Trizol使用说明
TRIZOL说明书
trizol 中文说明书trizol 试剂是一种从组织及细胞中提取总rna的专用试剂。
这种试剂是一种酚和硫氰酸胍的单相溶液，是将chomczynski 和sacchi发明的一步rna提取法的改进。
在样品匀浆或分析过程中，trizol 试剂可在分裂细胞及溶解胞膜的同时保持rna的完整。
在匀浆后加入氯仿，可将溶液分为水相和有机相。
rna均在水相中。
吸取水相加入异丙醇，得到rna沉淀。
去除水相后，样品中的dna及蛋白质可通过进一步连续的沉淀而得到。
中间相加入乙醇可沉淀dna而有机相加入异丙醇则能沉淀出蛋白质。
dna的再纯化可能对标化样品的rna产量有作用。
2．这一技术可以用于人，动物，植物或细菌株的微量组织（50—100mg）及细胞（5×106），也可以用于大量检材（≥1g）及细胞(﹥107).该方法简便易行,可用于同时检测大量样品,全部过程1小时内可以完成.用trizol 试剂分离的rna 没有dna及蛋白质成分.这种rna可用于northern印迹分析,斑点杂交,多聚(a)+检出及vitro转移, rna酶蛋白分析及分子克隆.用于pcr反应时,当两个引物位于同一外显子时应用扩增特异dna酶i处理提取出的rna.3． trizol 试剂可用于分子量从大到小的各种rna的提取.例如,大鼠肝脏提取出的rna,经琼脂糖凝胶电泳,eb染色后可显现出7kb和15kb的大分子量的rna谱带(包括mrna和hnrna), 位于～5kb(28s)和～2kb (18s)的两条主要的核糖体rna谱带及大小在0.1kb-0.3kb之间的低分子量rna(trna,5s).分离出的rna当溶于双蒸水中时a260/280为1.6-1.8之间.每毫克组织所能提取的rna量约为:肝和脾,6-10μg;肾,3-4μg;骨骼肌和脑,1-5μg;胎盘,1-4μg.从1×106培养细胞中提取的rna量约为:上皮细胞,8-15μg;成纤维细胞,5-7μg.需要但未提供的试剂:1. 氯仿2. 异丙醇3. 75%乙醇(depc处理水配制)4. 无rna酶水或0.5%sds溶液(制备无rna酶水:将水倒进无rna酶的玻璃容器中,加入depc至0.01%(v/v)放置过夜后高压灭菌). sds溶液必须用depc处理后高压灭菌的水配制.rna分离提取步骤:1．匀浆a. 组织每50-100mg组织加入1ml的trizol 试剂后用匀浆机或玻璃棒匀浆。
Trizol使用说明书(TRIzol
TRIzol® ReagentCatalog Numbers Quantity Store at 2°C to 25°C 15596-026 100 mL15596-018 200 mLDescriptionTRIzol® Reagent is a ready-to-use reagent, designed to isolate high quality total RNA (as well as DNA and proteins) from cell and tissue samples of human, animal, plant, yeast, or bacterial origin, within one hour. TRIzol® Reagent is a monophasic solution ofphenol, guanidine isothiocyanate, and other proprietary components which facilitate the isolation of a variety of RNA species of large or small molecular size. TRIzol® Reagent maintains the integrity of the RNA due to highly effective inhibition of RNaseactivity while disrupting cells and dissolving cell components during sample homogenization. TRIzol® Reagent allows forsimultaneous processing of a large number of samples, and is an improvement to the single-step RNA isolation method developed by Chomcynski and Sacchi (Chomczynski & Sacchi, 1987).TRIzol® Reagent allows the user to perform sequential precipitation of RNA, DNA, and proteins from a single sample(Chomczynski, 1993). After homogenizing the sample with TRIzol® Reagent, chloroform is added, and the homogenate is allowed to separate into a clear upper aqueous layer (containing RNA), an interphase, and a red lower organic layer (containing the DNA and proteins). RNA is precipitated from the aqueous layer with isopropanol. DNA is precipitated from the interphase/organic layer with ethanol. Protein is precipitated from the phenol-ethanol supernatant by isopropanol precipitation. The precipitated RNA, DNA, or protein is washed to remove impurities, and then resuspended for use in downstream applications.•Isolated RNA can be used in RT-PCR, Northern Blot analysis, Dot Blot hybridization, poly(A)+ selection, in vitro translation, RNase protection assay, and molecular cloning.•Isolated DNA can be used in PCR, Restriction Enzyme digestion, and Southern Blots.•Isolated protein can be used for Western Blots, recovery of some enzymatic activity, and some immunoprecipitation. CautionTRIzol® Reagent contains phenol (toxic and corrosive) and guanidine isothiocyanate (an irritant), and may be a health hazard if not handled properly. Always work with TRIzol® Reagent in a fume hood, and always wear a lab coat, gloves and safety glasses. Contact your Environmental Heath and Safety (EH&S) department for proper work and disposal guidelines. Avoid direct contact with TRIzol® Reagent, because contact to skin, eyes, or respiratory tract may cause chemical burns to the exposed area. If contact to skin or eyes occurs, immediately wash the exposed area with copious amounts of water for 15 minutes and seek medical attention if necessary. If you inhale vapors, move to fresh air and seek medical attention if necessary. For more information, refer to the TRIzol® Reagent SDS (Safety Data Sheet), available from our web site at /support. Contents and StorageTRIzol® Reagent is supplied in 100 mL (Cat. no. 15596-026) or 200 mL (Cat. no. 15596-018) volumes, and shipped at room temperature. Upon receipt, store TRIzol® Reagent at room temperature. TRIzol® Reagent is stable for 12 months when properly stored.Intended UseFor research use only. Not intended for human or animal diagnostic or therapeutic uses.Materials NeededThe following additional materials are needed, but not supplied for the isolation of RNA, DNA or proteins.Part no. 15596026.PPS MAN0001271Rev. Date: 13 Dec 2012For support, visit /support or email techsupport@. To reorder, visit Preparing Samples Homogenizing samples 1.at room temperature according to the table below. Thesample volume should not exceed 10% of the volume ofTRIzol® Reagent used for homogenization. Be sure to usethe indicated amount of TRIzol® Reagent, because aninsufficient volume can result in DNA contamination ofisolated RNA.2.