常用荧光染料激发信息
cy系列染料激发发射波长
cy系列染料激发发射波长现代生物学和生物医学研究中经常会使用荧光染料来标记和观察细胞和分子。
其中,CY系列染料是一类常用的荧光染料,具有广泛的应用范围。
本文将介绍CY系列染料的基本原理、激发发射波长及其在生物学研究中的应用。
CY系列染料是一类由屡次修饰的硫氰酸衍生物构成的化合物。
在CY系列染料中,CY2、CY3、CY5和CY7是最为常见的四种荧光标记。
它们具有不同的激发和发射波长,可用于不同范围的荧光检测。
CY2是一种比较新的荧光染料,其激发波长为488纳米,发射波长为510纳米。
由于其光谱特性与FITC类似,可以作为其替代品使用,用于观察融合蛋白、蛋白表达和细胞追踪。
CY3是一种常用的红色荧光染料,其激发波长为550纳米,发射波长为570纳米。
CY3被广泛应用于细胞和分子研究中,可用于免疫组织化学、原位杂交、蛋白质定位和荧光原位PCR等。
CY5也是一种红色荧光染料,其激发波长为649纳米,发射波长为670纳米。
CY5具有较长的发射波长,可用于多色荧光共聚焦显微镜分析、分子探针和高灵敏度测定等领域。
CY7是CY系列中最红的荧光染料,激发波长为743纳米,发射波长为767纳米。
CY7的特点是具有极高的光稳定性和明亮的荧光强度,常应用于近红外区域的光学成像、分子探针和荧光定量等实验中。
CY系列染料的应用非常广泛。
它们可用于细胞和分子标记、免疫组织化学、蛋白质检测和定位、荧光原位PCR、流式细胞术、荧光定量等实验中。
此外,由于CY系列染料的光稳定性和亮度较高,也逐渐被用于活体动物的近红外区域光学成像研究。
虽然CY系列染料在生物学研究中起到了重要的作用,但也存在一些缺点。
首先,CY系列染料的荧光强度受到化学结构和环境的影响,这可能导致不同实验中的荧光信号差异。
其次,CY系列染料由于分子结构以及与生物样品的相互作用,容易受到光灭和荧光淬灭等现象的影响,损失荧光信号。
总的来说,CY系列染料是一类常用的荧光染料,具有多种激发和发射波长可供选择,适应不同的实验需求。
rbitc激发波长和发射波长
rbitc激发波长和发射波长
rbitc是一种荧光染料,常用于生物学和医学领域中的荧光显微镜和流式细胞仪等实验中。
在这些实验中,rbitc的激发波长和发射波长是非常重要的参数,因为它们直接影响到实验结果的准确性和可靠性。
rbitc的激发波长通常为550纳米左右,而发射波长则为590纳米左右。
这意味着当rbitc受到550纳米左右的激发波长时,它会发出590纳米左右的荧光信号。
这个过程被称为荧光共振能量转移(FRET),它是一种非常重要的生物学现象,可以用来研究蛋白质相互作用、细胞信号传导等生物学过程。
在实验中,选择合适的激发波长和发射波长非常重要。
如果激发波长太低或太高,可能会导致rbitc无法被激发或者荧光信号过弱。
同样,如果发射波长太低或太高,可能会导致荧光信号被其他物质吸收或者干扰。
因此,选择合适的波长可以最大限度地提高实验的准确性和可靠性。
除了激发波长和发射波长之外,rbitc的荧光强度也是一个重要的参数。
荧光强度越高,说明rbitc的荧光信号越强,可以更容易地被检测到。
因此,在实验中,通常会选择荧光强度较高的rbitc染料,以提高实验的灵敏度和准确性。
rbitc的激发波长和发射波长是非常重要的参数,可以直接影响到实验结果的准确性和可靠性。
在实验中,选择合适的波长和荧光强度可以最大限度地提高实验的灵敏度和准确性,从而得到更加可靠的实验结果。
常用染料的激发与发射
常用染料的激发与发射 Company Document number:WUUT-WUUY-WBBGB-BWYTT-1982GT常用荧光染料的激发和发射波长荧光染料的使用吖啶橙:吖啶橙是最经典的灵敏的荧光染料,它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光,DNA呈绿色荧光,RNA呈橙红色荧光。
EB:染色DNA和RNA 荧光素双醋酸酯(FDA):FAD本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜。
一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生具有荧光的极性物质荧光素。
它不能自由出入原生质膜,因此有活力的细胞能产生荧光,无活力的原生质体不能分解FAD无荧光产生。
5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用时取贮存液加入L甘露醇中.使用时,使最终浓度为%。
荧光染料Ho33342和若丹明123:活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。
