甲胎蛋白诊断试剂盒说明书
SOP文件：甲胎蛋白(AFP)1
宁城县中蒙医院赤峰市精神病防治院检验科CLinLab.NCXZMYY(CFSJSBFZY)甲胎蛋白（AFP）标准操作程序编号：日期：版本：第页共页1、变动程序：由操作者提出，并经科主任审核。
2、范围：测定人血清、血浆、体液中的甲胎蛋白。
3、操作程序：使用仪器：日本东曹AIA-600II型全自动化学发光免疫分析仪生产厂商名称：日本东曹株式会社注册号：国食药监械（进）字2007第2400371号3.1、测定原理:本试剂盒使用的是高亲合性抗AFP抗体，并采用一步EIA夹心法定量检测人血清和体液中的AFP含量，可用于原发性肝细胞癌、肝炎、肝硬化、怀孕后期的诊断，治疗过程中的监视以及治疗后的效果评价3.2、试剂：E-test（TOSOH）Ⅱ（AFP）免疫反应试剂3.3 操作步骤3.3.1、在试剂Cup中加入100微升缓冲液和25微升标准品或稀释后的样品溶液，在磁石磁珠振动器上搅拌，在37℃下使抗原抗体反应进行10分钟3.3.2、用洗脱液冲洗试剂Cup，除去其中游离的酶联标记抗体和样品成分（B·F分离）。
3.3.3、加入基质液后，在磁石磁珠振动器上搅拌同时用荧光检测器检测荧光物质的荧光强度，激发波长363nm，荧光吸收波长447nm，并计算出荧光物质的生成速度。
3.3.4、根据标准液检测绘制的荧光物质生成速度标准曲线，计算出样品中AFP的浓度。
3.3.5、如果检测结果超过400ng/mL时，要用样品稀释液提高稀释倍数重新稀释，并按照（1-4）步骤检测。
3.4、结果判定3.4.1、应用E-test（TOSOH）Ⅱ（AFP）标准品试剂盒绘制标准曲线，从曲线中计算出样品中AFP的浓度。
3.4.2、分析225例健康者血清中AFP浓度的检测结果，所得的参考标准范围是0.9-7.6ng/ml。
其中，参考标准范围因为很容易受其他各种因素影响，所以希望各单位自行设定。
4、注意事项：1. 本品是一种体外诊断用试剂，禁止以其他目的使用。
甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒说明书
甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒说明书甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒说明书Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）用途：科研实验等领域科学研究，不得用于临床诊断。
供应商：上海樊克生物有限公司甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒说明书甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒说明书试剂盒操作步骤：温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
试剂盒样品的采集和存储血清-使用血清分离管，使样品在室温下或凝块一夜之间两个小时在大约1000×4oC G.测定新鲜制备的血清离心20分钟立即或存放样品在-20°C或稀释后使用80oC。
避免反复冻融循环。
血浆采集血浆用EDTA或肝素作为抗凝剂。
15分钟，离心样品×G在2到8摄氏度范围内采集30分钟。
去除血浆和即刻检测或者储存样品液体类标本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
）血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
）血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
）尿液：用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照此实行。
）细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。
甲胎蛋白诊断试剂盒说明书
血清甲胎蛋白检测操作规程一．检验原理根据酶联免疫双抗体夹心法的作用原理，利用抗原、抗体反应的特异性与酶的高效催化性研制而成，其原理是将特异性抗体吸附到固相载体上。