(Optional) When preparing samples with high content offat, proteins, polysaccharides, or extracellular material(e.g., muscle, fat tissue, or tuberous plant material), anadditional isolation step may be required to removeinsoluble material from the samples.Note: Do not perform this additional isolation step if youare performing subsequent DNA isolation on your sample.3.Proceed to Phase separation, or store the homogenizedsample. Homogenized samples can be stored at roomtemperature for several hours, or at –60 to –70°C for at leastone month.Incubate the homogenized sample (see Homogenizingsamples) for 5 minutes at room temperature to permitcomplete dissociation of the nucleoprotein complex.2.Add 0.2 mL of chloroform per 1 mL of TRIzol® Reagentused for homogenization. Cap the tube securely.3.Shake tube vigorously by hand for 15 seconds.4.Incubate for 2–3 minutes at room temperature.5.Centrifuge the sample at 12,000 × g for 15 minutes at 4°C.Note: The mixture separates into a lower red phenol-chloroform phase, an interphase, and a colorless upperaqueous phase. RNA remains exclusively in the aqueous phase.The upper aqueous phase is ~50% of the total volume.6.Remove the aqueous phase of the sample by angling thetube at 45° and pipetting the solution out. Avoid drawingany of the interphase or organic layer into the pipette whenremoving the aqueous phase.7.Place the aqueous phase into a new tube and proceed tothe RNA Isolation Procedure.8.Save the interphase and organic phenol-chloroform phaseif isolation of DNA or protein is desired. See DNAIsolation Procedure and Protein Isolation Procedure fordetails. The organic phase can be stored at 4°C overnight.RNA Isolation ProcedureAlways use the appropriate precautions to avoid RNasecontamination when preparing and handling RNA.RNA precipitation1.(Optional) When precipitating RNA from small samplequantities (<106 cells or <10 mg tissue), a dd 5–10 µg ofRNase-free glycogen as a carrier to the aqueous phase.Note: Glycogen is co-precipitated with the RNA, but doesnot inhibit first-strand synthesis at concentrations≤4 mg/mL, and does not inhibit PCR.2.Add 0.5 mL of 100% isopropanol to the aqueous phase, per1 mL of TRIzol® Reagent used for homogenization.3.Incubate at room temperature for 10 minutes.4.Centrifuge at 12,000 × g for 10 minutes at 4°C.Note: The RNA is often invisible prior to centrifugation,and forms a gel-like pellet on the side and bottom of thetube.5.Proceed to RNA wash.RNA wash1.Remove the supernatant from the tube, leaving only theRNA pellet.2.Wash the pellet, with 1 mL of 75% ethanol per 1 mL ofTRIzol® Reagent used in the initial homogenization.Note: The RNA can be stored in 75% ethanol at least 1 yearat –20°C, or at least 1 week at 4°C.3.Vortex the sample briefly, then centrifuge the tube at7500 × g for 5 minutes at 4°C. Discard the wash.4.Vacuum or air dry the RNA pellet for 5–10 minutes. Do notdry the pellet by vacuum centrifuge.Note: Do not allow the RNA to dry completely, becausethe pellet can lose solubility. Partially dissolved RNAsamples have an A260/280 ratio <1.6.5.Proceed to RNA resuspension.RNA resuspension1.Resuspend the RNA pellet in RNase-free water or0.5% SDS solution (20–50 μL) by passing the solution upand down several times through a pipette tip.Note: Do not dissolve the RNA in 0.5% SDS if it is to beused in subsequent enzymatic reactions.2.Incubate in a water bath or heat block set at 55–60°C for10–15 minutes.3.Proceed to downstream application, or store at –70°C. DNA Isolation ProcedureDNA is isolated from the interphase and phenol-chloroform layer saved from the Phase separation step.DNA precipitation1.Remove any remaining aqueous phase overlying