Countstar 细胞计数仪介绍
Countstar细胞计数仪【快速操作指南】
Countstar细胞计数仪【快速操作指南】Countstar细胞计数仪【快速操作指南】章节一、介绍1.1 产品概述1.2 适用范围1.3 主要特点章节二、设备启动2.1 设备准备2.2 设备连接2.3 设备开机章节三、操作流程3.1 样本制备3.2 测量设置3.2.1 选择计数模式3.2.2 选择细胞类型3.2.3 设置计数参数3.3 测量操作3.3.1 放置载玻片3.3.2 吸取样本3.3.3 镜片清洁3.3.4 载玻片测量3.4 数据分析3.4.1 统计数据显示3.4.2 数据导出章节四、常见问题及解决方法4.1 设备故障4.2 计数不准确4.3 数据异常章节五、操作注意事项5.1 安全操作5.2 设备维护5.3 使用限制章节六、附件6.1 使用说明书6.2 软件6.3 技术支持联系方式法律名词及注释：1、细胞计数仪：一种科学仪器，用于快速准确地计数和分析细胞数量和特征的设备。
2、计数模式：根据需要选择的计数方式，如细胞计数、细胞大小、细胞形态等。
3、细胞类型：根据样本的种类，选择相应的细胞类型进行计数和分析。
4、计数参数：设定用于计数的相关参数，如计数孔的大小、样本的稀释倍数等。
5、载玻片：细胞样本用来放置的玻璃片，用于显微镜观察和计数。
本文档涉及附件：1、使用说明书：详细介绍Countstar细胞计数仪的操作步骤和注意事项。
2、软件：提供Countstar细胞计数仪的软件地质，方便用户升级和更新。
3、技术支持联系方式：提供Countstar细胞计数仪的售后服务方式和邮箱，用户在使用中遇到问题可联系技术支持人员。
Countstar 细胞计数仪介绍
10µl
30s 活细胞和死细胞浓度， 总细胞浓度，细胞存活 率，细胞的平均大小， 细胞图像
10µl
30s 活细胞和死细胞浓度， 总细胞浓度，细胞存 活率，细胞的平均大 小，细胞图像
通量 染料 CCD分辨率 调焦技术 细胞结团校正 结果输出格式
8 台盼蓝 2592 x 1944(500万像 素） 自动定焦 粗略校正 单一文本格式
样本混匀，加样
插入计数板
自动计数结果
宽广的样品检测范围
• 测量浓度范围：1×104~3×107/ml。 • 直径范围：5-180µm大小的各种原代细胞及传代细胞、干细胞、肿瘤 细胞、血细胞、昆虫细胞、藻类及部分浮游动物。
CHO
MCF7
4T1
Human lymphocyte
MSC
HepG2
微囊藻
隐甲藻
进行相关操作，确保数据的安全性和客观性。
数据输出功能
Countstar细胞计数仪检测结果可以通过JPEG/PDF/EXCEL多格式数
据输出，确保数据的客观真实性，并可以进行后期数据分析和处理。
系统参数
◆ 细胞浓度：1×104－3×107/ml
◆ 细胞直径：5－180μm ◆ 细胞活率范围：0-100% ◆ 样本体积：20μl
Countstar细胞计数仪 与人工计数对比
Countstar细胞计数仪与血球计数板计数细胞活率结果一致，两种方法 计数结果差异无统计学意义(Y=1.0072x;R2=0.9937)
Countstar细胞计数仪 与人工计数对比
Countstar细胞计数仪与血球计数板分别对CHO、MCF-7、HepG2、 MDCK、Vero细胞计数细胞浓度，两种方法计数结果一致，Countstar 细胞计数仪计数结果更准确，重复性测量标准偏差更小。误差线代表 精度
Countstar 细胞计数仪操作手册
Countstar细胞计数仪操作手册计数仪的标准操作程序和细胞计数和活率检测标准操作程序一、启动Cedex XS 系统1. 打开计数仪：按下计数仪上的ON/OFF按钮，按钮亮起蓝色光表示仪器已打开；2. 打开Cedex XS 控制软件：①打开配套电脑，进入Windows操作系统；②双击桌面上的Cedex XS 图标，进入Cedex XS 控制中心；3. 调节白平衡：首次安装Cedex XS系统或移动系统后必须调节白平衡。
①把样品板支架拉出；②点击Cedex XS 控制中心中的HWM键，打开硬件管理对话框；③点击WHITE BALANCE键进行调节，结果将自动保存；④调节完毕后关闭对话框。
二、细胞计数与活性测定1. 样品制备①用培养基或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml；②使用0.2%台盼蓝染色（一般为10μl、1：1）：台盼蓝对血清蛋白亲和力更强，若大量血清蛋白导致图像背景过暗，可以将样品离心，用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数；③将细胞悬液充分混匀；④用移液枪取细胞悬液加入样品板，每槽10μl；可以一次测定八槽，也可测定单槽。
2. 进样：样品板有八个槽，一次可测定四个样品槽。
①拉出样品板支架；②加有样品方向朝里，将样品板放上支架；③将支架推入计数仪，有少许卡扣感表示已就位：样品槽位置指示灯表示样品测定进程。
三、软件设置：1. 打开测定界面：在Cedex XS 控制中心点击MEASURE键，进入测定界面；2. 设置样品参数：①在样品参数栏输入样品名（Reactor ID），可在下拉栏选择或手动输入，最多可输入21个字符；②输入样品编号（Sample ID），最多21个字符；若样品名已存在，软件将自动延续样品编号，也可手动重新输入编号；③软件将自动记录日期和时间，表明样品测定的实际时间；④点击MI×键，出现进样体积对话框；⑤输入参数：样品量（Sample V olume）、台盼蓝用量（Dye Volume）、稀释剂用量（Diluent V olume）；⑥系统将自动计算稀释比例等，可以手动输入注释（Comments）。
countless细胞计数仪参数
countless细胞计数仪参数标题：无数细胞的统计之旅——countless细胞计数仪的参数引言：自从countless细胞计数仪诞生以来，它为科学家们提供了一种精确计算细胞数量的方法。
本文将带您走进这一仪器的世界，揭开它的一些关键参数和工作原理，让我们一同探索无数细胞的统计之旅。
1. 参数一：精确度countless细胞计数仪的精确度是其最重要的参数之一。
通过精确度参数，我们可以了解到该仪器在计数细胞时的准确性。
它的精确度通常以百分比表示，较高的精确度意味着我们可以获得更加可靠的数据。
使用countless细胞计数仪，我们可以准确地知道细胞的数量，从而更好地研究和理解生物学过程。
2. 参数二：速度除了精确度，countless细胞计数仪的速度也是一个重要的考量因素。
速度参数告诉我们该仪器在一定时间内可以计数的细胞数量。
高速度意味着我们可以更快地获取到大量的数据，从而加快研究的进程。
countless细胞计数仪的高速度使得科学家们能够更加高效地进行实验和分析。
3. 参数三：可视化界面现代的countless细胞计数仪通常配备了直观的可视化界面，这是另一个重要的参数。
通过可视化界面，我们可以清晰地看到细胞的图像和计数结果，进一步加强数据的可靠性。
