实验12 小鼠生殖细胞形态观察以及影响精子活力

小鼠精子畸形实验报告

小鼠精子畸形实验报告
本实验旨在研究小鼠精子畸形对后代的影响，以期为人类生育健康提供参考依据。

实验选取了30只健康小鼠作为实验对象，分为实验组和对照组，实验组小鼠
在受孕前接受了精子畸形诱导剂处理，而对照组小鼠则未受任何处理。

经过一系列观察和分析，我们得出了以下实验结果。

首先，实验组小鼠在受孕后产下的幼崽数量明显减少，平均每只小鼠产仔数量
为4只，而对照组小鼠的平均产仔数量为7只。

这表明精子畸形对小鼠生育能力产生了明显的负面影响。

其次，在实验组幼崽中，出现了较高比例的畸形幼崽，包括畸形四肢、畸形头部等。

而对照组幼崽中几乎没有出现畸形情况。

这进一步证实了精子畸形对后代健康的不良影响。

此外，我们还对实验组和对照组幼崽的生长发育情况进行了观察。

结果显示，
实验组幼崽的生长发育明显滞后于对照组幼崽，体重增长速度较慢，行动能力较弱。

这说明精子畸形不仅影响了幼崽的出生情况，还对其后续的生长发育产生了长期影响。

综上所述，本实验结果表明，小鼠精子畸形对后代的影响是显著的，不仅影响
了生育能力和出生情况，还对幼崽的生长发育产生了长期的不良影响。

这一结论对于人类生育健康具有一定的借鉴意义，也提醒我们在日常生活中要注意维护精子健康，减少畸形对后代的影响。

在今后的研究中，我们将进一步探究精子畸形的形成机制，寻找可能的干预手段，以期能够更好地保障后代的健康。

希望本实验结果能够为相关领域的研究提供一定的参考价值，也为人类生育健康贡献我们的一份力量。

体外培养小鼠生精细胞的形态学研究

体外培养小鼠生精细胞的形态学研究1江中良，李青旺，张明涛，李文烨，帅春晓，程磊西北农林科技大学动物科技学院11＃陕西杨凌 712100E-mail：jiangzhongliang73@摘要：利用姬姆萨原液和瑞－姬染色法对30-35日龄小鼠精液和睾丸组织培养后的生精细胞和精子进行形态学鉴定。

结果表明，用姬姆萨原液染色精子形态清晰，细胞膜边缘清楚，呈紫红色，未成熟精子的染色程度浅于成熟精子；另外，姬姆萨原液也可以替代其它混合染料。

睾丸组织经培养后，用姬姆萨原液染色，生精细胞形态清晰，细胞核呈颗粒状，开始呈现深紫红色，胞质粉红色且带有蓝色背景，颜色较深，过一定时间后，颜色变浅；瑞－姬染色生精细胞形态完整清晰，细胞核、核仁、胞质分别呈现不同颜色。

关键词：生精细胞；体外培养；形态学；细精管生精细胞包括精原细胞、各级精母细胞和精子细胞，其中精原细胞包括Ａ型精原细胞和Ｂ型精原细胞，前者作为人体内唯一可自我更新的干细胞，逐渐受到科学家的重视[1－3]。

而Ａ型精原细胞发育成为成熟精子的过程仍存在许多问题，包括精子发生的基因调控，精原细胞增殖分化的启动和调控，干细胞状态的维持及自我更新的方式等[4，5]。

生精细胞培养可用于人类男性生殖生理及精子发生，调控机制及治疗精子发生阻滞的患者；对精子发生机制的进一步阐明；可促进各种类型的精子微注射[6]，也可以促进动物转基因技术的发展及珍稀野生动物繁殖和濒危物种的保护[7]等。

随着细胞培养技术的发展，人们可直接对所培养的细胞进行观察处理。

因此，生精细胞体外成熟培养的研究已越来越重要，各国学者为之作了大量的努力。

本研究通过对小鼠精液、细精管中生精细胞和精子的染色，及细精管组织培养方面的研究，以期为今后的应用提供一定的数据和理论基础。

1.材料和方法：1.1实验动物选择小白鼠购自第四军医大学实验动物中心，昆明系30-35日龄，健康状况良好，生殖系统发育成熟。

1.2仪器、设备与试剂电子天平（上海精密科学仪器有限公司），相差显微镜及显微镜温控仪（南京凯尔医疗器械有限公司），恒温室水浴锅，CO2培养箱等。

小鼠精子畸形实验

操作步骤
处死动物：用颈椎脱法处死小鼠，剪开腹腔，取
出两侧附睾过滤：放入盛有约１ml生理盐水的平皿中，用眼科剪剪碎附睾，四层擦镜纸过滤涂片：取１小滴滤液涂片固定：干燥，甲醇固定５分钟（可以直接涂片镜检）染色：用２％伊红染色１小时，冲洗镜检：干燥镜检（先用低倍镜，再用高倍镜，在较暗的视野下观察）
器材与试剂
器材：显微镜；镊子；剪刀；平皿试剂：生理盐水；无水乙醇；2%伊红水
溶液
试验设计
1、试验动物：采用6～8周龄性成熟雄性小鼠 2、接毒剂量及分组：受试物设高、中、低三个剂量组，同时设阴性和阳性对照组。受试物高剂量组的总剂量应能使部分动物死亡，然后以1/5或1/10递减为中、低剂量组。阳性对照组用环磷酰胺20 mg/kg，腹腔注射，连续５天，每天一次。
小鼠精子畸形实验 Sperm Abnormality Test in Mouse
பைடு நூலகம்的
观察精子在生成过程中形态的改变来检查受试物对雄性生殖细胞的致突变作用.
原理
精子的成熟和正常形态受多种基因控制，
当这些基因中任何一个在化合物的作用下发生突变，就会导致畸形率增高。某些特殊的染色体重排，如性-常染色体易位是精子产生畸形的主要机理。但是，缺血、变态反应、感染和体温升高也可能导致精子的畸形。
注意事项
辨别小鼠附睾；如将精子悬液经过滤、离心等步骤除去组织残渣
后再推片效果更好，注意推片的质量；处于精母细胞阶段的生精细胞对诱变剂较敏感，因此在染毒后3～5周时精子畸形率最高，必要时可作动态观察有助于全面评价；缺血、感染、发热等可产生假阳性结果；镜检时注意鉴别制片过程中人为造成的镜子损伤。

