粉防己生物碱的提取分离和鉴别

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中药化学实验指导

总液
最后一次
萃取过程
Dragendorff显色反应示意图
2．亲脂性生物碱中酚性与非酚性碱的分离上述CHCl3液置分液漏斗中，用2%NaOH水溶液萃取1~2 次，每次50ml，此时碱水层色已很浅，示酚性脂溶性碱已
基本被萃取到 NaOH 层，合并NaOH萃取液，将NaOH 层与 CHCl3液分置2个分液漏斗中，可同时操作： NaOH层加固体NH4Cl至pH 9左右，然后CHCl3萃取2次（80ml，50ml），第2次CHCl3层生物碱反应应极弱示萃取基本完全，弃去水相，合并CHCl3层并用蒸馏水洗至中性，加无水Na2SO4脱水24小时以上，过滤，回收 CHCl3，得粗酚性生物碱。 CHCl3层用蒸馏水洗至中性，加无水Na2SO4脱水24小时以上，过滤，回收CHCl3，残留物抽松，得非酚性生物碱的抽松物，称重，取出50mg作第4项。
（Cyclanoline），本实验经提取、分离可得到这些化合物。
H3CO OCH3 OR1 O O OR2
HO
N CH3
H3C
N
H3CO
N
CH3 OH OCH3
R1=R2=CH3 粉防己碱（甲素） R1=H，R2=CH3 防己诺林碱（乙素） R1=CH3，R2=H 小檗胺
轮环藤酚碱
一、实验目的
掌握各种生物碱的分离纯化方法，包括亲脂性碱与亲水性碱分离，亲脂性碱中酚性碱与非酚性碱的分离，亲水性生物碱与非生物碱水溶性成分的分离，亲脂性碱单体的分离学习生物碱的各种鉴识方法，包括：色谱方法（TLC及PC），沉淀反应，学习各种实验技能提取：回流提取分离：萃取、柱色谱精制：沉淀法、柱色谱法鉴识：色谱法、化学法
步骤

样品制备：拌样上样，取非酚性碱的抽松物

实验三粉防己生物碱的提取分离与鉴定

实验三粉防己生物‎碱的提取分‎离与鉴定1 实验目的1.1生物碱的一‎般提取方法‎。

1.2 用低压柱层‎析分离，纯化单体的‎方法及薄层‎层析鉴定2 实验原理2.1 生物碱大都‎能溶于氯仿‎、甲醇、乙醇等有机‎溶剂，除季铵碱和‎一些分子量‎较低或含极‎性基团较多‎的生物碱外‎，一般均不溶‎或难溶于水‎，而生物碱与‎酸结合成盐‎时则易溶于‎水和醇。

基于这种特‎性，可用不同的‎溶剂将生物‎碱从中药中‎提取。

常用的提取‎方法包括有‎溶剂提取法‎、直接提取法‎（水溶性生物‎碱、季铵碱）、离子交换树‎脂法（如麦角新碱‎类、东莨菪碱、咖啡因等）和沉淀法。

2.2 一种植物中‎往往含有几‎种或几十种‎生物碱。

因此，提取出来的‎总生物碱还‎需进一步分‎离，去除杂质、排除干扰物‎，保证分析结果的准确‎性。

一般纯化的‎方法可析出‎结晶的生物‎碱用重结晶‎法；挥发性生物‎碱可用水蒸‎气蒸馏法；易升华的生‎物碱用升华‎法提取得到‎单体。

由不同沸点‎组成的液体‎生物碱总碱‎，往往可通过‎常压或减压‎分馏分离。

如毒芹中的‎毒芹碱和羟‎基毒芹碱，石榴皮中的‎伪石榴皮碱‎、异石榴皮碱‎和甲基异石‎榴皮碱等都‎可通过减压‎分馏法分离‎出来。

许多生物碱‎的盐比游离‎碱更易于结‎晶。

因此，可利用其在‎各种溶剂中‎的不同溶解‎度进行分离‎，之后再转变‎成游离碱。

3 实验材料材料：汉防己4实验步骤4.1 生物碱的提‎取分离4.1.1 总生物碱的‎提取和亲脂‎性与亲水性‎生物碱的分‎离100g0.5%H2SO4液渗漉（注一）倍量V/V）pH9~10，静置，抽滤泥黄色沉淀（水溶性季铵碱及水溶性杂质）将沉淀与静砂拌匀（注二）80℃烘干，置索氏提取器中用乙醚（约180ml）提取至提尽生物碱（注三）回收乙醚（注四）乙醚提取物用95%乙醇40~60ml回流热溶后倾入500ml水中，加30gNaCl盐析水溶上加热至凝结，静置抽滤白色沉淀（亲脂性叔铵总碱，以汉防己甲素、乙素为主）注一：将汉防已粗‎粉加适量酸‎水液，以能将生药‎粉末润湿为‎度（约150m‎l），充分拌匀，放置半小时‎，均匀而致密‎地装入渗筒‎内，用锥形瓶底‎部或其它平‎底工具压紧‎，供渗漉用，流速约1.5ml/分。

