细胞生长曲线的绘制实验报告
细胞培养生长曲线
细胞培养生长曲线细胞培养生长曲线是描述细胞数量随时间变化的关系曲线，是研究细胞生长规律和评估细胞活力的重要手段。
通过生长曲线，我们可以了解细胞的生长速率、倍增时间、细胞周期等相关参数，进而揭示细胞的生长规律。
一、细胞培养生长曲线的绘制绘制细胞培养生长曲线需要记录不同时间点细胞数量的变化。
通常采用以下步骤：细胞种板：将一定数量的细胞接种到培养板中，确保细胞密度适宜，能够满足后续实验需求。
细胞培养：按照设定的时间间隔（如24小时、48小时、72小时等）对细胞进行计数，记录每个时间点的细胞数量。
细胞计数：采用细胞计数器或显微镜对细胞进行计数，注意选择合适的计数方法，避免误差。
数据记录：将每个时间点的细胞数量记录在表格中，并绘制成细胞培养生长曲线。
二、细胞培养生长曲线的解析根据绘制的生长曲线，我们可以从以下几个方面解析细胞的生长规律：细胞增殖速率：通过观察生长曲线，可以了解细胞的增殖速率。
在生长曲线上，会出现一个明显的指数增长期，这个时期的细胞增殖速率较快，通常出现在细胞接种后的初期。
随着时间的推移，增殖速率会逐渐降低，这是由于营养物质和空间限制等因素的影响。
倍增时间：倍增时间是细胞培养过程中一个重要的指标，它表示细胞数量需要经过多少时间才能增加一倍。
通过生长曲线，可以计算每个时间点的倍增时间，从而了解细胞的生长速度。
细胞周期：细胞周期是指一个细胞从分裂开始到下一次分裂结束所经历的时间。
在生长曲线上，可以观察到细胞的周期性增殖现象，通过计算不同时间点的细胞数量和倍增时间，可以估算细胞的周期长度。
细胞死亡率：在细胞培养过程中，可能会出现细胞死亡的情况。
在生长曲线上，可以观察到细胞的死亡率变化情况。
如果死亡率较高，可能意味着培养条件不适宜或者细胞质量存在问题。
三、细胞培养生长曲线的影响因素细胞培养生长曲线受到多种因素的影响，包括以下几个方面：培养条件：培养条件对细胞的生长具有重要影响。
例如，培养液的成分、pH值、氧气浓度、温度等条件都会影响细胞的生长。
细胞生长曲线实验步骤
细胞生长曲线实验步骤一、准备细胞与培养基1.选择适宜于实验的细胞系，并确保细胞状态良好，无污染。
2.准备所需的培养基，按照说明书进行配制，并在使用前进行无菌过滤处理。
3.准备所需的无菌器械、吸管、离心管等。
二、接种细胞至培养板1.在无菌操作台上，用无菌吸管吸取适量的细胞悬液。
2.将细胞悬液均匀接种至培养板中，每个孔内的细胞数量应保持一致。
3.将接种好的培养板放入培养箱中，设置适宜的温度、湿度和二氧化碳浓度。
三、定时观察与计数1.在接种后的不同时间点（如每天或每24小时）观察细胞的生长情况。
2.使用倒置显微镜观察细胞的贴壁生长和形态变化，以及细胞数量的变化。
3.在特定时间点，使用血细胞计数板或自动细胞计数器对细胞进行计数。
四、记录数据1.将每次观察和计数的结果详细记录下来，包括细胞数量、形态变化等。
2.记录实验过程中的温度、湿度、二氧化碳浓度等环境参数。
五、绘制生长曲线1.根据记录的数据，以时间为横轴，细胞数量为纵轴，绘制细胞生长曲线图。
2.生长曲线应反映出细胞数量随时间的变化趋势。
六、数据分析1.分析生长曲线，计算细胞的倍增时间、生长速率等参数。
2.比较不同条件下的细胞生长情况，分析影响细胞生长的因素。
七、清洗与消毒1.实验结束后，将使用过的器械、培养板等进行清洗和消毒处理。
2.清洗可使用去离子水或清洗剂，消毒可使用75%酒精或紫外线照射等方法。
八、实验总结1.总结实验过程中的经验教训，分析可能存在的误差来源。
2.根据实验结果，提出改进实验方法的建议或对未来研究方向的展望。
请注意，以上步骤仅为一般性的细胞生长曲线实验步骤，具体实验过程可能因细胞类型、实验条件等因素而有所不同。
在实际操作中，请遵循实验室的安全规定和操作规程，确保实验结果的准确性和可靠性。
细胞生长曲线实验
细胞生长曲线实验细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法，也是判定细胞活力的重要指标，是培养细胞生物学特性的基本参数之一。
一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮然后贴壁，随后度过长短不同的潜伏期，即进入大量分裂的指数生长期。
在细胞达到饱和密度后，停止生长，进入平顶期，然后退化衰亡。
为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期，斜率较大的指数生长期，呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部分。
以存活细胞数(万/mL)对培养时间(h或d)作图，即得生长曲线。
实验方法原理细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法，是判定细胞活力的重要指标。
一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮然后贴壁，随后度过长短不同的潜伏期，即进入大量分裂的指数生长期。