加入待测的样品，与吸附于固相载体上的特异性抗体反应后，洗去未反应的样品，加入酶标记的特异性抗体与抗原反应，生成抗体－抗原－酶标抗体复合物，再加入底物和显色剂，生成可显色的产物，进行检测。
二．试剂盒组成96人份/盒：1.AFP标准品：5IU/ml、10IU/ml、20IU/ml、50IU/ml、100IU/ml、200IU/ml 各一瓶2.包被条96孔: AFP单抗；3.酶结合物（1号液）1瓶：酶标记单抗；4.洗液（2号液）1瓶：乳化剂OP；5.底物(3号液) 1瓶：过氧化脲；6.显色剂（4号液）1瓶：TMB；7.终止液1瓶：硫酸；8.说明书：1份不同批号的试剂不能混用。
三．储存条件及有效期本试剂盒在2-8℃保存，有效期为一年；打开包装后在4℃保存一个月。
四．适用仪器酶标仪、恒温培养箱、100µl移液器、1000µl移液器。
五．样本要求1.样本应为新鲜的血清。
2.溶血样本不可使用。
3.样本未能在24小时内使用时应-20℃保存。
4.样本使用前应恢复至室温。
5.禁止反复冻溶。
六．操作方法使用前试剂盒应恢复至室温，将冻干标准品各加入1ml蒸馏水，待完全溶解后与待测样品同时进行操作。
1.加样:将包被孔编号，每孔加标准品或待测样品各100μl。
2.孵育:37℃孵育，20分钟。
3.洗涤:在各孔中加入洗液2滴，轻轻摇动几下，弃之。
然后用蒸馏水或自来水加满各孔，甩掉，反复5次（洗涤要彻底，防止假阳性，但不可洗涤过猛过急而导致假阴性），最后在吸水纸上拍干。
4.加酶:每孔加酶结合物2滴（100μl）。
5.孵育:37℃孵育，15分钟。
6.洗涤:重复步骤“3”。
7.显色:加入底物1滴，随即加入显色剂1滴，轻轻摇动几下，室温反应2～5分钟。
8.终止:每孔加2滴（100μl）终止液。
罗氏中文说明书：甲状腺球蛋白检测试剂盒(电化学发光法)说明书
【产品名称】通用名称：甲状腺球蛋白检测试剂盒(电化学发光法)英文名称：Tg II【包装规格】100测试/盒【预期用途】主要用途用于体外定量测定人血清和血浆的甲状腺球蛋白含量。
Tg的测定能辅助监控甲状腺切除术后的情况。
Elecsys和cobas e 免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ECLIA”。
临床应用甲状腺球蛋白是一种分子量接近660 kDa的糖蛋白。
4Tg由甲状腺细胞大量合成并释放到甲状腺滤泡腔内。
TSH、甲状腺内碘缺乏、促甲状腺激素免疫球蛋白均可刺激Tg的生成。
Tg对外周甲状腺激素T3和T4的合成起决定作用。
它含有约130种酪氨酸残基，其中一部分在TPO(甲状腺过氧化物酶)和碘化物存在时被碘化为单碘-和二碘酪氨酸(MIT和DIT)。
3随后也是在Tg和TPO的作用下，MIT和DIT偶联结合成T3和T4。
5甲状腺细胞合成Tg以及将Tg转送到滤泡的过程中，少量蛋白可进入血流。
因此无甲状腺疾病的健康个体中也能检出低浓度Tg。
Tg浓度升高在不同的甲状腺疾病中均有报道，桥本氏病、葛瑞夫兹病等。
Tg还有助于鉴别亚急性甲状腺炎和人为甲状腺毒症。
对于先天性甲状腺功能减退症Tg的检测可用于鉴别先天性甲状腺缺失和甲状腺发育不全或其它病理情况。
5,6,7Tg检测主要用于甲状腺全切或次全切术后病人的随访。
由于甲状腺是Tg的唯一已知来源，在甲状腺全切或次全切伴随放射性碘成功消融残留甲状腺组织后，血清Tg浓度将降至极低，甚至检测不到。
对于部分甲状腺切除的病人，检测到的Tg水平取决于手术后残留的甲状腺组织的多少。
若甲状腺全切术后仍可检出Tg则提示DTC残留或复发。
因此Tg明显升高常提示该疾病复发。
8,9,10,11,12,13采用高灵敏度Tg检测后，“甲状腺球蛋白阳性”病人数量增加，即使这些病人并未表现出疾病症状。
13不能认为这些病人没有疾病，应根据当前指南进行监测随访。
已有不同临界值报道用以鉴别仅需监测的病人和那些需要接受进一步诊断和治疗的复发病人。
甲胎蛋白(AFP)测定(化学发光法)
4 操作步骤
1 开机前检查
a 察看电源是否正常安全通电
b 推主机下部的前门，打开后检查洗净水与分注液的用量是否满足当日
用量废试样杯与废吸嘴是否丢弃
2 开机
a更换75%酒精，放置基质液
b 打开电脑主机及AIA-1800电源, 点击主业面进入root
c 试样吸嘴的设置及酶标识试剂，检体稀释液的设置，按主机操作版面
Reagent/Tip键，LED指示灯变为绿色，打开试剂吸嘴护罩，将酶
