微生物检验与控制
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
更易生长） 标准与国际药典USP/EP/JP相近
精选ppt
5
微生物学是开发、生产及成品测试的一部分
无菌控制也适用于非无菌产品（无菌观念： 不要人为引入微生物）
控制贯穿于一个药物或生物制剂从研发到市场 到成品控制的整个过程 整个过程中的各种微生物控制的整合将提高 最终产品微生物质量的保证
精选ppt
-纯化水，去离子水，蒸馏水 -记录用量
成分的测量:
-校准过的天平，天平的量程应准确 -清洁的容器和工具 -记录称量
精选ppt
28
培养基
不要过度加热
-加热帮助溶解，通常培养基变深说明过度加热 -添加剂加入后需充分混合
清洁的玻璃器皿
-防止外来污染和抑菌剂 -玻璃器皿清洁
精选ppt
29
培养基
灭菌条件
-供应商提供参数，或自己验证 -高压蒸汽灭菌，过滤除菌 -验证应考虑无菌和培养基生长能力 - 湿 热 灭 菌 要 考 虑 装 载 分 布 ， 通 常 121℃
草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌（？） 接种量：不大于100 cfu（以前是多少？） 培养条件：温度：30-35℃
时间：不超过3天；不超过5天
精选ppt
10
霉菌和菌总数计数：
培养基：沙氏葡萄糖琼脂 SDA 试验菌株：白色念珠菌、黑曲霉菌 接种量：不大于100 cfu 培养条件：温度：20-25℃（？）
101 可以接受的最大菌数为20； 102 可以接受的最大菌数为200； 103 可以接受的最大菌数为2000；
精选ppt
18
非无菌产品微生物限度检查： 控制菌检查法
精选ppt
19
培养基适用性检查
培养基促生长能力检查
分离培养基在规定的最短时间内促生长能力考察。
培养基抑菌能力检查
分离培养基在规定的最长时间内的抑菌能力考察。
融化 -重复融化应被限制（不超过一次），
防止过度加热或潜在污染 -融化时，使用
水浴或流通蒸汽 微波炉，热板要防止过度加热 -融化的培养基储存 在40~45℃水浴不应超过8小时 浇制平皿前擦干
精选ppt
32
培养基应标示:
-制备批号 -制备日期，有效期 -培养基名称
有效期确定
-根据成分，配方，容器，储存条件等确定 -生长能力试验数据支持
精选ppt
20
检验方法适用性试验：
实质：控制菌检验方法验证。
适用性试验：
规定最短时间培养，试验菌检出能力试验。
精选ppt
21
供试品检查：
规定最长时间下的控制菌试验。
精选ppt
22
微生物控制菌检验结果解释：
-阳性。产品报废。 -阴性，（1）未检出；
（2）非控制菌。怎么办？
精选ppt
23
微生物实验室检验技术
（涂布法：涂布时候0.1ml里应含有100cfu菌悬液， 所以可用上一级的稀释液）
精选ppt
15
微生物测试方法
平皿法
1、倾注法； 2、涂布法（新增）
薄膜过滤法
MPN法（一般用在食品行业）
精选ppt
16
涂布法：
新引入的方法 关键点：涂布供试液不少于0.1mL.