汉防己提取实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解汉防己生物碱的提取、分离与鉴定方法。

2. 掌握回流提取、低压柱层析等实验操作技术。

3. 学习天然产物中活性成分的提取与分离过程。

二、实验原理汉防己（Stephania tetrandra S. Moore）为防己科千金藤属植物，其根含有多种生物碱，如汉防己甲素、乙素等。

本实验采用回流提取和低压柱层析方法，从汉防己根中提取生物碱，并进行分离和鉴定。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：汉防己根粉、95%乙醇、丙酮、硅胶、氧化铝、硝酸银、氨水、氯化钡等。

2. 实验仪器：圆底烧瓶、回流装置、布氏漏斗、抽滤瓶、低压柱层析柱、超声波清洗器、电子天平、紫外分光光度计等。

四、实验步骤1. 汉防己生物碱的提取（1）称取100 g汉防己根粉，置于1000 ml圆底烧瓶中。

（2）加入500 ml 95%乙醇，回流1 h。

（3）过滤，同法提取一次，合并乙醇提取液。

（4）浓缩至干，得浸膏。

2. 低压柱层析（1）装柱：取25 cm长、内径1.8 cm的层析柱，用减压干法装硅胶约25 g（高约20 cm）。

（2）拌样加样：取汉防己碱约150 mg，加少量丙酮热溶（刚溶为度），用滴管加到1.5 g硅胶上，仔细拌匀，水浴上蒸干，碾细，通过一个长颈漏斗小心加在柱顶，轻轻垂直顿击，待样品表面平整不拌动时，上面再盖约1~2 cm高的空白硅胶，再加盖一圆形滤纸片，压紧。

（3）洗脱：开动气泵待用。

用滴管顺层析柱柱壁仔细加入溶剂，收集不同洗脱组分。

3. 汉防己生物碱的鉴定（1）紫外分光光度法：将提取的生物碱溶液在紫外分光光度计上测定其最大吸收波长。

（2）薄层色谱法：将提取的生物碱溶液点于薄层板上，与已知标准品进行对照，观察其Rf值。

五、实验结果与分析1. 提取结果：经回流提取和低压柱层析，从汉防己根中成功提取出生物碱。

2. 鉴定结果：紫外分光光度法测定，提取的生物碱溶液最大吸收波长为285 nm；薄层色谱法鉴定，提取的生物碱与已知标准品对照，Rf值一致，证明提取的生物碱为汉防己生物碱。

生物碱的提取和分离技术

生物碱的提取和分离技术生物碱是指天然产物中含有碱性官能团（如胺基）的化合物。

它们广泛存在于植物、动物及微生物中，并具有多种生理活性和药理作用。

对生物碱的提取和分离技术研究具有重要的科学意义和应用价值。

为了从原料中提取和纯化生物碱，通常需要进行以下几个重要步骤：1. 原料选择：选择含有目标生物碱的植物、动物或微生物，并确保原料的来源和品质，以提高生物碱的产量和纯度。