小鼠的生殖调控和发育畸形研究

小鼠的生殖调控和发育畸形研究小鼠是人类疾病模型研究的重要动物，其生殖调控和发育畸形研究也是非常重要的领域。

本文就此话题展开讨论。

首先，小鼠的生殖调控和发育畸形研究的重要性。

小鼠是人类近亲，其生殖系统的发育和调控机制与人类有很大的相似性，因而小鼠成为了研究人类生殖系统疾病的重要模型。

例如，小鼠模型可用于睾丸发育不全、子宫内膜异位症和多囊卵巢综合症等疾病的研究。

此外，小鼠的工具基因编辑技术也为生殖疾病的治疗提供了新思路和新方法。

其次，小鼠生殖系统的发育。

小鼠的生殖系统是从生殖小叶发育而来，而生殖小叶则由生殖细胞和支持细胞组成。

在小鼠的分化过程中，SRY基因的表达决定了胚胎的性别。

在雄性小鼠中，睾丸开始分泌睾酮激素，促进了生殖小叶中的生殖细胞的分化和生长。

最终，雄性小鼠的精巢可分泌精子，从而实现繁殖后代。

而在雌性小鼠中，因缺乏睾酮激素的作用，生殖小叶发育成为了子宫和卵巢。

由于子宫内膜细胞的异常增生，雌性小鼠也有可能发生子宫内膜异位症。

此疾病通过小鼠模型的研究进一步揭示了雌激素和孕激素等性激素在子宫内膜形成过程中的作用和调控机制。

除生殖系统外，小鼠的骨骼发育亦为人类疾病研究提供了模型。

例如，小鼠模型可以用于研究成骨细胞功能障碍等疾病的发病机制。

最后，小鼠生殖系统的畸形研究。

小鼠的生殖系统也有着一些发育畸形，如睾丸发育不全和卵巢发育不全等。

可通过基因编辑技术或遗传突变小鼠模型等手段，进一步研究其病理机制和治疗方法。

总之，小鼠的生殖调控和发育畸形研究为人类疾病治疗提供了重要模型和思路，也在科学界引起了广泛的关注。

未来，我们还需加大小鼠生殖系统疾病研究的投入，探索更多的机制和治疗方法，为保障人类健康发挥更大的贡献。

锰对小鼠精子数量、畸形率和活动度影响(一)

锰对小鼠精子数量、畸形率和活动度影响(一)【关键词】小鼠精子近年来，随着对锰的生殖毒理、生殖流行病学和生殖生化领域的研究进展，锰对男性生殖系统的损害已渐渐受到重视，并提出以精子数量、精子形态结构和精子运动能力等作为衡量环境有害因素对雄性生殖机能影响的重要观察指标〔1〕。

为此，本文对小鼠精子数量、畸形率和活动度进行了研究。

1材料与方法11实验动物6～8周雄性昆明种小鼠100只，体重23～28g(贵阳医学院实验动物中心)，合格证号为SCXK2002-0001。

随机分为4组，即3个不同剂量MnCl2组(75，15，30mg/kg)和对照组，分别给予腹腔注射MnCl2和等量生理盐水，1次/d，每周5d,每组25只，每周测小鼠体重，调整用锰量。

12主要试剂MnCl2・4H2O(中国医药集团上海化学试剂公司)。

13标本收集分别于染锰3，7，14，28，56d随机每组取5只小鼠，脱臼处死，立即分离附睾。

14精子计数参照文献〔2〕。

15精子活动度参照文献〔2〕。

精子活动度分级参照WHO推荐的方法，按精子游泳状态将精子活动度分为4级〔3〕。

精子活动度=(Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ)/(Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ+Ⅳ)×100%。

16精子畸形率取上述精子悬液500μl，加入2%伊红溶液50μl，染色1min，涂片，甲醇固定。

油镜下观察1000个精子/只，用‰表示精子畸形率〔4〕。

精子畸形分类参照文献〔5〕的方法。

17统计分析采用SPSS110统计软件进行分析。

所得计量资料用±s表示，用F分析进行检验；精子活动度采用χ2检验；精子畸形率用Poisson分布进行检验。

2结果21氯化锰对小鼠精子数量的影响(表1)各组在染锰第3，7d精子计数与对照组比较，差异无统计学意义(P＞005)；染锰14d，30mg/kg组精子计数开始降低，与对照组比较，差异有统计学意义(P005)；染锰28d，3个染锰组精子计数与对照组比较，差异有统计学意义(P005，P001，P001)；至染锰56d，3个染锰组精子计数均显著降低，与对照组比较，差异有统计学意义(P001)，精子数量随染锰剂量增加和时间延长逐渐减少。

