Countstar+细胞计数仪操作手册
体细胞计数仪安全操作及保养规程
体细胞计数仪安全操作及保养规程前言体细胞计数仪是目前常见的实验室仪器之一，用于精确计数细胞及其种子。
正确的操作方法和维护保养对于仪器的可靠性和长期稳定使用至关重要。
本文将介绍体细胞计数仪的安全操作规程及保养维护规程，以确保仪器的最佳性能和安全性。
安全注意事项在操作体细胞计数仪之前，必须注意以下事项：操作前准备•检查电源和仪器的电线是否完好无损，确保正常连接。
•确认仪器有足够的耗材，例如显微镜液、盖玻片、移液管、离心管等物品。
注意不要使用过期或已打开的耗材。
•阅读并理解仪器的使用说明书和相关实验操作流程，随时注意实验安全。
操作中的注意事项•使用手套或棉花条避免手指直接接触盖玻片。
千万不要将手指放入试液中。
•确保显微镜镜头干净，以避免影响细胞计数的准确性。
•在盖玻片和试液之间添加适量的显微镜液，并避免带大气泡和小气泡。
•不要触碰解决方案长时间的明显变质迹象。
操作后的注意事项•关闭仪器时，要先关闭电源，然后再进行其他操作。
•将仪器外部的污渍清除干净，并清理桌面、台面等周围区域的杂物。
•用干净的抹布轻轻擦拭显微镜镜头。
•收拾好仪器周围的所有物品。
保养维护规程•每次完成使用后，清理仪器的使用区域并清洁盖玻片和试液。
•时时验证稀释液的pH值和质量，及时更换。
•定期对仪器进行维护，检查电线和管路是否完好无损，如有破损必须及时更换。
•仪器内部容器一定要定期进行清理，保证不影响细胞计数质量。
•每个实验结束后，通过控制体细胞计数仪的稀释液能够达到基本平衡来检查体细胞计数仪的性能。
结论在正确的操作体细胞计数仪的同时，保养和维护是非常关键的，只有将这两者结合起来，才能更好的确保仪器的稳定性和精确性。
以上介绍的体细胞计数仪的安全操作规程及保养维护规程，是最基本的指导和建议，可以广泛应用于各实验室中。
Countstar细胞计数仪【快速操作指南】
Countstar细胞计数仪【快速操作指南】Countstar细胞计数仪【快速操作指南】章节一、介绍1.1 产品概述1.2 适用范围1.3 主要特点章节二、设备启动2.1 设备准备2.2 设备连接2.3 设备开机章节三、操作流程3.1 样本制备3.2 测量设置3.2.1 选择计数模式3.2.2 选择细胞类型3.2.3 设置计数参数3.3 测量操作3.3.1 放置载玻片3.3.2 吸取样本3.3.3 镜片清洁3.3.4 载玻片测量3.4 数据分析3.4.1 统计数据显示3.4.2 数据导出章节四、常见问题及解决方法4.1 设备故障4.2 计数不准确4.3 数据异常章节五、操作注意事项5.1 安全操作5.2 设备维护5.3 使用限制章节六、附件6.1 使用说明书6.2 软件6.3 技术支持联系方式法律名词及注释：1、细胞计数仪：一种科学仪器，用于快速准确地计数和分析细胞数量和特征的设备。
2、计数模式：根据需要选择的计数方式，如细胞计数、细胞大小、细胞形态等。
3、细胞类型：根据样本的种类，选择相应的细胞类型进行计数和分析。
4、计数参数：设定用于计数的相关参数，如计数孔的大小、样本的稀释倍数等。
5、载玻片：细胞样本用来放置的玻璃片，用于显微镜观察和计数。
本文档涉及附件：1、使用说明书：详细介绍Countstar细胞计数仪的操作步骤和注意事项。
2、软件：提供Countstar细胞计数仪的软件地质，方便用户升级和更新。
3、技术支持联系方式：提供Countstar细胞计数仪的售后服务方式和邮箱，用户在使用中遇到问题可联系技术支持人员。
Countstar 细胞计数仪介绍
10µl
30s 活细胞和死细胞浓度， 总细胞浓度，细胞存活 率，细胞的平均大小， 细胞图像
10µl
30s 活细胞和死细胞浓度， 总细胞浓度，细胞存 活率，细胞的平均大 小，细胞图像
通量 染料 CCD分辨率 调焦技术 细胞结团校正 结果输出格式
8 台盼蓝 2592 x 1944(500万像 素） 自动定焦 粗略校正 单一文本格式
样本混匀，加样
插入计数板
自动计数结果
宽广的样品检测范围
• 测量浓度范围：1×104~3×107/ml。 • 直径范围：5-180µm大小的各种原代细胞及传代细胞、干细胞、肿瘤 细胞、血细胞、昆虫细胞、藻类及部分浮游动物。
CHO
MCF7
4T1
Human lymphocyte
MSC
HepG2
微囊藻
隐甲藻
进行相关操作，确保数据的安全性和客观性。
数据输出功能
Countstar细胞计数仪检测结果可以通过JPEG/PDF/EXCEL多格式数
据输出，确保数据的客观真实性，并可以进行后期数据分析和处理。
系统参数
◆ 细胞浓度：1×104－3×107/ml
◆ 细胞直径：5－180μm ◆ 细胞活率范围：0-100% ◆ 样本体积：20μl
Countstar细胞计数仪 与人工计数对比
Countstar细胞计数仪与血球计数板计数细胞活率结果一致，两种方法 计数结果差异无统计学意义(Y=1.0072x;R2=0.9937)
Countstar细胞计数仪 与人工计数对比
Countstar细胞计数仪与血球计数板分别对CHO、MCF-7、HepG2、 MDCK、Vero细胞计数细胞浓度，两种方法计数结果一致，Countstar 细胞计数仪计数结果更准确，重复性测量标准偏差更小。误差线代表 精度
Countstar 细胞计数仪操作手册
Countstar细胞计数仪操作手册计数仪的标准操作程序和细胞计数和活率检测标准操作程序一、启动Cedex XS 系统1. 打开计数仪：按下计数仪上的ON/OFF按钮，按钮亮起蓝色光表示仪器已打开；2. 打开Cedex XS 控制软件：①打开配套电脑，进入Windows操作系统；②双击桌面上的Cedex XS 图标，进入Cedex XS 控制中心；3. 调节白平衡：首次安装Cedex XS系统或移动系统后必须调节白平衡。
①把样品板支架拉出；②点击Cedex XS 控制中心中的HWM键，打开硬件管理对话框；③点击WHITE BALANCE键进行调节，结果将自动保存；④调节完毕后关闭对话框。
二、细胞计数与活性测定1. 样品制备①用培养基或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml；②使用0.2%台盼蓝染色（一般为10μl、1：1）：台盼蓝对血清蛋白亲和力更强，若大量血清蛋白导致图像背景过暗，可以将样品离心，用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数；③将细胞悬液充分混匀；④用移液枪取细胞悬液加入样品板，每槽10μl；可以一次测定八槽，也可测定单槽。
2. 进样：样品板有八个槽，一次可测定四个样品槽。
①拉出样品板支架；②加有样品方向朝里，将样品板放上支架；③将支架推入计数仪，有少许卡扣感表示已就位：样品槽位置指示灯表示样品测定进程。
三、软件设置：1. 打开测定界面：在Cedex XS 控制中心点击MEASURE键，进入测定界面；2. 设置样品参数：①在样品参数栏输入样品名（Reactor ID），可在下拉栏选择或手动输入，最多可输入21个字符；②输入样品编号（Sample ID），最多21个字符；若样品名已存在，软件将自动延续样品编号，也可手动重新输入编号；③软件将自动记录日期和时间，表明样品测定的实际时间；④点击MI×键，出现进样体积对话框；⑤输入参数：样品量（Sample V olume）、台盼蓝用量（Dye Volume）、稀释剂用量（Diluent V olume）；⑥系统将自动计算稀释比例等，可以手动输入注释（Comments）。
细胞计数板的使用方法
细胞计数板的使用方法细胞计数板是用于测定细胞浓度的实验仪器。
以下是细胞计数板的使用方法：1. 准备工作：a. 清洁：使用酒精或其他清洁剂将细胞计数板上的任何污迹清洁干净。
b. 预热：将细胞计数板放置在实验室温度下，以使其适应环境温度。
2. 样品制备：a. 取适量的细胞悬液，将其转移到一个小离心管中。
b. 用转速适中的离心机离心样品，以使细胞沉淀在离心管底部。
c. 倒掉上清液，轻轻将细胞沉淀重悬于适量的培养基或缓冲液中。
d. 用显微镜检查细胞的存活率和均一性。
3. 细胞计数：a. 用移液器吸取一定量的细胞悬液，注入细胞计数板中的一个小方格。
b. 在显微镜下，使用10倍或20倍目镜观察方格中的细胞数量。
c. 统计每个小方格中的细胞数量，并根据计数板的标记进行计数。
d. 如果细胞数目过多，需要稀释细胞悬液并重新计数。
4. 计算细胞浓度：a. 根据使用的细胞计数板的面积和深度来计算每个小方格中的体积。
b. 计算每个小方格中细胞的平均数量。
c. 乘以细胞计数板的稀释倍数（如果有的话）来得出实际的细胞浓度。
d. 根据需求将细胞浓度转化为适当的浓度单位，如每毫升细胞数。
5. 清洁细胞计数板：a. 将细胞计数板浸泡在去离子水或清洗液中，以去除细胞残留物。
b. 用纸巾或棉花球轻轻擦拭细胞计数板表面，确保其干净。
注意事项：- 操作过程中要注意避免细胞样品和细胞计数板的污染。
- 选择合适的细胞计数板，确保其适用于所要测定的细胞类型和浓度范围。
- 在进行细胞计数之前，最好对细胞悬液进行稀释，以使细胞数量在每个小方格中分散均匀，方便计数。
- 重复计数可以提高准确性和可靠性。
细胞计数仪说明书
Countess™ 自动细胞计数仪配有一台相机 (2.3X 物镜及 310 万像素)。
Countess™ 细胞计数板规格 材料： 尺寸： 计数板深度： 计数板容积： Countess™ USB 驱动器：
聚甲基丙烯酸甲脂 (PMMA) 75 mm (w) × 25 mm (d) × 1.8 mm (h) 100 μm 10 μL 1 GB
vii
Countess™ 自动细胞计数仪的描述
Countess™ 自动细胞计数仪的正
视图
Countess™ 自动细胞计数仪是一款台式自动细胞计数仪，它采用台盼蓝染色进行细胞 计数或存活率检测。 正视图显示了 Countess™ 自动细胞计数仪的各种部件，如下图所示。
电源按钮
电源按钮用来开启和关闭仪器。红色状态灯表示仪器已关闭；绿色状态灯表示仪器已开 启。
简介...............................................................................................................................................1
产品概述.................................................................................................................................................1