为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期，斜率较大的指数生长期，呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法，是判定细胞活力的重要指标。
一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮然后贴壁，随后度过长短不同的潜伏期，即进入大量分裂的指数生长期。
为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期，斜率较大的指数生长期，呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部分。
细胞生长曲线的测定一般可利用细胞计数法进行。
实验材料细胞试剂、试剂盒D-Hanks液牛血清 RPMI1640 双抗 0.08%胰酶仪器、耗材净化工作台离心机恒温水浴箱冰箱倒置相差显微镜培养箱吸管培养瓶吸头枪头 24培养板胶塞微量加样枪红血球计数板实验步骤1. 取生长状态良好的细胞，采用一般传代方法进行消化，制成细胞悬液。
分。
细胞生长曲线的测定一般可利用细胞计数法进行。
实验材料细胞试剂、试剂盒D-Hanks液牛血清 RPMI1640 双抗 0.08%胰酶仪器、耗材净化工作台离心机恒温水浴箱冰箱倒置相差显微镜培养箱吸管培养瓶吸头枪头 24培养板胶塞微量加样枪红血球计数板实验材料细胞试剂、试剂盒D-Hanks液牛血清 RPMI1640 双抗 0.08%胰酶仪器、耗材净化工作台离心机恒温水浴箱冰箱倒置相差显微镜培养箱吸管培养瓶吸头枪头 24培养板胶塞微量加样枪红血球计数板细胞试剂、试剂盒D-Hanks液牛血清 RPMI1640 双抗 0.08%胰酶仪器、耗材净化工作台离心机恒温水浴箱冰箱倒置相差显微镜培养箱吸管培养瓶吸头枪头 24培养板胶塞微量加样枪红血球计数板实验步骤1. 取生长状态良好的细胞，采用一般传代方法进行消化，制成细胞悬液。
细胞增殖实验报告
细胞增殖实验报告细胞增殖实验报告细胞增殖是生物学中一个重要的研究领域，对于了解生命的起源、发展和疾病的发生机制具有重要意义。
本文将介绍一项关于细胞增殖的实验，旨在探究细胞增殖的规律和影响因素。
实验设计：本次实验选择了人类肺癌细胞株作为研究对象，通过培养细胞，观察细胞在不同条件下的增殖情况，并分析影响细胞增殖的因素。
实验步骤：1. 细胞培养：将人类肺癌细胞株接种于含有适宜培养基和培养液的培养皿中，放置于恒温培养箱中，温度为37℃，湿度为95%，二氧化碳浓度为5%。
2. 细胞计数：每隔一定时间，取出一小部分细胞悬液，使用显微镜和细胞计数板对细胞进行计数。
记录细胞数量并计算平均值。
3. 细胞增殖曲线绘制：根据细胞计数结果，绘制细胞增殖曲线，以时间为横轴，细胞数量为纵轴，观察细胞增殖的动态变化。
实验结果：经过一段时间的培养，我们观察到细胞数量逐渐增加，呈现出指数增长的趋势。
细胞增殖曲线显示，细胞数量在初始阶段增长较缓慢，随着时间的推移，增长速度逐渐加快，直至达到饱和状态。
讨论：1. 生长曲线特征：细胞增殖曲线呈现出一定的特征，即初始阶段增长缓慢，然后迅速加速，最后趋于平缓。
这是由于细胞在培养基中适应环境，增殖能力逐渐增强，细胞数量也随之增加。
当细胞数量达到一定程度时，培养基中的营养物质和空间有限，细胞增殖速度减缓，最终停止增殖。
2. 影响因素：细胞增殖受到多种因素的影响，如培养基中的营养物质浓度、pH 值、温度、湿度等。
其中，营养物质的供应是细胞增殖的基础，适宜的pH值和温度可以提供良好的生存环境，湿度对于细胞的生长也有一定的影响。
3. 应用前景：细胞增殖实验可以为药物筛选、疾病治疗和组织工程等领域提供重要参考。
通过观察细胞在不同条件下的增殖情况，可以评估药物对细胞增殖的影响，为新药的开发提供依据。
此外，细胞增殖实验还可以为疾病的治疗方案提供参考，例如癌症治疗中的细胞毒性药物筛选和剂量确定。
结论：通过本次实验，我们成功观察到了人类肺癌细胞在培养基中的增殖情况，并绘制了细胞增殖曲线。
MTT法测定细胞生长曲线
MTT法测定细胞生长曲线
1、取生长状况良好的细胞，常规消化制成单细胞悬液并计数，调整细胞成六个浓度梯度，依次为：5x103、1x104、2x104、3x104、4x104、5x104/ml，均匀接种细胞于96孔细胞培养板，每孔加细胞悬。
液200ul，每个浓度组设6个复孔,共接种7块培养板，37℃、5%C02浓度，饱和湿度培养箱中连续孵育24/48/72/96/120/148/172小时后。
2、每孔加入20ulMTT溶液(smg/m1用PBS<ph=7.4>配)，继续孵育4h后终止培养。
3、快速翻转培养板,弃去上清液,每孔加入150ulDMSO,振荡10min，使MTT蓝紫色结晶完全溶解。
4、用酶联免疫检测仪于490nm处检测各孔的吸光值(OD值)，并以未接种细胞只加培养基孔的吸光值为空白对照调零，取6孔平均值。
5、实验重复3次，以培养“时间”为横轴，“吸光值”为纵轴绘制细胞生长曲线。
细胞生长曲线的绘制实验报告范文2篇