一般的生物染料不能穿透细胞膜,只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性,染料才能进入细胞内。
但有些活体染料能进入活细胞,并对细胞不产生毒性作用。
荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。
Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合,若丹明123能与线粒体进行特异的结合。
采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。
荧光组化实验中应注意的几个问题:1.每种荧光染料,均有自己的最适PH值,此时荧光最强。
当pH改变时,不仅荧光强度减弱,而且波长将有所改变,因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。
2.一放荧光染色在20℃以下时荧光比较稳定,温度升高常出现温度猝灭。
3.在荧光观察中,常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭,造成观察和照相困难。
为此最好用能量小的长波长光进行观察,需照相时再适当增强激发光。
4.一般荧光染液的浓度在万分之一以下,甚至亿万分之一,也能使标本着色。
在一定的限度内,荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强,但超过限度,荧光强度反而下降,这是由于荧光分子间的缔合而使自身荧光猝灭所致。
常用染料的激发与发射
常用荧光染料的激发和发射波长
备注:发射波长的颜色及频率
荧光染料的使用
吖啶橙:吖啶橙是最经典的灵敏的荧光染料,它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光,DNA呈绿色荧光,RNA呈橙红色荧光;EB:染色DNA和RNA荧光素双醋酸酯FDA:FAD本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜;一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生具有荧光的极性物质荧光素;它不能自由出入原生质膜,因此有活力的细胞能产生荧光,无活力的原生质体不能分解FAD无荧光产生;5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用时取贮存液加入L甘露醇中.使用时,使最终浓度为%;荧光染料Ho33342和若丹明123:活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体;一般的生物染料不能穿透细胞膜,只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性,染料才能进入细胞内;但有些活体染料能进入活细胞,并对细胞不产生毒性作用;荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料;Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合,若丹明123能与线粒体进行特异的结合;采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色;
荧光组化实验中应注意的几个问题:1.每种荧光染料,均有自己的最适PH值,此时荧光最强;当pH改变时,不仅荧光强度减弱,而且波长将有所改变,因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行;2.一放荧光染色在20℃以下时荧光比较稳定,温度升高常出现温度猝灭;3.在荧光观察中,常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭,造成观察和照相困难;为此最好用能量小的长波长光进行观察,需照相时再适当增强激发光;4.一般荧光染液的浓度在万分之一以下,甚至亿万分之一,也能使标本着色;在一定的限度内,荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强,但超过限度,荧光强度反而下降,
这是由于荧光分子间的缔合而使自身荧光猝灭所致;。
常用染料的激发与发射
常用荧光染料的激发和发射波长备注:发射波长的颜色及频率荧光染料的使用吖啶橙:吖啶橙是最经典的灵敏的荧光染料,它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光,DNA呈绿色荧光,RNA呈橙红色荧光。
EB:染色DNA和RNA 荧光素双醋酸酯(FDA):FAD本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜。