实验12 小鼠生殖细胞形态观察以及影响精子活力

小鼠卵子体外成熟（去卵丘）
睾丸的一般形态
精子形态
A B
C
D
E
F
A) Normalsperm.B)Coiledtail.C)Abnormalacrosome. D)Bentmidpiece.E)Midpiececytoplasmicdroplet. F)Proximalcytoplasmicdroplet.
精子顶体
A
B
C
D
A) Normalapicalridge.B)Damagedapicalridge. C)Missingapicalridge.D)Looseacrosomalcap.
猪精子顶体染色
小鼠体外受精
猪体外受精胚胎
实验项目
l l l
l
l
观察小鼠未成熟卵母细胞的一般形态和精子活力及运动状况。精子经0.4%曲利苯蓝染色2分钟，离心除去染色液，抹片观察精子的形态以及顶体状态。在不同温度下（4度，25度，37度）观察精子的运动状态（用15表示）和活力（用百分数表述）。在不同pH条件下（在精液中滴加1，2，3，4 或5滴1NHCl或NaOH）。体外受精试验。将精子与卵子放在一起观察。
讨论
l
影响精子活力的因素影响体外受精成功率的因素
l
实验十二小鼠生殖细胞形态观察以及影响精子活力的因素
目的： 1了解生殖细胞的发育过程及受精过程 2观察生殖细胞的一般形态 3观察影响精子活力的因素
卵巢的一般形态
卵子的发育过程卵子的Leabharlann 态成熟培养前猪卵子形态
成熟培养后猪卵子形态
去掉卵丘细胞的猪卵子
猪成熟卵子染色观察
小鼠未成熟卵子（去卵丘）

小鼠精子畸形实验报告

一、实验目的本实验旨在探究不同因素对小鼠精子形态的影响，分析精子畸形率的变化，评估其对小鼠生殖健康的影响。

二、实验材料1. 实验动物：昆明种雄性小鼠，体重25~30g。

2. 实验药品：白头翁水提取物、硫酸镉、丝裂霉素C。

3. 实验器材：显微镜、染色液、培养皿、注射器、剪刀、眼科剪等。

三、实验方法1. 将实验动物随机分为五组，每组10只：阴性对照组、阳性对照组、硫酸镉诱变实验组、白头翁诱变实验组、白头翁+硫酸镉复合诱变实验组。

2. 阴性对照组：正常饲养，不予任何处理。

3. 阳性对照组：腹腔注射丝裂霉素C（1.0mg/kg）一次，模拟化学物质对精子的影响。

4. 硫酸镉诱变实验组：腹腔注射硫酸镉（44、22和11mg/kg，相当于1/2、1/4和1/8 LD50）一次，模拟重金属对精子的影响。

5. 白头翁诱变实验组：灌胃白头翁水提取物（1.0、2.0、4.0和8.0g/kg，相当于人5、10、20和40临床剂量）一次，模拟中药对精子的影响。

6. 白头翁+硫酸镉复合诱变实验组：同时给予硫酸镉和白头翁水提取物处理。

7. 实验后35天，处死动物，取出两侧副睾，放入盛有2mL生理盐水的平皿中。

8. 用眼科剪将副睾纵向剪1～2刀，静止3～5min，轻轻摇动。

9. 用四层擦镜纸过滤，吸滤液涂片。

10. 空气干燥后，用甲醇固定5min以上干燥。

11. 用1%～2%伊红染色1min，用水冲洗。

12. 镜检精子形态，记录精子畸形率。

四、实验结果1. 阴性对照组：精子畸形率为5%。

2. 阳性对照组：精子畸形率为30%。

3. 硫酸镉诱变实验组：精子畸形率为20%。

4. 白头翁诱变实验组：精子畸形率为10%。

5. 白头翁+硫酸镉复合诱变实验组：精子畸形率为35%。

五、讨论1. 实验结果表明，硫酸镉和丝裂霉素C对小鼠精子形态有显著的畸形作用，导致精子畸形率升高。

2. 白头翁水提取物对硫酸镉诱变有明显的抑制作用，降低精子畸形率。

小鼠精子细胞活性调控之研究

小鼠精子細胞活性調控之研究The Role of [Ca2+]i in Capacitation and Decapacitation Processes in Mouse Sperm中文摘要精子獲能作用指的是精子經過射精之後會經過一連串生化反應的調控來使得精子具有與卵結合的能力，反之，稱為去獲能作用。

精子從雄性睪丸分化到進入雌性生殖道的過程中，存在著一些獲能因子以活化精子，同時也存著一些去獲能因子使精子不被提早活化，避免在與卵受精之前就已耗盡能量，使精子能在適當的時間和適當的地點和卵結合。

我們實驗室對於調控精子活性之獲能作用及去獲能作用機制深感興趣。

我的論文分成兩部分：在獲能作用方面，我們承接之前已發表一專一表現於睪丸之孤兒受體（orphan receptor）鳥?酸環化?G(mGC-G)的研究，繼續進行此mGC-G可能扮演的功能性分析。

RT-PCR結果得知mGC-G 高度表現於性成熟的小鼠睪丸中；利用免疫組織染色法、免疫細胞染色法和共軛焦顯微技術得知，此mGC-G表現於成熟精子頭部與尾部中段。

利用流式細胞儀和電腦輔助精子分析系統得知，由牛血清白蛋白(bovine serum albumin)所引發的細胞內鈣離子上升和高泳動力皆可被抗mGC-G-ECD抗體所抑制，然而，對A23187所引發的頂體反應結果並不明顯，因此我們推論其功能與精子游動力相關。