这种直观的界面不仅使科学家们更方便地操作仪器，还使数据分析更加直观和有效。
4. 参数四：适用范围countless细胞计数仪的适用范围也是我们需要考虑的因素之一。
不同的仪器可能适用于不同类型的细胞，因此我们需要选择适合自己研究对象的仪器。
适用范围参数告诉我们该仪器是否适用于我们的实验需求，从而确保我们能够准确计数所需的细胞类型。
结论：countless细胞计数仪的参数对于科学家们来说至关重要。
通过了解精确度、速度、可视化界面和适用范围等参数，我们能够选择适合自己研究需求的仪器，从而获得更加准确和可靠的数据。
这将进一步推动生物学研究的发展，为我们揭示细胞世界的奥秘。
细胞计数仪说明书
Countess™ 自动细胞计数仪配有一台相机 (2.3X 物镜及 310 万像素)。
Countess™ 细胞计数板规格 材料： 尺寸： 计数板深度： 计数板容积： Countess™ USB 驱动器：
聚甲基丙烯酸甲脂 (PMMA) 75 mm (w) × 25 mm (d) × 1.8 mm (h) 100 μm 10 μL 1 GB
vii
Countess™ 自动细胞计数仪的描述
Countess™ 自动细胞计数仪的正
视图
Countess™ 自动细胞计数仪是一款台式自动细胞计数仪，它采用台盼蓝染色进行细胞 计数或存活率检测。 正视图显示了 Countess™ 自动细胞计数仪的各种部件，如下图所示。
电源按钮
电源按钮用来开启和关闭仪器。红色状态灯表示仪器已关闭；绿色状态灯表示仪器已开 启。
简介...............................................................................................................................................1
产品概述.................................................................................................................................................1
附录...............................................................................................................................................25
18. Countstar Rigel S2细胞计数仪标准操作规程
Countstar Rigel S2细胞计数仪标准操作规程1、操作步骤1)开机：接通电源，并开启左侧底部电源按钮。
显示屏启动开关变成黄色后，长按触摸按键6-8秒，黄色指示灯变成蓝色，等待系统开机。
登陆界面输入用户名和密码，点击登陆（初始用户名：admin，初始密码：admin）。
2)准备：待测样品，Countstar计数板，移液器及枪头。
3)计数：吸取20ul样品匀速加入Countstar计数板中，在“类型”界面，点击所测实验类型图标，如“AOPI细胞活率”，将计数板插入进样口中，输入测量信息。
a)在信息输入界面选择计数槽位（自上而下为1-5），选中后槽位由蓝色变成黄色。
b)输入实验名称（允许为空）、样品ID（允许为空）、稀释比例和细胞类型。
c)点击“确认”，槽位变成绿色。
d)点击“开始”，开始计数。
4)计数完毕，样品板自动退出，屏幕上显示计数结果。
5)数据管理：以“AOPI 细胞活率”为例，点击结果界面左上角“返回”或直接点击导航栏“数据”并在实验类型下拉框中选择“AOPI 细胞活率”，均可进入“AOPI 细胞活率”的数据界面中，点击数据行第一列的圆形按钮选中记录，可进行如下操作：a)查看视野：查看样品ID 下各视野的结果。
b)详细结果：查看选中记录的详细结果，若选中多条记录，默认显示第一条记录。
c)参数调节：优化识别参数。
d)样本删除：删除选中的数据。
e)Excel 导出：插入USB 存储设备，可批量进行Excel 格式的数据导出。
f)PDF 导出：插入USB 存储设备，可批量进行PDF 格式的数据导出。
g)图片导出：插入USB 存储设备，可批量进行图片形式的数据导出。
h)计算器：可以根据当前的浓度计算加入多少体积稀释至目标浓度6)关机：点击导航栏关机按钮，弹出对话框，点击“关机”，等待触摸按钮变为黄色后，关闭左侧底部电源按钮，并关闭电源。
2、注意事项1)关机后请拔出样品板。
2)操作员需经过培训并在管理规范的实验室内才可以操作。
Countstar+细胞计数仪操作手册
Countstar细胞计数仪操作手册计数仪的标准操作程序和细胞计数和活率检测标准操作程序一、启动Cedex XS 系统1. 打开计数仪:按下计数仪上的ON/OFF按钮,按钮亮起蓝色光表示仪器已打开;2. 打开Cedex XS 控制软件:①打开配套电脑,进入Windows操作系统;②双击桌面上的Cedex XS 图标,进入Cedex XS 控制中心;3. 调节白平衡:首次安装Cedex XS系统或移动系统后必须调节白平衡。
①把样品板支架拉出;②点击Cedex XS 控制中心中的HWM键,打开硬件管理对话框;③点击WHITE BALANCE键进行调节,结果将自动保存;④调节完毕后关闭对话框。
二、细胞计数与活性测定1. 样品制备①用培养基或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml;②使用0.2%台盼蓝染色(一般为10μl、1:1):台盼蓝对血清蛋白亲和力更强,若大量血清蛋白导致图像背景过暗,可以将样品离心,用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数;③将细胞悬液充分混匀;④用移液枪取细胞悬液加入样品板,每槽10μl;可以一次测定八槽,也可测定单槽。
2. 进样:样品板有八个槽,一次可测定四个样品槽。
①拉出样品板支架;②加有样品方向朝里,将样品板放上支架;③将支架推入计数仪,有少许卡扣感表示已就位:样品槽位置指示灯表示样品测定进程。
三、软件设置:1. 打开测定界面:在Cedex XS 控制中心点击MEASURE键,进入测定界面;2. 设置样品参数:①在样品参数栏输入样品名(Reactor ID),可在下拉栏选择或手动输入,最多可输入21个字符;②输入样品编号(Sample ID),最多21个字符;若样品名已存在,软件将自动延续样品编号,也可手动重新输入编号;③软件将自动记录日期和时间,表明样品测定的实际时间;④点击MI×键,出现进样体积对话框;⑤输入参数:样品量(Sample V olume)、台盼蓝用量(Dye Volume)、稀释剂用量(Diluent V olume);⑥系统将自动计算稀释比例等,可以手动输入注释(Comments)。
细胞计数仪技术参数
细胞计数仪技术参数1、直接加样计数，无需细胞计
数板。
*2、多检测模式：包括红绿两色荧光模式，GFP模式（转染效率），明场模式，台酚蓝检