一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生具有荧光的极性物质荧光素。
它不能自由出入原生质膜,因此有活力的细胞能产生荧光,无活力的原生质体不能分解FAD无荧光产生。
5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用时取贮存液加入L甘露醇中.使用时,使最终浓度为%。
荧光染料Ho33342和若丹明123:活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。
一般的生物染料不能穿透细胞膜,只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性,染料才能进入细胞内。
但有些活体染料能进入活细胞,并对细胞不产生毒性作用。
荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。
Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合,若丹明123能与线粒体进行特异的结合。
采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。
荧光组化实验中应注意的几个问题:1.每种荧光染料,均有自己的最适PH值,此时荧光最强。
当pH改变时,不仅荧光强度减弱,而且波长将有所改变,因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。
2.一放荧光染色在20℃以下时荧光比较稳定,温度升高常出现温度猝灭。
3.在荧光观察中,常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭,造成观察和照相困难。
为此最好用能量小的长波长光进行观察,需照相时再适当增强激发光。
4.一般荧光染液的浓度在万分之一以下,甚至亿万分之一,也能使标本着色。
在一定的限度内,荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强,但超过限度,荧光强度反而下降,这是由于荧光分子间的缔合而使自身荧光猝灭所致。
cy3.5激发波长和发射波长
CY3.5标记的激发波长和发射波长是细胞荧光染料领域中的重要参数。
在细胞和分子生物学研究中,荧光染料被广泛应用于细胞成像、蛋白质检测、细胞追踪等领域。
CY3.5作为一种常用的荧光染料,其激发波长和发射波长的选择对于实验结果的准确性和可靠性具有重要意义。
1. CY3.5激发波长CY3.5的激发波长一般在550-570nm范围内。
在进行细胞成像或蛋白质检测实验时,我们需要选择适合的激发波长来激发CY3.5荧光染料。
激发波长的选择应考虑到激发效率和对样品的影响。
在实际操作中,我们可以通过激光共聚焦显微镜等设备来选择合适的激发波长,以确保CY3.5荧光的最大激发效果。
还需要注意避免激发波长对细胞和样品产生的热伤害,保证实验结果的准确性。
2. CY3.5发射波长CY3.5的发射波长一般在570-590nm范围内。
选择适当的发射波长可以有效提取荧光信号,从而获得清晰的细胞成像或蛋白质定位结果。
在实验设计中,我们需要根据实际情况选择合适的检测设备和滤光片,以确保有效捕获CY3.5的发射信号。
3. CY3.5激发波长和发射波长的选择意义CY3.5荧光染料作为一种重要的细胞标记物,其激发波长和发射波长的选择直接影响了实验结果的精准度和可靠性。
合理选择激发波长和发射波长可以最大程度地提高CY3.5荧光信号的强度和稳定性,为细胞成像和蛋白质检测提供可靠的数据支持。
个人观点和理解在进行生物荧光实验时,合理选择CY3.5的激发波长和发射波长是非常重要的。
这不仅关系到实验结果的准确性,也关系到对细胞和样品的保护。
对于CY3.5激发波长和发射波长的选择,我们需要深入了解其光学特性和实验条件,以确保实验结果的可靠性。
总结回顾通过本文的介绍,我们了解到CY3.5荧光染料的激发波长和发射波长选择对于生物荧光实验具有重要意义。
合理选择激发波长和发射波长可以有效提高荧光信号的稳定性和强度,从而获得清晰可靠的实验结果。
在进行类似实验时,我们应该注意选择合适的光学设备和滤光片,以确保CY3.5荧光信号的最佳表现。
常用染料的激发与发射
常用染料的激发与发射公司内部编号:(GOOD-TMMT-MMUT-UUPTY-UUYY-DTTI-常用荧光染料的激发和发射波长荧光染料的使用吖啶橙:吖啶橙是最经典的灵敏的荧光染料,它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光,DNA呈绿色荧光,RNA呈橙红色荧光。
