葡萄糖检验

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葡萄糖测定方法操作规程

葡萄糖测定方法操作规程

葡萄糖(GLu)测定方法操作规程【产品名称】通用名称:葡萄糖(GLu)测定试剂盒(葡萄糖氧化酶法)使用说明书【摘要】糖是人体的主要供能物质,也是组织细胞的主要成分。

血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定,当这些调节失去原有的相对平衡时,则出现高血糖或低血糖症状。

1.病理性高血糖:(1)原发性糖尿病(2)内分泌疾病:嗜铬细胞瘤、甲状腺毒瘤、肢端肥大症、巨人症、Cushing综合征、高血糖素细胞瘤;(3)胰腺疾病:急性或慢性胰腺炎、流行性腮腺炎引起的胰腺炎、胰腺囊性纤维化、血色病(血红蛋白沉着症)等;(4)抗胰岛素受体抗体与有关疾病:棘皮症、Wernicke’s脑病。

2.病理性低血糖:(1)胰岛细胞瘤、高血糖素缺乏;(2)对抗胰岛素的激素分泌不足,如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长激素、肾上腺皮质激素和甲状腺素分泌减少;(3)严重肝病患者,肝细胞糖原储存不足及糖原异生功能低下,肝脏不能有效地调节血糖。

【预期用途】该试剂盒采用葡萄糖氧化酶法,用于体外定量测定人血清或血浆中葡糖糖的含量。

【检验原理】葡糖糖被葡萄糖氧化酶氧化后生成过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下,与4-氨基安替比林和对羟基苯甲酸钠缩合,生成醌系色素,通过测定此反应的吸光度可求得葡糖糖的含量。

D-2葡萄糖氧化酶D-葡萄糖醛酮+H2O22 H2O2 + 4-APP ++ H3O+POD醌系色素+ 5H2O【主要组成成份】试剂1(R1):磷酸盐缓冲液100 mmol/L抗环血酸氧化酶4700 U/L葡糖糖氧化酶4000 U/L试剂2(R2):磷酸盐缓冲液100 mmol/L过氧化物酶6700U/L4-氨基安替比林0.7 mmol/L对羟基苯甲酸钠 1.3 mmol/L校准品:葡萄糖溶液。

*不同批号试剂盒各组分请勿混用。

【试剂准备】R1:即用液体试剂R2:即用液体试剂【储存条件与有效期】未开启的试剂盒避光保存于无腐蚀性气味和通风良好的室内,在2℃~8℃有效期为一年。

检验科生化葡萄糖测定的标准操作规程

检验科生化葡萄糖测定的标准操作规程

葡萄糖测定的标准操作规程【目的】体外检测血清中葡萄糖(GLU )的含量。

【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP ,室负责人监督落实。

2.本SOP 的改动,可由任一使用本SOP 的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:室负责人、科主任。

【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h ,不饮酒24h 后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况。

孕妇应在产后或终止哺乳3个月后检验。

此外,有无服用影响的药物以及采血的季节都应做相关记录。

2.静脉采血除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。

在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。

【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪,低速离心机一、检测原理本试剂所采用的反应式如下:+--+++-−−−→−+--+--−→−+H NADH PG NAD ADPATP PDH G HK 6666磷酸葡萄糖磷酸葡糖糖葡萄糖式中:ATP 为三磷酸腺苷;ADP 为二磷酸腺苷;HK 为己糖激酶;G-6-PDH 为葡萄糖-6-磷酸脱氢酶;6-PG 为6-磷酸葡萄糖酸上述反应中,NADH 的生成量与样本中葡萄糖的浓度成正比,通过在340nm 处测定吸光度的变化值,即可测得样本中葡萄糖的浓度。

二、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司HDL-C 试剂盒,为液体双试剂,各组分如下:试剂1(R1)三磷酸腺苷 0.75mmol/L葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 375U/LNAD 15mmol/L哌嗪-N,N ’-双(2-乙磺酸)缓冲液 50 mmol/L试剂2(R2)己糖激酶 60KU/L哌嗪-N,N ’-双(2-乙磺酸)缓冲液 50 mmol/L2.校准要求2.1校准品:使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清(货号:4490050/4590050)对测定进行校准。

葡萄糖检验操作规程

葡萄糖检验操作规程

目的:为检验葡萄糖辅料规定一个标准的程序,以便获得准确的实验数据。

范围:适用于葡萄糖的检验。

职责:检验员,检验室主任。

规程:1.性状:本品为无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末,无臭;味甜。

本品在水中易溶,在乙醇中微溶。

1.1 比旋度:精密称取本品约10g,置100ml量瓶中,加水适量与氨试液0.2ml溶解后用水稀释至刻度,摇匀,放置10分钟,在25℃时,按旋光度测定法(SOP-QC-310-00)测定。

比旋度应在+52.5°至+53.0°范围内为符合规定。

2.鉴别2.1 试剂与仪器2.1.1 碱性酒石酸铜试液 2.1.2 试管2.1.3 IR-470型红外光谱仪2.2 项目与步骤2.2.1 称取本品约0.2g,置试管中,加水5ml溶解后,缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中,即生成氧化亚铜的红色沉淀。

2.2.2 红外分光光度法:本品按红外光光度法测定法(SOP-QC-302-00)测定,本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致为符合规定。

3.检查3.1 试剂与仪器3.1.1 酚酞指示液 3.1.2 氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)3.1.3 1号浊度标准液 3.1.4 90% 乙醇3.1.5 标准氯化钠溶液 3.1.6 标准硫酸钾溶液3.1.7 碘试液 3.1.8 磺基水扬酸溶液(1→5)3.1.9 硝酸 3.1.10 硫氰酸铵溶液(30→100)3.1.11 标准铁溶液 3.1.12 醋酸盐缓冲液3.1.13 稀硫酸 3.1.14 溴化钾溴试液,盐酸3.1.15 烧杯 3.1.16 滴管3.1.17 回流管,三角烧杯瓶 3.1.18 比色管3.1.19 电炉 3.1.20 直热式电热恒温干燥箱3.1.21 坩埚 3.1.22 小型三用水箱3.2 项目与步骤3.2.1 酸度:称取本品2.0g,置烧杯中,加水20ml溶解后,加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)0.20ml,应显粉红色为符合规定。