细胞生长曲线的绘制实验报告范文2篇An experimental report on the drawing of cell growth c urve编订：JinTai College细胞生长曲线的绘制实验报告范文2篇小泰温馨提示：实验报告是把实验的目的、方法、过程、结果等记录下来，经过整理，写成的书面汇报。
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本文简要目录如下：【下载该文档后使用Word打开，按住键盘Ctrl键且鼠标单击目录内容即可跳转到对应篇章】1、篇章1：细胞生长曲线的测定文档2、篇章2：MTT法绘制生长曲线文档篇一：实验五微生物生长量的测定及生长曲线的绘制一、实验目的学习了解微生物生长量测定的方法学习了解细菌生长曲线的绘制方法学习掌握血细胞计数板的使用方法（一）微生物生长量的测定计数法重量法生理指标法1、显微镜直接计数法（1）利用血细胞计数板计数（二）细菌生长曲线将单细胞细菌接种到恒定容积的液体培养基中，不补充营养物或移去培养物，细菌以二分裂方式繁殖，以时间为横坐标，细菌数目的对数值为纵坐标，可画出一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线，称为生长曲线（growth curve）篇章1:细胞生长曲线的测定文档一、实验目的掌握测定细胞生长曲线的方法。
二、实验器具24孔细胞培养板、微量加样器、eppendorf管、吸头、吸头盒、显微镜、细胞计数板、载玻片、盖玻片、吸管、试管架、普通显微镜、细胞悬液、0.4%台盼蓝。
三、实验方法1.培养细胞：首先在24孔细胞培养板内分别接种相同数量的细胞，计数并记录接种的细胞悬液密度，接种时间记为0小时。
2.计数细胞密度：从接种时间算起，每隔24小时计数3孔的细胞密度，算出平均值。
为提高准确率，对每孔细胞可计数2-3次，如此操作至第七天结束。
3.绘制曲线：以培养时间为横坐标、细胞密度为纵坐标，将全部结果在坐标纸上绘图，即得所培养细胞的生长曲线。
MRC-5体外培养细胞生长曲线测定 - 详细
MRC-5体外培养细胞生长曲线测定一．实验目的认识细胞接种和传代培养中细胞生长增殖规律。
二．实验原理在培养接种或每一次传代培养过程中，培养物都要经历相似的恢复和生长过程。
细胞生长曲线反映的是培养细胞从接种到传代之前的生长状况，也是判定细胞活力的重要指标。
一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮然后贴壁，随后度过长短不同的潜伏期，紧接着进入大量分裂的指数生长期。
在细胞达到饱和密度后，停止生长，进入平台期，然后退化衰亡。
为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期，斜率较大的指数生长期，呈平台状的平台期及退化衰亡4个部分。
以培养时间为横坐标、细胞密度为纵坐标绘制细胞的生长曲线坐标图。
三．实验准备3.1实验人员用品工作服、帽子、口罩、手套、肥皂、医用手臂消毒桶、0.1%新洁尔灭消毒液；3.2消毒和灭菌用品电炉、高压蒸汽灭菌锅、铝盒、24孔细胞培养板、移液管、枪头、洗耳球、离心管（规格：1.5mL/5mL/10mL）；3.3药品和试剂DMEM细胞培养液（10%血清）、0.25%胰蛋白酶-0.53Mm EDTA、PBS(-)；3.4 细胞MRC-5人二倍体细胞；3.5设备与器材CO2培养箱、离心机、移液枪（规格：1000uL、200uL）、二级生物安全柜、血细胞计数板、显微镜、记号笔、废液瓶；四．实验步骤4.1细胞接种4.1.1选择生长良好的MRC-5人二倍体细胞，移液管移除原细胞培养液至废液瓶中；4.1.2 DPBS润洗三次，每次5mL；4.1.3 吸管吸取1mL胰蛋白酶溶液浸润培养层细胞，37℃恒温消化2～10min；4.1.4用含10%血清的DMEM培养液4mL终止消化；4.1.5将终止消化后的细胞悬液用移液管转移至离心管中，1000r/min离心8min，弃上清；4.1.6吸管吸取2mL DMEM细胞培养液悬浮细胞；4.1.7对细胞悬浮液进行细胞计数；4.1.8调整悬浮液的细胞浓度分别为5×103个/mL(A) 、2×104个/mL(B)、 5×104个/mL(C)3种不同的细胞浓度（细胞理论数：1.575×104个）；4.2 细胞培养4.2.1依次将浓度为5×103个/mL(A) 、2×104个/mL(B)、 5×104个/mL(C)的细胞悬液分装于3个有盖的24孔细胞培养板，分别按每孔接种1mL，每种浓度各接21孔，进行细胞的悬浮培养；4.3 细胞换液细胞接种培养后，分别按照每间隔3d和5d换液一次。
细胞生长曲线的绘制实验报告范文
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生长曲线和细胞生长周期的测定
生长曲线和细胞生长周期的测定MTT比色法绘制生长曲线生长曲线测定一般可用细胞计数法进行，但数值不够精确，可有20%-30%的误差，需结合其他指标进行分析。
原理：MTT，商品名噻唑蓝，是一种能接受氢原子的染料的四唑盐。
活细胞的线粒体中的琥珀脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶的蓝紫色结晶物并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。