附录...............................................................................................................................................25
18. Countstar Rigel S2细胞计数仪标准操作规程
Countstar Rigel S2细胞计数仪标准操作规程1、操作步骤1)开机：接通电源，并开启左侧底部电源按钮。
显示屏启动开关变成黄色后，长按触摸按键6-8秒，黄色指示灯变成蓝色，等待系统开机。
登陆界面输入用户名和密码，点击登陆（初始用户名：admin，初始密码：admin）。
2)准备：待测样品，Countstar计数板，移液器及枪头。
3)计数：吸取20ul样品匀速加入Countstar计数板中，在“类型”界面，点击所测实验类型图标，如“AOPI细胞活率”，将计数板插入进样口中，输入测量信息。
a)在信息输入界面选择计数槽位（自上而下为1-5），选中后槽位由蓝色变成黄色。
b)输入实验名称（允许为空）、样品ID（允许为空）、稀释比例和细胞类型。
c)点击“确认”，槽位变成绿色。
d)点击“开始”，开始计数。
4)计数完毕，样品板自动退出，屏幕上显示计数结果。
5)数据管理：以“AOPI 细胞活率”为例，点击结果界面左上角“返回”或直接点击导航栏“数据”并在实验类型下拉框中选择“AOPI 细胞活率”，均可进入“AOPI 细胞活率”的数据界面中，点击数据行第一列的圆形按钮选中记录，可进行如下操作：a)查看视野：查看样品ID 下各视野的结果。
b)详细结果：查看选中记录的详细结果，若选中多条记录，默认显示第一条记录。
c)参数调节：优化识别参数。
d)样本删除：删除选中的数据。
e)Excel 导出：插入USB 存储设备，可批量进行Excel 格式的数据导出。
f)PDF 导出：插入USB 存储设备，可批量进行PDF 格式的数据导出。
g)图片导出：插入USB 存储设备，可批量进行图片形式的数据导出。
h)计算器：可以根据当前的浓度计算加入多少体积稀释至目标浓度6)关机：点击导航栏关机按钮，弹出对话框，点击“关机”，等待触摸按钮变为黄色后，关闭左侧底部电源按钮，并关闭电源。
2、注意事项1)关机后请拔出样品板。
2)操作员需经过培训并在管理规范的实验室内才可以操作。
GMP文件 Countstar细胞计数仪操作规程
细胞计数仪操作规程1、Countstar细胞计数仪简介1.1 基于经典台盼蓝染色法原理开发。
1.2 采自动优化成像系统，无需人工调焦，摒除人工调焦的误差。
1.3 精确标定死活细胞和校正结团细胞，能快速进行细胞计数、细胞形态和细胞统计图分析。
1.4 样本需求量低，快速：20µl/样本，<20s/样本。
1.5 自动光学对焦、成像并进行数据分析，每个样本可进行多个视野检测，系统自动统计出平均结果。
1.6 测量浓度范围：1×104~3×107/ml。
1.7 直径范围：5-180µm大小的各种原代细胞及传代细胞、干细胞、肿瘤细胞、血细胞、昆虫细胞、藻类及部分浮游动物。
2、操作过程简介2.1 打开配套电脑，进入Windows操作系统；2.2 双击桌面上的Countstar图标，进入Countstar控制中心；2.3 打开计数仪：按下计数仪上的ON/OFF按钮，按钮亮表示仪器已打开；2.4 设定所测的细胞参数；2.5 取样。
当样品浓度过大时，用盐水或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml；2.6 染色。
使用0.2%台盼蓝染色（一般为10μl、1：1）：台盼蓝对血清蛋白亲和力更强，若大量血清蛋白导致图像背景过暗，可以将样品离心，用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数；将细胞悬液充分混匀；2.7 加样。
移液枪取细胞悬液加入样品板，每槽20μl；2.8 插入计数板；2.9 自动计数结果；2.10 根据测试结果可适当调整细胞参数以达到最佳测试结果；微调旋钮同一样本可进行多个视野检测，系统自动统计出平均结果。
3、检测结果包括2.1 细胞图片2.2 总细胞浓度2.3 活细胞浓度2.4 死细胞浓度2.5 细胞存活率2.6 细胞平均直径2.7 细胞增长曲线2.8 细胞大小柱状图2.9 细胞平均圆度2.10 细胞结团率2.11 细胞结团柱状图（具体操作参见说明书）4、细胞总浓度的检测4.1无台盼蓝染色时，Countstar细胞计数仪可以检测细胞浓度、细胞平均直径、细胞平均圆度和细胞聚团率（绿色圈所示为有效计数细胞）。
Coutstar简易规程及注意事项
Countstar 简易操作规程及注意事项
开机:
1.插入Countstar密码狗, 启动电脑主机.
2.运行Countstar软件,登录入主界面
3.启动Countstar计数仪电源
测量样品:
1.由主菜单进入Count Cells界面
2.准备样品, 注入样品测量槽中
3.根据样品特性, 稀释比及染色与否, 选择稀释比及Cell Type参数
4.按下Start键开始测量
关机:
1.测量完毕后, 关闭软件
2.关闭Countstar计数仪电源
注意事项:
1.样本检测必须在样品注入测量槽10分钟内完成.
2.细胞样本推荐使用工作浓度0.2%的Trypan Blue染色
3.如遇到原代培养的细胞, 建议用PBS或HANKS液清洗一遍后, 再用PBS或
HANKS液重悬检测.