在去獲能作用方面，我們發現一貯精囊分泌蛋白SVA(貯精囊自體抗原)，可以和PAF(platelet-activating factor)及富含膽鹼(choline)的脂質，如神經磷脂(sphingomyelin)和磷脂膽鹼(phosphatidylchoine)結合。

此外，我們發現SVA藉由降低細胞內鈣離子濃度來調控精子活性。

以免疫細胞螢光染色法與流氏細胞儀偵測得知，細胞膜PMCA (Ca2+-ATPase通道)抑制劑，CE(Carboxyleiosin-AM)，可回復SVA所降低細胞內鈣離子濃度的現象，顯示SVA的降低細胞內鈣離子機制調節與PMCA相關。

精子畸形试验

(5) 吸去上清液，视沉淀物多少，加人适
量的生理盐水，混匀后，涂片。 (6) 空气干燥后，用甲醇固定 5min ，干后用 2% 伊红水溶液染色 lh ，冲洗，吹干后镜检。
步骤
(7)镜检，在低倍镜下找到背景清晰、精子重叠
较少的部位，用高倍镜按顺序检查精子的形态。每只动物检查完整的精子1000个。精子畸形主要表现在头部，畸形的类型可分为无钩、香蕉形、无定形、胖头、双头以及双尾等。无尾精子、头部重叠的或精子整个与另一个重叠的均不计数。分别记录各种类型畸形的精子，进行精子畸形类型构成比分析，并计算每组动物精子畸形百分率。
精子形态
精子畸形试验
原理
精子畸形是指精子形状改变和畸形精子
数量增多。男人精子数目减少或畸形精子数量增多与妻子自发流产有关。小鼠精子畸形实验是一种检测环境理化因素对雄性生殖细胞遗传损伤的遗传毒理学方法。精子畸形是环境理化因素对精原细胞遗传物质损伤的结果。
原理
小鼠精子畸形试验是评价环境化学物质
(1)给药方法按各种受试物实际侵人途径，
步骤
(2) 颈椎脱白பைடு நூலகம்处死小鼠，剪开腹腔，取
出睾丸分离出双侧附睾，放人盛有 4mL 生理盐水的小平皿中，用眼科剪剪碎组织。加人5mL生理盐水。 (3) 将悬液通过四层擦镜纸滤人离心管中。 (4)滤液以1000r/min离心5min。
步骤
对哺乳类雄性生殖细胞遗传损伤的一种有效检测方法。
试剂和材料
(1)实验动物一般采 (2)试剂生理盐水、
用杂交雄性小鼠，鼠龄8-10周。
甲醇(化学纯)、伊红染色液、环磷酰胺 (30mg/kg或甲基磺酸甲醋(50mg/kg)或丝裂霉素C(l.0mg/kg)。

小鼠生殖细胞发育及遗传特性研究

小鼠生殖细胞发育及遗传特性研究小鼠作为一种广泛应用于生殖研究中的实验动物，其生殖系统发育及遗传特性一直备受关注。

在小鼠生殖系统中，生殖细胞的发育过程对小鼠的繁殖具有重要意义。

因此，对于小鼠生殖细胞的发育及遗传特性的研究不仅对于解决生殖不育等问题具有重要意义，还有助于人类对于生殖系统的认识和了解。

本文将重点介绍小鼠生殖细胞发育及遗传特性的研究进展。

一、小鼠生殖细胞发育1. 卵子和精子的发育过程小鼠卵子的发育过程自出生以来即开始，而这个发育过程在小鼠体内不能进行完全，必须通过体外操作的方式进行辅助的代孕技术。

小鼠精子的发育过程则相对容易，小鼠精原细胞有两次减数分裂，形成四个不同类型的精子。

每个精子中只含有23条染色体，在与卵子结合时能够形成一个新的体细胞，具有独立性基因特性的遗传基因即从由母亲和父亲遗传而来。

2. 生殖系统器官的发育小鼠生殖系统是由生殖腺、输精管、前列腺、阴茎等器官组成。

其中生殖腺是主要的组成部分，负责生产和储存生殖细胞，其发育过程主要分为两个阶段：原始生殖细胞（PGC）的形成和生殖细胞分化。

在PGC的形成期间，PGC从胚胎中的肠胚移动而来，在肠胚腹侧置入生殖嵴，最终分裂成数百个细胞，成为生殖网格或称生殖细胞神经索。

在生殖细胞分化阶段，PGC根据性别的不同，分化成雄性和雌性生殖细胞。

二、小鼠生殖细胞的遗传特性研究小鼠生殖细胞具有独特的遗传特性，主要包括外激发及内源性遗传管理。

外激发指的是由外界因素引起基因表达的改变，例如辐射、药物、疾病等。

内源性遗传管理指的是通过小鼠生殖细胞自身的机制来控制遗传表达。

1. 外源性遗传特性的研究在小鼠生殖细胞中，外源性遗传特性的研究主要集中在基因突变、DNA甲基化等方面。

基因突变是指小鼠生殖细胞中基因序列发生突变的现象，这种突变有时会导致细胞功能的改变，也有可能影响小鼠的整体健康状况。

DNA甲基化是指DNA分子上甲基化的现象，这种现象在小鼠生殖细胞中非常普遍，可以起到对遗传基因的调节作用。

小鼠发育生物学实验内容

小鼠发育生物学实验内容实验一：小鼠卵母细胞和精子的形态观察一、实验目的：掌握胚胎体外操作工具的制备、小鼠超数排卵方法以及小鼠精子和不同发育阶段观卵母细胞的收集方法，观察精子结构和运动状态，评估精子活力，观察卵母细胞结构，了解体外授精操作过程。

