青紫兰兔的生物净化技术探讨
实验用新西兰兔绿脓假单胞菌病的诊断与防治
实验用新西兰兔绿脓假单胞菌病的诊断与防治
新西兰兔绿脓假单胞菌病是一种兔子常见的疾病,可引起兔子膜性肺炎、败血症等症状,给兔子养殖带来很大的经济损失。
为了诊断与防治新西兰兔绿脓假单胞菌病,需要进行以下实验。
第一步:样品采集
从患有疑似绿脓假单胞菌病的兔子肺部或其他组织中采集样品。
可以选择采用肺泡灌洗液、血液、脾脏、肝脏等组织样品。
第二步:细菌培养
将采集到的样品进行处理,进行绿脓假单胞菌的培养。
可以使用MacConkey培养基、血琼脂培养基等进行细菌培养。
第三步:生物学鉴定
通过绿脓假单胞菌的形态、生物学特性进行鉴定。
可以观察细菌的形态、生长速度及生长形态等来进行鉴定。
第四步:免疫学检测
可以进行免疫学检测来进一步确认疾病的结果。
可以使用ELISA检测法、酶联免疫吸附试验以及PCR技术等。
第五步:治疗与预防
对于绿脓假单胞菌病可以使用抗生素进行治疗,一般选择头孢拉定、加替沙星等抗生素进行治疗。
在防治上,需要注意做好卫生消毒、加强饲养管理及预防性接种等工作。
总结
诊断与防治新西兰兔绿脓假单胞菌病是一个比较综合性的工作,需要结合多种方法和技术。
通过以上实验步骤可以清晰地了解绿脓假单胞菌病的诊断及预防,为预防和控制绿脓假单胞菌病提供有用的技术参考。
新西兰兔的饲养环境消毒方法
新西兰兔的饲养环境消毒方法新西兰兔
新西兰兔的饲养中,每天都要做的就是环境的消毒,每天常规的消毒、出栏后的清洗消毒、饲养场废料的有机处理,每一步都关系到阻隔饲养场的疾病传播,消毒的方法有很多种,可以根据情况具体的来进行选择。
一、物理消毒法
1.清扫、冲刷、擦洗、通风换气;此类为机械性的消毒法,是最常用、最基础的消毒法,简单易行。
机械性消毒并不能杀灭病原体,但可大大减少环境中的病原体,有利于提高消毒方法的消毒效果,并可为家兔创造一个清洁、舒适的环境。
2.阳光曝晒有加热、干燥和紫外线杀菌三个方面的作用,有一定杀菌能力。
在日光下暴晒2~3小时可杀死某些病原体,此法适用于产箱、垫草和饲草饲料等物的消毒。
3.紫外线灯照射:紫外线灯发出的紫外线可杀灭一些微生物。
主要用于更衣室、生产区入舍通道等的消毒,一般照射不少于30分钟;
4.煮沸:煮沸30分钟,可杀灭一般微生物。
适用于注射器、针头及部分金属、玻璃等小器械用具的消毒。
5.火焰消毒:这是一种最彻底而又简便的消毒法;用喷灯(以汽油或液化气或酒精为燃料)火焰直接喷烧笼位、笼底板或产箱,可杀灭细菌、病毒和寄生虫。
二、生物热消毒法
是利用土壤和自然界中的嗜热菌,来参与对兔粪尿及兔舍垃圾(饲草、饲料残渣废物)的堆肥发酵,利用其产生的大量生物热来杀灭多种非芽胞菌和球虫等寄生虫的消毒法;
三、化学药物消毒法
是利用一些对人、畜安全无害,对病源微生物、寄生虫有杀灭或抑制作用的化学药物进行消毒的方法。
此法在家兔生产中广为使用,不可缺少。
理想的消毒剂应对人、兔无毒性或毒性较小,而对病源微生物有强大的杀灭作用,且不损伤笼具物品,易溶于水,价廉易得。
膀胱无细胞基质在青紫蓝兔组织工程膀胱替代手术中的应用研究
严泉 剑等 : 膀胱无细胞基质 在青 紫蓝免组织工程膀胱替 代手 术中的应用研究
膀 胱无细胞基质在青紫蓝兔组织工程膀 胱替代手术 中的应用研 究
严泉剑 邵 国兴 张宇梅 刘 海军。郭金 龙。刘恩靖 金 小明。李六金 王 。 , , , , , , ,
氮 钠) 中搅拌 5 去脂膜 。最 后获 取 的无细 胞基 锁边 缝合于 三 角 区。 三 角 区将 8 ~6h溶 从 F硅胶 管 逆行插 人 尿 质生 物材料在 P S中洗 3遍 。 4℃在 l 硫酸新霉 道 。8 B 置 0 F的耻 骨上 管 由粘 膜 下 隧道 置于 三 角区 。耻骨 上 素 中储存 待用 。
膀 胱 内表面 , 液 间 隔为 1 4 平滑 肌 细胞 按 同 换 2 h。 8 h后
l 材 料 和 方 法 1 1 材 料制备 .