theinterphase. This is critical for the quality of the isolatedDNA.2.Add 0.3 mL of 100% ethanol per of 1 mL TRIzol® Reagentused for the initial homogenization.3.Cap the tube and invert the sample several times to mix.4.Incubate samples for 2–3 minutes at room temperature.5.Centrifuge the tube at 2000 × g for 5 minutes at 4°C topellet the DNA.6.Remove the phenol-ethanol supernatant and save it in anew tube if protein isolation is desired. The supernatantcan be stored at –70°C for several months.7.Proceed with the DNA wash step using the DNA pellet. DNA wash1.Wash the DNA pellet with 1 mL of sodium citrate/ ethanolsolution (0.1 M sodium citrate in 10% ethanol, pH 8.5) per1 mL of TRIzol® Reagent used for the initialhomogenization.2.Incubate for 30 minutes at room temperature. Mixoccasionally by gentle inversion.Note: The DNA can be stored in sodium citrate/ethanolsolution at least 2 hours.3.Centrifuge at 2000 × g for 5 minutes at 4°C. Remove anddiscard supernatant.4.Repeat wash (steps 1–3), once.Note: Repeat wash twice for large DNA pellets (>200 µg).5.Add 1.5–2 mL 75% ethanol per 1 mL of TRIzol® Reagentused for the initial homogenization.Note: DNA samples may be stored in 75% ethanol at 4°Cfor several months.6.Incubate for 10–20 minutes at room temperature. Mix thetube occasionally by gentle inversion.7.Centrifuge at 2000 × g for 5 minutes at 4°C. Remove anddiscard supernatant.8.Air or vacuum dry the DNA pellet for 5–10 minutes. Donot allow the pellet to dry out. Do not dry the pellet byvacuum centrifuge.9.Proceed to the DNA resuspension step.DNA resuspensionResuspend the DNA in 8mM NaOH at a concentration of0.2–0.3 µg/µL.1.Add 0.3–0.6 mL of 8mM NaOH per 50–70 mg of tissue,or per 1 × 107 cells.Note: Resuspending the DNA is a mild base is highlyrecommended because isolated DNA does notresuspend well in water or Tris buffer.2.Remove any insoluble material by centrifuging thesample at 12,000 × g for 10 minutes at 4°C.3.Transfer the supernatant containing the DNA to a newtube. Adjust pH as needed with HEPES and proceed to downstream application of choice. The DNA can bestored overnight at 4°C, but for long-term storage adjust to pH 7–8 with HEPES, and add 1 mM EDTA. Store at4°C or –20°C.Determining Yield of RNA and DNAUse absorbance of RNA and DNA at 260 nm and 280 nm to determine concentration.Expected yieldsThe table below presents typical yields of RNA (A260/280 of>1.8) and DNA (A260/280 of 1.6–1.8) from various starting materials.Protein Isolation ProcedureProteins are isolated from the phenol-ethanol supernatant layer left over after the DNA precipitation step. Isolate the protein using either Protein precipitation OR Protein dialysis. Protein precipitation1.Add 1.5 mL of isopropanol to the phenol-ethanolsupernatant per of 1 mL TRIzol® Reagent used for theinitial homogenization.2.Incubate samples for 10 minutes at room temperature.3.Centrifuge at 12,000 × g for 10 minutes at 4°C to pellet theprotein. Remove and discard the supernatant.4.Proceed to the Protein wash step with the remainingprotein pellet.Protein wash1.Prepare a wash solution consisting of 0.3 M guanidinehydrochloride in 95% ethanol.2.Wash the protein pellet with 2 mL of the wash solution per1 mL of TRIzol® Reagent used for the initial homogenization.3.Incubate for 20 minutes at room temperature.Note: Protein samples may be stored in 0.3 M guanidinehydrochloride-95% ethanol for at least one month at 4°C orfor at least one year at –20°C.4.Centrifuge at 7500 × g for 5 minutes at 4°C. Remove anddiscard the wash solution.5.Repeat steps 2–4, two more times.6.Add 2 mL of 100% ethanol to protein pellet after the thirdwash and vortex.7.Incubate for 20 minutes at room temperature.8.Centrifuge at 7500 × g for 5 minutes at 4°C. Remove anddiscard ethanol wash.9.Air dry the protein pellet for 5–10 minutes. Do not allow thepellet to dry out.10.Proceed to the Protein resuspension step.Protein resuspension1.Add 1% SDS to the protein pellet (200 μL) and pipet up anddown until the protein is resuspend.Note: To completely dissolve the protein pellet, you may need to incubate the sample at 50°C in a water bath or heat block.2.Centrifuge at 10,000 × g for 10 minutes at 4°C to sediment anyinsoluble material.3.Transfer the supernatant containing the protein to a