自动细胞计数仪选购指南

自动细胞计数仪选购指南(一)自动细胞计数仪选购指南——通用篇除非你像猴哥那般火眼金睛，否则，利用血球计数板来数细胞绝对是一件痛苦的事情。

浪费时间不说，关键是不准确，重复性也不好。

若是有多个样本，那真是让人发疯。

这时，自动细胞计数仪应运而生，带来了更高效更准确的细胞计数。

市场上有多个品牌的细胞计数仪，乍一看，好像都是经典三步曲：上样-插入-分析。

如何选择一台最理想的细胞计数仪，让你只选对的，不选贵的。

首先，想一想平时主要对哪些细胞计数，它们的大小在什么范围；其次，你需要什么样的细胞信息以及通量水平；你们实验室打算将多大一块地方奉献给细胞计数仪；最后，你打算花多少钱。

市场上大部分细胞计数仪都是基于染料，以台盼蓝为主，也有碘化丙啶（PI）。

正常的健康细胞能够排斥台盼蓝，而当细胞损伤或死亡时，台盼蓝可穿透变性的细胞膜，与DNA 结合，使其着色，从而区分出活细胞和死细胞。

有些细胞计数仪是基于电阻抗法，更简便，不需要使用台盼蓝染料，但也无法分辨活细胞与死细胞。

首先为你介绍两款热门的细胞计数仪。

之后，还将介绍一些便携式的细胞计数仪和高通量的仪器，囊括了市场上近期推出的大部分细胞计数仪。

我们将提供详细的参数对比和特性介绍，以便您在选购仪器时能够方便地参考。

TC10自动细胞计数仪（Bio-Rad）这款细胞计数仪是由Bio-Rad公司去年推出的。

它的计数流程很简单，就是“上样-插入-结果”。

首先将样品上样到计数玻片上，然后将玻片插入TC10细胞计数仪，计数自动开始，30秒内总细胞数和活细胞数就显示在屏幕上。

仪器对细胞浓度的要求为5 x 104 -1 x 107细胞/ml。

计数只需要10 µl悬浮或重悬的细胞，让珍贵样品得以保留。

玻片上有两个室，每次能对2个样品进行计数。

有些细胞计数仪通过单个焦点平面来评估细胞活力，这样得到的结论可能不太准确，而TC10细胞计数仪对多个平面的每个样品进行打分。

独特的自动对焦技术和图像分析算法在30秒内提供了准确且重复性高的细胞数量。

Bio-Rad的产品经理认为这对于评估细胞活性尤为重要，因为焦点的差异可能显著影响结果。

TC10系统所能接受的细胞大小是6-50 µm，适合哺乳动物细胞及一些更小的生物，如浮游生物和孢子等。

若你正在使用Bio-Rad 的Bio-Plex系统，那么还可以利用TC10对Bio-Plex的磁珠进行计数。

TC10能够提供下列结果：活细胞和死细胞浓度，总细胞浓度，细胞存活率，细胞的平均大小，细胞图像。

通过USB接口，研究人员能导出带注释的JPEG图像文件，用于进一步的分析，或下载计数的数据。

当然，结果也能够打印出来。

当然，光是一台仪器还不够，你还需要耗材和相关配件。

TC10的耗材有TC10计数玻片、TC10台盼蓝、TC10系统验证试剂盒，另外，你还可以选择TC10热敏打印机。

据Bio-Rad介绍，TC10计数玻片也是很独特的，无论用户的移液习惯如何，它都能让样品均匀分布，带来准确重复的结果。

这一点很重要，试想一下，如果有的地方没有样品，那么就会影响计数准确性。

Countess 自动细胞计数仪（Life Technologies）2008年，Life Technologies（当时还是Invitrogen）推出了这款细胞计数仪。

