荧光定量分析仪

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常见荧光定量PCR仪汇总

常见荧光定量PCR仪汇总
上海浩然,达安基因,上海博尼,山东艾克韦,济南朋远,北京博凌,上海 众华,北京普生瑞等
优缺点:
LightCycler
检测通道:3通道 加热模式:离心式空气加热/冷却 升温:20℃/S 孔数:32孔 材料:玻璃毛细管 20ul和100ul 两种规格 实验成本:体系小,成本低 理论支持本公司PCR体系:20ul
体积大,价格贵,性能比上不如7500。
各孔板基座 96孔板
384孔
8联管
芯片板
优缺点:
ABI 7500
7500是ABI第三代PCR产品,目前ABI市场占有率最高,最成功PCR仪。 价格40万RMB,理论支持本公司PCR体系:40ul 检测孔数:兼容96孔和8联管。 检测通道:5通道,除去ROX后4通道。 加热模块:半导体加热模块,升温3℃/S 激发光源:齿钨灯。
ABI Step One / Step one plus
ABI Step one system
光源系统:LED激发+PMT扫描机制 检测孔数:48孔 检测通道:3通道 理论支持本公司PCR体系:30ul
ABI Step one plus system
检测孔数:96孔 检测通道:4通道 加热模块:半导体加热模块,升温3℃/S 具有独特的Veriflex TM 加块,控温效果大大提高 理论支持本公司PCR体系:30ul
代理公司:
达安基因,上海创萌北京鼎盛伟业等
优缺点:
ABI 7900
7900是ABI第二代PCR产品,目前最强PCR仪。价格70-80万RMB,理论
支持本公司PCR体系:40ul 1.检测孔数:支持8联管,96孔板,384孔板,Taqman 低密度表达谱芯片 2.激发光源:氩离子激光,全波长检测 3.进样时可以采用ABI自动机械臂,方便快捷 4.加热模块:半导体加热模块,升温3℃/S 缺点:

荧光定量pcr仪原理

荧光定量pcr仪原理

荧光定量pcr仪原理
荧光定量PCR仪是一种用于测量PCR反应过程中荧光信号的仪器。

其原理基于PCR反应中的DNA扩增过程以及荧光染料的发射和检测。

PCR是一种通过使用DNA聚合酶酶和特定引物,在适当的温度下连续进行反复的DNA复制过程。

PCR反应通常包含三个基本步骤:变性(解旋DNA双链),退火(引物结合到模板DNA上),和延伸(DNA聚合酶沿引物扩增目标序列)。

此过程会导致目标DNA序列数量的指数性增加。

荧光定量PCR仪中,DNA的扩增过程通常伴随着一种荧光染料的加入。

这种荧光染料会在扩增过程中与新合成的DNA结合,产生荧光信号。

荧光定量PCR仪通过在PCR反应过程中记录荧光信号的强度来测量PCR反应的进程。

仪器中的光学系统会周期性地激发荧光信号,并通过检测器检测信号的强度。

荧光定量PCR仪可以记录每一个PCR循环的荧光信号,然后使用计算机软件分析这些信号的特征,例如峰值高度或面积。

通过与已知浓度的标准样品进行比较,可以利用荧光信号的强度来定量PCR反应中的目标DNA的初始浓度。

荧光定量仪操作指南

荧光定量仪操作指南

荧光定量仪操作指南1.准备工作在使用荧光定量仪之前,需要进行一些准备工作:-打开仪器电源,并接通仪器的电源线。

-启动仪器,并等待其自检完成。

-检查仪器所需的配件是否齐全,如荧光管、滤光片等。

2.校准仪器在进行荧光定量测量之前,需要对仪器进行校准,以确保测量结果的准确性。

校准通常包括两个步骤:-波长校准:使用标准荧光溶液,根据其发射波长设置仪器的激发和发射波长。

-亮度校准:使用标准荧光溶液,根据其知名的荧光强度设置仪器的亮度。

3.准备样品在测量样品之前,需要进行一些准备工作:-根据测定要求,选择合适的荧光染料,并将其溶解在适当的溶剂中。

-在样品舱中选择合适的载体,如荧光底板或石英反射板,并将样品涂覆在载体上。

4.进行测量在开始测量之前,需要进行一些操作:-打开样品舱盖,并将载体放置在样品舱中。

-选择适当的激发波长和发射波长,并将它们设置到仪器上。

-调节仪器上的曝光时间,以确保荧光强度在仪器的线性范围内。

5.数据分析测量完成后,需要对数据进行分析:-使用仪器上的软件导出数据,并存储到计算机中。

-对数据进行统计分析,如计算平均值、标准差等。

-通过比较样品间的荧光强度,得出相应的结论。

6.清洁和维护在使用荧光定量仪完成实验后,需要进行仪器的清洁和维护工作:-关闭仪器电源,并拔下电源线。

-将使用过的载体和滤光片取下,并进行清洗。

-清洁仪器的外壳和光学系统,可以使用干净的纸巾或专门的清洁剂。

注意事项:-避免直接接触荧光管,以免对其造成损坏。

-在测量荧光强度之前,应先调节仪器的对比度和亮度,以获得清晰的图像。

-在测量过程中,尽量避免光线干扰,可在实验室内提供充足的遮光条件。

总结:以上是荧光定量仪的操作指南。

正确操作荧光定量仪是确保实验结果准确的重要步骤,希望本文对您在实验中使用荧光定量仪时有所帮助。

实时荧光定量PCR仪介绍

实时荧光定量PCR仪介绍

实时荧光定量PCR仪介绍 | QPCR的国际标准---MIQE | 联系我们仪器名称实时荧光定量PCR仪英文名称Real-Time QPCR System国产/进口进口产地/品牌美国品牌,德国制造型号Mx3000P/Mx3005P实时荧光定量PCR仪【性能参数】美国安捷伦Stratagene公司实时荧光定量PCR仪Mx3000P/Mx3005PMx3000P系统性能指标:激发光源:石英卤钨灯检测器:扫描光电倍增管(PMT)多重检测:四个光学通道,并提供用户选择的滤光系统加热系统:Peltier的热循环加热模块内置芯片在断电或连接中断时自动保存数据样品量:96孔高通量平台,反应体系10-100ul外形尺寸:33cm(宽) x 46cm(长) x 43cm(高),重量:20kgMx3000P系统参数配置:动力学范围:10个数量级激发光范围:350—750nm发射光范围:350—700nm温度均一性:+/- 0.25℃温度精确性:+/- 0.25℃升降温速率:2.5℃/秒兼容所有常规荧光染料:FAM、SYBR Green I 、Texas Red、ROX、TET 、Cy3、Cy5、HEX、JOE、VIC 、TAMRA、ALEXA Fluor 350等标准配置的滤光片组为:Cy5,HEX,FAM,ROX具有快速QPCR功能(反应时间在50分钟内)Mx3000P软件功能:•分析功能强大:通过一台计算机可连接和控制6台QPCR仪;可同时分析12个独立的96孔板;也可以在同一块板上进行和分析不同的实验•设置和运行简单:根据实验目的和方法不同,可选择多种实验设置:(多重)绝对定量PCR、相对定量PCR、Sybr Green定量及熔解曲线分析、SNP分析、Molecular Beacon熔解曲线分析等使用简便:实验条件设置、反应过程监控、数据显示分析三大功能模块从同一界面链接,直观简便•实时观测和数据分析:反应过程中可实时监测和收集荧光信号,在实验还未结束的情况下便可对现有数据进行分析提供多种数据显示模式:用户可根据自己需要选择:扩增曲线模式、熔解曲线模式、标准曲线模式、原始荧光信号模式、最终定量结果模式等•多种数据传输格式:所有结果可以原始数据的形式显示,也可输出到Excel 中作进一步分析,曲线和表格等结果可直接用于PowerPoint、Text等文档中。

荧光定量pcr仪的组成

荧光定量pcr仪的组成

荧光定量pcr仪的组成
荧光定量PCR仪主要由两部分组成:PCR系统和荧光检测系统。

1.PCR系统:主要由基因扩增热循环组件、微量荧光监测光学系统、
为电路控制系统、计算机及应用软件组成。

定量PCR必需借助样本和标准品之间的对比来实现定量的,对于定量PCR系统来说,重要的参数除了传统PCR的温控精确性、升降温速度等等,更重要的还在于样品孔之间的均一性,以避免微小的差别被指数级放大。

2.荧光检测系统:多色多通道检测是当今的主流趋势,仪器的激发
通道越多,仪器适用的荧光素种类越多。

荧光检测系统可以弥补背景荧光的差异,并设定域值水平,这是分析荧光数据的水平。

此外,实时荧光定量PCR仪还包括光路系统、检测器、热循环模块和分析软件等部分。

总之,荧光定量PCR仪是用于监测循环过程的荧光仪器,能够进行实时分析和数据处理,是生物学和医学研究的重要工具。

常见荧光定量PCR仪汇总

常见荧光定量PCR仪汇总

常见荧光定量PCR仪汇总常见的荧光定量PCR仪(Fluorescence Quantitative PCR Instrument)主要有以下几种:1. Applied Biosystems 7500 Fast System:该系统是ABI公司旗下产品之一,具有优秀的性能和稳定性。