测、酵母检测模式及自定义方法模式。
*3、检测浓度范围：7X102~2.5X107cells/mLo4、测量细胞直径范围：4〜420Pm。
*5、测量样品体积:5PL（50pm高度），10（iL （100（im高度）,40|iL （400pm高度）可调。
6、检测速度：明场＜3秒，荧光＜8.5秒。
7、样品基座材质：光学级蓝宝石。
8、明场照明：LED 530nm o9、荧光激发:LED 470nm o
10、发射滤光片：AO530±25nm, PI
645±37nm o11、触摸屏：27寸高清彩色触摸屏，可抓屏，可屏幕缩放。
12、图像：N310万像素荧光图像，2500万像素明场图像，可图像叠加。
13、内存：N1T固态存储器。
14、连接：N3个USB接口。
Countess II FL 自动细胞计数器用户教程说明书
APPLICATION NOTE Countess II FL Automated Cell CounterFluorescent apoptosis evaluation using the Countess II FL Automated Cell CounterProtocol—instrument setup1. Turn on the Countess II FL Automated Cell Counter and install the GFP and Cy5 EVOS Light cubes.2. Install the appropriate slide holder for either the disposable or reusable slide.3. Obtain a disposable or reusable Countess slide.Protocol—culture setup and counting1. Acquire a eukaryotic cell suspension, CellEventCaspase-3/7 Green Detection Reagent, and SYTOX Red Dead Cell Stain.2. Stain the cell sample according to the manual provided with the CellEvent Caspase 3/7 Green Detection Reagent.3. Stain the cell sample according to the manual provided with the SYTOX Red Dead Cell Stain.4. Apply 10 µL of the stained cell sample to the Countess slide.IntroductionThe ability to assess cell health in a cell population is a basic and critical evaluation parameter in many cell and molecular biology labs. To this end, knowing how many cells are dead or dying are key pieces of information. To answer such basic questions, the cells of interest can be stained with a viability dye, such as Invitrogen ™ Molecular Probes ™ SYTOX ™ Red Dead Cell Stain, as well as an apoptosis indicator that measures caspase activation, such as Invitrogen ™Molecular Probes ™ CellEvent ™ Caspase-3/7 Green Detection Reagent. This staining combination, used together with an Invitrogen ™ Countess ™ II FL Automated Cell Counter equipped with GFP and Cy ®5 EVOS ™ Light Cubes, allows a quick and simple method to obtain apoptosis data together with cell viability data.General methodsMaterials• Countess II FL Automated Cell Counter (Cat. No. AMQAF1000)• Invitrogen ™ Countess ™ Cell Counting ChamberSlides (Cat. No. C10228) or Invitrogen ™ Countess ™ II FL Reusable Slide (Cat. No. A25750)• EVOS Light Cubes, GFP (Cat. No. AMEP4651) and Cy5 (Cat. No. AMEP4656)• CellEvent Caspase-3/7 Green Detection Reagent (Cat. No. C10423)• SYTOX Red Dead Cell Stain (Cat. No. S34859)5. Insert the Countess slide into the Countess II FL Automated Cell Counter sample port to initiate autofocus.6. Adjust fluorescence light intensities to minimize background while maximizing signal.7. Press Capture.Apoptosis assessmentThe CellEvent Caspase-3/7 Green DetectionReagent (Ex/Em: 502/530 nm when bound to DNA) is intrinsically nonfluorescent, as the DEVD peptide inhibits the ability of the dye to bind to DNA. However, after activation of caspase-3/7 in apoptotic cells, the DEVD peptide is cleaved, enabling the dye to bind to DNA and produce a bright, fluorogenic response. The fluorescence emission of the dye when bound to DNA