Countstar 细胞计数仪操作手册

Countstar细胞计数仪操作手册
计数仪的标准操作程序和细胞计数和活率检测标准操作程序
一、启动Cedex XS 系统
1. 打开计数仪：按下计数仪上的ON/OFF按钮，按钮亮起蓝色光表示仪器已打开；
2. 打开Cedex XS 控制软件：
①打开配套电脑，进入Windows操作系统；
②双击桌面上的Cedex XS 图标，进入Cedex XS 控制中心；
3. 调节白平衡：首次安装Cedex XS系统或移动系统后必须调节白平衡。

①把样品板支架拉出；
②点击Cedex XS 控制中心中的HWM键，打开硬件管理对话框；
③点击WHITE BALANCE键进行调节，结果将自动保存；
④调节完毕后关闭对话框。

二、细胞计数与活性测定
1. 样品制备
①用培养基或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml；
②使用0.2%台盼蓝染色（一般为10μl、1：1）：台盼蓝对血清蛋白亲和力更强，若大量血清蛋白导致图像背景过暗，可以将样品离心，用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数；
③将细胞悬液充分混匀；
④用移液枪取细胞悬液加入样品板，每槽10μl；可以一次测定八槽，也可测定单槽。

2. 进样：样品板有八个槽，一次可测定四个样品槽。

①拉出样品板支架；
②加有样品方向朝里，将样品板放上支架；
③将支架推入计数仪，有少许卡扣感表示已就位：样品槽位置指示灯表示样品测定进程。

三、软件设置：
1. 打开测定界面：在Cedex XS 控制中心点击MEASURE键，进入测定界面；
2. 设置样品参数：
①在样品参数栏输入样品名（Reactor ID），可在下拉栏选择或手动输入，最多可输入21个字符；
②输入样品编号（Sample ID），最多21个字符；若样品名已存在，软件将自动延续样品编号，也可手动重新输入编号；
③软件将自动记录日期和时间，表明样品测定的实际时间；
④点击MI×键，出现进样体积对话框；
⑤输入参数：样品量（Sample V olume）、台盼蓝用量（Dye Volume）、稀释剂用量（Diluent V olume）；
⑥系统将自动计算稀释比例等，可以手动输入注释（Comments）。

3. 设置测定与分析参数：
①在分析参数栏选择需要的精度水平（Precision）：精度水平表示单次测定样品数，最多8个；
②选择细胞类型，默认的细胞类型有：标准大小细胞直径约12-14μm；可识别对象；小细胞直径约8μm；
③系统自动添加系统名和测定时间。

四、开始测定
①点击START MEASUREMENT键；
②测定多个样品时，在弹出对话框后将样品板支架推进一格，点击确定自动开始测定程序；
③重复上一步骤测定其他样品；
④若测定样品多于四个，可将支架抽出后样品板调转方向重新插入进行上述测定程序；
⑤全部测定结束后关闭对话框。

五、计数结果
1. 在测定界面获得结果
测定程序完成后，结果在测定界面的数据栏（Result Data）显示，数据栏有两个表格：第一个表格显示总细胞数，第二个表格显示单次测定中每个样品室的测定结果。

两个表中分别列出以下参数：
●Viable Cell Conc.: 活细胞浓度[×105/mL]
●Total Cell Conc.: 总细胞浓度[×105/mL]
●Viability (%): 细胞总数中活细胞的百分比
●Total Cell Count: 测定总细胞数
●Avg Compactness: 活细胞与理想状态细胞形状的平均变异程度（1表示细胞形状均一）●Avg Diameter: 测定活细胞平均直径[μm]
●Aggregate Rate (%):成团细胞占总细胞数的比值
●Dead Cell Conc.: 死细胞浓度[×105/mL]
●Viable Cell Count: 测定活细胞数
●Dead Cell Count: 测定死细胞数
●Total Object Count: 全部测定数
●Total Object Conc.: 总浓度[×105/mL]
●Avg Object Diameter: 测定总群体平均直径[μm]
●Avg Object Compactness: 所有测定群体与理想状态细胞形状的平均变异程度。

在单个样品结果表中，会有三项列在表头：
●Image No.: 图像编号
●Valid: 表示图像质量是否能够达到分析要求
●Excluded: 复选框以排除或包括该样品在总结果表中的显示
2. 在柱形图中看结果：此结果不包括已经由上述复选框选择排除的计数结果
①在测定界面点击HISTOGRAMS键，打开柱形图对话框；
②可选择以下项目：
●成团细胞柱形图
●细胞直径柱形图
●细胞形状均一度柱形图
●总群直径柱形图
六、查看图像
单副图像：在测定界面的右侧显示的是选定的单个样品测定结果所对应的图像；
多幅图像：在图像显示区点击VIEW IMAGES键出现图像列表，可显示单次测定的多个样品。

1. 在图像框查看图像
图像框提供放大图像，系统自动分析活细胞与死细胞，并用绿色圈和红色圈分别标出，还可以使用下列功能：
●双击图像可打开大图，调节对比、亮度和焦距；
●显示或隐藏细胞的圈标记；
●浏览前后样品的图像；
●按住左键圈定可将选定图像放大或自定义尺寸，右键点击图像进行保存或复制。

七、系统优化：调节白平衡
若图像亮度不均衡，则需调节白平衡，影响图像亮度的调节。

①把载物支架拉出；
②点击Cedex XS 控制中心中的HWM键，打开硬件管理对话框；
③点击WHITE BALANCE键进行调节，结果将自动保存；
④调节完毕后关闭对话框。

八、结果列表
1. 点击Cedex XS 控制中心中的LIST键，或在Measurements菜单中选择Measurement List，可选择以下功能：
●查找结果
●浏览总体的测定数据
●删除结果
●打印报告
●结果输出保存为文件
●开始新测定
●查看测定过程
●重新测定
2. 查找结果可以通过以下方式：选定后点击FIND键
●样品处理时间
●测定时间
●样品名
●样品编号
●系统名
●存档数据/全部数据
●数据组
●细胞类型
九、关机
顺序为：Cedex XS 控制中心（软件）→配套电脑→计数仪。