粪便钙卫蛋白检测试剂盒说明书-中文
钙测定试剂盒(偶氮砷 III 法)产品技术要求haifeng
钙测定试剂盒(偶氮砷 III 法)
适用范围:本产品适用于体外定量测定人血清中的钙含量。
1.1 产品规格
1.2 主要组成成分
2.1外观
2.1.1试剂盒标签标识清晰,外包装完整无破损;
2.1.2试剂为紫红色液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
2.2净含量
净含量不低于标示值。
2.3空白吸光度
在主波长660nm、副波长750nm、37℃条件下:试剂空白吸光度A≤0.5。
2.4线性范围
[1.0,4.0]mmol/l范围内,线性相关系数r≥0.990,相对偏差不超过±10.0%。
2.5分析灵敏度
在产品说明书规定参数设定条件下,浓度为2.5mmol/L时,吸光度变化△A≥0.30。
2.6 精密度
2.6.1批内重复性
CV≤3.0%。
2.6.2批间差
相对极差R≤5.0%。
2.7 准确度
测定参考物质GBW09152,测定结果应不超过标称值的±5%。
2.8 稳定性
未开封试剂2℃~8℃储存,有效期为12个月。
取到效期后2个月内产品进行检测, 检测结果应满足2.4和2.7的规定。
钙卫蛋白测定试剂盒(胶体金免疫层析法)产品技术要求meikang
钙卫蛋白测定试剂盒(胶体金免疫层析法)
适用范围:与南京美xx诚生物科技有限公司生产的胶体金免疫层析分析仪配套使用,用于体外定量测定人粪便中钙卫蛋白的含量。
1.1规格:20人份/盒;100人份/盒。
1.2主要组成成分:
2.1外观
2.1.1试剂盒外包装完整无破损,试剂盒内容物齐全,各类标签、标识清晰无误。
检测卡外观干净无污渍,试纸条放置平整无偏移。
2.1.2 试纸条宽度为4mm±0.2mm;
2.1.3 液体移行速度应不低于10mm/min。
2.2 空白限
空白限≤10 μg/g。
2.3线性
2.3.1 在[30,600]μg/g的线性范围内,线性相关系数r≥0.9900;
2.3.2在[30,200]μg/g范围内绝对偏差为±25μg/g,在(200,600]μg/g范围内相对偏差为±15%。
2.4 准确度
回收率为85%~115%。
2.5 精密度
2.5.1批内差:同一批号产品重复测试高低浓度的样本,所得结果的变异系数CV≤10%。
2.5.2批间差:3个不同批号产品分别测试样本,所得结果的批间相对极差R≤10%。
2.6 稳定性
本产品有效期为12个月,取至效期后三个月内的产品,分别检测2.2~2.4、2.5.1项,其结果应符合各项要求。
钙测试预装试剂盒说明书
Millipore- 1.00858页码 1 的 9The life science business of Merck operates as MilliporeSigma in the US化学品安全技术说明书按照GB/T 16483、GB/T 17519编制版本6.2修订日期18.09.2022打印日期18.09.2022最初编制日期19.07.2017SDS 编号Millipore - 1.00858产品编号Millipore - 1.00858钙测试预装试剂盒第1部分:化学品及企业标识1.1 产品标识产品名称: 钙测试预装试剂盒Calcium Cell Test Method: photometric 10 -250 mg/l Ca14 - 350 mg/l CaO25 - 624 mg/l CaCO₃ Spectroquant®产品编号: 1.00858产品编号: 100858品牌: Millipore1.2 安全技术说明书提供者的详情制造商或供应商名称: Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co.Ltd.509 Renqing RoadZhangjiang High Tech East Park, PudongSHANGHAI201201 