膀胱 无细胞基 质 生物 材料按 Peht 的改进 方 i oa等 c
样方 法接 种于 外表 面
14 膀胱 切除与重建 .
腹部 正 中切 口暴露 膀 胱 , 离 两侧 输尿 管 。 开膀 分 切
使部分细胞溶解。 溶解时问视组织块大小和厚度而定。 损 伤输尿 管 。6只 动物 三 角 区缝 闭后 不做 任 何处 理 ( n 在5 0mL 含 2O0Ku l O nt 位 D z单 NA 酶 (ima t Sg ,S. 一 6第 1组 , ; 用 组织 工 程 膀 胱 ( AMG 复 合细 , A) 7只 B
4周 , 与无细胞基质材料 复合成组 织工程膀胱 , 1 3 平 滑 肌 及 上 皮 细 胞 培 养 . 对 同一 兔 实 施 膀 胱 次全 切 术 , 组 织 工程 膀 胱 用
温 的角 朊细胞 培养 基 中保 存 。
收 获细 胞 培 养方 法 如 文献 所 述 , 检 标 本 的 碌 活
青紫蓝兔的生活环境,青紫蓝兔的食物选择
青紫蓝兔的生活环境,青紫蓝兔的食物选择青紫蓝兔的生活环境青紫蓝兔饲养青紫蓝兔时,要注意环境的布置以及兔笼的摆放位置,有一些主人会将兔笼放在阳台,其实这是不合理的做法,尤其是在北方,冬天的阳台是很冷的,兔子很容易感冒。
一、阳光和通风的要求不要把兔笼放在阳光能够直晒到的地方,深秋、冬天、早春能晒得到太阳固然不错,但其他季节就不适合了,会发生中暑。
要放在能够通风的地方,但不能放在风口,让风直吹到的位置不适合。
二、温度和湿度的要求要考虑为兔笼安排一个冬天相对暖和,夏天相对通风凉爽的位置。
一定要干燥,潮湿的位置,例如厕所,会飘到雨的位置尤其不适合,会滋生疾病!三、清洁方面的要求环境一定要打扫干净,不能有灰尘,无法清扫到的角落,例如塞满杂物的床底等要禁止兔兔前往,这不仅仅是让兔兔的身体保持干净,同样也是预防疾病。
四、离空调的距离兔笼的位置要远离空调出风口,空调开关的瞬间造成的大温差会使兔兔患病,尤其是患上感冒。
五、阳台露台不适合养兔即便封了窗户,但阳台上的温度依旧是冬天冷于室内,夏天比室内热很多。
除非封窗能做得很好,没有这方面问题。
青紫蓝兔的食物选择青紫蓝兔一些家长们在饲养青紫蓝兔时,为了保证其营养的均衡,通常会将多种兔粮混合饲喂,认为这样可以保证吸收到不同的营养,你觉得这样做真的合理吗?一、兔粮混吃真的好么家长们混合多种兔粮,其实是破坏了每一款兔粮本身拥有的均衡。
有些品牌兔粮,其实不存在均衡不均衡的问题,而是适合不适合的问题,它或许会不适合你的兔子,或者不适合某个地区的兔子。
并且如果真的营养配比不均衡,也不是我们混一下能混均衡的。
二、多种兔粮混合可能发生的问题首先是造成兔子挑食。
青紫蓝兔每天都有多种选择,很可能培养出挑食的坏毛病。
这个现象确实不少兔妈反应过。
其次是可能增加青紫蓝兔消化道的负担,因为它的消化道要适应多种食物。
消化道不是很强劲的青紫蓝兔尤其不适合吃混合粮!如果你发现某款兔粮你的青紫蓝兔吃了似乎不好,或者你听闻某款兔粮有某个弊端你无法释怀,那索性换掉它换别的牌子。
实验用新西兰兔绿脓假单胞菌病的诊断与防治
实验用新西兰兔绿脓假单胞菌病的诊断与防治【摘要】实验用新西兰兔绿脓假单胞菌病是一种常见的实验动物疾病,严重影响实验结果和动物健康。
本文从病因分析、临床表现、诊断方法、治疗方案和预防措施等方面全面介绍了该疾病的诊断与防治。
研究表明,该病主要通过污染的饲料和环境传播,临床表现包括消化系统症状和呼吸系统问题。
诊断方法主要依靠实验室检测和病理分析,治疗方案包括抗生素治疗和支持疗法。
为了预防该病的发生,必须加强动物环境卫生管理和定期检查动物健康状况。
通过本研究,我们可以更好地了解该疾病的诊断与防治方法,为实验动物的健康和实验结果的准确性提供保障。
希望未来能够进一步探讨相关治疗方法的改进和动物疾病预防的新途径。
【关键词】关键词:新西兰兔, 绿脓假单胞菌, 病因, 临床表现, 诊断方法, 治疗方案, 预防措施, 实验结论, 展望1. 引言1.1 研究背景实验用新西兰兔绿脓假单胞菌病是一种常见的实验动物疾病,可能导致严重的健康问题和实验结果的扭曲。
绿脓假单胞菌是一种革兰氏阴性杆菌,常见于环境中,可引起动物和人类感染。
目前,对于实验用新西兰兔绿脓假单胞菌病的诊断和防治仍然存在一定的挑战和争议。
研究背景部分旨在对该疾病的相关情况进行介绍和阐述,深入探讨其发生机制和病因,为后续的诊断与防治提供理论依据。
通过对疾病的背景知识进行全面分析,可以更好地理解该病的病理生理过程,为研究的深入展开奠定基础。