2. 原料预处理：对原料进行粉碎、干燥和预处理等处理，以提高生物碱的析出率和溶出性，使其更易被提取。

3. 提取方法选择：根据生物碱的性质和目标物的需求，选择合适的提取方法。

常用的提取方法包括水提取、乙醇提取、热水提取、蒸馏提取等。

水提取法是最常用的提取方法，适用于具有稳定性的生物碱。

而乙醇提取法适用于极性生物碱的提取。

4. 提取工艺优化：通过改变提取剂的性质、浓度、温度、时间等条件，优化提取工艺，以提高生物碱的提取效果。

5. 提取液处理：对提取液进行脱色、去杂质、去溶剂等处理，以获得更纯净的生物碱。

6. 分离和纯化技术：根据生物碱的物化性质，选择适当的分离和纯化技术。

常用的分离和纯化技术包括结晶法、凝胶过滤法、色谱法、薄层色谱法、高效液相色谱法等。

序列薄层扫描法是常用的分离和鉴定方法。

7. 结晶和晶体工艺：通过结晶和晶体工艺，进一步提高生物碱的纯度和晶体形态，以满足药物制剂的要求。

生物碱的提取和分离技术是一门综合性的科学，需要结合化学、生物学、工程学等多学科的知识和技术，研究与应用领域广泛。

随着科技的不断发展，对于高效、低能耗的生物碱提取和分离技术的研究也越来越重要，这将有助于推动生物医药产业的发展和进一步探索新型天然药物。

汉防己碱的提取、分离及检验(2)

美国得克萨斯生物医学研究所研究人员发现，中草药提取成分汉防己碱是埃博拉病毒“克星”，有望在今后两到五年内用于治疗埃博拉感染疾病。

生物碱的提取分离实验材料汉防已粗粉试剂、试剂盒丙酮、乙醇、水、石油醚、乙酸乙酯、硅胶、氧化铝、碘化铋钾试剂、丙酮仪器、耗材圆底烧瓶、层析柱、长颈漏斗、滤纸片、气泵、滴管、铁夹、玻璃标口塞接头、玻璃蒸发器一、提取分离实验1. 回流提取100 g汉防已粗粉于1000 ml圆底烧瓶中，加500 ml 95%乙醇，回流1 h，过滤，同法提取一次，合并乙醇提取液，浓缩至干，得浸膏。

2. 低压柱层析低压柱层析在低压下(0.5~3 kg/cm2，一般0.3~1.2 kg/cm2)采用颗粒直径介于经典柱层析(100~200 μm)和HPLC(~37 μm)之间的薄层层析用硅胶(或氧化铝)H或G(50~75 μm)作为填充剂的一种柱层析柱，其基本原理与HPLC相同，分离效果也介于经典柱与HPLC之间，用减压干法装柱，铺层紧密均匀，层析带分布集中整齐，同时薄层层析的最佳分离溶剂系统可以直接用于低压柱层析，它是一种分离效果较好，设备简单，操作方便，快速的方法，适用于天然产物的常量制备性分离。

（1）装柱减压干法装法，层析柱规格：柱长25 cm，内径1.8 cm，共装硅胶约25 g(高约20 cm)。

（2）拌样加样取汉防已碱约150 mg，加少量丙酮热溶(刚溶为度)用滴管加到1.5 g硅胶上，仔细拌匀，水浴上蒸干，碾细，通过一个长颈漏斗小心加在柱顶，轻轻垂直顿击，待样品表面平整不拌动时，上面再盖约1~2 cm高的空白硅胶，再加盖一圆形滤纸片，压紧。

（3）洗脱开动气泵待用。

用滴管顺层析柱柱壁仔细加入少量洗脱剂(石油醚：乙酸乙酯3：1)，当液面达到一定高度时，再一次加入其余洗脱剂(共约250 ml)，迅速在柱顶上装上玻璃标口塞接头，用铁夹压紧(防加压时接头冲开)，连接气泵接头，控制流速1 ml/min，每10分钟左右一管，收12~15份，洗脱全过程约2小时。

中药化学提取、分离与鉴定方法

中药化学提取、分离与鉴定方法上述提取法所得到的中草药提取液或提取物仍然是混合物，需进一步除去杂质，分离并进行精制。

具体的方法随各中草药的性质不同而异，以后将通过实例加以叙述，此处只作一般原则性的讨论。

(一)溶剂分离法:一般是将上述总提取物，选用三、四种不同极性的溶剂，由低极性到高极性分步进行提取分离。

水浸膏或乙醇浸膏常常为胶伏物，难以均匀分散在低极性溶剂中，故不能提取完全，可拌人适量惰性填充剂，如硅藻土或纤维粉等，然后低温或自然干燥，粉碎后，再以选用溶剂依次提取，使总提取物中各组成成分，依其在不同极性溶剂中溶解度的差异而得到分离。

