细胞生长曲线实验
细胞生长曲线的绘制实验报告
细胞生长曲线的绘制实验报告篇一：实验五微生物生长量的测定及生长曲线的绘制一、实验目的学习了解微生物生长量测定的方法学习了解细菌生长曲线的绘制方法学习掌握血细胞计数板的使用方法微生物生长量的测定计数法重量法生理指标法1、显微镜直接计数法利用血细胞计数板计数涂片计数2、活菌菌落计数法3、滤膜法细菌生长曲线将单细胞细菌接种到恒定容积的液体培养基中，不补充营养物或移去培养物，细菌以二分裂方式繁殖，以时间为横坐标，细菌数目的对数值为纵坐标，可画出一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线，称为生长曲线篇二：细胞生长曲线的测定细胞生长曲线的测定一、实验目的掌握测定细胞生长曲线的方法。
二、实验器具24孔细胞培养板、微量加样器、eppendorf管、吸头、吸头盒、显微镜、细胞计数板、载玻片、盖玻片、吸管、试管架、普通显微镜、细胞悬液、0.4%台盼蓝。
三、实验方法1. 培养细胞：首先在24孔细胞培养板内分别接种相同数量的细胞，计数并记录接种的细胞悬液密度，接种时间记为0小时。
2. 计数细胞密度：从接种时间算起，每隔24小时计数3孔的细胞密度，算出平均值。
为提高准确率，对每孔细胞可计数2-3次，如此操作至第七天结束。
3. 绘制曲线：以培养时间为横坐标、细胞密度为纵坐标，将全部结果在坐标纸上绘图，即得所培养细胞的生长曲线。
篇三：MTT法绘制生长曲线实验材料：1，5%FBS-L-DMEM, 5x104个/ml细胞悬液，5mg/mlMTT溶液，DMSO,0.01M PBS,2, 96孔板共7个,酶标仪,50ml离心管，1.5ml离心管，0.22μm滤膜，锡箔纸，MTT工作液实验步骤：1，分别选取生长良好的P1、P3、P5代BMSCs消化后制备成细胞悬液，调整细胞密度为5x104/ml。
接种到96孔板，每孔接种200μl 细胞悬液进行培养。
2，培养16-48后，每天选择6个培养孔各自加入MTT溶液20μl，37℃继续孵育。
细胞生长曲线 统计方法
细胞生长曲线统计方法细胞生长曲线是研究细胞生长特征的重要工具，它可以描述细胞在不同环境条件下的生长模式和速率。
统计方法在分析细胞生长曲线时起着至关重要的作用，它们能够帮助我们从大量的实验数据中提取有用的信息和结论。
本文将从简单到复杂，由浅入深地介绍一些常用的统计方法，以便读者全面、深入地了解细胞生长曲线的分析过程。
1. 平均值与标准差分析细胞生长曲线实验中，我们通常会测量一系列时间点上的细胞数量，并计算平均值和标准差。
平均值能够反映细胞数量的整体趋势，而标准差则表示细胞数量的离散程度。
通过对不同条件下的平均值和标准差进行比较，可以初步了解细胞生长的差异性。
2. 生长速率与斜率分析细胞生长曲线通常呈现出不同的生长阶段，包括指数生长期、稳态生长期和平台期。
为了定量评估生长速率，我们可以计算细胞数量关于时间的斜率。
斜率越大，说明细胞生长速率越快；斜率越小，说明细胞生长速率越慢。
通过比较不同条件下的斜率，我们可以判断细胞对环境的适应能力和生长潜力。
3. 峰值分析细胞生长曲线的峰值表示细胞生长的最大值，它对于了解细胞生长的极限和饱和程度非常重要。
通过对不同条件下的峰值进行比较，我们可以评估细胞所处环境的适宜程度，并确定最佳的生长条件。
4. 方差分析与T检验当我们需要比较三个及以上条件下的细胞生长曲线时，可以使用方差分析（ANOVA）来评估差异的显著性。
方差分析能够判断不同条件下的细胞生长是否存在显著差异，并找出主要的影响因素。
而当我们只需要比较两个条件时，可以使用T检验来判断差异是否显著。
5. 线性回归分析在某些情况下，我们希望找到适合细胞生长曲线的数学模型，以便预测和优化细胞生长的过程。
线性回归分析可以帮助我们建立细胞生长曲线与其他因素之间的数学关系，从而实现对细胞生长的精准控制。
总结回顾：细胞生长曲线的分析是研究细胞生长特征的重要方法之一。
在本文中，我们从简单到复杂地介绍了一些常用的统计方法，并通过这些方法对细胞生长曲线进行全面评估。
细胞生长曲线实验步骤
细胞生长曲线实验步骤一、准备细胞与培养基1.选择适宜于实验的细胞系，并确保细胞状态良好，无污染。
2.准备所需的培养基，按照说明书进行配制，并在使用前进行无菌过滤处理。
3.准备所需的无菌器械、吸管、离心管等。
二、接种细胞至培养板1.在无菌操作台上，用无菌吸管吸取适量的细胞悬液。
2.将细胞悬液均匀接种至培养板中，每个孔内的细胞数量应保持一致。
3.将接种好的培养板放入培养箱中，设置适宜的温度、湿度和二氧化碳浓度。
三、定时观察与计数1.在接种后的不同时间点（如每天或每24小时）观察细胞的生长情况。
2.使用倒置显微镜观察细胞的贴壁生长和形态变化，以及细胞数量的变化。
3.在特定时间点，使用血细胞计数板或自动细胞计数器对细胞进行计数。
四、记录数据1.将每次观察和计数的结果详细记录下来，包括细胞数量、形态变化等。
2.记录实验过程中的温度、湿度、二氧化碳浓度等环境参数。
五、绘制生长曲线1.根据记录的数据，以时间为横轴，细胞数量为纵轴，绘制细胞生长曲线图。
2.生长曲线应反映出细胞数量随时间的变化趋势。
六、数据分析1.分析生长曲线，计算细胞的倍增时间、生长速率等参数。
2.比较不同条件下的细胞生长情况，分析影响细胞生长的因素。
七、清洗与消毒1.实验结束后，将使用过的器械、培养板等进行清洗和消毒处理。
2.清洗可使用去离子水或清洗剂，消毒可使用75%酒精或紫外线照射等方法。
八、实验总结1.总结实验过程中的经验教训，分析可能存在的误差来源。
2.根据实验结果，提出改进实验方法的建议或对未来研究方向的展望。
请注意，以上步骤仅为一般性的细胞生长曲线实验步骤，具体实验过程可能因细胞类型、实验条件等因素而有所不同。
在实际操作中，请遵循实验室的安全规定和操作规程，确保实验结果的准确性和可靠性。
细胞生长曲线的测定