4.建议将原代细胞调到5×105-1×107/ml范围测量，以减少原代组织细胞碎片
背景的干扰。
Countstar细胞计数仪【快速操作指南】
Countstar细胞计数仪【快速操作指南】Countstar细胞计数仪【快速操作指南】1.准备工作1.1 确保Countstar细胞计数仪已经正确连接电源，并且设备处于开启状态。
1.2 确保Countstar细胞计数仪已经连接到电脑，并且安装了相关的驱动程序和软件。
2.样品处理2.1 将待检测的细胞样品均匀悬浮在培养基中。
2.2 取出Countstar细胞计数仪的计数室盖子，并用70%酒精消毒。
3.开始计数3.1 打开Countstar细胞计数软件，并选择“New Experiment”。
3.2 在弹出的窗口中，选择合适的计数模式（如细胞计数、活细胞计数等）。
3.3 将计数室盖子上的样品滴到计数室的中心位置，然后轻轻盖上计数室盖子。
3.4 软件界面上的“Count”按钮，开始计数。
3.5 等待Countstar细胞计数仪完成计数，并在软件界面上显示结果。
4.计数结果解读4.1 在软件界面上，可以看到细胞总数、活细胞数、死细胞数等详细数据。
4.2 可以通过设置不同的参数，如细胞大小、形状等，对结果进行筛选和分析。
4.3 可以将计数结果保存为Excel或PDF文件，以便后续分析和报告。
5.清洁和保养5.1 计数室使用后，立即清洗和消毒，以防止交叉污染。
5.2 定期检查和清洁Countstar细胞计数仪的外壳、计数室盖子等部分。
5.3 注意保持Countstar细胞计数仪的干燥和整洁，避免灰尘和液体进入设备内部。
6.附件本文档涉及的附件：●Countstar细胞计数仪软件安装包●Countstar细胞计数仪驱动程序7.法律名词及注释●细胞计数：利用Countstar细胞计数仪快速准确地统计细胞数量的方法。
●活细胞计数：通过对活细胞的染色并利用Countstar细胞计数仪进行计数，得出活细胞数目的方法。
●培养基：提供细胞生长所需营养物质的液体或固体培养基质。
●70%酒精：一种常用的消毒剂，用于对Countstar细胞计数仪进行表面消毒。
countstar细胞计数仪原理
Countstar细胞计数仪原理解析1. 前言细胞计数在生物医学领域中起着至关重要的作用，因为它不仅可以帮助我们了解细胞数量的变化，还能帮助科研人员进行细胞实验和药物筛选。
而在细胞计数仪中，Countstar细胞计数仪以其高精度和便捷性而备受青睐。
在本文中，我们将深入探讨Countstar细胞计数仪的原理，帮助您更好地理解这一先进的设备。
2. Countstar细胞计数仪的基本原理Countstar细胞计数仪是一种基于数字图像分析技术的细胞计数设备，其基本原理是通过数字图像扫描样品，利用图像识别和分析技术对细胞进行自动识别和计数。
在使用过程中，用户只需将样品放置在仪器上，通过仪器内置的摄像头将细胞图像拍摄下来，然后通过计算机软件进行图像处理和分析，最终得到准确的细胞计数结果。
3. Countstar细胞计数仪的工作流程Countstar细胞计数仪的工作流程主要包括样品准备、图像拍摄、图像处理和计数结果输出四个步骤。
用户需要将细胞样品放置在特制的培养皿中，然后将培养皿放置在仪器上。
接下来，通过仪器内置的高清摄像头对样品进行图像拍摄，然后将图像传输到计算机上进行图像处理和分析。
计算机软件将自动识别和计数细胞，并输出准确的计数结果。
4. Countstar细胞计数仪的优势Countstar细胞计数仪相较于传统的显微镜计数方法，具有操作简便、精度高、效率高等显著优势。
Countstar细胞计数仪采用数字图像分析技术，可以大大提高细胞计数的准确性和稳定性。
Countstar细胞计数仪还具有自动化的特点，能够快速实现大批量样品的计数，大大提高了工作效率。
Countstar细胞计数仪操作简单，用户无需专业的培训即可快速上手，极大地降低了使用门槛。
5. 我的个人观点和理解对于Countstar细胞计数仪，我个人认为其数字图像分析技术的应用极大地提高了细胞计数的准确性和稳定性，这对于细胞实验和药物筛选等工作具有非常重要的意义。
细胞计数板使用方法
细胞计数板使用方法实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作：1. 将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算：细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104说明：公式中除以4，因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为：1.0mm（长）×1.0mm（宽）×0.1mm（高）=0.1mm3 而1ml=1000mm3（注意：镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液）细胞计数板的使用血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大格，中央的一大格作为计数用，称为计数区。
计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开），而每个大方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个大方格（大方格之间用双线分开），而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。
计数区边长为1mm，则计数区的面积为1mm2，每个小方格的面积为1/400mm2。
盖上盖玻片后，计数区的高度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为1/4000mm3。
使用细胞计数板计数时，先要测定每个小方格中微生物的数量，再换算成每毫升菌液（或每克样品）中微生物细胞的数量。
细胞计数板-使用方法1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍），以每小格的菌数可数为度。
Countess II 中文操作指南
Countess II操作指南1) 拆开Countess II 包装，设置演示设备a) 打开包装盒，取出附件包装盒，拆开Countess II 设备的包装b) 插上Countess II 插头，将USB驱动器插入仪器前方的USB端口内。
c) 打开仪器电源d) 仪器将显示“开始”(Start) 界面，指导用户插入计数板。
设备现在可进行计数。
2) 从包装纸中取出Countess计数板a) 保存包装纸，以供后面的细胞溶液 (若使用) 与台盼蓝活性染料稀释使用b) 混匀细胞/微珠——晃动并上下吹打(涡旋振荡)c) 吸取10 uL细胞样本至包装纸上d) 在包装纸上加入10 uL台盼蓝染料至细胞/微珠样本中(使用新吸头，确保台盼蓝染料不被污染)e) 上下吹打混匀5次f) 吸取样本，加入Countess计数板边缘的半月形上样口中。
g) 计数板现可直接使用。
3) 插入计数板a) 将计数板插入Countess仪器，首先插入样本侧——在弹簧压力下推动计数板，直到听到咔嗒声。
b) 仪器将自动聚焦——确认焦距是否正确：微珠和活细胞应呈规则的球形，中心亮，边缘暗。
