亮氨酸氨基肽酶说明书
丙氨酸氨基转移酶与亮氨酸氨基肽酶的区别
文章题目:探讨丙氨酸氨基转移酶与亮氨酸氨基肽酶的区别在生物化学领域,丙氨酸氨基转移酶和亮氨酸氨基肽酶是两种重要的酶,在生物体内起着关键作用。
它们虽然名字相似,但在功能和特性上却有着明显的区别。
本文将从不同的角度深入探讨丙氨酸氨基转移酶和亮氨酸氨基肽酶的区别,帮助读者更好地理解这两种酶的作用和意义。
1. 简介1.1 丙氨酸氨基转移酶1.2 亮氨酸氨基肽酶在这里,我们将从最基本的特性和作用开始逐步展开,让读者对这两种酶有一个清晰的认识。
2. 功能差异2.1 丙氨酸氨基转移酶的功能2.2 亮氨酸氨基肽酶的功能在这一部分,我们将比较两种酶在生物体内的不同作用,以及它们分别对生物体的影响。
3. 结构差异3.1 丙氨酸氨基转移酶的结构特点3.2 亮氨酸氨基肽酶的结构特点通过对比两种酶的结构特点,我们可以更清晰地理解它们在生物体内的不同功能和作用机制。
4. 应用领域4.1 丙氨酸氨基转移酶的应用领域4.2 亮氨酸氨基肽酶的应用领域在这一部分,我们将探讨这两种酶在医学、生物工程等领域的不同应用,以及它们的潜在用途。
5. 个人理解与观点5.1 我对丙氨酸氨基转移酶的理解5.2 我对亮氨酸氨基肽酶的理解在这里,我将共享我对这两种酶的个人理解和观点,帮助读者更深入地思考和讨论这一主题。
总结与展望:通过本文的探讨,我们对丙氨酸氨基转移酶和亮氨酸氨基肽酶的区别有了更深入的了解。
这不仅有助于我们在生物化学领域的学习和研究,也为我们理解生物体内酶类的多样性和复杂性提供了新的视角。
在未来的研究和实践中,我们可以进一步探讨这一主题,并挖掘这两种酶在生物体内的更多潜在作用。
通过对丙氨酸氨基转移酶和亮氨酸氨基肽酶的深度剖析,我们对这一主题有了更全面、深刻和灵活的理解。
希望本文能够对你有所启发和帮助,也期待在未来的学习和研究中继续探讨这一令人着迷的领域。
丙氨酸氨基转移酶和亮氨酸氨基肽酶是生物体内起着重要作用的酶类,它们在生物化学领域具有重要的研究和应用价值。
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书 微量法
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC4025规格:100T/48S产品内容:试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存;临用前加入3mL丙酮溶解。
产品说明:S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。
S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。
自备实验用品及仪器:天平、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、甲苯、丙酮、30目筛(或更小)。
操作步骤:一、样本处理土样自然风干,过30-50目筛。
二、测定步骤1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,波长调至405nm,蒸馏水调零。
2、加样表:测定管对照管土样(g)0.030.03甲苯(μL)1515震荡混匀,室温静置15min。
试剂一(μL)255255试剂二(μL)30-30℃水浴反应1h后立刻煮沸5min。
流水冷却至室温。
试剂二(μL)-3014000g常温离心10min,取200μL上清于405nm处测定吸光值,分别记为A测定管、A对照管,计算ΔA=A测定管-A对照顾管。
三、酶活计算公式(1)按微量比色皿计算:酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol对硝基苯胺为一个酶活力单位。
S-LAP活性(U/g)=△A÷(ε×d)×109×V反总÷W÷T=0.507×△A÷W。