细胞生长曲线的测定细胞生长曲线的测定一：背景与原理生长曲线是测定细胞生长数的常用方法，也是判定细胞活力的重要指标，是培养细胞生物学特性的基本参数之一。
一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮后贴壁，随后渡过长短不同的潜伏期，即进入快速生长的指数生长期。
在细胞达到饱和密度后，停止生长，进入平台期，然后退化衰亡。
为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，需连续对细胞进行计数。
通常计数6天。
为精确起见，一般每次实验设3个平行重复。
【晶莱生物】二：材料、试剂与仪器1. 实验材料Hela细胞系。
2. 实验试剂DMEM培养基（青霉素，链霉素，10%血清），0.25%胰蛋白酶溶液，台酚蓝染液。
3. 实验仪器超净工作台，CO2培养箱，倒置显微镜，微量移液器，血细胞计数板，培养瓶，离心管，移液管，废液缸，盖玻片，24孔板。
三：方法与步骤1.取生长良好的细胞，用培养基制成细胞悬液后计数。
根据细胞计数结果按5×104/mL作传代培养接种于24孔板中，共接种21孔细胞。
1 ml/孔。
余下三孔可设传代培养的对照。
2.24h后每天记录细胞数目，每次取3孔细胞，分别进行计数。
计算平均值。
连续计数7d。
细胞用胰酶消化后加入一定量的培养基，混匀制成细胞悬液。
取少量悬液与台酚蓝1:1混合。
取一干净的血细胞计数板，盖上盖片，从盖片两边滴入细胞悬液使之充满计数板和盖片之间。
注意滴液勿有气泡，也不能太多，否则会使盖片浮起而使细胞计数不准。
3.低倍镜下观察，活细胞不着色，台盼蓝着色的细胞呈深蓝色，是不健康或已死亡的细胞，不能计数。
找出计数板上的方格，计算四角大格内总细胞数，压大格线者只计左侧和上方，不计右侧和下方细胞悬液中细胞密度计算公式为：细胞数/mL=（四角大格内细胞数/4）×104×24.根据细胞计数结果，以单位细胞数（细胞数/mL）为纵坐标，以时间为横坐标绘制生长曲线。
MTT比色法测定细胞生长曲线_郝新保
MTT比色法测定细胞生长曲线郝新保 张利朝 殷 缨 韩秀珍 陶秦渝 郝晓柯 张盈华(第四军医大学唐都医院中心实验室 西安710038)关键词 细胞生长曲线 M T T比色法中图号 Q28 在有关肿瘤细胞生物学的研究中,我们常常要测定细胞的生长状态,制作细胞生长曲线,以往的方法是取少量细胞在镜下或计数仪中计数,然后标注在坐标纸上,制作出细胞生长曲线.这种方法对同一样品要求计数几次取平均值,不但操作繁琐、费时,更主要的是误差较大,可达到20%～30%[1],包括取样误差、计数误差等.为了能简便、准确地测定细胞数,我们建立了基于M T T比色法的细胞生长曲线制作方法.1 材料和方法1.1 试剂 R PM I1640培养基为GIBCO公司产品,小牛血清为杭州四季青产品,M T T为SERV E产品,其它试剂均为国产.1.2 仪器 HL-2029P型酶标自动分析仪为国营二六二厂产品,Pr ofileⅡ,Elite型流式细胞仪为美国CO U L T ER 公司产品.1.3 细胞培养 选用人乳腺癌细胞系SK-BR-3.细胞培养在含10%小牛血清的RPM I1640培养基中,37℃,5% CO2.1.4 镜下计数测定细胞数 细胞消化后悬浮在一定量的培养基中,用计数板按常规方法在倒置显微镜下计数,每个样品测三次,取平均值.1.5 流式细胞仪计数 细胞消化后悬浮在一定量的培养基中,取0.2ml细胞过滤后用流式细胞仪自动计数.1.6 M T T比色法计数 M T T比色法计数为间接计数,先要做出细胞的标准曲线,然后根据欲测样品的A值计算出相应的细胞数.1.6.1 制作标准曲线 准备细胞悬液,从1×107细胞/200μl/孔开始在96孔板中倍比稀释至1×102细胞/孔,每个稀释度三孔细胞,培养板置37℃培养4h后细胞贴壁,每孔中加入20μg M T T继续培养4h,然后吸出150μl培养液,加入等量DM SO,37℃20min,570nm处测定吸光度[2],用二六二厂酶标自动分析仪程序绘出细胞标准浓度曲线.1.6.2 制作生长曲线 调整细胞的浓度,按2×103/孔接种在96孔板中,置37℃培养,每天用M T T比色法测定3孔细胞的A值,在标准曲线上计算出相应的细胞数,即可绘出细胞的生长曲线.郝新保,男,32岁,讲师,主治医师2 结果2.1 细胞数与A值的标准曲线 根据各稀释度的A值制作细胞浓度的标准曲线,如图1.图1 SK-BR-3细胞浓度的标准曲线2.2 肿瘤细胞的M T T比色法生长曲线 根据每天测定的三孔细胞的A值在标准曲线上求得其对应的细胞数,7～10d后即可绘制细胞生长曲线,如图2.图2 SK-BR-3细胞的生长曲线2×;--0.2×;…20×.2.3 细胞接种密度对生长曲线的影响 当细胞接种密度较低(2×102/孔)和较高(2×104/孔)时,对细胞生长曲线的形状有一定的影响,如图2.2.4 M T T比色法与镜下计数法及流式细胞仪计数法的比较 为了比较M T T比色法和镜下计数法制作的细胞生长曲线,用流式细胞仪的计数结果作为参照,结果表明M T T 比色法与流式细胞仪计数结果更接近,明显优于镜下计数法的结果.3 讨论 从结果可以看出,用M T T比色法制作细胞生长曲线完全可行.因其减少了取样和计数误差,免除了贴壁细胞的消化等,使其具有简便、快速的特点.对几种不同方法制作的生长曲线进行比较发现,M T T比色法在客观性上也比镜下计数法有了很大的提高.要掌握好这个方法首要的一点是标准曲线的制作,稀释一定要准确,在保证标准曲线如实反映细胞数的基础上,才能制作出好的生长曲线.在测定时,接种细胞的密度对生长曲线的影响较大.从图2可以看出,接种密度过高或过低都不利于生长曲线的制作,这与细胞的生长能力有关,可进行简单的预实验确定,一般在(1～5)×103细胞/孔为好.尽管M T T比色法测定细胞生长曲线具有很多优点,但因其需要使用自动酶标仪而受到了一定的限制,如果能开发出细胞生长曲线专用软件,就能摆脱自动酶标仪的限制,利用普通酶标仪就可以开展工作了.