二甲基亚砜能溶解细胞中的蓝紫色复合物，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映细胞数量。
在一定细胞数范围内，MTT结晶物形成的量与细胞数成正比。
步骤;1.接种：用含%10胎小牛血清的培养液配成细胞悬液，以每孔1000-10000个细胞接种到96孔板，每孔体积200ul.2细胞培养：同一培养条件，培养3-5天3呈色：培养3-5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS配制，ph=7.4）20ul.继续孵育4h。
终止培养，小心吸弃孔内培养基上清液，对于悬浮细胞需要分离后再吸弃孔内上清液。
每孔加150ul DMSO，脱色摇床震荡10min，使结晶充分溶解。
4.比色；选择490nm(570nm)波长，在没脸免疫检测仪上测定各孔光吸收值，记录时间，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。
流式细胞仪测细胞生长周期：流式测细胞周期，只需在实验结束后收集细胞（细胞数量须达到2-5x105）,离心，用PBS洗三次，再转移到1.5ml的EP管内，用预冷的70百分之的酒精固定1小时，就可以送到流式细胞仪检测。
流式细胞仪细胞周期检测流程1，做前提前换液，调整细胞状态，小皿或大皿（保证细胞达到10--100万个）。
2，遇冷PBS 清洗两次3，加入胰酶（Tripsin），静止2-3分钟（消化时间不要过长，以免损伤细胞），加入2-3mlDMEM慢慢吹打细胞成单细胞悬液。
4，1000rpm 离心3min5，去上清，加入遇冷PBS 1000rpm 离心3min6，去上清，加入0.5ml PBS（预冷）悬浮细胞7，加入1.5ml无水乙醇在漩涡器上涡旋（逐滴加入）8，-20℃固定过夜（overnight）9，拿出已固定细胞，1000rpm 离心3min 去上清10，加入预冷PBS 100rpm 离心3mim11，去上清加入500ul---1000ul 预冷PBS 悬浮细胞12，加入5-10ul RNA酶37℃水浴消化30min13，过400目细胞筛注入EP管,封口膜封口。
细胞生长曲线实验
细胞生长曲线实验引言细胞生长曲线实验是一种常用的细胞生物学实验方法，用于研究细胞在不同条件下的生长速率和增殖能力。
通过测量细胞数量随时间的变化，可以得到细胞生长曲线，进一步了解细胞的增殖规律和相关生理过程。
实验目的本实验旨在通过观察和记录细胞数量随时间变化的情况，构建出细胞生长曲线，并分析不同因素对细胞生长的影响。
实验材料与方法材料清单•细胞培养基：包括培养液、培养皿、离心管等。
•细胞株：选择合适的人类或动物细胞株。
•显微镜：用于观察和计数细胞。
•倒计时器或实时荧光定量PCR仪：用于记录时间。
实验步骤1.准备工作：–消毒工作台和实验器具，确保无菌环境。
–预热培养基至适宜温度（通常为37°C）。
2.细胞培养：–取出细胞株，将其转移到含有适宜培养基的培养皿中。
–放置在恒温培养箱中，维持合适的温度、湿度和氧气浓度。
–每天检查细胞的生长情况，记录细胞数量。
3.细胞计数：–取出培养皿，用显微镜观察细胞。
–使用倒计时器或实时荧光定量PCR仪记录观察时间，并进行细胞计数。
–记录每次观察的时间点和对应的细胞数量。
数据处理与分析绘制生长曲线图根据实验所得数据，可以使用图表软件（如Excel）绘制细胞生长曲线图。
横轴表示时间，纵轴表示细胞数量。
通过连接各个时间点上的细胞数量，可以得到一条曲线，反映了细胞的生长过程。
生长速率计算通过生长曲线图可以得到不同时间点上的细胞数量。
根据相邻两个时间点上的细胞数量差异，可以计算出单位时间内的生长速率。
例如，若第1天细胞数量为100个，第2天细胞数量为200个，则生长速率为100个/天。
统计与比较可以将不同实验组的生长曲线进行比较，分析不同因素对细胞生长的影响。
例如，可以比较不同培养基对细胞生长速率的影响，或者观察不同药物处理下细胞增殖能力的变化。
通过统计学方法（如t检验）可以判断实验组之间是否存在显著差异。
结果与讨论根据实验所得数据和分析结果，可以得出一些结论并进行讨论。
细胞生长曲线绘制
细胞生长曲线绘制
细胞生长是指细胞在生长培养基或其它合适环境下，按照一定的规律进行生长、分裂和增殖，形成生长曲线。
细胞生长曲线是研究细胞生物学、微生物学和生物技术工程等领域中最基本、最重要的曲线之一。
细胞生长曲线的绘制一般分为四个阶段：潜伏期、指数生长期、平台期和死亡期。
在细胞培养中，潜伏期是指细胞在初始阶段适应环境时的生长停滞期，指数生长期是指细胞开始快速增殖的阶段，平台期是指细胞增殖速度逐渐减缓的阶段，死亡期是指细胞数量开始下降的阶段。
细胞生长曲线的绘制需要通过实验数据进行，常用的方法是利用细胞计数法、细胞代谢物质浓度变化法和细胞生长速率法等。
其中，最常用的是细胞计数法，即通过显微镜计算每个单位面积或体积中细胞数量的方法来确定细胞生长曲线。