ε:对硝基苯胺摩尔消光系数:9.87×103L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,300μL=3×10-4L;W:土样质量,g;T:反应时间,60min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。
亮氨酸氨肽酶偏高原因
亮氨酸氨肽酶偏高原因亮氨酸氨基肽酶活性明显升高者,大多为肝胆病患者。
尿液中亮氨酸氨基肽酶活性明显升高者,大多为肾病患者、同时提示肝胆病。
若为孕期妇女,则提示存在代谢综合征。
1.肾病:病理情况下,由于各种原因导致肾实质尤其是肾小管损害,可引起大量亮氨酸氨基肽酶通过尿排出,常在亚临床期就表现出明显的尿酶排泌量增高,可早期反映肾损害的性质和程度2.肝胆病:血亮氨酸氨基肽酶显著升高见于原发性肝癌、胆道癌、胰腺癌。
对于无黄疸的肝肿大患者,如亮氨酸氨基肽酶升高,提示有原发性肝癌的可能肝内胆汁瘀积或肝外胆管阻塞时,亮氨酸氨基肽酶在胆管、胆小管中的活性最强,可以准确可靠地反映胆汁瘀积的程度。
3.孕期:亮氨酸氨基肽酶显著升高常见于代谢综合征。
若是出现亮氨酸氨基肽酶偏高,要尽快前往医院查明病因,以免造成疾病的发展。
LAP是一种蛋白酶,肝内含量很丰富。
肝内外胆淤时,LAP活力显著增高,尤其在恶性胆淤时,其活力随病情进展而持续增高。
试剂对肝道梗阻及胰腺癌的诊断有价值。
肝坏疽、肝肿瘤、肝炎、乳腺癌、肝癌、胆道癌、胰腺癌、子宫内膜癌、卵巢癌明显增高。
肝硬化、传染性肝炎可中度增高,常为参考值的2-4倍。
阻塞性黄疸明显增高,常达参考值5倍以上,并出现在胆红素或ALP上升之前。
不像其他肝功的酶,只能检测血液样本,LAP还可以检测尿液。
在一些病例中可以检测尿液中LAP的变化,而不必采血。
亮氨酸氨基肽酶(LAP)LAP在人体各组织中广泛存在,在毒性物质或疾病影响到富含LAP的近端小管时,尿LAP 活性最高。
肾小球基底膜通透性增高、肾小管上皮细胞损害、药物致中毒性肾损害和肾肿瘤时LAP增高。
肿瘤治疗后尿LAP增高提示肿瘤复发。
对各种肾脏病例进行分析,发现LAP阳性率最高。
亮氨酸氨基肽酶的基础研究及临床应用
亮氨酸氨基肽酶的基础研究及临床应用
纪晓霞;陈林
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2011(23)12
【摘要】亮氨酸氨基肽酶( LAP)是一类具有HEXXH(X) (18)E锌离子结合的活性中心的金属蛋白酶,定位于细胞胞液、微粒体内及细胞胞膜上,广泛分布于人体各种组
织和器官中,与各种组织、器官的生理功能密切相关;LAP的高表达与肿瘤的转移、浸润、病情的分级、分期以及肿瘤对化疗药物的抵抗性密切相关.临床上使用药物
抑制LAP的活性,可增强免疫力、增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.
【总页数】3页(P175-177)
【作者】纪晓霞;陈林
【作者单位】江苏东台市人民医院消化内科东台 224200;江苏东台市人民医院消
化内科东台 224200
【正文语种】中文
【中图分类】R969.4
【相关文献】
1.亮氨酸氨基肽酶的临床应用进展 [J], 胡芳;司平;袁剑锋
2.尿亮氨酸氨基肽酶测定及临床应用 [J], 杨胜茹;王娟;樊宁;郑玉娟;刘坤
3.血清丙氨酸氨基肽酶和亮氨酸氨基肽酶的临床应用 [J], 吴林岚;林天寿;涂向东
4.血清亮氨酸氨基肽酶水平在妊娠期妇女体内的变化趋势及临床应用 [J], 李小燕;
胡玉皎;程晓东
5.连续监测法测定血清亮氨酸氨基肽酶的活性及临床应用 [J], 嵇鸣;姚莉韵;张建华因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
亮氨酸氨基肽酶的正常值范围_解释说明
亮氨酸氨基肽酶的正常值范围解释说明引言是一篇文章的开头部分,用于向读者介绍文章的背景和目的,为后续内容做铺垫。