葡萄糖一般杂质检查

葡萄糖一般杂质检查
包装和储存过程中引入的杂质:如包装材料不干净或储存环境不良,可能 导致葡萄糖中混入一些杂质。
储存过程中产生的杂质
氧化产物:葡 萄糖在储存过 程中容易被氧 化,产生具有 颜色的氧化产
物。
聚合产物:葡 萄糖在长时间 储存过程中可 能发生聚合反 应,生成高分
子物质。
分解产物:葡 萄糖在储存过 程中可能发生 分解反应,生 成具有特殊气
检验方法:采用高效液相色谱法、气相色谱法等方法进行杂质检查。检验方法的操 作步骤和注意事项应在检验规程中详细说明。
检验周期:企业应按照生产批次进行杂质检查,并确保每个批次都经过检查。同时, 应定期对库存产品进行抽查,以确保产品质量稳定。
国内外标准的比较
国内葡萄糖杂质检查标准 国外葡萄糖杂质检查标准 国内外标准的异同点比较 国内外标准对实际操作的指导意义
定期校准检查仪器和试剂
检查后的数据处理与分析
记录数据:确保准确记录每个观 察结果和测量值
数据分析:对数据进行统计分析, 以确定葡萄糖中杂质的含量
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
异常值处理:识别并处理异常值, 以避免对结果产生影响
结果解释:根据分析结果,解释 葡萄糖中杂质的类型和程度
提高葡萄糖质量的措施与展望
味的产物。
微生物污染: 葡萄糖在储存 过程中可能受 到微生物污染, 产生具有异味 的代谢产物。
杂质种类及来源
硫酸盐:来源于原料或生产过程中使用的硫酸 氯化物:来源于原料或生产过程中使用的盐酸 硝酸盐:来源于生产过程中使用的硝酸 重金属:来源于生产过程中使用的金属器具或试剂
杂质对葡萄糖质量的影响
气相色谱法:利用不同组分在气体中的溶解度和吸附性质的不同,分 离和测定样品中各组分的含量。

五.葡萄糖的质量检查(3)

五.葡萄糖的质量检查(3)

(三)比较法:
不需对照物质 供试液测定某些数值(如PH值、吸 收度、旋光度、干燥失重等),要求不 得超越其限量值。 如:葡萄糖氯化钠注射液 【检查】pH值 应为3.5~5.5
六、一般杂质检查
(一)氯化物检查(信号杂质) 葡萄糖中氯化物 取本品 0.60g,依法检查(附录Ⅷ A),与标准氯化钠溶液 6.0ml制成对照液比较,不 得更浓(0.0l%) 准备: 称量范围: 0.595~0.605g 天平、量筒、50ml纳氏比色管、 10ml刻度吸管、标准氯化钠 溶液、稀硝酸。
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杂质来源
两大来源
生产中引入 原料 中间体 副产物 降解产物
贮藏过程中产生 水解 氧化 分解 异构化
五、杂质检查方法
药典规定的杂质检查均为限量检查 杂质限量:药物中所含杂质的最大允许量 表示方法: % 或 ppm
检 查 方 法
灵敏度法
对照法
比较法
(一)对照法:(限量检查法)
CH2OH OH OH OH O OH
-3H2O △
HOCH 2
O
CHO
聚合,显黄色
双键转移成醛基
5-羟甲基糠醛无色, 有紫外吸收;对人 体有害,注射剂检 查其限量。ppt66
S
糠醛,别名: 呋喃甲醛
三、葡萄糖的质量标准
中国药典 2010年版二部
检验依据 的确定
检验前 的准备
试药的准备 与试液的配制 仪器的准备
1.原理:对照法 氯化物在硝酸酸性条件下与AgNO3反 应, 生成AgCl白色浑浊液, 与一定量标 准氯化钠溶液在相同条件下产生的AgCl 浑浊程度比较, 浊度不得更大. Clˉ+ AgNO3 → AgCl↓
2.操作方法(对照法)葡萄糖中氯化物检查

葡萄糖检测标准操作规程SOP

葡萄糖检测标准操作规程SOP

葡萄糖1.目的规范葡萄糖测定的操作程序,确保葡萄糖测定结果准确。

2.检验方法氧化酶法(两点终点法) 3.检验原理 葡萄糖+O 2+H 2O 葡萄糖酸+H 2O 2H 2O 2+4-AAP+苯酚红色醌亚胺+4H 2O在波长505nm 处比色,计算出GLU 浓度。

4.临床意义临床检测GLU 浓度主要用于糖尿病诊断、昏迷鉴别诊断及糖代谢研究。

血糖增高主要见于:①生理性高血糖:可见于饭后1-2小时或情绪紧张肾上腺分泌增加时;②病理性高血糖:可见于内分泌功能障碍引起的糖尿病、颅外伤、颅内出血、脑膜炎引起的颅内高压、脱水引起的高血糖、急慢性胰腺炎、肝功能障碍等。

