② 蛙心灌流实验报告

蛙心灌流实验

2012级临七3班廖梦宇2012021320

一、实验目的

1.学习离体蛙心灌流的实验方法。

2.观察Na、K、Ca三种离子及肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。

二、实验准备

1.实验对象：蟾蜍

2.实验器材：BL-420生物信号采集系统、张力换能器、蛙类手术器械1套、蛙心插管、

蛙心夹、试管夹、双凹夹、滴管、小烧杯4个、任氏液。

3.实验药品：0. 65％氯化钠、3％氯化钙、1％氯化钾、1：10 000肾上腺素、1：10 000

乙酰胆碱等。

三、实验步骤

1.离体蛙心的制备：

破坏脑和脊髓，仰卧固定于蛙板上。由剑突处向两锁骨肩峰端呈三角形剪开皮肤、胸壁，打开心包，暴露心脏。在两个主动脉干下各穿一根细线，并打一活结备

用。用连有细线的蛙心夹在心舒期夹住心尖部，将心脏上翻，辨认心房，静脉窦，腔静脉，然后结扎腔静脉，用眼科剪在左侧主动脉距分叉部3mm处剪一切口。将

盛有少量任氏液的蛙心套管(用拇指将套管堵住) 插入动脉球底部，稍后撤套管，再

将蛙心管尖端转向蟾蜍的背侧及左下方，于心缩期插入心室；将预置线的活结扎紧，并固定于插管壁的小钩上小心提起套管和心脏，剪断主动脉左右分支，将心脏连同

静脉窦一起剪下用任氏液反复冲洗心室。

2.实验装置：

将蛙心插管用试管夹固定于支架上，蛙心夹的连线连接在机械换能器上。

记录心脏收缩曲线。

3.处理因素

(1) 记录仅有任氏液时的收缩曲线，观察心率及收缩幅度，作为正常对照。

(2) 换以等量0.65％Nacl，观察心跳的变化。

(3) 任氏液换洗，待心跳恢复后，加入3％Cacl 1—2滴，观察心跳变化。

(4) 任氏液换洗，待心跳恢复后，加入l％Kcl 1～2滴，观察心跳变化。

(5) 任氏液换洗，待心跳恢复后，加入1：l0 000肾上腺素1～2滴，观察心跳变化。

(6) 任氏液换洗，待心跳恢复后，加入l：10 000乙酰胆碱1～2滴，观察心跳变化。

四、实验结果

1.仅有任氏液时，正常对照：

2.换以等量0.65％Nacl：

3.3％Cacl 1—2滴：

4.l％Kcl 1～2滴：

5.1：l0 000肾上腺素1～2滴：

6.l：10 000乙酰胆碱1～2滴：

五、结果分析

1.将任氏液换以等量0.65％Nacl，相当于细胞外环境没有了钙离子，由图象看出，心

肌收缩力减弱，因为心肌的收缩是由细胞外的钙离子刺激胞内肌浆网释放钙离子，作用于肌球蛋白、肌钙蛋白，肌丝滑动引起的。

2.加入3％Cacl 1—2滴后，出现了心脏骤停，立即采取急救措施，后平稳。由图象看

出，心肌收缩力减弱，可能是外环境高浓度的钙产生的抑制，也可能是因为心肌刚

恢复而达不到之前正常的收缩力。

3.加入l％Kcl 1～2滴后，由于高浓度的钾离子产生抑制，心率减慢，心肌收缩力下降。

4.1：l0 000肾上腺素1～2滴，肾上腺素作用于心肌，使心率加快，心肌收缩力增强，

心搏出量增强。

5.l：10 000乙酰胆碱1～2滴对心肌收缩产生了抑制，心率减慢，心肌收缩力下降。

六、注意事项

1.当实验效果明显后，应及时将插管内的溶液吸出，至少用任氏液冲洗2～3次，待

心跳恢复正常后，再进行下一项实验。

2.各种溶液的滴管不要混用。

3.蛙心插管内灌流液的液面高度应始终保持一致，以保证固定的负荷

4.每一项实验，均应先记录一段正常对照曲线，然后再加入药液并记录其效应。

5.肾上腺素：加2-3滴，可多次使用；乙酰胆碱：必须最后一次滴加

6.NaCl：全换其余：从一滴加起