其特点包括快速准确的PCR结果、高通量PCR样品处理能力以及灵活的试剂和探针选择。

该系统可应用于基因表达分析、SNP检测、病毒定量等多个领域。

2. Bio-Rad CFX96 Touch System:这个PCR仪是Bio-Rad公司的产品之一,具有高精度的温控技术和可靠的荧光检测系统。

它支持多种共轭染料和探针,可以同时检测多个靶序列,适用于基因表达分析、蛋白质分析和病毒检测等多个应用领域。

3. Roche LightCycler 480 System:这是一款高通量的PCR仪,可同时处理多达384个孔的样品,适用于高通量基因表达分析和蛋白质研究。

该系统具有高分辨率荧光检测和精确的温度控制能力,可提供更准确和一致的PCR结果。

4. Thermo Fisher QuantStudio 6 Flex Real-Time PCR System:该PCR仪具有灵活多样的探针和染料选择,可以满足不同的研究需求。

它具有宽广的检测动态范围和高灵敏度,适用于基因表达分析、SNP分型和病毒定量等多个应用领域。

5. Qiagen Rotor-Gene Q:这是一款高通量PCR仪,可同时处理多达72个样品。

它具有快速高效的PCR扩增速度和精确的荧光检测能力,适用于基因表达分析、基因突变检测和染色体融合分析等多个研究领域。

6. Stratagene Mx3000P/QPCR System:这是Agilent Technologies旗下的产品,具有高精度和稳定性的特点。

它支持多种探针和染料,可以同时检测多个靶序列,适用于基因表达分析、非编码RNA研究和表观遗传学研究等多个领域。

全自动荧光免疫定量分析仪及配套试剂技术要求

全自动荧光免疫定量分析仪及配套试剂技术要求

全自动荧光免疫定量分析仪及配套试剂技术要求
一、全自动荧光免疫分析仪技术要求
1、检测方法:荧光免疫层析法
2、检测时间:≤15min
★3、检测项目:N末端-B型钠尿肽原(NT-PrOBNP)、降钙素原(PCT)。

4、样本类型:全血,血清,血浆
5、样本最小用血量W75u1.
★6、检测通道,20通道,各通道能同时开展项目检测。

★7、试剂仓位:24个。

★8、加样方式:原始采血管穿刺取样(无需拔帽,无需TIP头)。

9、检测通量2100测试/小时。

10、检测参数的升级:可通过外部U盘或联网升级软件,使用新的测试卡即可完成,无需增加模块
11、内置计算机:仪器自带彩色电容式液晶触摸屏
12、连接管理:支持USB接口、RS232、RJ45接口
13、结果存储:主机存储检测数据数量,IOoOo条
二、配套试剂
三、售后服务要求:。

荧光定量pcr仪实验报告

荧光定量pcr仪实验报告

荧光定量pcr仪实验报告近年来,在不断的学习和实践中,我们有了自己的实验经验。

荧光定量 pcr仪是根据 PTI (Principle Time Agent Imaging)理论设计开发的一种测量方法,它利用荧光探针在光化学发光条件下产生具有荧光特性的光束,然后通过软件自动调整光强以计算出浓度。

荧光定量 pcr仪有很大的应用潜力,目前在许多研究领域都有广泛需求。

例如:农业科学、材料科学、环境生态、食品工业、化学、物理和化学工程等领域都有着广泛的应用空间。

本文将介绍荧光定量 pcr仪的工作原理和光化学发光法测水平之间的关系,分析使用荧光定量 pcr仪进行分析方法的适用性和局限性。

同时利用这一特性可以确定不同检测对象中不同浓度水平上相应分子量所对应关系,为研究不同分子及各分域之间分子量关系提供了重要工具。

一、荧光定量 pcr仪的工作原理荧光定量 pcr仪工作原理是将荧光探针在特定波长和光谱范围内(1-100 nm)发光,利用紫外光泵浦发光二极管产生一定波长的光,然后通过软件自动调节光强来计算出荧光值。

通过比较不同波长下的荧光强度,可得到样品中特定物质浓度的变化趋势,从而得出样品中特定物质的浓度。

它能有效地分析样品中各种物质的含量,但因波长不同,测得的数据精度也不相同。

这种方法在分子分析方面特别适用于生物样品,可以用来测定微生物以及其代谢产物或毒性物质的生物浓度;也可以用来测定某些物质中特定分子或生物受体、基因表达、蛋白质组成以及分子量的变化。

荧光定量 pcr仪可以通过监测荧光激发物发出的光来反映未知物质存在或不存在以及各种化合物在某一特定波长范围内在该特定波长范围内具有的发光强度,然后计算出各浓度水平上这些化合物各自不同的量值。

它采用一种较简单和容易操作的方法而被广泛用于检测样品中各个常见化合物到其浓度变化曲线之间关系,它不仅能精确测量样品中特定物质浓度,而且可以通过计算机软件自动计算出各组分分子量。

