卫生部规范化操作1—微生物检验流程图
微生物检测流程
食品微生物检测标准受控状态：文件编号：H-XM-PGZY-10颁发部门：品管部接收部门：品管部发布日期：// 实施日期：//更改记录微生物检测目录食品接触面微生物检测一、目的：检测生产车间空气、操作人员手部、与食品有直接接触面的机械设备的微生物指标，生产区域环境当中病原微生物的监控，达到规定标准，以控制食品成品的质量。
二、范围：标准适用于盘锦兴牧肉联加工集团有限公司食品接触面微生物的检测。
三、采样与检测方法：3.1、空气微生物采样（自然沉降法）3.1.1、采样布点要求(1)室内面积不足50m2的设置3个采样点，50m2以上的设置5个采样点。
（2）采样点按均匀布点原则布置，室内3个采样点的设置在室内对角线四等分的3个灯分点上，5个采样点的按梅花布点。
（3）采样点距离地面高度1.2m-1.5m,距离墙壁不小于1m。
（4）采样点应避开通风口、通风道等。
（2）采样方法采样时，将含平板计数琼脂培养基的平板(直径9 cm)置采样点并避开空调、门窗等空气流通处，打开平皿盖，使平板在空气中暴露5min(静态)，送检时间不得超过6h，若样品保存于0～4℃条件时，送检时间不得超过24h。
3.1.2、菌落培养：（1）将已采集样品的培养基在6 h内送实验室，细菌总数于37℃±1℃培养48h观察结果，计数平板上细菌菌落数。
（3）菌落计算：a) 记录平均菌落数，用“个/皿”来报告结果。
用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镜检查，不可遗漏。
b) 若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2 个或2个以上菌落计数。
c)计数每块平板上生长的菌落数，求出全部采样点的平均菌落数，检验结果以每平皿菌落数（CFU/皿）3.2、车间设备、工器具（作业前/后）表面采样与检测方法：3.2.1、样品采集范围：a)在设备、工器具加工前/后进行擦拭检验，以便了解车间卫生清扫消毒情况。
b)产品检验结果超内控标准时，应及时对车间可疑处进行擦拭，如有检验不合格点，整改后再进行擦拭检验。
临床微生物检验标准化操作(周庭银)-.微生物实验室设置及管理程序
微生物实验室设置及管理程序
1.目的
规范微生物实验室的设置及管理程序，保证检验结果的准确性和可靠性。
2.适用范围
适用于临床微生物实验室的设置和日常管理等。
3.职责
实验室负责人参与本实验室设置和管理。
4.程序
4. 1实验室设置
4.1.1临床微生物室设标本接种、细菌鉴定和药敏、培养基配制等岗位。
4. 1. 2微生物实验室分为污染区、半污染区和清洁区。
污染区为已被病原微生物污染的区域，如标本收发室、病原微生物检测实验室等;半污染区为可能被病原微生物污染的区域如缓冲间、工作服放置室、走廊等;清洁区为未被病原微生物污染的区域，包括办公区、会议室、休息室等。
4. 2实验室管理
4. 2. 1严格遵守微生物实验室的生物安全制度，参见《二级生物安全防护程序》。
4.2.2非本实验室工作人员，未经许可不得人内;进修、实习或其他科室人员应经实验室负责人同意并登记后才能进入实验室;禁止穿着工作服进入清洁区。
4.2.3实验完毕后做好清洁消毒工作。
4.2.4污染的处理参见《二级生物安全防护程序》。
4.2.5实验室质量管理参见《质量管理程序》、《室间质量控制管理程序》、((室内质量控制管理程序》等相关文件。
4.2.6实验室生物安全管理参见《实验室安全管理程序》、《二级生物安全防护程序》等相关文件。
4. 2. 7实验室人力资源管理参见《实验室人员的配置及培训程序》、《工作人员职责设置程序》。
微生物检验标准化操作
微生物检验标准化操作微生物检验是指对各种环境、食品、药品、化妆品等样品中的微生物进行检测和分析的过程。
微生物检验的标准化操作对于确保检验结果的准确性和可靠性至关重要。