研究背景的重要性在于为本文的内容提供全面的信息,并引导读者对实验用新西兰兔绿脓假单胞菌病有更深入的了解。
1.2 研究目的实验用新西兰兔绿脓假单胞菌病是一种严重威胁实验动物健康的疾病,引起了广泛的关注。
本次研究的目的在于探讨该病的诊断与防治方法,为实验动物的健康提供有效保障。
通过深入分析病因、临床表现和诊断方法,我们旨在为实验室动物医学领域提供更为全面和科学的治疗方案,以提高实验动物的生存率和健康水平。
在本次研究中,我们将结合实验数据和临床观察,总结出针对该病的有效治疗策略,并探讨未来可能的预防措施。
医学实验动物学
• 普通动物 1 普通开放性饲养环境 2 普通实验动物饲料 3 不携带人兽共患病病原 4 不携带动物烈性传染病病原 绝对排除:鼠痘病毒、流行性出血热病毒
• 清洁动物 1 饲养于亚屏障系统 2 需要辐照饲料 3 必须排除:多杀巴氏杆菌、嗜肺巴氏杆菌、波氏杆菌、肺 支原体、泰泽氏菌、鼠棒状杆菌等 4 必要时检查:小肠结肠炎耶氏菌、大肠杆菌、皮肤病原真 菌、李氏杆菌等
门新兴学科。前者是以实验动物本身为对象,专门 研究它的育种、保种、生物学特性、繁殖、饲养管 理以及疾病的诊治和预防等,以期达到培育标准的实 验动物;后者是以实验动物为材料,采用各种方法 在动物身上进行实验,研究动物实验过程中实验动物 的反应、表现及其发生发展规律等,着重解决实验 动物如何应用于各个科学领域,为生命科学和经济 建设服务
精品课件
• 无菌动物(GF)
1 不携带任何生命体 2 隔离器饲养(无菌环境) 3 饲料、饮水需保证无菌 • 体内、外无任何可检测出的活的微生物和寄生虫的动物。来 源于无菌手术剖腹取胎,饲养在无菌隔离器内,人工喂乳或 保姆代养培育而成
• 悉生动物(GN)
1 来自无菌动物 2 人工接种单菌、双菌、三菌或多菌(已知菌) 3 其他条件同无菌动物 • 来源于无菌动物,体内携带有已知微生物的动物。饲养在隔 离器中
个近交系杂交而成 杂交群 (Cross Breeding colony) 两种不
同品系杂交,利用杂交一代 F1杂交优势 突变系(Mutant strain)具有特殊突变基
因的品系动物,正常染色体基因发生突变,并具有 各种遗传缺陷的动物
精品课件
• 按微生物控制的程度,目前我国将实验动物 分为四个等级
parasitology)
• 研究实验动物的微生物、寄生虫等病 原对实验动物的影响,疾病防治等
蓝色生物技术在海洋开发中的应用
蓝色生物技术在海洋开发中的应用随着环保理念的不断深入人们心灵,人们对海洋的保护也变得越来越重视。
而在保护海洋的同时,如何更好地开发利用海洋资源也成为了人们关注的重点。
在这个问题上,蓝色生物技术的应用成为了海洋开发的重要方式。
蓝色生物技术是指以海洋蓝色生物为研究对象,开展的一系列生物学领域研究与应用的总称。
蓝色生物技术的应用,不仅可以制备医学和食品工业基础原料,同时也能为海洋环境的污染治理提供一些可能的解决方案。
一、蓝色生物技术在海洋药物研发中的应用海洋中的生物可谓是天然的药房。
在100多万种已知的海洋生物中,大量的生物具有药用价值。
由此,海洋药物研发成为了蓝色生物技术的一大应用领域。
目前,海洋生物从杏仁酸钙到腺苷肌苷、都已经成为了药物研制中不可或缺的组成部分。
例如,从深海海绵提取的药物海绵素A,已成为治疗艾滋病的常用药物之一。
此外,海洋生物还产生了一些高效的抗肿瘤化合物,如植物生长抑制物质、静脉卟啉类化合物等。
这些新型药物的研制,对于现代医学的发展具有举足轻重的意义。
二、蓝色生物技术在海洋食品加工中的应用近年来,随着人们健康饮食的需求的不断提高,海洋食品的开发与研究也已进入了高速发展期。
其中,蓝色生物技术的应用也为海洋食品的开发提供了新思路。
海洋食品中的蛋白质、多糖、脂肪等成分,都是蓝色生物技术为之提供的重要原材料。
例如,海藻多糖、蛤蜊多肽等蓝色生物素材被广泛应用在海洋食品加工中。
这些天然高品质的海洋生物成分,具有多种生理活性、生物活性和营养成分,因而极具开发价值。
而且,由于蓝色生物素材具有天然、绿色、健康、营养等特点,更加适合食品企业创新开发出具有健康价值的新鲜、安全海洋食品。
三、蓝色生物技术在海洋环境污染治理中的应用众所周知,海洋环境越来越遭受到人类活动的破坏或污染,阻碍了海洋的天然生态平衡。
如何更加有效地保护和治理海洋环境已成为当代全球性问题。
在海洋环境污染治理上,蓝色生物技术的应用也有着重要的作用。
实验兔的养殖与管理——大学生创业项目报告
相应 的机构与学术 团体 , 加强 了相应 教学与科研 , 逐步建 立和