细胞生长曲线的绘制对于研究细胞生物学、微生物学和生物技术工程等领域具有重要意义，可以帮助人们更好地理解细胞的生长规律、优化培养条件和掌握细胞工程技术。
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细胞生长曲线的测定
（一）细胞生长曲线的测定（细胞计数法）1．取生长良好接近汇合的细胞，用胰酶消化，用新培养基制成细胞悬液后计数(见四、细胞传代培养的实验步骤)。
如是非粘壁细胞，则离心弃旧培养基后，换上一定量的新鲜培养基然后制成细胞悬液计数。
2．根据细胞计数结果按每个小方瓶5×104／mL作传代培养接种细胞，共接种21瓶细胞。
3．24 h后开始计数细胞，以后每隔24 h计数一次，每次取3瓶细胞，分别进行计数。
计算平均值。
连续计数7 d。
4．根据细胞计数结果，以单位细胞数(细胞数／mL)为纵坐标，以时间为横坐标绘制生长曲线。
(细胞计数方法请参照实验三)(二)细胞生长曲线测定(MTT法) 1．制备1 mL细胞悬液。
空白对照以1 mL培养基代替细胞悬液。
加入0．1 mL MTT于37℃孵育4 h。
使MTT还原为蓝紫色甲月赞结晶。
2．加1 mL DTW脱色液，37℃至少静置30 min(甚至过液)，使甲质颗粒充分溶解。
3．吸取200 μL该溶解液至96孔板孔中，在酶标仪上读取OD值，检测波长570 nm，参考波长630 nm。
4．每隔24 h测量一个点，每个点为3个平行样品的平均值。
（二）细胞蛋白电泳一.细胞总蛋白抽提细胞裂解液三去污裂解液:50 mmol/L Tris-cl (pH 8.0)，150 mmol/L NaCl，0.2 g/L叠氮钠，1 g/LSDS，100 mg/L Aprotin，10 g/L NP-40，5 g/L去氧胆酸钠，100 mg/L 苯甲基磺酰氟(PMSF)总蛋白抽提程序：1.PBS洗细胞3 次2.加入裂解缓冲液（1.5x10 6 个细胞大约加入100µL 裂解液，或100ml细胞瓶中加入100µL 裂解液），冰上放置20min3.收集裂解液4.离心，12000转，2~10min5.吸取上清，蛋白定量，分装，保存在-78度备用。
试剂：1. 30% 聚丙烯酰胺：29g 丙烯酰胺，1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺，100ml 水，0.45um 滤膜过滤，棕色瓶，室温保存2. 10% 过硫酸铵：1g 过硫酸铵，10ml 水，4℃保存3. 10% SDS：100g SDS，1000ml 水，68℃助溶，pH 7.24. TEMED：lml TEMED，99ml 水，棕色瓶，4℃保存5. 5X Tirs-甘氨酸电泳缓冲液：15.1g Tirs碱，94g 甘氨酸，50ml 10%SDS，1000ml 水，使用时配制成1X【操作步骤】l.将电泳槽玻璃板洗净，吹干，安装好；2.用1％的琼脂糖电泳缓冲液（1g琼脂糖溶于100ml电泳缓冲液）封严玻璃板的边和底（保证不漏胶）；3.配分离胶，将配好的分离胶立即倒入凝胶槽内，至凝胶槽高三分之二处，加入蒸馏水密封。
细胞生长曲线的测定
细胞生长曲线的测定细胞生长曲线的测定一：背景与原理生长曲线是测定细胞生长数的常用方法，也是判定细胞活力的重要指标，是培养细胞生物学特性的基本参数之一。
一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮后贴壁，随后渡过长短不同的潜伏期，即进入快速生长的指数生长期。
在细胞达到饱和密度后，停止生长，进入平台期，然后退化衰亡。
为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，需连续对细胞进行计数。
通常计数6天。
为精确起见，一般每次实验设3个平行重复。
【晶莱生物】二：材料、试剂与仪器1. 实验材料Hela细胞系。
2. 实验试剂DMEM培养基（青霉素，链霉素，10%血清），0.25%胰蛋白酶溶液，台酚蓝染液。
3. 实验仪器超净工作台，CO2培养箱，倒置显微镜，微量移液器，血细胞计数板，培养瓶，离心管，移液管，废液缸，盖玻片，24孔板。
三：方法与步骤1.取生长良好的细胞，用培养基制成细胞悬液后计数。
根据细胞计数结果按5×104/mL作传代培养接种于24孔板中，共接种21孔细胞。
1 ml/孔。
余下三孔可设传代培养的对照。
2.24h后每天记录细胞数目，每次取3孔细胞，分别进行计数。
计算平均值。
连续计数7d。
细胞用胰酶消化后加入一定量的培养基，混匀制成细胞悬液。
取少量悬液与台酚蓝1:1混合。
取一干净的血细胞计数板，盖上盖片，从盖片两边滴入细胞悬液使之充满计数板和盖片之间。
注意滴液勿有气泡，也不能太多，否则会使盖片浮起而使细胞计数不准。
3.低倍镜下观察，活细胞不着色，台盼蓝着色的细胞呈深蓝色，是不健康或已死亡的细胞，不能计数。
找出计数板上的方格，计算四角大格内总细胞数，压大格线者只计左侧和上方，不计右侧和下方细胞悬液中细胞密度计算公式为：细胞数/mL=（四角大格内细胞数/4）×104×24.根据细胞计数结果，以单位细胞数（细胞数/mL）为纵坐标，以时间为横坐标绘制生长曲线。
实验八计数法绘制动物细胞的生长曲线