SHANGHAICHINA西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司上海市浦东新区仁庆路509号10幢邮政编码:201201默克股份两合公司64271 达姆施塔特德国Millipore - 1.00858 页码 2 的 9The life science business of Merck operates as MilliporeSigma in the USPhone:+49(0)6151 72-2440电话号码 : +86 21 6141-5566 传真: +86 21 6141-55671.3 应急咨询电话紧急联系电话: +86 532 838890901.4 物质或混合物的推荐用途和限制用途已确认的各用途 : 分析用试剂这是此产品概括的物质安全资料表(SDS),如需第16项中所列的每一成分完整的物质安全资料表(SDS),请浏览我们的网站.第2部分:危险性概述2.1 GHS 危险性类别易燃液体 (类别 3), H226 金属腐蚀物 (类别 1), H290严重眼睛损伤/眼睛刺激性 (类别 2A ), H319 生殖毒性 (类别 1B ), H360本部分提及的健康说明(H-)全文请见第16部分。
钙卫蛋白 乳铁蛋白检测试剂盒(胶体金法产品技术要求医友
钙卫蛋白/乳铁蛋白检测试剂盒(胶体金法)
性能指标
1物理性状
1.1外观
钙卫蛋白/乳铁蛋白检测试纸应整洁完整、无毛刺、无破损、无污染;材料附着牢固。
1.2宽度
钙卫蛋白/乳铁蛋白检测试纸的宽度应不小于 2.5mm。
1.3移行速度
利用25mm宽度硝酸纤维素膜,加样后液体迁移到质控区出现对照线的时间不超过3min。
2检测限
用钙卫蛋白+乳铁蛋白质控品进行检测,钙卫蛋白应不高于500ng/ml,乳铁蛋白不高于100ng/ml。
3特异性
分别用浓度为1mg/ml猪血红蛋白,1mg/ml牛血红蛋白,500μg/ml人血红蛋白,1mg/ml猪转铁蛋白,1mg/ml牛转铁蛋白,100μg/ml人转铁蛋白及1mg/ml 牛乳铁蛋白进行检测,每份质控品重复检测3次,结果应全部为阴性。
4重复性
取同一批号的钙卫蛋白/乳铁蛋白检测试纸10支,以浓度为CP1000ng/ml+ LF500ng/ml的钙卫蛋白+乳铁蛋白进行测定,反应结果应一致,显色度均一。
5批间差
取三个批号的钙卫蛋白+乳铁蛋白检测试纸,对重复性进行检测,三个批号检测试纸的结果应符合2.4的要求。
人钙卫蛋白(Calprotectin)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断人(Human)钙卫蛋白(Calprotectin)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被钙卫蛋白(Calprotectin)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的钙卫蛋白(Calprotectin)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、50、100、200、400、800ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
QiaGen粪便DNA提取试剂盒中文说明书
注意:1.准备好70℃水浴锅。
2.所有的离心操作都在室温下(15-25℃),14000转/分钟3.用BufferAL和InhibitEXBuffer溶解任何沉淀都要加热和混匀。
4.Buffer AW1和Buffer AW2都加乙醇。
5.使用之前混合所有缓冲液。
1.称取200ul样品在2ml的离心管中,离心管放在冰上。
2.每个样品添加1mlInhibitEXBuffer,然后持续旋涡混合1min或者直到样品混合均匀。
3.在70℃加热悬浮液5min(难以溶解的细胞溶解温度可以提高到95℃),然后旋涡混合15s。