EB:染色DNA和RNA荧光素双醋酸酯(FDA):FAD本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜。
一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生具有荧光的极性物质荧光素。
它不能自由出入原生质膜,因此有活力的细胞能产生荧光,无活力的原生质体不能分解FAD无荧光产生。
5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用时取贮存液加入L 甘露醇中.使用时,使最终浓度为%。
荧光染料Ho33342和若丹明123:活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。
一般的生物染料不能穿透细胞膜,只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性,染料才能进入细胞内。
但有些活体染料能进入活细胞,并对细胞不产生毒性作用。
荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。
Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合,若丹明123能与线粒体进行特异的结合。
采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。
荧光组化实验中应注意的几个问题:1.每种荧光染料,均有自己的最适PH值,此时荧光最强。
当pH改变时,不仅荧光强度减弱,而且波长将有所改变,因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。
2.一放荧光染色在20℃以下时荧光比较稳定,温度升高常出现温度猝灭。
3.在荧光观察中,常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭,造成观察和照相困难。
为此最好用能量小的长波长光进行观察,需照相时再适当增强激发光。
4.一般荧光染液的浓度在万分之一以下,甚至亿万分之一,也能使标本着色。
在一定的限度内,荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强,但超过限度,荧光强度反而下降,这是由于荧光分子间的缔合而使自身荧光猝灭所致。
常用荧光染料的激发及发射波长
492
518
5-Carboxynapthofluorescein (pH 10)
512/598 563/668 Ratio Dye, pH
5-Carboxytetramethylrhodamine (5-TAMRA) 542
568
5-FAM (5-Carboxyfluorescein)
492
518
5-HAT (Hydroxy Tryptamine)
Anilin Blue Anthrocyl stearate APC (Allophycocyanin) APC-Cy7 APTRA-BTC = Ratio Dye, Zn2+ APTS Astrazon Brilliant Red 4G Astrazon Orange R Astrazon Red 6B Astrazon Yellow 7 GLL Atabrine ATTO-TAG™ CBQCA ATTO-TAG™ FQ Auramine Aurophosphine G Aurophosphine BAO 9 (Bisaminophenyloxadiazole) BCECF (high pH) BCECF (low pH) Berberine Sulphate Beta Lactamase BFP blue shifted GFP (Y66H)
荧光素名称
激发波长 发射波长 备注 (nm) (nm)
1,5 IAEDANS
336
490
1,8-ANS
372
480
4-Methylumbelliferone
385
502
5-carboxy-2,7-dichlorofluorescein
504
529
pb450荧光染料激发波长
pb450荧光染料激发波长PB450荧光染料激发波长PB450荧光染料是一种常用的荧光染料,它具有较高的荧光强度和较长的荧光寿命。
它的激发波长为450纳米,是一种蓝色荧光染料。
荧光染料是一种能够吸收特定波长的光并发射出较长波长的光的物质。
PB450荧光染料的激发波长为450纳米,意味着它能够吸收波长为450纳米的光。
当PB450荧光染料吸收到450纳米的光时,其分子将从基态跃迁到激发态。
随后,分子会经历非辐射跃迁,即内部转换过程,从而发射出较长波长的荧光光子。
PB450荧光染料的激发波长为450纳米,使得它在实验室和工业应用中具有广泛的用途。
例如,在细胞和分子生物学中,研究人员经常使用荧光染料来标记和可视化细胞或分子的位置和活动。
