(完整word版)医学分子生物学
分子生物学精选全文

可编辑修改精选全文完整版第一章绪论1、分子生物学简史:分子生物学是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子形态、结构特征及其重要性、规律性而相互联系的科学,是人类从分子水平上真正揭示生物世界的奥秘,由被动的适应自然界到主动的改造和重组自然界的基础科学。
2、分子生物学发展阶段第一阶段:分子生物学发展的萌芽阶段第二阶段:分子生物学的建立和发展阶段第三阶段:分子生物学的深入发展和应用阶段3、分子生物学的主要研究内容DNA重组技术;基因表达调控研究;生物大分子的结构与功能的研究;基因组、功能基因组与生物信息学的研究第二章染色体与DNA1、名词解释:不重复序列:在单倍体基因组中只有一个或几个拷贝的DNA序列。
真核生物的大多数基因在单倍体中都是单拷贝。
中度重复序列:每个基因组中10~104个拷贝。
平均长度为300 bp,一般是不编码序列,广泛散布在非重复序列之间。
可能在基因调控中起重要作用。
常有数千个类似序列,各重复数百次,构成一个序列家族。
高度重复序列:只存在于真核生物中,占基因组的10%~60%,由6~10个碱基组成。
卫星DNA(satellite DNA):又称随体DNA。
卫星DNA是一类高度重复序列DNA。
这类DNA是高度浓缩的,是异染色质的组成部分。
微卫星DNA(microsatellite DNA):又称短串联重复序列,是真核生物基因组重复序列中的主要组成部分,主要由串联重复单元组成。
重叠基因(overlapping gene,nested gene):具有部分共同核苷酸序列的基因,及同一段DNA携带了两种或两种以上不同蛋白质的编码信息。
重叠的序列可以是调控基因也可以是结构基因部分。
多顺反子(polycistronic mRNA ) :编码多个蛋白质的mRNA称为多顺反子mRNA 。
单顺反子(monocistronic mRNA) :只编码一个蛋白质的mRNA称为单顺反子mRNA。
DNA的转座:又称移位(transposition),是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。
(完整word版)医学分子生物学名词解释-2
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1.转录泡(三元复合物):转录泡是由RNA聚合酶核心酶、DNA模板链以及转录形成的RNA新链三者结合形成的转录复合物.在转录的延伸阶段,RNA聚合酶使DNA双螺旋解链,暴露出长度约为17bp的局部单链区,因外形酷似泡状结构故称之为转录泡2.3.密码子:mRNA上每3 个核苷酸翻译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸,这 3 个核苷酸称为密码,也叫三联子密码4.摆动假说:在密码子与反密码子的配对中,前两对严格遵守碱基配对原则,第三对碱基有一定的自由度,可以”摆动",因而使某些tRNA可以识别1个以上的密码子.5.SD序列:位于原核生物起始密码子上游7~12个核苷酸处的保守区,该序列能与16SrRNA的3端互补,促使mRNA与核糖体的结合,与翻译的起始有关。
6.校正tRNA:校正tRNA通过改变反密码子区校正突变。
可分为无义突变的校正RNA和错义突变的校正RNA、移码突变的校正RNA。
7.无义突变:在蛋白质的结构基因中,一个核苷酸的改变使代表某个氨基酸的密码子变成终止密码子(UAG、UGA、UAA),使蛋白质合成提前终止,合成无功能的或无意义的多肽的突变,叫做无义突变.8.错义突变:错义突变是由于结构基因中某个核苷酸的变化而使一种氨基酸的密码变成另一种氨基酸的密码.9.移码突变:在正常地DNA分子中,碱基缺失或增加非3地倍数,造成这位置之后的一系列编码发生移位错误的改变,这种现象称移码突变。