4.离心样品1min析出沉淀。
5.另取1.5ml离心管加15ulProteinaseK。
6.移取200ul步骤4的上清液至1.5ml含ProteinaseK的离心管中。
7.然后添加200ulBufferAL,旋涡混合15s。
(注意:不要直接添加ProteinaseK到BufferAL中,样品和BufferAL必须充分混合成均匀混合液)8.70℃孵育10min。
9.添加200ul乙醇到溶解液中,旋涡混合。
10.小心移取600ul步骤9的裂解液到QIAamp旋转柱中,盖上盖子,离心1min。
把QIAamp旋转柱放到一个新的2ml的收集管中,丢掉含有滤液的管。
11.小心打开QIAamp旋转柱,添加500ulBufferAW1,离心1min。
把QIAamp旋转柱放到一个新的2ml收集管中,丢掉包含滤液的收集管。
12.小心打开QIAamp旋转柱,添加500ulBufferAW2,离心3min,丢掉包含滤液的收集管。
13.把QIAamp旋转柱放到一个新的2ml的收集管中,丢掉旧的含有滤液的收集管,离心3min。
14.把QIAamp旋转柱放到一个新的1.5ml的离心管,直接移取200ulBufferATE到QIAamp薄膜上。
室温孵育1min,然后离心1min洗提DNA。
通过UV吸收度判断DNA纯度,使用BufferATE做空白设计避免结果错误。
LMK504Mu 96T 钙卫蛋白(CALPRO)检测试剂盒 (磁性微球Luminex单因子夹心法)
LMK504Mu 96T钙卫蛋白(CALPRO)检测试剂盒(磁性微球Luminex单因子夹心法)适用生物:小鼠使用说明书仅供体外研究使用,不用于临床诊断!第一版[ 预期应用 ]本试剂盒运用双抗体夹心法定量测定小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清或其它相关生物液体中CALPRO含量。
[ 试剂盒内容 ][ 需自备的设备及试剂 ]1、Luminex MAGPIX®,Luminex 100™,Luminex200™,或Bio-Rad®,Bio-Plex®分析仪(建议仪器使用前提前预热,并做好自检和校准)2、单道或多道微量移液器及吸头3、稀释样品的EP管.4、蒸馏水或去离子水5、磁力架6、盛放洗液的容器7、0.01mol/L(或1×)磷酸缓冲盐 (PBS),pH=7.0-7.28、旋涡振荡器9、酶标板振荡器[ 试剂盒的储存及有效期 ]1、 未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。
请注意,收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A 、检测溶液B以及96孔板保存于-20°C,其余试剂请置于4°C保存备用。
2、 使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存。
注意:试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。
产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。
[ 标本的采集与保存 ]血清:将收集于血清分离管中的全血标本在室温放置2小时或4°C过夜,然后1,000×g离心20分钟,取上清即可,将上清置于-20°C或-80°C保存,避免反复冻融。
血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8°C 1,000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20°C或-80°C保存,避免反复冻融。
粪便钙卫蛋白检测试剂盒(免疫层析法)产品技术要求珠海金标医学检验
粪便钙卫蛋白检测试剂盒(免疫层析法)
1.性能指标
1.1.物理性状
1.1.1.外观