例如粉防己乙醇浸膏，碱化后可利用乙醚溶出脂溶性生物碱，再以冷苯处理溶出粉防己碱，与其结构类似的防己诺林碱比前者少一甲基而有一酚羟基，不溶于冷苯而得以分离。

利用中草药化学成分，在不同极性溶剂中的溶解度进行分离纯化，是最常用的方法。

广而言之，自中草药提取溶液中加入另溶剂，析出其中某种或某些成分，或析出其杂质，也是一种溶剂分离的方法。

中草药的水提液中常含有树胶、粘液质、蛋白质、糊化淀粉等，可以加入一定量的乙醇，使些不溶于乙醇的成分自溶液中沉淀析出，而达到与其它成分分离的目的。

例如自中草药提取液中除去这些杂质，或自白及水提取液中获得白及胶，可采用加乙醇沉淀法;自新鲜括楼根汁中制取天花粉素，可滴人丙酮使分次沉淀析出。

，提取多糖及多肽类化合物，多采用水溶解、浓缩、加乙醇或丙酮析出的办法。

此外，也可利用其某些成分能在酸或碱中溶解，又在加碱或加酸变溶液的pH后，成不溶物而析出以达到分离。

例如内酯类化合物不溶于水，但遇碱开环生成羧酸盐溶于水，再加酸酸化，又重新形成内酯环从溶液中析出，从而与其它杂质分离;生物碱一般不溶于水，遇酸生成生物碱盐而溶于水，再加碱碱化，又重新生成游离生物碱。

这些化合物可以利用与水不相混溶的有机溶剂进行萃取分离。

一般中草药总提取物用酸水、碱水先后处理，可以三部分:溶于酸水的为碱性成分(如生物碱)，溶于碱水的为酸性成分(如有机酸)，酸、碱均不溶的为中性成分(如甾醇)。

实验四-粉防己生物碱的提取分离与鉴定(1)

实验四粉防己生物碱的提取分离与鉴定（1）【实验目的】1、能够熟练进行粉防己总生物碱的提取。

【实验原理】本实验是根据粉防己生物碱可溶于一般有机溶剂的性质，先用乙醇提取得总碱，再利用粉防己碱、防己诺林碱及轮环藤酚碱的溶解性和极性差异进行分离。

将总生物碱溶于稀酸水，碱化后用苯萃取出粉防己碱，再用三氯甲烷萃取防己诺林碱，轮环藤酚碱为水溶性生物碱，仍留在碱水层；或者将稀酸水碱化后用三氯甲烷萃取出粉防己碱和防己诺林碱。

【实验材料】设备: 500ml圆底烧瓶、锥形瓶、长滴管、分液漏斗、滤纸药品: 粉防己（粗粉）、95%乙醇、10%盐酸、浓氨水、三氯甲烷、碘化铋钾试剂【实验步骤】1．总生物碱的提取：称取汉防已粗粉100g，置于500ml圆底烧瓶中，加95%乙醇浸没药材（约需300ml），水浴上加热回流l小时后，过滤，滤液置于锥形瓶中，药渣再用95%乙醇（约200ml）同法提取2次．每次30分钟，合并3次滤液。

放冷后如有絮状物析出，再过滤一次，澄清溶液浓缩至无醇味，成糖浆状，即得到总生物碱。

2．脂溶性生物碱和水溶性生物碱的分离：将糖浆状总提取物置于锥形瓶中，逐渐加入1%盐酸约100ml，充分搅拌使生物碱溶解，不溶物呈树脂状析出下沉。

静置，滤出上清液，锥形瓶底部的不溶物再用1%盐酸少量多次洗涤，直至洗液对生物碱沉淀试剂反应微弱。

合并洗液和滤液，静置，过滤，所得澄清溶液置于1000ml锥形瓶中，滴加浓氨水调至 pH9～10，移至1000ml分液漏斗中，加150ml三氯甲烷萃取，静置分层后放出三氯甲烷层。