10.可读框:可读框是指mRNA上从起始密码子到终止密码子的一段序列.11.信号肽:常指新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移(定位)的N—末端氨基酸序列(有时不一定在N端)。
12.分子伴侣:一类能帮助其他蛋白质进行正确组装、折叠、转运、介导错误折叠的蛋白质进行降解的蛋白。
当蛋白质折叠时,它们能保护蛋白质分子免受其它蛋白质的干扰。
很多分子伴侣属于热休克蛋白(例如HSP-60),它们在细胞受热时大量合成.热激可导致蛋白质稳定性降低,增加错误折叠的几率,因此在受到热刺激时,细胞中的蛋白质需要更多热休克蛋白的帮助。
(完整word版)分子生物学知识点归纳
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分子生物学1.DNA的一级结构:指DNA分子中核苷酸的排列顺序。
2.DNA的二级结构:指两条DNA单链形成的双螺旋结构、三股螺旋结构以及四股螺旋结构。
3.DNA的三级结构:双链DNA进一步扭曲盘旋形成的超螺旋结构。
4.DNA的甲基化:DNA的一级结构中,有一些碱基可以通过加上一个甲基而被修饰,称为DNA的甲基化。
甲基化修饰在原核生物DNA中多为对一些酶切位点的修饰,其作用是对自身DNA产生保护作用。
真核生物中的DNA甲基化则在基因表达调控中有重要作用。
真核生物DNA中,几乎所有的甲基化都发生于二核苷酸序列5’-CG-3’的C上,即5’-mCG-3’.5.CG岛:基因组DNA中大部分CG二核苷酸是高度甲基化的,但有些成簇的、稳定的非甲基化的CG小片段,称为CG岛,存在于整个基因组中。
“CG”岛特点是G+C含量高以及大部分CG二核苷酸缺乏甲基化。
6.DNA双螺旋结构模型要点:(1)DNA是反向平行的互补双链结构。
(2)DNA双链是右手螺旋结构。
螺旋每旋转一周包含了10对碱基,螺距为3.4nm. DNA 双链说形成的螺旋直径为2 nm。
每个碱基旋转角度为36度。
DNA双螺旋分子表面存在一个大沟和一个小沟,目前认为这些沟状结构与蛋白质和DNA间的识别有关。
(3)疏水力和氢键维系DNA双螺旋结构的稳定。
DNA双链结构的稳定横向依靠两条链互补碱基间的氢键维系,纵向则靠碱基平面间的疏水性堆积力维持。
7.核小体的组成:染色质的基本组成单位被称为核小体,由DNA和5种组蛋白H1,H2A,H2B,H3和H4共同构成。
各两分子的H2A,H2B,H3和H4共同构成八聚体的核心组蛋白,DNA双螺旋缠绕在这一核心上形成核小体的核心颗粒。
核小体的核心颗粒之间再由DNA和组蛋白H1构成的连接区连接起来形成串珠样结构。
8.顺反子(Cistron):由结构基因转录生成的RNA序列亦称为顺反子。
9.单顺反子(monocistron):真核生物的一个结构基因与相应的调控区组成一个完整的基因,即一个表达单位,转录物为一个单顺反子。
医学分子生物学(MedicalMolecularBiology)
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三、典型病毒基因组介绍 (一)SV40病毒(猴空泡病毒40) 基因组
晚期转录区
Ori
早期转录区
早期基因 T抗原基因 转录区 t抗原基因 VP1 SV40病毒 晚期基因 VP2 基因组 转录区 VP3 复制起始点 调控区 启动子 增强子
(二)乙型肝炎病毒(hepatitis B virus , HBV)基因组
病毒衣壳二十面对称结构
包膜蛋白 包膜
核酸 核衣壳 衣壳
Schematic diagram of human immunodefiency virus(HIV)
杆状病毒衣壳为螺旋对称结构
RNA Protein subunit
烟草 mosaic 病毒
一、病毒基因组核酸的主要类型
双链DNA 单股正链DNA 双链RNA 单股负链RNA 单股正链RNA
(二)转位因子的类型及其特征
插入序列 转位因子 转座子 可转座的噬菌体