外包装盒整洁、光滑,无破损;外包装及标签应清晰,准确、牢固;试剂盒组分齐全、完整;检测卡密封严密,无开口、无破损;液体试剂无杂质。
1.1.
2.膜条宽度
应不小于2.5mm。
1.1.3.液体移行速度
液体移行速度应不低于10mm/min。
1.2.净含量
试剂净含量应不少于标示值。
1.3.最低检测限
应不大于500ng/ml。
1.4.阳性参考品符合率
分别检测用于评价灵敏度的3份不同企业阳性参考品各1次,检测结果应均为阳性。
1.5.阴性参考品符合率
分别检测用于评价特异性的3份不同企业阴性参考品各1次,检测结果应均为阴性。
1.6.重复性
检测1份企业精密性阳性参考品,重复检测10次,结果应均为阳性,且显色均一;
检测1份企业阴性精密性参考品,重复检测10次,结果应均为阴性。
1.7.批间差
抽取三个批次的试剂盒,各批分别重复检测1份企业精密性阳性参考品10次,结果应均为阳性,且显色均一。
1。
粪便钙卫蛋白胶体金法试剂说明书
粪便钙卫蛋白胶体金法试剂说明书一、前言粪便钙卫蛋白胶体金法试剂是一种用于检测粪便中钙卫蛋白的试剂,具有快速、准确、简便等特点。
本说明书旨在为使用者提供详细的试剂使用方法和注意事项,以确保试剂的正确使用和检测结果的准确性。
二、试剂组成本试剂包括胶体金试剂、样品处理液、检测板、洗涤缓冲液、显色液和停止液等组成部分。
三、试剂使用方法1. 样品处理将粪便样品加入样品处理液中,按照说明书中的比例混合均匀,离心沉淀后取上清液进行检测。
2. 检测板处理将检测板中的孔洞用洗涤缓冲液洗涤3次,每次洗涤时间不少于30秒,然后用吸头吸干。
3. 加样将样品加入检测板中的孔洞中,每孔加入适量的样品,注意不要超过孔洞的容量。
4. 洗涤将检测板放入洗涤器中,加入洗涤缓冲液,按照说明书中的程序进行洗涤,每次洗涤时间不少于30秒。
5. 显色将显色液加入检测板中的孔洞中,按照说明书中的程序进行显色,显色时间不少于10分钟。
6. 停止反应将停止液加入检测板中的孔洞中,停止反应,然后用洗涤缓冲液洗涤3次,每次洗涤时间不少于30秒。
7. 结果判定将检测板放入显色板中,按照说明书中的程序进行结果判定,根据显色板上的颜色变化判断样品中钙卫蛋白的含量。
四、注意事项1. 本试剂仅供科研使用,不得用于临床诊断。
2. 使用前请仔细阅读说明书,按照说明书中的方法进行操作。
3. 操作过程中应注意个人防护,避免接触试剂和样品。
4. 试剂应存放在干燥、阴凉、避光的地方,避免受潮和阳光直射。
5. 试剂过期或者包装破损的试剂不得使用。
五、结语粪便钙卫蛋白胶体金法试剂是一种快速、准确、简便的检测粪便中钙卫蛋白的试剂,本说明书详细介绍了试剂的使用方法和注意事项,希望使用者能够按照说明书中的方法进行操作,确保试剂的正确使用和检测结果的准确性。
粪便钙卫蛋白检测试剂盒说明书-中文
未开封试剂
2-8 度储存,失效期标注在试剂盒标签上,不要使用超过失
效期的试剂盒
已开封试剂
提取缓冲液
2-8 度储存,直至失效期
微孔板
未使用的板条立即重新放回装有干燥
剂的铝箔袋中,并封上自封口。
2-8 度储存,直至失效期
已稀释的洗涤 2-8 度储存,最多 6 个月
液
孵育缓冲液
标准品
质控品
2-8 度储存,直至失效期
粪便钙卫蛋白检测试剂盒 (酶联免疫法)
货号 EK-CAL EK-CAL2
96T 192T
用途:
瑞士 BÜ HLMANN 公司生产的粪便钙卫蛋白检测试剂 盒(酶联免疫法)用于定量检测人粪便中的钙卫蛋白 (MRP8/14; S100A8/S100A9)。
产品原理
本试剂盒应用双抗体夹心法,基于不同位点的两种单 克隆抗-人钙卫蛋白抗体。标准品、质控品和稀释后的待测 样本加入到具有高亲和力的单克隆抗-人钙卫蛋白抗体包被 的微孔板微孔内。在第一次孵育步骤中,样本中钙卫蛋白被 固相抗体捕获。加入酶联物后第二次孵育时,形成以下复合 体:捕获抗体-人钙卫蛋白-酶标抗体结合物。接着加入 TMB 底物进行显色,加入酸液终止液终止显色反应,溶液变成黄 色。黄色亮度与样本中钙卫蛋白浓度成正比。最后在酶标仪 450nm 波长处测量吸光度。做出标准品浓度对相应 OD 值的 标准曲线,在其上计算出样本浓度。
75
3.7
80
3.9
85
4.2
90
4.4
95
4.7
100
4.9
5、 将样本管放入多孔漩涡混匀器,用最高速充分震荡 30 分钟,使样本变成匀浆。
6、 将匀浆转移到 2ml 的微量离心管,放入微型离心机,用 3000xg 离心 5 分钟。
钙卫蛋白检测要求-概述说明以及解释
钙卫蛋白检测要求-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述:钙卫蛋白是一种重要的细胞内调节蛋白,它在神经元中扮演着重要的神经传导调节角色。
钙卫蛋白的检测可以帮助医生及时发现和诊断神经系统相关疾病,如脑卒中、脑损伤等。
本文旨在探讨钙卫蛋白检测的要求,以提高检测准确性和临床应用价值。
1.2文章结构1.2 文章结构本文将首先介绍钙卫蛋白的作用和检测的重要性,深入探讨其在疾病诊断和预后评估中的价值。
接着,将详细讨论钙卫蛋白检测的要求,包括样本采集、实验室操作、结果解读等方面,旨在提供一套系统化的检测指南。
最后,将总结钙卫蛋白检测的要求,并展望未来在这一领域的研究方向和发展趋势。
通过对这些内容的深入探讨,可以为临床实践和科研工作提供重要的参考信息,促进钙卫蛋白检测技术的进步和应用。
1.3 目的本文的目的在于讨论钙卫蛋白检测的要求,明确检测的标准和要求,为临床医生提供指导性建议。
通过深入探讨钙卫蛋白检测的意义和必要性,帮助医疗机构和科研人员更好地利用该检测手段,提高疾病的诊断准确性和治疗效果。
同时,为未来研究提供思路和展望,促进相关领域的发展与进步。
通过本文的探讨,希望能够引起广泛的关注和讨论,推动钙卫蛋白检测在临床实践中的应用和推广,最终造福广大患者。
2.正文2.1 钙卫蛋白的作用钙卫蛋白是一类重要的细胞内蛋白质,其主要作用是在细胞内调节钙离子的浓度和分布。
钙离子是细胞内的重要信号分子,参与调控细胞生理功能、细胞信号传导和细胞凋亡等过程。
钙卫蛋白通过结合钙离子,调节细胞内钙平衡,保持细胞内稳态。
此外,钙卫蛋白还可以与其他蛋白质相互作用,参与细胞内多种信号通路的调控。
在细胞内,钙卫蛋白还可以与细胞骨架蛋白质相互作用,调节细胞的形态和运动。
钙卫蛋白在神经元中也起着重要作用,参与突触传递和神经元发射等活动。
此外,钙卫蛋白还参与细胞间的黏附和细胞间的相互作用,对细胞的功能和结构具有重要影响。
总的来说,钙卫蛋白在细胞内起着多种重要作用,对维持细胞内稳态、调节细胞功能具有重要意义。
粪便基因组DNA提取试剂盒说明书
磁珠法粪便基因组DNA提取试剂盒(常规版)MagBeads Faeces DNA Extraction Kit (Regular Version)【目录号】FDE-5005、FDE-5030【运输条件】2~25℃;【保存条件】磁珠悬浮液、裂解液2 2~8℃,蛋白酶K-20℃,其它组分室温;【试剂盒组成】【注意事项】1. 磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心,以免磁珠受到损害,使用前务必充分混匀;2. 使用前请检查裂解液1/2中是否出现结晶,如有结晶请将置于于37℃环境中重新溶解;3. 蛋白酶K长期不使用,请置于-20℃保存,融化后4℃保存,并尽快使用;4. 本操作指南经本公司反复验证,使用前请仔细阅读,并且按照操作指南建议操作。
磁珠法·自动化:为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案【产品简介】本试剂盒适用于从各种固态或液态粪便样本中分离纯化基因组DNA。
试剂盒采用具有独特分离作用的纳米磁珠和缓冲液体系,特殊技术包埋的磁珠在特定条件下对核酸具有极强的富集能力,当条件改变时,磁珠会释放所吸附的核酸,从而达到快速分离纯化核酸的目的。
方法简便、快捷、质量稳定。