生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室
大连理工大学
3.实验材料、用品
• • 实验材料：Hela细胞 用品：
①仪器及用具
环境与生命学院
C02培养箱，倒置显微镜，血球计数板，培养瓶，试管，吸管，
移液管，废液缸，培养细胞，专用盖玻片。
②试剂 培养基（RPMI 1640），小牛血清，Hanks液，0.25%胰蛋白酶
生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室
溶液，0.5%台酚蓝染液。
生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室
大连理工大学
4. 实验步骤
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环境与生命学院
取生长良好接近汇合的细胞，用胰酶消化，用新培养基制成细胞悬液后 计数。如是非贴壁细胞，则离心弃旧培养基后，换上一定量的新鲜培养 基然后制成细胞悬液计数。
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根据细胞计数结果按每个小方瓶5×104/ml。作传代培养接种细胞，共接 种21瓶细胞。
唐颖大连理工大学环境与生命学院生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室掌握血细胞计数板的使用掌握血细胞计数板的使用掌握计数法测定细胞的生长曲线的一般方掌握计数法测定细胞的生长曲线的一般方大连理工大学环境与生命学院生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室典型的细胞生长曲线典型的细胞生长曲线生长曲线常用于生长曲线常用于测定药物等外来因素测定药物等外来因素对细胞生长的影响对细胞生长的影响
生长曲线常用于
测定药物等外来因素
对细胞生长的影响。 一般在对数生长期的 1/3-1/2处加药。细胞
计数的时间和次数则
依实验目的而定。 典型的细胞生长曲线
生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室
实验三 微生物生长曲线的测定(实验相关)
实验三微生物生长曲线的测定一、实验目的目的1、了解细菌生长曲线特点及测定原理2、学习用比浊法测定细菌的生长曲线二、实验原理将少量细菌接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中，在适宜的条件下进行培养，定时测定培养液中的菌量，以菌量的对数作纵坐标，生长时间作横坐标，绘制的曲线叫生长曲线。
它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。
依据其生长速率的不同，一般可把生长曲线分为延缓期、对数期、稳定期和衰亡期。
这四个时期的长短因菌种的遗传性、接种量和培养条件的不同而有所改变。
因此通过测定微生物的生长曲线，可了解各菌的生长规律，对于科研和生产都具有重要的指导意义。
测定微生物的数量有多种不同的方法，可根据要求和实验室条件选用。
本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与光密度（OD值）成正比，因此可利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度，并将所测的OD值与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线，此法快捷、简便。
三、实验材料1、菌种2、培养基：肉膏蛋白胨培养基3、仪器和器具721分光光度计，比色杯，恒温摇床，无菌吸管，试管，三角瓶。
4、流程种子液→标记→接种→培养→测定四、实验步骤1、种子液制备取细菌菌种1支，以无菌操作挑取1环菌液，接入肉膏蛋白胨培养液中，培养18h作种子培养液。
2、标记编号取盛有30mL无菌肉膏蛋白胨培养液的三角瓶6个，分别编号为0、4、8、12、16、2 0。
3、接种培养用2mL无菌吸管分别准确吸取1mL种子液加入已编号的6个三角瓶中，于37℃下振荡培养。
然后分别按对应时间将三角瓶取出测定OD值。
4、生长量测定将未接种的肉膏蛋白胨培养基倾倒入比色杯中，选用600nm波长分光光度计上调节零点，作为空白对照，并对不同时间培养液从0h起依次进行测定，对浓度大的菌悬液用未接种的牛肉膏蛋白胨液体培养基适当稀释后测定，使其OD值在0.10.～0.65以内，经稀释后测得的OD值要乘以稀释倍数，才是培养液实际的OD值。
细胞生长曲线的测定
细胞生长曲线的测定（一）细胞生长曲线的测定（细胞计数法）1．取生长良好接近汇合的细胞，用胰酶消化，用新培养基制成细胞悬液后计数(见四、细胞传代培养的实验步骤)。
如是非粘壁细胞，则离心弃旧培养基后，换上一定量的新鲜培养基然后制成细胞悬液计数。
2．根据细胞计数结果按每个小方瓶5×104／mL作传代培养接种细胞，共接种21瓶细胞。
3．24 h后开始计数细胞，以后每隔24 h计数一次，每次取3瓶细胞，分别进行计数。
计算平均值。
连续计数7 d。