标识试剂，检体稀释液设置在试剂托架上，将条形码
标识面朝前
d 试剂杯的设置，按主机操作版面的Cup Sorter键，LED指示灯
变为绿色，拉开分类器抽屉将试剂托盘设置在分类器托盘上，将分类器
抽屉推到底
3 开机日检
4 日检通过后，进行标本检测，在树形菜单上进入界面设置标
本检测项目，Assay键点击开始测定
5 测定完毕后，按主机操作版面的Cup Sorter及Reagent/Tip键，LED指
示灯变为绿色，打开试剂吸嘴护罩及分类器抽屉，收集试剂放入冰箱，
更换基质液，放置75%酒精
6 点击关机，待窗口消失，关闭AIA-1800电源，在关闭电脑及主电
源
5 质量控制：
每批试剂都要使用东曹公司标准品作质量控制，请参见AIA-1800仪器操作手册。
甲胎蛋白(AFP)检测试剂盒(胶体金法)
广州健仑生物科技有限公司
甲胎蛋白(AFP)检测试剂盒（胶体金法）
【产品原理】 甲胎蛋白是一种由胚胎细胞和卵黄囊产生的胎儿所特有的蛋白质，正常成人血清中含量极低 （<25ng/ml），当肝细胞恶变时，含量可大大升高（>400ng/ml），因此，测定血清中甲胎蛋白含量 的异常增高，作为早期诊断原发性肝癌，在临床上是非常有效的判定依据。
本品以胶体金作为指示标 记，交联抗-AFP 单克隆抗体，与血清中 AFP 结合，形成双抗体夹心一步法。
用途： 用于定性检测原发性肝癌及其他 AFP 升高疾病， 用于该类疾病的筛选和流行病调查及基层医疗单位的 检测等。
【产品规格】 产品编号 类型 JLAFP JLAFP 样本 反应时间 灵敏度 特异性 有效期 10 分钟 10 分钟 20ng/ml >99% 24 个月 20ng/ml >99% 24 个月 3.0mm（条型） 血清/血浆/全血 2.5mm（条型） 血清/血浆/全血
【生产企业】 广州健仑生物科技有限公司
。
AFP(甲胎蛋白)标准操作程序SOP文件
孕妇血清/羊水AFP检测
反映胎儿状态。母体血清AFP异常增高时可能提示胎儿患低氧症、宫内死亡、遗传缺陷、先天性神经管缺损、无脑儿、脊柱裂等。
胎儿有先天性肾病综合症、先天性食管及十二指肠闭锁、性染色体异常、脑积水、及法乐四联症时，羊水中AFP可明显增高。
ABCD医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-02-03
AFP（甲胎蛋白）
版序：ABCD
页码：第4页，共4页
定标频率：每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器注册24小时以内）标定一次，如再次标定即根据下列要求：
·一个月（同一批号试剂）
·7天（放置仪器上的同一试剂盒）
·根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。
3）年龄因素：AFP对原发性肝癌的诊断率随患者年龄的增加而逐渐下降。对老年人AFP正常或轻微升高不能排除肝癌的可能性。
4）预后：原发性肝癌血清AFP水平与预后有关。肝癌切除后AFP能否正常或上升是判断预后的关键因素。
其他肿瘤
部分卵黄囊肿患者血清AFP上升；
胃癌、结肠癌等内胚层衍生的组织发生的癌，即使未发生肝转移也合成AFP；
·Elecsys2010分析仪
·Elecsys系统缓冲液（ProCell）
·Elecsys测量池清洗液（CleanCell）
·Elecsys添加剂液（SysWash）
·Elecsys系统清洗液支架（Adapter for SysClean)）
·Elecsys 2010反应杯（Assay Cup）
·Elecsys 2010吸样头（Assay Tip）
甲胎蛋白测定试剂盒（时间分辨荧光法）说明书
2022.09.13Kit ComponentsProduct code Description6001-0010Z甲胎蛋白测定试剂盒（时间分辨荧光法）说明书6001-0010Z, 6001-001CZ DELFIA Xpress hAFP kit Components:13803824hAFP calibrators A-F13804966hAFP Tracer13804968hAFP Assay Buffer页 1/5SDS编号: 13803824化学品安全技术说明书根据 GB/T 16483-2008, GB/T 17519-2013版本序号: 3打印日期 2022.09.13在 2022.09.13 审核版本序号: 3打印日期 2022.09.13在 2022.09.13 审核化学品名中文[英文] 称, 化学品俗名或商品名:hAFP calibrators A-F(在 1 页继续)· 需要及时的医疗处理及特别处理的症状无相关详细资料。
