种酰基化和去酰基化反应,在基因表达、代谢和信号传导中具有重要作用。
AAT催化乙酰CoA转移乙酰基到丁醇,同时还原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,测定412nm吸光度增加速率,来计算AAT活性。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水操作步骤:一、样本的前处理:称取约0.1g样品,加提取液1mL,冰上充分研磨,16000g4℃离心20min,取上清液待测。
二、测定步骤:1、分光光度计预热30min以上,调节波长至412nm,蒸馏水调零。
2、试剂一在37℃水浴保温30min以上。
3、样本测定试剂名称(μL)空白管测定管蒸馏水100-上清液-100试剂一(预热)700700试剂二5050试剂三100100试剂四5050将上述试剂按顺序加入1mL玻璃比色皿中,加试剂四的同时开始计时,在412nm波长下记录10s时的初始吸光度A1和130s后的吸光值A2,计算ΔA空=A2空-A1空;ΔA测=A2测-A1测,ΔA=ΔA测-ΔA空。
注:如果△A测偏低,可以延长反应时间,如测定10s和310s的吸光度,相应修改计算公式中反应时间。
三、AAT活性计算:(1)按样本蛋白浓度计算:单位的定义:37℃中每mL反应体系下每毫克蛋白每分钟催化吸光值变化0.001个单位为1U。
亮氨酸氨基肽酶测定试剂盒(L-亮氨酰-p-硝基苯胺底物法)产品技术要求lepu
亮氨酸氨基肽酶测定试剂盒(L-亮氨酰-p-硝基苯胺底物法)适用范围:用于体外定量测定人血清中亮氨酸氨基肽酶的活性。
1.1 规格试剂盒是由试剂组成的液体单试剂,质控品为冻干粉,规格及装量见表1。
表1 规格及装量1.2 主要组成成分试剂主要组分:质控品主要组分:2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.2 外观试剂:无色或淡黄色透明溶液。
质控品为浅黄色至黄色冻干粉,复溶后为浅黄色至黄色液体。
外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在405nm处测定试剂空白吸光度,应≤1.7。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.5。
2.4 分析灵敏度测试50U/L的被测物时,吸光度变化率(ΔA/min)应不低于0.0015。
2.5 准确度参照EP9-A2的方法,用比对试剂盒同时测试40例线性范围内不同浓度的血清样本,其相关系数(r)不小于0.990;每个浓度点在[1,30)U/L区间内绝对偏差不超过±3.6U/L;[30,250]U/L区间内相对偏差不超过±12%。
2.6 重复性批内变异系数(CV)应不超过10%。
2.7 线性2.7.1在[1,250]U/L区间内,线性相关系数r应不低于0.990;2.7.2 [1,30)U/L区间内绝对偏差不超过±3.6U/L;[30,250]U/L区间内相对偏差不超过±12%。
2.8 批间差对同一份样品进行重复测定,相对极差不大于12%。
2.9质控品批内瓶间差变异系数(CV)≤10%。
2.10 质控品赋值有效性质控品测值应在靶值范围内。
2.11 稳定性2.11.1效期稳定性原包装试剂盒在2℃~8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测,应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.10之规定。
2.11.2质控品复溶稳定性质控品复溶后在2℃~8℃条件下密闭避光保存,稳定期为7天,稳定期满后1天内,性能应符合2.10的要求。
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP )活性检测试剂盒说明书微量法货号:AC10622规格:100T/48S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系本公司工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体30 mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存溶液的配制:1、试剂二:临用前加入3 mL 丙酮溶解。
产品说明:S-LAP 是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。
S-LAP 活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-LAP 分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm 有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP 活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:天平、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、甲苯、丙酮、30-50目筛、蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)土样自然风干,过30-50目筛。
二、测定步骤1、分光光度计/酶标仪预热30min 以上,波长调至405nm ,蒸馏水调零。
2、加样表:测定管对照管风干土样(g )0.030.03甲苯(μL )1515震荡混匀,室温静置15min 。
试剂一(μL )255255试剂二(μL )30-30℃水浴反应1h 后立刻煮沸5min 。
流水冷却至室温。
试剂二(μL )-3014000g 常温离心10min ,取200μL 上清于405nm 处测定吸光值,分别记为A 测定管、A 对照管,计算ΔA=A测定管-A 对照管。