can be observed using a standard “FITC” or GFP filter set.To use CellEvent Caspase 3/7 Green DetectionReagent, simply add substrate to control and treated cells, incubate 30 minutes, and visualize. Apoptotic cells with activated caspase-3/7 will have bright green nuclei, while cells without activated caspase 3/7 will have minimal fluorescence signal.SYTOX dead cell stains do not cross intact cellmembranes, and they exhibit increased fluorescence upon dsDNA binding, making them some of ourbrightest dead cell stains. SYTOX dead cell stains can be applied to cells and visualized without an additional wash step because they are nonfluorescent inaqueous media. These stains are available in multiple single-color formats, making them compatible with many filter sets.After brief incubation with SYTOX Red Dead Cell Stain, the nucleic acids of dead cells fluoresce bright red when excited and detected with traditional Cy5 filter sets. SYTOX Red Dead Cell Stain is distinct from dead cell probes such as 7-AAD and propidium iodide (PI) that are excited using 488 nm light. Moreover, the emission of SYTOX Red Dead Cell Stain is limited to one channel, thus minimizing spectral overlap with CellEvent Caspase 3/7 Green Detection Reagent and simplifying workflow.What used to take more than an hour on traditional microscopes or cytometers—simply acquiring preliminary results—now takes only a few minutes with the Countess II FL Automated Cell Counter. You can save time and effort by checking your sample before using a microscope or flow cytometer.Find out more at thermofi/countessFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. © 2015 Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved. All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific and its subsidiaries unless otherwise specified. Cy is a trademark of GE Healthcare. CO210384 0615Figure 1. Apoptotic and dead cells counted on a Countess II FLAutomated Cell Counter. A Countess II FL Automated Cell Counter was loaded with EVOS Light Cubes for GFP (Cat. No. AMEP4651) and Cy5 (Cat. No. AMEP4656). After incubation with 0.5 µm staurosporine, HeLa cells were labeled with 1:400 CellEvent Caspase-3/7 Green Detection Reagent (Cat. No. C10423) to identify apoptotic cells, and then stained with 1:1,000 SYTOX Red Dead Cell Stain (Cat. No. S34859) to denote all dead cells and incubated at room temperature for 30 minutes.Figure 2. Apoptosis of HeLa cells measured on a Countess II FL Automated Cell Counter using CellEvent Caspase-3/7 GreenDetection Reagent and SYTOX Red Dead Cell Stain. The indicated amounts of staurosporine were applied to HeLa cells to trigger apoptosis. Increases in green and far-red signal were noted with increased drug treatment, indicating significant increases in apoptosis and cell death,respectively.P e r c e n tConditionStaurosporineStaurosporineApoptotic DeadApoptotic and dead。
GMP文件 Countstar细胞计数仪操作规程
细胞计数仪操作规程1、Countstar细胞计数仪简介1.1 基于经典台盼蓝染色法原理开发。
1.2 采自动优化成像系统，无需人工调焦，摒除人工调焦的误差。
1.3 精确标定死活细胞和校正结团细胞，能快速进行细胞计数、细胞形态和细胞统计图分析。