1、插入序列 (insertion sequence , IS) 特征: (1)是一类较小的没有表型效应 的转座因子,长度约700~2000bp; (2)由一个转位酶基因和两侧的 反向重复序列(inverted repeat sequence,IR)组成; (3)可双向插入靶位点,在插入 后的两侧可形成顺向重复序列 (direct repeat sequence ,DR)
4、位点特异重组系统:控制质 粒在细菌细胞内的多聚体与单体 相互转变过程。 att位点 Int酶 位点特异 Xis酶 重组系统 FIS因子 IHF因子
质粒自 身提供 宿主提供
5、质粒的不相容性:具有相同 复制起始点和分配区的两种质粒 不能共同存在于同一个细菌细胞 中,这种现象称为质粒的不相容 性。
(完整word版)分子生物学简答题
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课后思考题1. 试述乳糖操纵子的结构及调控原理?乳糖操纵子开放转录需要什么条件?(1)乳糖操纵子的结构:含Z、Y、A3个结构基因,分别编码乳糖代谢的3个酶;一个操纵序列O,一个启动序列P,一个CAP结合位点共同构成乳糖操纵子的调控区.乳糖操纵子的上游还有一个调节基因I。
(2)阻遏蛋白的负性调节:I基因的表达产物为一种阻遏蛋白,在没有乳糖存在时,阻遏蛋白与O序列结合,阻碍RNA聚合酶与P序列结合,抑制转录启动,乳糖操作子处于阻遏状态;当有乳糖存在时,乳糖转变为半乳糖,后者结合阻遏蛋白,使构象变化,阻遏蛋白与O序列解离,在CAP蛋白协作下发生转录。
(3)CAP的正性调节:分解代谢基因激活蛋白(CAP)分子内存在DNA和cAMP结合位点.当没有葡萄糖时,cAMP浓度较高,cAMP与CAP结合,cAMP-CAP结合于CAP结合位点,提高RNA转录活性;当有葡萄糖时,cAMP浓度降低,cAMP与CAP结合受阻,乳糖操纵子表达下降。
(4)协调调节:乳糖操纵子阻遏蛋白的负性调节和CAP的正性调节机制协调合作,CAP不能激活被阻遏蛋白封闭基因的表达,但如果没有CAP存在来加强转录活性,即使阻遏蛋白从操纵序列上解离仍无转录活性。
因此,乳糖操纵子开放转录需要的条件是:1)诱导物乳糖存在,解除阻遏蛋白的负调节。
2)葡萄糖缺乏,CAP蛋白活化,启动正调节。
2.试述原核生物和真核生物基因表达调控特点的异同.(1)相同点:转录起始是基因表达调控的关键环节。
(2)不同点:1)原核生物基因表达调控主要包括转录和翻译水平;真核基因表达调控包括染色质活化、转录、转录后加工、翻译、翻译后加工多个层次.2)原核基因表达调控主要为负调节;真核生物基因表达调控主要为正调节。
3)原核转录起始不需要转录因子,RNA聚合酶直接结合启动子,由σ因子决定基因表达的特异性;真核转录起始需要基础、特异两类转录因子,依赖DNA—蛋白质、蛋白质-蛋白质相互作用,调控转录激活。
分子生物学完整版
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第一章遗传物质基础1.2 DNA的结构DNA一级结构:定义:指DNA 分子中四种脱氧核苷酸按照一定的排列顺序,通过磷酸二酯键连接形成的多核苷酸。
方向性:5’→3’5’-端:C5’没有和其他核苷酸相连的末端残基,含磷酸,又称5’磷酸端3’-端:C3’没有和其他核苷酸相连的末端残基,含有-OH,又称3’羟基端通常用bp、kb或Mb的数目表示大小生理pH下,核酸是多聚阴离子化合物DNA的二级结构:DNA双螺旋结构的研究背景:碱基组分分析(Chargaff 规则):不同来源DNA:[A] = [T],[G] = [C]。
不同物种DNA:A+T/G+C不同。
A+G = T+C DNA双螺旋结构模型要点:主链:1由脱氧核糖和磷酸基通过酯键交替连接而成。
2二条主链相互平行而走向相反形成右手双螺旋构型3主链处于螺旋外侧,亲水性4螺旋直径为2nm,形成大沟及小沟相间碱基对:1 碱基位于螺旋的内侧,同一平面的碱基在二条主链间形成碱基对(A=T 和G=C),以氢键维系。
2碱基平面取向与螺旋轴垂直。