new tubeand proceed to downstream application of choice, or store the sample at –20°C. Protein resuspension, continuedPoor solubility of the pellet in SDS can occur, because the solubilityof specific classes of proteins differs with different solvents. If the protein pellet is insoluble in SDS, the following alternative solvents(Hummon et. al., 2007) may be required to solubilize the pellet: •1% SDS and 62.5 mM sarkosyl at pH 8.0–8.8•9.5 M urea and 2% CHAPS, pH 9.1•250mM glycerol, 10mM TEA, and 4% CHAPS•2% diethylamine•10M UreaProtein dialysis1.Load the phenol-ethanol supernatant into the dialysismembrane.Note: The phenol-ethanol solution can dissolve some types ofdialysis membranes (e.g., cellulose ester). Test dialysis tubingwith the membrane to assess compatibility before starting.2.Dialyze the sample against 3 changes of 0.1% SDS at 4°C. Makethe first change of solution after 16 hours, the second change4 hours later (at 20 hours), and the final change 2 hours later (at22 hours).Note: 0.1% SDS is required to resolubilize the proteins from the pellet; a lower concentration of SDS is insufficient. If desired,the SDS can be diluted after solubilization.3.Centrifuge the dialysate at 10,000 × g for 10 minutes at 4°C.Proteins are located in the clear supernatant.4.Transfer supernatant to a new tube and proceed to downstreamapplication, or store the sample at –20°C.5.(Optional) Solubilize the pellet by adding 100 μL of 1% SDS and100 μL of 8 M urea.Determining Yield of ProteinMeasure protein concentration by Bradford assay (SDSconcentration must be <0.1%).TroubleshootingReferences:Chomczynski, P. (1993) A reagent for the single-step simultaneous isolation of RNA, DNA and proteins from cell and tissue samples. BioTechniques 15, 532-537Chomczynski, P., and Sacchi, N. (1987) Single Step Method of RNA Isolation by Acid Guanidinium Thiocyanate-Phenol-Chloroform Extraction. Anal. Biochem. 162, 156-159Hummon, A. B., Lim S. R., Difilippantonio, M. J., Ried, T. (2007) Isolation and solubilization of proteins after TRIzol® extraction of RNA and DNA from patient material following prolonged storage.BioTechniques 42, 467-472Limited Use Label License No. 358: Research Use Only: The purchase of this product conveys to the purchaser the limited, non-transferable right to use the purchased amount of the product only to perform internal research for the sole benefit of the purchaser. No right to resell this product or any of its components is conveyed expressly, by implication, or by estoppel. This product is for internal research purposes only and is not for use in commercial services of any kind, including, without limitation, reporting the results of purchaser’s activities for a fee or other form of consideration. For information on obtaining additional rights, please contact outlicensing@ or Out Licensing, Life Technologies, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008.©2010 Life Technologies Corporation. All rights reserved. The trademarks mentioned herein are the property of Life Technologies Corporation or their respective owners.TRIzol® is a registered trademark of Molecular Research Center, Inc.。
invitrogen_TRIZOL_中文说明书
TRIZOL® ReagentCat. No. 15596-026 Size: 100 mlStore at 2 to 8°C.警告：在与皮肤接触及吞咽有毒。
可导致烧伤。
与皮肤接触后，应立即用洗涤剂和大量水冲洗。
如感到身体不适，应就医（如需要，应出示本产品标签）。
本产品含有苯酚（108-95-2）和其他成分（NJTSRN 80100437-5000P）。
已经证明TRIZOL 在室温下可稳定保存12个月。
不过，我们建议在储存于2-8°C，以保证最佳性能。
描述：TRIzol试剂（美国专利号，5346994）是即用型细胞和组织总RNA提取试剂。
该试剂是一步法苯酚和异硫氰酸胍解决方案，是对Chomczynski和Sacchi开发的单步RNA提取法（1）的改善。
在匀质化或溶解样品中，TRIzol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞及溶解细胞成分。
加入氯仿离心后，裂解液分离成水相和有机相。
RNA存在于水相。
水相转移后，RNA通过异丙醇沉淀回收。
移去水相后，样品中DNA和蛋白质可通过相继沉淀回收（2）。
用乙醇沉淀可从中间相得到DNA，加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质（2）。
与DNA的共纯化可能对不同样品得到的RNA的归一化有用。
此技术可完美应用于少量人类、动物、植物或细菌来源的组织（50-100毫克）和细胞（5×106），以及大量的组织（≥1 g）和细胞（>107）。
该TRIzol试剂方法简单，允许大量样本同时处理。
整个过程可在一小时内完成。
用TRIZOL提取总RNA可避免蛋白质和DNA 污染。
可用于Northern blot分析、斑点杂交、poly（A）+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。
聚合酶链反应（PCR反应）中，当两条引物位于单个外显子时，推荐使用扩增级DNA酶I(Cat. No. 18068)处理分离出的RNA。
TRIzol试剂方便提取不同种类、不同分子大小的RNA。
诺维赞trizol说明书
诺维赞trizol说明书1、该法从细胞中提取RNA——用匀浆器将组织磨碎，加入TRIzol处理组织。
5分钟后加入氯仿，以每分钟12000转离心5分钟，样品即分成水样层、中间层和有机层。
2、RNA存在于水样层中，收集水样层后可以通过异丙醇沉淀RNA来还原。
