实验九 姐妹染色单体差别染色

SCE平均交换频率（次/细胞）= 交换总次数 / 细胞数
作业
完成此次实验报告(包含实验原理、实验药品、
实验步骤）
染色体识别要求: 1、 B组一对
2、 C组的8号、9号、10号任选取1对
3、 D组一对 4、 E组17号、18号任选取1对 5、 性染色体一对
第二周期细胞
选择染色体分散良好、长度适中、轮廓清晰、数目完整、 分化良好的的第二周期的分裂相进行计数。人体姐妹染色单体 交换（SCE）的计数方法：
①凡是在染色单体端部出现互换，记为1次交换； ②在染色单体中间出现互换，记为2次交换； ③如果在着丝粒处发生交换，需判明是否为扭转，不是扭转的 为着丝粒部位交换，记为1次交换。每一份标本至少需要计数 20~50个细胞的染色体，计算SCE平均交换频率。
B、把培养皿置于预温75℃水浴锅平板上，距 30W紫外灯管5cm，照射30分钟，其间滴加数次 2×SSC，勿使擦镜纸干燥。
C、用Giemsa染液染色10分钟，自来水冲洗、 晾干即为SCE标本。
2、SCE观察计数 镜下（油镜）观察中期分裂相时，注意区分各细胞周期 分裂相的染色特点：①染色体的两个单体均为深染的细胞 记为第一周期的细胞；②染色体的两个单体染色一深一浅 的细胞为第二周期细胞；③部分染色体的两个单体染色都 为浅色的细胞为第三周期的细胞。
实验九 姐妹染色单体差别染色
Fra Baidu bibliotek
实验用品
1、器材：水浴锅、紫外灯、温度计、擦镜纸、 显微镜、滴管 2、试剂： 2×SSC缓冲液、Giemsa染液、 PH6.8 PBS、 3、材料：人外周血淋巴细胞染色体标本片
实验步骤
1、姐妹染色单体差别染色
A、将标本片放入培养皿中，加2×SSC数滴于 玻片上，盖一张擦镜纸，以湿润擦镜纸为宜，并在 培养皿中加入2×SSC使之浸在玻片底面。