版本序号: 3打印日期 2022.09.13在 2022.09.13 审核化学品名中文[英文] 称, 化学品俗名或商品名:hAFP calibrators A-F(在 2 页继续)· 眼睛防护:补充期间建议使用的护目镜版本序号: 3打印日期 2022.09.13在 2022.09.13 审核化学品名中文[英文] 称, 化学品俗名或商品名:hAFP calibrators A-F(在 3 页继续)· 危险的分解产物:未知有危险的分解产品.版本序号: 3打印日期 2022.09.13在 2022.09.13 审核化学品名中文[英文] 称, 化学品俗名或商品名:hAFP calibrators A-F(在 4 页继续)· 环境危害· 海运污染物质:不是· 用户特别预防措施不适用的· MARPOL73/78(针对船舶引起的海洋污染预防协约)附件书2及根据IBC Code(国际装船货物编码)的大量运送不适用的· UN "标准规定":无效页 1/5SDS编号: 13804966化学品安全技术说明书根据 GB/T 16483-2008, GB/T 17519-2013版本序号: 3打印日期 2022.09.13在 2022.09.13 审核版本序号: 3打印日期 2022.09.13在 2022.09.13 审核化学品名中文[英文] 称, 化学品俗名或商品名:hAFP Tracer(在 1 页继续)· 需要及时的医疗处理及特别处理的症状无相关详细资料。
甲胎蛋白( AFP )标准操作程序SOP文件
页码：第2页，共2页
[结果判定]
1、酶标仪检测（选择波长450nm）：每孔终止液1滴后，用空白孔校零，测定各孔OD值。
2、计算：同T3。
[质量控制]
每批检测同步进行标准和质控品测定，绘制室内质控图。其它按室内质量控制管理规定进行。
[正常参考值]
参考值：健康成年人≤25ng/ml。
[临床意义]
6、对AFP弱阳性，建议复查并定期动态观察。检测AFP为辅助诊断指标之一，确诊需结合临床等综合判断。
[注意事项]
1、不同批号的试剂不可混用。
2、试剂盒用前先平衡至室温。含血球的标本易出现假阳性，应避免使用。
3、未用完的板条应及时封存于易封袋中。
4、滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀。滴加时瓶身应保持垂直。
5、若浓缩洗涤液出现结晶，可于37℃放置至溶解。洗涤要充分，各孔均需加满，防止孔口内游离酶不能洗净。
（2）肝炎：急性肝炎、慢性肝炎活动期、肝硬变患者ＡＦＰ增高，一般不超过300μg/L。普通肝炎AFP增高的时期不长，如转氨酶（ALT）恢复正常随着肝细胞的修复，AFP逐渐减少到正常水平。
（3）其他：先天性总胆管闭锁，开放性骨脊裂的胎儿，生殖腺胚胎性肿瘤等疾病ＡＦＰ有所增高。
（4）正常孕妇在妊娠3－5个月时AFP达最高峰（一般不超过200μg/L），以后逐步下降，到胎儿出生后恢复正常。
ABCD医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-SOP-01-25
甲胎蛋白( AFP )AFP是哺乳类动物胎胚期肝细胞内合成的糖蛋白，属于肿瘤相关抗原，分子量65000～70000。血中AFP含量升高，有生理性（如新生儿、孕妇）和病理性（如原发性肝细胞癌、畸胎瘤、新生儿肝炎等）两种。检测血中AFP含量，为肝癌的人群普查、早期诊断、疗效判断、预测复发提供了一种满意的手段。正常人AFP含量≤20ng/ml。
甲胎蛋白AFP免疫放射分析药盒操作说明书
甲胎蛋白AFP免疫放射分析药盒操作说明书
AEP(HY-10011)
（包被试管法）
测定原理：采用双抗体夹心法测定样品中AFP的浓度。
测定盒组成：
１、抗AFP多抗包被管：（2×50管）包被管置于2-8℃可保存至有效期。
２、 125I抗AFP单抗：1瓶（红色，液体），每瓶不少于370 kBq (10μCi)
３、AFP系列标准品六瓶：S0、S1、S2、S3、S4、S5，直接使用，其浓度值分别为：0、4、15、50、150、500 ng/ml .