参考文献1鄂 征.组织培养技术.第2版.北京:人民卫生出版社,1993: 1542候 健,孔宪涛.四甲基偶氮唑蓝比色法检测人血清白细胞介素6.中华医学检验杂志,1993;16(4):208～210(收稿1996-09-17 修回1997-02-04)编辑 王小仲化云宁滴眼液的质控标准王 颖 雷其云 蒋永培 樊亚萱 (第四军医大学西京医院药局 西安710033)关键词 化云宁 钾离子 耐缺氧 质量控制 刺激性中图号 R289 我院研制的新药化云宁滴眼液为一复方中药制剂,具有活血化瘀、退翳明目的功效,是治疗角膜瘢痕(角膜云翳,角膜斑翳)的理想药物.在化云宁研制和生产的质量控制上,我们采用了钾离子(K+)含量测定、刺激性实验及生物检定方法作为质控标准,保证了化云宁滴眼液在临床上安全和有效地使用.1 材料和方法1.1 药物与试剂 化云宁滴眼液由丹参、黄芩和金银花等生药的提取液按眼药常规要求制备而成;心得安注射液(1mg/ml,批号830706,北京制药厂);丹参素注射液(10 mg/ml,批号820401,上海医科大学附属中山医院制);生理盐水(2ml/支,批号8303023,自制).1.2 实验动物 BA L B/c小鼠,雄性,6～8周龄,体重18～21g;新西兰白兔2只,雄性,编号分别为543,554,体重分别为2.05kg和2.45kg(以上动物均由本校实验动物研究中心提供).1.3 K+含量测定[1] 用System E4A型火焰光度计(美国BECKM AN公司制造)分别测定化云宁滴眼液成品及其组方中各味药的提取液(丹参,黄芩,金银花等)中K+浓度.样品在测定前均用N aO H调p H值至6.8～7.0.1.4 刺激性实验 采用家兔滴眼法.选取健康新西兰白兔2只,编号分别为543,554,用药前,检察兔眼结膜血管、角膜透明度等均属正常,如①结膜无血丝及发红;②王 颖,女,42岁,主管药师角膜不浑浊,呈透明状;③眼角无分泌物.左眼点化云宁滴眼液2滴(批号850619),右眼点生理盐水2滴作为对照,用药后开始记录时间,并观察眼部反应情况.结果判定以上述用药前检察的①～③项指标无异常为无刺激症状表现(-),否则为被检眼药有刺激性(+).1.5 常压耐缺氧实验 按表2中的剂量,小鼠腹腔(注射)给药(批号830509,自制)后30min,放入容量为250ml的磨口玻璃瓶中,瓶内放钠石灰5g,每瓶放小鼠一只,放入后用凡士林密封盖紧,并开始记录其存活时间[2].以生理盐水组为对照,比较各组间统计学上的差异,统计学处理采用t检验.2 结果2.1 药液中K+浓度的测定 在中药滴眼液与中药注射液中常含有来源于植物药材本身的K+,其浓度过高可引起局部疼痛.我们采用中草药注射液的K+浓度限定范围[40%～60%(mg/ml)以下][3]做为化云宁滴眼液的质控标准之一.六个批号的化云宁滴眼液中K+浓度测定的结果见表1,均符合限定标准.此外,对化云宁滴眼液中丹参,黄芩和金银花三种主药提取液的K+浓度也分别进行了检测,结果(三次测定的平均值)分别为47.6%,0.8%和1.2%(mg/ml),由此可见,该滴眼液中的K+主要来源于丹参.2.2 刺激性实验 经2只新西兰白兔左、右眼对照实验观察,除1只兔左眼在用药液后15min时观察有轻度流泪外,其余均无任何刺激性反应.因此,该眼药符合有关规定.。
大肠杆菌细胞生长曲线的测定实验报告思考题
大肠杆菌细胞生长曲线的测定实验报告思
考题
在大肠杆菌细胞生长曲线的测定实验报告中，以下是一些可能的思考题：
1. 实验结果显示大肠杆菌细胞在培养基中的生长呈现出典型的生长曲线，包括潜伏期、指数期、平台期和死亡期。
这种生长曲线的形成是由什么因素引起的？
2. 在实验中，为了测定大肠杆菌细胞的生长曲线，我们选择了什么样的培养基和培养条件？这些选择是否对实验结果产生了影响？
3. 在实验过程中，我们通过测量光密度或细胞数量来确定大肠杆菌细胞的生长情况。
这种测量方法可能存在的缺陷是什么？有没有更准确的测量方法可以应用于该实验？
4. 实验中，我们还讨论了大肠杆菌细胞生长的影响因素，如温度、pH值和营养成分等。
在未来的研究中，我们可以采取哪些控制变量的方法来深入探究这些影响因素对大肠杆菌细胞生长的具体影响？
5. 大肠杆菌细胞生长曲线的测定在哪些领域有广泛的应用？如何利用实验结果来研究和解决实际问题，比如食品安全、环境污染等？
这些思考题可以帮助你对实验结果进行进一步的思考和讨论，深化对大肠杆菌细胞生长曲线的理解并应用于更广泛的领域。
MTT法测定细胞生长曲线
MTT法测定细胞生长曲线
1、取生长状况良好的细胞，常规消化制成单细胞悬液并计数，调整细胞成六个浓度梯度，依次为：5x103、1x104、2x104、3x104、4x104、5x104/ml，均匀接种细胞于96孔细胞培养板，每孔加细胞悬。
液200ul，每个浓度组设6个复孔,共接种7块培养板，37℃、5%C02浓度，饱和湿度培养箱中连续孵育24/48/72/96/120/148/172小时后。
2、每孔加入20ulMTT溶液(smg/m1用PBS<ph=7.4>配)，继续孵育4h后终止培养。
3、快速翻转培养板,弃去上清液,每孔加入150ulDMSO,振荡10min，使MTT蓝紫色结晶完全溶解。
4、用酶联免疫检测仪于490nm处检测各孔的吸光值(OD值)，并以未接种细胞只加培养基孔的吸光值为空白对照调零，取6孔平均值。
5、实验重复3次，以培养“时间”为横轴，“吸光值”为纵轴绘制细胞生长曲线。
MTT比色法测定细胞生长曲线、细胞生长曲线拟合、细胞群体倍增时间的简化计算解析
1.MTT比色法测定细胞生长曲线
2018/10/31
细胞生长曲线
• 细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法，也 是判定细胞活力的重要指标，是培养细胞生物学特性 的基本参数之一。