下图是焦距正确和不正确的范例。
c) 调整“光源”(Light Source) 滑块 (屏幕右侧，“采集按钮”(Capture) 上方)，在背景光和单个细胞之间达到最佳对比度。
下图是焦距和光强度合适的范例——请注意“活”细胞应中间明亮，如下图所示。
4) 演示缩放和手动聚焦滑块 (位于显示界面的左侧)a) 缩放滑块提供了目标区域的详细视图。
用手指来回“平移”，选择显示区域，从而找到目标区域。
b) 焦距滑块调整焦平面，它与缩放功能结合使用，可以获得准确的焦距。
(参见聚焦说明，上文第3步和下图)5) 采集和查看结果a) 按下“采集”(Capture) 按钮采集数据——仪器将采集图像，分析图像视野中的颗粒 (细胞或微珠)。
b) 细胞计数需要大约10秒c) 请注意“活细胞”和“死细胞”群体以%和绝对数值显示。
Countstar+细胞计数仪操作手册
Countstar细胞计数仪操作手册计数仪的标准操作程序和细胞计数和活率检测标准操作程序一、启动Cedex XS 系统1. 打开计数仪:按下计数仪上的ON/OFF按钮,按钮亮起蓝色光表示仪器已打开;2. 打开Cedex XS 控制软件:①打开配套电脑,进入Windows操作系统;②双击桌面上的Cedex XS 图标,进入Cedex XS 控制中心;3. 调节白平衡:首次安装Cedex XS系统或移动系统后必须调节白平衡。
①把样品板支架拉出;②点击Cedex XS 控制中心中的HWM键,打开硬件管理对话框;③点击WHITE BALANCE键进行调节,结果将自动保存;④调节完毕后关闭对话框。
二、细胞计数与活性测定1. 样品制备①用培养基或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml;②使用0.2%台盼蓝染色(一般为10μl、1:1):台盼蓝对血清蛋白亲和力更强,若大量血清蛋白导致图像背景过暗,可以将样品离心,用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数;③将细胞悬液充分混匀;④用移液枪取细胞悬液加入样品板,每槽10μl;可以一次测定八槽,也可测定单槽。
2. 进样:样品板有八个槽,一次可测定四个样品槽。
①拉出样品板支架;②加有样品方向朝里,将样品板放上支架;③将支架推入计数仪,有少许卡扣感表示已就位:样品槽位置指示灯表示样品测定进程。
三、软件设置:1. 打开测定界面:在Cedex XS 控制中心点击MEASURE键,进入测定界面;2. 设置样品参数:①在样品参数栏输入样品名(Reactor ID),可在下拉栏选择或手动输入,最多可输入21个字符;②输入样品编号(Sample ID),最多21个字符;若样品名已存在,软件将自动延续样品编号,也可手动重新输入编号;③软件将自动记录日期和时间,表明样品测定的实际时间;④点击MI×键,出现进样体积对话框;⑤输入参数:样品量(Sample V olume)、台盼蓝用量(Dye Volume)、稀释剂用量(Diluent V olume);⑥系统将自动计算稀释比例等,可以手动输入注释(Comments)。
Countess II FL 自动细胞计数器用户教程说明书
APPLICATION NOTE Countess II FL Automated Cell CounterFluorescent apoptosis evaluation using the Countess II FL Automated Cell CounterProtocol—instrument setup1. Turn on the Countess II FL Automated Cell Counter and install the GFP and Cy5 EVOS Light cubes.2. Install the appropriate slide holder for either the disposable or reusable slide.3. Obtain a disposable or reusable Countess slide.Protocol—culture setup and counting1. Acquire a eukaryotic cell suspension, CellEventCaspase-3/7 Green Detection Reagent, and SYTOX Red Dead Cell Stain.2. Stain the cell sample according to the manual provided with the CellEvent Caspase 3/7 Green Detection Reagent.3. Stain the cell sample according to the manual provided with the SYTOX Red Dead Cell Stain.4. Apply 10 µL of the stained cell sample to the Countess slide.IntroductionThe ability to assess cell health in a cell population is a basic and critical evaluation parameter in many cell and molecular biology labs. To this end, knowing how many cells are dead or dying are key pieces of information. To answer such basic questions, the cells of interest can be stained with a viability dye, such as Invitrogen ™ Molecular Probes ™ SYTOX ™ Red Dead Cell Stain, as well as an apoptosis indicator that measures caspase activation, such as Invitrogen ™Molecular Probes ™ CellEvent ™ Caspase-3/7 Green Detection Reagent. This staining combination, used together with an Invitrogen ™ Countess ™ II FL Automated Cell Counter equipped with GFP and Cy ®5 EVOS ™ Light Cubes, allows a quick and simple method to obtain apoptosis data together with cell viability data.General methodsMaterials• Countess II FL Automated Cell Counter (Cat. No. AMQAF1000)• Invitrogen ™ Countess ™ Cell Counting ChamberSlides (Cat. No. C10228) or