3、在除去水样层后，中间层中的DNA和蛋白质也能相继以沉淀的方式还原：乙醇能使中间层的DNA沉淀析出，在中间层中加入异丙醇能沉淀出蛋白质。
4、每100mlTRIzol可以抽提100个六孔板中的样品或100个50-80mg的组织样品。
无论样品是人、动物、植物还是细菌组织，该方法对少量的组织（50-100mg)和细胞（约五百万个）及大量的组织（≥1g）和细胞（超过一千万个）均有较好的分离效果。
5、每一百万细胞用TRIzol抽提可得5-15微克RNA，每毫克组织用TRIzol抽提可得1-10微克RNA（产量因细胞和组织不同而异）。
6、TRIzol操作上的简便性允许其同时处理多个样品，所有的操作可以在一小时内完成。
7、TRIzol抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白质的污染，故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA 酶保护分析和单分子克隆（PCR）。
8、如果是用于PCR，当两条引物位于单一外显子内时，建议用级联扩大的DNaseI(Cat.No.18068）来处理抽提的总RNA。
9、TRIzol试剂能促进不同种属、不同分子量大小的多种RNA 的析出。
例如，从大鼠肝脏抽提的RNA经过琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色，可见许多介于7kb和15kb之间的不连续的高分子量条带（mRNA和hnRNA成分），两条优势核糖体RNA条带位于~5kb（28S）和~2kb（18S），低分子量RNA介于0.1和0.3kb之间(tRNA,5S）。
当抽提的RNA用TE稀释时，其A260/A280比值≥1.8。
抽提小RNA时宜-70℃沉淀过夜。
Trizol中文说明书
Trizol 中文说明书TRIzol 试剂是一种从组织及细胞中提取总RNA的专用试剂。
这种试剂是一种酚和硫氰酸胍的单相溶液，是将Chomczynski 和Sacchi发明的一步RNA提取法的改进。
在样品匀浆或分析过程中，TRIzol 试剂可在分裂细胞及溶解胞膜的同时保持RNA的完整。
在匀浆后加入氯仿，可将溶液分为水相和有机相。
RNA均在水相中。
吸取水相加入异丙醇，得到RNA沉淀。
去除水相后，样品中的DNA及蛋白质可通过进一步连续的沉淀而得到。
中间相加入乙醇可沉淀DNA而有机相加入异丙醇则能沉淀出蛋白质。
DNA的再纯化可能对标化样品的RNA产量有作用。
2．这一技术可以用于人，动物，植物或细菌株的微量组织（50—100mg）及细胞（5×106），也可以用于大量检材（≥1g）及细胞(﹥107).该方法简便易行,可用于同时检测大量样品,全部过程1小时内可以完成.用TRIzol 试剂分离的RNA 没有DNA及蛋白质成分.这种RNA可用于Northern印迹分析,斑点杂交,多聚(A)+检出及Vitro转移, RNA酶蛋白分析及分子克隆.用于PCR反应时,当两个引物位于同一外显子时应用扩增特异DNA酶I处理提取出的RNA.3． TRIzol 试剂可用于分子量从大到小的各种RNA的提取.例如,大鼠肝脏提取出的RNA,经琼脂糖凝胶电泳,EB染色后可显现出7kb和15kb的大分子量的RNA谱带(包括mRNA和hnRNA), 位于～5kb(28s)和～2kb (18s)的两条主要的核糖体RNA谱带及大小在0.1kb-0.3kb之间的低分子量RNA(tRNA,5s).分离出的RNA当溶于双蒸水中时A260/280为1.6-1.8之间.每毫克组织所能提取的RNA量约为:肝和脾,6-10μg;肾,3-4μg;骨骼肌和脑,1-5μg;胎盘,1-4μg.从1×106培养细胞中提取的RNA量约为:上皮细胞,8-15μg;成纤维细胞,5-7μg.需要但未提供的试剂:1. 氯仿2. 异丙醇3. 75%乙醇(DEPC处理水配制)4. 无RNA酶水或0.5%SDS溶液(制备无RNA酶水:将水倒进无RNA酶的玻璃容器中,加入DEPC 至0.01%(v/v)放置过夜后高压灭菌). SDS溶液必须用DEPC处理后高压灭菌的水配制.RNA分离提取步骤:1．匀浆a. 组织每50-100mg组织加入1ml的TRIzol 试剂后用匀浆机或玻璃棒匀浆。
TRIZOL LS 试剂使用中文说明书
TRIZOL LS 试剂使用中文说明书TRIzol??LS?试试(ambion);中文试明试,试试格室试存号温10296?010?????????????????100ml10296?028200ml试品描述TRIzol?LS试试适用于液试品～如人、试植物、酵母、试菌或者病毒源的液试品体来体～提取高试量的试RNA;DNA和蛋白试也可以,全试程只需1小试。
TRIzol?LS试试里含有、硫试酸和其成分～由于在试试品试程中能有效地抑制酚异胍它匀很RNase活性～所以TRIzol?LS试试能试持RNA完整性。
TRIzol?LS试试允试同试试理大量的试品。
TRIzol?LS试试能一试品里有序分提取从个离RNA、DNA 和蛋白试。
TRIzol?LS试试均试化试品后～加入试～能看试分试试象～上试是透明的含仿RNA的水相～中试试～下试是试色的有机相;含有DNA和蛋白试,。
水相RNA 用丙醇能淀分～中试试或异沉离者下试中的DNA用乙醇淀分～丙醇淀能使蛋白试沉离异沉从酚?醇相的上液中清沉来沉淀出。
淀出的RNA、DNA和蛋白试洗试试～重试后用于下游。
脱分的离RNA可以用于RT-PCR, Northern Blot analysis, Dot Blot hybridization, poly(A)+selection, in vitro translation, RNase protection assay, and molecular cloning分的离DNA可以用于PCR, and Restriction Enzyme digestion, and Southern Blots.分的蛋白试可以用于离Western Blots, recovery of some enzymatic activity, and someimmunoprecipitation.注意,TRIzol?LS试试适用于液试品;如～血液和病毒制品,。
TRIZOL试剂提取RNA
TRIZOL试剂警告：接触皮肤或误吞将导致中毒或灼伤。
接触皮肤之后立即用去垢剂和水冲洗。
若感到不适，请遵医嘱（可能的话出示标签）。
收到药品后，在室温下存储。
以已证明TRIZOL在常温下可稳定储存12个月。
说明：TRIZOL是一种从细胞和组织中提取总RNA的现用试剂。
该试剂是一种苯酚异硫氰酸酯单相溶液，它发展自Chomczynski 和Sacchi的RNA一步抽提法。
在细胞破碎和溶解细胞组分时，TRIZOL可以保持细胞匀浆或抽提物中RNA的完整性。
离心后加入氯仿，将溶液分为水相和有机相。
RNA只留在水相中。
转移水相后，用异丙醇沉淀回收RNA。
除去水相后，样品中的DNA和蛋白质也可以用后续沉淀方法回收。
用乙醇从相界面间沉淀DNA，异丙醇从有机相回收蛋白质。
DNA的共纯化可能对样品间RNA产量的正常化有用。
这项提取技术对人、动物、植物或细菌来源的各种量的组织（低至50-100mg，高至≥1g）和细胞（低至5×106，高至＞107）都有良好的效果。
其简单的操作方法允许同时处理大量样品。
整个过程可在1小时内完成。
用TRIZOL提出的总RNA不含蛋白质和DNA污染，可用来做Northern 电泳分析、斑点杂交、poly (A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。
在PCR和扩大DNA酶Ⅰ梯度分离中，建议使用一个内含子中的两个引物。
TRIZOL简化了各种类型的大分子及小分子RNA的分离。
例如，从鼠肝分离的RNA经琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色，显示出介于7到15kb的大分子RNA条带,（由mRNA和hnRNA组成的）两个约5kb（28S）和2kb（18S）核糖体RNA的条带，以及介于0.1到0.3kb（tRNA, 5S）的小分子RNA的条带。
所分离的RNA稀释于TE时A260/A280之比大于等于1.8。
谨防RNase的污染：在提取中任何不正确的操作方法中都可能偶然引入RNase。
由于其活性难以抑制，因此只能直接避免其引入。
TRIZOL用法
TRIZOL（invitrogen life techologies）一．RNA提取1.-80o C取标本2.取组织3.液氮中陶瓷研钵研磨，组织呈粉状时转移到预先称重的5毫升的塑料离心管中，离心管需要DEPC水处理后，灭菌。
称重，得组织100mg4.加入TRIZOL 1.5ml（-60 o C—-70o C下，可存放1个月）5.室温保温5min6.加入氯仿0.3ml，盖紧手震动混匀15s7.室温2-3min8.4 o C，12000g 15min9.取上清约0.8ml，转移到1.5ml离心管中，管子处理同上，去净上清的中下层液体用于DNA和蛋白质的提取10.加异丙醇0.7ml，混匀，室温下10min11.4 o C，10000g 10min12.弃上清，加1.4ml 75%乙醇（以DEPC处理灭菌水配制）混匀13.4 o C，7000g 5min14.弃上清，室温干燥5min15.DEPC处理灭菌纯水100μl溶解，-70 o C保存二．DNA提取1.去净上清的中下层液体约0.6ml，加入100%乙醇0.45ml，混匀2.室温下2-3min3.4 o C，5000g 5min4.去除液体，可保留用为蛋白提取5.加入0.1M柠檬酸钠75%乙醇溶液洗涤1.4ml DNA沉淀，室温下30分钟，间断混匀6.4 o C，2000g 5min7.重复洗涤一次8.加入0.1M柠檬酸钠75%乙醇溶液洗涤1.4ml DNA沉淀，室温下15分钟，间断混匀9.4 o C，2000g 5min10.室温下干燥5-15min11.在300-600μl 8mM NaOH中溶解，DNA浓度约为0.2-0.3 μg/ μl12.若有不溶物，12000g 10min13.上清可以在4 o C存放过夜14.长时间保存需要用HEPES加1mM EDTA调整pH至7-8。