荧光定量pcr仪用途

荧光定量pcr仪用途

荧光定量pcr仪用途
荧光定量PCR仪是一种基于荧光探针技术的PCR仪器,用于测定PCR
反应体系中特定DNA序列的相对数量。

其用途广泛,包括:
1.基因表达分析:荧光定量PCR仪可以测定目标基因的表达水平。


过与内参基因比较,可以对不同样本中目标基因的表达差异进行定量分析。

这在生物医学研究中特别重要,可以揭示基因在不同组织或条件下的表达
调控情况。

2.病原体检测:荧光定量PCR仪可以用于鉴定和定量检测病原体,如
病毒、细菌等。

通过特异性引物和探针,可以在样品中检测到非常低浓度
的病原体,并判断其感染水平。

3.基因突变分析:荧光定量PCR仪可以检测和分析DNA序列中的突变。

通过引物和探针的设计,可以特异性地扩增和检测目标突变位点,从而快
速鉴定突变类型和频率。

4.染色体异常检测:荧光定量PCR仪可以用于染色体异常的检测和定量。

通过引物和探针的选择,可以对染色体的数目和结构异常进行快速检测,如常见的三体综合征、染色体重排等。

5.基因型分析:荧光定量PCR仪可以进行基因型分析,如单核苷酸多
态性(SNP)检测。

通过特异性引物和探针的设计,可以准确地分辨和定
量某个基因位点上的不同等位基因,为个体遗传特征的研究提供有力的工具。

6.反应监控:荧光定量PCR仪提供实时荧光监测,可以记录PCR反应
过程中的荧光信号强度,实时监控扩增曲线的形成。

这可以帮助判断PCR
反应的效果,如可靠性、特异性和灵敏度等。

总之,荧光定量PCR仪广泛应用于科研、医学诊断、基因检测等领域,为快速、准确、高通量的PCR定量分析提供技术支持。

7500型荧光定量PCR仪

7500型荧光定量PCR仪



2
3
AB具有的Real-Time PCR相关的知识产权
● ● ● ●
PCR仪器专利 定量PCR仪器专利 VIC dye TaqMan MGB探针
4
ABI提供基因分析全套解决方案
基因序列分析,SNP和突变分析,STR基因分型,基因表达分析 ● ● ● ● • ●
5
常规PCR仪
– 2720、9700、9800、Veriti;
● ● ● ● ●
Bacillus anthrasis – 炭疽芽胞杆菌 Yersinia pestis – 鼠疫杆菌 Francisella tularensis – 土拉弗朗西斯菌 Pseudomonas aeruginosa – 绿脓杆菌 Staphylococcus – 葡萄球菌
– 阪崎肠杆菌
其他检测试剂盒
● ● ● ● ●
药物代谢基因分型分析试剂盒 病原体检测试剂盒 转基因检测试剂盒 禽流感检测试剂盒 ……
32

全面解决方案
● ● ● ●
安装培训 用户培训 售后服务
全面的试剂、耗材支持 ● …………
ABI不仅仅提供仪器
33
Q & A
34
Thanks!
4006209660 cnmcbsupport@
独特的茎环设计,有效区分前体 和成熟的microRNA; 检测灵敏度高,仅需1-10ng总 RNA或类似样品; 检测速度快,两步反应3小时内 得到高质量的结果; 涵盖人、线虫、果蝇、拟南芥、 小鼠和大鼠等众多物种,1000多 个检测试剂盒可供选择。
27
miRNA研究举例——生殖细胞瘤表达谱
DG YST
7
7500定量PCR仪热循环系统

荧光定量pcr仪用途

荧光定量pcr仪用途

荧光定量pcr仪用途荧光定量PCR仪是一种用于测定PCR反应的荧光信号强度并推测目标DNA含量的仪器。

它在生物科学领域广泛应用于基因表达分析、基因突变检测、病原微生物检测以及环境样品分析等方面。

以下将详细介绍荧光定量PCR仪的用途。

首先,荧光定量PCR仪可用于基因表达分析。

基因的表达水平是指在特定条件下基因转录和翻译产物的数量,它反映了细胞内基因活性和生物学功能。

荧光定量PCR仪可以通过检测PCR扩增产物的荧光信号强度,量化目标基因的表达水平,并和对照基因进行相对定量或绝对定量分析,从而研究基因的调控机制、探究基因与生理过程的关系。

其次,荧光定量PCR仪可用于基因突变检测。

基因突变是生物体基因组DNA序列发生变异或改变的现象,它是基因多样性产生的基础,也是疾病发生的重要原因之一、荧光定量PCR仪可以通过测定目标基因的荧光信号变化来检测基因突变,进而对遗传病和遗传变异进行分析和研究,有助于提前筛查潜在的遗传病风险,为疾病的预防和治疗提供科学依据。

第三,荧光定量PCR仪可用于病原微生物检测。

病原微生物是指引起疾病的病菌、病毒、寄生虫和真菌等微生物,它们的及时检测和识别对疾病防控至关重要。

荧光定量PCR仪通过特异性引物和荧光标记的探针,可以快速、准确地检测病原微生物的核酸序列,实现对病原微生物的鉴定和检测,为临床医学、食品安全监测和环境卫生监测等领域提供了强大的工具和手段。

最后,荧光定量PCR仪可用于环境样品分析。

环境中存在着丰富的微生物群落和各种活性物质,了解和分析这些微生物和物质对环境健康的影响至关重要。

荧光定量PCR仪可以通过检测环境样品中目标基因的荧光信号强度,推测该基因在样品中的数量,从而定量研究环境样品中微生物的种类和数量变化,探究环境污染和生态系统变化对微生物群落的影响,为环境保护和生态修复提供科学依据。

总之,荧光定量PCR仪在基因表达分析、基因突变检测、病原微生物检测和环境样品分析等方面有着广泛的应用。

Getin1100荧光免疫定量分析仪操作规程

Getin1100荧光免疫定量分析仪操作规程

Getin1100荧光免疫定量分析仪操作规程1.目的配套基蛋生物干式荧光定量法专用试剂盒,体外定量检测人血清、血浆、全血或尿液中的肌钙蛋白I、NT-ProBNP,超敏C反应蛋白等,用于临床辅助诊断。

2.检测项目肌钙蛋白I、NT-ProBNP,超敏C反应蛋白等3.检测原理3.1 配套卡工作原理:在检测卡上包被有荧光标记的单克隆抗体以及捕获单克隆抗体,当试样加入到检测卡上时,荧光标记的单克隆抗体和样本中的待测物结合,形成抗原抗体复合物。