( 一) 大 兔 必须 实行 单 笼 饲 养 大 兔 是 指 4月 龄 以 上 的青 年
完 善 实验 动 物 质 量 监 测 体 系 , 加 强 了 实 验动 物 的 营养 与 饲 养 的 后 备 种 兔 , 能繁 种 公 、 母 兔 。大 兔 必 须 实 行 单 笼 饲 养 , 是 因 为 兔 科学研 究, 开展 了国际交流等等 , 使 我 国 实验 动 物 科 学 有 了很 子 在 达 到 性 成 熟 的 年 龄 , 即4 - 4 . 5月 龄 后 , 在群养 的条件下 , 常 大发展。 出现公兔与公兔、母兔与母兔打架斗咬致严重伤残的现象 , 严
验动物 品种 , 但 规模 极小 , 使用 范围也相 当窄 , 发展 极为缓慢 。 建 国后 , 包括 实验兔在 内的实验动物 规模 开始发展 , 建 立了 一
二、 实 验 兔 养殖 的基 本 要 求 根 据 家 兔 的 生 活 习 性 和 生 理 特 点 如胆 小 怕 惊 、昼 伏 夜 行 、
实验 兔是实验动 物中 的一种 ,符合实验 动物的规 范 与要 重 影 响 种 兔 繁 殖 质 量 。所 以 , 种用 兔 到 4月龄 后 必 须 实 行 单 笼 求 。根据科学研究 的要求定 向培育而成 , 它 是 一种供 科学实验 饲 养 。 的载 体、 对 象和材料 : 具有 明确 的生物学特 性和清楚 的遗传背
业项 目实践 , 对实验兔养殖的历程、 特点、 分类 以及 实验兔养殖 、 管理过程 中的基本要 求与技术进行 了总结。
关键词 : 实验兔 ; 养殖; 管理 ; 创业 多年 来, 实验 兔不仅作 为一种产 品、 商 品在兔 业界崭露 头 兔在 生命科学 中的作用 , 如物理化学实验中所需的精密仪器和 角, 实验兔 充当着非常重要 的安全试验 、 效果试验、 标准试 验的 高 纯 度 的化 学试 剂 一 样 , 具有较 高的敏感性 、 较 好 的 重 复 性 和 角色 , 是现代 化科学 实验研 究的一个必不 可少 的条件 , 已受到 反应 的一 致 性 等特 点 。因此 , 必须通过训化培育, 才 能 获得 遗 传
蓝色生物技术的研究与应用
蓝色生物技术的研究与应用蓝色生物技术是指利用海洋生物和海洋资源开展研究和应用的理论和技术。
在现代生物技术发展中,蓝色生物技术已经成为了一个备受关注的领域。
海洋相对于陆地而言具备着不可替代的独特性,其生物种类的丰富和栖息环境复杂性,使得在海洋生物类研究中,所涉及的科学问题更加多样且复杂。
因此,蓝色生物技术的研究和应用具备着极高的研究价值和前景。
一、海洋生物资源的探索和开发蓝色生物技术是指利用海洋生物和海洋资源开展研究和应用的理论和技术。
在现代生物技术发展中,蓝色生物技术已经成为了一个备受关注的领域。
海洋相对于陆地而言具备着不可替代的独特性,其生物种类的丰富和栖息环境复杂性,使得在海洋生物类研究中,所涉及的科学问题更加多样且复杂。
因此,蓝色生物技术的研究和应用具备着极高的研究价值和前景。
在各种海洋生物资源的探索和开发过程中,实施环保意识和行动显得尤为必要。
在探索和开发过程中,应尽量避免造成环境污染和对海洋生态环境的影响。
可以采取一些有效的措施,例如严格控制工业废水、工业渣滓、污水、废气等的排放,避免对海洋生态环境的污染,保护海洋生物种群的丰富性和数量,从而更好地实现对海洋生物资源的保护和探索。
二、蓝色生物技术在食品加工中的应用在食品行业中,海洋生物提供着丰富和多样的食材资源,海洋食品的营养价值和健康价值也受到越来越多的关注。
海带、海藻、贝类、海鱼等海洋食品在市场上非常受欢迎。
在海洋食品的加工过程中,蓝色生物技术的应用已经起到了很大的作用。
例如,利用海洋生物和微生物发酵工艺,可以生产出适合人体摄入的高蛋白、低成本的蛋白粉;通过海洋生物的细胞培养和提取技术,可以提取出人体所需的多种脂肪酸以及其他营养成分。
这些海洋生物提取物可以广泛地应用于食品、保健品、医药等多个领域,为人类的健康和生活带来更多的变化。
三、蓝色生物技术在医药领域的应用蓝色生物技术在医药领域的应用也引起了广泛的关注。
利用海洋生物资源开展医药研究已经成为一种趋势。
剖腹净化建立清洁级獭兔核心群关键技术探讨
福建畜牧兽医第38卷第6期2016年剖腹净化建立清洁级獭兔核心群关键技术探讨翁顺太1姚尧2郑忠东1郑立锋1吴润生2陈先进2詹先强2*(1.福建省人兽共患病研究重点实验室福建省疾病预防控制中心,福州350001;2.福州大北农生物技术有限公司,福州350014)摘要为研究獭兔在生物医药领域中的作用,对非等级獭兔进行实验动物化研究,成功建立了清洁级獭兔核心种群。