三．蛋白质提取1.转移上清到5ml的离心管中，大约体积为1ml2.加入2.3ml异丙醇（1.5ml/mlTRIZOL），室温下保温10min3.4 o C，12000g 10min4.加入3ml（2ml/mlTRIZOL）含0.3M盐酸胍的95%乙醇，室温下20min5.4 o C，7500g 5min6.重复洗涤3次7.加入2ml乙醇，室温下20min8.4 o C，7500g 5min9.真空干燥蛋白沉淀5－10min，1%SDS溶解10.完全溶解需要在50 o C保温，不溶物可4 o C 10000g 10min离心去除11.上清转移至新管，可用于Western blotting或－20o C存放。
RNA提取Trizol 使用说明书
Trizol使用说明书一、分离纯化的基本原理研究基因的表达和调控时常常要从组织和细胞中分离和纯化RNA。
RNA质量的高低常常影响cDNA库，RT-PCR和Northern Blot等分子生物学实验的成败。
Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶。
二、用户需自备的试剂和材料无水乙醇、氯仿、Glycogen（可能需要）、 1.5ml Eppendorf管（RNase-free）、 Tips （RNase-free）三、准备工作RNase酶非常稳定，是导致RNA降解最主要的物质。
它在一些极端的条件可以暂时失活，但限制因素去除后有迅速复性。
用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂都不能是RNase完全失活。
它广泛存在于人的皮肤上，因此，在与RNA制备有关的分子生物学实验时，必须戴手套。
RNase的又一污染源是取液器，根据取液器制造商的要求对取液器进行处理。
一般情况下采用用DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的内部和外部，基本达到要求。
取RNase-free的物品时必须戴手套。
1、 料制品的处理尽可能使用无菌，一次性塑料制品，已标明RNase-Free 的塑料制品，如没有开封使用过通常没有必要再次处理。
对于国产塑料制品，原则上都必须处理方可使用。
处理步骤如下：1）在玻璃烧杯中注入去离子水，加入DEPC使DEPC的终浓度为0.1%。
注意：DEPC为剧毒物，活性很强，小心在通风柜中使用。
2）处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中，注入DEPC水溶液，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中。
3）在通风柜中室温处理过夜。
4）将DEPC水溶液小心倒到废液瓶中，用铝箔封住含已DEPC水处理过的塑料制品的烧杯，高温高压蒸气灭菌至少30分钟。
5）烘箱用合适的温度烘拷至干燥。
置于干净处备用。
2、 璃玻和金属物品250°C烘烤3小时以上。
四、从组织中提取总RNA1)液氮研磨，组织块直接放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织变软，再加少量液氮，再研磨，如此三次，按50-100mg组织/ml Trizol加入Trizol，转入离心管进行第2步操作。
诺维赞trizol说明书
诺维赞trizol说明书一、药物名称商品名：诺维赞（Novalzone）通用名：trizol二、药物成分每片（包或瓶）含有主要成分trizol 500mg。
三、适应症诺维赞（trizol）适用于治疗以下感染性疾病：1.呼吸道感染2.泌尿系统感染3.皮肤和软组织感染4.肺炎5.腹部感染6.中耳炎7.骨关节感染8.表皮感染9.尿道感染10.盆腔炎四、禁忌症1.对磺胺类药物过敏者2.肾功能不全或肾衰竭患者3.儿童（特别是6岁以下）五、用法和用量成人一般剂量为每日2-4次，每次服用1片（500mg）。
儿童用量需根据年龄和体重进行确定，以避免过量。
应按照医生的指示准确服用。
六、注意事项1.使用前请阅读本说明书，并请遵循医生的建议。
4.患有肝功能异常的患者应在医生指导下使用。
5.患有糖尿病的患者请监测血糖，因为该药物可能会影响血糖水平。
6.使用过程中如出现恶心、呕吐、头晕等不适症状，应及时就医。
七、不良反应1.常见的不良反应包括胃肠道不适，如恶心、呕吐、腹泻、腹痛等。
2.偶尔可能出现过敏反应，如皮疹、红肿、呼吸困难等。
八、药物相互作用1.请告诉医生您正在使用的所有药物，包括非处方药、补品和保健品。
2. trizol可能与一些药物相互作用，增加药物的毒性或降低疗效。
请遵循医生的建议。
九、贮藏方式1.请将药物放在干燥、避光的地方，远离儿童。
2.药物过期后请勿使用。
十、生产厂家本药品由诺维赞制药有限公司生产。
trizol LS 试剂使用中文说明书
TRIzol LS 试剂(ambion)（中文说明书）货号规格室温贮存10296-010 100ml10296-028 200ml产品描述TRIzol LS试剂适用于液体样品，如人、动植物、酵母、细菌或者病毒来源的液体样品，提取高质量的总RNA（DNA和蛋白质也可以）全过程只需1小时。
TRIzol LS试剂里含有酚、异硫氰酸胍和其它成分，由于在摇匀样品过程中能很有效地抑制RNase活性，所以TRIzol LS试剂能维持RNA完整性。
TRIzol LS试剂允许同时处理大量的样品。
TRIzol LS试剂能从一个样品里有序分离提取RNA、DNA和蛋白质。
TRIzol LS试剂均质化样品后，加入氯仿，能看见分层现象，上层是透明的含RNA的水相，中间层，下层是红色的有机相（含有DNA和蛋白质）。
水相RNA用异丙醇能沉淀分离；中间层或者下层中的DNA用乙醇沉淀分离；异丙醇沉淀能使蛋白质从酚-醇相的上清液中沉淀出来。
沉淀出的RNA、DNA 和蛋白质洗脱杂质，重悬后用于下游。
分离的RNA可以用于RT-PCR, Northern Blot analysis, Dot Blot hybridization, poly(A)+ selection, in vitro translation, RNase protection assay, and molecular cloning 分离的DNA可以用于PCR, and Restriction Enzyme digestion, and Southern Blots.分离的蛋白质可以用于Western Blots, recovery of some enzymatic activity, and some immunoprecipitation.注意：TRIzol LS试剂适用于液体样品（如，血液和病毒制品）。
TRIzol LS试剂与TRIzol试剂仅在它们成分的含量上不同，TRIzol LS试剂的浓度更高，因此相对于同个样品时，TRIzol LS试剂需要量更少。
TRIzol中文说明书
TRIzol2-8℃避光保存产品包装：100ml蓝色透明液体产品简介：TRIzol试剂适用于从细胞和组织中快速分离RNA。
TRIzol试剂有多组分分离作用,TRIzol使样品匀浆化，细胞裂解，溶解细胞内含物，同时保持RNA的完整性。
在加入氯仿离心后，溶液分为水相和有机相，RNA在水相中。
取出水相用异丙醇沉淀可回收RNA；用乙醇沉淀中间层可回收DNA；用异丙醇沉淀有机相可回收蛋白质。
TRIzol试剂可用于小量样品（50~100mg组织、5×106细胞）也适用于大量样品（≥1g组织、>107细胞）。
对人，动物，植物组织，细菌均适用，整个提取过程在一小时内即可完成。
分离的总RNA无蛋白质和DNA污染，可用于Northernblot，dotblot，ployA筛选，体外翻译，RNase 保护分析和分子克隆。
在用于RT-PCR时如果两条引物存在于一个单一外显子内，建议用无RNase的DNaseⅠ处理RNA样品，避免出现假阳性。
共纯化的DNA可用作标准，比较不同样品RNA的得率，也可用于PCR和酶切。
蛋白质可用于westernblotting。
注意事项：请勿直接接触皮肤或吞咽，以免灼伤。
如接触皮肤应立即用洗涤剂和大量水冲洗。
忌用乙醇擦洗，乙醇会加重灼伤。
预防RNase污染注意事项：1．经常更换新手套，皮肤上常带有的细菌，霉菌可能成为RNase的来源。
2．使用灭过菌的RNA专用塑料制品避免交叉污染。
3．RNA在TRIzol试剂中时不会被RNase污染，但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。
玻璃器皿可在150℃烘烤4小时，塑料制品可在0.5MNaOH中浸泡10分钟，然后用水彻底清洗，高压灭菌，即可去除RNase。
4．配制溶液应使用无RNase的水（将水加入处理过不含RNase的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.01℅v/v,放置过夜,高压灭菌。
注：DEPC有致癌之嫌，需小心操作。
TRIzol中文说明书
T R I z o l中文说明书-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1TRIzol2-8℃避光保存产品包装：100ml蓝色透明液体产品简介：TRIzol试剂适用于从细胞和组织中快速分离RNA。
TRIzol试剂有多组分分离作用,TRIzol使样品匀浆化，细胞裂解，溶解细胞内含物，同时保持RNA的完整性。
在加入氯仿离心后，溶液分为水相和有机相，RNA在水相中。
取出水相用异丙醇沉淀可回收RNA；用乙醇沉淀中间层可回收DNA；用异丙醇沉淀有机相可回收蛋白质。
TRIzol试剂可用于小量样品（50~100mg组织、5×106细胞）也适用于大量样品（≥1g组织、>107细胞）。
