酶工程期末复习题
《酶工程》期末复习题整理

第一章1.酶工程:是生物工程的重要组成部分,是随着酶学研究迅速发展,特别是酶的推广应用,使酶学和工程学相互渗透、结合、发展而成的一门新的技术科学,是酶学、微生物学的基本原理与化学工程有机结合而产生的边缘科学技术。
2.化学酶工程:指自然酶、化学修饰酶、固定化酶及化学人工酶的研究和应用3.生物酶工程:是酶学和以基因重组技术为主的现代分子生物学技术结合的产物,亦称高级酶工程。
4.酶工程的组成部分?答:酶工程主要指自然酶和工程酶(经化学修饰、基因工程、蛋白质工程改造的酶)在国民经济各个领域中的应用。
内容包括:酶的产生;酶的分离纯化;酶的改造;生物反应器。
5.酶的结构特点?答:虽然少数有催化活性的RNA分子已经鉴定,但几乎所有的酶都是蛋白质,因而酶必然具有蛋白质四级结构形式。
其中一级结构是指具有一定氨基酸顺序的多肽链的共价骨架;二级结构为在一级结构中相近的氨基酸残基间由氢键的相互作用而形成的带有螺旋、折叠、转角、卷曲等细微结构;三级结构系在二级结构基础上进一步进行分子盘区以形成包括主侧链的专一性三维排列;四级结构是指低聚蛋白中各折叠多肽链在空间的专一性三维排列。
具有低聚蛋白结构的酶(寡聚酶)必须具有正确的四级结构才有活性。
具有活性的酶都是球蛋白,即被广泛折叠、结构紧密的多肽链,其氨基酸亲水基团在外表,而疏水基团向内。
6.酶活性中心:是酶结合底物和将底物转化为产物的区域,通常是整个酶分子中相当小的一部分,它是由在线性多肽链中可能相隔很远的氨基酸残基形成的三维实体。
7.酶作用机制有哪几种学说?答:锁和钥匙模型、诱导契合模型8.酶催化活力的影响因素?答:底物浓度、酶浓度、温度、pH等。
9.酶的分离纯化的初步分离纯化的步骤?答:(一)材料的选择和细胞抽提液的制备1.材料的选择:目的蛋白含量要高,而且容易获得2.细胞破碎方法及细胞抽提液的制备。
为了确保可溶性细胞成分全部抽提出来,应当使用类似于生理条件下的缓冲液。
动物组织和器官要尽可能除去结缔组织和脂肪、切碎后放人捣碎机中。
酶工程期末复习

酶工程期末复习一、名词解释1、酶工程:是酶的生产、改性与应用的技术过程。
由酶学与化学工程技术、基因工程技术、微生物学技术相结合而产生的一门新的技术学科。
2、酶的化学修饰:通过化学基团的引入或除去,使蛋白质共价结构发生改变。
3、必需水:一般将维持酶分子完整空间构象所必需的最低水含量称为必需水。
4、抗体酶:具有催化活性的抗体,即抗体酶。
5、别构效应:调节物与酶分子的调节中心结合之后,引起酶分子构象发生变化,从而改变催化中心对底物的亲和力。
这种影响被称为别构效应或变构效应。
6、别构酶:能发生别构效应的酶称为别构酶。
7、酶活力:又称酶活性,是指酶催化某一化学反应的能力。
8、比活力:也称为比活性,是指每毫克酶蛋白所具有的酶活力单位数,一般用IU/mg 蛋白质表示。
9、生物传感器:由生物识别单元和物理转换器相结合所构成的分析仪器。
10、蛋白质工程:是以创造性能更适用的蛋白质分子为目的,以结构生物学与生物信息学为基础,以基因重组技术为主要手段,对天然蛋白质分子的设计和改造。
11、酶反应器12、固定化酶:固定在载体上并在一定空间范围内进行催化反应,可以反复、连续使用的酶。
13、水活度:是指在一定温度和压力下,反应体系中水的摩尔系数w χ与水活度系数w γ的乘积:ww w γχα=。
14、生物反应器:指有效利用生物反应机能的系统(场所)。
15、酶反应器:以酶或固定化酶作为催化剂进行酶促反应的装置称为酶反应器。
16、活化能:从初始反应物(初态)转化成活化状态(过渡态)所需的能量,称为活化能。
二、填空题1、酶活力测定的方法有终止法和连续反应法。
常用的方法有比色法、分光光度法、滴定法、量气法、同位素测定法、酶偶联分析。
2、酶固定化的方法有吸附法(物理吸附法、离子交换吸附法)、包埋法(网格包埋法、微囊型包埋法、脂质体包埋法)、共价结合(偶联)法、交联法。
3、酶活力是酶催化反应速率的指标,酶的比活力是酶制剂纯度的指标,酶的转换数是酶催化效率的指标。
酶工程复习题