它的基本参数与TC10大致相同，也是利用台盼蓝染色和图像分析算法，在30秒内给出准确的细胞和活性计数。

每次的样本量也是2个，每次需要10 ul，只是可分辨的细胞大小略有不同，在5-60 um。

细胞浓度范围应在1×104-1×107细胞/ml，最好在1×105-4×106细胞/ml。

据Life Technologies介绍，Countess细胞计数仪的一个独特之处在于其gating功能，能够根据细胞大小分辨混合群体中的细胞。

在对某一混合群体计数后，用户随后可保存特定的参数组，以便未来计数。

此特征对于干细胞或原代细胞特别有用，让用户能够排除细胞碎片和滋养层细胞。

有时，细胞会成团，使得细胞数量被低估，或细胞大小被高估，Countess细胞计数仪能够准确分辨最多5-6个细胞的细胞团。

至于仪器的清洁和维护，也非常简单。

Countess计数仪已经预先校准过了。

如果你升级了仪器的固件，就需要校准。

另外，如果你换用另一个牌子的台盼蓝或台盼蓝浓度与以前不同，那也应该重新校准。

校准只需要2-3分钟即可。

除此之外，就没有必要校准了。

点评：这两款自动细胞计数仪在参数上不相伯仲，只有细胞大小方面的微小差异。

TC10的特别之处在于多平面对焦分析，而Countess则有gating功能。

现在唯一未知的就是价格了，用户可根据报价再做打算。

本参数表是根据厂家资料整理，仅供参考。

(二)自动细胞计数器选购指南——便携篇也许，你想要把细胞计数仪带到超净工作台里面去。

这时，便携式细胞计数器可能更合你心意。

这两款仪器都采用了电阻抗法细胞计数原理，无需台盼蓝染料。

Scepter手持式细胞计数器（默克密理博）默克密理博公司在去年3月推出了Scepter手持式细胞计数器，这也是目前市场上唯一一款手持式的自动细胞计数器。

一年后，Scepter升级到2.0版，性能进一步提升。

Scepter的外形看上去像一只移液器，但在顶部有一个显示屏，能指导用户进行细胞计数。

操作者只需轻轻一按，细胞就可被自动吸入计数，结果以图形的形式显示细胞的直径和体积，提供细胞密度和细胞群分布数据，为掌控细胞健康状况提供了便捷的量化手段，整个过程在40秒以内。

Scepter采用了电阻抗法细胞计数工作原理（又名库尔特原理），该核心技术借助精细的微电路设计得以集中体现在Sensor里。

将Sensor插进等渗电解质溶液稀释的细胞悬液中，Sensor内微电路中小孔管两侧的内外电极在接通电源后产生稳定电流，稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管向小孔管内侧流动，使小孔感应区内电阻增高，引起瞬间电压变化形成脉冲信号，脉冲振幅越高，细胞体积越大，脉冲数量越多，细胞数量越多，由此得出细胞数量和体积值，细胞直径从细胞体积推导而得。