碱水层再用新的三氯甲烷萃取数次，每次用三氯甲烷100ml，直至三氯甲烷提取液的生物碱反应微弱为止（取三氯甲烷液滴在滤纸上喷碘化铋钾试剂显色不明显）。

三氯甲烷液中含脂溶性叔胺碱，而三氯甲烷萃取过的氨性碱水液含有水溶性生物碱。

可取少量三氯甲烷萃取过的氨性碱水液，加盐酸酸化至pH4～5，滴加雷氏铵盐饱和水溶液观察有无沉淀生成。

生物碱类化合物的分离与活性成分鉴定

生物碱类化合物的分离与活性成分鉴定生物碱类化合物是一类含有氮杂环化合物的天然产物，常见于植物、动物和微生物中。

这种化合物具有多种生物活性，如抗癌、镇痛、抗炎、神经调节、抗菌等。

因此，生物碱类化合物的分离和活性成分的鉴定是极其重要的。

本文将介绍分离和鉴定生物碱类化合物的方法和技术。

一、生物碱类化合物的分离生物碱类化合物的分离通常需要采用复杂的技术，包括取样、提取、分离、纯化等步骤。

1. 取样取样是生物碱类化合物分离的第一步。

在进行取样前，需要对样品进行分类、筛选，以确保获得优质的样品。

对于不同来源的样品，需要使用不同的取样方法。

2. 提取提取是从样品中提取化合物的过程。

提取一般采用一种或多种提取剂，如水、有机溶剂、超临界流体等。

提取剂的选择应根据样品的物理化学特性和所需化合物的特点进行优化。

3. 分离分离是将提取得到的混合液按照性质分离得到目标化合物的过程。

常见的分离方法包括薄层色谱、柱层色谱、高效液相色谱、气相色谱等。

在分离过程中，需要对分离条件进行优化，以提高纯化效果。

4. 纯化纯化是将目标化合物从含有其他化合物的混合物中分离出来的过程。

纯化方法包括结晶、再结晶、凝胶过滤、透析和高速离心等。

对于高要求的纯化，还需要采用反相和离子交换色谱等技术。

二、活性成分的鉴定活性成分的鉴定是分离出生物碱类化合物后的重要步骤。

鉴定需要先对化合物进行初步的生物活性测试，然后采用多种技术进行鉴定。

1. 生物活性测试生物活性测试是对生物碱类化合物活性的初步评价。

这种测试可以通过标准的体外和体内技术进行。

常见的生物活性测试有MTT法、溶血试验、小鼠模型试验、细胞毒性实验等。

2. 光谱法光谱法是通过化合物吸收或发射光辐射的特性来判断化合物结构的方法。

常用的光谱包括红外光谱、质谱、紫外光谱等。

这些光谱可以提供化合物的分子式、分子量、官能团等信息，从而辅助鉴定化合物的结构。

3. 色谱法色谱法包括气相色谱和液相色谱。

它们可以分离不同类别化合物，并根据它们的保留时间来确定化合物的相对分子质量和结构。

粉防己中粉防己碱和防己诺林碱的分离制备研究

粉防己中粉防己碱和防己诺林碱的分离制备研究冀德富;王小康;郭嫦娥;裴妙荣【摘要】Objective:To establish a method of separating and preparing tetrandrine and fangchinoline from stephania te-trandra S.Moore. Methods:Tetrandrine and fangchinoline were isolated by column chromatography,and then were identi-fied by TLC. The contents of tetrandrine and fangchinoline were determined by HPLC. Results:The chromatograms of the purified product of tetrandrine and fangchinoline were consistent with the standard product. The contents of tetrandrineand fangchinoline in sample were 100.97%,98.54% respectively. Conclusion:This method is simple and practical.The products are very pure.%目的：建立粉防己中粉防己碱和防己诺林碱的分离制备方法。

方法：采用柱色谱法对粉防己碱和防己诺林碱进行分离，采用薄层色谱法对粉防己碱和防己诺林碱的纯化品进行定性鉴别，采用高效液相色谱法对其进行含量测定。

结果：经薄层色谱法鉴定粉防己碱与防己诺林碱的纯化品与标准品图谱一致；经高效液相色谱法测定，所得样品中粉防己碱和防己诺林碱的百分含量分别为100.97%和98.54%。