酶工程复习题复习题1一、名词解释1、抗体酶2、反胶束3、等电聚焦电泳4、氨基酸置换修饰5、交错延伸PCR6、诱导契合学说7、非水酶学8、离子交换层析9、易错PCR 10、酶的活性中心二、选择题1、1926年,()首先制得脲酶结晶,并证明它具有蛋白质的性质。
他因这一杰出贡献,获1946年度诺贝尔化学奖。
A、Sumner J.B.B、Cech T.R.C、Henri V.D、Koshland D.E.2、1960年Jacob F.和()提出操纵子学说,阐明酶生物合成的调控机制。
A、Fischer H.E.B、Monod J.C、Michaelis L.D、Koshland D.E.3、酶分子的物理修饰是通过物理方法改变酶分子的()而改变酶的催化特性A、组成单位B、侧链基团C、空间构象D、一级结构4、氨基酸置换修饰()的分子修饰A、只能用于核酸类酶B、只能用于蛋白类酶C、可以用于蛋白类酶和核酸类酶D、不能用于蛋白类酶和核酸类酶5、半抗原()A、可以诱导抗体生成,但不能与抗体特异结合B、可以与抗体特异结合,但不能诱导抗体生成C、可以诱导抗体产生,也可以与抗原特异结合D、不能与抗体特异结合,也不能与抗体特异结合6、有些酶在细胞进入平衡期以后还可以继续合成较长的一段时间,这是由于()。
A、该酶所对应的mRNA稳定性好B、该酶所对应的DNA稳定性好C、细胞自溶后使酶分泌出来D、培养基中还有充足的营养成分7、以下酶反应器中混合效果较差的是()反应器A、搅拌罐B、流化床C、填充床D、鼓泡式8、必需水是指()A、维持酶催化反应速度所必需的水量B、酶催化反应速度达到最大时所需的水量C、与酶分子紧密结合的水量D、维持酶分子完整的空间构象所必需的最低水量9、有机溶剂极性的强弱可以用极性系数lgP表示,lgP越大,()。
A、表明其极性越强,对酶活性的影响就越大B、表明其极性越强,对酶活性的影响就越小C、表明其极性越弱,对酶活性的影响就越大D、表明其极性越弱,对酶活性的影响就越小10、对于有气体参与反应的酶,通常采用()反应器A、填充床式B、流化床C、鼓泡式D、搅拌罐式11、用带负电荷的载体制备的固定化酶后,酶的最适pH()。
酶工程期末试题及答案

酶工程期末试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 酶工程中常用的酶固定化方法不包括以下哪种?A. 吸附法B. 共价结合法C. 包埋法D. 离心法答案:D2. 下列哪项不是酶的催化特性?A. 高效性B. 专一性C. 可逆性D. 需要高温答案:D3. 酶工程中,酶的来源不包括以下哪种?A. 植物B. 动物C. 微生物D. 无机物答案:D4. 酶的活性中心通常包含哪些元素?A. 金属离子B. 氨基酸残基C. 核酸D. 糖类答案:B5. 下列关于酶工程的描述,错误的是?A. 酶工程是生物技术的一部分B. 酶工程可以提高酶的稳定性C. 酶工程可以提高酶的催化效率D. 酶工程不能改变酶的催化特性答案:D6. 酶工程中,酶的固定化技术主要用于什么目的?A. 提高酶的稳定性B. 增加酶的催化效率C. 便于酶的回收和重复使用D. 以上都是答案:D7. 下列哪种酶在工业生产中应用最广泛?A. 淀粉酶B. 蛋白酶C. 纤维素酶D. 脂肪酶答案:A8. 酶的催化效率通常比无机催化剂高多少倍?A. 10倍B. 100倍C. 1000倍D. 10000倍答案:D9. 酶的专一性是由什么决定的?A. 酶的活性中心B. 酶的氨基酸序列C. 酶的三维结构D. 酶的浓度答案:A10. 酶工程中,酶的催化反应通常在什么条件下进行?A. 高温B. 高压C. 常温常压D. 真空答案:C二、填空题(每题2分,共20分)1. 酶工程是通过___________和___________技术,对酶进行改造和应用的一门学科。
答案:基因工程、蛋白质工程2. 酶的活性中心通常由___________和___________组成。
答案:氨基酸残基、金属离子3. 酶的催化作用是通过___________和___________来实现的。
答案:降低反应活化能、提供反应途径4. 酶工程中,酶的固定化方法主要有吸附法、___________和___________。
酶工程考试复习题及答案

酶工程考试复习题及答案一、选择题1. 酶工程是指对酶进行改造和利用的科学,其主要目的不包括以下哪一项?A. 提高酶的稳定性B. 增强酶的催化效率C. 改变酶的底物专一性D. 降低酶的生产成本答案:D2. 在酶工程中,下列哪一项技术不属于酶的改造方法?A. 基因工程B. 蛋白质工程C. 酶的固定化D. 酶的纯化答案:D3. 固定化酶技术的优点不包括以下哪一项?A. 可重复使用B. 提高酶的稳定性C. 便于酶的分离和纯化D. 增加酶的底物专一性答案:D二、填空题4. 酶工程中常用的酶固定化方法包括_______、_______和_______。
答案:吸附法、包埋法、共价结合法5. 酶的催化效率通常用_______来表示,它是酶催化反应速率与_______的比值。
答案:kcat、底物浓度三、简答题6. 简述酶工程在工业生产中的应用。
答案:酶工程在工业生产中的应用主要包括食品加工、制药、生物燃料生产、环境保护等领域。
通过酶的改造和固定化技术,可以提高生产效率,降低成本,实现绿色生产。
7. 描述酶的改造方法之一——蛋白质工程的基本过程。
答案:蛋白质工程的基本过程包括:(1) 确定目标酶的氨基酸序列;(2) 设计预期的氨基酸序列变化;(3) 通过基因突变或基因合成技术实现氨基酸序列的改变;(4) 表达改造后的酶蛋白;(5) 评估改造酶的性能,如稳定性、催化效率等。
四、论述题8. 论述固定化酶在生物反应器中的应用及其优势。
答案:固定化酶在生物反应器中的应用主要包括连续流反应器和批式反应器。
固定化酶的优势包括:(1) 酶的稳定性提高,延长使用寿命;(2) 易于从反应体系中分离,便于回收和再利用;(3) 可以提高底物转化率,减少副反应;(4) 有助于实现工业化大规模生产。
五、案例分析题9. 某制药公司希望通过酶工程提高一种药物前体的合成效率。
请分析可能采取的策略,并讨论这些策略的潜在优势和局限性。
答案:可能采取的策略包括:(1) 利用基因工程技术改造酶的基因,提高酶的催化效率;(2) 通过蛋白质工程技术改变酶的结构,提高其稳定性和底物专一性;(3) 采用固定化技术,使酶在反应过程中易于分离和重复使用。
酶工程复习题(1)