一般细胞传代之后，经过短暂的 悬浮然后贴壁，随后度过长短不同 的迟缓期（潜伏期），即进入大量 分裂的对数生长期。在细胞达到饱 和密度后，停止生长，进入稳定期， 然后退化衰亡。
t 24h( Lg 2 / [ Lg (a eb t ln 2 ) Lg (a eb t0 ln 2 )] t 24h( Lg 2 / [ Lg (a 2 ) Lg (a 2
bt b t0
)])
t (24h( Lg 2 / b((t t0 ) Lg 2)
t[24h( Lg 2 / (b t Lg 2)]
• 1.标准曲线的测定:
• 例如：用培养液将待检细胞重悬，得到 细胞悬液，按照4x10^4/ml细胞密度梯度 ,分 别接种于 96孔板 ,每孔 100μl,重复 3孔;采用 MTT法测量吸光值A值,同一浓度下测得的A值 为该浓度下3孔的平均值。 依检测结果 ,得到吸光值 A值与细胞浓度 的对应关系，绘出标准曲线。
2018/10/31
• • •
2.细胞生长曲线拟合及细胞群体倍增时间的简 化计算
2018/10/31
• 曲线拟合
• 曲线拟合（curve fitting）是指选择适当的曲线类 型来拟合观测数据，并用拟合的曲SS是世界上最早的统计分析软件，由美国斯坦 福大学的三位研究生Norman H. Nie、C. Hadlai (Tex) Hull 和 Dale H. Bent于1968年研开发成功， 同时成立了SPSS公司，并于1975年成立法人组织、 在芝加哥组建了SPSS总部。 • 1984年SPSS总部首先推出了世界上第一个统计分 析软件微机版本SPSS/PC+，开创了SPSS微机系列 产品的开发方向，极大地扩充了它的应用范围， 并使其能很快地应用于自然科学、技术科学、社 2018/10/31
细胞生长曲线的测定
（一）细胞生长曲线的测定（细胞计数法）1．取生长良好接近汇合的细胞，用胰酶消化，用新培养基制成细胞悬液后计数(见四、细胞传代培养的实验步骤)。
如是非粘壁细胞，则离心弃旧培养基后，换上一定量的新鲜培养基然后制成细胞悬液计数。
2．根据细胞计数结果按每个小方瓶5×104／mL作传代培养接种细胞，共接种21瓶细胞。
3．24 h后开始计数细胞，以后每隔24 h计数一次，每次取3瓶细胞，分别进行计数。
计算平均值。
连续计数7 d。
4．根据细胞计数结果，以单位细胞数(细胞数／mL)为纵坐标，以时间为横坐标绘制生长曲线。
(细胞计数方法请参照实验三)(二)细胞生长曲线测定(MTT法) 1．制备1 mL细胞悬液。
空白对照以1 mL培养基代替细胞悬液。
加入0．1 mL MTT于37℃孵育4 h。
使MTT还原为蓝紫色甲月赞结晶。
2．加1 mL DTW脱色液，37℃至少静置30 min(甚至过液)，使甲质颗粒充分溶解。
3．吸取200 μL该溶解液至96孔板孔中，在酶标仪上读取OD值，检测波长570 nm，参考波长630 nm。
4．每隔24 h测量一个点，每个点为3个平行样品的平均值。
（二）细胞蛋白电泳一.细胞总蛋白抽提细胞裂解液三去污裂解液:50 mmol/L Tris-cl (pH 8.0)，150 mmol/L NaCl，0.2 g/L叠氮钠，1 g/LSDS，100 mg/L Aprotin，10 g/L NP-40，5 g/L去氧胆酸钠，100 mg/L 苯甲基磺酰氟(PMSF)总蛋白抽提程序：1.PBS洗细胞3 次2.加入裂解缓冲液（1.5x10 6 个细胞大约加入100µL 裂解液，或100ml细胞瓶中加入100µL 裂解液），冰上放置20min3.收集裂解液4.离心，12000转，2~10min5.吸取上清，蛋白定量，分装，保存在-78度备用。
试剂：1. 30% 聚丙烯酰胺：29g 丙烯酰胺，1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺，100ml 水，0.45um 滤膜过滤，棕色瓶，室温保存2. 10% 过硫酸铵：1g 过硫酸铵，10ml 水，4℃保存3. 10% SDS：100g SDS，1000ml 水，68℃助溶，pH 7.24. TEMED：lml TEMED，99ml 水，棕色瓶，4℃保存5. 5X Tirs-甘氨酸电泳缓冲液：15.1g Tirs碱，94g 甘氨酸，50ml 10%SDS，1000ml 水，使用时配制成1X【操作步骤】l.将电泳槽玻璃板洗净，吹干，安装好；2.用1％的琼脂糖电泳缓冲液（1g琼脂糖溶于100ml电泳缓冲液）封严玻璃板的边和底（保证不漏胶）；3.配分离胶，将配好的分离胶立即倒入凝胶槽内，至凝胶槽高三分之二处，加入蒸馏水密封。
细胞生长曲线的绘制实验报告范文2篇
细胞生长曲线的绘制实验报告范文2篇An experimental report on the drawing of cell growth c urve编订：JinTai College细胞生长曲线的绘制实验报告范文2篇小泰温馨提示：实验报告是把实验的目的、方法、过程、结果等记录下来，经过整理，写成的书面汇报。
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二、实验器具24孔细胞培养板、微量加样器、eppendorf管、吸头、吸头盒、显微镜、细胞计数板、载玻片、盖玻片、吸管、试管架、普通显微镜、细胞悬液、0.4%台盼蓝。
三、实验方法1.培养细胞：首先在24孔细胞培养板内分别接种相同数量的细胞，计数并记录接种的细胞悬液密度，接种时间记为0小时。
2.计数细胞密度：从接种时间算起，每隔24小时计数3孔的细胞密度，算出平均值。
为提高准确率，对每孔细胞可计数2-3次，如此操作至第七天结束。
3.绘制曲线：以培养时间为横坐标、细胞密度为纵坐标，将全部结果在坐标纸上绘图，即得所培养细胞的生长曲线。
MRC-5体外培养细胞生长曲线测定 - 详细
MRC-5体外培养细胞生长曲线测定一．实验目的认识细胞接种和传代培养中细胞生长增殖规律。