二、操作过程：1 胚胎体外操作工具制备在酒精喷灯上将玻璃管拉成直径1mm的细管，连上乳胶管即可。

2 小鼠的抓去与保定3 收集精子断颈处死公鼠，打开腹腔，找到睾丸和附睾，剪取附睾尾，剪碎，置1.5ml离心管底部，加0.5ml 生理盐水，置37度水浴锅20分钟，用吸管从离心管上部取50微升液体，置细胞计数板，观察精子结构、密度和活力。

精子活力计算公式：精子活力＝视野中直线运动的精子数/视野中总精子数4 收集卵母细胞成熟卵母细胞的收集：母鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素PMSG（每只10单位），48小时后再注射人类绒毛膜促性腺HCG（每只10单位），18小时后断颈处死母鼠，打开腹腔，剪下输卵管，用镊子刺破输卵管壶腹部，释放卵母细胞，用透明质酸酶溶液（10毫克/毫升生理盐水）处理卵母细胞以除去颗粒细胞，在实体显微镜下观察卵母细胞的结构。

未成熟卵母细胞的收集：断颈处死性成熟前母鼠，打开腹腔，剪取卵巢，加入1毫升盐水，用刀片或镊子捣碎卵巢，寻找生发泡状态的卵母细胞，观察卵母细胞结构。

5 体外授精将卵母细胞与精子共培养（微滴培养法）（演示）三、实验结果各种精子和卵子的形态绘图；精子活力；精子密度四、实验收获与体会，存在问题和改进意见。

实验二：小鼠早期不同发育阶段胚胎的收集、观察以及胚胎移植一、实验目的：掌握小鼠附植前胚胎收集方法，观察不同发育阶段小鼠胚胎的结构，认识小鼠早期胚胎形态学，并了解体内发育阶段与所处生殖器官位置的关系，了解小鼠胚胎移植的基本原理和操作过程。

二、操作过程：1 小鼠超数排卵程序中午12时腹腔注射PMSG，48小时后腹腔注射HCG并与公鼠合笼交配，次日清晨检查阴道栓，如果发现阴道栓则妊娠0.5天。

小鼠发育生物学实验内容

小鼠发育生物学实验内容实验一：小鼠卵母细胞和精子的形态观察一、实验目的：掌握胚胎体外操作工具的制备、小鼠超数排卵方法以及小鼠精子和不同发育阶段观卵母细胞的收集方法，观察精子结构和运动状态，评估精子活力，观察卵母细胞结构，了解体外授精操作过程。

二、操作过程：1 胚胎体外操作工具制备在酒精喷灯上将玻璃管拉成直径1mm的细管，连上乳胶管即可。

2 小鼠的抓去与保定3 收集精子断颈处死公鼠，打开腹腔，找到睾丸和附睾，剪取附睾尾，剪碎，置1.5ml离心管底部，加0.5ml 生理盐水，置37度水浴锅20分钟，用吸管从离心管上部取50微升液体，置细胞计数板，观察精子结构、密度和活力。

精子活力计算公式：精子活力＝视野中直线运动的精子数/视野中总精子数4 收集卵母细胞成熟卵母细胞的收集：母鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素PMSG（每只10单位），48小时后再注射人类绒毛膜促性腺HCG（每只10单位），18小时后断颈处死母鼠，打开腹腔，剪下输卵管，用镊子刺破输卵管壶腹部，释放卵母细胞，用透明质酸酶溶液（10毫克/毫升生理盐水）处理卵母细胞以除去颗粒细胞，在实体显微镜下观察卵母细胞的结构。

未成熟卵母细胞的收集：断颈处死性成熟前母鼠，打开腹腔，剪取卵巢，加入1毫升盐水，用刀片或镊子捣碎卵巢，寻找生发泡状态的卵母细胞，观察卵母细胞结构。

5 体外授精将卵母细胞与精子共培养（微滴培养法）（演示）三、实验结果各种精子和卵子的形态绘图；精子活力；精子密度四、实验收获与体会，存在问题和改进意见。

实验二：小鼠早期不同发育阶段胚胎的收集、观察以及胚胎移植一、实验目的：掌握小鼠附植前胚胎收集方法，观察不同发育阶段小鼠胚胎的结构，认识小鼠早期胚胎形态学，并了解体内发育阶段与所处生殖器官位置的关系，了解小鼠胚胎移植的基本原理和操作过程。