酶工程复习题(1)酶工程复习题一、名词解释酶的定向固定化、、抗体酶、酶的抽提、分子印迹、离子交换层析、生物工程酶、膜型反应器、酶工程、酶活性中心、酶的比活力、固定化酶、酶分子修饰、鼓泡式反应器、凝胶层析、固定化增殖细胞、别构酶、肽酶抗体酶、酶反应器、液体发酵法、别构酶、诱导酶、离子交换层析、修饰酶、酶回收率、酶纯化比、酶的变性、酶的失活二、问答题1、列举四例,表明酶在医学上存有宽广的用途。
2、如何检查一种酶的制剂是否达到了纯的制剂?试用所学过的知识加以论述。
3.酶的催化剂特性1、高效性:酶的催化效率比无机催化剂更高,使反应速率更慢;2、专一性:一种酶只能催化一种或一类底物,如蛋白酶只能催化蛋白质水意译多肽;3、温和性:是指酶所催化的化学反应一般是在较温和的条件下进行的。
4、活性可调节性:包含抑制剂和激活剂调节、意见反馈遏制调节、共价润色阳入节和变构调节等。
5.有些酶的催化性与辅因子有关。
6.易变性,由于大多数酶就是蛋白质,因而可以被高温、强酸、强碱等毁坏。
3、固定化细胞有哪些优缺点?4、详述生物印迹酶的种类及制取过程5、固定化酶和游离酶较之,有何优缺点?6、酶分子修饰的方法有哪些?酶分子修饰的目的是什么?7、简述酶的催化特点和催化机理。
8、举例说明固定化酶(细胞)的制取过程及原理。
9、详述抗体酶的制取方法及应用领域。
10、固定化方法存有哪几种?并阐释各自的机理。
11、阐释酶工程的应用领域并分别举例说明。
12、对酶展开化学修饰时,应当考量短萼?14、某酶的初提取液经过一次纯化后,经测定得到下列数据,试计算比活力,回收率及纯化倍数。
初提取液硫酸铵结晶体积(ml)1008活力单位(u/ml)250800蛋白氮(mg/ml)2.5、1.615、写下三种拆分提纯酶蛋白的方法,并详述其原理。
16、充填床反应器和流化床反应器的优缺点?17、酶固定化后性质可以出现什么变化?18、酶拆分提纯的技术路线19、常用沉淀法的种类及原理。
烟台大学酶工程期末考试复习题及参考答案

酶工程A2022秋复习题提示:输入题目题干部分文字,按键盘快捷键Ctrl+F查找题目答案。
超越高度一、单选题(每题2分,共40道小题,总分值80分)1.酰辅基的叙述正确的是:(2分)A、与酹蛋白结合较紧密B、决定酹催化作用的专一性C、能用透析或过滤方法使其与前蛋白分开D、以非共价键与筋蛋白结合E、由酶分子的氨基酸组成正确答案:A2.当酶促反应速度等于70%VmaX时,⑸为:(2分)A、IKmB、2KmC、3KmD、4KmE、5Km正确答案:B3.醯促反应动力学所研究的是:(2分)A、酶的基因来源B、醐的电泳行为C、酶的诱导契合D、酹分子的空间结构E、影响醐促反应速度的因素正确答案:E4.Km值大小与:(2分)A、酸的浓度有关B、醐作用温度有关C、酷的性质有关D、醐作用环境PH有关E、酶作用时间有关正确答案:C5.含LDHl丰富的组织是:(2分)A、骨骼肌B、心肌C、脑组织D、肾组织E、肝组织正确答案:B6.关于变构调节的叙述正确的是:(2分)A、变构抑制剂可使S型曲线左移B、变构抑制即为负协同效应C、变构效应与醐的四级结构有关D、变构激活即为正协同E、所有的多亚基醐都受变构调节正确答案:C7.在其它因素不变的情况下,改变底物浓度:(2分)A、反应速度成比例增加B、反应速度成比例下降C、反应初速度成比例改变D、反应速度先慢后快E、反应速度不变正确答案:C8.关于酶的共价修饰的描述正确的是:(2分)A、只有磷酸化和去磷酸化B、该调节不需其它酶参加C、所有受共价修饰的酶则不在进行变构调节D、调节过程虽消耗ATP但经济有效E、调节过程中无逐级放大效应正确答案Q9.米氏酶的动力学曲线图为:(2分)A、直线B、矩形双曲线C、S型曲线D、抛物线E、以上都不是正确答案:B10.同工酶是指:(2分)A、催化的化学反应相同B、催化不同的反应而理化性质相同C、酎的结构相同而存在部位不同D、由同一基因编码翻译后的加工修饰不同E、催化相同的化学反应理化性质也相同正确答案:A11.国际醐学委员会主要根据把酶分为六大类。
酶工程期末考试题及答案

酶工程期末考试题及答案酶工程是一门新兴的交叉学科,涉及化学、生物学、工程学等多个学科领域。
作为一名酶工程学生,期末考试对于我们来说是一项非常重要的考验。
下面我将介绍一些可能出现在酶工程期末考试中的题目和答案。
一、选择题1. 以下哪项不是酶的分类方式?A. 酸性酶B. 超微生物酶C. 细胞外酶D. 工业用酶正确答案:B2. 下面哪些因素不会影响酶催化反应的速率?A. 酶浓度B. 底物浓度C. 温度D. pH值正确答案:B3. 下面哪种酶是蛋白酶的前体?A. 胰岛素B. 胃蛋白酶原C. 胰蛋白酶原D. 胰激肽原正确答案:C二、填空题1. 酶活性受环境影响,会在 pH 为_____,温度为_____的情况下达到最大值。
正确答案: 7-8, 35-40℃2. 酶切割谷氨酰胺和精氨酰胺的酶是_____。
正确答案:转铁蛋白酶3. 醛缩酶是一种能催化_____和_____之间的反应的酶。
正确答案:醛类, 氨基酸三、简答题1. 什么是酶反应速率?如何计算酶反应速率?酶反应速率是指酶催化底物转化为产物的速率。
计算酶反应速率需要知道在单位时间内底物转化为产物的数量。
2. 什么是酶的底物?酶的底物是指酶催化反应过程中所作用的物质,它通常是一种分子,可以被酶催化转化为产物。
3. 请简述酶的工业应用。
酶广泛应用于食品、药品、环保等众多领域,例如在面包、啤酒、酪制品等食品加工过程中,酶用于改善产品的口感和品质。
在制药领域,酶可以被用作药物合成的催化剂。
在环保方面,酶可以被用来降解有害化学物质,以保护我们的环境。
以上是一些可能出现在酶工程期末考试中的题目和答案。
希望这些内容能够对你的学习有所帮助,也希望大家在考试中能够取得优异的成绩!。
酶工程复习题(1)