本文将从样品采集、检验方法、质控措施等方面介绍微生物检验的标准化操作。
首先，样品采集是微生物检验中至关重要的一步。
在进行样品采集时，应严格按照相关标准操作程序进行，避免外界环境对样品的污染。
同时，采样工具和容器应经过严格的消毒和清洁处理，以确保样品的纯净度和代表性。
其次，选择合适的检验方法也是微生物检验的关键。
根据不同的样品类型和检测要求，选择适合的微生物检验方法十分重要。
常见的微生物检验方法包括培养法、PCR法、免疫学方法等，各种方法都有其适用的范围和特点，需要根据具体情况进行选择。
另外，质控措施也是微生物检验中不可或缺的环节。
在进行微生物检验过程中，应建立健全的质控体系，包括环境监测、仪器校准、实验操作规范等方面的控制措施。
只有通过严格的质控措施，才能确保检验结果的准确性和可靠性。
此外，标准化的操作流程和记录也是微生物检验中的重要环节。
在进行微生物检验时，应严格按照标准化的操作流程进行，确保每一个步骤都得到正确执行。
同时，对于每一次检验都应进行详细的记录和归档，以备日后的查阅和追溯。
总的来说，微生物检验的标准化操作对于确保检验结果的准确性和可靠性至关重要。
通过严格的样品采集、选择合适的检验方法、健全的质控措施以及标准化的操作流程和记录，可以有效提高微生物检验的质量和可靠性，为保障公共健康和安全提供有力的支持。
希望本文所述内容能为微生物检验工作提供一定的参考和指导，使微生物检验工作更加规范、科学和可靠。
微生物检查操作方法
微生物检查操作方法
微生物检查操作方法主要包括以下几个步骤：
1. 样品采集：根据检测的需要，选择适当的方法采集样品。
常见的采样方法包括直接涂抹、刷拭、扩散采样等。
2. 样品处理：将采集得到的样品进行处理，以获得代表性的微生物菌落。
处理方法包括稀释、离心、过滤等。
3. 培养方法：根据检测需求，选择适宜的培养基和培养条件进行培养。
常用的培养基有营养琼脂、血琼脂、麦康凯琼脂等。
4. 培养操作：将处理后的样品转移到培养基上，通过涂布、滴种、稀释等方法进行培养。
培养过程中需严格控制温度、湿度和氧气供应等条件。
5. 菌落观察：培养一定时间后，观察培养基上是否有菌落的生长，根据菌落形态、颜色、大小等特征初步判断微生物的类型。
6. 菌落鉴定：通过进一步的实验方法，如形态学特征、生理生化反应、分子生物学方法等，对菌落进行鉴定，确定微生物的种类。
7. 数据处理：将检测结果记录和整理，根据标准进行判断和评价，生成相应的
检测报告。
需要注意的是，在操作过程中要严格遵守无菌操作规范，避免外界污染，保证检测结果的准确性和可靠性。
另外，不同类型的微生物检查方法可能有所差异，具体操作步骤还需根据检测要求和检测方法进行调整。
微生物菌种毒株和样本标准操作程序与流程 (2)
病原微生物菌(毒)种与样本的标准操作规程流程1.目的:对本实验室菌种、毒种的申购、保存、保管、领用、处理等各个环节实行有效的监督控制,防止意外事故发生,确保疾病预防与控制检验业务及科研教学工作。
２.适用范围及菌种、毒种专职管理人员适用于本科微生物实验室菌种、毒株的管理;菌种、毒种专职管理人员:于瑞芳、侯恩言３、职责①微生物实验室负责菌、毒种的出入库保管、保存及处理等日常管理。
②科室指定２名菌种、毒种库管理人员承担菌、毒种日常管理。
③科室负责人负责一、二类菌、毒种的出入库与向上级索取及对下级发送的审核。
④技术管理层批准本实验室一、二类菌、毒种的出入库与向上级索取及对下级发送的审批。
4.工作程序⑴报送及入库①当微生物实验室检出菌、毒株应及时报送市疾病预防控制中心。
②新发现的菌、毒种,要做好原始记录,逐级报送进行复核确认,报送时须2人参加。
③一、二类菌、毒种入库前,科室审核,技术管理层批准后入库④个人不得擅自保留菌、毒种,必须由科室进行统一编号、登记入库管理⑤菌、毒种入库时, ２名菌、毒种保管人员须认真做好菌毒种的编号、登记工作。