PB450荧光染料的蓝色荧光可以通过显微镜观察,为研究人员提供有关细胞结构和功能的重要信息。
PB450荧光染料的激发波长为450纳米,也使得它在荧光光谱分析中有着重要的应用。
荧光光谱分析是一种测量荧光染料发射光谱的技术,通过测量荧光强度随波长的变化,可以得到荧光染料的发射光谱。
PB450荧光染料的激发波长为450纳米,可以用来激发该染料,并测量其发射光谱。
通过分析发射光谱,研究人员可以了解荧光染料的特性,如荧光强度、荧光寿命等,从而为进一步的研究提供重要的参考。
除了在生命科学和分析化学领域的应用外,PB450荧光染料的激发波长为450纳米还可以用于光电子学和光催化等领域。
在光电子学中,荧光染料可以作为发光材料用于制造发光二极管(LED)等光电器件。
PB450荧光染料的蓝色荧光可以用于制造蓝光LED,为显示器和照明设备提供蓝色光源。
在光催化领域,荧光染料可以作为光敏剂用于光催化反应。
PB450荧光染料的激发波长为450纳米,可以用于激发该染料参与光催化反应,从而实现一系列的光化学转化。
PB450荧光染料是一种具有较高荧光强度和较长荧光寿命的荧光染料。
其激发波长为450纳米,可以被用于各种实验室和工业应用中。
dox的荧光激发光谱
dox的荧光激发光谱
Dox是一种常用的荧光染料,其荧光特性是研究者广泛关注的热点。
下面将从荧光激发光谱的角度来介绍Dox的荧光性质。
一、荧光激发光谱
荧光激发光谱是指在给定的激发波长下,样品中荧光分子吸收激发光
产生荧光的过程中,所记录到的荧光强度与激发波长之间的关系。
对
于Dox而言,其荧光激发光谱通常在330~480nm之间,最大吸收波长
约为480nm,荧光峰位于585~595nm之间。
二、影响荧光激发光谱的因素
1. 激发波长:激发波长对荧光激发光谱有直接影响。
在Dox的激发光
谱中,随着激发波长的增大,荧光峰的强度也会随之增强。
2. 温度:荧光激发光谱的峰值位置和强度受温度的影响较大。
一般来说,随着温度的升高,荧光峰位置会向更短波长方向移动,峰强度也
会显著降低。
3. pH值:荧光染料的pH值对其荧光光谱也有较大影响。
对于Dox来说,在pH不同的缓冲液中,其荧光峰位置有所变化,且峰值也会受到pH值的影响而有所变化。
三、应用前景
Dox在生物医学领域有着广泛的应用,如用于癌症药物治疗等。
荧光激发光谱的研究可为Dox的生物应用提供基础数据支持,有助于更好地了解其在体内的行为与药效,同时也可以加深对荧光染料的理解,为荧光染料的设计与开发提供依据。
综上所述,Dox的荧光激发光谱是一个重要且复杂的研究课题,其相关性质受到多种因素的影响。
研究者在以后的工作中需要充分考虑上述因素,以获得更为准确的研究结果。
常用荧光染料的激发和发射波长
常用荧光染料的激发和发射波长荧光染料广泛应用于生物医学、材料科学、光电子学等领域,其特点是在受到激发后会发出可见光,具有较高的荧光量子产率和灵敏度。
在实际应用中,荧光染料的激发和发射波长显得尤为重要,因此本文将整理常用荧光染料的激发和发射波长,方便读者在实验或研究中的选择。
常用荧光染料1. FITC (荧光同型素-异硫氰酸酯)FITC是一种广泛应用于生物学实验的荧光染料,常用于标记蛋白质、抗体、药物等分子,其最大吸收波长和最大发射波长分别为495 nm和519 nm。
FITC的分子量小,荧光量子产率高,这使得它成为一种理想的荧光标记分子。
2. Rhodamine 123Rhodamine 123是一种阳离子荧光染料,可在细胞中标记线粒体,同时也可在许多生物学应用中标定其他细胞器。
Rhodamine 123的最大吸收波长和最大发射波长分别为507 nm和529 nm,其荧光量子产率高,荧光亮度高。
3. Texas RedTexas Red是一种常用的激发波长长达596 nm的荧光染料,在荧光共振能量转移等实验中被广泛应用。
Texas Red的最大发射波长在610 nm左右,其在荧光共振能量转移实验中能够提供强烈的荧光标记。
4. PE (腺苷酸酰基酯)PE是一种被广泛用于流式细胞仪实验中的荧光染料,其最大激发波长为488 nm,最大发射波长在575 nm左右。
PE作为一种非常亮的荧光染料,可用于标记和鉴定特定类型的细胞。
荧光染料的选择在实验或研究中,需要根据具体的情况选择合适的荧光染料。
对于激发波长和发射波长的选择,一些因素应该被考虑,如:•研究对象的荧光信号贡献;•其他染料的交叉激发和发射波长;•激发和发射波长的设备可用范围。
一般来说,应选择滤光片相对集中并且有较高吸收的荧光染料,以确保设备需要的能量和检测返回信号的量达到最大程度。
总结本文简要介绍了几种常用的荧光染料及其特性,这些荧光染料可以分别从不同角度用于生物学、光学、材料学等领域的研究和实验中。
sybr gold激发波长和发射波长
sybr gold是一种常用的荧光染料,广泛应用于生物医学研究、生物工程领域。