对人，动物，植物组织，细菌均适用，整个提取过程在一小时内即可完成。
分离的总RNA无蛋白质和DNA污染，可用于Northernblot，dotblot，ployA筛选，体外翻译，RNase保护分析和分子克隆。
在用于RT-PCR时如果两条引物存在于一个单一外显子内，建议用无RNase的DNaseⅠ处理RNA样品，避免出现假阳性。
共纯化的DNA可用作标准，比较不同样品RNA的得率，也可用于PCR和酶切。
蛋白质可用于westernblotting。
注意事项：请勿直接接触皮肤或吞咽，以免灼伤。
如接触皮肤应立即用洗涤剂和大量水冲洗。
忌用乙醇擦洗，乙醇会加重灼伤。
预防RNase污染注意事项：1．经常更换新手套，皮肤上常带有的细菌，霉菌可能成为RNase的来源。
2．使用灭过菌的RNA专用塑料制品避免交叉污染。
3．RNA在TRIzol试剂中时不会被RNase污染，但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。
玻璃器皿可在150℃烘烤4小时，塑料制品可在中浸泡10分钟，然后用水彻底清洗，高压灭菌，即可去除RNase。
4．配制溶液应使用无RNase的水（将水加入处理过不含RNase的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度℅v/v,放置过夜,高压灭菌。
用Trizol提取DNA,RNA及蛋白质的方法及注意事项
TRIZOL试剂警告：接触皮肤或误吞将导致中毒或灼伤。
接触皮肤之后立即用去垢剂和水冲洗。
若感到不适，请遵医嘱（可能的话出示标签）。
收到药品后，在室温下存储。
以已证明TRIZOL在常温下可稳定储存12个月。
说明：TRIZOL是一种从细胞和组织中提取总RNA的现用试剂。
该试剂是一种苯酚异硫氰酸酯单相溶液，它发展自Chomczynski 和Sacchi的RNA一步抽提法。
在细胞破碎和溶解细胞组分时，TRIZOL可以保持细胞匀浆或抽提物中RNA的完整性。
离心后加入氯仿，将溶液分为水相和有机相。
RNA只留在水相中。
转移水相后，用异丙醇沉淀回收RNA。
除去水相后，样品中的DNA和蛋白质也可以用后续沉淀方法回收。
用乙醇从相界面间沉淀DNA，异丙醇从有机相回收蛋白质。
DNA 的共纯化可能对样品间RNA产量的正常化有用。
这项提取技术对人、动物、植物或细菌来源的各种量的组织（低至50-100mg，高至≥1g）和细胞（低至5×106，高至＞107）都有良好的效果。
其简单的操作方法允许同时处理大量样品。
整个过程可在1小时内完成。
用TRIZOL提出的总RNA 不含蛋白质和DNA污染，可用来做Northern 电泳分析、斑点杂交、poly (A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。
在PCR和扩大DNA酶Ⅰ梯度分离中，建议使用一个内含子中的两个引物。
TRIZOL简化了各种类型的大分子及小分子RNA的分离。
例如，从鼠肝分离的RNA经琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色，显示出介于7到15kb的大分子RNA 条带,（由mRNA和hnRNA组成的）两个约5kb（28S）和2kb（18S）核糖体RNA 的条带，以及介于0.1到0.3kb（tRNA, 5S）的小分子RNA的条带。
所分离的RNA 稀释于TE时A260/A280之比大于等于1.8。
谨防RNase的污染：在提取中任何不正确的操作方法中都可能偶然引入RNase。
由于其活性难以抑制，因此只能直接避免其引入。
invitrogen trizol rna抽提说明书
RNA抽提全过程(TRIZOL)一，准备工作1，实验器具与材料：（1）移液枪：1ml、200ul、10ul（2）吸头：1ml、200ul、20ul（3）吸头台：放置1ml吸头的一个，放置200ul和20ul的吸头一个（4）EP管1.5ml、100ul（5）玻璃研磨器（6）容量瓶：1000ml（7）盐水瓶：100ml（8）15ml塑料管一个（配75％乙醇用）2，实验器具的处理与准备（1）塑料制品：（包括吸头、EP管等）将塑料制品逐个浸泡于1‰DEPC水中（必要时小枪头需要用吸管打入DEPC水）37℃过夜，然后送至高压3次，后在80℃烘烤箱中烘干（或置于37℃中8小时左右烘干），试验前将枪头放入吸头台。
或直接购买经DEPC处理的枪头和EP管,每盒大约30元,基本上试剂公司都可以购买。
（2）玻璃制品：（主要是玻璃研磨器）先泡酸过夜，冲洗干净后，在1‰DEPC水中泡8小时左右，37℃烘干，用蒙锡纸包裹送至干烤3次（或180度干烤）。
（3）金属制品：（镊子等）先洗干净，再送干烤3次。
（不需要泡DEPC水）3，试剂配制和准备：（1）DEPC水：泡实验器具的DEPC水的配制：1000ml双蒸水中加1mlDEPC，放在1000ml 容量瓶中静置4小时后备用。
配75％乙醇的DEPC水的配制：100ml盐水瓶内装40ml双蒸水，加40ulDEPC，37℃过夜，送至高压。
（2）75％乙醇（要在抽提时现配）：用无水乙醇和DEPC水配制（DEPC水:无水乙醇＝1:3），然后放于-20℃备用。
（3）异丙醇：放入棕色瓶（4）氯仿：放入棕色瓶（5）Trizol：100ml/瓶存放于4℃二，抽提时注意事项：全程佩戴一次性手套和口罩，手套要勤换，避免戴上的一次性的手套接触可疑污染物。
三，抽提步骤1．匀浆化作用取约100mg鼠脑组织放于玻璃研磨器内，先加0.2ml的Trizol溶液，研磨组织后，倒入1.5mlEP管中，再在研磨器内加入0.8ml的Trizol溶液洗，后全部再倒入EP管中。
trizol 使用说明书中文版
Trizol使用说明书一、分离纯化的基本原理研究基因的表达和调控时常常要从组织和细胞中分离和纯化RNA。
RNA质量的高低常常影响cDNA库，RT-PCR和Northern Blot等分子生物学实验的成败。
Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶。
二、用户需自备的试剂和材料无水乙醇、氯仿、Glycogen（可能需要）、 1.5ml Eppendorf管（RNase-free）、 Tips （RNase-free）三、准备工作RNase酶非常稳定，是导致RNA降解最主要的物质。
它在一些极端的条件可以暂时失活，但限制因素去除后有迅速复性。
用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂都不能是RNase完全失活。
它广泛存在于人的皮肤上，因此，在与RNA制备有关的分子生物学实验时，必须戴手套。
RNase的又一污染源是取液器，根据取液器制造商的要求对取液器进行处理。
一般情况下采用用DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的内部和外部，基本达到要求。
取RNase-free的物品时必须戴手套。
1、 料制品的处理尽可能使用无菌，一次性塑料制品，已标明RNase-Free 的塑料制品，如没有开封使用过通常没有必要再次处理。
对于国产塑料制品，原则上都必须处理方可使用。
处理步骤如下：1）在玻璃烧杯中注入去离子水，加入DEPC使DEPC的终浓度为0.1%。
注意：DEPC为剧毒物，活性很强，小心在通风柜中使用。
2）处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中，注入DEPC水溶液，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中。
3）在通风柜中室温处理过夜。
4）将DEPC水溶液小心倒到废液瓶中，用铝箔封住含已DEPC水处理过的塑料制品的烧杯，高温高压蒸气灭菌至少30分钟。
5）烘箱用合适的温度烘拷至干燥。
置于干净处备用。
2、 璃玻和金属物品250°C烘烤3小时以上。
四、从组织中提取总RNA1)液氮研磨，组织块直接放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织变软，再加少量液氮，再研磨，如此三次，按50-100mg组织/ml Trizol加入Trizol，转入离心管进行第2步操作。
TRIzol中文说明书
T R I z o l中文说明书(共5页) -本页仅作为预览文档封面，使用时请删除本页-TRIzol2-8℃避光保存产品包装：100ml蓝色透明液体产品简介：TRIzol试剂适用于从细胞和组织中快速分离RNA。
TRIzol试剂有多组分分离作用,TRIzol使样品匀浆化，细胞裂解，溶解细胞内含物，同时保持RNA的完整性。
在加入氯仿离心后，溶液分为水相和有机相，RNA在水相中。
取出水相用异丙醇沉淀可回收RNA；用乙醇沉淀中间层可回收DNA；用异丙醇沉淀有机相可回收蛋白质。
TRIzol试剂可用于小量样品（50~100mg组织、5×106细胞）也适用于大量样品（≥1g组织、>107细胞）。
对人，动物，植物组织，细菌均适用，整个提取过程在一小时内即可完成。
分离的总RNA无蛋白质和DNA污染，可用于Northernblot，dotblot，ployA筛选，体外翻译，RNase保护分析和分子克隆。
在用于RT-PCR时如果两条引物存在于一个单一外显子内，建议用无RNase 的DNaseⅠ处理RNA样品，避免出现假阳性。
共纯化的DNA可用作标准，比较不同样品RNA的得率，也可用于PCR和酶切。
蛋白质可用于westernblotting。
注意事项：请勿直接接触皮肤或吞咽，以免灼伤。
如接触皮肤应立即用洗涤剂和大量水冲洗。
忌用乙醇擦洗，乙醇会加重灼伤。
预防RNase污染注意事项：1．经常更换新手套，皮肤上常带有的细菌，霉菌可能成为RNase的来源。
2．使用灭过菌的RNA专用塑料制品避免交叉污染。
3．RNA在TRIzol试剂中时不会被RNase污染，但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。