血液样品的收集与处理：
采血后立刻分离出血清用于分析，在24小时之内使用放在2～8℃中，长期存放应保存在-20℃，并避免反复冻融。
甲胎蛋白AFP免疫放射分析药盒操作说明书阳性血清在测量时要取出20 μl用生理盐水 1.0ml 稀释（即 51 倍稀释）。
分析过程：将包被管上标明标准、质控或样品，并按下表加样。
单位：μl
数据处理：以各标准管的浓度为X轴，各标准管的放射性计数B（已扣除NSB）为Y轴，用免疫放射（IRMA）分析程序的四参数方式回归，求未知样品的AFP浓度。
作过稀释的样品所测浓度还要乘以51倍。
临床参考值：
正常值：小于10 ng/ml
建议各实验室建立自己的临床测定值。
注意事项：
1、所有试剂于2-8℃保存，在有效期前使用，使用前须平衡到室温；
2、试剂盒不要长时间置于室温下，以免影响其稳定性；
3、打开包装前将试管平衡到室温，未使用的试管放入袋中重新封好并保存在2-8℃；
4、同一次实验不要使用不同批次的包被管。
AFP
甲胎蛋白电化学发光检测试剂盒说明书Elecsys AFPElecsys® Systems 1010/2010/MODULAR ANALYTICS E170 11731327 100人份【名称】通用名：甲胎蛋白电化学发光检测试剂盒英文名：Elecsys AFP汉语拼音：Jia tai dan bai dian hua xue fa guang jian ce shi ji he【注意事项】【使用目的】用免疫学方法体外定量测定人血清或血浆中甲胎蛋白(AFP)的含量,有助于非精原细胞瘤病人的治疗管理。
电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys1010/ 2010和MODULAR ANALYTICS E170（Elecsys模块）免疫测定分析仪。
【概述】甲胎蛋白类似于白蛋白,分子量为70,000道尔顿, 甲胎蛋白来源于卵黄囊、未分化肝细胞和胎儿胃肠道1.2。
70－95%的原发性肝癌患者的甲胎蛋白升高8。
越是晚期，AFP含量越高。
人绒毛膜促性腺激素（HCG）与甲胎蛋白是估计进展期非精原细胞瘤病人生存率的非常重要的两个参数4.9。
但尚未发现甲胎蛋白浓度含量与肿瘤大小、肿瘤的生长、肿瘤分期或恶性程度等有关系。
AFP含量显著升高一般提示原发性肝细胞癌。
在转移性肝癌中，AFP一般低于350-400IU/ml10。
在肝脏再生时，甲胎蛋白也会升高，AFP中度升高也常见于酒精性肝硬化、急性肝炎以及HBsAg携带者10.11。
不推荐将AFP用于普通人群的癌症筛查。
孕妇血清或羊水AFP升高提示胎儿脊柱裂、无脑症、食管闭锁或多胎。
AFP降低(结合孕妇年龄)提示未出生的婴儿有Down's综合征的危险性。
3.5.6.7【试验原理】采用双抗体夹心法原理，整个过程18分钟完成。
·第1步孵育：10μl标本、生物素化的单克隆AFP特异抗体和钌（Ru）标记的单克隆AFP特异抗体混匀，形成夹心复合物。
·第2步孵育：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
人甲胎蛋白异质体3AFPL3酶联免疫分析试剂盒使用方法
人甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)酶联免疫分析试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T50ng/L– 1600ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)水平。
用纯化的人甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)，再与HRP标记的甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)浓度。
1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品（3200 ng/L）×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