4．根据细胞计数结果，以单位细胞数(细胞数／mL)为纵坐标，以时间为横坐标绘制生长曲线。
(细胞计数方法请参照实验三)(二)细胞生长曲线测定(MTT法) 1．制备1 mL细胞悬液。
空白对照以1 mL培养基代替细胞悬液。
加入0．1 mL MTT于37℃孵育4 h。
使MTT还原为蓝紫色甲月赞结晶。
2．加1 mL DTW脱色液，37℃至少静置30 min(甚至过液)，使甲质颗粒充分溶解。
3．吸取200 μL该溶解液至96孔板孔中，在酶标仪上读取OD 值，检测波长570 nm，参考波长630 nm。
4．每隔24 h测量一个点，每个点为3个平行样品的平均值。
（二）细胞蛋白电泳一.细胞总蛋白抽提细胞裂解液三去污裂解液:50 mmol/L Tris-cl (pH 8.0)，150 mmol/L NaCl，0.2 g/L叠氮钠，1 g/LSDS，100 mg/L Aprotin，10 g/L NP-40，5 g/L去氧胆酸钠，100 mg/L 苯甲基磺酰氟(PMSF)总蛋白抽提程序：1.PBS洗细胞3 次2.加入裂解缓冲液（1.5x10 6 个细胞大约加入100μL 裂解液，或100ml细胞瓶中加入100μL 裂解液），冰上放置20min3.收集裂解液4.离心，12000转，2~10min5.吸取上清，蛋白定量，分装，保存在-78度备用。
试剂：1. 30% 聚丙烯酰胺：29g 丙烯酰胺，1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺，100ml 水，0.45um 滤膜过滤，棕色瓶，室温保存2. 10% 过硫酸铵：1g 过硫酸铵，10ml 水，4℃保存3. 10% SDS：100g SDS，1000ml 水，68℃助溶，pH 7.24. TEMED：lml TEMED，99ml 水，棕色瓶，4℃保存5. 5X Tirs-甘氨酸电泳缓冲液：15.1g Tirs碱，94g 甘氨酸，50ml 10%SDS，1000ml 水，使用时配制成1X【操作步骤】l.将电泳槽玻璃板洗净，吹干，安装好；2.用1％的琼脂糖电泳缓冲液（1g琼脂糖溶于100ml电泳缓冲液）封严玻璃板的边和底（保证不漏胶）；3.配分离胶，将配好的分离胶立即倒入凝胶槽内，至凝胶槽高三分之二处，加入蒸馏水密封。
生长曲线实验报告
生长曲线实验报告生长曲线实验报告引言：生长曲线实验是生物学中常见的实验之一，通过观察和记录生物体在不同时间点的生长情况，可以得出生物体的生长曲线。
本实验旨在通过观察小麦种子在一段时间内的生长情况，探讨生物体的生长规律。
实验材料和方法：实验所用材料包括小麦种子、培养皿、水、土壤和测量工具。
首先，将小麦种子均匀地撒在培养皿中，然后加入适量的水和土壤。
接下来，将培养皿放置在适宜的环境条件下，如温度适宜、光照充足的室内。
在实验过程中，每隔一段时间，使用测量工具对小麦的生长情况进行测量和记录。
实验结果和分析：在实验过程中，我们观察到小麦种子开始发芽，并逐渐生长成苗。
通过对不同时间点的测量数据进行整理和分析，我们得到了小麦的生长曲线。
初始阶段，小麦种子刚开始发芽，幼苗生长速度较慢。
此时，小麦的生长曲线呈现出一个平缓的上升趋势。
随着时间的推移，小麦的生长速度逐渐加快，生长曲线开始呈现出一个急剧上升的趋势。
这是因为小麦苗的根系逐渐扩展，吸收到更多的水分和养分，从而促进了植物体的生长。
然而，随着时间的继续推移，小麦的生长速度逐渐减缓，生长曲线开始趋于平缓。
这是因为小麦的生长到达了一个饱和状态，养分和水分的吸收速度与消耗速度达到了平衡。
此时，小麦的生长曲线呈现出一个平稳的水平趋势。
结论：通过本实验，我们得出了小麦的生长曲线，从而揭示了小麦在不同时间点的生长规律。
小麦的生长曲线呈现出一个平缓上升、急剧上升和平稳水平的趋势。
这说明小麦的生长速度在不同阶段有所差异，最终趋于稳定。
生长曲线实验不仅可以用于研究植物的生长规律，还可以应用于其他生物体的生长研究。
通过观察和记录生物体的生长情况，我们可以更好地了解生物体的生长过程，为农业生产和生物科学研究提供有益的参考。
总结：生长曲线实验是一种常见的生物学实验方法，通过观察和记录生物体的生长情况，可以得出生物体的生长曲线。
本实验以小麦种子为例，通过测量和记录小麦的生长情况，得出了小麦的生长曲线。
细胞生长曲线的绘制及注意事项
细胞生长曲线的绘制及注意事项1.取对数生长期细胞，用胰酶消化收集，调整单细胞悬液密度为104~105个/mL视细胞贴壁后的大小，倍增时间等因素确定接种密度。
按200μl/孔（1×104个细胞）接种于96孔培养板内，每组细胞接种5个孔，取平均值，切记各孔的接种密度一致。
2.置37℃、5％CO2气相和饱和湿度的CO2培养箱中培养，3.用PBS配制5mg/ml的MTT溶液，微膜过滤除菌，4度保存。
(MTT溶剂需避光4度保存，配好的溶剂有效期两周，过期的不能再用于实验，须重配)4.从第24 h开始，每隔24 h随机取1块96孔板，96孔板每孔加入20μl 5mg/mL MTT 液，继续培养4 h后，吸出孔内培养液；向每孔加入150μl DMSO。
将培养板置于微孔板振荡器上振荡10 min，使结晶物溶解。