⑵日常管理①保管人员由于瑞芳、侯恩言２名检验人员组成。
②菌、毒种入库时,保管人员应及时验收,统一编号,填写《菌、毒种登记表》③严禁随意将菌、毒种置于非菌、毒种专用保存场所,应做到三专(专室、专柜、专锁)。
④菌、毒种库由2名保管人员双锁管理,铁门与锁必须牢固有效,发现损坏须及时报修。
未经各科室负责人同意,不得擅自将钥匙委托她人代管。
⑤菌、毒种保管人员应定期对库内温度、湿度、通风及冰箱、冰柜等菌、毒种保藏设备运转情况进行检查,并做好记录。
⑥菌、毒种保管人员根据菌、毒种的保存期限,及时通知分管病种的检验人员进行传代,定期鉴定,并详细记录在《菌、毒种登记表》⑦菌、毒种保管人员发现菌、毒种发生变异与死亡,应及时向科室负责人报告,并填写《菌、毒种登记表》。
科室须将变异及死亡的一、二类菌、毒种通报技术管理层。
微生物菌种、毒株和样本标准操作程序与流程
病原微生物菌（毒）种和样本的标准操作规程流程1．目的：对本实验室菌种、毒种的申购、保存、保管、领用、处理等各个环节实行有效的监督控制，防止意外事故发生，确保疾病预防与控制检验业务及科研教学工作。
2．适用范围及菌种、毒种专职管理人员适用于本科微生物实验室菌种、毒株的管理；菌种、毒种专职管理人员：于瑞芳、侯恩言3．职责①微生物实验室负责菌、毒种的出入库保管、保存及处理等日常管理。
②科室指定2名菌种、毒种库管理人员承担菌、毒种日常管理。
③科室负责人负责一、二类菌、毒种的出入库和向上级索取及对下级发送的审核。
④技术管理层批准本实验室一、二类菌、毒种的出入库和向上级索取及对下级发送的审批。
4．工作程序⑴报送及入库①当微生物实验室检出菌、毒株应及时报送市疾病预防控制中心。
②新发现的菌、毒种，要做好原始记录，逐级报送进行复核确认，报送时须2人参加。
③一、二类菌、毒种入库前，科室审核，技术管理层批准后入库④个人不得擅自保留菌、毒种，必须由科室进行统一编号、登记入库管理⑤菌、毒种入库时， 2名菌、毒种保管人员须认真做好菌毒种的编号、登记工作。
⑵日常管理①保管人员由于瑞芳、侯恩言2名检验人员组成。
②菌、毒种入库时，保管人员应及时验收，统一编号，填写《菌、毒种登记表》③严禁随意将菌、毒种置于非菌、毒种专用保存场所，应做到三专（专室、专柜、专锁）。
④菌、毒种库由2名保管人员双锁管理，铁门与锁必须牢固有效，发现损坏须及时报修。
未经各科室负责人同意，不得擅自将钥匙委托他人代管。
⑤菌、毒种保管人员应定期对库内温度、湿度、通风及冰箱、冰柜等菌、毒种保藏设备运转情况进行检查，并做好记录。
⑥菌、毒种保管人员根据菌、毒种的保存期限，及时通知分管病种的检验人员进行传代，定期鉴定，并详细记录在《菌、毒种登记表》⑦菌、毒种保管人员发现菌、毒种发生变异和死亡，应及时向科室负责人报告，并填写《菌、毒种登记表》。
科室须将变异及死亡的一、二类菌、毒种通报技术管理层。
微生物检验操作规程
微生物检验操作规程微生物检验操作规程1. 目的建立微生物检验标准操作规程，保证检验操作规范化。
2. 范围适用于本公司相关的微生物检验活动的全过程。
3. 职责3.1 微生物检验员负责微生物检验的全过程；3.2 QC主管负责监督检查本规程的有效实施。
4. 操作规程4.1 微生物检验玻璃器皿吸管的洗涤4.1.1 一般的玻璃器皿（例如培养皿、试管、三角瓶等），可用毛刷及洗涤剂洗去灰尘、油垢，然后用自来水、蒸馏水充分冲洗，直至玻璃器皿内壁均匀分布一层薄的水膜，即器壁既不挂水珠也无条纹，即洗涤达到标准。
4.1.2 玻璃器皿内有污迹不能洗净时，可浸泡于洗液中，待器皿中有机物氧化分解后，取出用自来水、蒸馏水冲洗干净，备用。
4.1.3 新购的玻璃器皿先用2％盐酸浸泡，再用用自来水、蒸馏水充分冲洗。
4.2 器皿的包扎4.2.1 试管：塞上胶塞，然后用牛皮纸或报纸把试管头包扎起来。
做发酵试验时，将试管头塞上专用的耐高温PVC试管帽。
4.2.2 三角瓶、抽滤瓶：将三角瓶（抽滤瓶）口塞上胶塞，然后用牛皮纸把塞头部包起来。