生物碱提取分离鉴定

物碱的结构鉴定
（二）波谱法
(包括，IR，NMR，MS等) 包括UV，，包括，等
1. UV法法生色团（羰基、双键、苯基和硝基等）生色团（羰基、双键、苯基和硝基等）在生物碱的整体结构中时，可以反映其骨架类型特征可以反映其骨架类型特征。整体结构中时，UV可以反映其骨架类型特征。 (1) 生色团在整体结构中如：
H
别育亨烷伪育亨烷表别育亨烷
3α-H， 20-αH ， 3β-H， 20-βH ， 3β-H， 20-αH ，
正、别育亨烷有Bohlmann吸收峰别育亨烷有吸收峰
六、生物碱的结构鉴定
3. MS 法此法在生物碱结构测定中多有应用。此法在生物碱结构测定中多有应用。 (1) 母核稳定或由于取代基或边链裂解产生特征离子。母核稳定或由于取代基或边链裂解产生特征离子。主体或整体由芳香结构组成， ① 主体或整体由芳香结构组成，如：4－喹酮、吖－喹酮、啶酮、喹啉去氢阿朴菲等类：啶酮、喹啉去氢阿朴菲等类：
五、生物碱的提取分离
4.酸水提取液+雷氏铵盐等沉淀法: 4.酸水提取液+雷氏铵盐等沉淀法: 酸水提取液药材粉末
稀酸水提取多次
药材残渣
稀酸水部分溶液+沉淀溶液沉淀母液
雷氏铵盐或磷酸盐、硅酸盐等磷酸盐、过滤
沉淀
丙酮溶解
丙酮液
五、生物碱的提取分离
溶液+硫酸铜沉淀溶液硫酸铜沉淀
加入饱和硫酸银
总碱2 总碱
总碱3 总碱
五、生物碱的提取分离
3.水或酸水提取后+ 3.水或酸水提取后+强(弱)酸型阳离子树脂法: 水或酸水提取后酸型阳离子树脂法: 药材粉末
水，或0.5%-1%硫酸或硫酸或乙酸室温或回流提取多次

实验九：防已中生物碱的提取与分离

无水Na2SO4脱水，氯仿液由浑浊变澄清，静置，滤过
滤液
5.回收氯仿（常压回收）
滤液回收氯仿稠浸膏
置蒸发皿于通风厨中蒸干
粉状物
6.丙酮溶解结晶
粉状物
加15ml丙酮溶解
丙酮溶液滴加少量水至浑浊，放置，析晶总生物碱粗品
三：分离（了解）
利用仿已诺林碱比粉仿已碱多一个酚羟基，极性稍大而不溶于冷苯这一性质进行分离。
2.回收乙醇（减压回收）
提取液回收乙醇至稀浸膏，置蒸皿中蒸发至无醇味
浓缩液
3.酸化溶解
浓缩液 1%盐酸100ml分次溶解，静置，滤过（至生物碱沉淀试剂反应微弱为止）酸水液
4.碱化萃取
酸水液置分液漏斗中，氯仿萃取，加浓胺水调pH 至10，振摇萃取三次（70ml,50ml,50ml）氯仿液
实验九：防已中生物碱的提取与分离
一：实验原理利用乙醇提取总生物碱。根据粉防乙碱和防已诺林碱与酸结合溶与水而难溶于有机溶剂，在碱性条件下易溶于有机溶剂而不溶与水的性质反复处理后，再利用两者在冷苯中的溶解度不同，使之相互分离。
ห้องสมุดไป่ตู้ 二：提取 1.乙醇提取
防已粗粉
置500ml圆底烧瓶中，80%～95 %乙醇提取（1.5 h），过滤再提取两次（各1h）提取液合并提取液提取液

北中大中药化学实验指导02基本实验项目-3粉防己生物碱的提取、分离和鉴识

实验三粉防己生物碱的提取、分离和鉴识粉防己亦称汉防己,为防己科植物汉防己（Stephania tetrandra ）的干燥根，是临床常用中药。

具有祛风湿、止痛、利水消肿、泻下焦湿热等功效。

现代药理实验研究表明，汉防己总生物碱具有镇痛、消炎、降压、肌肉松弛以及抗菌、抗肿瘤作用，为主要有效成分。

粉防己中生物碱含量高达5%~2.3%，其中主要为汉防己甲素（tetrandrine ）和汉防己乙素(fangchineline ，又称防己诺林)，还含少量的轮环藤酚碱（cyclanoline ）。

它们的物理性质如下：1. 汉防己甲素和汉防己乙素均为双苄基异喹啉衍生物，氮原子呈叔胺状态。

汉防己甲素 R = CH 3汉防己乙素 R = H汉防己甲素为无色针状结晶，丙酮中结晶有双熔点：126～127℃/217～218℃。

即，在126～127℃先融化，继续加热至153℃固化，温度上升至217～218℃全熔。

不溶于水，石油醚，易溶于乙醇、乙醚、氯仿等有机溶剂及稀酸水溶液。

UV ：λ0.01NHCl max280nm （ε6887） IR ：υKBr max （cm -1）3050，2800，1605，1580，1235，1215，840汉防己乙素为细棒状结晶，同样有双熔点现象，丙酮中结晶mp134～136℃/238～240℃，甲醇中结晶mp177～179℃/238～240℃。