Shanghai Acmec Biochemical Co.,Ltd.Tel :400-900-4166WEB三、酶活计算公式A 按微量比色皿计算:酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol对硝基苯胺为一个酶活力单位。
酪氨酸酶活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
酪氨酸酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC4050规格:50T/48S产品内容:提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×3瓶,4℃保存。
临用前每瓶加入15mL提取液充分溶解待用。
现配现用。
产品说明:酪氨酸酶(tyrosinase:EC1.14.18.1)是一种单酚单加氧酶,是具有双功能的含铜糖蛋白,广泛存在于植物、酵母和动物组织中。
酪氨酸酶是生物体合成黑色素的关键酶,也是引起果蔬酶促褐变的主要因素,同时也对昆虫的免疫及生长有重要影响酪氨酸酶催化L-多巴生成多巴色素,其在475nm下有特征吸收峰,进而测定出酪氨酸酶的活性。
自备实验用品及仪器:可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理:(1)组织:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆。
12000g,4℃离心20min,取上清,置冰上待测。
(2)细胞或微生物样品的制备:先收集细胞或微生物样品到离心管内,弃上清,按照每500万细胞或微生物加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次)。
12000g,4℃离心20min,取上清,置冰上待测。
(3)血清(浆):直接检测。
二、测定步骤:(1)分光光度计预热30min,波长调至475nm。
蒸馏水调零。
(2)加样表:在1mL玻璃比色皿中分别加入试剂名称(μL)测定管试剂一900样品100充分混匀后立即测定10s时在475nm下的吸光度,记为A1,之后迅速将其放入37℃(哺乳动物)或25℃(其他物种)水浴或培养箱中3min。
然后迅速拿出擦净后测定190s时的吸光度,记为A2。
计算ΔA=A2-A1。
三、酪氨酸酶活力计算:1、按蛋白浓度计算:单位的定义:每mg组织蛋白每分钟催化生成1nmol多巴色素的酶量定义为一个酶活性单位。
2孕妇血清P—LAP检测在异常妊娠中的临床价值分析
2孕妇血清P—LAP检测在异常妊娠中的临床价值分析目的研究孕妇血清P-亮氨酸氨基肽酶(LAP)检测在异常妊娠中的应用价值,为临床异常妊娠的检测提供参考。
方法选择我院2014年2月~2015年4月收治的妊娠产妇作为本次研究的对象,包括异常妊娠及正常妊娠,比较其血清LAP、碱性磷酸酶(ALP)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性。
结果早期妊娠组中,异位妊娠产妇的LAP活性低于正常妊娠者,差异有统计学意义(P<0.05),但两者ALP和ALT的活性差异无统计学意义(P>0.05);中期妊娠组中,先兆流产和正常妊娠产妇的LAP、ALP、ALT活性比较差异无统计学意义(P>0.05);晚期妊娠组中,正常妊娠和多胎妊娠、胆内胆汁淤积症的LAP、ALP、ALT活性比较,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论孕妇血清P-LAP检测在异常妊娠中具有积极的价值,可有效监测妊娠过程中是否存在异常情况。
[Abstract] Objective To study the clinical value of serum P-leucine aminopeptidase (LAP)detection in abnormal pregnancy and to provide reference opinions for the detection of abnormal pregnancy. Methods Pregnant parturient from February 2014 to April 2015 of our hospital were selected as experimental objective,including normal pregnant and abnormal pregnancy parturient.The activity of serum LAP,alkaline phosphatase (ALP)and alanine aminotransferase (ALT)in two groups were compared. Results In early pregnancy,the activity of LAP in ectopic pregnancy group was lower than that of normal pregnancy (P<0.05),but the activity of ALP and ALT between two groups had no obvious difference (P>0.05).In mid pregnancy,the LAP,ALP and ALT between threatened abortion group and normal pregnancy group had no obvious difference (P>0.05).In third pregnancy,the activity of LAP,ALP and ALT between normal pregnancy group and multiple pregnancy group,intrahepatic cholestasis had obvious difference (P<0.05). Conclusion Pregnant serum P-LAP detection has positive determination value in abnormal pregnancy,which can effectively monitor whether there is any abnormal situation during pregnancy.[Key words] Abnormal pregnancy;P-LAP;Serum;Clinical value胎盘亮氨酸氨基肽酶(LAP)是人体中能够降解多种多肽的降解催产素,临床上亦称之为催产素酶的膜结合型外肽酶[1],如血管紧张素和抗利尿激素等。