提取所得基因组DNA产物,纯度优良,可应用于酶切、PCR、荧光定量PCR、文库构建、Sputhem杂交、芯片检测和高通量测序等各种下游分子生物学实验。
本试剂盒可手动法在EP管中进行操作,亦可配合核酸提取仪实现自动化操作。
【试剂盒说明】【自备试剂】异丙醇、80%乙醇、RNase A溶液(100mg/mL,分散液10mM Tris-HCl, 1mM EDTA, pH 值8.0)。
【自备仪器&耗材】仪器自动版:涡旋混合仪、高速离心机、金属浴或水浴锅、96孔方孔圆底板、英芮诚ETP-300核酸提取仪、磁棒套。
手动版:涡旋混合仪、高速离心机、EP管、EP管用磁力架。
【仪器自动版操作步骤】以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例,可同步完成32个样本的提取工作。
粪便钙卫蛋白 临界值参考值
粪便钙卫蛋白临界值参考值
内容:
粪便钙卫蛋白( )是一种含量丰富的钙结合蛋白,主要存在于粪便中。
它是肠道炎症的一个敏感和特异性的标志物。
粪便钙卫蛋白的临界值和参考值:
1. 临界值:
- 50μ/:正常值,提示肠道无明显炎症
- 50-120μ/:轻度升高,需要随访
- 120-250μ/:中度升高,提示存在轻中度肠炎
- >250μ/:显著升高,提示存在中重度肠炎
2. 参考值:
- 正常人群:0-50μ/
- 炎症性肠病患者:
- 缓解期:50-200μ/
- 轻度活动期:200-600μ/
- 中重度活动期:>600μ/
综上,粪便钙卫蛋白是评估肠道炎症的一个非常有用的指标。
其浓度越高,提示肠道炎症越严重。
临床上需要结合病史、症状和其他检查来综合判断。
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标准品钙卫蛋白分析浓度分别为 30,90,300,900,1800ug/g。
2 标准品和质控品在检测时直接使用,无需稀释。
根据需要可由供应商提供的试剂
粪便提取设备
Smart-Prep
50 支
Schebo® Quick- 50 支
Prep
1.3ml,直接使用
B-CAL-RD B-CAL-SOFI
试剂储存条件和效期
粪便钙卫蛋白检测试剂盒 (酶联免疫法)
货号 EK-CAL EK-CAL2
96T 192T
用途:
瑞士 BÜ HLMANN 公司生产的粪便钙卫蛋白检测试剂 盒(酶联免疫法)用于定量检测人粪便中的钙卫蛋白 (MRP8/14; S100A8/S100A9)。
产品原理
本试剂盒应用双抗体夹心法,基于不同位点的两种单 克隆抗-人钙卫蛋白抗体。标准品、质控品和稀释后的待测 样本加入到具有高亲和力的单克隆抗-人钙卫蛋白抗体包被 的微孔板微孔内。在第一次孵育步骤中,样本中钙卫蛋白被 固相抗体捕获。加入酶联物后第二次孵育时,形成以下复合 体:捕获抗体-人钙卫蛋白-酶标抗体结合物。接着加入 TMB 底物进行显色,加入酸液终止液终止显色反应,溶液变成黄 色。黄色亮度与样本中钙卫蛋白浓度成正比。最后在酶标仪 450nm 波长处测量吸光度。做出标准品浓度对相应 OD 值的 标准曲线,在其上计算出样本浓度。
试剂成分: 试剂
提取缓冲液 微孔板 (预 包被钙卫蛋 白单克隆抗 体) 封板膜 浓缩洗涤液 (10X) 含防腐剂 孵育缓冲液 含防腐剂 标准品 1,2 质控品 高 值/低值 酶联物
量
3 瓶,125ml 12*8 孔
3张 1 瓶,100ml
2 瓶,125ml 5 支,1ml 2 支,1ml 1 支,12ml
样本采集和储存
提取程序需要的粪便样本量为 50-100mg 将粪便样本放入试管中,在 2-8 度可储存 6 天 粪便样本冷冻后,钙卫蛋白的浓度会略有上升。因此,如需 长期保持,建议将提取物储存于-20 度,可保存至少 4 个月。 重要提示:样本收集装置不可含有其它生物或化学成分。
注意事项: 安全措施
未开封试剂
2-8 度储存,失效期标注在试剂盒标签上,不要使用超过失