该复合物受毛细管作用向检测卡的检测区移动,并被包被在检测区的单克隆抗体捕获,形成“三明治”式的抗原抗体复合物。

3.2 Getin1100工作原理:将反应后的配套检测卡插入到分析仪中,仪器的测量系统自动对标记物和待测物结合区进行扫描,获得光学信号。

然后对光学信号进行测量和分析处理,定量得出实测物质的浓度。

4.标本采集及运送4.1 标本类型:血浆、全血、血清、新鲜晨尿4.2 标本要求:血液3ml,尿液20-40ml4.3 标本的运送:标本留取后,1小时内送检。

4.4 标本拒收标准:污染或不合要求的标本拒收。

5.仪器及试剂5.1 仪器名称:南京基蛋Getin1100仪器厂家:南京基蛋生物科技有限公司仪器型号:南京基蛋Getin11005.2试剂:南京基蛋提供的检测试剂卡6.操作步骤6.1 打开仪器主机电源。

6.2 屏幕显示欢迎界面,系统自动检测硬件、光路系统。

6.3 自检结束后即进入主界面,此时界面显示“测量系统”和“系统设置”菜单,按“确定”键仪器即进入等待测量模式。

6.4将相应的检测卡插入仪器的检测口中,按“模式”键选取标本对应的标本类型,再按“确定”键,仪器即将检测卡送入仪器检测模块中。

6.5 测量完成后,仪器在屏幕上显示本次检测结果,并可用内置打印机进行打印.6.6待测试完成后,按“返回”回到主界面,按“确定”初始化电机后可进行下一次测量.6.7测量完毕后,关闭主机电源。

市面现有荧光定量PCR仪器对比介绍简介-pyp

市面现有荧光定量PCR仪器对比介绍简介-pyp

ABI 仪器光学路径
ABI 仪器:校正染料ROX
Rox:(5-carboxy-x-rhodamine) 5-羧基-X-罗丹 明
Rox的功能: 1)校正单次反应运行中由于泡沫或蒸发/冷凝而导致的信号改变; 2)为故障分析提供一项强有力的诊断工具:每次循环采集参比染料信号,不受PCR反 应影响; 3)均一化校正由于移液误差或蒸发所导致的批内体积差异; 4)均一化校正批间体积差异,提供更连续一致的批间重复Ct值。
4、加热系统:半导体加热系统
特点: 温控范围大( 4℃ to 99℃) ,均 一性(<±0.5 ℃); 灵活性好:可以做温度梯度; 样本数量多(96孔和384孔); 但其加热速度比空气加热稍慢。
风扇制冷
5、制冷系统
压缩机制冷
半导体制冷
优点 缺点
风扇制冷
压缩机制冷
半导体制冷
价格低
制冷快; 精确性好
➢ 国产 • 杭州博日(Bioer ) • 上海宏石(Slan) • 西安天隆(Tianlong) • 上海枫岭(Funglyn) • 厦门安普利(Amplly) • 广州达安(DA) • 上海科华(Fluocycler)
2007年:ABI Step one/Plus
2010年:ABI ViiA 7
样本容量
32×(10-20ul)
32 ×(20ul,100ul)
检测通道模式
F1: SYBR Green I; F2:LC Red 640; F3: LC Red 705
Roche LC 480 Roche LC480 热循环系统组成和特点:
1. Thermal Block Cycler包括了样本底座(96孔或384孔),Peltier元件,配合 Therma-BaseTM 热均衡器,银质散热块和电子元件。