酶工程复习题(1)酶工程复习题一、名词解释酶的定向固定化、、抗体酶、酶的抽提、分子印迹、离子交换层析、生物工程酶、膜型反应器、酶工程、酶活性中心、酶的比活力、固定化酶、酶分子修饰、鼓泡式反应器、凝胶层析、固定化增殖细胞、别构酶、肽酶抗体酶、酶反应器、液体发酵法、别构酶、诱导酶、离子交换层析、修饰酶、酶回收率、酶纯化比、酶的变性、酶的失活二、问答题1、举出四例,说明酶在医学上有广阔的用途。
2、如何检查一种酶的制剂是否达到了纯的制剂?试用所学过的知识加以论述。
3.酶的催化特性1、高效性:酶的催化效率比无机催化剂更高,使得反应速率更快;2、专一性:一种酶只能催化一种或一类底物,如蛋白酶只能催化蛋白质水解成多肽;3、温和性:是指酶所催化的化学反应一般是在较温和的条件下进行的。
4、活性可调节性:包括抑制剂和激活剂调节、反馈抑制调节、共价修饰调节和变构调节等。
5.有些酶的催化性与辅因子有关。
6.易变性,于大多数酶是蛋白质,因而会被高温、强酸、强碱等破坏。
3、固定化细胞有哪些优缺点?4、简述生物印迹酶的种类及制备过程5、固定化酶和游离酶相比,有何优缺点?6、酶分子修饰的方法有哪些?酶分子修饰的目的是什么?7、简述酶的催化特点和催化机理。
8、举例说明固定化酶的制备过程及原理。
9、简述抗体酶的制备方法及应用。
10、固定化方法有哪几种?并阐述各自的机理。
11、阐述酶工程的应用并分别举例说明。
12、对酶进行化学修饰时,应考虑哪些因素?14、某酶的初提取液经过一次纯化后,经测定得到下列数据,试计算比活力,回收率及纯化倍数。
初提取液硫酸铵沉淀体积100 8 活力单位250 800 蛋白氮、15、写出三种分离纯化酶蛋白的方法,并简述其原理。
16、填充床反应器和流化床反应器的优缺点?17、酶固定化后性质会发生什么变化?18、酶分离纯化的技术路线19、常用沉淀法的种类及原理。
20、比较各类酶反应器的优缺点21、双水相萃取、超临界流体萃取、反胶团萃取的原理。
酶工程复习题

酶工程复习题一、选择题:1.下面关于酶的描述,哪一项不正确( )(A)(答案)所有的蛋白质都是酶(B)酶是在细胞内合成的,但也可以在细胞外发挥催化功能(C)酶具有专一性(D)酶是生物催化剂2.下列哪一项不是辅酶的功能( )(A)转移基团(B)传递氢(C)传递电子(D)(答案)决定酶的专一性3.下列对酶活力的测定的描述哪项是错误的( )(A)酶的反应速度可通过测定产物的生成量或测定底物的减少量来完成(B)需在最适pH条件下进行(C)(答案)按国际酶学会统一标准温度都采用25℃(D)要求[S]远远小于[E]4.下列关于酶活性部位的描述,哪一项是错误的(A)活性部位是酶分子中直接与底物结合,并发挥催化功能的部位(B)活性部位的基因按功能可分为两大类:一类是结合基团,一类是催化基团(C)酶活性部位的集团可以是同一条肽链但在一级结构上相距很远的集团(D)(答案)不同肽链上的有关基团不能构成该酶的活性部位5.酶的高效率在于(A)增加活化能(B)降低反应物的能量水平(C)增加反应物的能量水平(D)(答案)降低活化能6.作为催化剂的酶分子,具有下列哪一种能量效应(A)增高反应活化能(B)(答案)降低反应活化能(C)增高产物能量水平(D)降低产物能量水平二、填空题1.酶和菌体固定化的方法很多。
主要可分为吸附法、结合法、交联法和热处理法2.系统命名法根据酶所催化的反应类型,将酶分为6大类。
即 1、氧化还原酶;2、转移酶;3、水解酶;4、裂合酶;5、异构酶;6、合成酶(或称连接酶)。
3.酶分子修饰中,经过修饰的酶的特性会改变,即可提高酶活力,增加稳定性或降低抗原性。
4.决定酶催化活性的因素有两个方面,一是酶分子结构,二是反应条件。
5.酶的特点酶是生物催化剂;其反应条件温和、催化效率高;酶具有高的作用专一性;其化学本质具有蛋白质性质。
6.常用产酶菌有细菌(大肠杆菌);霉菌(黑曲酶;青酶;木酶;根酶);放线菌(链酶菌);酵母等。
酶工程期末复习T