血糖降低主要见于:①生理性低血糖:常见于饥饿和剧烈运动后。

②病理性低血糖:可见于高胰岛素血症、非胰性肿瘤、糖原累积症、自身免疫性疾病、半乳糖血症和肾脏疾病等。

5.标本采集及干扰因素 5.1标本要求空腹不抗凝静脉血2~3ml 。

5.2标本保存室温保存,及时送检。

血清ALT 在20-25℃可稳定24小时,在2-8℃储存可稳定7d ,-20℃冰冻保存可稳定30d 。

5.3注意事项推荐选用血清,避免溶血,红细胞中ALT 比血浆高约7倍,溶血时红细胞内ALT 可进入血浆,导致测定结果偏高。

标本应避免溶血、脂血、黄疸。

6.检测仪器日立7180全自动生化分析仪,使用具体要求和校准程序详见《仪器GOPOD操作规程》。

7.试剂 7.1试剂品牌美康生物 7.2包装规格200mL (R1:2×65mL+R2:1×70mL ) 7.3主要组成成分 试剂成分含量(最终反应体系) 试剂1 磷酸盐缓冲液 0.1mol/L 苯酚0.01×10-3mol/L 试剂2葡萄糖氧化酶 16000u/L 过氧化物酶 1000u/L 4-氨基安替比林0.02×10-3mol/L不同批次的试剂不推荐混合使用 7.4储存条件有效期试剂在2-8℃保存可稳定1年,试剂开瓶后于2-8℃可稳定1个月。

临床生化检验 第三章 葡萄糖的测定

临床生化检验 第三章  葡萄糖的测定

糖代谢紊乱--高血糖和糖尿 脂类代谢紊乱--高血脂、酮症酸中毒 体重减轻和生长迟缓 微血管、神经病变和白内障的发生
糖尿病的诊断
临床症状
糖尿病的诊断
生化诊断
血糖的测定 尿糖的测定 葡萄糖耐量试验
一、血糖的测定
1.出现糖病症状加上随机血糖浓度≥11.1mmol/L。 2.空腹血糖≥7.0mmol/L。空腹指至少8h内无含热量食 物的摄入。 3.口服葡萄糖耐量试验(OGTT) ,2h血糖浓度 ≥11.1mmol/L。
空白管(B) 标准管(S) 测定管(U)


0.1

0.1

0.1


3.0
3.0
3.0
混匀,置沸水中煮沸10min,取出置冷水中冷却5min, 在630nm处比色,以空白管调零,读取各管吸光度。
计算
血清葡萄糖 (mmol/L)
测定管吸光度 标准管吸光度
5
参考值
临床意义
评价
回收率98.6%~99.6%,线性范围可达30.8mmol/L, 日 内CV2%左右,日间CV不大于4%。特异性强,但不及氧化 酶法。
第一节 体液葡萄糖测定 一、己糖激酶法(HK法)(理解) 原理:
葡萄糖+ATP HK 葡萄糖-6-磷酸+ADP 葡萄糖-6-磷酸+NADP+ G-6-PD 6-磷酸葡萄糖内酯 +NADPH
NADPH在340nm有吸收峰
评价:
本法特异性高,灵敏度高,干扰因素少,适用于自动化 分析,为葡萄糖测定的参考方法,但是试剂较贵。
生理性:饥饿和剧烈运动
低血糖
病理性:药源性、肝源性、胰岛素瘤等
三、邻邻甲苯胺法(理解)
原理:

7.2葡萄糖的检测

7.2葡萄糖的检测
葡萄糖的检测
一、发展历史 古代印度:蚂蚁尝尿
尿轮(urine wheel)
二、标本因素
检测标本









尿









三、血糖检测方法
1. 决定性方法:同位素稀释气相色谱-质谱法
概述
2. 常规方法——酶法 ①葡萄糖氧化酶法 ②己糖激酶法 ③葡萄糖脱氢酶法
四、酶法特点
酶法的特点:
1. 具有良好的特异性; 2. 便于检测:吸光度或电流改变; 3. 应用广泛:自动生化分析仪或POCT仪器。
六、血糖计
血糖计的原理
血糖计:当葡萄糖浓度 ≥100mg/dL时,其允许 误差范围是≤15%
自动生化分析仪:允 许误差≤2.0%
2017年SMBG销售额132 亿美元
七、血糖连续监测
连续血糖监控仪( continuous glucose monitor, CGM)是指通过葡萄糖传感器监测皮下组织间 液的葡萄糖浓度变化的技术。
指示反应: NAD+(NADP+)+ 2H ⇌ NADH(NADPH)+ H+
举例:乳酸脱氢酶反应:
问题:请总结还有哪些生化检验项目是通过“ 脱氢酶指示系统”完成检测的? 思维拓展:利用“脱氢酶指示系统”还可以 建立哪些新的检验项目?
己糖激酶法是测定葡萄糖的参考方法,目 前也用于常规检测
适用于血液、尿液、脑脊液中葡萄糖的测定
原理:
植入方式
CGM的特点:每1~5分钟检测一次葡萄糖 ;具报警功能;传感器每6天更换一次;既 能独立使用,也可连接到胰岛素泵(仿生胰

葡萄糖注射液检验记录

葡萄糖注射液检验记录
规格
报告日期
数量
检品来源
包装
检验依据
【性状】
本品为色澄明液体,味。
【鉴别】检验时间,温度,湿度。
取本品,缓缓滴入微温的碱性酒石酸铜试液中,生成。
【检查】
【PH】检验时间,温度,湿度。
仪器:。
仪器校正:标准缓冲液PH4.00,PH6.86,校正误差:PH单位
样品测定:取本品ml,置ml容量瓶中,用水稀释至刻度,加饱和氯化钾溶液ml,依法测定PH值①,②,
检验人
复核人
葡萄糖注射液检验记录(三)
检查结果:第一瓶≥10µm粒/ml;≥25µm粒/ml
第二瓶≥10µm粒/ml;≥25µm粒/ml
第三瓶≥10µm粒/ml;≥25µm粒/ml
平均≥10µm粒/ml;≥25µm粒/ml
标准规定:每1ml中含10µm及10µm以上的微粒不得过25粒,含25µm及25µm以上的微粒不得超过3粒,结果。
取25ml纳氏比色管三支,甲管中加标准铅溶液ml与醋酸盐缓冲
检验人
复核人
葡萄糖注射液检验记录(二)
液(PH3.5)ml,与水适量使成ml;取本品ml(约相当于葡萄糖3g),蒸发至约ml,放冷,置乙管中,加醋酸盐缓冲液(PH3.5)
ml,与水适量使成ml;取本品ml(约相当于葡萄糖3g),蒸发至约ml,放冷,置丙管中,再加与甲管相同的标准铅溶液ml与醋酸盐缓冲液(PH3.5)ml,用水稀释成25ml;甲、乙、丙三管中分别加硫代乙酰胺试液各ml,摇匀,放置2分钟同置白纸上,自上向下透视,丙管中显出的颜色甲管,乙管中显示的颜色与甲管比较,。(含重金属不得过百万分之五)结果。
仪器:。
取不溶性微粒检查用水ml,经0.45µm滤膜滤过,≥10µm的微粒粒/10ml,≥25µm微粒粒/10ml。试验环境及检测。

葡萄糖的检测报告

葡萄糖的检测报告

【检查】
1 、溶液的澄清度与颜色 取本品5.0g,加热水溶解后,放冷,用水稀释至10mL,溶液应澄清无色 ;如显浑浊,与1号 浊度标准液[《中国药典》 (2020版)附录比较,不得更浓 ;如显色,与对照液(取比色用氯 化钴溶液3.0mL, 比色用重铬酸钾溶液3.0mL与比色用硫酸铜溶液6.0mL,加水稀释成 50mL)1.0mL加水稀释至10mL比较,不得更深。
8、炽灼残渣
取本品1.0~2.0g置于已炽灼至恒重的坩埚中,精密称定,缓缓炽灼至完全炭化,放冷至 室温,加硫酸0.5~1.0mL使恰湿润,低温加热至硫酸蒸气除尽后,放入高温炉中,于700~ 800℃炽灼使完全炭化,移置干燥器内,放冷,精密称定 。再于700~800℃炽灼至恒重, 即得(0. 1%)。
因为全检有一项是比旋度 , 由公式[“]tD= (100ד)/(L×C)可知 ,浓度已知 ,溶液体积
也已经知道 , 因而已经可以求出葡萄糖含量 。所以全检中不用再进行含量测定。 检验项目中 ,任何一项不符合规定 ,则不可药用。
【鉴别】
(1)取本品约0.2g ,加水5ml溶解后,缓缓滴入微温的碱性酒石酸铜试液中, 即生 成氧化亚铜的红色沉淀。
依据费歇尔投影式 ,氧化度高的碳原子在上方,最下面的手性碳原子上的横向基团, 在右侧为D型 ,在左侧为L型 。哈沃斯式C5取代基在环面上方为D型 ,在下方为L型。
葡萄糖的结构特点
1 、多羟基化合物,极性大。 2 、四个手性碳原子,具旋光性。
3 、含醛基 4 、含一分子结晶水
பைடு நூலகம்
一 、仪器 、试药准备及试液的配制
葡萄糖的检测报告
实验目的
1)通过葡萄糖杂质检查 , 了解一般杂质检查的项目、方法和意义。 2) 掌握葡萄糖中氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属及砷盐限度检查的原理和方法。

葡萄糖含量测定计算公式

葡萄糖含量测定计算公式

葡萄糖含量测定计算公式葡萄糖含量测定计算公式是用于计算葡萄糖含量的公式,在食品工业、生物科学等领域广泛应用。

葡萄糖作为一种重要的能量源和碳源,其含量的测定对于食品质量控制、生物研究以及医学诊断都具有重要意义。

葡萄糖含量测定可以采用多种方法,例如酶法、光度法和高效液相色谱法等。

其中,酶法是一种常用的方法,通过葡萄糖氧化酶催化葡萄糖产生过氧化物,再用某种指示剂指示过氧化物的生成,从而实现葡萄糖含量的测定。

计算公式是将实验测得的吸光度值或发光强度值代入公式计算出葡萄糖含量。

下面是一种常用的光度法计算公式:葡萄糖浓度(mg/ml)= [(吸光度样品 - 吸光度空白) / 斜率] ×稀释倍数其中,吸光度样品为实验测得的葡萄糖样品的吸光度值,吸光度空白为测得的不含葡萄糖的空白试剂的吸光度值。

斜率是指标准曲线的斜率,用于校准样品光度值和葡萄糖浓度之间的关系。

稀释倍数是指样品在测定过程中进行的稀释倍数,用于将测得的吸光度值或发光强度值校正为原始样品的浓度。

在进行葡萄糖含量测定时,首先要制备一系列不同浓度的标准溶液,然后测量各标准溶液的吸光度或发光强度,绘制标准曲线。

通过测量待测样品的吸光度或发光强度,然后代入计算公式中,即可计算出样品中的葡萄糖含量。

需要注意的是,不同的测定方法和仪器可能有不同的计算公式。

因此,在具体的实验中,需要根据实验方法和仪器的要求,选择相应的计算公式进行计算。

此外,葡萄糖含量测定还可以采用其他方法,如高效液相色谱法。

在高效液相色谱法中,葡萄糖含量的计算公式是根据标准曲线的峰面积或峰高与葡萄糖浓度之间的线性关系进行计算的。

总结起来,葡萄糖含量测定计算公式是根据实验测得的吸光度值、发光强度值或峰面积、峰高等代入相应的计算公式,计算出样品中的葡萄糖浓度的公式。

不同的测定方法和仪器可能有不同的公式,因此在实验中需要根据具体情况选择合适的计算公式。

在葡萄糖含量测定中,光度法是一种简单、快速、准确的方法。

实验1葡萄糖的一般杂质检查(1)

实验1葡萄糖的一般杂质检查(1)

实验1葡萄糖的一般杂质检查(1)实验一葡萄糖的一般杂质检查一、目的要求1.了解葡萄糖中一般杂质检查的目的和意义;2.掌握氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属等一般杂质检查的基本原理、操作方法及杂质限量计算;3.正确使用纳氏比色管。