二．实验原理在培养接种或每一次传代培养过程中，培养物都要经历相似的恢复和生长过程。
细胞生长曲线反映的是培养细胞从接种到传代之前的生长状况，也是判定细胞活力的重要指标。
一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮然后贴壁，随后度过长短不同的潜伏期，紧接着进入大量分裂的指数生长期。
在细胞达到饱和密度后，停止生长，进入平台期，然后退化衰亡。
为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期，斜率较大的指数生长期，呈平台状的平台期及退化衰亡4个部分。
以培养时间为横坐标、细胞密度为纵坐标绘制细胞的生长曲线坐标图。
三．实验准备3.1实验人员用品工作服、帽子、口罩、手套、肥皂、医用手臂消毒桶、0.1%新洁尔灭消毒液；3.2消毒和灭菌用品电炉、高压蒸汽灭菌锅、铝盒、24孔细胞培养板、移液管、枪头、洗耳球、离心管（规格：1.5mL/5mL/10mL）；3.3药品和试剂DMEM细胞培养液（10%血清）、0.25%胰蛋白酶-0.53Mm EDTA、PBS(-)；3.4 细胞MRC-5人二倍体细胞；3.5设备与器材CO2培养箱、离心机、移液枪（规格：1000uL、200uL）、二级生物安全柜、血细胞计数板、显微镜、记号笔、废液瓶；四．实验步骤4.1细胞接种4.1.1选择生长良好的MRC-5人二倍体细胞，移液管移除原细胞培养液至废液瓶中；4.1.2 DPBS润洗三次，每次5mL；4.1.3 吸管吸取1mL胰蛋白酶溶液浸润培养层细胞，37℃恒温消化2～10min；4.1.4用含10%血清的DMEM培养液4mL终止消化；4.1.5将终止消化后的细胞悬液用移液管转移至离心管中，1000r/min离心8min，弃上清；4.1.6吸管吸取2mL DMEM细胞培养液悬浮细胞；4.1.7对细胞悬浮液进行细胞计数；4.1.8调整悬浮液的细胞浓度分别为5×103个/mL(A) 、2×104个/mL(B)、 5×104个/mL(C)3种不同的细胞浓度（细胞理论数：1.575×104个）；4.2 细胞培养4.2.1依次将浓度为5×103个/mL(A) 、2×104个/mL(B)、 5×104个/mL(C)的细胞悬液分装于3个有盖的24孔细胞培养板，分别按每孔接种1mL，每种浓度各接21孔，进行细胞的悬浮培养；4.3 细胞换液细胞接种培养后，分别按照每间隔3d和5d换液一次。
细胞生长曲线的绘制实验报告范文
细胞生长曲线的绘制实验报告细胞生长曲线的绘制实验报告范文篇一：实验五微生物生长量的测定及生长曲线的绘制一、实验目的学习了解微生物生长量测定的方法学习了解细菌生长曲线的绘制方法学习掌握血细胞计数板的使用方法（一）微生物生长量的测定计数法重量法生理指标法1、显微镜直接计数法（1）利用血细胞计数板计数（2）涂片计数2、活菌菌落计数法3、滤膜法（二）细菌生长曲线将单细胞细菌接种到恒定容积的液体培养基中，不补充营养物或移去培养物，细菌以二分裂方式繁殖，以时间为横坐标，细菌数目的对数值为纵坐标，可画出一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线，称为生长曲线（growth curve）篇二：细胞生长曲线的测定细胞生长曲线的测定一、实验目的掌握测定细胞生长曲线的.方法。
二、实验器具24孔细胞培养板、微量加样器、eppendorf管、吸头、吸头盒、显微镜、细胞计数板、载玻片、盖玻片、吸管、试管架、普通显微镜、细胞悬液、0.4%台盼蓝。
三、实验方法1. 培养细胞：首先在24孔细胞培养板内分别接种相同数量的细胞，计数并记录接种的细胞悬液密度，接种时间记为0小时。
2. 计数细胞密度：从接种时间算起，每隔24小时计数3孔的细胞密度，算出平均值。
为提高准确率，对每孔细胞可计数2-3次，如此操作至第七天结束。
3. 绘制曲线：以培养时间为横坐标、细胞密度为纵坐标，将全部结果在坐标纸上绘图，即得所培养细胞的生长曲线。
篇三：MTT法绘制生长曲线实验材料：1，5%FBS-L-DMEM, 5x104个/ml细胞悬液，5mg/mlMTT溶液，DMSO,0.01M PBS,2, 96孔板共7个,酶标仪,50ml离心管，1.5ml 离心管，0.22μm滤膜，锡箔纸，MTT工作液（1ml/管）实验步骤：1，分别选取生长良好的P1、P3、P5代BMSCs消化后制备成细胞悬液，调整细胞密度为5x104/ml。
接种到96孔板，每孔接种200μl细胞悬液进行培养（每孔1x104细胞）。
大肠杆菌细胞生长曲线的测定实验难点
大肠杆菌细胞生长曲线的测定实验难点
大肠杆菌细胞生长曲线的测定实验涉及到多个步骤,其中有几个难点：
1. 培养基的选择：大肠杆菌在不同的培养基条件下生长的情况会有所不同,因此在进行生长曲线实验前需要选择一个合适的培养基。
同时,培养基的质量对实验结果也会有影响,需要注意使用新鲜的培养基。
2. 细胞密度的准确测定：测定生长曲线需要准确地确定细胞数量,但直接计数难度较大。
在实验中常用的方法是通过测量细胞培养液的浓度或浊度来间接估算细胞数。
但这些方法也有一定的局限性,需要严格按照方法操作并进行多次检测。
3. 实验条件的控制：细胞生长曲线的测定需要严格控制温度、湿度、氧气含量等多个生长条件。
如果实验条件不稳定,会导致数据的误差增大。
4. 数据处理的准确性：测量出的生长曲线数据需要经过统计学处理和分析,并进行可靠性检验。
在处理数据的过程中,需要避免人为因素的影响,以保证实验结果的准确性。
细胞生长曲线实验
细胞生长曲线实验引言细胞生长曲线实验是一种常用的细胞生物学实验方法，用于研究细胞在不同条件下的生长速率和增殖能力。
通过测量细胞数量随时间的变化，可以得到细胞生长曲线，进一步了解细胞的增殖规律和相关生理过程。
实验目的本实验旨在通过观察和记录细胞数量随时间变化的情况，构建出细胞生长曲线，并分析不同因素对细胞生长的影响。