Invitrogen ™ Countess ™ II FL Reusable Slide (Cat. No. A25750)• EVOS Light Cubes, GFP (Cat. No. AMEP4651) and Cy5 (Cat. No. AMEP4656)• CellEvent Caspase-3/7 Green Detection Reagent (Cat. No. C10423)• SYTOX Red Dead Cell Stain (Cat. No. S34859)5. Insert the Countess slide into the Countess II FL Automated Cell Counter sample port to initiate autofocus.6. Adjust fluorescence light intensities to minimize background while maximizing signal.7. Press Capture.Apoptosis assessmentThe CellEvent Caspase-3/7 Green DetectionReagent (Ex/Em: 502/530 nm when bound to DNA) is intrinsically nonfluorescent, as the DEVD peptide inhibits the ability of the dye to bind to DNA. However, after activation of caspase-3/7 in apoptotic cells, the DEVD peptide is cleaved, enabling the dye to bind to DNA and produce a bright, fluorogenic response. The fluorescence emission of the dye when bound to DNA can be observed using a standard “FITC” or GFP filter set.To use CellEvent Caspase 3/7 Green DetectionReagent, simply add substrate to control and treated cells, incubate 30 minutes, and visualize. Apoptotic cells with activated caspase-3/7 will have bright green nuclei, while cells without activated caspase 3/7 will have minimal fluorescence signal.SYTOX dead cell stains do not cross intact cellmembranes, and they exhibit increased fluorescence upon dsDNA binding, making them some of ourbrightest dead cell stains. SYTOX dead cell stains can be applied to cells and visualized without an additional wash step because they are nonfluorescent inaqueous media. These stains are available in multiple single-color formats, making them compatible with many filter sets.After brief incubation with SYTOX Red Dead Cell Stain, the nucleic acids of dead cells fluoresce bright red when excited and detected with traditional Cy5 filter sets. SYTOX Red Dead Cell Stain is distinct from dead cell probes such as 7-AAD and propidium iodide (PI) that are excited using 488 nm light. Moreover, the emission of SYTOX Red Dead Cell Stain is limited to one channel, thus minimizing spectral overlap with CellEvent Caspase 3/7 Green Detection Reagent and simplifying workflow.What used to take more than an hour on traditional microscopes or cytometers—simply acquiring preliminary results—now takes only a few minutes with the Countess II FL Automated Cell Counter. You can save time and effort by checking your sample before using a microscope or flow cytometer.Find out more at thermofi/countessFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. © 2015 Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved. All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific and its subsidiaries unless otherwise specified. Cy is a trademark of GE Healthcare. CO210384 0615Figure 1. Apoptotic and dead cells counted on a Countess II FLAutomated Cell Counter. A Countess II FL Automated Cell Counter was loaded with EVOS Light Cubes for GFP (Cat. No. AMEP4651) and Cy5 (Cat. No. AMEP4656). After incubation with 0.5 µm staurosporine, HeLa cells were labeled with 1:400 CellEvent Caspase-3/7 Green Detection Reagent (Cat. No. C10423) to identify apoptotic cells, and then