3．组织处理：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
分装后一份待检测，其余冷冻备用。
甲胎蛋白测定试剂盒(时间分辨免疫荧光法)-产品技术要求-性能指标
甲胎蛋白测定试剂盒（时间分辨免疫荧光法）
2.性能指标
2.1外观
2.1.1试剂盒各组份应齐全、完整、液体无渗漏；
2.1.2中文包装标签应清晰、无磨损。
2.2溶解时间
冻干组分加入纯化水后应在3分钟内完全溶解。
2.3最低检测限
应不高于1.0IU/mL。
2.4准确度
用甲胎蛋白国家标准品作为样本进行检测，其测量结果的相对偏差应在±10%以内。
2.5剂量-反应曲线的线性
用双对数或其他适当的数学模型拟合，在校准品B(2IU/mL)与校准品F (480IU/mL)之间的浓度范围内，剂量-反应曲线相关系数（r）应不低于0.9900。
2.6精密度(CV%)
2.6.1分析内精密度
在试剂盒的线性范围内设置3个不同浓度的质控品，其检测结果的变异系数应不高于10.0%。
2.6.2分析间精密度
在试剂盒的线性范围内设置3个不同浓度的质控品，其检测结果的变异系数应不高于10.0%。
2.6.3批间精密度
在试剂盒的线性范围内设置3个不同浓度的质控品，批间精密度应不高于15.0%。
2.7特异性
检测10份正常血清，在本试剂盒上的测定结果均应不高于20ng/mL。
2.8质控品的测定值
在试剂盒的线性范围内设置3个不同浓度的质控品，并进行复孔平行测定，其测定结果应在质控品测定值允许的区间内。
人甲胎蛋白(AFP) 说明书
人甲胎蛋白（AFP）酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中甲胎蛋白（AFP）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人甲胎蛋白（AFP）水平。
用纯化的人甲胎蛋白（AFP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入甲胎蛋白（AFP），再与HRP标记的甲胎蛋白（AFP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的甲胎蛋白（AFP）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人甲胎蛋白（AFP）浓度。
试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：45μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
甲胎蛋白检测SOP文件(iFlash3000)
1.检验目的：本试剂盒用于定量测定人血清和（或）血浆中的甲胎蛋白。
2.检验原理：3.性能参数：3.1线性范围：用线性参考品进行测定，在1.0ng/mL ～1500.0ng/mL 范围内。
3.2最低检测限：≤1.0 ng/mL 。
3.3准确度：测量结果的相对偏差应在±10.0%范围内。
3.4重复性:变异系数（CV ）应不大于10.0%。
3.5批间差:3个批号试剂之间的批间变异系数（CV ）应不大于15.0%。
4.样品要求：4.1检测标本：血清和血浆（肝素锂、肝素钠、EDTA 和柠檬酸钠抗凝）是推荐使用的样本类型。
尚未验证其他抗凝剂能否适用。
4.2采集及处理：在进行离心操作前需让血清样本完全凝结（凝结时间不小于1小时）。
所有的待测样本在测试前均应进行离心操作。
顶部含脂质的离心样本，需转移澄清、无脂质的部分到新的样本管中。
在测试前，确保已去除了残余的纤维蛋白和细胞类物质。
应小心处理患者样本，避免交叉污染。
在测试前，确保患者样本、校准品、质控品均已平衡至环境温度（20-25°C ）。
为避免蒸发可能带来的影响，样本和校准品应在上机后2小时内完成测试。
4.3样品储存：在室温（20-25°C ）下，样本保存时间不得超过8小时。
若在8小时内无法完成测试，应将样本在2～8°C 冷藏保存。
