脲酶试验标准操作规程

脲酶试验标准操作规程

1 .目的

规范脲酶试验标准操作规程

2. 原理

某些细菌具有脲酶，能分解尿素生成氨，使培养基

变碱，酚红指示剂随之变红色。

3. 试剂

3.1尿素氮培养基成分

2.0g

2.0g

18 〜20g

1000ml

7.0

3.2制备 将上述成分（除酚红、尿素外 中，加热溶解，校正 PH ，加入酚红溶液，分装每瓶

100ml , 置120 C 灭菌15分钟备用。临用时，加热溶解，冷却至55 C 左

右，加入无菌的尿素溶液 10ml ，摇匀，无菌分装于灭菌试 管，每支2ml ，并置成斜面备用。

蛋白胨

1.0g 氯化钠

葡萄糖

1.0g 磷酸二氢钾

0.4 %酚红溶液

3.0ml 琼脂

20 %尿素溶液

100 ml 蒸馏水

PH ）混合于蒸馏水

4. 质控

大肠埃希菌ACTT 25922为阴性，奇异变形杆菌ACTT 49005为阳性。

5. 操作步骤

将待检菌接种至含尿素培养基中，35 C孵育1〜4日。

6. 结果判断

红色者为阳性。

7. 注意事项

所有尿素培养基均依靠出现碱性来证实，故对脲酶不是

特异性的。某些细菌如铜绿假单胞菌利用培养基的蛋白胨可

分解为多量氨基酸，使PH升高呈碱性，造成假阳性。因此必须用无尿素的相同培养基作为对照。

8. 临床意义

主要应用于肠杆菌科中的变形杆菌属细菌的鉴别。奇异变形

杆菌和普通变形杆菌脲酶阳性。