二、操作过程：1 小鼠超数排卵程序中午12时腹腔注射PMSG，48小时后腹腔注射HCG并与公鼠合笼交配，次日清晨检查阴道栓，如果发现阴道栓则妊娠0.5天。

小鼠精子畸形实验报告

小鼠精子畸形实验报告本实验旨在研究小鼠精子畸形对生育能力的影响，通过对小鼠进行精子畸形实验，观察其繁殖能力和后代健康状况，以期为人类生殖健康提供参考依据。

实验方法：首先，我们从实验室中选择了一组健康的雄性小鼠作为实验对象。

然后，我们对这些小鼠进行了一段时间的观察和饲养，以确保它们的身体状况良好。

接着，我们使用特定的方法诱导小鼠产生精子畸形，然后将这些小鼠与正常雌性小鼠交配，观察其繁殖能力和后代健康状况。

实验结果：经过一段时间的观察和记录，我们得出了以下实验结果：1. 精子畸形对小鼠的生育能力产生了显著影响。

精子畸形的小鼠在交配过程中出现了较低的交配成功率，且受孕率也明显降低。

2. 精子畸形对后代健康状况产生了一定影响。

经过观察发现，由精子畸形小鼠交配后所生的后代中，出现了较多的畸形现象，且部分后代的生长发育也受到了一定程度的影响。

实验结论：综合以上实验结果，我们得出了以下结论：1. 小鼠精子畸形对生育能力存在着显著的负面影响，这一影响主要表现在交配成功率和受孕率的降低上。

2. 精子畸形对后代健康状况也产生了一定的不良影响，这表明精子畸形可能会对后代的遗传健康产生一定的影响。

实验意义：本实验结果对人类生殖健康具有一定的参考价值。

精子畸形作为一种常见的生殖健康问题，其对生育能力和后代健康的影响一直备受关注。

通过本实验，我们对精子畸形的影响有了更深入的了解，这有助于人类更好地预防和治疗精子畸形相关的生殖健康问题。

总结：通过本次实验，我们验证了小鼠精子畸形对生育能力和后代健康的不良影响，这为人类生殖健康问题的研究提供了重要的参考依据。

希望本实验结果能够为相关领域的研究和临床实践提供一定的借鉴和指导。

小鼠精子畸形实验报告

小鼠精子畸形实验报告小鼠精子畸形实验报告引言：生殖健康是人类和动物健康的重要组成部分。

然而，近年来，人类和动物的生殖健康问题日益凸显，其中包括精子畸形现象的增加。

为了更好地了解精子畸形的成因和影响，本实验以小鼠为研究对象，通过实验观察和数据分析，探讨了精子畸形的发生原因及其对生殖健康的影响。

实验设计：本实验选取了30只成年雄性小鼠作为实验对象，分为两组：实验组和对照组。

实验组小鼠每日饮用含有某种特定化学物质的水，而对照组小鼠则饮用普通水。

实验期为8周，期间每两周进行一次采样。

实验结果：经过实验观察和数据分析，我们发现实验组小鼠的精子畸形率明显高于对照组。

在实验组中，精子头部畸形的比例达到了30%，而对照组仅为5%。

此外，实验组小鼠的精子尾部畸形率也明显升高，达到了20%，对照组仅为10%。

这些结果表明，特定化学物质的摄入对小鼠精子的形态产生了显著的影响。

讨论：精子畸形是生殖健康问题中的重要因素之一，它不仅会影响小鼠的生殖能力，还可能对后代的健康造成潜在风险。

通过本实验的结果可以看出，特定化学物质对小鼠精子的形态产生了明显的影响，这可能与该化学物质对小鼠生殖系统的毒性作用有关。

然而，具体的作用机制还需要进一步的研究来探讨。

此外，本实验中使用的小鼠模型虽然能够提供一定的参考价值，但其与人类的差异仍然存在。

因此，对于精子畸形问题的研究还需要进一步扩大样本规模，并结合人类的实际情况进行研究。

只有通过更多的实验和观察，才能更好地了解精子畸形的成因和影响，为人类和动物的生殖健康提供更有针对性的保护策略。

结论：本实验通过观察和数据分析，发现特定化学物质对小鼠精子形态产生了明显的影响，导致精子畸形率的显著升高。

这一结果提示我们，特定化学物质的摄入可能对生殖健康产生不良影响。

因此，我们需要加强对化学物质的监管和控制，以保护人类和动物的生殖健康。

参考文献：1. Smith R, et al. (2013). Human sperm number and morphology in relation to exposure to environmental pollution: a systematic review and meta-analysis. Reproductive Health, 10: 64.2. Carlsen E, et al. (1992). Evidence for decreasing quality of semen during past50 years. BMJ, 305(6854): 609-613.3. Jurewicz J, et al. (2015). Environmental factors and semen quality. International Journal of Occupational Medicine and Environmental Health, 28(2): 179-198.。

小鼠精子畸形实验报告

小鼠精子畸形实验报告
实验目的：
本实验旨在观察小鼠种公对辐射的敏感性和精子畸形情况，进
一步探究辐射对生殖系统的影响，为人类辐射防护提供科学依据。

实验方法：
选取雄性C57BL/6J小鼠10只，年龄在8~12周之间，均无生
殖系统疾病等慢性病史。

将小鼠随机分为两组：对照组（5只）和辐射组（5只）。

对照组小鼠暴露于正常环境，无额外操作。

辐射组小鼠在对照组操作基础上，于每日9:00-10:00和16:00-17:00左右，接受单次0.5Gy X射线辐射，共连续6天。

辐照前，检测所
有小鼠前列腺并记录体重。

辐射后第11天晚间，左双侧睾丸进行
离体解剖，取出精液供检测精子形态和结构。

实验结果：
与对照组相比，辐射组的平均体重有所下降，辐射组的平均体
重下降了2.3克；对照组的前列腺质量为12.4±2.3（mg），辐射组为10.0 ± 1.2(mg)，辐照组比对照组减轻了19.4%（p＜0.05）。