stained with 1:1,000 SYTOX Red Dead Cell Stain (Cat. No. S34859) to denote all dead cells and incubated at room temperature for 30 minutes.Figure 2. Apoptosis of HeLa cells measured on a Countess II FL Automated Cell Counter using CellEvent Caspase-3/7 GreenDetection Reagent and SYTOX Red Dead Cell Stain. The indicated amounts of staurosporine were applied to HeLa cells to trigger apoptosis. Increases in green and far-red signal were noted with increased drug treatment, indicating significant increases in apoptosis and cell death,respectively.P e r c e n tConditionStaurosporineStaurosporineApoptotic DeadApoptotic and dead。
细胞计数仪说明书
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快速参考卡 (QRC)
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登录我们的网站/countess，获取完整的使用说明书。 有关 Countess™ 自动细胞计数仪的技术规格及描述信息，请参见第 vii 页。
收到仪器后应立即
仔细检查仪器，是否在运输过程中发生损坏。确定仪器的所有部件 (包括上表列出的附 件) 是否配备齐全。必须与承运商签署损坏索赔条款。保证书不包括运输过程中造成的 损坏。
用在本仪器上表示警告。请查阅手册，以避免可能出现的人身伤害或造成仪器损坏。
保护安全接地
WEEE (报废电子电气设备指令) 标志表示本产品不得作为未分类的市政废物处理。请遵 循当地市政废物条例中的处理规定，减少 WEEE 对环境的危害。登录 /weee，了解收集和回收方案。
仪器规格
仪器类型：
台式细胞计数仪
处理时间： 细胞样本范围：
< 1 分钟 1 × 104–1 × 107
软件：
Countess™ 软件 /countess
仪器尺寸：
27 cm (w) × 20 cm (d) × 19 cm (h)
重量：
2.1 kg (4.6 lbs)
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产品规格
Countess™ 自动细胞计数仪规格
环境条件 负载功率 频率 电输入 安装位置： 工作温度： 最大相对湿度： 海拔高度： 暂时类别： 污染等级： 防护等级：
100–240 VAC，1.5 A 50/60 Hz 12 VDC，1.0 A 仅限室内使用 10–35°C 20–80% ≤2,000 m 安装类别 II 2 IPX0
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Countess™ 自动细胞计数仪的描述
Countess™ 自动细胞计数仪的正
视图
Countess™ 自动细胞计数仪是一款台式自动细胞计数仪，它采用台盼蓝染色进行细胞 计数或存活率检测。 正视图显示了 Countess™ 自动细胞计数仪的各种部件，如下图所示。
Countess II手册
计数无处不在但并非都能与COUNTESS® II FL自动细胞计数仪相媲美全新的Countess® II FL自动细胞计数仪是一款台式细胞分析平台，它采用最先进的光学元件和图像分析软件，快速评估悬浮细胞。
该仪器具有3通道灵活性-明场和两个可选的荧光通道-研究人员可以计数细胞、监测荧光蛋白表达并检测细胞活性。
•灵活-选择适合您的应用的荧光滤光片•超值-可重复使用的计数板供您选择，减少了耗材成本•精确-自动聚焦，可提高准确度，减少差异性•简单-易于使用的触摸屏界面“我会用准确、稳定和轻松来形容全新的Countess II® FL自动细胞计数仪。
”Ravi Pathak博士Baylor 医学院2Life Technologies | Countess® II FL自动细胞计数仪3Life Technologies | Countess ® II FL自动细胞计数仪细胞团块？采用Countess ® II FL 自动细胞计数仪可以轻松解决这个问题。
不论使用自动还是手动细胞计数方法，对含有细胞团块的样本进行准确的细胞计数都十分困难。
Countess II ® FL 自动细胞计数仪采用了先进的计数算法，可以明确划定细胞团块内的细胞轮廓，从而对细胞团块样本进行精准的细胞计数(图1)。
可重复使用的玻片或一次性玻片供您选择Countess ® II FL 自动细胞计数仪提供了可重复使用的细胞计数板，从而大大缩减了长期耗材成本。
对于喜欢使用方便的一次性玻片的研究人员而言，适用于之前的Countess ®自动细胞计数仪的玻片亦可用于Countess II ® FL 自动细胞计数仪 (图2)。
精准的计数Countess ®II FL 自动细胞计数仪采用了先进的自动聚焦和计数算法，可快速且准确地鉴别并计数细胞。
插入玻片后，Countess ® II FL 计数仪将自动聚焦细胞，避免了手动聚焦引起的用户差异 (图3)。
细胞计数仪 技术要求说明书
细胞计数仪技术要求目录1.法规和指南 (2)2.术语 (2)3.供应范围 (2)4.用户要求 (3)5.约束条件 (5)1.法规和指南整个系统或设备必须符合中国2010版GMP 的要求。
必须符合中国药典（2015版） 必须符合中国环境保护法规、必须符合压力容器和特种设备的中国国家制造标准。
必须符合美国FDA 的cGMP 要求 必须符合国家其他相关规范要求2.术语缩写 定义HMIHuman – Machine Interface 人-机界面URSUser Requirement Specification 用户需求标准IQInstallation Qualification 安装确认OQOperation Qualification 运行确认PQPerformance Qualification 性能确认3.供应范围4. 要求 4.1.技术要求序号 要求必需或期望工艺控制要求URS01 整机要求：外观要求美观大方、洁净光亮必须 URS02 供货范围：全自动细胞计数仪主机、样品杯、试剂包必须 URS03 所有设备的设计都应能减少颗粒释放到工作环境中而使其符合所在洁净环境要求，所有零部件的材质与处理工艺均不得有物品脱落、不得有对制品产生潜在污染的风险。