溶解度与汉防己甲素相似，，但极性稍大，故在冷苯中溶解度小于汉防己甲素，而在乙醇中的溶解度大于汉防己甲素。

具有隐性酚羟基，不溶于NaOH 溶OMe O C H 3O OMeNMeO CH 3H液。

2. 轮环藤酚碱轮环藤酚碱氯化物无色八面体状结晶，mp214～216℃碘化物无色绢丝状结晶，mp 185℃苦味酸盐黄色结晶，mp 154～156℃轮环藤酚碱为水溶性季铵型生物碱，不溶于低级性有机溶剂。

UV ：λMeOH max nm （logε）223（4.18），286（3.88） IR ：υKBrmax （cm -1）3200，1610，1580，1500， 1280，1245， 885，800一、实验目的1．掌握生物碱的乙醇提取方法以及脂溶性生物碱与水溶性生物碱分离。

汉防己中生物碱的提取、分离和鉴定

2、色谱检识、色谱材料：硅胶G-CMC-Na硬板色谱材料：硅胶硬板点样：汉防己总碱、点样：汉防己总碱、汉防己甲素和汉防己乙素的0.1%醇溶液乙素的醇溶液展开剂：氯仿—丙酮甲醇（ ∶ ∶ ）丙酮—甲醇展开剂：①氯仿丙酮甲醇（6∶1∶1）氯仿—乙醇乙醇（ ∶ ） ②氯仿乙醇（10∶1）甲苯—丙酮乙醇（ ∶ ∶ ）丙酮—乙醇 ③甲苯丙酮乙醇（4∶5∶1）显色剂：改良碘化铋钾试剂显色剂：观察记录：观察记录：记录图谱及斑点颜色
Oe M H3C N O R O O Oe M N CH3
汉防己甲素 R=CH3 汉防己乙素 R=H
实验器材：实验器材：试药：汉防己、乙醇、盐酸氯仿、盐酸、试药：汉防己、85%乙醇、1%盐酸、氯仿、乙醇氨水、氢氧化钠无水硫酸钠、氧化铝、氢氧化钠、氨水、1%氢氧化钠、无水硫酸钠、氧化铝、丙酮、环己烷、甲醇、改良碘化铋钾试剂、丙酮、环己烷、甲醇、改良碘化铋钾试剂、碘-碘化钾试剂、碘化汞钾试剂、硅钨酸试剂碘化钾试剂、碘化汞钾试剂、碘化钾试剂等仪器：回流装置、圆底烧瓶、分液漏斗、仪器：回流装置、圆底烧瓶、分液漏斗、层析柱、漏斗、薄层板、乳钵、量筒、烧杯、析柱、漏斗、薄层板、乳钵、量筒、烧杯、试管等
实验四汉防己中生物碱的提取、提取、分离和鉴定
实验目的：实验目的： 1、掌握一般叔胺生物总碱的提取和纯化方法。、掌握一般叔胺生物总碱的提取和纯化方法。 2、熟悉柱色谱法分离生物碱的操作技术。、熟悉柱色谱法分离生物碱的操作技术。 3、掌握生物碱的鉴定方法。、掌握生物碱的鉴定方法。
实验原理：实验原理：根据大多数生物碱或生物碱盐均能溶于乙醇的通性，利用乙醇提取总生物碱。的通性，利用乙醇提取总生物碱。利用季铵型生物碱易溶于水，型生物碱易溶于水，不溶于亲脂性有机溶剂的性质，的性质，用溶剂萃取法分离脂溶性生物碱和水溶性生物碱；水溶性生物碱；根据汉防己甲素和乙素和酸结合成盐而易溶于水，难溶于亲脂性试剂，结合成盐而易溶于水，难溶于亲脂性试剂，在碱性条件下易溶于亲脂性试剂不溶于水的性质反复处理后，性质反复处理后，在利用两者在冷苯中溶解度的不同，使它们相互分离。度的不同，使它们相互分离。

汉防己生物碱的提取

汉防己生物碱的提取汉防己生物碱的提取、分离与鉴定汉防己为防己科千金藤属物Stephania tetrandra S. Mcore的根，是祛风解热镇痛药物，其有效成分为生物碱。

主要是汉防己甲素和汉防已乙素。

临床上除用作治疗高血压、神经性疼痛、抗阿米巴原虫外，还将粉防已生物碱的碘甲基、或溴甲基化合物作为肌肉松弛剂应用，此外汉防已甲素在动物实验中有抗癌和扩张血管的作用。