精选ppt
17
微生物限度标准解释：
时间：不超过5天
精选ppt
11
培养基适用性检查：
范围： - 成品培养基（新引入概念）（？） - 由脱水培养基制成的培养基 - 按处方配制的培养基
精选ppt
12
培养基适用性检查合格标准：
1、回收率比值：0.5-2 范围内（以前是多少？）；
2、菌落：形态大小与对照培养基一致；（平板上长 五花八门的菌落怎么办？）
15min（我们应该怎么做？）
精选ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱpt
30
培养基灭菌条件
-在无菌和过度加热之间平衡 -消毒锅灭菌结束后，不建议在其中存储培养基 -不正确的加热、灭菌条件会影响培养基的
颜色 澄清度 pH 凝固能力 促生长能力 选择性
精选ppt
31
制备培养基的储存:
-低于0℃，凝胶结构破坏 -避光 避热 -琼脂培养基密封
对于固体培养基，获得的生长结果不得超 过由标准接种而来的计算值的两倍范围。
对照组计数
—————— ≤ 测试组计数 ≤ 2 X 对照组计数
2
精选ppt
14
计数方法适用性试验：
实质：微生物计数方法验证。
几个数字要求： - 接种菌悬液的体积不大于供试液的1% - 菌悬液含菌量不大于100cfu - 抗菌或抑菌活性的标准：回收率低于50%（？）
精选ppt
26
无菌技术：
防止和保持无菌物品及无菌区域不被污染 的操作方法和管理方法。
-无菌环境 -灭菌 -消毒 -卫生要求 -无菌操作技术
精选ppt
27
培养基
微生物实验室工作质量的核心是培养基，应根据既定的 目的选用正确的培养基。生产商应提供相关的COA和说 明书:
-配制 -储存 -菌种选用
水:
3、液体培养基：被检液体培养基与对照培养 基比较，生长良好。
精选ppt
13
回收率：
USP34-61：
For solid media, growth obtained must not differ by a factor greater than 2 from the calculated value for a standardized inoculum。
精选ppt
24
作为重要组成的微生物控制：
原料和组分的微生物控制（源头）
环境的微生物控制（动态时取样点如何确定？）
生产过程的微生物控制（比A级区更好的区域是什么？） 成品的微生物控制 人员的微生物控制
所有微生物控制的整合
精选ppt
25
微生物实验室重要的控制点：
-无菌技术（人员是关键） -培养基控制 -菌种控制 -设备控制 -实验室布局和运作 -数据文件控制 -员工培训
药品微生物检验与控制
精选ppt
1
培训主题：
1、新修订的“微生物限度检查法”介绍 2、药品微生物实验室质量管理和质量保证 3、药品微生物检验操作技术 4、洁净环境微生物监测
2
精选ppt
2
3
精选ppt
3
4
精选ppt
4
中国药典修订版整体特点：
微生物检验方法与国外药典接近 符合微生物生长特性（利于微生物的检出、
6
非无菌产品微生物限度检查： 微生物计数法
精选ppt
7
主要特点
需氧菌概念？ 回收率测试方法与合格限度
精选ppt
8
培养基适用性检查：
培养基： 胰酪大豆胨琼脂/胰酪大豆胨肉汤？ TSA / TSB
沙氏葡萄糖琼脂/沙氏葡萄糖肉汤 SDA
精选ppt
9
需氧菌总数计数：
培养基：胰酪大豆胨琼脂 TSA 试验菌株：金黄色普通球菌、铜绿假单胞菌、枯
精选ppt
5
微生物学是开发、生产及成品测试的一部分
无菌控制也适用于非无菌产品（无菌观念： 不要人为引入微生物）
控制贯穿于一个药物或生物制剂从研发到市场 到成品控制的整个过程 整个过程中的各种微生物控制的整合将提高 最终产品微生物质量的保证
精选ppt
-纯化水，去离子水，蒸馏水 -记录用量
成分的测量:
-校准过的天平，天平的量程应准确 -清洁的容器和工具 -记录称量
精选ppt
28
培养基
不要过度加热
-加热帮助溶解，通常培养基变深说明过度加热 -添加剂加入后需充分混合
清洁的玻璃器皿
-防止外来污染和抑菌剂 -玻璃器皿清洁
精选ppt
29
培养基
灭菌条件
-供应商提供参数，或自己验证 -高压蒸汽灭菌，过滤除菌 -验证应考虑无菌和培养基生长能力 - 湿 热 灭 菌 要 考 虑 装 载 分 布 ， 通 常 121℃
草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌（？） 接种量：不大于100 cfu（以前是多少？） 培养条件：温度：30-35℃
时间：不超过3天；不超过5天
精选ppt
10
霉菌和菌总数计数：
培养基：沙氏葡萄糖琼脂 SDA 试验菌株：白色念珠菌、黑曲霉菌 接种量：不大于100 cfu 培养条件：温度：20-25℃（？）
101 可以接受的最大菌数为20； 102 可以接受的最大菌数为200； 103 可以接受的最大菌数为2000；
精选ppt
18
非无菌产品微生物限度检查： 控制菌检查法
精选ppt
19
培养基适用性检查
培养基促生长能力检查
分离培养基在规定的最短时间内促生长能力考察。
培养基抑菌能力检查
分离培养基在规定的最长时间内的抑菌能力考察。
融化 -重复融化应被限制（不超过一次），
防止过度加热或潜在污染 -融化时，使用
水浴或流通蒸汽 微波炉，热板要防止过度加热 -融化的培养基储存 在40~45℃水浴不应超过8小时 浇制平皿前擦干
精选ppt
32
培养基应标示:
-制备批号 -制备日期，有效期 -培养基名称
有效期确定
-根据成分，配方，容器，储存条件等确定 -生长能力试验数据支持
精选ppt
20
检验方法适用性试验：
实质：控制菌检验方法验证。
适用性试验：
规定最短时间培养，试验菌检出能力试验。
精选ppt
21
供试品检查：
规定最长时间下的控制菌试验。
精选ppt
22
微生物控制菌检验结果解释：
-阳性。产品报废。 -阴性，（1）未检出；
（2）非控制菌。怎么办？
精选ppt
23
微生物实验室检验技术
（涂布法：涂布时候0.1ml里应含有100cfu菌悬液， 所以可用上一级的稀释液）
精选ppt
15
微生物测试方法
平皿法
1、倾注法； 2、涂布法（新增）
薄膜过滤法
MPN法（一般用在食品行业）
精选ppt
16
涂布法：
新引入的方法 关键点：涂布供试液不少于0.1mL.