在2～8°C 的保存情况下，标本保存时间不得超过3天。
长期保存，应将样本在-20°C 保存。
冷冻样本在融化后必须进行充分混匀。
样本冷冻次数不得超过1次。
5.设备和试剂：5.1仪器：iFlash 3000化学发光免疫分析仪。
5.2试剂：甲胎蛋白测定试剂盒（化学发光法）；包装量：2×50人份/盒； 5.3储存要求：（1）储存：存放在2-8°C ，保持竖直向上。
（2）有效期：试剂瓶及校准品未开封存放于2-8°C：可稳定365天；试剂瓶使用后存放于2-8°C或在机存储：可稳定28天；校准品复溶后在-20°C保存：可稳定28天（仅可冻融一次）。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
血清甲胎蛋白检测操作规程
一．检验原理
根据酶联免疫双抗体夹心法的作用原理，利用抗原、抗体反应的特异性与酶的高效催化性研制而成，其原理是将特异性抗体吸附到固相载体上。
加入待测的样品，与吸附于固相载体上的特异性抗体反应后，洗去未反应的样品，加入酶标记的特异性抗体与抗原反应，生成抗体－抗原－酶标抗体复合物，再加入底物和显色剂，生成可显色的产物，进行检测。
二．试剂盒组成
96人份/盒：
1.AFP标准品：5IU/ml、10IU/ml、20IU/ml、50IU/ml、100IU/ml、200IU/ml 各一瓶
2.包被条96孔: AFP单抗；
3.酶结合物（1号液）1瓶：酶标记单抗；
4.洗液（2号液）1瓶：乳化剂OP；
5.底物(3号液) 1瓶：过氧化脲；
6.显色剂（4号液）1瓶：TMB；
7.终止液1瓶：硫酸；
8.说明书：1份
不同批号的试剂不能混用。
三．储存条件及有效期
本试剂盒在2-8℃保存，有效期为一年；打开包装后在4℃保存一个月。
四．适用仪器
酶标仪、恒温培养箱、100µl移液器、1000µl移液器。
五．样本要求
1.样本应为新鲜的血清。
2.溶血样本不可使用。
3.样本未能在24小时内使用时应-20℃保存。
4.样本使用前应恢复至室温。
5.禁止反复冻溶。
六．操作方法
使用前试剂盒应恢复至室温，将冻干标准品各加入1ml蒸馏水，待完全溶解后与待测样品同时进行操作。
1.加样:将包被孔编号，每孔加标准品或待测样品各100μl。
2.孵育:37℃孵育，20分钟。
3.洗涤:在各孔中加入洗液2滴，轻轻摇动几下，弃之。
然后用蒸馏水或自来水加满各孔，甩掉，反复5次（洗涤要彻底，防止假阳性，但不可洗涤过猛过急而导致假阴性），最后在吸水纸上拍干。
4.加酶:每孔加酶结合物2滴（100μl）。
5.孵育:37℃孵育，15分钟。
6.洗涤:重复步骤“3”。
7.显色:加入底物1滴，随即加入显色剂1滴，轻轻摇动几下，室温反应2～5分钟。
8.终止:每孔加2滴（100μl）终止液。
9.比色:在波长450nm测定各孔光密度（OD）值。
10.试验结果的计算：制标准曲线。
依据AFP标准品含量及其光密度值绘制标准曲线。
待测样品AFP含量可依据标准曲线查得。
七．参考值（参考范围）
正常值：≤20IU/ml。
八．检验结果的解释
1.对试验结果影响的因素：
试剂盒使用前应恢复至室温；加样应准确；洗涤要彻底，防止假阳性，但不可洗涤过猛过急而导致假阴性；反应时间和显色时间。
2.需要进行确认试验的几种情况：
含量在20-200IU/ml之间者，建议动态观察；对于AFP含量大于200 IU/ml 的样品，请用生理盐水准确稀释后重新测定。
测定的值乘以稀释倍数为样品AFP的含量。
九．检验方法的局限性
1.检验结果必须依靠检验仪器判断。
2.通过其他方法得到的值与本品测定结果不具有直接的可比性。
十．试剂性能的指标
1.分析灵敏度：本品的分析灵敏度为5IU/ml。
2.精密性：CV（%）不应高于15%（n=12）。
十一．注意事项
1.本试剂盒仅用于体外诊断。
2.1IU/ml相当于1ng/ml。
3.操作前仔细阅读说明书。
4.应严格控制反应时间和显色时间。
5.试剂瓶盖切勿盖错。
6.该试剂盒应作为具有潜在的传染性试剂处理。
十二．临床意义
定量检测人血清中的甲胎蛋白（Alpha-feto-protein简称AFP）的含量，可以用于原发性肝癌以及胎儿发育畸形的辅助诊断。