螺距3.4nm,螺旋周期含10碱基对,相邻碱基平面间距0.34nm。
作用力:碱基堆积力:在水相中,轴向平行相邻的碱基平面将自发地相互靠近,从而形成碱基堆积,它的实质是疏水相互作用和范德华引力。
DNA双螺旋结构的多态性:DNA的分子结构是动态的,在不同的条件下可以有所不同。
A构象B构象C构象D构象Z构象DNA的三级结构:定义:双螺旋DNA进一步扭曲盘绕则形成其三级结构,是一种比双螺旋更高层次的空间构象。
超螺旋是DNA三级结构的主要形式。
超螺旋按其方向分分类正超螺旋:形成超螺旋时的旋转方向与DNA双螺旋方向相同,结果加大了DNA分子内部张力,有紧旋效应。
负超螺旋:形成超螺旋时旋转方向与DNA双螺旋方向相反,旋转结果使DNA分子内部张力减小,称为松旋效应。
在自然条件下共价封闭环状DNA呈负超螺旋结构。
DNA超螺旋的特点:1环状DNA分子:双螺旋扭曲而形成麻花状的超螺旋结构。
分子生物学完整版
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分子生物学The Coming of Wisdom With Time Though leaves are many, the root is one Through all the lying days of my youthI swayed my leaves and flowers in the sun; Now I may wither into the truth.---- William Butler Yeats (1916)*绪论进化论与细胞学说结合---现代生物学1859 ,?物种起源?--Charles Darwin“物竞天择,适者生存〞物种发生变异将生物学归于自然科学的行列19世纪中叶,细胞学说动植物的根本单元是细胞细胞成为生物学研究的首要对象分子生物学在遗传学和生物化学的根底上诞生和开展1857-1864,Gregor Mendel奥地利的修道士,1865发表?植物杂交实验?,1884去世,到1900年他的理论才被重新发现。
遗传学的奠基人,对性状遗传产生了理性认识。
1910-1915, T.H.Morgan创立了遗传的染色体理论以果蝇为材料。
发现了遗传性状的连锁定律。
将代表某一特定性状的基因,同某一特定的染色体联系起来。
对核酸的化学研究1869年,瑞典的F.Miescher提取了细胞核中的中复合物,不溶于稀酸,可溶于稀碱,含磷的酸性物质,但由于在技术上未能进一步提纯,受到嘲讽,而最终放弃。
核酸的化学研究在这之后的50年停滞,直到Avery的研究才有了突破。
1885—1900年间,Kossel、Johnew、Levine证实核酸最简单的单体结构是碱基-核糖-磷酸构成的核苷酸,有四种类型的碱基A T(U) C G。
1929年又确定了核酸有两种,一种是脱氧核糖核酸(DNA),另一种是核糖核酸(RNA)。
1928年,Griffith 肺炎双球菌的转化英国人,为揭示DNA是遗传物质奠定了根底第一个以令人信服的实验证明---基因的化学本质是DNA1935--1944年,Oswald Avery 以肺炎链球菌为材料证明,DNA分子是遗传信息的载体。
(完整word版)分子生物学期末复习试题及答案

一、(完整word版)分子生物学期末复习试题及答案二、一、亲爱的读者:二、本文内容由我和我的同事精心收集整理后编辑发布到文库,发布之前我们对文中内容进行详细的校对,但难免会有错误的地方,如果有错误的地方请您评论区留言,我们予以纠正,如果本文档对您有帮助,请您下载收藏以便随时调用。
下面是本文详细内容。
三、四、最后最您生活愉快 ~O(∩_∩)O ~五、三、名词解释四、分子生物学:包括对蛋白质和核酸等生物大分子的结构与功能,以及从分子水平研究生命活动RNA组学:RNA组学研究细胞中snmRNAs的种类、结构和功能。
同一生物体内不同种类的细胞、同一细胞在不同时间、不同状态下snmRNAs的表达具有时间和空间特异性。
增色效应: DNA变性时其溶液OD260增高的现象。