1.4 样本需求量低，快速：20µl/样本，<20s/样本。
1.5 自动光学对焦、成像并进行数据分析，每个样本可进行多个视野检测，系统自动统计出平均结果。
1.6 测量浓度范围：1×104~3×107/ml。
1.7 直径范围：5-180µm大小的各种原代细胞及传代细胞、干细胞、肿瘤细胞、血细胞、昆虫细胞、藻类及部分浮游动物。
2、操作过程简介2.1 打开配套电脑，进入Windows操作系统；2.2 双击桌面上的Countstar图标，进入Countstar控制中心；2.3 打开计数仪：按下计数仪上的ON/OFF按钮，按钮亮表示仪器已打开；2.4 设定所测的细胞参数；2.5 取样。
当样品浓度过大时，用盐水或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml；2.6 染色。
使用0.2%台盼蓝染色（一般为10μl、1：1）：台盼蓝对血清蛋白亲和力更强，若大量血清蛋白导致图像背景过暗，可以将样品离心，用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数；将细胞悬液充分混匀；2.7 加样。
移液枪取细胞悬液加入样品板，每槽20μl；2.8 插入计数板；2.9 自动计数结果；2.10 根据测试结果可适当调整细胞参数以达到最佳测试结果；微调旋钮同一样本可进行多个视野检测，系统自动统计出平均结果。
3、检测结果包括2.1 细胞图片2.2 总细胞浓度2.3 活细胞浓度2.4 死细胞浓度2.5 细胞存活率2.6 细胞平均直径2.7 细胞增长曲线2.8 细胞大小柱状图2.9 细胞平均圆度2.10 细胞结团率2.11 细胞结团柱状图（具体操作参见说明书）4、细胞总浓度的检测4.1无台盼蓝染色时，Countstar细胞计数仪可以检测细胞浓度、细胞平均直径、细胞平均圆度和细胞聚团率（绿色圈所示为有效计数细胞）。
countstar荧光细胞分析仪在干细胞领域的应用
Countstar Rigel全自动细胞荧光分析仪在干细胞领域的应用一、干细胞的研究背景干细胞新疗法的不断出现，不仅给更多的疾病带来治疗新思路，也给市场的发展注入源源不断的驱动力。
2018年，欧盟批准了脂肪来源间充质干细胞治疗产品Alofisel上市，适应症为克罗恩病患者复杂性肛周瘘。
同年，我国申报受理了5款间充质干细胞治疗产品。
此外，基于诱导多能干细胞的新型疗法也有多项获批进入临床试验。
例如，去年日本批准了世界首个iPS细胞治疗帕金森的临床试验，又批准了世界首个基于iPS细胞的心脏治疗试验，2019年2月，日本批准了全球首例iPS细胞治疗脊髓损伤的临床试验。
在干细胞研究和转化应用快速发展的同时，也出现了一些问题，干细胞制备标准不统一，质量存在严重隐患，一些逃避政府监管、缺乏临床前研究数据的干细胞治疗屡禁不止。
因此，国家卫生健康委员会制定了《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则（试行）》，并发布中国第一个干细胞行业法规《干细胞临床研究管理办法（试行）》来规范干细胞临床研究，充分保护受试者的权益。
因此，干细胞的临床研究不再是一个空白地带无人监管，而是有明确的法律文件进行指导和约束。
二、干细胞制剂与使用环节的难点1. 原代间充质干细胞分离后含有大量的杂质，从胎盘和脐带血中提取的原代细胞数量和质量难以控制；2. 传统方法冻存前干细胞活率判断粗略，并不明确细胞具体所处的生长周期和凋亡状态；3. 干细胞冻存前后和运输前后的活率，用台盼蓝染色法难以准确判断；4. 干细胞制剂或冻存干细胞的CD maker检测用流式检测工序繁琐、成本高昂；5. 缺乏一套简洁易行的放行检测方法和标准，以及实现质量鉴定控制的小型仪器；6. 目前以单个细胞为对象的质量监控方法主要有显微镜、流式细胞仪等，但是显微镜容易引入人为因素，造成检测结果不可控，另外，流式细胞仪的操作维护相对复杂，缺乏完成整个质控体系细胞质量检测的设备；三、Countstar Rigel全自动细胞荧光分析仪在干细胞质量鉴定控制的应用Countstar Rigel从研发、生产、质控、存储、临床等环节都可以应用，在制剂优化、培养基优化、CMC工艺验证、入库检、过程检、放行检、复核检等相关环节都能够充分发挥作用。
利用CountessIIFL自动细胞计数仪
实验方案——培养设置和计数 1. 采 集 真 核 细 胞 悬 液 、 准 备 CellEvent
Caspase-3/7 Green 检测试剂和 SYTOX Red 死细胞染料。
2. 参照 CellEvent Caspase 3/7 Green 检测试剂 提供的手册染色细胞样本。
一般方法
材料 Countess II FL 自 动 细胞 计 数 仪 (货 号 ：
AMQAF1000)
Invitrogen™ Countess™ 细胞计数板 (货号： C10228) 或 Invitrogen™ Countess™ II FL 可 重复使用的载玻片 (货号：A25750)
EVOS 光立方，GFP (货号：AMEP4651) 和 Cy5 (货号：AMEP4656)
3. 参照 SYTOX Red 死细胞染料提供的手册染色 细胞样本。
4. 在 Countess 计数板中加入 10 μL 染色细胞样 本。
5. 将 Countess 计数板插入 Countess II FL 自动 细胞计数仪上样口，开始自动聚焦。
6. 调整荧光光线强度，使背景最小化且信号最大 化。
CellEvent Caspase-3/7 Green 检测试剂 (货 号：C10423)
SYTOX Red 死细胞染料 (货号：S34859)
实验方案——仪器设置 1. 打开 Countess II FL 自动细胞计数仪，安装
GFP 和 Cy5 EVOS 光立方。
2. 安装适当的载玻片支架，用于放置一次性或可 重复使用的载玻片。
应用指南
Countess II FL 自动细胞计数仪
Countess II手册
计数无处不在但并非都能与COUNTESS® II FL自动细胞计数仪相媲美全新的Countess® II FL自动细胞计数仪是一款台式细胞分析平台，它采用最先进的光学元件和图像分析软件，快速评估悬浮细胞。
该仪器具有3通道灵活性-明场和两个可选的荧光通道-研究人员可以计数细胞、监测荧光蛋白表达并检测细胞活性。
•灵活-选择适合您的应用的荧光滤光片•超值-可重复使用的计数板供您选择，减少了耗材成本•精确-自动聚焦，可提高准确度，减少差异性•简单-易于使用的触摸屏界面“我会用准确、稳定和轻松来形容全新的Countess II® FL自动细胞计数仪。
”Ravi Pathak博士Baylor 医学院2Life Technologies | Countess® II FL自动细胞计数仪3Life Technologies | Countess ® II FL自动细胞计数仪细胞团块？采用Countess ® II FL 自动细胞计数仪可以轻松解决这个问题。
不论使用自动还是手动细胞计数方法，对含有细胞团块的样本进行准确的细胞计数都十分困难。