一、目的要求通过汉防己中几种生物碱的提取分离和鉴定，要求掌握下列知识和技能。

1．生物碱的一般提取方法。

2．纯化单体的方法及薄层层析鉴定二、已知生物碱的结构和性质汉防已根中总生物碱含量为1.5~2.3%，主要为汉防已甲素，含量约1%，汉防已乙素，含量约0.5%；轮环藤酚碱，含量为0.2%；以及其它数种微量生物碱。

1．汉防已甲素（T etrandrine，汉防已碱，粉防已碱）无色针晶，不溶于水和石油醚，易溶于乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和氯仿等有机溶剂及稀酸水中，可溶于苯，mp 216℃，有双熔点现象，自丙酮中结晶者，150℃左右熔后加热又固化，至213℃复熔。

NOCH3OROCH3OCH3ONCH3CH3H HR=CH3 R=H 汉防己甲素汉防己乙素O2．汉防已乙素（Fangchinoline, 又称防已诺林碱，去甲粉防已碱）溶解行为与汉防已甲素相似，因有一个酚羟基，故极性较汉防已甲素稍高，在苯中的溶解度小于汉防已甲素而在乙醇中又大于汉防已甲素。

籍此可以相互分离，用不同溶剂重结昌时，其晶形和溶点不同：乙醇细棒状结晶mp 245~40℃甲醇细棒状结晶mp177~9℃丙酮六面粒状晶mp134℃吡啶-甲醇mp 121~2℃环已烷-EtocAc mp 156℃3．轮环藤酚碱（Cylanoline ）为水溶性季铵生物碱，不溶于极性溶剂，氯化物为无色，八面体状结昌，mp 214~6℃，碘化物为无色绢丝状结晶，mp185℃；苦味酸盐为黄色结晶，mp154~6℃。

实验三粉防己生物碱的提取分离与鉴定

实验三粉防己生物碱的提取分离与鉴定1 实验目的1.1生物碱的一般提取方法。

1.2 用低压柱层析分离，纯化单体的方法及薄层层析鉴定2 实验原理2.1 生物碱大都能溶于氯仿、甲醇、乙醇等有机溶剂，除季铵碱和一些分子量较低或含极性基团较多的生物碱外，一般均不溶或难溶于水，而生物碱与酸结合成盐时则易溶于水和醇。

基于这种特性，可用不同的溶剂将生物碱从中药中提取。

常用的提取方法包括有溶剂提取法、直接提取法（水溶性生物碱、季铵碱）、离子交换树脂法（如麦角新碱类、东莨菪碱、咖啡因等）和沉淀法。

2.2 一种植物中往往含有几种或几十种生物碱。

因此，提取出来的总生物碱还需进一步分离，去除杂质、排除干扰物，保证分析结果的准确性。

一般纯化的方法可析出结晶的生物碱用重结晶法；挥发性生物碱可用水蒸气蒸馏法；易升华的生物碱用升华法提取得到单体。

由不同沸点组成的液体生物碱总碱，往往可通过常压或减压分馏分离。

如毒芹中的毒芹碱和羟基毒芹碱，石榴皮中的伪石榴皮碱、异石榴皮碱和甲基异石榴皮碱等都可通过减压分馏法分离出来。

许多生物碱的盐比游离碱更易于结晶。

因此，可利用其在各种溶剂中的不同溶解度进行分离，之后再转变成游离碱。

3 实验材料材料：汉防己4实验步骤4.1 生物碱的提取分离4.1.1 总生物碱的提取和亲脂性与亲水性生物碱的分离100g0.5%H2SO4液渗漉（注一）倍量V/V）pH9~10，静置，抽滤泥黄色沉淀（水溶性季铵碱及水溶性杂质）将沉淀与静砂拌匀（注二）80℃烘干，置索氏提取器中用乙醚（约180ml）提取至提尽生物碱（注三）回收乙醚（注四）乙醚提取物用95%乙醇40~60ml回流热溶后倾入500ml水中，加30gNaCl盐析水溶上加热至凝结，静置抽滤白色沉淀（亲脂性叔铵总碱，以汉防己甲素、乙素为主）注一：将汉防已粗粉加适量酸水液，以能将生药粉末润湿为度（约150ml），充分拌匀，放置半小时，均匀而致密地装入渗筒内，用锥形瓶底部或其它平底工具压紧，供渗漉用，流速约1.5ml/分。