精选ppt
17
微生物限度标准解释：
时间：不超过5天
精选ppt
11
培养基适用性检查：
范围： - 成品培养基（新引入概念）（？） - 由脱水培养基制成的培养基 - 按处方配制的培养基
精选ppt
12
培养基适用性检查合格标准：
1、回收率比值：0.5-2 范围内（以前是多少？）；
2、菌落：形态大小与对照培养基一致；（平板上长 五花八门的菌落怎么办？）
15min（我们应该怎么做？）
精选ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱpt
30
培养基灭菌条件
-在无菌和过度加热之间平衡 -消毒锅灭菌结束后，不建议在其中存储培养基 -不正确的加热、灭菌条件会影响培养基的
颜色 澄清度 pH 凝固能力 促生长能力 选择性
精选ppt
31
制备培养基的储存:
-低于0℃，凝胶结构破坏 -避光 避热 -琼脂培养基密封
对于固体培养基，获得的生长结果不得超 过由标准接种而来的计算值的两倍范围。
对照组计数
—————— ≤ 测试组计数 ≤ 2 X 对照组计数
2
精选ppt
14
计数方法适用性试验：
实质：微生物计数方法验证。
几个数字要求： - 接种菌悬液的体积不大于供试液的1% - 菌悬液含菌量不大于100cfu - 抗菌或抑菌活性的标准：回收率低于50%（？）
精选ppt
26
无菌技术：
防止和保持无菌物品及无菌区域不被污染 的操作方法和管理方法。
-无菌环境 -灭菌 -消毒 -卫生要求 -无菌操作技术
精选ppt
27
培养基
微生物实验室工作质量的核心是培养基，应根据既定的 目的选用正确的培养基。生产商应提供相关的COA和说 明书:
-配制 -储存 -菌种选用
水:
3、液体培养基：被检液体培养基与对照培养 基比较，生长良好。
精选ppt
13
回收率：
USP34-61：
For solid media, growth obtained must not differ by a factor greater than 2 from the calculated value for a standardized inoculum。
精选ppt
24
作为重要组成的微生物控制：
原料和组分的微生物控制（源头）
环境的微生物控制（动态时取样点如何确定？）
生产过程的微生物控制（比A级区更好的区域是什么？） 成品的微生物控制 人员的微生物控制
所有微生物控制的整合
精选ppt
25
微生物实验室重要的控制点：
-无菌技术（人员是关键） -培养基控制 -菌种控制 -设备控制 -实验室布局和运作 -数据文件控制 -员工培训
药品微生物检验与控制
精选ppt
1
培训主题：
1、新修订的“微生物限度检查法”介绍 2、药品微生物实验室质量管理和质量保证 3、药品微生物检验操作技术 4、洁净环境微生物监测
2
精选ppt
2
3
精选ppt
3
4
精选ppt
4
中国药典修订版整体特点：
微生物检验方法与国外药典接近 符合微生物生长特性（利于微生物的检出、
6
非无菌产品微生物限度检查： 微生物计数法
精选ppt
7
主要特点
需氧菌概念？ 回收率测试方法与合格限度
精选ppt
8
培养基适用性检查：
培养基： 胰酪大豆胨琼脂/胰酪大豆胨肉汤？ TSA / TSB
沙氏葡萄糖琼脂/沙氏葡萄糖肉汤 SDA
精选ppt
9
需氧菌总数计数：
培养基：胰酪大豆胨琼脂 TSA 试验菌株：金黄色普通球菌、铜绿假单胞菌、枯