Countess II ® FL 自动细胞计数仪采用了先进的计数算法，可以明确划定细胞团块内的细胞轮廓，从而对细胞团块样本进行精准的细胞计数(图1)。
可重复使用的玻片或一次性玻片供您选择Countess ® II FL 自动细胞计数仪提供了可重复使用的细胞计数板，从而大大缩减了长期耗材成本。
对于喜欢使用方便的一次性玻片的研究人员而言，适用于之前的Countess ®自动细胞计数仪的玻片亦可用于Countess II ® FL 自动细胞计数仪 (图2)。
精准的计数Countess ®II FL 自动细胞计数仪采用了先进的自动聚焦和计数算法，可快速且准确地鉴别并计数细胞。
插入玻片后，Countess ® II FL 计数仪将自动聚焦细胞，避免了手动聚焦引起的用户差异 (图3)。
Countstar细胞计数仪【快速操作指南】
Countstar细胞计数仪【快速操作指南】Countstar细胞计数仪【快速操作指南】1.准备工作1.1 确保Countstar细胞计数仪已经正确连接电源，并且设备处于开启状态。
1.2 确保Countstar细胞计数仪已经连接到电脑，并且安装了相关的驱动程序和软件。
2.样品处理2.1 将待检测的细胞样品均匀悬浮在培养基中。
2.2 取出Countstar细胞计数仪的计数室盖子，并用70%酒精消毒。
3.开始计数3.1 打开Countstar细胞计数软件，并选择“New Experiment”。
3.2 在弹出的窗口中，选择合适的计数模式（如细胞计数、活细胞计数等）。
3.3 将计数室盖子上的样品滴到计数室的中心位置，然后轻轻盖上计数室盖子。
3.4 软件界面上的“Count”按钮，开始计数。
3.5 等待Countstar细胞计数仪完成计数，并在软件界面上显示结果。
4.计数结果解读4.1 在软件界面上，可以看到细胞总数、活细胞数、死细胞数等详细数据。
4.2 可以通过设置不同的参数，如细胞大小、形状等，对结果进行筛选和分析。
4.3 可以将计数结果保存为Excel或PDF文件，以便后续分析和报告。
5.清洁和保养5.1 计数室使用后，立即清洗和消毒，以防止交叉污染。
5.2 定期检查和清洁Countstar细胞计数仪的外壳、计数室盖子等部分。
5.3 注意保持Countstar细胞计数仪的干燥和整洁，避免灰尘和液体进入设备内部。
6.附件本文档涉及的附件：●Countstar细胞计数仪软件安装包●Countstar细胞计数仪驱动程序7.法律名词及注释●细胞计数：利用Countstar细胞计数仪快速准确地统计细胞数量的方法。
●活细胞计数：通过对活细胞的染色并利用Countstar细胞计数仪进行计数，得出活细胞数目的方法。
●培养基：提供细胞生长所需营养物质的液体或固体培养基质。
●70%酒精：一种常用的消毒剂，用于对Countstar细胞计数仪进行表面消毒。
countstar细胞计数仪原理
Countstar细胞计数仪原理解析1. 前言细胞计数在生物医学领域中起着至关重要的作用，因为它不仅可以帮助我们了解细胞数量的变化，还能帮助科研人员进行细胞实验和药物筛选。
而在细胞计数仪中，Countstar细胞计数仪以其高精度和便捷性而备受青睐。
在本文中，我们将深入探讨Countstar细胞计数仪的原理，帮助您更好地理解这一先进的设备。
2. Countstar细胞计数仪的基本原理Countstar细胞计数仪是一种基于数字图像分析技术的细胞计数设备，其基本原理是通过数字图像扫描样品，利用图像识别和分析技术对细胞进行自动识别和计数。
在使用过程中，用户只需将样品放置在仪器上，通过仪器内置的摄像头将细胞图像拍摄下来，然后通过计算机软件进行图像处理和分析，最终得到准确的细胞计数结果。
3. Countstar细胞计数仪的工作流程Countstar细胞计数仪的工作流程主要包括样品准备、图像拍摄、图像处理和计数结果输出四个步骤。
用户需要将细胞样品放置在特制的培养皿中，然后将培养皿放置在仪器上。
接下来，通过仪器内置的高清摄像头对样品进行图像拍摄，然后将图像传输到计算机上进行图像处理和分析。
计算机软件将自动识别和计数细胞，并输出准确的计数结果。
4. Countstar细胞计数仪的优势Countstar细胞计数仪相较于传统的显微镜计数方法，具有操作简便、精度高、效率高等显著优势。
Countstar细胞计数仪采用数字图像分析技术，可以大大提高细胞计数的准确性和稳定性。
Countstar细胞计数仪还具有自动化的特点，能够快速实现大批量样品的计数，大大提高了工作效率。
Countstar细胞计数仪操作简单，用户无需专业的培训即可快速上手，极大地降低了使用门槛。
5. 我的个人观点和理解对于Countstar细胞计数仪，我个人认为其数字图像分析技术的应用极大地提高了细胞计数的准确性和稳定性，这对于细胞实验和药物筛选等工作具有非常重要的意义。
细胞计数仪说明书
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快速参考卡 (QRC)
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登录我们的网站/countess，获取完整的使用说明书。 有关 Countess™ 自动细胞计数仪的技术规格及描述信息，请参见第 vii 页。
收到仪器后应立即
仔细检查仪器，是否在运输过程中发生损坏。确定仪器的所有部件 (包括上表列出的附 件) 是否配备齐全。必须与承运商签署损坏索赔条款。保证书不包括运输过程中造成的 损坏。
用在本仪器上表示警告。请查阅手册，以避免可能出现的人身伤害或造成仪器损坏。
保护安全接地
WEEE (报废电子电气设备指令) 标志表示本产品不得作为未分类的市政废物处理。请遵 循当地市政废物条例中的处理规定，减少 WEEE 对环境的危害。登录 /weee，了解收集和回收方案。
仪器规格
仪器类型：
台式细胞计数仪
处理时间： 细胞样本范围：
< 1 分钟 1 × 104–1 × 107
软件：
Countess™ 软件 /countess
仪器尺寸：
27 cm (w) × 20 cm (d) × 19 cm (h)
重量：
2.1 kg (4.6 lbs)
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产品规格
Countess™ 自动细胞计数仪规格
环境条件 负载功率 频率 电输入 安装位置： 工作温度： 最大相对湿度： 海拔高度： 暂时类别： 污染等级： 防护等级：
100–240 VAC，1.5 A 50/60 Hz 12 VDC，1.0 A 仅限室内使用 10–35°C 20–80% ≤2,000 m 安装类别 II 2 IPX0
vii
Countess™ 自动细胞计数仪的描述
Countess™ 自动细胞计数仪的正
视图
Countess™ 自动细胞计数仪是一款台式自动细胞计数仪，它采用台盼蓝染色进行细胞 计数或存活率检测。 正视图显示了 Countess™ 自动细胞计数仪的各种部件，如下图所示。