在本文中,引言部分将包括概述、文章结构以及目的三个方面。
1.1 概述:亮氨酸氨基肽酶(Leucyl aminopeptidase)是一种重要的酶类物质,在机体的生理过程中发挥着关键作用。
它主要参与蛋白质代谢和消化系统中多肽的降解过程。
因此,了解亮氨酸氨基肽酶的正常值范围对于评估人体健康状况具有重要意义。
1.2 文章结构:本文将围绕亮氨酸氨基肽酶的正常值范围展开全面讨论。
首先,我们会给出亮氨酸氨基肽酶的定义,并介绍其功能特点。
其次,我们会详细说明测定亮氨酸氨基肽酶正常值范围的方法。
接下来,我们将探讨正常值范围在健康状况评估中所起到的重要作用,并分析影响正常值范围的因素。
最后,我们会研究异常值与疾病之间的关联性,并探讨亮氨酸氨基肽酶未来的发展方向。
1.3 目的:本文旨在促进对亮氨酸氨基肽酶正常值范围的理解,以及其在健康评估和疾病诊断中的应用。
通过对现有文献进行综合阐述,我们希望为相关领域的医学研究人员提供参考,并为未来针对亮氨酸氨基肽酶更准确测定方法的改进提出建议。
通过深入探索这一话题,我们可以更好地了解亮氨酸氨基肽酶在机体中的作用机制,并且为将来相关领域的治疗和预防提供指导。
2. 亮氨酸氨基肽酶的正常值范围2.1 亮氨酸氨基肽酶的定义:亮氨酸氨基肽酶(Leucyl Amino Peptidase,LAP)是一种存在于人体组织和体液中的酶类蛋白质。
它在蛋白质代谢中发挥重要作用,参与多种生理过程。
2.2 亮氨酸氨基肽酶的功能:亮氨酸氨基肽酶主要负责催化线性寡肽链通过去除其N-末端亮氨酸残基,从而控制细胞内蛋白质合成和降解。
该酶的活性能够被血清、尿液等生物样本测定。
2.3 测定亮氨酸氨基肽酶的方法:目前,常用于测定亮氨酸氨基肽酶活性或浓度的方法有多种。
其中,常见的是使用底物颜色变化反应法、免疫学检测法以及荧光染料添加法等。
亮氨酸氨基肽酶
亮氨酸氨基肽酶
亮氨酸氨基肽酶(Leucine Aminopeptidase,LAP)是世界上一种细胞修复的重要内分泌酶,它可以定向切除细胞膜上的多肽。
这种酶被小肠细胞合成,并被用来促进蛋白质的分解和代谢,而且还能抑制特定类型的肿瘤细胞的生长。
LAP可以在体内共调节许多不同的生物作用,其中包括:抑制激素类药物的生物合成,情绪管理,抵抗上呼吸道病原体,促进胃酸分泌,参与肝脏代谢,减少血液凝块,促进血小板功能,抗肥胖,促进小肠空肠活动,增强免疫力,减少运动后的疲劳,以及促进血糖代谢和有氧代谢。
更重要的是,LAP还能抗击癌症,具体表现为减缓癌症的发展速度,增强抗癌药物对癌细胞的杀伤作用,并能够增强对抗癌药物的抗性。
它还可以通过阻断癌症细胞新陈代谢和抑制癌细胞复制来降低癌症的发生率。
LAP的抗癌作用应该得到足够的重视,目前众多研究表明,LAP存在能够抗击癌症的具体活性。
值得注意的是,LAP的抗癌作用力可以通过比较各种不同的癌症细胞类型来体现。
因此,根据癌症病人的具体病情,可以拟定一个合理的治疗方案,分别采用基于LAP和其他抗癌药物结合的治疗方法。
总之,亮氨酸氨基肽酶(LAP)是一种有许多有益作用的重要内分泌酶。
它可以调节许多生理过程,其中包括抑制癌细胞生长和发展。
在认识到它的多种优点之后,越来越多的专家正在研究它在临床治疗中的应用。
土壤亮氨酸氨基肽酶测定方法
土壤亮氨酸氨基肽酶测定方法土壤亮氨酸氨基肽酶(leucine aminopeptidase)是一种能够水解亮氨酸氨基肽的酶。
下面是一种常用的土壤亮氨酸氨基肽酶测定方法:材料:- 亮氨酸-对硝基酯 (L-啮合亮胺酸对硝基酯) 库存溶液- 0.1 M 氢氧化钠溶液- pH 8.5 磷酸缓冲液- 0.01 M 纳氢磷酸钠缓冲液 (pH 7.0)- 可见光分光光度计- 土壤样品步骤:1. 准备土壤样品:将土壤样品通过筛网过滤,去除大颗粒杂质。
将过滤后的土壤样品均匀地取出一定量,放入离心管中。
2. 提取土壤亮氨酸氨基肽酶:向离心管中加入足够的 pH 8.5磷酸缓冲液,使土壤悬浊液在振荡器上完全浸没。
