血液葡萄糖定量测定
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血液葡萄糖测定-福林(Folin )-吴宪氏法
目的
了解测定原理,掌握福林-吴宪氏法测定葡萄糖方法。
原理
葡萄糖是多羟基的醛类化合物,其醛基具有还原性,与碱性铜试剂反应后葡萄糖的醛基被氧化成羧基,铜(Cu 2+)离子被还原成砖红色的氧化亚铜(Cu 2O )。氧化亚铜可使磷钼酸还原成钼蓝其
蓝色的深浅葡萄糖浓度成正比,在620nm 处有最大吸收峰。用标准葡萄糖利用分光光度计一同进行比色测定,可计算出样品中葡萄糖的含量。
测定血糖是在特制福林一吴宪血糖管中进行,该血糖管于4m1容量处,管颈缩小成一细管状,
可以减少在煮沸时管内液体与空气的接触,避免产生的氧化亚铜再氧化。 步骤
1. 用钨酸法制备1:10全血无蛋白滤液(相当于将原血稀释了10倍,已由教师准备好)。
盖紧紧管口颠倒摇匀,在420nm 波长处进行比色测定,用空白管调零读取各管的光密度值(OD )或光吸收值(A )。
3. 计算
高浓度标准管: