测定血氟存在的问题 - 科学网—博客
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测定血氟存在的问题
我很汗颜,因为我在大学专门讲授生物材料检验这门课,每次讲到血氟测定的时候,总觉得很简单,直接用离子选择电极法,样品用TISAB吸收后变可直接测定。上个月,和别人合作一个课题,课题需要测定血中的氟,才发觉实际的测定不不那么简单
首先,我们选择了血清作为样品,血清正常值报道大概在0.027ug/ml,当时将血清稀释5倍,结果未检出。测定完成后,也没有重视,估计可能是测定灵敏度达不到要求,所以结果最终报了检出限。
因为想到报道的血浆正常值有1.2mg/L,含量是比较高的,所以第二次测定选用了血浆作为样品。很有信心的将血浆样品稀释了3.5倍后,进行测定,结果发现,仍未检出。汗~~~。做标准曲线,电极洗至330,然后测定TISAB,电位升至286,第一点标准浓度0.04ug/ml,测定值为281,第二点为0.1ug/ml,测得值为275,第三点为0.2ug/ml,测得值为266,大概数据这样的,我记不很清楚,线性是良好的。0.04ug/ml是肯定能测定出来的。后来用标准加入法也做了,加入的第一个标准点浓度,血基底是286,和TISAB一样,加入0.04ug/ml 标准浓度后,电位为281.
我很纳闷,按上述测定,检出方法的灵敏度远远高于血浆样品的正常值水平,为什么我们却始终测定不出来。是方法的问题,还是样品处理另有妙方,抑或是文献报道或者书上给出的正常值有问题
不知有没有测定血氟的高手,不吝赐教,倍感感激!同事说可以用标准加入法,事实证明也不行。
分析原因可能:1. 血液中的蛋白质或者基体有负干扰
2.以前报道的血浆正常值有误