使用振荡器在室温下轻轻振荡土壤悬浊液30分钟。
3. 离心样品:将土壤悬浊液离心10分钟,以除去残渣和土壤颗粒。
4. 准备标准曲线:取一系列含有不同浓度亮氨酸-对硝基酯的标准溶液。
将每种标准物质转移到不同的离心管中,每管加入适量的 0.01 M 纳氢磷酸钠缓冲液 (pH 7.0)。
5. 按以下步骤分别处理标准溶液和提取液:- 各取一定体积的标准溶液和提取液,分别加入一定体积的0.1 M 氢氧化钠溶液。
保持温度稳定,反应30分钟。
- 在30分钟后,各体系用 0.01 M 纳氢磷酸钠缓冲液 (pH 7.0) 稀释。
6. 测定吸光值:用可见光分光光度计分别测量标准溶液和提取液的吸光值。
以纳氢磷酸钠缓冲液 (pH7.0) 为白底。
7. 绘制标准曲线:将标准曲线上的吸光值与相应亮氨酸-对硝基酯的浓度进行关联,绘制标准曲线。
8. 计算土壤亮氨酸氨基肽酶活力:使用标准曲线中的吸光值和提取液的吸光值,计算土壤亮氨酸氨基肽酶的活力。
亮氨酸氨基肽酶测定试剂盒(L-亮氨酸-p-硝基苯胺底物法)产品技术要求baiding
亮氨酸氨基肽酶测定试剂盒(L-亮氨酸-p-硝基苯胺底物法)适用范围:用于体外定量测定人血清中的亮氨酸氨肽酶的活性。
1.1规格
1.2组成
2.1 外观
2.1.1试剂1:无色液体,无浑浊,无不溶物。
2.1.2试剂2:无色至淡黄色液体。
2.1.3包装外观应整洁,标签字迹清晰,不易脱落。
2.2 净含量
液体试剂的净含量不低于标示体积。
2.3 试剂空白
2.3.1试剂空白吸光度
试剂空白吸光度≤0.3 。
2.3.2试剂空白吸光度变化率
试剂空白吸光度变化率(ΔA/分)≤0.002。
2.4 分析灵敏度
样本浓度为50 U/L时,ΔA/分≥0.010。
2.5 线性区间
在[14,300]U/L范围内,线性相关系数r≥0.990,测试浓度在[14,50]U/L 时,绝对偏差不超过±5U/L,测试浓度在(50,300]U/L时,相对偏差不超过±10%。
2.6 精密度
2.6.1 批內精密度
用高、中、低3个浓度的样本测试试剂盒,各重复测试10次,其变异系数(CV)应不大于6%。
2.6.2批间差
用样本分别测试3个不同批次的试剂盒,每个批次测试3次,其相对极差(R)应不大于10%。
2.7 准确度
回收率在85%-115%范围内。
2.8 稳定性
原包装试剂盒在2℃~8℃避光保存下有效期为12个月,有效期满后3个月内测试,应满足2.3、2.4、2.5、2.6.1和2.7的要求。
早中晚期孕妇血浆亮氨酸氨基肽酶的变化
早中晚期孕妇血浆亮氨酸氨基肽酶的变化摘要】目的:探讨血浆亮氨酸氨基肽酶(LAP)在早中晚期孕妇中的变化情况。
方法:使用全自动生化分析仪对400例孕早期,孕中期,孕晚期的LAP进行检测,并对结果进行分析。
结论:LAP作为监测胎盘的功能、胎儿的成熟度等将具有非常重要的意义。
【关键词】亮氨酸氨基肽酶LAP 早中晚期孕妇【中图分类号】R714 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2014)19-0381-01亮氨酸氨基肽酶(Leucine aminopeptidase,LAP)是一种蛋白水解酶,位于细胞的线粒体内,有膜结合性,广泛分布于各组织中,尤以肝、胆、肾、胰、小肠及子宫肌层含量丰富[1]。
LAP作为评价肝功能的指标,已在国内逐步应用,但其在妊娠期的活性变化鲜有报道。
我们检测了早中晚各期血浆中LAP活性,以了解在不同孕期LAP的变化情况。
1 材料与方法1.1 材料随机选取我院门诊以及住院孕妇400例,排除既往有肝胆肾胰病史者。
早孕组(妊娠≤12周)118例,年龄18~41(26.33± 4.06)岁;中孕组(妊娠第13~27周)163例,年龄19~39(25.99±4.73)岁;晚孕组(妊娠≥28周)119例,年龄19~41(28.72±5.75)岁。
受试者早晨空腹采静脉血置于肝素锂抗凝真空管内,3500r/min离心7min,排除乳糜、黄疸、溶血标本,进行检测。