采用剖腹净化技术取得清洁级仔兔,以SPF 级日本大耳白母兔作为代乳母兔哺育至离乳。
对10只经产非等级母獭兔进行剖腹取得48只仔獭兔;离乳时成活36只,成活率为75%(其中2只由于预产期判断失误,剖腹取出的13只仔兔无法自主哺乳全部死亡,故不予统计)。
经过质量检测,符合清洁级实验兔国家标准。
本方法用于建立清洁级獭兔核心群是可行的,但关系培育成功与否的几个关键问题应值得注意。
关键词剖腹净化清洁级獭兔核心群建立关键技术文献标识码:B文章编号:1003-4331(2016)06-0044-02动物种质资源综合开发和实验动物化一直是实验动物学科发展的重点内容之一。
多年来,实验动物科技工作者相继开展了许多种类的野生动物或经济动物的实验动物化研究工作,为肝炎、心血管病、血吸虫病、异种器官移植等研究提供了广泛而又丰富的实验材料。
为探索獭兔在生物医药领域中的特殊用途,本实验室成功地将其进行实验动物化,积累了一些宝贵经验。
现将建立清洁级獭兔核心群过程中积累的几个关键技术问题予以探讨。
1代乳母兔与獭兔的选择及准备1)代乳母兔的选择关系到动物母性的好坏(即能否主动、安静地予以哺乳)、泌乳能力和哺育仔兔数量。
应选择繁殖能力强、乳头4对以上、外阴端正、第二或第三胎的经产种母兔;母性好,无食仔、咬仔等恶癖;注意坚决不能采用第一胎的母兔。
由于沟通不准确,本实验室引进的是第一胎孕兔且有的只有3对乳头,结果有2只在代乳过程中出现泌乳不足、带仔能力差的现象,剖腹取出的48只仔兔中被咬死、踩死,因营养不足而死亡的累计达12只之多,离乳成活率仅为75%,这与代乳母兔的性能关系密切。
学海无涯小组
用水葫芦、2植水花物生净等化7种的草本利植用物与净化发酸展性造纸废水结果表明,废水的pH值最低不能低于5. 废 因水此中可有 见机 ,污 植2染 物.1物 净水浓 化生度 能高力高低 大等、 小植关N和系物P到含净净量化化大效技小率以术的及的高污低优染。物势是否易降解等性质,对植物净化效率而言很重要。 华南环科所进水行了生2高年的等实植验物,对治华理南污地区水11是种一高等种水新生兴植物的从生净物化能工力程、技抗逆术性,、有管理以难下易、4个综合优利点用:价值①和成美本化景低观,等对5项环方面综 合评价,筛境选扰出动黑藻小和;假②马齿有苋利为于较优保净护化和物种改。善原有环境,有较高的美化环境价值;③治理污染时可以收 因此可见,获植植物物净化和能生力物大小能关源系,到净获化得效经率的济高效低益。 ,如水葫芦净化塘,每年每公顷可产沼气58400m3, ⑴可继续采折用合水节生植约物标多准种组煤合4建6配.7置2t或;多④级水操生作植简物串单联,塘,少形,成一其定基的建净化层、次运,转这样费有用利和于生能长耗期均和净为化常功规能的二季级节处性交理替互 补。 方法的1/3~1/5. 如水用凤生水莲 高 葫处等芦理植、炼物水2目油治花.2废理生前现水污等水状实水7种生施是问草运一高本题行种等植最新物植佳兴净条的物化件生净酸为物性化:工造程6污纸5技m水废g术/水还,L结有<存果C以O在表下D明着4,个一废优些水点的:问①pH题成值。本最低低首,不先对能环,低境于管扰5理.动小上;控制不当,未能及时打捞 如凤莲处理过炼剩油的废水或实干施枯运行的最植佳物条件残为体:,65m就g/会L致<C使OD二<13次0m污g/染L,的临产界生有效(点如为富CO营D=养2化62.、有毒物质的释放)。 1、整棵放其进污次水,里一,每种一植天物检查一一般次只,查能看吸PH收值降。解一种或有限的几种环境污染物,而对其他浓度高的污染 水生植物凤物莲可净能化富会营中养毒化湖,水因滞此留时对间于≤2推d时广,作净化用结有果不局明限显性;。再次,水生植物自身在污水生长,极易在水 因此可见,面植屏物蔽净化产能生力自大小屏关蔽系效到净应化,效会率的压高迫低环。 境;同时,密度过大也会滋生蚊虫细菌。第四,不能科 由于其无性学繁地殖筛速度选极出快抗,现性已大广的泛分植布物于,华北并、且华净东、化华的中、系华统南工和西艺南设的计19也个省未市考,虑尤以最云优南(化昆配明置)、和江后苏处、浙理江问、题福建,、四 川、湖南、导湖致北净、河化南效等果省的不入明侵显严重,,效并率已扩不散高到。温带地区,如锦州、营口一带均有分布。 11、 水整生棵高放等进植污物2.水净3里化今,技后每 术的一的天优发检势展查方一次向,查看PH值。 凤眼莲对其生⑴活的可水继面续采取采了用野水蛮的生封植锁物策略多,种挡组住阳合光建,配导致置水或下多植物级得水不生到足植够物光串照而联死塘亡,,破形坏成水一下动定物的的食净物化链层,导次致,水生 动物死亡。这样有利于生长期和净化功能的季节性交替互补。