sybr gold的激发波长和发射波长对于其在实验中的应用至关重要,下面我们将对sybr gold的激发波长和发射波长进行详细的解读。
一、sybr gold的激发波长1.1 sybr gold是一种DNA染料,其激发波长在约495纳米至505纳米之间。
在这一范围内的光波作用下,sybr gold分子会发生能级跃迁,从而激发出荧光信号。
1.2 由于sybr gold的激发波长较窄,在进行实验时需要选择合适的激发光源,以确保sybr gold能够充分受激发并发出荧光信号。
1.3 实验中常用的激发光源包括紫外光、蓝光等,研究人员可以根据实验需求选择合适的激发光源来激活sybr gold。
1.4 正确的激发波长对于实验结果的准确性和可重复性具有重要意义,因此在进行实验前需要对激发波长进行严格的控制和调节。
二、sybr gold的发射波长2.1 sybr gold的发射波长在约520纳米至530纳米之间,当受到激发光源激发后,sybr gold分子会发出这一范围内的荧光信号。
2.2 发射波长的测定可以通过荧光分光光度计等专业仪器进行,研究人员可以根据实验需求对sybr gold的发射波长进行精确测定。
2.3 sybr gold的发射波长是衡量其荧光强度和稳定性的重要指标,研究人员在选择sybr gold作为实验染料时需要对其发射波长进行充分的了解和考量。
2.4 合理的发射波长选择能够提高实验结果的准确性和可靠性,因此在实验设计中需要充分考虑sybr gold的发射波长及其特性。
三、sybr gold激发波长和发射波长的匹配3.1 sybr gold的激发波长和发射波长的匹配关系直接影响着其在实验中的应用效果,研究人员需要对此进行深入的研究和探讨。
3.2 当激发波长与sybr gold的激发波长匹配良好时,sybr gold分子会受到充分激发并发出较强的荧光信号,从而提高实验结果的灵敏度和准确性。
常用染料的激发与发射
常用染料的激发与发射 IMB standardization office【IMB 5AB- IMBK 08- IMB 2C】常用荧光染料的激发和发射波长荧光染料的使用吖啶橙:吖啶橙是最经典的灵敏的荧光染料,它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光,DNA呈绿色荧光,RNA呈橙红色荧光。
EB:染色DNA和RNA荧光素双醋酸酯(FDA):FAD?本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜。
一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生具有荧光的极性物质荧光素。
它不能自由出入原生质膜,因此有活力的细胞能产生荧光,无活力的原生质体不能分解FAD无荧光产生。
5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用时取贮存液加入L甘露醇中.使用时,使最终浓度为%。
荧光染料Ho33342和若丹明123:活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。
一般的生物染料不能穿透细胞膜,只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性,染料才能进入细胞内。
但有些活体染料能进入活细胞,并对细胞不产生毒性作用。
荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。
Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合,若丹明123能与线粒体进行特异的结合。
采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。
荧光组化实验中应注意的几个问题:1.每种荧光染料,均有自己的最适PH值,此时荧光最强。
当pH改变时,不仅荧光强度减弱,而且波长将有所改变,因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。
2.一放荧光染色在20℃以下时荧光比较稳定,温度升高常出现温度猝灭。
3.在荧光观察中,常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭,造成观察和照相困难。
为此最好用能量小的长波长光进行观察,需照相时再适当增强激发光。
4.一般荧光染液的浓度在万分之一以下,甚至亿万分之一,也能使标本着色。
在一定的限度内,荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强,但超过限度,荧光强度反而下降,这是由于荧光分子间的缔合而使自身荧光猝灭所致。