效期的试剂盒
已开封试剂
提取缓冲液
2-8 度储存,直至失效期
微孔板
未使用的板条立即重新放回装有干燥
剂的铝箔袋中,并封上自封口。
2-8 度储存,直至失效期
已稀释的洗涤 2-8 度储存,最多 6 个月
液
孵育缓冲液
标准品
质控品
2-8 度储存,直至失效期
试剂盒内的微孔板、标准品和校准品还有人源性成分,尽管 已经过检测,HBV 表面抗原、HCV 以及 HIV1/2 均为阴性, 但仍然应视为有潜在传染性的物质对待,遵守实验室规程并 采取适当的防护措施。 底物和终止液:TMB 底物还有联苯胺、H2O2 以及二甲基甲 酰胺,终止液含有硫酸(0.25M),这些试剂都会刺激眼睛、 皮肤和黏膜,避免试剂接触眼睛、皮肤并穿着合适的防护服、 手套、和眼镜。如试剂接触到眼睛和皮肤,应立即用清水冲 洗。 未使用的溶液必须按当地法规进行处理。
技术措施
试剂盒组件 不要使用超过标签上所示有效期的试剂盒 不要混合不同批号的试剂 避免试剂、样本和孔间的交叉污染 使用前将试剂恢复到室温并混匀 微孔板不可重复利用 提取 为了获得准确的定量结果,必须将加入到提取缓冲液中的已 称重的所有粪便样本变成匀浆。要避免样本残留在管帽处。 样本提取时最短需要 5 分钟可获得有浑浊的液体,延长离心 时间可以减少或消除浊度,但试验表明浊度对 ELISA 的定量 结果无影响。 ELISA 过程 为获取可重复的准确结果,清洗步骤是必不可少的。洗涤液 加入到每个检测孔后,每次必须至少孵育 20 秒,洗板次数 也要按照要求进行。 如使用自动洗板机,强烈建议使用“板模式”,可缩短孵育 时间。 检测板震荡参数:400-600 转/分(<10HZ)。 建议标准品、校准品和标本做复孔,每次实验都必须使用本 次新做的标准曲线。 如果某个未知样本的检测到的浓度比最高的标准品浓度还 要高,则需要将这个未知样本进一步稀释并重新检测,由此 产生的稀释系数必须体现到计算结果中。
试验过程
提取
标准提取程序
1、 将接种环和贴上标签的空 PE 管称重
2、 用接种环将 50-100mg 的粪便样本加入到 PE 管内
3、 估算样本的净重
4、 向管中加入提取缓冲液(样本净重的 49 倍),并盖紧管
子。
粪便重量(mg) 提取液体积(ml)
50
2.5
55
2.7
60
2.9
65
3.2
70
3.4
编号
B-CAL-EX B-CAL-MP
B-CAL-WB
B-CAL-IB B-CAL-CASET B-CAL-CONSET B-CAL-EL
说明
直接使用 直接使用
用 900ml 去离子水 稀释 直接使用
直接使用 直接使用
直接使用
TMB 底物
B-TMB12
直接使用
终止液
B-STS12
直接使用
1 钙卫蛋白标准品从 A 到 E 的实际浓度为 4,12,40,120 和
240ng/ml。使用低范围检测程序时(样本用提取缓冲液 1:50
倍稀释,提取物再用孵育缓冲液 别为 10,30,100,300,600ug/g。
如使用扩展范围检测程序时(样本用提取缓冲液 1:50 倍稀
释,提取物再用孵育缓冲液 1:150 倍稀释,共稀释 750 倍)
酶联物
TMB 底物
终止液
需要但没提供的材料
抽提程序
10ul 一次性接种环(Sarstedt: 86.1562.010) 15ml 带帽聚丙烯管(Sarstedt: 62.554.502) 层流工作站 多管旋涡混合器 精密天平(10 - 150 毫克) 小型离心机(≥3000 g)
ELISA 程序
10、100 及 1000ul 移液器及配套吸嘴 用于样本稀释的一次性试管 用于稀释洗涤液的 1000ml 量筒 用于洗板的洗板机或塑料挤瓶 吸水纸 酶标仪(450nm)
75
3.7
80
3.9
85
4.2
90
4.4
95
4.7
100
4.9
5、 将样本管放入多孔漩涡混匀器,用最高速充分震荡 30 分钟,使样本变成匀浆。
6、 将匀浆转移到 2ml 的微量离心管,放入微型离心机,用 3000xg 离心 5 分钟。