荧光定量分析仪原理

荧光定量分析仪原理

荧光定量分析仪原理
荧光定量分析仪是一种利用化学物质在吸收辐射能量后再放出辐射的特性来定量测定样品中特定物质含量的仪器。

它基于荧光现象的产生和测量,与光谱仪一起使用,能够提供准确、快速的分析结果。

荧光定量分析仪的工作原理是通过激发样品中的化学物质产生荧光,并测量荧光的强度来确定物质的含量。

它利用激发光源产生的电磁辐射能量来激发样品中的分析物,激发后的分析物进入高能级激发态,当分析物从高能级跃迁回到基态时,会放出能量较低的光子,即荧光。

荧光的发射波长和强度与分析物的浓度成正比关系。

荧光定量分析仪通常包括一个光源、一个激发光滤光片、样品室、检测器和信号处理系统。

光源产生适当波长的激发光,经过激发光滤光片选择特定波长的光进入样品室。

样品室中的分析物被激发后产生荧光,荧光通过检测器接收并转换成电信号。

信号处理系统对电信号进行放大和数字化处理,并根据预先建立的标准荧光强度与分析物浓度的关系曲线,计算出样品中分析物的含量。

荧光定量分析仪具有灵敏度高、选择性强、操作简便等优点,广泛应用于化学、生物、环境等领域的测量和分析。

它在药物研发、环境监测、食品安全等方面发挥了重要作用,为科学研究和工业应用提供了可靠的分析结果。

ABI 7500荧光定量PCR

ABI 7500荧光定量PCR

ABI 7500荧光定量PCR
一、简介
7500型荧光定量PCR仪是特异性靶基因检测与定量的一体化平台。

7500型将PCR热循环,荧光检测和各种应用分析软件结合在一起,可实时定量观察PCR 每一循环各反应管中PCR扩增产物的情况。

PCR实验结束后即刻得到定量结果,无需凝胶电泳分析,无需纯化PCR产物,无需进行任何实验操作。

7500型实时荧光定量PCR仪具有节省时间,灵敏度高,准确性好和避免产物污染等优点。

二、主要技术参数
1. 样品孔数:96孔样品基座,
2. 温度范围:4.0-99.9℃
3. 温度显示:经计算机计算的实际样品温度,精确到0.1℃
4. 加热冷却速度:平均温度变化速度1℃/秒
5. 温度准确性:正负0.25℃,35-100℃范围
6. 升降温重现性:任意温度达到时间误差小于5秒
三、仪器性能:
1.电脑图表式PCR扩增方法,填表式PCR编程,程序运行可闪烁显示当前状态。

2.样品基座基本配置为可更换型96孔基座,可满足不同PCR反应管,不同孔数以及不同类型PCR实验的要求。

3.计算机计算不同样品体积的实际样品温度,控温精确,扩增效果重现性更好。

4.软件容量大,可储存100个完整的PCR方法,软件自动计算引物解链温度。

5.自动断电保护,恢复供电后自动执行未完成循环,保证扩增全过程安全运行。

四、主要功能
利用荧光染料和探针标记跟踪PCR产物,对反应进行实时监控;不仅可以对产物进行溶解曲线分析,而且可以通过加入已知浓度的标准样品做标准曲线,确定待测样品的浓度。

可应用于基因表达分析,突变检测;细菌、病毒等致病微生物的检测;食品卫生检疫等。

荧光定量pcr仪用途

荧光定量pcr仪用途

荧光定量pcr仪用途荧光定量PCR仪是一种基于聚合酶链反应(PCR)的技术工具,它可以实时、准确地测量DNA模板的产物丰度。

荧光定量PCR仪在分子生物学研究、临床诊断和药物开发等领域中具有广泛的应用和重要性。

下面我将详细介绍荧光定量PCR仪的用途。

荧光定量PCR仪的主要用途之一是进行基因表达分析。

通过PCR反应,荧光定量PCR仪能够检测和定量目标基因的转录水平。

在分子生物学研究中,研究人员通常需要了解特定基因在不同条件下的表达模式,以揭示基因调控机制和疾病发生的分子机制。

荧光定量PCR仪通过测量PCR反应体系中荧光信号的强度,可以实时监测靶基因在不同时间点的表达水平变化,从而准确地描述基因表达的动态变化情况。

荧光定量PCR仪还可用于检测和定量微生物的存在和数量。

在微生物学研究和临床诊断中,往往需要快速、准确地检测和鉴定微生物的存在和种类。

传统的微生物检测方法往往需要培养和鉴定的过程,耗时且存在误差。

而荧光定量PCR 仪可以通过特异性引物和荧光探针,直接检测微生物的DNA序列,并定量计算出微生物的存在数量。

这种方法不仅可以提高检测的准确性和敏感性,还可以缩短检测时间,适用于微生物感染的早期诊断和流行病学调查等领域。

此外,荧光定量PCR仪在遗传病诊断中也有重要作用。

遗传病常常由基因突变引起,针对特定基因的突变检测对于遗传病的诊断和预防具有重要意义。

荧光定量PCR仪可以通过特异性引物和荧光标记的探针,快速、准确地检测目标基因的突变。

荧光定量PCR仪不仅可以检测变异的存在与否,还可以定量测量突变的水平,为遗传病筛查和家族遗传病的预测提供有力依据。

荧光定量PCR仪还可以用于检测和定量分析特定DNA序列的拷贝数。

在基因组学研究和致病机制研究中,往往需要了解特定基因的拷贝数变异和相应基因的表达差异。

传统的方法往往需要耗时耗力,且不够准确。

而荧光定量PCR仪通过测量荧光信号的强度,可以定量检测不同DNA序列的拷贝数,从而揭示基因复制和表达的重要信息。

abi quant studio dx荧光定量pcr仪原理

abi quant studio dx荧光定量pcr仪原理

abi quant studio dx荧光定量pcr仪原理
Abi quant studio dx荧光定量PCR仪是一种高精度定量分析仪器,其基本原理是通过荧光探针技术对PCR反应进行实时荧光称量,从而定量测定PCR扩增产物。

其具体原理如下:
1. PCR反应:在PCR反应中,DNA模板通过酶切产生大量的复制,从而扩增特定的DNA片段。

2. 荧光标记:在PCR反应中的荧光探针,通过在引物上或与引物配对后非特异性与扩增产物结合,从而产生荧光信号。

3. 荧光检测:PCR反应过程中,荧光信号与PCR反应周期相关联,荧光信号量与反应模板量成正比,进而实现对PCR反应量的定量。

4. 数据分析:软件采用荧光定量PCR技术,通过分析荧光曲线、基线级别、阈值等,从而确定PCR扩增产物的数量,并生成如定量曲线、扩增曲线和热图等有用的可视化信息。