所以Scepter可以监测细胞数量，细胞体积和直径大小。

当然，由于采用的是电阻抗法，通过小孔的任何颗粒都会被计数，这时，不论是活细胞、死细胞，还是细胞碎片，都会被计算在内。

你可以根据需要设置取值上下限，从而排除细胞碎片。

但是，活细胞和死细胞就没办法精确地区分，你只能根据曲线的变化来比较不同培养批次的细胞形态。

目前Scepter手持式细胞计数器可使用两种sensor：40 μm和60 μm。

如果你要计数的细胞比较小，可以选前者，反之选后者。

具体的参数详见下表。

这些sensor是一次性的，需要持续购进。

Moxi™ Z迷你细胞计数器（ORFLO）这款迷你的细胞计数仪是由美国ORFLO Technologies公司开发的。

虽然该公司名不见经传，但它也是上面那款仪器的开发商。

因此，这两款仪器在原理上大致相同，都是利用库尔特原理，不过，大小形状不同，使用耗材不同，软件也有所不同。

Moxi Z在计数时使用一种小巧的cassette，每个cassette能容纳2个样品。

独特的设计让样品从两端上样。

在cassette插入时，仪器的“智能技术”能自动检测，并检测此cassette是全新的还是用过的。

对于所有样品，均使用相同的cassette。

每次测量仅需8秒，仪器就能带来细胞大小、细胞数量等参数。

ORFLO还开发出一种专利的算法，能计算出活细胞/死细胞的比例（Moxi Viability Index），它与公认的染料法有着很好的相关性。

Moxi Z能够对直径2-34 μm的细胞进行计数，适用于哺乳动物细胞、血小板、酵母及其他。

由于检测下限为2 μm，也就避免了漏掉一些细胞的风险。

每次测量需要75 μl样品，其中细胞浓度范围在3,000-500,000个细胞/ml。

测量完之后，显示屏显示如下。

图中不仅包括了细胞数量和平均大小，还有完整的直方图，反映样品中细胞大小的分布。

通过直方图的比较，您可以轻松发现细胞培养间的细胞变化。

仪器本身可储存500个样品的数据。

此外，所有数据也可通过USB接口或蓝牙传输到电脑中。

Moxi Z在美国的目录价大约是3000美元，相对于Countess的7万多来说是便宜得多。

点评：就便携性而言，Scepter取胜，移液器般的设计，小巧轻便，但其劣势在于细胞浓度的下限较高，且不能分辨活细胞和死细胞。

Moxi Z适用的细胞浓度范围更广，也能提供活细胞/死细胞的比例。

然而，就仪器而言，售后也是相当重要的，我们还要考虑售后服务的便利性。

本参数表是根据厂家资料整理，仅供参考。

(三)自动细胞计数器选购指南——高通量篇对于一些专门从事细胞研究的大型实验室来说，高通量细胞计数仪也许更为实用。

而且，除了通量高之外，今天介绍的这几款仪器也能提供更多的分析参数，为您带来更全面的分析结果。

Cedex XS Anzlyzer（罗氏）1999年，Innovatis公司制造出全球第一台自动化细胞计数仪。

10年来，它一直致力于细胞计数、分析、细胞质量控制的相关技术研发和仪器生产，是国际著名的细胞计数分析仪生产厂商。

罗氏应用科学部于2009年成功收购Innovatis，将其众多特色产品收归旗下。

Cedex XS细胞计数分析仪是一款半自动化的细胞计数系统。

它采用手动的样品制备过程，大大降低系统的运行和维护成本。

同时体积小巧，节省实验室的空间。

Cedex XS所需的样品量极少，只需5ul 样品+5ul台盼蓝，比其它平台更能节省宝贵的样品。

这款细胞计数仪的检测范围非常大，达2-180um，覆盖了所有哺乳动物细胞、植物细胞、血细胞、酵母和藻类等。

这一点恐怕是其他仪器都望尘莫及的。

每个样本的检测时间为20秒，一次最多可检测8个样本。

此外，仪器采用2592 x 1944的高分辨率CCD，获取更高分辨率图像，确保了后续分析结果的高精确度。

除了可获得细胞浓度/数量/活力等基本信息外，它还可进行多种参数统计和分析，包括细胞直径分布、细胞圆度分析、细胞结团分析、细胞结团与细胞活力、细胞增值曲线、细胞活力动态变化曲线以及细胞浓度动态变化曲线等。

Cedex XS细胞计数仪还具有独特的Live operator 功能，可根据图像获取信息，随时调整图像分析参数设置，获取最佳分析结果，无需重复检测。

Cytorecon全自动细胞计数分析仪（GE Healthcare）通用电气（GE Healthcare）代理的这一款Cytorecon全自动细胞计数分析仪采用了高分辨率的CCD成像技术及自动软件分析功能，可以快速完成包括贴壁细胞、悬浮细胞、白细胞、培养细胞、酵母细胞等细胞样品的计数和浓度计算，结合台盼蓝染色技术，还可以快速完成细胞存活率的分析。