二、实验操作试药:葡萄糖试剂:酚酞、氢氧化钠、氯化钴、重硌酸钾、硫酸铜、硝酸、硝酸银、氯化钠、氯化钡、盐酸、硫酸、硫氰酸铵、90%乙醇、无水乙醇、磺基水杨酸、硫代乙酰胺、硝酸铅仪器:石蕊试纸5盒、滴瓶5个、量筒50ml、10ml各8个,移液管5ml、2ml、1ml各8只,烧杯100ml各8只、石英比色皿3对2.1 酸度取本品2.0克,加水20ml溶解后,加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)0.20ml,应显粉红色。

2.2 溶液的澄清度与颜色取本品5g,加热水溶解后,放冷,用水稀释至10ml,溶液应澄清无色,如显浑浊,与1号浊度标准液(中国药典2000年二部附录IX B)比较,不得更浓;如显色,与对照液取(比色用氯化钴液3ml、比色用重硌酸钾液3ml与比色用硫酸铜6ml,加水稀释50ml)1.0ml加水稀释至10ml比较,不得更深。

2.3 氯化物取本品0.6g,加水溶解使成25ml(如显碱性,可滴加硝酸使遇石蕊试纸显中性反应),再加稀硝酸10ml,溶液如不澄清,滤过。

臵50ml纳氏比色管中,加水适量使成约40ml,加硝酸银试液1ml,用水稀释使成50ml,摇匀,在暗处放臵5分钟,如发生浑浊,与标准氯化钠溶液一定量制成的对照液【取标准氯化钠溶液(10 μg Cl/ml)6.0ml臵50ml纳氏比色管中,加稀硝酸10ml,用水稀释使成约40ml后,加硝酸银试液1ml,再加水适量使成约40ml后,加硝酸银试液1ml,再加水适量使成50ml,摇匀,再暗处放臵5分钟】比较,不得更浓(0.01%)。

2.4 硫酸盐取本品2.0g,加水溶解使成40ml(如显碱性,可滴加盐酸使遇石蕊试纸显中性反应)。

血清葡萄糖测定标准操作规程

血清葡萄糖测定标准操作规程

⾎清葡萄糖测定标准操作规程葡萄糖测定标准操作规程1 检验申请单独检验项⽬申请:空腹⾎清葡萄糖测定(缩写GLU),餐后2h葡萄糖测定,各种体液葡萄糖测定;组合项⽬申请:葡萄糖耐量试验(缩写OGTT)。

临床医⽣根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采⾎约2 ml,不抗凝,置普通试管中。

或采⽤含分离胶的真空采⾎管。

2.1.2检验申请单和⾎标本试管标上统⼀且唯⼀的标识符。

2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单⼀起及时运送⾄检验科。

专⼈负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不⾜:少于0.3ml的全⾎标本,或少于0.1ml的⾎清或⾎浆。

2.1.5.2对反应吸光度有⼲扰的标本,包括严重溶⾎、严重浑浊的标本。

2.1.5.3⽆法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4抽⾎后室温放置超过4h以上的标本。

2.1.5.5静脉滴注⼤剂量维⽣素C后⽴即抽⾎的标本。

2.1.5.6其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离⼼分离出⾎清,并及时将⾎清与⾎球分离。

2.2.2标本保存时间:不抗凝⾎标本如⾎清未与⾎块分开,共存同⼀试管中,室温(15~25℃)下⾎清葡萄糖很不稳定,普通冰箱中(2~8℃)稳定1天。

加氟化钠的⾎液标本室温(15~25℃)下稳定4h。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,单独分离出⾎清后,密闭置4~8℃冰箱内保存7天。

2.3标本采集的注意事项2.3.1采⾎前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。

检查空腹⾎清葡萄糖的须在禁⾷12h以上早晨抽⾎。

2.3.2餐后2h葡萄糖检查,受检者于餐后2h准时抽⾎。

2.3.3葡萄糖耐量试验检查的⾎液标本,在服⽤75克葡萄糖后,分别于0.5h、1h、2h及3h准时抽⾎。

2.3.4为了避免葡萄糖被酵解,单独测定葡萄糖时,⾎标本可氟化钠-草酸钾抗凝,氟化钠⽤量为1.5mg/ml⾎。

葡萄糖实验报告

葡萄糖实验报告

一、实验目的1. 了解葡萄糖的化学性质和生理作用。

2. 掌握葡萄糖的测定方法,包括葡萄糖氧化酶法、还原性滴定法等。

3. 学习实验操作技能,提高实验动手能力。

二、实验原理葡萄糖是一种单糖,是人体重要的能量来源。

在生物体内,葡萄糖的代谢主要通过糖酵解、三羧酸循环和氧化磷酸化等途径进行。

本实验采用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量,其原理如下:葡萄糖氧化酶催化葡萄糖与氧反应,生成葡萄糖酸和过氧化氢。

过氧化氢在过氧化物酶的作用下,将色原性受体氧化,产生红色化合物。

在一定波长下,该化合物的吸光度与葡萄糖浓度成正比,从而可以测定葡萄糖含量。

三、实验材料1. 试剂:葡萄糖标准溶液、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、磷酸盐缓冲液、硫酸铁溶液、硫酸铜溶液、邻苯二胺溶液等。

2. 仪器:分光光度计、移液管、试管、容量瓶等。

四、实验步骤1. 标准曲线绘制(1)取6支试管,分别加入不同浓度的葡萄糖标准溶液。

(2)向各试管中加入适量的磷酸盐缓冲液,混匀。

(3)向各试管中加入适量的葡萄糖氧化酶和过氧化物酶,混匀。

(4)室温反应5分钟后,用分光光度计在特定波长下测定吸光度。

(5)以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。

2. 样品测定(1)取一定量的待测葡萄糖溶液,按照标准曲线绘制步骤进行操作。

(2)根据标准曲线计算待测葡萄糖溶液的浓度。

五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制根据实验数据,绘制标准曲线,得到线性方程:y = ax + b,其中y为吸光度,x为葡萄糖浓度。

2. 样品测定根据标准曲线,计算待测葡萄糖溶液的浓度。

六、实验讨论1. 葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量具有操作简便、灵敏度高、特异性强等优点,是临床和科研中常用的测定方法。