一、名词解释(10*2’)1.酶(Enzyme):具有生物催化功能的生物大分子,按照其化学组成,可以分为蛋白类酶(P酶)和核酸类酶(R酶)两大类别。
蛋白类酶主要由蛋白质组成,核酸类酶主要由核糖核酸(RNA)组成。
2.酶工程(Enzyme Engineering):从应用目的出发研究酶,在一定的生物反应装置中利用酶的催化性质,将相应原料转化成有用的物质的过程,是生物技术的重要组成部分。
3.单体酶:以一个独立的三级结构为完整生物功能分子的最高结构形式的酶。
4.寡聚酶:以一个独立的四级结构为完整生物功能分子的最高结构形式的酶。
5.多酶复合体:由多种酶彼此镶嵌成一个功能完整的具有特定结构的复合体,它们相互配合依次进行,催化连续的一系列相关反应。
6. 酶活力(enzyme activity):酶催化底物发生化学反应的能力。
测定酶活力,实际上就是测定酶促反应进行的速度。
7. 酶单位:在一定条件下,一定时间内将一定量的底物转化为产物所需的酶量。
酶含量用每克酶制剂或与每毫升酶制剂含多少酶单位来表示(U/g或U/m1)。
8. 酶的比活力:每毫克酶蛋白(酶制剂)所含的酶活力单位数称为酶的比活力(specific activity),用U/mg蛋白表示。
9.蛋白质分子设计:通过蛋白质模型和结构预测来构建具有新功能的蛋白质的技术。
10.蛋白质工程:是指基于蛋白质结构功能的研究结果,通过基因工程技术,改造现有蛋白质和设计制造新蛋白质,因而也称为第二代基因工程。
11.操作基因:可以与调节基因产生的变构蛋白(阻遏蛋白)中的一种结构结合,从而操纵酶生物合成的时机和合成速度。
12.调节基因:可产生一种阻遏蛋白,是一种有多亚基组成的变构蛋白,它可以通过与某些小分子效应物(诱导物或阻遏物)的特异结合而改变其结构,从而改变它与操纵基因的结合力。
13.蛋白质化学修饰:凡是通过活性基团的引入或去除,而使蛋白质一级结构发生改变的过程称为蛋白质的化学修饰。
酶工程期末考试试题

⑶离子交换层析分离酶蛋白时,通过调整洗脱室和贮液室的直径大小可分为洗脱、洗脱和洗脱;
⑷根据葡聚糖凝胶的交联度不同,软胶包括、、
、;
⑸酶蛋白经聚丙烯酰胺凝胶电泳后常用的染色剂有、、;
⑹酶固定化方法有、、、、;
⑺核酶的类型包括、、其中前者包括:
、、,后者主要是;
⑻酶蛋白化学修饰的方法包括、、、
1结合酶制剂的应用论述酶分子定向进化的酶工程意义
2与游离酶比较论述固定化酶在应用上的优越性
18简述酶分子定向进化的主要方法
19简述酶基因定点突变的基本程序
四论述题
1结合酶制剂的应用论述酶分子定向进化的酶工程意义
2论述固定化酶反应器的类型及其特点和适用范围
4畅谈酶制剂的应用领域及其作用
一名词解释:
酶活性中心
酶催化的邻近效应、定向效应
Km
酶比活力
酶催化常数
超滤
离子交换剂
酶分子的定向进化
核酶
固定化酶活收率
、、,后者主要是;
⑶酶蛋白化学修饰的方法包括、、、
、;⑷酶蛋白基因定向进化的方法有、和;
⑸酶制剂生产的固态发酵方法有、、;
三简答题(每题6分共30分)
1简述酶活力测定的基本原则
2简述细胞破碎的方法
3简述分子筛层析分离酶蛋白的基本原理
4简述固定化酶反应器的主要类型
5简述酶分子定向进化的主要方法
四论述题(每题10分共20分)
⑷酶蛋白化学修饰的方法包括、、、
、;
三简答题(每题6分共30分)
1简述微生物发酵生产酶制剂的发酵方法
2简述离子交换层析分离酶蛋白的基本操作程序
3简述提高固定化酶的稳定性的途径
酶工程期末复习题

第一章绪论问题:试述木瓜蛋白酶的生产方法答:木瓜蛋白酶可以采用提取分离法、基因工程菌发酵法、植物细胞培养法等多种方法进行生产。
(1)提取分离法:从木瓜的果皮中获得木瓜乳汁,通过各种分离纯化技术获得木瓜蛋白酶。
(2)发酵法:通过DNA重组技术将木瓜蛋白酶的基因克隆到大肠杆菌等微生物中,获得基因工程菌,在通过基因工程菌发酵获得木瓜蛋白酶。
(3)植物细胞培养法:通过愈伤组织诱导获得木瓜细胞,在通过植物细胞培养获得木瓜蛋白酶。
第二章微生物发酵产酶1、解释酶的发酵生产、酶的诱导、酶的反馈阻遏(产物阻遏)、分解代谢物阻遏。
诱导物的种类答:酶的发酵生产:利用微生物的生命活动获得所需的酶的技术过程;酶的诱导:加进某些物质,使酶的生物合成开始或加速的现象,称为诱导作用;产物阻遏(反馈阻遏):指酶催化反应的产物或代谢途径的末端产物使该酶的生物合成受到阻遏的现象。
分解代谢物阻遏(营养源阻遏):是指某些物质经过分解代谢产生的物质阻遏其他酶合成的现象。
诱导物的种类:诱导物一般是酶催化作用的底物或其底物类似物,有的也是反应产物。
2、微生物产酶模式几种特点最理想的合成模式是什么答:(1)同步合成型特点:a.发酵开始,细胞生长,酶也开始合成,说明不受分解代谢物和终产物阻遏。
b.生长至平衡期后,酶浓度不再增长,说明mRNA很不稳定。
(2)延续合成型特点:a.该类酶一般不受分解代谢产物阻遏和终产物阻遏。
b.该酶对应的mRNA是相当稳定的。
(3)中期合成型特点:a.该类酶的合成受分解代谢物阻遏和终产物阻遏。
b.该酶对应的mRNA不稳定。
(4)滞后合成型特点:a.该类酶受分解代谢物阻遏和终产物阻遏作用的影响,阻遏解除后,酶才大量合成。
b.该酶对应的mRNA稳定性高。
选择:在酶的工业生产中,为了提高酶产率和缩短发酵周期,最理想的合成模式是延续合成型。
3、可以添加什么解除分解代谢物阻遏表面活性剂的作用答:(1)一些酶的发酵生产时要控制容易降解物质的量或添加一定量的cAMP,均可减少或解除分解代谢物阻遏作用。
酶工程期末考试题及答案