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D-二聚体阳性结果的解释
• <0.5ug/mL ,结合验前概率评估,中、低风险的疑似患者可排除 DVT和PE,无需再做进一步检查。 • >0.5ug/mL,不能排除静脉栓塞性疾病,应结合临床表现和其他 检查综合评估血栓性疾病的风险,必要时进行动态观察。 • 结合病人群建立 D-二聚体检测的医学决定水平(反映某一病种患 者罹患血栓的风险程度),如:孕妇、老年人 • 动态监测 短期内重复测定D-D不仅对诊断有益,而且可窥测病 情的演变。
FXIII
FXIIIa 交联纤维蛋白
X ′,Y′, D,E等碎 片
凝固
纤溶
DD,DXD, DD/E,YXD等 复合物
D-二聚体临床意义
• • • • • • 静脉血栓栓塞的排除性诊断 弥漫性血管内凝血的诊断 脑梗死的辅助诊断及预后判断 外科手术、溶栓治疗的监测 妊娠高血压综合征高凝状态的诊断及检测 ACS、肝脏疾病、恶性肿瘤的辅助诊断及预后判 断
外科手术后) 及其恢复期的筛检、监测、病情评估与疗效 判断
(准确的检测低水平的 CRP和微小变化,更 敏感)
hsCRP主要用于诊断和预测
心血管事件的发生、发 展,新生儿感染
0.5~200mg/L 全程CRP=hsCRP+常规CRP
(增强了临床高CRP标本的检测能力,同时也提高了低值的灵敏性,更利于动态监
– 由5个完全相同的非糖基化单体以 非共价键联接形成
– 每个单体每个含206个氨基酸残基( 相对分子质量23017)
C—反应蛋白( c-reactive protein ,CRP)

C-反应蛋白(CRP)的生成
• 由肝细胞在IL6、IL2、TNF刺激下 合成,炎症局部巨噬细胞也可少量 产生。 正常合成率1-10mg/d,急性炎症时 每天合成>1g。 半衰期19h,不耐热,65℃30min 破坏。 不能通过胎盘,在体内分布甚广, 除血液外,胸水、腹水、心包液、 关节液中均可测出。
响(肝脏发育不全或肝功能严重受损则会影响CRP的合成)
4.能关联疾病活动性:CRP 上升速度、幅度及持续时间与病情 及组织损伤的严重程度密切相关
常规CRP、hsCRP 、全程CRP的区别
5~160mg/L 0.5~5mg/L
hsCRP
常规CRP(低水平区灵敏度较差) 主要用于细菌感染、各种炎症过程、组织坏死与组织损伤(如
慢性肾病(CKD)是全球性的公共卫生事件 —— “冰山一角”
近些年肾透析病人数(单位:万人)
400 350 300 250 200 150 100 50 0
360
200 101 48.5
215.8
2002
☺ ☺ ☺
花费 80年代 2000亿美元/年 2008 2010 2011 2020E 90年代 4500亿美元/年 2010年(估) 超过1万亿美元 全球1/3的尿毒症其原发病是糖尿病肾病;肾小球肾炎仍是CKD的首位病因 中国CKD 发病率约为9.7 %,上海社区CKD发病率为11.8 % 中国CKD 知晓率不到10 %,至少20%的患者就诊时已到肾病晚期
• • •
C-反应蛋白(CRP)的生理作用
• 引发对侵入细胞的免疫调节和吞噬作用,与配体结合,激活补体,调 理吞噬功能,促使内源性或外源性配体物质(载有配体的病理物质或 病原体)的清除,表现为炎症反应 – 在Ca2+存在下与磷酸胆碱、DNA、组蛋白等结合 • 与凋亡坏死细胞膜脂质双层结构破坏时暴露的磷脂或外部侵入的细菌 、真菌、寄生虫的细胞壁磷酸胆碱结合
单胎妊娠hCG数值(单位:mIU/ml)
5 -50 5 - 426 18 - 7,340 1,080 - 56,500 7,650 - 229,000 25,700 - 288,000 13,300 - 254,000 4,060 - 165,400 3,640 - 117,000
注:1.上述参考范围是基于正常月经周期的孕妇,建议动态监测,以观察其递增速度。 2. 在怀孕的头4周内,βhCG水平几乎每2天翻一番,到6-7周时,大约每84个小时翻一番。 3. β –hCG 4000-6000 mIU/mL,Β-超可见胚囊
正常参考值:hs CRP:<1 mg/L; CRP:<10 mg/L
线性范围:0.5~200 mg/L
尿微量白蛋白 人绒毛膜促性腺激素HCG
正常参考值:<20 mg/L 线性范围: 5~300 mg/L
正常参考值:<10 mIU/mL
线性范围:10 mIU/mL~200000 mIU/mL
D-二聚体
CRP
细菌
巨噬细胞
CRP的生物学特点
1.反应快速,增量大,随着恢复下降也快;敏感!