4.2.3 吸管：将耐高温的移液枪头装盒，用用牛皮纸或报纸包裹。
4.2.4 平皿：10个为一组，用牛皮纸包裹。
4.3消毒和灭菌：4.3.1 化学灭菌：此法适用于微生物操作过程中不能加热、紫外线的地方。
如人手等。
（1）用75%的乙醇溶液或0.1%新洁尔灭擦拭或浸泡。
（2）一般用1～2%的甲醛液浸泡软管和用具。
（3）一般成品漂白粉的有效成分是25～32% 。
使用时配成有效成份的2%溶液洒在地面或容器内，（对金属有腐蚀作用）放置10～15min后冲洗即可。
（4）氯灭菌剂的能力以有效氯表示，将氯水配制成50～100PPm 的有效氯溶液，可用于浸泡，冲洗和表面杀菌。
但氯对金属有腐蚀作用。
4.3.2 物理灭菌：4.3.2.1 干热灭菌：适用于干燥的玻璃器皿（吸管、平皿等）、金属器具（镊子等）、固体试液、液状石蜡等。
最新3-微生物检测一般流程课件PPT
4 采样方法
Sampling Method
• 必须在无菌操作下进行 • 袋装、瓶装、罐装品，应采完整的未开封的样品 • 如果样品很大，用无菌采样器采集 • 固体样品：粉末状的边取边混，小块大包装品从不同
部位的小块取样，大块整体样品从不同部位取样，兼 顾表面和深度 • 半固体样品，用无菌勺从几个部位挖取 • 液体样品振摇混匀，用100mL无菌注射器抽取 • 冷冻品，保持冷冻状态 根据检验目的，确定取样方案
可疑微生物检测
病原体 指示菌
二级抽样方案
三级抽样方案
选择n值
选择n值和c值
美国食品药品管理局（FDA） 联合国粮农组织（FAO）
二级抽样方案
• 由n、c和m组成 • n是从一批被检查食品中抽取样品的数量 ，
取样数 • c是样品检测值超过指标值m的最大可接受
抽样单位数，如果超过该值，则拒绝接受 该批产品 • m是每克样品中相关细菌的合格菌数限量， 即指标值
(1)药品取样
Drug sampling
• 抽样： ▪ 供试品为随机抽样，一般抽样量为检验用量（2个
以上最小包装单位）的3倍量。 ▪ 对异常的供试品应针对性的抽样，对外观可疑污
染或对有争议复验的样品应抽取可疑污染或对有 争议复验的原样品。 ▪ 从药品、瓶外观看出发霉、生虫及变质的药品不 必再继续检验，直接判为不合格。 • 检样： ▪ 每次最少应分取二瓶（盒）以上的样品共10g或 10ml。 ▪ 中药蜜丸至少应分取4丸以上共10g。
广泛扩散
严重、直接
二级法，n=15,c=0 二级法，n=30,c=0 二级法，n=60,c=0
蛋制品的抽样方案
蛋制品的抽样方案
目标微生物 抽样方
n
案
临床微生物室标本处理及操作流程ppt课件
弹性纤维
库什曼螺旋体
呈链排列的革兰阳性球菌和革兰阴性球杆菌。缺乏鳞状上 皮细胞提示混合厌氧菌感染
几种细菌的混合形态，缺乏鳞状上皮细胞=混合厌氧菌感染。 如果是呼吸道标本可能是吸入性肺炎。报告临床医生“提示 吸入性肺炎”
你看见多少种形态？
呼吸道标本中未被染色的，有折射的杆菌=抗酸杆菌
呈链排列的革兰阳性球菌？或革兰阳性分枝杆菌？
)1-2种机会致病菌 （查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释）
若为腐生葡萄球菌，则处理与其他致病菌相同； 其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污染
进行鉴定和药敏，若数量< 105CFU/ml， 仍然对可能的致病菌进行操作
是
> 104 CFU/ml
导管尿
过夜培养
< 104 CFU/ml
继续培养；
否 随后观察；发送初步的培养阴性报告
1-2种机会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的以上相同注释
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛； 重新采集清洁标本.