酶工程期末考试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 酶工程是指:A. 酶的提取和纯化B. 酶的催化机理研究C. 酶的工业化应用D. 利用酶进行生物转化的技术答案:D2. 下列哪个不是酶工程中常用的酶固定化方法?A. 吸附法B. 交联法C. 包埋法D. 蒸馏法答案:D3. 酶的催化效率比无机催化剂高约:A. 10倍B. 100倍C. 1000倍D. 10^7 至 10^13倍答案:D4. 酶的特异性主要体现在:A. 反应条件B. 反应速率C. 底物选择性D. 反应产物答案:C5. 下列哪个不是酶工程的应用领域?A. 食品工业B. 制药工业C. 环境工程D. 核能工程答案:D二、填空题(每空2分,共20分)6. 酶的催化作用具有________、________和________的特点。
答案:高效性、专一性、温和性7. 酶的活性中心是指酶分子中直接参与________的区域。
答案:催化反应8. 酶的分类按照国际酶分类法分为六大类,分别是________、________、________、________、________和________。
答案:氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶、连接酶9. 酶的固定化技术可以提高酶的________和________。
答案:稳定性、重复使用性10. 酶工程在制药工业中的应用包括________、________和________等。
答案:药物合成、药物改造、药物筛选三、简答题(每题10分,共30分)11. 简述酶工程在食品工业中的应用。
答案:酶工程在食品工业中的应用包括:1) 乳制品中的乳糖酶用于乳糖分解,减少乳糖不耐受;2) 酿酒工业中的酵母酶用于酒精发酵;3) 肉类加工中的蛋白酶用于肉品嫩化;4) 面包制作中的淀粉酶用于改善面包质地。
12. 阐述酶固定化技术的优点。
答案:酶固定化技术的优点包括:1) 酶的稳定性提高,使用寿命延长;2) 反应条件易于控制,操作简便;3) 酶可以重复使用,降低成本;4) 易于实现酶与反应体系的分离,提高产品纯度。
酶工程期末试题及答案