必须 URS04 检测原理：台盼蓝染色排斥法必须名称 数量 配套试剂验证颗粒细胞计数仪1YYURS05 检测方法：数字高清成像必须URS06 CCD像素：1280×1024，真彩色500万；具有“可移动的显微镜”设计，可以全面精确观察整个样本必须URS07 全自动化分析，自动取样、混合、染色、检测、清洗必须URS08 进样管路具有防止堵塞设计必须URS09 测试通量：同时放置20个样品必须URS10 测试需要样本体积≤0.3 ml，平均测量周期：<4 min/sample 必须URS11 细胞直径测量范围：1 µm−90 µm 必须URS12 细胞浓度测量范围：5x10^4−1x10^7/ml 必须URS13 分析参数包括活细胞数目，活细胞浓度，死细胞数目，死细胞浓度，总细胞数目，总细胞浓度，细胞存活率，细胞生长曲线，比生长速率，倍增时间，结细胞平均直径，细胞直径分布，细胞平均圆度，细胞圆度分布，还包括结团率，结团大小必须URS14 软件需具有扫描预览(Prescan)功能，可在低分辨率下对图像进行快速扫描；实时测量比生长速率(µ) 和倍增时间(T)；实时测量比生长速率(µ) 和倍增时间(T)；细胞类型管理；多视角数据显示等必须URS15 数据输出：多种格式输出，如XML, EXCEL 必须URS16 数据过滤：可根据日期、使用者和样本ID进行检索。
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Countstar细胞计数仪操作手册
计数仪的标准操作程序和细胞计数和活率检测标准操作程序
一、启动Cedex XS 系统
1. 打开计数仪:按下计数仪上的ON/OFF按钮,按钮亮起蓝色光表示仪器已打开;
2. 打开Cedex XS 控制软件:
①打开配套电脑,进入Windows操作系统;
②双击桌面上的Cedex XS 图标,进入Cedex XS 控制中心;
3. 调节白平衡:首次安装Cedex XS系统或移动系统后必须调节白平衡。
①把样品板支架拉出;
②点击Cedex XS 控制中心中的HWM键,打开硬件管理对话框;
③点击WHITE BALANCE键进行调节,结果将自动保存;
④调节完毕后关闭对话框。
二、细胞计数与活性测定
1. 样品制备
①用培养基或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml;
②使用0.2%台盼蓝染色(一般为10μl、1:1):台盼蓝对血清蛋白亲和力更强,若大量血清蛋白导致图像背景过暗,可以将样品离心,用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数;
③将细胞悬液充分混匀;
④用移液枪取细胞悬液加入样品板,每槽10μl;可以一次测定八槽,也可测定单槽。
2. 进样:样品板有八个槽,一次可测定四个样品槽。
①拉出样品板支架;
②加有样品方向朝里,将样品板放上支架;
③将支架推入计数仪,有少许卡扣感表示已就位:样品槽位置指示灯表示样品测定进程。
三、软件设置:
1. 打开测定界面:在Cedex XS 控制中心点击MEASURE键,进入测定界面;
2. 设置样品参数:
①在样品参数栏输入样品名(Reactor ID),可在下拉栏选择或手动输入,最多可输入21个字符;
②输入样品编号(Sample ID),最多21个字符;若样品名已存在,软件将自动延续样品编号,也可手动重新输入编号;
③软件将自动记录日期和时间,表明样品测定的实际时间;
④点击MI×键,出现进样体积对话框;
⑤输入参数:样品量(Sample V olume)、台盼蓝用量(Dye Volume)、稀释剂用量(Diluent V olume);
⑥系统将自动计算稀释比例等,可以手动输入注释(Comments)。
3. 设置测定与分析参数:
①在分析参数栏选择需要的精度水平(Precision):精度水平表示单次测定样品数,最多8个;
②选择细胞类型,默认的细胞类型有:标准大小细胞直径约12-14μm;可识别对象;小细胞直径约8μm;
③系统自动添加系统名和测定时间。
四、开始测定
①点击START MEASUREMENT键;
②测定多个样品时,在弹出对话框后将样品板支架推进一格,点击确定自动开始测定程序;
③重复上一步骤测定其他样品;
④若测定样品多于四个,可将支架抽出后样品板调转方向重新插入进行上述测定程序;
⑤全部测定结束后关闭对话框。
五、计数结果
1. 在测定界面获得结果
测定程序完成后,结果在测定界面的数据栏(Result Data)显示,数据栏有两个表格:第一个表格显示总细胞数,第二个表格显示单次测定中每个样品室的测定结果。
两个表中分别列出以下参数:
●Viable Cell Conc.: 活细胞浓度[×105/mL]
●Total Cell Conc.: 总细胞浓度[×105/mL]
●Viability (%): 细胞总数中活细胞的百分比
●Total Cell Count: 测定总细胞数
●Avg Compactness:活细胞与理想状态细胞形状的平均变异程度(1表示细胞形状均一)●Avg Diameter: 测定活细胞平均直径[μm]
●Aggregate Rate (%):成团细胞占总细胞数的比值
●Dead Cell Conc.: 死细胞浓度[×105/mL]
●Viable Cell Count: 测定活细胞数
●Dead Cell Count: 测定死细胞数
●Total Object Count: 全部测定数
●Total Object Conc.: 总浓度[×105/mL]
●Av g Object Diameter: 测定总群体平均直径[μm]
●Avg Object Compactness: 所有测定群体与理想状态细胞形状的平均变异
程度。
在单个样品结果表中,会有三项列在表头:
●Image No.: 图像编号
●Valid: 表示图像质量是否能够达到分析要求
●Excluded: 复选框以排除或包括该样品在总结果表中的显示
2. 在柱形图中看结果:此结果不包括已经由上述复选框选择排除的计数结果
①在测定界面点击HISTOGRAMS键,打开柱形图对话框;
②可选择以下项目:
●成团细胞柱形图
●细胞直径柱形图
●细胞形状均一度柱形图
●总群直径柱形图
六、查看图像
单副图像:在测定界面的右侧显示的是选定的单个样品测定结果所对应的图像;
多幅图像:在图像显示区点击VIEW IMAGES键出现图像列表,可显示单次测定
的多个样品。
1. 在图像框查看图像
图像框提供放大图像,系统自动分析活细胞与死细胞,并用绿色圈和红色圈分别标出,还可以使用下列功能:
●双击图像可打开大图,调节对比、亮度和焦距;
●显示或隐藏细胞的圈标记;
●浏览前后样品的图像;
●按住左键圈定可将选定图像放大或自定义尺寸,右键点击图像进行保存或复制。
七、系统优化:调节白平衡
若图像亮度不均衡,则需调节白平衡,影响图像亮度的调节。
①把载物支架拉出;
②点击Cedex XS 控制中心中的HWM键,打开硬件管理对话框;
③点击WHITE BALANCE键进行调节,结果将自动保存;
④调节完毕后关闭对话框。
八、结果列表
1. 点击Cedex XS 控制中心中的LIST键,或在Measurements菜单中选择Measurement List,可选择以下功能:
●查找结果
●浏览总体的测定数据
●删除结果
●打印报告
●结果输出保存为文件
●开始新测定
●查看测定过程
●重新测定
2. 查找结果可以通过以下方式:选定后点击FIND键
●样品处理时间
●测定时间
●样品名
●样品编号
●系统名
●存档数据/全部数据
●数据组
●细胞类型
九、关机
顺序为:Cedex XS 控制中心(软件)→配套电脑→计数仪。