1.2 方法仪器为OLYMPUS,AU5821全自动生化分析仪,试剂由北京九强生物技术股份有限公司提供。
在定标曲线良好、质控在控的情况下进行样本检测。
2 结果随着孕周的增加LAP逐渐增高,晚孕组LAP均值达160U/L以上,见下表。
3 讨论孕妇血浆中含有两种LAP,除以肝脏毛细胆管上皮细胞为主的普通机体组织细胞产生的LAP[1]外,还有胎盘LAP(placental leucine aminopeptidase,P-LAP)[2-3]。
LAP临床意义
检验科新开展项目
血清亮氨酸氨基肽酶(LAP):
LAP是一种蛋白酶,肝内含量很丰富,主要检测胆汁排泄功能。
当肝内外胆淤时,LAP活力显着增高,尤其在恶性胆淤时,其活力随病情进展而持续增高。
试验对胆道梗阻及胰腺癌的诊断有价值,肝坏疽,肝肿瘤,肝炎,乳腺癌,肝癌,胆道癌,总胆管结石,子宫内膜癌,明显增高。
肝硬化,传染性肝炎可中度增高常为参考值的2~4倍。
阻塞性黄疸明显增高常为参考值5倍以上,并出现胆红素或ALP上升之前,对原发性肝癌增高显着。
妊娠妇女,长期饮酒者,药物影响如庆大霉素,多粘霉素,磺胺类等LAP可升高。
LAP临床意义
检验科新开展项目血清亮氨酸氨基肽酶(LAP):
LAP是一种蛋白酶,肝内含量很丰富,主要检测胆汁排泄功能。
当肝内外胆淤时,LAP活力显著增高,尤其在恶性胆淤时,其活力随病情进展而持续增高。
试验对胆道梗阻及胰腺癌的诊断有价值,肝坏疽,肝肿瘤,肝炎,乳腺癌,肝癌,胆道癌,总胆管结石,子宫内膜癌,明显增高。
肝硬化,传染性肝炎可中度增高常为参考值的2~4倍。
阻塞性黄疸明显增高常为参考值5倍以上,并出现胆红素或ALP上升之前,对原发性肝癌增高显著。
妊娠妇女,长期饮酒者,药物影响如庆大霉素,多粘霉素,磺胺类等LAP可升高。
尿亮氨酸氨基肽酶
尿亮氨酸氨基肽酶
尿亮氨酸氨基肽酶介绍:
亮氨酸氨肽酶广泛存在人体各种组织中,在尿中也有分布。
当肾脏受到严重损伤时,致使肾实质发生病理性改变时,尿中亮氨酸氨肽酶明显升高。
测定尿亮氨酸氨肽酶有助于临床诊断肾脏或肾外疾病。
尿亮氨酸氨基肽酶正常值:
(6.54±2.71)u/(g・cr)
尿亮氨酸氨基肽酶临床意义:
异常结果:
升高:常见于各种肾小球肾炎活动期,急性肾盂肾炎、休克、麻醉、心血管手术引起的肾脏缺血或急性肾功能衰竭,药物中毒性肾病、肾肿瘤、肾外肿瘤(如肝、胆、胰、肺、血液)等。
需要检测的人群:
肾功能异常,休克,肾衰竭的人
尿亮氨酸氨基肽酶注意事项:
检查前:禁止剧烈运动,保持良好的饮食和作息,检查前一周停用氨基糖苷类
抗生素(庆大霉素、妥布霉素、多黏菌素等)、磺胺类。
检查前3天禁饮酒。
检查时:即先排出一部分尿弃去,以冲掉留在尿道口及前尿道的细菌,然后将中段尿留取送检。
不适宜人群:月经期中的女性,感冒患者
尿亮氨酸氨基肽酶检查过程:
收集受检测者的尿液,用酶促法进行检测。
亮氨酸氨基转肽酶
亮氨酸氨基转肽酶1. 介绍亮氨酸氨基转肽酶(Leucyl-tRNA synthetase)是一种重要的酶类,参与蛋白质合成过程中的翻译阶段。
它的主要功能是将亮氨酸与对应的转运RNA(tRNA)结合,形成亮氨酰-tRNA复合物,为蛋白质的合成提供亮氨酸。
2. 结构亮氨酸氨基转肽酶是一个复合酶,由两个亚基组成:大亚基(α亚基)和小亚基(β亚基)。
大亚基包含了催化活性位点,而小亚基则有助于稳定酶的结构。
亮氨酸氨基转肽酶的结构非常复杂,它包含了多个结构域,每个结构域都有不同的功能。
其中,最重要的结构域是亮氨酰化结构域,它与亮氨酸的结合密切相关。
3. 机制亮氨酸氨基转肽酶的催化机制可以分为两个关键步骤:激活和转肽。
3.1 激活在激活步骤中,亮氨酸氨基转肽酶首先与ATP结合,形成一个复合物。
然后,亮氨酸与ATP发生酯化反应,生成亮氨酰-AMP复合物,同时释放出无机磷酸。
3.2 转肽在转肽步骤中,亮氨酰-AMP复合物与亮氨酰-tRNA结合,形成亮氨酰-tRNA复合物。