酶工程期末试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 酶的生物学特性主要包括以下哪几个方面?A. 底物特异性、活性、稳定性B. 底物特异性、酶动力学、催化机制C. 底物特异性、酶结构、酶动力学D. 活性、酶结构、稳定性答案:C2. 酶工程是指通过修改酶的______或______,以获得具有实际应用价值的新酶或改良酶。
A. 基因、活性B. 底物、酶动力学C. 序列、特异性D. 结构、功能答案:D3. 以下哪种方法可以用来产生酶突变体?A. 随机突变B. 在体突变C. 平板筛选D. 扩增酶链式反应答案:A4. 下列哪个条件不会影响酶的活性?A. 温度B. pH值C. 底物浓度D. 亚硝酸盐浓度答案:D5. 酶的稳定性可以通过以下哪种方式提高?A. 改变酶的底物亲和力B. 改变酶的催化速率C. 降低酶的温度D. 增加酶的抗氧化性答案:D6. 合成酶通常通过以下哪种方法获得?A. 改造已有酶催化活性B. 随机突变C. 基因工程D. 酶酶法答案:C7. 酶的底物特异性是指酶对于底物的______。
A. 适应性B. 吸附性C. 形状选择性D. 结构靶标答案:C8. 酶的酶动力学主要包括以下哪几个参数?A. 反应速率、催化常数B. 酶底物复合物形成速率、酶解离速率C. 反应速率、底物浓度D. 酶底物复合物形成速率、底物浓度答案:B9. 酶的活性可以通过以下哪种方式测定?A. 浓度法B. 比色法C. 比重法D. 酶动力学法答案:D10. 下列哪个因素不会影响酶的催化效率?A. 底物浓度B. 金属离子浓度C. pH值D. 反应温度答案:B二、简答题(每题10分,共30分)1. 请简要阐述酶的催化机制。
答案:酶通过提供催化反应所需的活化能来加速生物化学反应的进行。
酶与底物发生相互作用,形成酶底物复合物,从而降低反应的能垒,加快反应速率。
酶的催化机制包括亲和力催化和过渡态催化。
亲和力催化是指酶通过与底物形成非共价相互作用来促进反应的进行,如氢键、离子键等。
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第一章绪论问题:试述木瓜蛋白酶的生产方法?答:木瓜蛋白酶可以采用提取分离法、基因工程菌发酵法、植物细胞培养法等多种方法进行生产。
(1)提取分离法:从木瓜的果皮中获得木瓜乳汁,通过各种分离纯化技术获得木瓜蛋白酶。
(2)发酵法:通过DNA重组技术将木瓜蛋白酶的基因克隆到大肠杆菌等微生物中,获得基因工程菌,在通过基因工程菌发酵获得木瓜蛋白酶。
(3)植物细胞培养法:通过愈伤组织诱导获得木瓜细胞,在通过植物细胞培养获得木瓜蛋白酶。
第二章微生物发酵产酶1、解释酶的发酵生产、酶的诱导、酶的反馈阻遏(产物阻遏)、分解代谢物阻遏。
诱导物的种类?答:酶的发酵生产:利用微生物的生命活动获得所需的酶的技术过程;酶的诱导:加进某些物质,使酶的生物合成开始或加速的现象,称为诱导作用;产物阻遏(反馈阻遏):指酶催化反应的产物或代谢途径的末端产物使该酶的生物合成受到阻遏的现象。
分解代谢物阻遏(营养源阻遏):是指某些物质经过分解代谢产生的物质阻遏其他酶合成的现象。
诱导物的种类:诱导物一般是酶催化作用的底物或其底物类似物,有的也是反应产物。
2、微生物产酶模式几种?特点?最理想的合成模式是什么?答:(1)同步合成型特点:a.发酵开始,细胞生长,酶也开始合成,说明不受分解代谢物和终产物阻遏。
b.生长至平衡期后,酶浓度不再增长,说明mRNA很不稳定。
(2)延续合成型特点:a.该类酶一般不受分解代谢产物阻遏和终产物阻遏。
b.该酶对应的mRNA是相当稳定的。
(3)中期合成型特点:a.该类酶的合成受分解代谢物阻遏和终产物阻遏。
b.该酶对应的mRNA不稳定。
(4)滞后合成型特点:a.该类酶受分解代谢物阻遏和终产物阻遏作用的影响,阻遏解除后,酶才大量合成。
b.该酶对应的mRNA稳定性高。
选择:在酶的工业生产中,为了提高酶产率和缩短发酵周期,最理想的合成模式是延续合成型。
3、可以添加什么解除分解代谢物阻遏?表面活性剂的作用?答:(1)一些酶的发酵生产时要控制容易降解物质的量或添加一定量的cAMP,均可减少或解除分解代谢物阻遏作用。
(2)表面活性剂的作用:增溶、乳化作用、润湿作用、助悬作用、起泡和消泡作用、消毒和杀菌剂。
4、根据微生物培养方式不同,酶的发酵生产有几种类型?哪种是目前酶发酵生产的主要方式?按酶生物合成的速度把细胞中的酶分几类?酶的生物合成在转录水平的调节主要有哪三种模式?微生物细胞生长过程一般分为几个阶段?答:液体深层发酵、固体培养发酵、固定化微生物细胞发酵、固定化微生物原生质体发酵。
液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。
按酶生物合成的速度把细胞中的酶分为组成型酶、适应型酶两类转录水平的调节主要有:分解代谢物阻遏作用、酶合成诱导作用、酶合成反馈阻遏作用。
微生物细胞生长过程一般经历4个阶段:调整期、对数生长期、平衡期、衰退期。
5、为什么属于滞后合成型的酶要在细胞生长一段时间甚至进入平衡期以后才开始合成?答:是由于受到培养基中存在的阻遏物的阻遏作用,只有随着细胞的生长,阻遏物几乎被细胞用完而使阻遏解除后,酶才开始大量合成。
6、简述微生物发酵产酶过程中工艺条件的控制?(提示:从pH、温度、溶解氧三方面论述)答:生产中控制pH值的方法:①调节培养基的原始pH,保持一定的C/N比;②添加缓冲液维持一定的pH值(如磷酸盐);③发酵液中pH过高,加糖或淀粉来调节。
反之,加尿素或液氨;④通过调节通气量来实现;⑤加酸、碱。
温度的控制方法:一般采用热水升温,冷水降温。
因此,在发酵罐中均设有足够传热面积的热交换装置,如排管、蛇管,夹套、喷淋管等。
调节溶氧速率的方法:①调节通气量;②调节氧的分压;③调节气液接触时间;④调节气液接触面积;⑤改变培养液性质。
7、在酶的发酵生产过程中,为了提高酶的产率,可以采取哪些措施?答:在酶的发酵生产过程中,要使酶产率提高,必需采取一系列的措施,主要有:(1)使用优良的产酶细胞:通过筛选、诱变、原生质体融合、基因重组、定向进化等手段,获得生长快、产率高、稳定性好的产酶细胞。
(2)使用优良的发酵生产设备:通过精心设计或者选择使用高产、低耗的发酵罐等发酵生产设备。
(3)采用先进的分离纯化技术和设备:采用操作简便、收得率高的分离纯化技术和设备,已达到高产丰收的效果。
(4)控制好工艺条件:在发酵过程中,要根据菌种特性,确定培养基和发酵工艺条件,进行工艺优化,并根据需要和变化的情况及时加以调节控制。