兔源内毒素结合蛋白的提取纯化及体外生物学活性研究
论著文章编号:100025404(2003)0620514205兔源内毒素结合蛋白的提取纯化及体外生物学活性研究葛晓冬1,刘友生1,王晓东1,潘 峰2,周 萍3 (第三军医大学:1附属西南医院病理学研究所;2高原军事医学系中心实验室,重庆400038;3附属大坪医院野战外科研究所分子生物学中心,重庆400042) 提 要:目的 从烧伤合并内毒素血症损伤兔的血清中分离纯化出内毒素结合蛋白(Lipopolysaccharide2Binding Protein LBP),以研究LBP在烧伤复合内毒素血症中的作用。
方法 兔血清中蛋白质通过二步离子交换层析(Bio2Rex70Resin、M ono2Q)及凝胶过滤来分离纯化,并经流式细胞分析实验、绵羊红细胞凝聚实验、氨基末端氨基酸残基测序等方法鉴定,再将LBP作用于体外培养的人单核细胞(U937),观测其分泌T NFα等细胞因子的状况。
结果 获得一种分子量为60×103蛋白质,其N端10个氨基酸序列为T NPG LITRIT,与NC BI蛋白质库中有关兔的氨基酸序列进行比较,发现其与LBP的序列相同,它能促进脂多糖(Lipopolysaccharide LPS)与外周血单核细胞(P BMC)结合,并能促进U937在极低浓度的LPS用下分泌T NFα。
结论 从血清中分离纯化带有生物活性、全长LBP是可行的,LBP能促进极低浓度的LPS与单核细胞结合,介导炎性因子的分泌,从而促进炎症反应的发生。
关键词:内毒素结合蛋白;脂多糖;二步离子交换层析;凝胶过滤;肿瘤坏死因子α 中图法分类号:R392.11;R341;R446.1 文献标识码:AA study of the extraction and purification of rabbit lipopolysaccharide2binding protein and its biological function in vitroGE X iao2dong,LI U Y ou2sheng,W ANG X iao2dong,PAN Feng,ZH OU Ping(Department of Pathology,S outhwest H ospital,Third Military Medical University,Chongqing400038,China) Abstract:Objective T o purify and extract the lipopolysaccharide2binding protein from the serum in rabbits in2 flicted with injury due to burn com plicated with endotoxemia s o as to study the principal biological function of the pro2 tein.Methods The protein of the rabbit serum was purified and extracted by tw o2step ion2exchange chromatography (Bio2Rex70Resin,M ono2Q)and gel chromatography,and was determined with fluorescence activated cell s orter (FACS)experiment,agglomerate experiment of sheep erythrocyte and NH22amino acid sequence determination.At last LBP was added to the culture of human m onocyte(U937)to observe the changes of the tum or necrosis factor al2 pha(T NFα)in the culture.Re sults A kind of protein with m olecular weight being60kDa was acquired from the serum.Its NH22terminal amino acid sequence was T NPG LITRIT.A fter com