进行鉴定和药敏，若数量< 104CFU/ml， 仍然对可能的致病菌进行操作
若为腐生葡萄球菌， 则处理与其他致病菌相同； 其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污 染
评价尿培养的标准
病人 无症状者 有症状者，不固定的
标本质量
脓痰
唾液or诱导痰 (?)
粘液样痰 带血痰
用革兰氏染色来评估 呼吸道标本是否合格
痰标本>10鳞状上皮细胞/每低倍视野=拒 收
有PMN的痰标本，中性粒细胞多，且鳞状上皮细胞特别 少=接受，进行培养
粘液丝
胞内细菌 ——提示感染 细胞内细菌
柱状纤毛上皮细胞
肺泡巨噬细胞
滑石颗粒
见于迁延长时间的呼吸道疾病 淀粉样小体
微生物检测步骤
1.菌落总数操作步骤检样稀释及培养以无菌操作，取样25g放入225mL灭菌生理盐水或灭菌乳钵中，经充分振摇作成1：10均匀稀释液。
用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液），振摇试管，混合均匀，做成1:100的稀释液。
另取1mL灭菌吸管，按上条操作顺序，做10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1mL火菌吸管。
根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计，选择2〜3个适宜稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。
稀释液移入平皿后，应及时将凉至45°C营养琼脂培养基，注入平皿约15mL，并转动平皿使混合均匀。
同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照待琼脂凝固后，翻转平板（使平皿底朝上），置36±1C温箱内培养48±2h。
菌落计数方法做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏。
在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
菌落计数的报告平板菌落数的选择选取菌落数在30〜300之间的平板作为菌落总数测定标准。
一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。
稀释度的选择应选择平均菌落数在30〜300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之（见表1中例1）。
若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30〜300之间，则视两者之比如何来决定。
若其比值小于或等于2，应报告其平均数；若大于2则报告其中较小的数字（见表中例2及3）。
若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中例4）。
卫生部规范化操作课件：微生物检验规程
Bactec BacT/ALERT 3D皮肤凝固酶阴性葡萄球菌定植于输液管细菌沿输液管定植相区分，因此他们静脉穿刺部位的影响%FalseBryant & Strand. 1987. Am. J. Clin. Path. 88:113-16.et al. 2001. J. Clin. Microbiol. 39:3393-4.哪部分用于培养#1#2CVC血:外周血CFU比率= 4-10:1 提示导管相关性感染(CRI) (85% 敏感性& 99% 特异性)确定检测阳性的培养时间儿童Wallace and BitsyDennis Maki, M.D.Chief, Infect. Diseases, U Wisc女性生殖道标本的采集酵母菌，细菌性阴道病，阴道毛滴虫子宫颈部，或子宫颈内部淋病奈瑟菌，沙眼衣原体，人乳头瘤病毒阴道高位拭子(HVS)淋病奈瑟菌，B群链球菌（+阴道拭子）肛门黏液脓性子宫颈炎阴道分泌物16S rRNA电泳图Srinivasan and Fredricks. Interdisc. Perspect. Infect. Dis. 2008:1-22.Lactobacillus iners卷曲乳酸菌阴道加德纳菌细菌性阴道炎的阴道微生物基于分子生物学的Clostridial -unnamed 梭菌属，未命名的阴道加德纳菌Lactobacillus iners阴道奇异菌纤毛菌属普雷沃菌属卟啉单胞菌属巨型球菌属分子生物学检测方法检测的细菌性阴道炎的主要致病菌正常中介细菌性阴道炎KOH 氢氧化钾感染对照1.