(5)此外还可以采取某些行之有效的措施,诸如添加诱导物、控制阻遏物浓度、添加表面活性剂等。
8、从如下实验方法和结果分析酶生物合成的调节作用。
实验方法:将大肠杆菌细胞接种于营养肉汤培养中,于37℃振荡培养,当 OD550达到0.3左右时,将培养液分装到4个小三角瓶中,每瓶17mL培养液。
于4个三角瓶中分别添加(A)3mL无菌水;(B)1mL乳糖溶液(0.1mol/L)和2mL无菌水;(C)1mL乳糖溶液(0.1mol/L)、1mL葡萄糖溶液(0.1mol/L)和1mL无菌水;(D)1mL 乳糖溶液(0.1mol/L) 、1mL葡萄糖溶液(0.1mol/L)和1mLcAMP钠盐溶液(0.1mol/L)。
然后在相同的条件下于37℃振荡培养2h,分别取样测定β-半乳糖苷酶的活力。
实验结果:(A)瓶和(C)瓶样品的β-半乳糖苷酶活力为0,(B)瓶和(D)瓶样品的β- 半乳糖苷酶活力达到1000U/mL左右。
答:从实验方法和结果可以进行下列分析,并得出如下结论:(1)(A)号瓶为对照,只加入无菌水,结果没有β-半乳糖苷酶产生,表明β-半乳糖苷酶不是组成酶,而是诱导酶。
(2)(B)号瓶加入了半乳糖,结果在2h 内β-半乳糖苷酶大量合成,表明乳糖是β-半乳糖苷酶的诱导剂。
(3)(C)号瓶与(B)号瓶相比,在含有乳糖的基础上增加了葡萄糖,结果也没有β-半乳糖苷酶产生,表明β-半乳糖苷酶的合成受到葡萄糖的阻遏作用,由于葡萄糖是一种容易利用的碳源,其对β-半乳糖苷酶的阻遏作用属于分解代谢物阻遏作用。
(4)(D)号瓶与(C)号瓶相比,增加了 cAMP,结果β-半乳糖苷酶又大量合成,表明cAMP 可以使分解代谢物阻遏作用解除。
第三章动植物细胞培养产酶1、解释超氧化物歧化酶、纤溶酶原激活剂答:超氧化物歧化酶:是催化超氧负离子进行氧化还原反应,生成氧和双氧水的氧化还原酶纤溶酶原激活剂:可以催化纤溶酶原水解,生成纤溶酶。
2、植物细胞培养、动物细胞培养主要用来获得哪些产物?答:超氧化物歧化酶、纤溶酶原激活剂等3、动物细胞培养的方式?答:a.悬浮培养:主要适用于杂交瘤细胞、肿瘤细胞、以及来自于血液、淋巴组织的细胞。
b.贴壁培养:采用滚瓶培养系统、微载体系统进行培养。
c.固定化细胞培养:锚地依赖性和非锚地依赖性细胞均可固定化后培养。
4、举例说明植物细胞培养产酶的工艺过程?答:大蒜诱导组织的诱导:优良蒜瓣→4℃保持3周→消毒→洗涤3次→切片→半固体培养基培养→诱导组织大蒜细胞悬浮培养和分离纯化:诱导组织→滤→25℃,600lux,12h/d培养→分离纯化→25℃,600lux,12h/dSOD。
培养→分散获得单细胞→过5、举例说明动物细胞培养产酶的工艺过程?答:以人黑色素瘤细胞培养生产组织纤溶酶原激活剂为例:a、人黑色素瘤细胞培养基b、人黑色素瘤细胞培养c、组织纤溶酶原激活的分离纯化6、从外植体获取植物细胞的方法主要有哪些?答:直接分离法、原生质体再生法、愈伤组织诱导法。
7、动物细胞培养中常有哪种指示剂监测pH?答:监测动物细胞培养液pH的常用指示剂是酚红8、动物、植物细胞培养时适宜的温度和pH都是多少?答:植物:最佳温度26-28℃、最佳 pH:5.5-5.8;动物:温度:一般控制在36.5℃、pH值:一般控制在7.0-7.6的微碱性范围内第四章酶的提取与分离纯化(一)1、解释细胞破碎、酶的提取、沉淀分离。
答:细胞破碎:通过各种方法使细胞外层结构破坏的技术过程。
酶的提取:是指在一定的条件下,用适当的溶剂或溶液处理含酶原料,使酶充分溶解到溶剂或溶液中的过程。
沉淀分离:通过改变某些条件或添加某种物质,使酶的溶解度降低,而从溶液中沉淀析出,与其它溶质分离的技术过程。
2、细胞破碎的主要方法?各包括哪些具体方法?答:机械破碎:捣碎法、研磨法、匀浆法;物理破碎:温度差破碎法、压力差破碎发、超声波破碎法;化学破碎法:有机溶剂:甲苯、丙酮、丁醇、氯仿,表面活性剂:TritonTween;酶促破碎:自溶法、外加酶制剂法3、酶的提取主要方法?答:盐溶液提取、酸溶液提取、碱溶液提取、有机溶剂提取。
4、简述酶沉淀分离的主要方法及原理?答:盐析沉淀法:利用不同蛋白质在不同的盐浓度条件下溶解度不同的特性,通过在酶液中添加一定浓度的中性盐,使酶或杂质从溶液中析出沉淀,从而使酶与杂质分离。
等电点沉淀法:利用两性电解质在等电点时溶解度最低,以及不同的两性电解质有不同的等电点这一特性,通过调节溶液的pH值,使酶或杂质沉淀析出,从而使酶与杂质分离。
有机溶剂沉淀法:利用酶与其它杂质在有机溶剂中的溶解度不同,通过添加一定量的某种有机溶剂,使酶或杂质沉淀析出,从而使酶与杂质分离。
复合沉淀法:在酶液中加入某些物质,使它与酶形成复合物而沉淀下来,从而使酶与杂质分离。
选择性变性沉淀法:选择一定的条件使酶液中存在的某些杂质变性沉淀,而不影响所需的酶,从而使酶与杂质分离(耐高温,热稳定的蛋白)。
5、酶促破碎法破碎细胞壁时,不同细胞常采用哪些具体的酶?答:革兰氏阳性菌主要依靠肽多糖维持细胞结构和形态,外加溶菌酶作用于肽多糖的β-1,4-糖苷键而使细胞壁破坏;酵母细胞的破碎是外加β-葡聚糖酶,使其细胞壁的β-1,3-葡聚糖水解;霉菌可用几丁质酶进行细胞破碎;纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的混合使用,可使各种植物的细胞壁受到破坏,对植物细胞有良好的破碎效果。
6、按照离心机最大转数不同如何分类?答:低速离心机高速离心机超速离心机第四章酶的提取与分离纯化(二)1、解释凝胶层析、亲和层析、膜分离技术。
答:凝胶层析:是指以各种多孔凝胶为固定相,利用流动相中所含各种组分的相对分子质量不同而达到物质分离的一种层析技术。
亲和层析:是利用生物分子与配基之间所具有的专一而又可逆的亲和力,而使生物分子分离纯化的技术。
膜分离技术:借助于一定孔径的高分子薄膜,将不同大小、不同形状和不同特性的物质颗粒或分子进行分离的技术称为膜分离技术。
2、结晶的主要方法?答:盐析结晶、有机溶剂结晶、透析平衡结晶、等电点结晶。
3、根据过滤介质截留的物质颗粒大小不同,过滤分为?根据推动力不同膜分离分为?答:加压膜分离、电场膜分离、扩散膜分离4、常用的萃取方法有?答:有机溶剂萃取、双水相萃取、超临界萃取、反胶束萃取5、按照凝胶的组成系统不同,聚丙烯酰胺凝胶电泳可以分为?答:连续凝胶电泳、不连续凝胶电泳、梯度凝胶电泳、SDS-凝胶电泳6、凝胶层析的洗脱中先流出的是?答:凝胶层析中相对分子质量大的先流出层析柱。