检
测精液样本可知，辐射组的精子畸形率为15.74±0.8%，对照组的
精子畸形率为7.32±2.6%。

辐射组的畸形率高出对照组8.4% （p＜0.01）。

实验结论：
小鼠对辐射的敏感性显著，在短时间辐射后，辐射组小鼠体重
减轻和前列腺质量流失均有显著差异。

同时，精子畸形率显著提高，证实辐射对生殖系统造成伤害。

因此，对于长期接触辐射工
作者应加强防护，减少辐照量，防止过大辐照对生殖系统的影响。

间歇低氧对小鼠精子生成数量及活力的影响

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ＣｈｉｎａＣｏｎｔｉｎｕｉｎｑＭｅｄｉｃａｌＥｄｕｃａｔｉｏｎ
一
Ｎｏ１８－毒馕李窍
．
据笔者自身的腹腔镜手术麻醉经验总结，最佳的麻醉状态是，
总之，七氟醚和瑞芬太尼联合麻醉治疗的效果比丙泊酚和
麻醉诱导迅速，镇痛彻底，循环系统稳定，无呼吸抑制，术后麻瑞芬太尼联合麻醉要好，患者的麻醉效果更优秀，使用的瑞芬醉消退快速，患者能迅速苏醒，无药物残留。现在公认较好的快太尼更少，所以患者对瑞芬太尼的依赖性较低，临床中危害性
的恶心、呕吐等症状，所以使用的时候，需要控制剂量，剂量增加，
危害性也会增加［５－６１０所以，用瑞芬太尼进行麻醉治疗的时候，应［６６】孙艳，张雪芹．全身麻醉术后恢复室的安全防护探讨［ＪＪ．吉林医该要尽量减少使用剂量。学，２０１２，３３（３３）：４００９
比较少，不会导致患者儿茶酚胺过敏，而且对呼吸系统的影响轻微，能够方便调控麻醉深度】。瑞芬太尼是型阿片受体的激动剂，
［３】
石合并胆总管结石的临床应用价值分析［『１＿中国继续医学教育，２０１４，６（３）：２７－２８
【摘要ｌ目的探讨间歇低氧对小鼠精子生成数量及活力的影响。方法

小鼠生殖细胞分化和发育的分子机制研究

小鼠生殖细胞分化和发育的分子机制研究小鼠是人类疾病模型动物中最常用的一种，因其生命周期较短、生殖周期连续和容易饲养等优势而备受广大研究者的关注。

在小鼠研究中，生殖细胞分化和发育是一个重要的研究领域，涉及到分子机制、细胞信号传导和遗传学等方面的知识。

1. 小鼠生殖细胞的分化和发育过程小鼠生殖细胞的分化和发育分为两个阶段——配子母细胞阶段和胚胎干细胞阶段。

1.1 配子母细胞阶段小鼠配子母细胞的形成是在胚胎发育的过程中完成的。

在雌性发育过程中，卵母细胞开始在胚胎的卵泡中分化，然后在生长发育的过程中继续分化。

与此同时，在雄性生殖系统中，精原干细胞经历了一系列的分裂和分化过程转化为精子。

1.2 胚胎干细胞阶段在小鼠的胚胎干细胞阶段，生殖细胞进一步分化为生殖干细胞和生殖细胞前体细胞，后者随后再分裂成成熟的生殖细胞。

2. 小鼠生殖细胞分化和发育的分子机制在小鼠生殖细胞分化和发育过程中，分子机制起着至关重要的作用。

下面是几个关键的分子机制：2.1 第四代和第七代重复序列第四代和第七代重复序列(Repeat Region4和Repeat Region7)是在小鼠生殖细胞分化和发育中非常重要的分子。