countess3细胞计数仪工作原理
countess3细胞计数仪工作原理哇塞！今天咱们来聊聊这个Countess3 细胞计数仪的工作原理！这可真是个超厉害的玩意儿啊！首先呢，咱们得搞清楚啥是细胞计数仪？简单来说，它就是能帮咱们快速又准确地数清楚细胞数量的神器！那Countess3 细胞计数仪到底是咋做到的呢？第一，它有个特别厉害的光学系统！就像咱们的眼睛一样，能看得清清楚楚。
这个光学系统能发出特定波长的光，照射到细胞样本上。
然后呢，细胞会对这些光产生反应，散射或者吸收。
这就好比在黑暗中点亮了一盏灯，细胞在光的照射下就“现形”啦！第二，图像采集和分析可不能少！Countess3 细胞计数仪会把细胞的样子拍成照片，就像咱们用手机拍照一样。
然后呢，它会用超级聪明的算法来分析这些照片。
比如说，它能分辨出单个的细胞，不会把几个挤在一起的细胞当成一个。
这是不是很神奇？第三，还有个重要的环节就是样本制备啦！咱们得把细胞样本处理好，让计数仪能更好地工作。
比如说，要保证细胞均匀分布，不能有的地方多，有的地方少。
这就像咱们做蛋糕，材料得搅拌均匀，不然做出来的蛋糕就不好吃啦！第四，数据处理和结果展示也很关键哟！Countess3 细胞计数仪算完细胞数量后，会把结果清晰地展示给咱们。
可能是数字，可能是图表，让咱们一下子就能明白细胞的情况。
哎呀，你说这Countess3 细胞计数仪咋就这么聪明呢？它能在那么短的时间里，把细胞数量算得明明白白的！这可给科学家们省了多少事儿啊！比如说在医学研究中，医生们要研究细胞的变化，就得知道细胞数量。
要是靠人工一个一个数，那得数到啥时候啊？有了Countess3 细胞计数仪，一下子就搞定啦！在生物制药领域，它也大有用处呢！要保证药品的质量，就得严格控制细胞的数量和状态。
Countess3 细胞计数仪就能准确地给出数据，让制药过程更可靠！还有在细胞培养实验里，咱们得时刻关注细胞的生长情况。
Countess3 细胞计数仪就能及时告诉咱们细胞是多了还是少了，是不是很厉害？不过，使用Countess3 细胞计数仪也有一些要注意的地方呢！比如说，样本的质量得保证好，不能有杂质干扰。
Countstar Rigel全自动细胞荧光分析仪对PBMC细胞精确计数及活力分析
Countstar® Rigel全自动细胞荧光分析仪对PBMC细胞精确计数及活力分析一、PBMC细胞浓度与活力分析的重要性外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC) 即外周血中具有单个核的细胞，主要包括淋巴细胞、单核细胞、吞噬细胞、树突状细胞和其他少量细胞类型，是机体免疫应答功能的重要细胞组成。
PBMC 是免疫学、抗体药物研发、传染病、恶性血液肿瘤疾病、干细胞移植、疫苗开发以及移植免疫等领域学者经常需要的研究原材料。
PBMC的浓度、活力、免疫细胞亚型分布及细胞因子等都是监测机体免疫状态及其他领域研究的重要指标。
所以如何精确计数PBMC细胞在科研和临床上都有重要的意义。
二、目前PBMC细胞分离、计数的方法与痛点1、根据外周血各种血细胞的密度不相同，PBMC细胞分离方法主要密度梯度离心法，然后根据实际情况添加红细胞裂解液除去部分残留红细胞。
2、由于个体及分离效果差异，导致分离后的PBMC样本中红细胞和血小板的残留程度不同。
用血球计数板在显微镜下计数是最常见的一种计数方法，由于显微镜下观察红细胞与PBMC细胞大小差异不大，肉眼很难辨别，经验丰富的操作者需通过不停调节焦距观察红细胞的双凹状的形态来区分。
这个过程无疑造成了非常大的工作量及误差。
3、目前常用的计数方法包括血球计数板台盼蓝染色计数法、库尔特法及荧光细胞计数法。
其中台盼蓝染色法与库尔特法均无法很好的区分红细胞与白细胞。
三、Countstar® Rigel细胞荧光分析仪对PBMC细胞精确计数及活力分析原理：利用AO/PI双荧光染色法进行PBMC死活细胞精确计数。
吖啶橙（Acridine orange,AO）和碘化丙啶（propidiumiodide,PI）都可以对死、活细胞核中的DNA进行染色。
所以该方法可以排除无核的细胞碎片、成熟的血小板及红细胞干扰，从而更准确计数PBMC细胞。
Countess
Countess™ II FL自动细胞计数仪货号：AMQAF1000出版号：MAN0014631 版本：A.0注：有关安全性和生物危害指南，请参阅《Countess™ II FL自动细胞计数仪用户指南》(出版号：MAN0010644) 中的“安全性”附录。
请阅读安全数据表(SDS)，并遵循操作说明。
应穿戴合适的保护眼镜、防护服和手套。
操作流程如需了解更详细的使用说明、维护信息和疑难解析，请参考仪器附带的U盘中的《Countess™ II FL自动细胞计数仪用户指南》或登录/countess下载。
明场细胞计数制备样本并上样1. 将10μL细胞悬液加至10 μL 0.4%的台盼蓝染料中。
充分混匀。
2. 计数板每个计数池中加入10 μL样本混合物。
使样本混合物静置30秒。
注：Countess™ II FL自动细胞计数仪采用可更换的载玻片特定的载物台，能够容纳一次性Countess™ 细胞计数板和玻璃的Countess™ II FL可重复使用的载玻片。
插入计数板1. 将计数板完全插入计数板接口，直到听到轻轻的咔嗒声。
仪器将自动聚焦并设置明场照明强度。
注：在新仪器中，第一次使用时需要使用焦距(Focus) 按钮手动设置焦距。
随后可使用自动聚焦特性准确聚焦。
正确的焦距不正确的焦距Countess™ 细胞计数板(一次性)Countess™ FL可重复使用的载玻片制备样本并上样插入计数板细胞计数设置结果门限(如果需要)保存结果1. 在采集界面中，选择采集(Capture)。
仪器采集图像并显示结果(总浓度、活细胞和死细胞的百分比和浓度)。
注：如果仪器配备有EVOS™ 光立方，请确保在采集通道下只选定了BF (明场) 复选框，然后再采集图像。
切记！在明场下进行细胞计数和细胞存活率分析时，结果界面上显示的细胞浓度是加入台盼蓝稀释前的初始细胞浓度。
2. 要查看根据细胞大小显示活细胞和/或死细胞分布的直方图，按下图片(Graph) 按钮。
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大小或监测细胞培养过程中细胞大小的变化。
转染前
转染后
CHO细胞转染质粒后细胞大小显著变大，右 图是细胞大小柱状图比较
CTC曲线的绘制及叠加分析
Countstar细胞计数仪可以自动生成细胞倍增曲线并可以对统计图进行 叠加分析方便进行细胞的倍增速率比较或进行细胞优化选种。 细胞倍增曲线的分析 不同细胞间细胞倍增曲线的比较
Countstar细胞计数仪可以通
B16细胞计数，绿色圈计数为活细胞，黄色圈计数为死细胞
结团细胞校正功能
Countstar细胞计数仪可以对结团细胞进行准确区分和精确计数。
分别采用普通细胞模式及结团模式计数293细胞，绿色圈计数为 活细胞，黄色圈计数为死细胞，红色圈统计为一个细胞团块
10µl