2. 实验过程中,应注意以下几点:(1)严格控制反应时间,避免过氧化酶的活性降低。

(2)准确配制试剂,保证实验结果的准确性。

(3)使用干净、无污染的仪器和试剂。

七、实验总结本实验通过葡萄糖氧化酶法测定了葡萄糖含量,掌握了实验操作技能。

葡萄糖检验标准操作规程

葡萄糖检验标准操作规程

范围:葡萄糖职责:检验室对本规程的实施负责正文:1.性状——本品为无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末,无臭,味甜。

本品在水中易溶,在乙醇中微溶。

1.1比旋度——取本品约10g,精密称定,置100ml量瓶中,加水适量与氨试液0.2ml,溶解,用水稀释至刻度,摇匀,放置10分钟,在25℃时依法测定并计算,比旋度为+52.5°至+53.0°。

1.1.1执行SOP-QM-419《旋光度测定标准操作规程》。

1.1.2执行SOP-EM-302《WZZ-2B型自动指示旋光仪标准操作规程》。

1.1.3计算公式旋光度×100比旋度=称样量×(1-水份)2.鉴别2.1取本品约0.2g,加水5ml溶解后,缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中,即生成氧化亚铜的红色沉淀。

2.2本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集464图)一致。

2.2.1执行SOP-QM-421《红外分光光度法标准操作规程》。

2.2.2执行SOP-EM-309《TJ270-30A型红外分光光度计标准操作规程》。

3.检查3.1酸度——取本品 2.0g,加水20ml溶解后,加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)0.20ml,应显粉红色。

3.2溶液的澄清度与颜色——取本品5g,加热水溶解后,,放冷 , 用水稀释至10ml,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液比较,不得更浓;如显色,与对照液(取比色用氯化钴液 3ml,比色用重铬酸钾液3ml与比色用硫酸铜液6ml,加水稀释成50ml)1.0ml 加水稀释至10ml比较,不得更深。

3.2.1执行SOP-QM-413《澄清度检查标准操作规程》。

3.2.2执行SOP-QM-410《溶液颜色检查标准操作规程》。

3.3乙醇溶液的澄清度——取本品1.0g,加90%乙醇 30ml,置水浴上加热回流约10分钟,溶液应澄清。

3.3.1执行SOP-QM-411《澄清度检查标准操作规程》。

葡萄糖检验操作规程

葡萄糖检验操作规程

标题:葡萄糖检验操作规程
分发部门:总经理室、质量技术部,行政部(存档)
葡萄糖检验操作规程
1 范围
本标准规定了葡萄糖的检测方法和操作要求;适用于葡萄糖的质量检测。

2 引用标准
中华人民共和国药典2005版二部
3 责任
QC检验员对本规程实施负责,QA负责监督。

4 检验方法
4.1 打开产品包装,通过外观检查判定:本品为无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末;无臭,味甜。