在小鼠配子母细胞形成的过程中，这些重复序列会漂移和扩增，同时还会导致染色体的重编码和基因组稳定性的改变。

2.2 小鼠生殖细胞前体细胞中的基因表达在小鼠的生殖细胞前体细胞中，有一些关键基因的表达对于正常的生殖细胞的生成是非常重要的。

例如，在雌性胚胎中，Sox9等基因的表达可以促进小鼠的体内雄性生殖细胞的分化和发育。

2.3 蛋白质半胱氨酸甲基化和小鼠生殖细胞的分化和发育近年来越来越多的研究表明，蛋白质半胱氨酸甲基化在小鼠生殖细胞分化和发育中起着重要作用。

蛋白质半胱氨酸甲基化是一种新型的蛋白质化学修饰，可以影响到蛋白质的稳定性和功能。

在小鼠生殖细胞分化和发育中，这种化学修饰会影响到相关的基因转录、翻译和表达，从而控制生殖细胞的命运。

小鼠精子畸形试验

小鼠精子畸形试验一、目的与要求1. 熟悉精子畸形的概念及类型、精子畸形试验的实验设计、试验检测的遗传学终点。

2. 学习和掌握小鼠精子畸形试验的基本方法步骤，正常精子及畸形精子的镜下观察。

3. 了解精子畸形试验数据整理、分析方法及结果的评价。

二、实验原理精子的畸形主要是指精子形态的异常改变，大、小鼠精子畸形受基因控制，具有高度遗传性，许多常染色体及X、Y性染色体基因直接或间接地决定精子形态。

因此精子形态的改变提示有关基因及其蛋白质产物的改变。

大、小鼠精子畸形试验可检测受试物对于精子生成、发育的影响，而且对已知的生殖细胞致突变物有高度敏感性，故精子畸形试验可用作检测受试物在体内对生殖细胞的致突变作用。

三、实验设计1. 动物选择：一般采用小鼠，因为小鼠比较经济，且有大量的实验结果证实小鼠在该实验系统中对受试物最为敏感。

6~8周龄（体重25~35g），雄性。

每组应保证至少有5只存活小鼠。

2. 染毒途径：多用腹腔注射，也可采用与人体实际接触化学毒物相同的途径，如经口、吸入及皮肤接触等。

3. 染毒次数及取样时间：可采用1次或每天1次连续5天的方法进行染毒。

各种化学毒物作用于精子的不同发育阶段，可在接触某种化学毒物后不同时间出现精子畸形，故有条件时，可于给受试物后第1、4、10周处死动物，检查精子形态。

因为大部分化学毒物对精原细胞后期或初级精母细胞早期的生殖细胞较为敏感，故一般均是于首次给受试物后的第35天处死。

4. 剂量选择：至少设置3个剂量组。

最高剂量组5天总剂量应能使部分动物死亡，一般可取1/2 LD50为高剂量组，然后以1/2~1/4递减作为中、低剂量组。

另设溶剂对照组（阴性对照组）和阳性对照组。

阳性对照组可用环磷酰胺（20 mg/kg）或甲基磺酸甲酯（75 mg/kg）或甲基磺酸乙酯（60 mg/kg）进行腹腔注射，每天1次，连续5天。

四、操作步骤1. 制片颈椎脱臼处死小鼠，取出双侧附睾，将附睾放入1 ml磷酸盐缓冲液或生理盐水中。

小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究

小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究解剖学报 1999年第2期第0卷论著作者：李子义谭景和孙兴参刘忠华周琪贺桂馨单位：李子义谭景和孙兴参刘忠华周琪贺桂馨东北农业大学生物工程系，哈尔滨150030 关键词：精子；球形精子细胞；显微注射；电活化；电融合；小鼠【摘要】目的研究动物受精机理。

方法以昆明白鼠为实验动物，利用显微注射技术，对精子和球形精子细胞的显微注射受精进行了研究。

结果1. 带下注射受精，注射4～6个精子的卵的受精率(32.5%)和卵裂率(25.0%)显著高于注射单个精子的卵的受精率和卵裂率(分别为12.5%和6.3%)(P＜0.05)。

2. 带下注射4～6精子后，有第1极体卵母细胞的存活率(69.6%)、受精率(32.5%)和卵裂率(25.0%)分别高于无第1极体卵母细胞的存活率、受精率和卵裂率(分别为64.4%、20.7%和13.8%)，但两者无显著差异(P＞0.05)。

3.胞质内精子注射卵的存活率(21.4%)极显著低于带下注射卵的存活率(69.6%)(P＜0.01)；而胞质内精子注射卵的受精率(35.5%)、卵裂率(32.3)%和囊胚率(20.0%)则高于带下注射卵的受精率(33.3%)、卵裂率(25.0%)和囊胚率(10.0%)，但无显著差异(P＞0.05)。

4.将球形精子细胞注入经电活化处理的卵母细胞的透明带下，注射卵的存活率为90.5%，电融合率为34.6%，2-细胞分裂率为28.3%。

结论 1.注射精子的数量对小鼠带下注射的受精率和卵裂率有显著影响。

2.卵母细胞中第1极体存在与否对小鼠带下注射的受精率和卵裂率无显著影响。

3. 不同注射方法对小鼠卵的存活率有极显著的影响，而对受精率、卵裂率和囊胚率无显著影响。

4. 本实验所采用的电融合条件，尚未满足多数球形精子细胞与卵母细胞融合之需要。

FERTILIZATION BY MICROINJECTION OF SPERMATOZOON AND ROUND SPERMATIDINTO OOCYTE IN THE MOUSELi Ziyi，Tan Jinghe△， Sun Xingshen, Liu Zhonghuan, Zhou Qi, He Guixin(Department of Biotechnology, Northeast Agricultural University)【Abstract】 Objective To study fertilization mechanism in mammals and provide essential data for treating human maleinfertility.Methods Using microinjection technique, thefertilization by microinjection of spermatozoa and round spermatids into oocytes in the mouse was systematically studied.Results 1. Following subzonal injection of spermatozoa into occytes, the fertilization rate (32.5%) and cleavage rate(25.0%) in the oocytes injected with 4-6 spermatozoa were significantly higher (P＜0.05) than those (12.5% and 6.3%, respectively) in the oocytes injected with a single spermatozoon. 2. Following subzonal injection of 4-6 spermatozoa into the oocytes, the survival rate (69.6%),fertilization rate (32.5%) and cleavage rate (25.0%) in those oocytes with polar body 1 (PB1) were higher than those (64.4%, 20.7% and13.8%, respectively) in the oocytes without PB1, but the difference was not significant (P＞0.05). 3. The survival rate (21.4%) in the oocytes injected with a single spermatozoon into the cytoplasm was significantly lower (P＜0.01) than that (69.0%) in the oocytes injected with 4\|6 spermatozoa into the perivitelline space (PVS). The fertilization rate (35.5%), cleavage rate (32.2%) and blastocyst rate (20.0%) in those oocytes injected with a single spermatozooninto the cytoplasm of oocytes were higher than those (33.3%, 25.0% and 10.0%, respectively) in the oocytes injected with 4-6 spermatozoa into the PVS, but they did not differ significantly(P＞0.05). 4. Following subzonal injection of a round spermatid into the oocyte,the survival rate, electrofusion rate and 2-cell rate were 90.5%,34.6% and 28.3%, respectively.Conclusions 1. The fertilization rate and cleavage rate in the oocytes were significantly affected by the number of subzonal injection of spermatozoa. 2. The survival rate, fertilization rate and cleavage rate in the oocytes with PB1 or without PB1 were not significantly affected when subzonal injectionof spermatozoa. 3. The survival rate in the oocytes weresignificantly affected by injection methods, and the fertilization rate, cleavage rate and blastocyst rate in the oocytes were not significantly affected by injection methods. 4. Most round spermatids and oocytes were not fused on the present condition of electrofusion.【Key words】 Spermatozoon; Round spermatid; Microinjection; Electrical activation; Electrofusion; Mouse正常的受精过程，精子必须穿过透明带并与卵质膜融合而进入卵中。