在孕期35～37周时的普查培养a.阴道和直肠拭子Van Dyke et al. N Engl J Med 2009;360:2626-36.早产儿=较高EOD发生率（0.73 vs0.26/1000活婴儿）新的快速实时PCR和传统培养法确定B群链球菌定植Gavino& Wang. Am J Obstet Gynecol2007;197:388 e1-4.CLSI AST Standards2009CLSI 药敏标准2009MIC 最低抑菌浓度纸片扩散法The Tables 表格CLSI表1用于检测/报告的药物“* ”某些药物只能用MIC法检测CLSI表1用于检测/报告的药物CLSI表2A肠杆菌科菌的解释标准CLSI表3 质控范围CLSI M100-S19抗菌药物列表第一部分第二部分One colonyMultiple colonies 单个菌落多重菌落选择菌落接种前充分地混匀标准化接种物混悬液至0.5麦氏浊度Swab plate涂布平皿Remove sample挤去多余菌液Add disks贴纸片Light光线Light光线Linezolid 利奈唑烷圈内菌落大肠埃希菌混杂有肠球菌；用纯培养重复试验微量稀释法MIC测定盘标化接种物悬液（与纸片扩散法相同）稀释&混匀接种物悬液纯接种物倒入菌液盘然后接种MIC 测定盘仔细检查“纯度验证平皿”以保证接种物为纯菌-+6432168421>640.5>32Automated AST SystemsMicroScan自动化药敏系统Vitek 2Sensititre Phoenix此时可通过自动化药敏系统进行Etest操作程序根据标准化操作程序进行琼脂平板接种试条转运器的使用用以及15-18小时的培养抑制浓度（IC）的判读和临床解释Etest判读指南Pos阳性TEM型超广谱和抑制剂耐药的β-內酰胺酶（部分列表）β-內酰胺酶/Studies/temtable.aspCLSI 表1检测和报告的药物（1）CLSI Table 1表1Drugs to Test/Report (2)检测和报告的药物（2）CLSI Table 1表1Drugs to Test/Report检测/报告药物“OR”“或”No “OR”没有“或”放在同一框里的药物具有相似的抗菌活性No “OR”没有“或”CLSI M100-S19.肠杆菌科不动杆菌属如果有“或”则两种药物的敏感性可以互推，没有”Lesho et al. 2005. Fatal A. baumannii carbapenem susceptibility. Clin Infect Dis. 41:758.Imip-S 亚胺培南-敏感Mero-R 美罗培南-耐药对临床有意义的菌株（如无菌部位分离菌株）（如泌尿生殖道的乳酸仅在和感染病专家进行密切交流后，以便于结果可被很好的理经验治疗推荐订阅at: 免费获取:In your handouts 在你的手册中(from CLSI M45-A)…. 来自于CLSI M45-ACLSI M100-S19质控（纸片扩散法）我们应该使用那些质控菌株？CLSI M100-S19质控（MIC）CLSI表2A 肠杆菌科的解释标准质控菌株补充质控菌株CLSI M100-S19.Troubleshooting Guide 纸片扩散法质控问题解决指南保存质控菌株（1）CLSI M02-A10. CLSI M07-A8.Stock culture 原始培养物Working stock culture –week 1工作培养物－第一周Working stock culture –week 2工作培养物－第一周Use for QC tests 用于质控试验Use for QC tests 用于质控试验β-内酰胺酶阴性大肠埃希杆菌ATCC 25922氨苄西林-舒巴克坦氨苄西林氨苄西林-舒巴克坦氨苄西林β-内酰胺酶阳性大肠埃希杆菌ATCC 35218/天然耐药异常表型（与CLSI的“确认表”相似）解释规则与CLSI的注释相似CLSI 表1检测/报告药物CLSI介绍“警告性注释”CLSI M100-S19 附录E确证表“异常表型”侧面图膀胱耻骨子宫颈尿道输卵管卵巢子宫阴道直肠肛门急性肾盂肾炎肾小管被白细胞填塞尿素酶→碱性尿→鸟粪石= 结石膀胱上皮细胞无需冷藏传统的尿培养使用校准过的接种环(0.001 or 0.01 