20s 总细胞浓度、活细胞浓度， 死细胞浓度，细胞数量、细 胞活率、细胞平均直径，细 胞平均圆度，细胞结团率， 细胞直径分布图、细胞结团 分布图、细胞增殖曲线、细 胞增殖曲线叠加分析，细胞 直径分布图叠加分析 5 台盼蓝 2592 x 1944(500万像素） 自动定焦 可精确校正 PDF、EXCEL及JPG格式
统保证数据结果的准确性。
全面的参数分析：从浓度、活率、直、园度、团聚指标全方位考察细胞 变化，自动生成细胞生长曲线和统计图表。 数据储存和输出灵活：数据结果自动储存，并可通过JPEG、PDF和
EXCEL格式输出。
耗材成本经济节约：一片5槽的设计，提供实验结果的平行性及可重复性 检测，最大化节省实验成本。
◆ 测量时间：20s
◆ 光源：白色LED ◆ 输出格式：JPEG/PDF/EXCEL ◆ 数据传输：USB2.0 ◆ 单片测量样本数：5个
不同细胞计数仪对比表
名称 Countstar Automated Cell Counter 上海睿钰生物科技公司(美国 研发，国内组装) 1x104-3x107/ml 5-180µm Cedex XS Vi-CELL XR TC10 Automated Cell Counter Countess Cell Counter
Countstar细胞计数仪 与人工计数对比
Countstar细胞计数仪与血球计数板计数细胞活率结果一致，两种方法 计数结果差异无统计学意义(Y=1.0072x;R2=0.9937)
Countstar细胞计数仪 与人工计数对比
Countstar细胞计数仪与血球计数板分别对CHO、MCF-7、HepG2、 MDCK、Vero细胞计数细胞浓度，两种方法计数结果一致，Countstar 细胞计数仪计数结果更准确，重复性测量标准偏差更小。误差线代表 精度
2 台盼蓝 130万像素 自动定焦 不能校正 单一文本及图片格式
2 台盼蓝 310万像素 需人工调焦 不能校正 PDF格式
Countstar细胞计数仪优点
快速自动化检测：20ul样本，20s内完成单个样本检测，自动检测有无台
盼蓝染液并对死活细胞进行识别。
宽广的适用范围：5-180um大小的各种哺育动物细胞、昆虫细胞、肿瘤 细胞及部分浮游动物都均可适用。 准确清晰的结果：500万专业级彩色成像、大范围样本采集、固化焦距系
不同模式计数比较
普通细胞计数模式
结团细胞计数模式
细胞碎片去除和背景杂质过滤
Countstar细胞计数仪可以有效区分细胞碎片及背景杂质，如下图所示，
细胞计数结果中细胞碎片和背景杂质被自动去除。
Cell Debris
Impurities
绿色圈所示为有效计数细胞，细胞碎片和背景杂 质会自动去除
细胞大小柱状图
Countstar细胞计数仪 与人工计数对比
Countstar细胞计数仪与血球计数板分别对细胞浓度和活率进行计数比
较，两种方法计数结果保持高度的线性一致性。针对不同细胞浓度进
行计数比较， Countstar细胞计数仪结果更准确，重复性检测标准偏 差更小。
Countstar细胞计数仪与血球计数板计数细胞浓度结果一致，两种方法 计数结果差异无统计学意义(Y=1.0533x; R2=0.9967)
细胞计数板
• 计数板专利设计，确保样本分布均匀，保证数据准确性。
• 每个样本可进行多个视野检测，系统自动统计出平均结果，
减少样本分布性引起的误差，确保实验结果的平行性及可重复性。 • 每个细胞计数板可检测5个样本，节约实验耗材成本。
检测结果
• 细胞图片 • 总细胞浓度 • 活细胞浓度 • 死细胞浓度
10µl
30s 活细胞和死细胞浓度， 总细胞浓度，细胞存活 率，细胞的平均大小， 细胞图像
10µl
30s 活细胞和死细胞浓度， 总细胞浓度，细胞存 活率，细胞的平均大 小，细胞图像
通量 染料 CCD分辨率 调焦技术 细胞结团校正 结果输出格式
8 台盼蓝 2592 x 1944(500万像 素） 自动定焦 粗略校正 单一文本格式
专业级自动优化成像系统
• 专业级500万高像素光学成像。 • 大拍摄面积，多视野成像，高统计抽样量。
• 自动优化成像系统，无需人工调焦，摒除人工调焦的误差 。
• 实时显示细胞图像，自动过滤图像背景。 • 精确标定死活细胞和校正结团细胞。 • 全程电脑控制，配备硬件密钥，完美进行操作监控及数据分析。
• 细胞存活率
• 细胞平均直径 • 细胞增长曲线 • 细胞大小柱状图
• 细胞平均圆度
• 细胞结团率 • 细胞结团柱状图
细胞总浓度的检测
无台盼蓝染色时，Countstar细胞计数仪可以准确检测细胞浓度、细 胞平均直径、细胞平均圆度和细胞聚团率。
CHO细胞计数，绿色圈所示为有效计数细胞
细胞存活率的检测
自动细胞计数仪
自动细胞计数仪简介
• 基于经典台盼蓝染色法原理开发。
• 采用最新的光学成像技术和智能图像识别技术。 • 能快速准确进行细胞计数、细胞形态和细胞统计图分析。
快速准确的自动化检测
• 样本需求量低，快速：20µl/样本，<20s/样本。 • 自动光学对焦、成像并进行数据分析。 • 操作简单，三步完成。
样本混匀，加样
插入计数板
自动计数结果
宽广的样品检测范围
• 测量浓度范围：1×104~3×107/ml。 • 直径范围：5-180µm大小的各种原代细胞及传代细胞、干细胞、肿瘤 细胞、血细胞、昆虫细胞、藻类及部分浮游动物。
CHO
MCF7
4T1
Human lymphocyte
MSC
HepG2
微囊藻
隐甲藻
进行相关操作，确保数据的安全性和客观性。
数据输出功能
Countstar细胞计数仪检测结果可以通过JPEG/PDF/EXCEL多格式数
据输出，确保数据的客观真实性，并可以进行后期数据分析和处理。
系统参数
◆ 细胞浓度：1×104－3×107/ml
◆ 细胞直径：5－180μm ◆ 细胞活率范围：0-100% ◆ 样本体积：20μl
制造商 细胞浓度 细胞直径
Roche 1x104-1x107/ml 5-180µm
Beckman Coulter 5×104-1×107/ml 2-70µm
Bio-Rad 5x104 -1x107/ml 6-50µm
Invitrogen 1×104-1×107/ml 5-60µm
样品体积
分析时间 分析参数
5µl
20s 细胞浓度、细胞数量、 细胞活率、细胞直径分 布、细胞圆度分析、细 胞结团分析、细胞增殖 曲线、细胞活力动态变 化曲线、细胞浓度动态 变化曲线
500µl
2.5min 细胞存活率、总细胞数、 存活细胞数、总细胞浓度、 存活细胞浓度、细胞的直 径及分布、细胞的平均直 径、细胞圆度及分布、细 胞平均圆度、细胞的生长 速度、细胞倍增时间、细 胞生长曲线 12 台盼蓝 1394×1040 自动定焦 粗略校正 EXCEL及图片格式
参数设置与验证
Countstar细胞计数仪预设了适合大多数细胞和颗粒的初始参数，同时
预留多个参数接口方便用户针对不同情况进行参数优化调试与设置，
并辅之有人工修正功能，确保数据结果的准确性。
用户管理设置
Countstar细胞计数仪具有卓越的数据安全保护功能，从硬件和软件全
方位保护实验数据库，自动保存所有检测结果并可根据不同登录权限