这个过程是通过亮氨酸氨基转肽酶的催化作用完成的。
在这个过程中,亮氨酰-AMP复合物首先与亮氨酰-tRNA结合,形成一个过渡态。
然后,过渡态进一步转变为亮氨酰-tRNA复合物,同时释放出AMP。
4. 功能亮氨酸氨基转肽酶在蛋白质合成中起着至关重要的作用。
它的功能主要有以下几个方面:4.1 亮氨酸的激活亮氨酸氨基转肽酶能够将亮氨酸与ATP结合,形成亮氨酰-AMP复合物。
这个过程被称为亮氨酸的激活,是蛋白质合成的第一步。
4.2 亮氨酰-tRNA的形成亮氨酸氨基转肽酶能够将亮氨酰-AMP复合物与亮氨酰-tRNA结合,形成亮氨酰-tRNA复合物。
这个过程是蛋白质合成的关键步骤之一,确保正确的氨酰-tRNA与相应的密码子配对。
4.3 翻译的准确性亮氨酸氨基转肽酶通过选择性地与亮氨酰-tRNA结合,确保了翻译过程的准确性。
它能够识别并结合正确的亮氨酰-tRNA,避免错误的氨酰-tRNA进入翻译复合物。
亮氨酸氨基肽酶测定试剂盒 (L-亮氨酰对硝基苯胺底物法)产品技术要求北京九强
亮氨酸氨基肽酶测定试剂盒(L-亮氨酰对硝基苯胺底物法)适用范围:用于体外定量测定人血清、血浆或尿液中的亮氨酸氨基肽酶的含量。
1.1 包装规格试剂1:1×72mL、试剂2:1×25mL540测试/盒(试剂1:1×75mL、试剂2:1×25mL)校准品(单水平,选配):1×5mL;1×1 mL;1×2mL;1×3mL质控品(水平1,选配):1×5mL;1×1 mL;1×2mL;1×3mL质控品(水平2,选配):1×5mL;1×1 mL;1×2mL;1×3mL1.2 主要组成成分注:校准品、质控品靶值批特异,详见靶值单。
2.1 外观试剂1为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;试剂2为无色至淡黄色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;校准品为黄色粉末状物质,复溶后为淡黄色或黄色液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;质控品为黄色粉末状物质,复溶后为淡黄色或黄色液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;试剂盒标签标识清晰,外包装完整无损。
2.2 净含量液体试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度A下测定空白吸光度应≤0.1000。
415nm2.3.2 试剂空白吸光度变化率A下测定的空白吸光度变化率(ΔA/min)应≤ 0.0100。
415nm2.4 准确度血清(血浆):与已上市产品进行比对试验:在[12,300] U/L区间内,相关系数r≥0.975,在[12,50]U/L区间内测定的绝对偏差应不超过±5U/L,在(50,300]U/L区间内测定的相对偏差应不超过±10%。
尿液:与已上市产品进行比对试验,在[1,80]U/L区间内,相关系数r≥0.975,在[1,20]U/L区间内测定的绝对偏差应不超过±2U/L,在(20,80]U/L区间内测定的相对偏差应不超过±10%。
医学检验·检查项目:尿液亮氨酸氨基转肽酶(ULAP)_课件模板
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相关检查: 血清亮氨酸氨基转肽酶(LAP)、尿糖、 尿酮体试验、尿血红蛋白定性、尿蛋白质、 尿沉渣3小时计数。
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相关症状: 血红蛋白尿、脓尿、乳糜尿、血尿、少尿、 多尿。
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相关疾病: 肾细胞癌、隐匿性肾小球肾炎、肾癌、肾 创伤、肾盂肾炎、局灶性肾小球硬化症。
谢谢!