ml)垂直插入装有尿液的无菌容器中尿培养的划线方式大肠埃希菌肠球菌无乳链球菌腐生葡萄球菌同样的接种物在科玛嘉显色培养基（BBL ）上生长大肠埃希菌，肠球菌和变形杆菌在血平皿上生长大肠埃希菌肠杆菌属大肠埃希菌，克雷伯菌和变形杆菌大肠埃希菌chromID CPS-生物梅里埃公司的产品快速鉴定大肠埃希菌，变形杆菌和肠球菌•可分离所有尿道病原菌•更好的可操作性•更好的鉴定能力•更高的可靠性•微生物的列举–用10ul的校准接种环接种–菌尿的解释•<104菌落单位/ml : 在104和105菌落单位/ml 中间极有可能是污染: 意义不明确，用新的一份标本进行检测•>105菌落单位/ml : 可能为感染–比较菌落密度如下图所示(CFU = 菌落形成单位) chromID CPS进行鉴定和药敏，若数量仍然对可能的致病菌进行操作若为腐生葡萄球菌，则处理与其他致病菌相同；其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污染，若为腐生葡萄球菌，则处理与其他致病菌相同；其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污染附加的问题在接种这份尿标本时，为何在原始接种区有一个不长菌的区域？菌株数量耻骨上吸取物，肾脏尿，输尿管尿（手术室获得），肾造口术和膀胱镜检查操作：0.01ml 接种于血平皿，0.001ml 接种于血平皿和科玛嘉平皿和Eugon 肉汤菌落计数<10,000 CFU/ml>10,000 CFU/ml任何菌生长（假如仅在Eugon 肉汤中生长，则报告<100 CFU/ml)1 or 2解释性鉴定 (a, e)确定的鉴定和药敏 (b, d, e)确定可疑病原菌的鉴定和药敏 (b, d, f)确定可疑病原菌的鉴定和药敏(b, d, f)>=3咨询部门主任或ID 医师混杂的革兰阳性菌<10,000 CFU/ml Final At 总检测时间Day 2假如不生长，报告无生长 ( <100CFU/ml )Day 2无生长 ( <100CFU/ml )无生长 ( <1000 CFU/ml )Day 2混杂革兰阳性菌<10,000 CFU/ml 尿的处理方案Table 1表1诊断性&直接导管菌落计数接种于血平皿，0.001ml 接种于血平皿和科玛嘉平皿可能的报告清洁留取，ileal loop ，内置尿管&福氏尿管操作：0.001ml 接种于血平皿和科玛嘉平皿菌落计数f. 假如是乳酸杆菌或阴道加德纳菌则用形态学鉴定。
微生物标准操作流程
微生物标准操作流程(总18页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--目录生物安全柜操作规程及维护 (4)实验室高压蒸气灭菌器操作程序 (8)物体表面细菌监测 (10)医护人员手指细菌监测 (11)空气中细菌含量的监测 (12)环境卫生学监测质控标准 (14)使用中消毒剂与无菌物品保存液的质控程序 (15)一次性医疗用品微生物监测 (16)紫外线消毒质量控制程序 (17)污水的细菌监测 (总大肠菌群) (18)正确洗手的手法 (20)生物安全柜操作规程及维护1.目的：为了满足生物安全操作的要求，并且达到在操作时保护操作人员的目的，使细菌操作达到无菌操作的要求，便于操作的标准化。
2.原理：通过使用空气超高过滤器（ULPA）的过滤，使仪器内部的空气洁净度达到100级，使细菌的一般操作限制在一个相对密闭的环境中，不但保护操作人员，还可满足操作的标准化。
3.工作条件：环境温度：18－30℃相对湿度：<80%安装的环境必须达到一定的洁净度；远离人员通道及有潜在干扰气流的位置；柜后及两侧各留30cm的空隙，顶部30-35cm空隙。
环境必须有良好的通风设备。
4、操作步骤：生物安全柜的设置已经设置完全，如果需要重新设置请参看HFsafe生物安全柜使用说明。
具体操作步骤为：4.1将电源插头插入准备好的固定插座，连通电源。
4.2有系统管理员(即本室负责人)开启玻璃门门锁，并将总开关置于开位置“！”，此时系统开始上电。
4.3检查显示及按钮的各项功能，具体见后附注（注意：UV灯的测试除外，开启UV灯时必须将前玻璃门关闭）。
4.4当系统稳定后，对设备进行安全性检查。
（检查项目包括：工作室平均垂直风速；工作室内可操作区域洁净度达到100级；设备的密封有没有被破坏。
所有的安全检查项目中的洁净度建议由当地卫生防疫部门来进行尘埃粒子数、沉降菌和菌落数的检测，看是否符合其工作室的洁净度要求）。