实验材料与方法材料清单•细胞培养基：包括培养液、培养皿、离心管等。
•细胞株：选择合适的人类或动物细胞株。
•显微镜：用于观察和计数细胞。
•倒计时器或实时荧光定量PCR仪：用于记录时间。
实验步骤1.准备工作：–消毒工作台和实验器具，确保无菌环境。
–预热培养基至适宜温度（通常为37°C）。
2.细胞培养：–取出细胞株，将其转移到含有适宜培养基的培养皿中。
–放置在恒温培养箱中，维持合适的温度、湿度和氧气浓度。
–每天检查细胞的生长情况，记录细胞数量。
3.细胞计数：–取出培养皿，用显微镜观察细胞。
–使用倒计时器或实时荧光定量PCR仪记录观察时间，并进行细胞计数。
–记录每次观察的时间点和对应的细胞数量。
数据处理与分析绘制生长曲线图根据实验所得数据，可以使用图表软件（如Excel）绘制细胞生长曲线图。
横轴表示时间，纵轴表示细胞数量。
通过连接各个时间点上的细胞数量，可以得到一条曲线，反映了细胞的生长过程。
生长速率计算通过生长曲线图可以得到不同时间点上的细胞数量。
根据相邻两个时间点上的细胞数量差异，可以计算出单位时间内的生长速率。
例如，若第1天细胞数量为100个，第2天细胞数量为200个，则生长速率为100个/天。
统计与比较可以将不同实验组的生长曲线进行比较，分析不同因素对细胞生长的影响。
例如，可以比较不同培养基对细胞生长速率的影响，或者观察不同药物处理下细胞增殖能力的变化。
通过统计学方法（如t检验）可以判断实验组之间是否存在显著差异。
结果与讨论根据实验所得数据和分析结果，可以得出一些结论并进行讨论。
细胞生长曲线的绘制及注意事项
细胞生长曲线的绘制及注意事项1.取对数生长期细胞，用胰酶消化收集，调整单细胞悬液密度为104~105个/mL视细胞贴壁后的大小，倍增时间等因素确定接种密度。
按200μl/孔（1×104个细胞）接种于96孔培养板内，每组细胞接种5个孔，取平均值，切记各孔的接种密度一致。
2.置37℃、5％CO2气相和饱和湿度的CO2培养箱中培养，3.用PBS配制5mg/ml的MTT溶液，微膜过滤除菌，4度保存。
(MTT溶剂需避光4度保存，配好的溶剂有效期两周，过期的不能再用于实验，须重配)4.从第24 h开始，每隔24 h随机取1块96孔板，96孔板每孔加入20μl 5mg/mL MTT 液，继续培养4 h后，吸出孔内培养液；向每孔加入150μl DMSO。
将培养板置于微孔板振荡器上振荡10 min，使结晶物溶解。
5.酶联免疫检测仪检测各孔OD值，检测波长570 nm, 以时间为横坐标，平均OD值为纵坐标，记录并绘制细胞生长曲线。
备注：A.选择适当的细胞接种浓度。
因此，在进行MTT试验前，对每一种细胞都应测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，然后确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止时不致细胞过满。
这样，才能保证MTT结晶形成的量与细胞数呈良好的线性关系。
B.细胞生长曲线方法96孔板太小,接种细胞多时,用不了几天就长满,因一般要做5-7天);接种细胞少时,不易养活.C.避免血清干扰。
用含15%胎牛血清培养液培养细胞时，高浓度的血清物质会影响试验孔的吸光值。
由于试验本底增加，会降低试验敏感性。
因此，一般选小于10%胎牛血清的培养液进行试验。
在呈色后，尽量吸净培养孔内残余培养液。
D.操作过程中按常规换液.一般2-3天换液,如果不换液,则酸性产物等代谢产物积聚,一方面培养环境改变影响细胞生长,另一方面细胞营养消耗过多,生长变慢.做细胞生长曲线的目的是反映其生长特性,增殖能力,不换液则与我们平时细胞生长环境不一致.结果不科学.E.实验时应设置调零孔，对照孔，加药孔。
细胞生长曲线的测定
（一）细胞生长曲线的测定（细胞计数法）1．取生长良好接近汇合的细胞，用胰酶消化，用新培养基制成细胞悬液后计数(见四、细胞传代培养的实验步骤)。
如是非粘壁细胞，则离心弃旧培养基后，换上一定量的新鲜培养基然后制成细胞悬液计数。
2．根据细胞计数结果按每个小方瓶5×104／mL作传代培养接种细胞，共接种21瓶细胞。
3．24 h后开始计数细胞，以后每隔24 h计数一次，每次取3瓶细胞，分别进行计数。
计算平均值。
连续计数7 d。
4．根据细胞计数结果，以单位细胞数(细胞数／mL)为纵坐标，以时间为横坐标绘制生长曲线。
(细胞计数方法请参照实验三)(二)细胞生长曲线测定(MTT法) 1．制备1 mL细胞悬液。
空白对照以1 mL培养基代替细胞悬液。
加入0．1 mL MTT于37℃孵育4 h。
使MTT还原为蓝紫色甲月赞结晶。
2．加1 mL DTW脱色液，37℃至少静置30 min(甚至过液)，使甲质颗粒充分溶解。
3．吸取200 μL该溶解液至96孔板孔中，在酶标仪上读取OD值，检测波长570 nm，参考波长630 nm。
4．每隔24 h测量一个点，每个点为3个平行样品的平均值。
（二）细胞蛋白电泳一.细胞总蛋白抽提细胞裂解液三去污裂解液:50 mmol/L Tris-cl (pH 8.0)，150 mmol/L NaCl，0.2 g/L叠氮钠，1 g/LSDS，100 mg/L Aprotin，10 g/L NP-40，5 g/L去氧胆酸钠，100 mg/L 苯甲基磺酰氟(PMSF)总蛋白抽提程序：1.PBS洗细胞3 次2.加入裂解缓冲液（1.5x10 6 个细胞大约加入100µL 裂解液，或100ml细胞瓶中加入100µL 裂解液），冰上放置20min3.收集裂解液4.离心，12000转，2~10min5.吸取上清，蛋白定量，分装，保存在-78度备用。