paris on with the rabbit amino acid se2 quence bank of NC BI(National Center for Biotechnology In formation),it was proved to be the same sequence as that of LBP.The protein could prom ote the binding of LPS(lipopolysaccharide)with peripheral blood m ononuclear cells (P BMC)and accelerate the secretion of T NFαby U937with low m olarity of LPS.Conclusion It is feasible to ac2 quire com plete functional LBP from serum.LBP can prom ote the in flammatory response by the acceleration of the binding of LPS at low concentration with m onocyte and induction of the secretion of in flammatory factor. K ey w ords:lipopolysaccharide binding protein;lipopolysaccharide;tw o2step ion2exchange chromatography;gel chromatography;tum or necrosis factor alpha 烧伤复合内毒素血症是常见的临床病症,在战时也多见,它是导致全身炎症反应综合征(SIRS)、多器官 基金项目:国家自然科学基金资助项目(39970757) 作者简介:葛晓冬(1971-),男,河北省保定市人,博士,讲师,主要从事创伤分子病理机制方面的研究。
新品种介绍-青紫蓝兔
新品种介绍:青紫蓝兔
青紫蓝兔,是一个优良的皮肉兼用品种。
是法国育种家用蓝色贝韦伦兔,嘎伦兔和喜马拉雅兔杂交育成的。
因毛色和青紫蓝兽相似而得名本品在世界上分布很广。
它有三个不同的类型:标准型、美国型和巨型,但它们都是灰蓝色。
标准青紫蓝兔体型较小成年母兔重2.7~3.6公斤,公兔2.5~3.4公斤。
美国型青紫蓝是人1919年由英国引进,俣发生变异,成年母兔重4.5~5.4公斤,公兔4.1~5.0公斤。
巨型青紫蓝是用弗朗德巨兔杂交而成,是偏巨型的肉用品种,成年母兔重5.9~7.3公斤,公兔5.4~6.8公斤。
青紫蓝体质强,适应性强,性情温顺,生长快;繁殖力和泌乳力都较好,每窝产仔一般是6~8头,初生体重约为45克,40天可达0.9~1.0公斤,90天体重为2.2~2.3公斤。
兔血清纯化
兔血清抗体分离纯化抗血清纯化的目的是尽量除去抗血清中与目的抗体不相关的成分,以防止抗体外的其他血清成分对试验结果产生影响。
因此只能根据不同目的的要求,从抗血清中除去容易干扰的有关成分,或提取相应的免疫球蛋白。
抗血清纯化的方法主要有粗提法和精制法两个过程。
粗提法主要常用硫酸铵盐析法,精制法分非特异性和特异性两种类型。
非特异性方法如葡聚糖凝胶过滤法、离子交换层析法,其方法均系基于蛋白质分子的物理性质。
特异性方法如免疫吸附法,其方法基于抗原抗体的特异性反应。
一、盐析法(Salt fractionation)(粗提)【实验原理】当用中性盐加入蛋白质溶液,中性盐对于水分子的亲和力大于蛋白质,于是蛋白质水分子周围的水化膜减弱甚至消失;同时,中性盐加入蛋白质溶液后,由于离子强度发生改变,蛋白质表面电荷大量被中和,更加导致蛋白质溶解度降低,使蛋白质分子间聚集而沉淀。
不同蛋白质由于所带电荷不同以及水化程度不同,加入不同浓度的中性盐可分段从溶液中沉淀出来。
蛋白质在不同浓度的盐溶液中相对溶解度不同,血清γ球蛋白在一定浓度盐溶液中易于沉淀,而白蛋白则不易沉淀,据此可将二者分离。
盐析法:硫酸铵分级沉淀【主要试剂与仪器】实验材料:兔血清(20 ml-200 ml)试剂:饱和硫酸铵溶液(用前以5 mol/L NaOH调至pH7.4)、0.01 mol/L Ph7.4磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline PBS)、奈氏试剂实验器材:三角瓶、烧杯、各种吸管、小试管、量筒、布氏漏斗、透析袋(用前用PBS或双蒸水煮沸10 min)等仪器:搅拌器、离心机、电泳仪等【溶液配制】a、饱和硫酸铵溶液的配制:取500 ml蒸馏水加热至70~80 ℃,称(NH4)2SO4400~425 g溶于蒸馏水中,搅拌20 min,趁热过滤,冷却,配制好的饱和硫酸铵溶液,瓶底应有结晶析出,在使用前用28%的氨水调pH至7.4。