氨基酸(AA)含量检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4434
可见分光光度法氨基酸(AA)含量检测试剂盒说明书货号:UPLC-MS-4434规格:50T/48S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体50mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体50mL×1瓶2-8℃保存试剂三粉剂×1瓶2-8℃保存试剂四粉剂×1瓶2-8℃保存标准品粉剂×1瓶2-8℃保存溶液的配制:1、试剂三:临用前加入4mL无水乙醇,盖紧后充分混匀,再加入56mL蒸馏水混匀,避光保存。
2、试剂四:临用前加5mL蒸馏水,充分溶解。
3、标准品:10mg半胱氨酸,临用前加入8.26mL蒸馏水,得到10μmol/mL的半胱氨酸标准溶液备用。
产品说明:动物肝脏、肾脏是氨基酸代谢的主要器官,故尿中氨基酸的变化最能反应肝、肾的生理状态。
另外,氨基酸还能反应灼伤、伤寒等方面情况。
植物体内氨基酸含量对研究植物在不同条件下及不同生长发育时期氮代谢变化、植物对氮素的吸收、运输、同化及营养状况等有重要意义。
氨基酸的α-氨基可与水合茚三酮反应,产生蓝紫色化合物,在570nm有特征吸收峰;通过测定570nm吸光度,来计算氨基酸含量。
技术指标:最低检出限:0.798μmol/mL线性范围:1-15μmol/mL注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:台式离心机、可见分光光度计、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、无水乙醇、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)组织样本:称取约0.1g组织,加试剂一1mL,室温下充分研磨,转移到1.5mL EP管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15min;自来水冷却后,10000rpm,4℃离心10min,取上清液,待测。
NADPH-细胞色素 C 还原酶活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4372
NADPH-细胞色素C还原酶(NCR)活性检测试剂盒说明书注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
可见分光光度法货号:UPLC-MS-4372规格:50T/48S产品内容:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一粉剂×2瓶4℃保存试剂二液体80mL×1瓶4℃保存试剂三粉剂×2瓶-20℃保存试剂四粉剂×2支4℃保存溶液的配制:1、试剂一:临用前取一瓶加入50mL蒸馏水,充分溶解;用不完的试剂4℃保存可保存4周;2、试剂三:临用前取一瓶加入1.3mL蒸馏水,充分溶解;用不完的试剂-20℃分装保存2周,避免反复冻融。
3、试剂四:临用前取一支加入275μL蒸馏水,充分溶解;用不完的试剂-20℃分装保存4周,避免反复冻融。
产品说明:细胞色素P450酶是一组主要存在于肝脏的同工酶,在外源物质代谢中具有重要作用,尤其是药物和毒物的代谢。
NCR作为P450酶系的重要一员,催化氧化型P450还原再生。
NCR催化NADPH还原氧化型细胞色素C,还原型细胞色素C在550nm处有特征吸收峰;通过测定550nm 吸光度的增加速率,来计算NCR活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、恒温培养箱/水浴锅、低温离心机、超速离心机、研钵/匀浆器、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、粗酶液提取(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、除去细胞核和线粒体等:称约0.5g组织,加入4℃预冷的1mL试剂一,冰上充分研磨,10000g,4℃离心30min,取上清液,转移到超速离心管中。
2、粗制微粒体:4℃,100000g,离心60min,弃上清液。
3、除血红蛋白等杂质:向步骤2的沉淀中加1mL试剂一,盖紧后充分震荡溶解,100000g离心30min,弃上清液。
尿酶测定实验报告
一、摘要本实验旨在通过测定尿液中的r-谷氨酰转肽酶(rGT)和亮氨酸氨基肽酶(LAP)活性,了解尿酶在泌尿系统疾病诊断中的应用价值。
通过对尿液中rGT和LAP活性的测定,分析其在肾盂肾炎和膀胱炎等疾病中的变化,为临床诊断提供依据。
二、实验目的1. 了解尿酶测定的原理和方法。
2. 掌握尿液中rGT和LAP活性的测定方法。
3. 分析尿酶活性在泌尿系统疾病诊断中的应用价值。
三、实验原理尿酶是一种存在于尿液中的酶类,其活性可以反映肾脏功能状况。
rGT和LAP是常见的尿酶,它们在肾脏近端曲管上皮细胞中含量丰富。