本品在水中易溶,在乙醇中微溶。

4.2 干燥失重按照公司制定的《干燥失重测定法》(QC-O-037)的方法测定。

4.3 微生物限度按照公司制定的《食品微生物检测方法》(QC-O-032)的方法测定。

初中化学葡萄糖的检验

初中化学葡萄糖的检验

初中化学葡萄糖的检验葡萄糖是一种重要的单糖,是人体内能量的主要来源之一。

在化学实验中,我们需要对葡萄糖进行检验,以确定其存在和浓度。

本文将介绍几种常见的葡萄糖检验方法。

一、费林试剂法费林试剂法是一种常用的葡萄糖检验方法。

它的原理是将葡萄糖与费林试剂(含有铜离子)反应,生成红色沉淀。

具体操作步骤如下:1. 取一定量的葡萄糖溶液,加入适量的费林试剂。

2. 在加入试剂后,将溶液加热至沸腾,持续加热一段时间。

3. 观察溶液的颜色变化。

如果溶液变成了红色,说明葡萄糖存在。

二、本氏试剂法本氏试剂法也是一种常用的葡萄糖检验方法。

它的原理是将葡萄糖与本氏试剂(含有铜离子和碱性氢氧化物)反应,生成红色沉淀。

具体操作步骤如下:1. 取一定量的葡萄糖溶液,加入适量的本氏试剂。

2. 在加入试剂后,将溶液加热至沸腾,持续加热一段时间。

3. 观察溶液的颜色变化。

如果溶液变成了红色,说明葡萄糖存在。

三、苏丹三试剂法苏丹三试剂法是一种常用的葡萄糖检验方法。

它的原理是将葡萄糖与苏丹三试剂(含有苏丹三染料)反应,生成红色沉淀。

具体操作步骤如下:1. 取一定量的葡萄糖溶液,加入适量的苏丹三试剂。

2. 在加入试剂后,将溶液加热至沸腾,持续加热一段时间。

3. 观察溶液的颜色变化。

如果溶液变成了红色,说明葡萄糖存在。

四、硝酸银试剂法硝酸银试剂法是一种常用的葡萄糖检验方法。

它的原理是将葡萄糖与硝酸银试剂(含有硝酸银离子)反应,生成白色沉淀。

具体操作步骤如下:1. 取一定量的葡萄糖溶液,加入适量的硝酸银试剂。

2. 在加入试剂后,将溶液加热至沸腾,持续加热一段时间。

3. 观察溶液的颜色变化。

如果溶液变成了白色,说明葡萄糖存在。

以上四种方法都是常用的葡萄糖检验方法,它们的原理都是利用葡萄糖与试剂反应生成沉淀或颜色变化来检验葡萄糖的存在。

在实际操作中,我们可以根据需要选择不同的方法进行检验。

同时,我们还可以通过比较不同试剂的反应结果来确定葡萄糖的浓度。

检验葡萄糖的方法

检验葡萄糖的方法

检验葡萄糖的方法
1.光度法:利用葡萄糖在碱性条件下和某些化学试剂反应生成有色物质,然后用光度计测定这种有色物质的吸光度来判断葡萄糖含量。

这种方法常用于临床血糖测定。

2.比色法:将待测样品和比色剂混合后,根据比色剂的变色反应来测定葡萄糖含量。

这种方法常用于日常食品的检测。

3.酶法:利用葡萄糖氧化酶对葡萄糖进行催化反应,生成能导致电子流动的物质,并通过电极来测定电流或电压大小,从而确定葡萄糖的含量。

这种方法常用于实验室或工业环境。

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(2)耐量受损(减退)
常见于无症状的糖尿病(亚临床型),表 现为轻度耐糖量降低,空腹血糖可低于 7.8mmol/L,但口服葡萄糖后,30min、 60min、90min、血糖水平可 ≥11.0mmol/L,特别是2h后血糖水平仍在 8.0~11. 1mmol/L者,追踪随访几年后, 其转归为:1/3→正常,1/3 →糖耐量受损, 1/3 →DM
增殖性视网膜病变
白內障
糖尿病神经病变
Claw foot – Dermopathy & Neuropathy
(二)低血糖症
1.概念
低血糖症(hypoglycaemia):是指血糖浓度低于空腹参考水平下限,临床出 现一系列因血糖浓度降低引起的症侯群.饥饿感,四肢无力,面色苍白,心慌, 出冷汗,头昏,倦怠,严重量肢体与口周麻木,记忆减退和运动不协调甚至意 识丧失。
(4)妊娠期糖尿病: 妊娠期间发生或首次发现的糖尿病, 妊娠前正常或可能已有糖代谢异常但未能发现, 建议其诊断与其它糖尿病标准相同。
应在产后6周或更长一段时间重新进行糖耐量试验, GDM患者即使产后血糖恢复正常, 其在若干时间后发生糖尿病的机会明显增加,应注意加强监测。
糖尿病的代谢变化
糖尿病病人代谢异常主要表现在以下四方面: ①糖代谢紊乱-高血糖和糖尿; ②脂类代谢紊乱-高脂血症、酮症酸中毒; ③体重减轻和生长迟缓; ④微血管病变、神经病变等并发症。
(3)耐量增高型
其特点:为空腹血糖浓度正常或低于正常。服糖 后,血糖浓度在整个试验期间变化不大,不见 血糖浓度以正常形式增高,呈平坦型耐量曲线。 可见于:粘液性水肿、肾上腺皮质功能减退、垂 体功能减退、胃排空延迟以及小肠吸收不良等。
(4)贮存延迟型糖耐量
此类曲线特点为空腹血糖浓度正常,服糖 后血糖急剧升高,峰值出现早,30min达最高 峰(10mmol/L),然后急剧下降,2h值又 低于空腹血糖水平。
(1)空腹性低血糖
正常人一般不会因为饥饿而发生低血糖症, 因为正常的调节机制可维持血糖浓度>2.8mmol/L。 成年人空腹时发生低血糖症往往由于葡萄糖利用过多或生成不足。 反复发生空腹性低血糖提示有器质性疾病,如胰岛素瘤。
餐后低血糖为刺激性低血糖的一大类,按病史与OGTT反应类型可分为三型 :
⒈功能性低血糖症(反应性低血糖症): 为发生于餐后或OGTT2-5小时的暂时性低血糖。多发于心理动力学异常的妇女, 病人有交感神经兴奋的症状。 ⒉Ⅱ型糖尿病或糖耐量受损伴有的低血糖症病人空腹血糖正常, OGTT前2小时似糖耐量受损或Ⅱ型糖尿病,但食糖后3-5小时, 血浆葡萄糖浓度迅速降低达最低点。产生的原因可能是持续高血糖引起胰岛素延 迟分泌,且表现出后期胰岛素高,致使血糖后期迅速下降。
引起低血糖的原因 : 使用胰岛素或降血糖药物过多;胰岛β细胞增生和肿瘤等使胰岛素分泌过多; 垂体前叶或肾上腺皮质功能减退,肾上皮质激素分泌减少。 肝严重损害时不能有效地调节血糖,肝糖原减少和糖异生减弱。 长期饥饿、剧烈运动或高烧病人因代谢率增加,血糖消耗过多。
2.分类 常用临床分类法,分为空腹性低血糖和餐后性低血糖症两类。
果糖胺-血清糖化白蛋白测定(GAlb)
葡萄糖也可通过非酶促糖基化反应与其他蛋白结合形成酮胺(ketoamine), 即果糖胺(fructosamine, FA)。果糖胺的生成量与血糖浓度有关。由于清