减色效应: DNA复性时其溶液OD260降低的现象。
Tm:变性是在一个相当窄的温度范围内完成,在这一范围内,紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度,又称融解温度(melting temperature, Tm)。
其大小与G+C含量成正比。
解链曲线:如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260(absorbance,A,A260代表溶液在260nm处的吸光率)值作图,所得的曲线称为解链曲线。
DNA复性:在适当条件下,变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象,这一现象称为复性。
核酸分子杂交:在DNA变性后的复性过程中,如果将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中,只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系,在适宜的条件(温度及离子强度)下,就可以在不同的分子间形成杂化双链,这种现象称为核酸分子杂交。
基因:广义是指原核生物、真核生物以及病毒的DNA 和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列,是遗传的基本单位。
狭义指能产生一个特定蛋白质的DNA序列。
断裂基因:不连续的基因称为断裂基因,指基因的编码序列在DNA上不连续排列而被不编码的序列所隔开。
(word版)医学分子生物学考试题及答案,文档
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分子生物学一、选择题:1.1953年,哪两位科学家发现DNA双螺旋结构〔〕A.G.W.BeadleC.H.G.Khoran a和E.L.TatumB.F.Jacob和M.W.NirenbergD.J和J.L.Monod.D.Watson和F.H.C.Crick2.以下描述正确的选项是〔〕A.DNA是遗传物质,蛋白质是遗传信息的表达者B.蛋白质是遗传物质,DNA是遗传信息的表达者C.RNA是遗传物质,蛋白质和DNA是遗传信息的表达者D.DNA和蛋白质均是遗传物质E.DNA和蛋白质均是遗传物质,RNA是遗传信息的表达者3.基因组是指一〔〕A.生物遗传信息的载体B.整个染色体C.细胞或生物体中一套完整的遗传物质D.核基因组E.线粒体基因组4.人工质粒作为商品供给使用最为广泛的质粒是〔〕A.pBR322B.pUCC.pSP系列D.ColEIE.PC1945.大型质粒具有以下何种特征〔〕A.质粒长B.无整合作用C.少数为接合型D.质粒长60-120kbE.低拷贝数质粒6.研究最早的病毒是〔〕A.DNA病毒B.SV40C.腺病毒D.乙型肝炎病毒E.RNA病毒7.乙型肝炎病毒的基因组是〔〕A.一个带有局部单链区的环状双链DNA分子B.线性双链DNA分子C.双链环状DNA分子D.环状超螺旋DNA分子E.从培养的猴肾细胞中别离出来8.关于RNA病毒正确的选项是〔一〕18.19.20. A.RNA病毒基因组以双链多见 B.病毒RNA链有正负之分21. C.RNA病毒少有变异D.RNA病毒的复制依赖于宿主细胞22. E.许多哺乳类逆转录病毒属于单负链双体RNA23.9.丙型肝炎病毒基因组是〔〕24. A.环状双链RNA分子B.单链RNA病毒25. C.逆转录病毒D.单链正股RNA病毒26. E.单负链双体RNA27.HIV是属于〔〕28. A.获得性免疫缺陷综合征的病原体B.线性双链DNA分子29. C.单链正股RNA病毒D.单链负股RNA病毒30.E.双链环状DNA分子31..染色质的根本结构单位是,〔〕32. A.核小体B.核质蛋白C.螺线管D.拌环E.微带33.目前认为,人类细胞的整个基因组DNA序列用于编码蛋白质的比例仅为〔〕34.1%B.2%一3%C.5%D.8%E.10%35.