试剂：1. 30% 聚丙烯酰胺：29g 丙烯酰胺，1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺，100ml 水，0.45um 滤膜过滤，棕色瓶，室温保存2. 10% 过硫酸铵：1g 过硫酸铵，10ml 水，4℃保存3. 10% SDS：100g SDS，1000ml 水，68℃助溶，pH 7.24. TEMED：lml TEMED，99ml 水，棕色瓶，4℃保存5. 5X Tirs-甘氨酸电泳缓冲液：15.1g Tirs碱，94g 甘氨酸，50ml 10%SDS，1000ml 水，使用时配制成1X【操作步骤】l.将电泳槽玻璃板洗净，吹干，安装好；2.用1％的琼脂糖电泳缓冲液（1g琼脂糖溶于100ml电泳缓冲液）封严玻璃板的边和底（保证不漏胶）；3.配分离胶，将配好的分离胶立即倒入凝胶槽内，至凝胶槽高三分之二处，加入蒸馏水密封。
细胞生长曲线的测定方法
细胞生长曲线的测定方法细胞生长曲线是啥玩意儿？嘿，其实就是用来观察细胞在一段时间内生长情况的曲线呗！那咋测定呢？首先，得准备好细胞和合适的培养基呀！就像厨师准备食材一样，可不能马虎。
把细胞接种到培养瓶或培养板里，然后在合适的条件下培养。
这就好比种下一颗种子，等着它发芽长大。
接着，要定期观察细胞的生长情况。
可以用显微镜看看细胞长得咋样了，数数有多少个。
这就像你时不时去看看自己养的花长得好不好一样。
可别偷懒哦！不然数据就不准确啦。
在测定过程中有啥要注意的呢？那可多了去了。
比如，培养条件一定要稳定，温度、湿度啥的都不能变来变去。
这就跟人需要一个稳定的生活环境一样，细胞也不例外呀！要是条件不稳定，细胞可能就不开心了，生长也会受影响。
还有啊，操作的时候一定要小心，别把细胞弄伤了。
这就像你小心翼翼地对待一个宝贝一样，轻拿轻放。
要是不小心把细胞搞坏了，那可就前功尽弃啦！那这个过程安全不？当然安全啦！只要你按照正确的方法操作，就不会有问题。
就像开车遵守交通规则就不会出事故一样。
而且，细胞生长曲线的测定通常在实验室里进行，有专业的设备和防护措施。
稳定性咋样呢？如果操作规范，数据是很稳定的哦！就像一座坚固的大楼，不会轻易倒塌。
只要你认真做好每一步，得到的结果就会很可靠。
细胞生长曲线有啥用呢？用处可大啦！可以用来研究细胞的生长规律，看看不同条件下细胞的生长情况有啥不同。
这就像侦探通过线索破案一样，细胞生长曲线就是我们研究细胞的线索。
还可以用来筛选合适的药物。
如果一种药物能抑制细胞生长，那在生长曲线上就能看出来。
这就像给病人选药一样，要选最适合的。
优势也不少呢！可以直观地看到细胞的生长情况，不用瞎猜。
就像你看天气预报知道明天会不会下雨一样，心里有底。
而且操作相对简单，不需要太复杂的设备。
举个实际案例呗！比如说在癌症研究中，就经常用细胞生长曲线来观察癌细胞的生长情况。
看看不同的药物对癌细胞的抑制效果如何。
这就像跟癌症这个大坏蛋打仗，细胞生长曲线就是我们的武器。
细胞生长曲线的测定安全操作及保养规程
细胞生长曲线的测定安全操作及保养规程1. 简介细胞生长曲线的测定是一种常用的实验方法，用于评估和研究细胞的生长状态和增长速度。
本文档旨在提供细胞生长曲线测定的安全操作指南和保养规程，以确保实验的准确性和实验人员的安全。
2. 实验材料•细胞培养物•无菌培养基•无菌培养器皿（培养盘、培养瓶等）•细胞培养培养箱•移液器和吸头•离心机•显微镜•细胞计数仪3. 实验操作3.1. 确保实验环境的清洁在进行细胞生长曲线测定之前，应确保实验环境的清洁和消毒，以防止细胞污染。
实验操作台、培养箱、显微镜等设备应定期清洁，使用无菌工具进行操作。
3.2. 细胞培养和传代在开始测定细胞生长曲线之前，需根据细胞类型的要求进行细胞培养和传代。
培养基的配制应按照相关实验室的标准操作程序进行，确保培养基的无菌和适宜。
3.3. 细胞接种和处理•使用无菌技术将细胞接种到培养器皿中，如培养盘或培养瓶。
根据细胞类型的不同，接种密度也会有所差异，应根据相关文献或实验室标准操作程序指导进行操作。
•保持培养器皿的密闭性，避免细菌和真菌的污染。
•维持适宜的温度和湿度，在培养箱中保持恒定的培养条件。
•定期进行细胞观察和培养液的更换。
3.4. 细胞计数和细胞生长曲线测定•在指定时间点，使用无菌技术从培养器皿中取出一定数量的细胞。
•使用细胞计数仪准确计数细胞的数量。
遵循仪器操作规程，避免仪器污染和误差。
•根据已知的细胞密度和培养时间计算细胞生长速率，并绘制细胞生长曲线。
3.5. 数据记录和分析实验过程中需要记录相关的实验参数和数据，如培养时间、细胞密度、培养条件等。
使用适当的试验记录表格或电子文档进行记录，并妥善保存。
4. 实验安全注意事项•操作前应熟悉实验材料和设备的使用方法，避免误操作和事故发生。
•实验过程中应佩戴实验室标准的防护用品，包括实验手套、眼镜和实验服等。
•使用无菌技术和实验室标准的消毒操作规程，以防止细胞污染和交叉感染。
•注意实验室卫生，定期清洁和消毒实验设备和工作台面，保持实验环境的清洁和无菌。
细胞生长实验报告
一、实验目的1. 掌握细胞生长曲线的绘制方法。
2. 了解细胞生长的基本规律和影响因素。
3. 掌握细胞计数方法及血细胞计数板的使用。
二、实验原理细胞生长曲线是指在一定条件下，细胞数量随时间推移而变化的规律。
通过绘制细胞生长曲线，可以了解细胞的生长速度、生长停滞期、死亡期等特征，从而分析细胞生长的规律和影响因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：细胞悬液、培养基、胰蛋白酶、0.4%台盼蓝、血细胞计数板、载玻片、盖玻片、显微镜、吸管、试管架等。
2. 实验仪器：细胞培养箱、恒温培养箱、冰箱、电子天平、计时器等。
四、实验方法1. 细胞培养：将细胞悬液接种于24孔细胞培养板中，每孔接种相同数量的细胞，放入细胞培养箱中培养。
2. 细胞计数：每隔24小时，从培养板中取出3孔细胞，用胰蛋白酶消化后，用血细胞计数板计数细胞密度。
3. 数据记录：记录每孔细胞的密度，计算平均值。
4. 绘制生长曲线：以时间为横坐标，以细胞数的对数为纵坐标，绘制细胞生长曲线。
五、实验结果与分析1. 细胞生长曲线：通过实验，得到了细胞生长曲线，如图1所示。