蛋白是血清蛋白最丰富的成分,故认为测定果糖胺主要是测定血清清蛋白。
成人血红蛋白(Hb)
GHb是在红细胞生存期间,HbA1与血中已糖(主要为葡萄糖)缓慢、 连续的非酶促反应产物,为HbA1合成化学修饰的结果。
特点:
1、GHb的形成取决于血糖浓度和作用时间,生成量与血中葡萄糖浓度成正比。 红细胞平均寿命为120天,因此GHb的浓度反映测定日前1-2个月内受试者 血糖的平均水平,而与血糖的短期波动无关。与抽血时间,是否空腹,是否使 用胰岛素无关,是糖尿病监控达标的新标准。 2、对糖尿病性高血糖和应激性高血糖做出诊断, 3、低于参考区间说明近期有低血糖发作。或存在红细胞寿命缩短。
原理:
葡萄糖+O2+H2O
GOD
葡萄糖酸内酯+H2O2
POD
2H2O2 + 4-氨基安替比林+酚
红色醌类化合物 + H2O +O2
评价
操作简单,特异性较高,是血糖测定的首选方法.但溶血、
GSH、Vc、胆红素,GSH可引起测定结果负偏差。
(四)口服葡萄糖耐量试验(oral
glucose tolerance test,OGTT)
随机血糖指一天中的任一时间采血测定的血糖浓度。
妊娠期糖尿病的诊断标准
对妊娠24-28周有DM倾向(肥胖,有 GDM病史,尿糖阳性,有糖尿病史)可在 空腹条件下口服50克葡萄糖,然后测定1小 时血糖浓度进行妊娠期糖尿病,若 >7.8mmol/l则筛查异常,需进一步做 OGTT.
妊娠期糖尿病的诊断标准 100g 葡萄糖负荷试验:FPG 浓度>5.3 mmol/ L (95mg/dl);1h 血糖浓度>10.0 mmol/ L (180mg/dl);2h 血糖浓度>8.6 mmol/ L (155mg/dl);3h 血糖浓度>7.8 mmol/ L (140mg/dl)。 75g 葡萄糖负荷试验:FPG 浓度>5.3 mmol/ L (95mg/dl);1h 血糖浓度>10.1 mmol/ L (180mg/dl);2h 血糖浓度>8.6 mmol/ L (155mg/dl)。
此种情况常见于胃切除或严重肝病等。
(5)空腹血糖受损
其表现为: ①血浆FPG<7.0 mmol/L ②2hPG <7.8mmol/L
糖化蛋白的测定 HbA1(α2β2),占97% HbA2(α2δ2),占2.5% HbF(α2γ 2),占0.5% 对HbA1进行色谱分析,发现了几种次要血红蛋白: HbA1a、HbA1b、HbA1c 统称为HbA1,或快速血红蛋白,或糖化血红蛋白
⒊营养性低血糖症低血糖常发生于餐后1-3小时。 病人大多有上消化道手术或迷走神经切除,由于胃迅速排空,使葡萄糖吸收增快, 血浆葡萄糖明显快速增高,刺激胰岛素一时性过多分泌,致使血糖浓度迅速降低。
低血糖症的诊断标准
1、低血糖症状 2、发作时空腹血糖低于2.8mmol/l 3、供糖后低血糖症状迅速缓解
糖代谢紊乱检验
二、糖代谢紊乱
(一)高血糖症(hyperglycemia)与糖尿病 1.概念 高血糖症是指空腹血糖高于7.3mmol/L,血糖高于肾糖阈值9.0mmol/L, 则出现尿糖。在某些生理情况下,如情绪激动致交感神经系统兴奋, 称为情感性糖尿;一次性食入大量糖,血糖急剧升高,称为饮食性尿糖。 受试者空腹血糖浓度均在正常水平,且无临床症状和意义。 临床上最常见的病理性高血糖症是糖尿病。 糖尿病(diabetes mellitus)是一组由于胰岛素分泌不足或(和)胰岛素作用低 下而引起的代谢性疾病,其特征是高糖血症。 典型症状:多尿、多饮、多食、体重减轻。
1.OGTT的适应症
(1)空腹血糖浓度在6.1-7.0mmol/L 且疑为糖尿病患者 (2)诊断为妊娠性DM (3)诊断糖耐量减退 (4)临床上出现肾病、神经病变和视网膜病 而又无法作出合理解释者。 (5)空腹血糖浓度正常,但有发展为糖尿病 可能的人群。
2.OGTT的标准化
(1)病人准备:
3.参考值
(1)空腹血糖<6.11mmol/L (2)口服葡萄糖后30~60min达高峰,峰值 不超过10mmol/L (3)2hPG<7.8mmol/L 每次尿糖试验均为阴性。
4.临床意义:
书41页图3-3葡萄糖耐量曲线
(1)糖尿病性糖耐量
a.空腹血浆葡萄糖浓度≥7.0mmol/L b.葡萄糖峰值超过10.0mmol/L;尿糖 (+) c.延迟(2h以后)回复到空腹水平。 此时重要的判断指标是服糖后2h血糖浓度 仍然高于空腹水平。 DM患者糖耐量曲线的最大特征是耐糖曲线延 迟恢复到空腹水平。
OGTT:是一种葡萄糖负荷试验,当一次口服大 量葡萄糖后,在其后2h内4次测定血糖含量, 用以了解机体对葡萄糖的调节能力的试验,称 之为OGTT 。
OGTT原理
1、耐糖现象 正常人进食葡萄糖后。血液中 的葡萄糖仅暂时升高(一般不超过 9.0mmol/l)但在2小时内血糖又恢复到 空腹水平。 2、糖耐量失常 因内分泌功能失调引起糖 代谢障碍时,口服一定量的葡萄糖后,血糖 浓度可急剧升高,而且短时间内不能恢复到 原来的浓度水平的想象。
GDM 的诊断标准仅限于妊娠期间,并且至少要满足上述两项及 两项以上指标才能作出诊断。
3.糖尿病的分类
主要分为四大类型:1型糖尿病、 2型糖尿病、 特异性糖尿病 妊娠糖尿病。
(1)1型糖尿病 : 胰岛β-细胞破坏致胰岛素绝对缺乏,易出现酮症酸中毒。多发于儿童 和青少年,对胰岛素治疗敏感。 (2)2型糖尿病 :以往称为非胰岛素依赖型糖尿病,患者多数为中年肥胖。胰岛素抵 抗伴相对不足此型不发生胰岛β-细胞的自身免疫性损伤,无明显酮症倾向。单用口服降 糖药一般可以控制血糖。 起病缓慢
HK
葡萄糖-6-磷酸+ADP
G-6-PD
葡萄糖-6-磷酸+NADP+
6-磷酸葡萄糖内酯+NADPH
NADPH在340nm有吸收峰,其吸光度增加与标本中的葡萄糖浓度成正比。
评价:
本法特பைடு நூலகம்性高,灵敏度高,干扰因素少,适用于自动化
分析,为葡萄糖测定的参考方法,但是试剂较贵。
2、葡萄糖氧化酶法(GOD)
第二节 体液葡萄糖测定
一、血糖测定
无机化学法 测定 方法
有机化学法 酶法
标本采集
1、空腹静脉采血。血浆,用草酸甲-氟化钠 抗凝剂。 2、采血后立即分离,2-8.C,可稳定三天以 上。
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