பைடு நூலகம்
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临床意义:
升高时可见于: 1、急性肾炎、肾血 管损伤。肾肿瘤、急性肾功能衰竭、白血 病、淋巴瘤等肾外肿瘤,以及肾缺血,如 肾移植排斥反应、药物所致的肾损害。 2、 女性生殖器肿瘤。
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正常值: 参考值:(6.54±2.57)u/(g.cr)。
医学检验·各论 尿液亮氨酸氨基转肽酶
(ULAP) 内容课件模板
医学检验·各论:尿液亮氨酸氨基转肽酶(ULAP) >>>
别名: 亮氨酸氨基转肽酶。
医学检验·各论:尿液亮氨酸氨基转肽酶(ULAP) >>>
简介:
血清亮氨酸氨基转肽酶广泛存在于人 体各种组织中,在尿中也有分布。当肾脏 受到严重损伤时,致使肾实质发生病理性 病变时,尿中亮氨酸氨基转肽酶明显升高。 尿液亮氨酸氨基转肽酶测定有助于临床诊 断肾脏或肾外疾病。
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP )活性检测试剂盒说明书微量法货号:AC10622规格:100T/48S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系本公司工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体30 mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存溶液的配制:1、试剂二:临用前加入3 mL 丙酮溶解。
产品说明:S-LAP 是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。
S-LAP 活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-LAP 分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm 有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP 活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:天平、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、甲苯、丙酮、30-50目筛、蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)土样自然风干,过30-50目筛。
二、测定步骤1、分光光度计/酶标仪预热30min 以上,波长调至405nm ,蒸馏水调零。
2、加样表:测定管对照管风干土样(g )0.030.03甲苯(μL )1515震荡混匀,室温静置15min 。
试剂一(μL )255255试剂二(μL )30-30℃水浴反应1h 后立刻煮沸5min 。
流水冷却至室温。
试剂二(μL )-3014000g 常温离心10min ,取200μL 上清于405nm 处测定吸光值,分别记为A 测定管、A 对照管,计算ΔA=A测定管-A 对照管。
Shanghai Acmec Biochemical Co.,Ltd.Tel :400-900-4166WEB三、酶活计算公式A 按微量比色皿计算:酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol对硝基苯胺为一个酶活力单位。
亮氨酸氨基肽酶
亮氨酸氨基肽酶
亮氨酸氨基肽酶-LAP 全称:leucine arylamidase
临床意义:
LAP是一种蛋白酶,肝内含量很丰富。
肝内外胆淤时,LAP活力显著增高,尤其在恶性胆淤时,其活力随病情进展而持续增高。
试剂对肝道梗阻及胰腺癌的诊断有价值。
肝坏疽、肝肿瘤、肝炎、乳腺癌、肝癌、胆道癌、胰腺癌、子宫内膜癌、卵巢癌明显增高。
肝硬化、传染性肝炎可中度增高,常为参考值的2-4倍。
阻塞性黄疸明显增高,常达参考值5倍以上,并出现在胆红素或ALP上升之前。
不像其他肝功的酶,只能检测血液样本,LAP还可以检测尿液。
在一些病例中可以检测尿液中LAP的变化,而不必采血。
亮氨酸氨基肽酶(LAP)LAP在人体各组织中广泛存在,在毒性物质或疾病影响到富含LAP的近端小管时,尿LAP活性最高。
肾小球基底膜通透性增高、肾小管上皮细胞损害、药物致中毒性肾损害和肾肿瘤时LAP增高。
肿瘤治疗后尿LAP增高提示肿瘤复发。
对各种肾脏病例进行分析,发现LAP阳性率最高。
发展及现状:
亮氨酸氨基肽酶试剂盒,采用L-Leucine-p-nitroanilide作为底物通过LAP水解,通过检测P-nitroaniline来测定LAP的活性,此方法在六十年代即为推荐方法,但由于L-Leucine-p-nitroanilide不稳定,此试剂只能配制成应用试剂后使用。
如:RANDOX公司的LAP试剂,使用前R1和R2按照30:1的比例混合,混合后的试剂在2-8度,仅能稳定1天,稳定性大大限制了此试剂在临床上的使用。
参考值:(148-250) mg/dl 或 (1.9-3.2) mmol/L (氧化酶法检测)。
亮氨酸氨基肽酶空腹血糖与妊娠期高血压症发展的相关性