图1 细胞生长曲线从图1可以看出，细胞生长曲线分为四个阶段：（1）迟缓期：细胞接种后，生长速度较慢，细胞密度变化不大。
（2）对数生长期：细胞生长速度逐渐加快，细胞密度迅速增加。
（3）平台期：细胞生长速度减慢，细胞密度趋于稳定。
（4）死亡期：细胞生长速度逐渐降低，细胞密度减少。
2. 影响细胞生长的因素：（1）培养基：培养基的营养成分、pH值、渗透压等对细胞生长有重要影响。
实验中，培养基的营养成分和pH值均保持一致，说明培养基对细胞生长的影响不大。
（2）温度：细胞生长的最适温度一般在37℃左右。
实验中，细胞培养箱的温度保持在37℃，说明温度对细胞生长的影响不大。
（3）细胞密度：细胞密度对细胞生长有显著影响。
实验中，随着细胞密度的增加，细胞生长速度逐渐减慢，说明细胞密度是影响细胞生长的重要因素。
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细胞生长曲线实验
细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法，也是判定细胞活力的重要指标，是培养细胞生物学特性的基本参数之一。
一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮然后贴壁，随后度过长短不同的潜伏期，即进入大量分裂的指数生长期。
在细胞达到饱和密度后，停止生长，进入平顶期，然后退化衰亡。
为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期，斜率较大的指数生长期，呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部分。
以存活细胞数(万/mL)对培养时间(h或d)作图，即得生长曲线。
实验方法原理细
胞生长曲线是测
定细胞绝对生长
数的常用方法，是
判定细胞活力的
重要指标。
一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮然后贴壁，随后度过长短不同的潜伏期，即进入大量分裂的指数生长期。
为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期，斜率较大的指数生长期，呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法，是判定细胞活力的重要指标。
一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮然后贴壁，随后度过长短不同的潜伏期，即进入大量分裂的指数生长期。
为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期，斜率较大的指数生长期，呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部分。
细胞生长曲线的测定一般可利用细胞计数法进行。
实验材料细胞试剂、试剂盒D-Hanks液牛血清 RPMI1640 双抗 0.08%胰酶仪器、耗材净化工作台离心机恒温水浴箱冰箱倒置相差显微镜培养箱吸管培养瓶吸头枪头 24培养板胶塞微量加样枪红血球计数板实验步骤1. 取生长状态良好的细胞，采用一般传代方法进行消化，制成细胞悬液。
分。
细胞生长曲线的测定一般可利用细胞计数法进行。
实验材料细胞试剂、试剂盒D-Hanks液牛血清 RPMI1640 双抗 0.08%胰酶仪器、耗材净化工作台离心机恒温水浴箱冰箱倒置相差显微镜培养箱吸管培养瓶吸头枪头 24培养板胶塞微量加样枪红血球计数板
实验材料细胞试
剂、试剂盒
D-Hanks液牛血清 RPMI1640 双
抗 0.08%胰酶仪器、耗材净化工作台离心机恒温水浴箱冰箱倒置相差显微镜培养箱吸管培养瓶吸头枪头 24培养板胶塞微量加样枪红血球计数板细胞试剂、试剂盒D-Hanks液牛血清 RPMI1640 双抗 0.08%胰酶仪器、耗材净化工作台离心机恒温水浴箱冰箱倒置相差显微镜培养箱吸管培养瓶吸头枪头 24培养板胶塞微量加样枪红血球计数板实验步骤1. 取生长状态良好的细胞，采用一般传代方法进行消化，制成细胞悬液。
试剂、试剂盒
D-Hanks液牛血清 RPMI1640 双抗 0.08%胰酶仪器、耗材净化工作台离心机恒温水浴箱冰箱倒置相差显微镜培养D-Hanks液牛血清 RPMI1640 双抗 0.08%胰酶仪器、耗材净化工作台离心机恒温水浴箱冰箱倒置相差显微镜培养箱吸管培养瓶吸头枪头 24培养板胶塞微量加样枪红血球计数板实验步骤1. 取生长状态良好的细胞，采用一般传代方法进行消化，制成细胞悬液。
箱吸管培养瓶吸头枪头 24培养板胶塞微量加样枪红血球计数板
仪器、耗材净化工作台离心机恒温水浴箱冰箱倒置相差显微镜培养箱吸管培养
瓶吸头枪头 24培养板胶塞微量加样枪红血球计数板实验步骤1. 取生长状态良好的细胞，采用一般传代方法进行消化，制成细胞悬液。
净化工作台离心机恒温水浴箱冰箱倒置相差显微镜培养箱吸管培养瓶吸头枪头 24培养板胶塞微量加样枪红血球计数板实验步骤1. 取生长状态良好的细胞，采用一般传代方法进行消化，制成细胞悬液。
实验步骤1. 取生长状态良好的细胞，采用一般传代方法进行消化，制成细胞悬液。
1. 取生长状态良好的细胞，采用一般传代方法进行消化，制成细胞悬液。
2. 计数，精确地将细胞分别接种于21～30个大小一致的培养瓶内或培养孔（以24孔培养板为宜），每瓶或孔细胞总数要求一致，加入培养液的量也要一致。
3. 每天或每隔一天取出3瓶（孔）细胞进行计数，计算均值。
培养3～5 d 常要给未计数的细胞换液。
4. 以培养时间为横轴，细胞数为纵轴（对数），描绘在半对数座标纸上，连接成曲线后即成该细胞的生长曲线。
注意事项1. 细胞生长曲线虽然最为常用，但有时其反映数值不够精确，可有20～30%的误差，需结合其它指标进行分析。