b、磷酸盐缓冲液的配制:贮存液 A液 0.2 M NaH2PO4·2H2O 31.2 g,加蒸馏水1000 mlB液 0.2 M Na2HPO4·12H2O 71.7 g,加蒸馏水至1000 ml应用液取A液19ml加B液81ml混合,再以生理盐水作10倍稀释,加入NaCl至终浓度为0.85%,即为PBS。
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青紫兰兔的生物净化技术探讨
目的为建立SPF级青紫兰兔种群,满足各类研究的需要。
方法用剖腹取胎的方法,对青紫兰种兔进行生物净化,用SPF级代乳兔进行喂养,使其微生物等级达到SPF级。
结果共取得青紫兰仔兔88只,存活74只,存活率为84.1%。
结论种兔预产期判断准确,可提高剖腹产手术的成功率。
标签:青紫兰兔;生物净化;剖腹取胎
随着生命科学技术和生物医药的迅速发展,实验动物越发显得重要[1]。
实验兔作为实验动物中不可缺少的一部分,对其的要求也越来越高,通过对实验兔进行生物净化,使其微生物等级达到SPF级,在本实验中采用剖腹取胎的方法来达到生物净化的目的。
1 资料与方法
1.1一般资料
1.1.1 实验动物经产健康的怀孕30~31d的青紫兰种兔[2],通过触诊、观察的方法来确定其临产期,母兔表现为拔毛做窝,阴道口鲜红,母兔下腹部膨大。
1.1.2手术器材手术剪、止血钳等物品经过121℃,20min高温灭菌。
1.1.3净化室的准备净化室、超净台用2%的过氧乙酸喷雾消毒,超凈台开启紫外灯。
1.1.4隔离器的准备隔离器用2%的过氧乙酸消毒灭菌后,通风吹干后待用。
1.2方法
1.2.1 剖腹取胎按照剖腹取胎的操作程序,用止血钳分别夹住子宫的子宫颈和子宫角,用手术剪剪断其末端,放在2%的过氧乙酸溶液中浸泡后,传入净化室。
1.2.2 子宫剥离,取出胎仔将消毒过的子宫放入超净台中,用镊子撕开子宫,弄破羊膜,取出胎仔,用纱布或棉花球擦拭仔兔,并且轻轻按摩仔兔,促使呼吸,待等到仔兔全身发红后,剪断其脐带,传入准备好的隔离器中[3]。
1.2.3 仔兔的哺乳传入隔离器的仔兔可以通过母兔带奶和人工哺乳进行喂养。
1.2.4 微生物和寄生虫检测每季度进行1次微生物、病毒和寄生虫的检测。
2结果
2.1 剖腹取胎仔兔的成活率我们准备了13只青紫兰种兔进行剖腹取胎,在整个过程中,有2只早产;1号母兔由于操作不熟练,操作时间较长,导致4只仔兔在子宫中时间过长,引起死亡;2号母兔由于仔兔发育未成熟只有1只存活;通过经验的积累,在之后的实验过程中,基本达到了全部存活。
2.2 微生物和寄生虫学检测根据国标GB14922-94 SPF级质量标准对不同隔离器的仔兔抽样进行微生物、寄生虫检测,结果均为阴性。
3讨论
3.1母兔临产前的判断通过触诊、观察的方法来确定其临产期,母兔表现为拔毛做窝,阴道口鲜红。
临产期判断过早,取出的仔兔发育不全,且体质较弱,死亡率高;判断过晚,子宫颈张开,引起微生物污染。
3.2仔兔的取出在剖腹取胎过程中,1号母兔子宫取出后,由于仔兔在子宫中滞留时间过长,引起4只仔兔的窒息死亡,因此在剖腹取胎过程中,应尽快的撕开子宫和羊膜,促使仔兔呼吸,有利于提高仔兔的存活率。
3.3仔兔脐带剪断的时间掌握仔兔从子宫取出后,不应马上剪断脐带,应等到仔兔全身发红后,脐带血凝固后再剪断,以避免仔兔出血,造成死亡。
3.4仔兔的哺乳仔兔传入隔离器后,可以用SPF级母兔带奶,如果待乳兔母乳较少,辅以人工哺乳进行哺育。
用母兔带奶,应注意带奶母兔应在剖腹取胎母兔前2~3d分娩,确保奶水的充足。
剖腹取胎的仔兔应与带奶母兔的仔兔混合哺乳,以免由于气味不同造成母兔不喂奶。
用人工哺乳,应严格控制好仔兔的环境温度、奶的营养成分、奶的温度。
注意哺乳时要多次少喂,控制哺乳流速,以免发生呛食,引起异物性肺炎、出血,导致死亡。
参考文献:
[1]徐平,小鼠剖腹育仔若干问题探讨[J].上海实验动物科学,10(4):222.
[2]张业彬,岳秉飞,邢瑞昌等,SPF兔种群的建立[J].实验动物科学与管理,2003.20.
[3]薛家宾,徐为中,诸玉梅,等.实验兔生物净化初报[J].上海实验动物科学,23(3):174.。