液相色谱de使用说明

第一部分：手性柱的使用说明及注意事项

1.流动相、进行适当稀释后的待测样品，用前均需通过0.45 µm 滤膜

过滤，然后超声脱气。

2.两次实验间隔时间较长时，在使用前，系统须排气10分钟（流速设

为5ml/ min），以冲洗管路杂质，排气结束时，将流速调为0.1 ml/min。

然后接手性柱进样一端（即有保护住一端），保持另一端断开，开泵冲洗手性柱5-10分钟，流速由低住逐步升高：0.1，0.3，0.5，

1.0ml/min。冲洗完毕后，将另一端接好，流速由低住逐步升高：0.1，

0.3，0.5，1.0ml/min。

3.打开仪器后，需设置系统参数，系统主要参数如下：

检测器：SPD(紫外分光检测)-20A

柱温：30℃（如在夏天室内气温达到该温度可不开柱温箱）；

进样流速：0.7 mL/min或1 mL/min；

检测波长：254 nm；

柱压：（新柱）压力一般为13～14MPa，最大保护柱压设为25MPa；

测试时间：进样流速为 1 mL/min 时25min，进样流速为

0.7mL/min 时30min；

进样量：2 µL。

4.测试过程中，须打开柱温箱开关，保证柱子的实际温度和设定温度

相同。测样过程中，如发现同样物质的峰，两次出峰时间不一致，可能是柱子出问题了，须联系柱子厂家来解决。

5.测试过程中需更换流动相时，应先把泵流速调为0 mL/min，更换后，

流速调为0.2 mL/min，排气2次，再进样。

6.样品测试结束后，需用流动相继续冲洗柱子30至60min。取出柱子

时应保证其内部充满流动相，以便长期保存，切忌空柱子存放。7.测试范围：各种具有旋光异构体的有机酸类物质。

备注：测L、D-乳酸的流动相为2 mmol/L CuSO4溶液（溶剂为5 %的异丙醇溶液），使用前经0.45 µm滤膜过滤。溶液配制，称取CuSO4〃5H2O

0.49936 g，加50 mL双蒸水溶解，转移置1000 mL的容量瓶中，加

入50 mL的色谱纯异丙醇，再用双蒸水定容至1000 mL,用0.45 µm 孔径的合成纤维素酯膜进行真空超滤，超声波脱气。

第二部分：糖柱的使用及注意事项

1、流动相一般为选哇哈哈纯净水进行超声脱气后，备用（如有特别要求选用其他溶剂做流动相，则要考虑是否过膜）；进行适当稀释后的待测样品，用前需通过0.45 µm 滤膜过滤。

2、在使用前，系统先排气10分钟（流速设为﹤1ml/ min），以冲洗管路杂质，排气结束后，将流速调为0.4～0.5 ml/min。然后接糖柱进样一端（即有保护住一端），保持另一端断开，开泵冲洗手性柱5分钟。冲洗完毕后，将另一端接好，流速由低住逐步升高：0.1，0.3，0.5，0.6ml/min。在柱温达到设定的80℃后，冲洗半小时，如基线已平，即可进样。

打开仪器后，需设置系统参数，系统主要参数如下：

检测器：RID-10A（示差检测器）

柱温：80℃；

柱压：新柱压力一般为2～3MPa，最大保护柱压设为4MPa；

进样流速：0.6 mL/min；

Cell temp：室温加12℃；

测试时间：进样流速为0.6mL/min 时20min；

参比值（R-flow）：进样时关，冲洗每隔5分钟来回切换；

Auxiliary Rang：1.0E-4；

Balance值：±50；

RI：折射率；

进样量：20 µL。

备注：冲洗过程如发现基线很冲不平，取下柱子接上双通，设流速为0.8ml/L，冲洗两小时，期间每隔半小时切换到参比值冲洗20分钟。

3、测试过程中，须打开柱温箱开关，加温使柱子的实际温度和设定温度相同。测样过程中，如发现同样物质的峰，两次出峰时间不一致，可能是柱子出问题了，须联系柱子厂家来解决。

测试过程中需更换流动相时，应先把泵流速调为0 mL/min，更换后，流速调为0.2 mL/min，排气2次，再进样。

4、样品测试结束后，需用流动相继续冲洗柱子30至60min。取出柱子时应保证其内部充满流动相，以便长期保存，切忌空柱子存放，最后糖柱子应该保存在4℃的冰箱里。

5、测试范围：主要测葡糖糖、麦芽糖、果糖、核糖醇、甘露糖、松三糖等。

第三部分：C18柱的使用及注意事项

1、流动相、进行适当稀释后的待测样品，均需超声脱气，其中在脱气

前待测样品需调节pH值，然后通过0.45 µm 滤膜过滤。

2、两次实验间隔时间较长时，在使用前，系统须排气10分钟（流速设

为5ml/ min），以冲洗管路杂质，排气结束时，将流速调为0.2 ml/min。然后接手性柱进样一端（即有保护住一端），保持另一

端断开，开泵冲洗柱子5-10分钟，流速由低住逐步升高：0.1，0.3，

0.5，0.8ml/min。冲洗完毕后，将另一端接好，流速由低住逐步升

高：0.1，0.3，0.5，0.8ml/min。

3、打开仪器后，需设置系统参数，系统主要参数如下：

检测器：SPD(紫外分光检测)-20A

柱温：40℃；

进样流速：0.8mL/min；

检测波长：210nm；

柱压：压力一般为7～8MPa，最大保护柱压设为10MPa；

测试时间：进样流速为0.8mL/min 时25min；

进样量：2 0µL。

4、测试过程中，须打开柱温箱开关，保证柱子的实际温度和设定温度

相同。测样过程中，如发现同样物质的峰，两次出峰时间不一致，可能是柱子出问题了，须联系柱子厂家来解决。

5、测试过程中需更换流动相时，应先把泵流速调为0 mL/min，更换后，

流速调为0.2 mL/min，排气2次，再进样。