5.酶联免疫检测仪检测各孔OD值，检测波长570 nm, 以时间为横坐标，平均OD值为纵坐标，记录并绘制细胞生长曲线。
备注：A.选择适当的细胞接种浓度。
因此，在进行MTT试验前，对每一种细胞都应测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，然后确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止时不致细胞过满。
这样，才能保证MTT结晶形成的量与细胞数呈良好的线性关系。
B.细胞生长曲线方法96孔板太小,接种细胞多时,用不了几天就长满,因一般要做5-7天);接种细胞少时,不易养活.C.避免血清干扰。
用含15%胎牛血清培养液培养细胞时，高浓度的血清物质会影响试验孔的吸光值。
由于试验本底增加，会降低试验敏感性。
因此，一般选小于10%胎牛血清的培养液进行试验。
在呈色后，尽量吸净培养孔内残余培养液。
D.操作过程中按常规换液.一般2-3天换液,如果不换液,则酸性产物等代谢产物积聚,一方面培养环境改变影响细胞生长,另一方面细胞营养消耗过多,生长变慢.做细胞生长曲线的目的是反映其生长特性,增殖能力,不换液则与我们平时细胞生长环境不一致.结果不科学.E.实验时应设置调零孔，对照孔，加药孔。
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细胞生长曲线的绘制实验报告
篇一：实验五微生物生长量的测定及生长曲线的绘制
一、实验目的
学习了解微生物生长量测定的方法
学习了解细菌生长曲线的绘制方法
学习掌握血细胞计数板的使用方法
微生物生长量的测定
计数法重量法生理指标法
1、显微镜直接计数法
利用血细胞计数板计数
涂片计数
2、活菌菌落计数法
3、滤膜法
细菌生长曲线
将单细胞细菌接种到恒定容积的液体培养基中，不补充营养物或移去培养物，细菌以二分裂方式繁殖，以时间为横坐标，细菌数目的对数值为纵坐标，可画出一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线，称为生长曲线
篇二：细胞生长曲线的测定
细胞生长曲线的测定
一、实验目的
掌握测定细胞生长曲线的方法。
二、实验器具
24孔细胞培养板、微量加样器、eppendorf管、吸头、吸头盒、显微镜、细胞计数板、载玻片、盖玻片、吸管、试管架、普通显微镜、细胞悬液、0.4%台盼蓝。
三、实验方法
1. 培养细胞：首先在24孔细胞培养板内分别接种相同数量的细胞，计数并记录接种的细胞悬液密度，接种时间记为0小时。
2. 计数细胞密度：从接种时间算起，每隔24小时计数3孔的细胞密度，算出平均值。
为提高准确率，对每孔细胞可计数2-3次，如此操作至第七天结束。
3. 绘制曲线：以培养时间为横坐标、细胞密度为纵坐标，将全部结果在坐标纸上绘图，即得所培养细胞的生长曲线。
篇三：MTT法绘制生长曲线
实验材料：
1，5%FBS-L-DMEM, 5x104个/ml细胞悬液，5mg/mlMTT溶液，DMSO,0.01M PBS,2, 96孔板共7个,酶标仪,50ml离心管，1.5ml离心管，0.22μm滤膜，锡箔纸，MTT工作液
实验步骤：
1，分别选取生长良好的P1、P3、P5代BMSCs消化后制备成细胞悬液，调整细胞密度为5x104/ml。
接种到96孔板，每孔接种200μl 细胞悬液进行培养。
2，培养16-48后，每天选择6个培养孔各自加入MTT溶液20μl，37℃继续孵育。
3，孵育4h后终止培养，吸出孔内上清，此时应该倾斜96孔板，用枪头小心的将上清液吸去，不可吸去下面的结晶颗粒，慢慢吸去。
每孔加入150μlDMSO,室温振荡10min，使结晶充分溶解，于试验孔平行设不加细胞只加培养液的空白对照1孔。
注意事项：
【1】 1, 两种方法分离小型猪骨髓间充质干细胞的比较
分别取两组0,1,3代细胞，制成1x103的细胞悬液，接种到96孔板，每孔细胞悬液200微升，置37℃、5%CO2饱和湿度孵箱内孵育，各组每24小时分别取出4孔，每孔加入MTT20微升 37℃孵育，4h 后吸弃孔内培养液，每孔加入150微升分析纯的二甲基亚砜，移至酶联免疫检测仪上振荡10min,用分光光度计在492nm波长处测定每孔的吸光度值，以OD(492)值为纵坐标，时间为横坐标绘制生长曲线【2】来自：SD大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养的实验研究大鼠MSCs生长曲线测定：为了定量测定大鼠BMSCs的生长状况，对来源于同一动物的原代细胞进行连续培养。
分别选取生长良好的P1、P3、P5代BMSCs消化后制备成细胞悬液，调整细胞密度为5x104/ml。
接种到96孔板，每孔接种200μl细胞悬液进行培养。
次日起每天选择6个培养孔各自加入MTT溶液20μl，37℃继续孵育4h 后终止培养，吸出孔内上清，每孔加入150μlDMSO,室温振荡10min，使结晶充分溶解，于试验孔平行设不加细胞只加培养液的空白对照1
孔。
在酶标仪上选择570nm波长，以空白孔调零，测定各孔吸光度值，连续测7天，以时间为横轴，A值为纵轴绘制细胞生长曲线。
细胞生长曲线的绘制实验报告范文。