玻璃器皿可在150℃烘烤4小时，塑料制品可在中浸泡10分钟，然后用水彻底清洗，高压灭菌，即可去除RNase。
4．配制溶液应使用无RNase的水（将水加入处理过不含RNase的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度℅v/v,放置过夜,高压灭菌。
trizol试剂法
Trizol试剂法是一种用于提取RNA的常用方法，其操作简单，可以同时处理多个样品，且提取的RNA无DNA 和蛋白质污染。
以下是其基本步骤：
1. 将细胞或组织样本磨碎，具体操作方法是将细胞或组织样本放入匀浆器中，加入Trizol试剂，通过反复
研磨来破碎细胞。
2. 加入氯仿，用力震荡后离心。
此步操作可使不同物质分相，将RNA留在水相中。
3. 将水相转移至新的EP管中，加入异丙醇后再次离心。
这一步可促进RNA沉淀。
4. 去除上清液，用75%乙醇洗涤RNA沉淀，最后让RNA在室温下自然干燥。
5. 用无RNA酶的水溶解RNA沉淀。
此外，Trizol试剂法提取RNA时，需注意以下几点：
1. 在收集到生物材料后应尽快进行RNA制备工作，以避免RNA降解。
2. 提取RNA时，每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解；提取细胞RNA时，先离心沉淀细
胞，每5~106个细胞加1ml Trizol后，反复用枪吹打或剧烈震荡以裂解细胞。
3. 提取的总RNA没有DNA和蛋白质污染，可用于 Northern blot、RT-PCR、Dot blot、RNase 保护分
析等。
请注意，对于不同类型和状态的材料，可能需要调整Trizol试剂法的具体步骤和参数。
因此，在实验过程中应根据实际情况进行调整。
Trizol试剂
Trizol Reagent/总RNA提取试剂发布日期：[2007-7-13] 共阅[7177]次Trizol Reagent/总RNA提取试剂说明书产品简介TRIzol是从细胞和组织中提取总RNA的即用型试剂，在样品裂解或匀浆过程中，TRIzol能保持RNA完整性。
加入氯仿后，溶液分为水相和有机相，RNA在水相中。
取出水相，用异丙醇可沉淀回收RNA。
TRIzol试剂可用于小量样品（50－100mg组织、5×106细胞），也可用于大量样品（≥1g组织或≥107个细胞），对人、动物、植物和细菌、血液提取都适用，可同时处理大量不同样品。
一个小时内即可完成反应，提取的总RNA没有DNA和蛋白质污染，可用于Northern blot、RT-PCR、Dot blot、RNase保护分析等。
本试剂为红颜色，便于区分水相和有机相，同时最大限度的保持RNA的稳定性。
保存条件2-8℃避光保存12个月。
实验前需要准备的试剂氯仿、异丙醇、75%乙醇（用RNase-free水配制）、RNase-free的水。
操作步骤1. 匀浆处理（Homogenization）组织中提取总RNA1) 植物组织：植物叶片直接放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨成粉末，每50-100mg植物叶片加入1ml TRIzol。
2) 动物组织：按10-30mg组织加入1ml TRIzol，用电动匀浆器或者一次性研磨杵充分匀浆。
培养细胞中提取总RNA1) 贴壁细胞：无须胰酶消化，可直接用TRIzol进行裂解，每10平方厘米培养面积加1ml TRIzol。
2) 悬浮细胞：可直接离心收集、裂解，每1ml TRIzol可裂解5×106动物或酵母细胞，或107细菌细胞。
血液中提取总RNA直接取新鲜的血液，加入3倍体积红细胞裂解液，混匀后室温放置10分钟，10,000 rpm离心1分钟。
彻底吸弃上清，收集白细胞沉淀。
每100-200μl血液收集的白细胞沉淀加入1ml TRIzol。
trizol-LS-试剂使用中文说明书
TRIzol LS 试剂(ambion)（中文说明书）货号规格室温贮存10296-010 100ml10296-028 200ml产品描述TRIzol LS试剂适用于液体样品，如人、动植物、酵母、细菌或者病毒来源的液体样品，提取高质量的总RNA（DNA和蛋白质也可以）全过程只需1小时。
TRIzol LS试剂里含有酚、异硫氰酸胍和其它成分，由于在摇匀样品过程中能很有效地抑制RNase活性，所以TRIzol LS试剂能维持RNA完整性。
TRIzol LS试剂允许同时处理大量的样品。
TRIzol LS试剂能从一个样品里有序分离提取RNA、DNA和蛋白质。
TRIzol LS试剂均质化样品后，加入氯仿，能看见分层现象，上层是透明的含RNA的水相，中间层，下层是红色的有机相（含有DNA和蛋白质）。
水相RNA用异丙醇能沉淀分离；中间层或者下层中的DNA用乙醇沉淀分离；异丙醇沉淀能使蛋白质从酚-醇相的上清液中沉淀出来。
沉淀出的RNA、DNA 和蛋白质洗脱杂质，重悬后用于下游。
分离的RNA可以用于RT-PCR, Northern Blot analysis, Dot Blot hybridization, poly(A)+ selection, in vitro translation, RNase protection assay, and molecular cloning 分离的DNA可以用于PCR, and Restriction Enzyme digestion, and Southern Blots.分离的蛋白质可以用于Western Blots, recovery of some enzymatic activity, and some immunoprecipitation.注意：TRIzol LS试剂适用于液体样品（如，血液和病毒制品）。
TRIzol LS试剂与TRIzol试剂仅在它们成分的含量上不同，TRIzol LS试剂的浓度更高，因此相对于同个样品时，TRIzol LS试剂需要量更少。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
TRIzol（Invitrogen）试剂的性能描述及注意事项
警告：
TRIzol试剂与皮肤接触及吞咽有毒。
可导致烧伤。
与皮肤接触后，应立即用洗涤剂和大量清水冲洗。
如感到身体不适，应就医（如需要，请出示本产品标签）。
本产品含有苯酚和其他成分。
已经证明TRIzol在室温下可稳定保存12个月。
但我们建议在储存于2-8°C，以保证最佳性能。
性能描述：
TRIzol试剂（美国专利号，5346994）是即用型细胞或组织总RNA提取试剂。
该试剂是利用苯酚和异硫氰酸胍一步完成提取RNA的方法，是对Chomczynski和Sacchi开发的单步RNA提取法的改善。
在匀质化或裂解样品中，TRIzol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞并溶解细胞成分。
加入氯仿离心后，溶液分离成水相和有机相。
仅RNA存在于水相中。
将水相转移后，RNA通过异丙醇沉淀回收。
移去水相后，样品中DNA和蛋白质可通过相继沉淀回收。
用乙醇沉淀可从中间相得到DNA，加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。
此技术既可良好的应用于少量组织（50-100mg）和细胞（5×106），也可用于大量的组织（≥1g）和细胞（>107）的处理，组织和细胞不限于人、动物、植物或细菌。
TRIzol试剂使用简单方便，可同时处理大量样本。
整个过程可在一小时内完成。
用TRIZOL提取总RNA可避免蛋白质和DNA污染。
提取的RNA可用于Northern blot分析、斑点杂交、poly（A）+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。
TRIzol试剂方便提取不同种类、不同分子大小的RNA。
例如，从大鼠肝中提取RNA，经琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色，高分子量RNA离散带长度可高达7kb和15kb，(组成mRNA’s和hnRNA’s)，两个主要的核糖体RN A 带在~5kB（28S）和~2Kb（18S）。
低分子量RNA介于0.1和0.3kB
之间（tRNA，5S）。
分离出的RNA用TE稀释，其A260/A280比值≥1.8。
防止RNA酶污染的注意事项
在不当的技术操作过程中，RNA酶可在任何提取程序中意外引入RNA的制备中。
由于酶的活性难以抑制，所以必须防止其引入。
进行RNA工作时，下列准则应予以遵守。
①一直戴着手套。
皮肤上通常包含的细菌和霉菌，可污染RNA的制备，同时也是RNA酶的一个来源。
良好的微生物操作技术可防止微生物污染。
②使用无菌制品，专为RNA工作准备的一次性塑料器皿和自动吸管避免与共用设备的RNA酶交叉污染。
例如，一个实验室正在使用的RNA探针可能用得上RNA酶A或RNA酶T1以减少过滤背景，其中任何非一次性物品（如自动吸管）可能是大量RNA酶的来源。
③TRIzol试剂可保护RNA酶对RNA的污染。
下游样品处理要求非一次性的玻璃器皿或塑料器皿无RNA酶。
玻璃物品可以在150℃烘烤4小时，塑料制品，可浸泡10分钟的0.5M NaOH溶液，然后用清水彻底冲洗，并高压蒸汽灭菌。
其他需要注意的事项：
①用小于2毫升体积的TRIZOL试剂工作时，建议使用一次性透明聚丙烯管。
②对于较大的体积，用玻璃（Corex）或聚丙烯管，并测试以确保该管装满TRIzol试剂和氯仿时可承受12,000×g的离心力，不要使用泄漏或有裂纹的管子。
③离心前平衡管子的重量
④玻璃管必须用封口膜密封，密封时封口膜要覆盖有螺丝处，聚丙烯管
离心前必须盖好。
警告：当使用TRIzol试剂工作时，应使用手套，并保护眼睛（屏蔽、安全护目镜）。
避免与皮肤或衣服接触。
使用化学通风橱。
避免吸入蒸气。
除非特别注明，所有程序均在15-30°C下进行。