当肾脏发生炎症、感染等病变时,尿酶活性会明显增高。
本实验通过测定尿液中的rGT和LAP活性,评估泌尿系统疾病的诊断价值。
四、实验材料与仪器1. 实验材料:尿液样本、rGT测定试剂盒、LAP测定试剂盒、pH计、酶标仪等。
2. 实验仪器:恒温水浴锅、移液器、离心机、酶标仪等。
五、实验方法1. 样本采集:收集受试者尿液样本,分为两组,一组为肾盂肾炎患者样本,另一组为膀胱炎患者样本。
2. rGT测定:按照试剂盒说明书,将尿液样本加入反应体系中,在酶标仪上测定吸光度值,计算rGT活性。
3. LAP测定:按照试剂盒说明书,将尿液样本加入反应体系中,在酶标仪上测定吸光度值,计算LAP活性。
4. 数据分析:对两组尿液样本的rGT和LAP活性进行统计学分析,比较两组间的差异。
六、实验结果1. 肾盂肾炎患者尿液样本中rGT活性为(25.6±5.2)U/L,膀胱炎患者尿液样本中rGT活性为(18.2±3.8)U/L,两组间差异具有统计学意义(P<0.05)。
2. 肾盂肾炎患者尿液样本中LAP活性为(32.4±6.1)U/L,膀胱炎患者尿液样本中LAP活性为(23.1±4.2)U/L,两组间差异具有统计学意义(P<0.05)。
七、讨论本实验结果表明,尿液中的rGT和LAP活性在肾盂肾炎和膀胱炎患者中均有明显增高。
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亮氨酸氨基肽酶(LAP)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC4140
规格:50T/48S
产品内容:
试剂一:液体100mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存;临用前加入5mL丙酮溶解。
产品说明:
LAP是一种膜结合酶,广泛存在于肝、胆、胰等组织中,参与组织蛋白和某些肽类的降解更新。
各类肝病患者因肝细胞损伤,血清LAP的活性均有不同程度的升高,LAP可以作为各类肝病的一项初步检测指标,特别是肝癌鉴别诊断的指标。
LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算LAP活性。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、丙酮、匀浆器/研钵。
操作步骤:
一、样本处理:
组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,然后,10000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
细胞:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
液体:直接检测。
二、测定操作:
1、分光光度计预热30min以上,波长调至405nm,蒸馏水调零。
2、加样表:在1mL玻璃比色皿中分别加入下列试剂
试剂名称(μL)测定管空白管
试剂一50
样品上清50
试剂一850850
试剂二100100在1mL玻璃比色皿中分别加入上述试剂,充分混匀后于405nm处测定30s时的吸光值A1,迅速置于37℃水浴3min,拿出迅速擦干测定210s时的吸光值A2,计算△A测定管=A2测定-A1测定,△A空白管=A2空白-A1空白,△A=△A测定管-△A空白管。
空白管只需做一次。
三、酶活计算公式
1、液体LAP活力的计算:
单位的定义:每mL液体每分钟生成1nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(U/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=675.4×ΔA
2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1nmol对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(U/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr)÷T=675.4×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟生成1nmol对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(U/g鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W×V样÷V样总)÷T=675.4×ΔA÷W
(3)按细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细胞每分钟生成1nmol对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(U/104cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总)÷T=1.35×ΔA
V反总:反应体系总体积,1×10-3L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.87×103L/mol/cm;109:单位换算系数,1mol=109nmol;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05mL;V样总:加入试剂一体积,1mL;T:反应时间,3min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL,需单独测定;W:样本质量,g;
500:细胞总数,500万。
注意事项:
1、△A大于0.5时或者A值大于1.5时建议将样品上清用试剂一稀释后再进行测定。
2、空白管的△A变化小于0.01。