感染、创伤、手术等情况下 快速上升,6~10hr 明显改变 48hr(24~72 hr)到高峰,102~103倍的 变化 半衰期6~7hr,较快反映病情的变化 例图:术后CRP等变化

CRP的生物学特点
二聚体与FDP同时检测可提高诊断效率
• 手术前D-二聚体高不是手术禁忌指标,应综合分析 • 一般情况下,3.0ug/mL以上可作为临床干预的医学决定水平,因引起
D-二聚体升高的疾病较多,需结合症状、体征及其它检查综合判断
• 妊娠妇女和健康老人排除静脉栓塞性疾病的D-二聚体cutoff值高于其它 人群
CRP与疾病的活动性及检测的临床意义
鉴别细菌或病毒感染(首选指标) 监测病情(CRP升高的程度反映炎症组织和感 染的范围.严重程度和活动性)。 监控感染(术后.产后) 抗生素疗效观察,指导和监测治疗(急性感染 性疾病时抗生素治疗的最适化,避免抗生素滥 用和耐药性) 心血管疾病的风险评估和指导治疗(独立于脂 类之外的危险因子,广泛应用于临床)
为什么要检测尿微量白蛋白 ?
微量白蛋白尿是早期肾病唯一的临床征象,尿微 量白蛋白检测是提示早期肾病十分有效的手段。 微量白蛋白尿代表糖尿病肾病尚处于经过治疗可 以避免发展为进展期肾病的早期阶段。
大量研究证明微量白蛋白尿是心血管疾病、原发 性高血压以及1、2型糖尿病发生早期心血管死亡 事件的重要、独立的风险因素。
尿肌酐与尿量有极好的相关性,且不受肾脏基底膜病变的影响, 用尿肌酐做校正可消除尿量对尿白蛋白排泌量的影响,因此ACR (尿微量白蛋白/尿肌酐及比值)能更为准确地反映肾功能状态 。
AJKD. 2007, 49 (2 ); Suppl 2: S13-S154 Diabetes Care. 2009, 32; Supp 1: S1-S61
CRP优势
标本面广,可适用于全血、血浆、血清样本的检测 反应时间短,3 分钟 即可出结果 先进的免疫荧光系统,与美国 DADE BEHRING BN 100 全自动特定蛋白仪进行比对,相关性好,相关系数R=0.9992 一卡双项(超敏+常规),线性范围广(0.5-200 mg/L), 可全面满足临床需求 正常参考值:hsCRP< 1 mg/L; CRP < 10 mg/L
在微量白蛋白尿阶段,积极联合治疗,包括良好 的血糖控制,使用ACEI 和其他抗高血压药,可 防止疾病进展为显性肾病或肾衰。
如何检测尿微量白蛋白?
24小时尿蛋白定量检测繁琐,没有增加预测价值和准确性,患 者依从性差,尿量收集亦时有误差。 某一时点的尿微量白蛋白检测易受尿量和其他因素干扰,导致假 阴性或假阳性结果。
• 不同试剂(检测系统)检测结果可比性低
• 标本溶血、凝固、放置时间对DD的测试结果影响较大,因此测定血浆 D-二聚体应避免溶血、凝固而且需及时送检标本和测定。
什么是微量白蛋白尿?
微量白蛋白尿是指尿液中血浆白蛋白排泌量 的轻度升高,在20 mg/min~200 mg/min或20 mg/L~200 mg/L之间(晨尿) 。 血浆白蛋白、尿微量白蛋白分子量均为 66000,且结构相同。 “微量”是指排泌到尿液中的白蛋白的“数 量”少,而非指泌到尿液中的白蛋白是一些 特殊类型的、“小”分子量的白蛋白。
来源:美国妊娠协会
PCT概述
• 降钙素原(procalcitonin, PCT) 是无激素活性的降钙素( calcitonin, CT) 的前肽物质 • 由116个氨基酸组成的糖蛋白、分子质量为13000。 • 半衰期为25~30h,在体内、外稳定性很好。 • 血清PCT的升高与细菌感染密切相关,在全身系统性严重 感染中PCT早期即可升高,经抗生素治疗使感染控制后血 中PCT会下降 • 在病毒感染及局部细菌感染而无全身表现的患者PCT仅轻 度升高 • PCT已被用作全身严重感染或败血症时的一个重要的观察 指标。 • 不受机体免疫抑制状态的影响。
2.病毒感染没有标志性升高:病毒主要在细胞内进行复制,一般不破坏
细胞膜,暴露CRP结合点,所以病毒感染时 CRP一般不超过 25mg/L 。在 成人,革兰氏阴性菌感染时 CRP 可高达 500mg/L, 革兰氏阳性菌和寄生虫 感染时通常可引起CRP中度升高,多为100mg/L左右。
3. 受影响因素少:不受生理活动的影响,不受化疗、放疗和激素治疗的影
D-Dimers 局限性
局限性: 特异性在50%左右 – 如果D-dimers实验结果为阳性, 其中50%病例为血栓症
– 另外50%病例为其它临床症状
• • - 炎症, - 癌症,

• •
- 血肿,
- 术后, - 出血,


- 怀孕,
- 老年人 ...
20
小结
• D-二聚体升高是继发性纤溶亢进的标志,但不是血栓形成的标志,D-
测) 三者检测血中相同的物质 (物质的唯一性,仅是检测方法和范围的差异)
常规炎症严重程度判断
常规 CRP
病毒或细菌感染 CRP 10-20 mg/L 一般细菌感染 CRP 20-50 mg/L 严重细菌感染 CRP >50 mg/L
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