亮氨酸氨基肽酶空腹血糖与妊娠期高血压症发展的相关性张亚兰范晓玲高原DOI :10.11655/zgywylc2021.06.046作者单位:712000陕西省咸阳市第一人民医院检验科(张亚兰),产科(范晓玲);陕西省兴平市秦岭医院检验科(高原)通信作者:范晓玲,Email :*****************亮氨酸氨基肽酶(LAP )是一类能水解肽链N⁃末端并由亮氨酸和其他氨基酸形成肽键的酶。
广泛分布于肝、肾、胰等组织中。
肝脏含量最为丰富。
各类肝细胞损伤的肝病患者,血清中LAP 活性均有不同程度升高。
目前,在临床上LAP 作为肝功能损伤标志评价之一,但在妊娠妇女中血清LAP 水平的生理变化未能广泛重视。
相关研究[1]证实LAP 中的胎盘LAP(P⁃LAP )只有在与妊娠期的女性血液才能检测到。
P⁃LAP 通过降解母体和胎盘之间内表面的催产素、抗利尿激素、血管紧张素Ⅱ等生物活性肽来维持内环境的稳定。
一般情况下,随着孕周的增加,LAP 水平会随之升高。
患者出现妊娠期高血压时,LAP 水平可出现异常变化,故而LAP 可能与妊娠期高血压具有密切相关性,但还有待进一步明确。
另外,妊娠期高血压患者由于激素分泌紊乱常可导致患者血糖水平异常,但相关研究资料较为缺乏。
基于此,本研究探讨了LAP 、空腹血糖(FBG )表达与妊娠期高血压症发展的相关性,旨在为临床妊娠期高血压症的早期诊断提供新的路径和着力点。
观察组对照组10010095665349566组别例数Ⅰ级反应Ⅱ级反应Ⅰ级反应所占比(%)表12组患者急性皮肤反应情况2结果2.12组患者治疗成效对比:观察组受试者局部肿瘤控制率为95%、对照组为94%;观察组受试者远处转移率为5%、对照组为6%。
相较于对照组,观察组受试者局部控制率以及远处转移率差异无统计学意义(P >0.05)。
2.22组患者急性皮肤反应情况:相较于对照组,观察组受试者Ⅰ级急性皮肤反应率明显更高(χ2=16.395,P <0.05)。
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亮氨酸氨基肽酶(Leucine Aminopeptidase, LAP)
试剂盒说明书
微量法100管/96样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶,广泛存在于肝、肾、胰等组织中,尤其以肝脏中含量最为丰富。
各类肝病患者因肝细胞损伤,血清LAP的活性均有不同程度的升高,因此,血清LAP活性的检测能从不同侧面反映各种肝病的发生和发展。
测定原理:
LAP分解L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算LAP活性。
自备用品:
酶标仪/可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体15mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;
样本的前处理:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为1000~5000:1的比例(建议2000万细菌或细胞加入1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
LAP测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至405nm,蒸馏水调零。
2、将试剂二转移至试剂一中充分溶解(如较难溶解,可50℃水浴加热约30min促进溶解);
在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min以上;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
3、在微量石英比色皿或96孔板中加入50μL样本和150μL试剂一,混匀后立即记录405nm
处初始吸光值A1和2min后的吸光值A2,计算ΔA=A2-A1。
注意事项:若ΔA大于0.5,需将酶液用提取液稀释,计算公式中乘以相应稀释倍数。
使A2-A1小于0.5,可提高检测灵敏度。
LAP活力单位的计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、血清(浆)LAP活力的计算:
单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA
2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr (2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W (3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。
b.用96孔板测定的计算公式如下
1、血清(浆)LAP活力的计算:
单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=411.5×ΔA
2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷ (V样×Cpr) ÷T=411.5×ΔA÷Cpr (2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=411.5×ΔA÷W (3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.206×ΔA V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。