结构基因中的编码序列是指〔〕36.内含子B.外显子C.增强子D.寂静子E.TATA盒37.以下DNA序列ATGAGCTAG一TACGTACTAGCTACTA可能形成〔〕38.发夹结构B.回文结构C.a一卫星DNAD.SIRSE.LIRS39.限制性内切酶AluI的酶切位点是’___〔〕40. A.AGyCTB.TCyGAC.AyGCT____41. D.TCGyAE.AGCyT42.核小体的形成使DNA压缩了多少倍〔〕43.2-3倍B.5-6倍C.6---7倍D.8--9倍E.10倍以上44.染色质大局部以什么结构形式存在〔〕45.DNA与组蛋白复合物B.核小体C.30nm螺线管纤维46. D.700nm后环E.1000nm纤维47.以下哪种现象只在真核生物基因组中存在〔〕48. A.内含子B.外显子C.DNAD.质粒E.重叠基因49.人类体细胞染色体的数目是多少条〔〕50. A.22B.23C.44D.46E.4851.用荧光染料哇叮因氮芥对染色体进行染色使染色体显带,称为〔〕显带显带显带显带显带.对染色体端粒进行的显带称为〔〕显带显带显带显带显带染色质和染色体是〔〕同一物质在细胞中的不同时期的两种不同的存在形式不同物质在细胞中的不同时期的两种不同的存在形式同一物质在细胞的同一时期的不同表现不同物质在细胞的同一时期的不同表现E.染色质是染色体的前体物质在一次细胞周期中,需时最短的期是〔〕G1期期期期期在细胞周期中,DNA的复制发生在〔〕G期期期期期种类最多的遗传病是’〔〕A.单基因病B.多基因病C.染色体病D.体细胞遗传病E.肿瘤最早被人类研究的遗传病是〔〕A.尿黑酸尿病B.白化病C.慢性粒细胞白血病D.镰状细胞贫血E.苯丙酮尿症与I型糖尿病相关的基因是〔〕A.HLA基因B.胰岛素基因C.胰岛素受体基因D.胰岛素受体后基因E.信号传导系统苯丙酮尿症是由于哪种基因突变导致的〔〕A.酪氨酸转氨酶B.磷酸毗哆醛,C.苯丙氨酸经化酶D.多巴脱狡酶E.酪氨酸经化酶染色体末端的结构称为〔〕端点B.端粒C.端粒酶D.着丝粒E.随体哪种癌基因的染色体易位可导致慢件粒细胞白血病的发生〔〕c一mycB.c一ablC.c一sisD.bet一1E.bet一2.第一别离到的抑癌基因是〔〕APC基因B.BRCA基因C.DCC基因D.p53基因E.Rb基因人类基因组30亿对碱基估计存在编码基因数是〔〕万一2万个万一4万个万一6万个万一8万个万一10万个关于蛋白质亚基的聚合体形状以下哪项不是〔〕A.线性聚合体B.环状聚合体C.螺旋状聚合体D.球状聚合体E.菱状聚合体真核生物的细胞器DNA为哪种分子〔〕A.双链线状B.双链环状C.单链线状D.单链环状E.缺口环状对DNA分子而言,以下哪种因素属于无法防止的有害因素_.〔〕A.过酸B.过碱C.高温RNA中mRNA占百分之多少〔〕一5B.15一一一一85一般28S〔或23S)RNA的荧光强度约为18S〔或16S)RNA的几倍,否那么提示有RNA的降解〔〕EDTA可赘合什么离子,抑制DNA酶的活性〔〕43.RNA溶于什么溶液中时,可在一20℃中长期保存〔〕44. A.TE溶液B.醋酸钠C.双蒸水D.70%乙醇E.无水乙醇45.在PCR反响中,引物的长度一般以多少个核昔酸为宜〔〕46. A.10~15B.15一23C.16-25D.18一25E二18--3047.在PCR反响中,TM等于〔〕48.4(A+T)+2(C+G)B.2(A+T)+4〔C+G)49.(A+T)+(C+G)D.2(A+C)+4(T+G)50.2(A+G)+4(C+T)51.关于核酸探针的描述以下何项不正确〔〕52.可以是DNAB.可以是RNAC.可用放射性标记53. D.可用非放射性标记 E.必须是单链核酸54.生物芯片技术是在哪一方面应用技术根底上开展起来的〔〕A.核酸的测序B.基因诊断C.基因表达差异分析D.外源微生物的鉴定E.药物的筛选电泳的根本原理是〔〕溶液中带正电颗粒与逞负电颗粒之间的静电引力产生的移动B.在电场中带电颗粒向着与本身电性相反的电极移动C.带电颗粒向电极移动的力只与电场强度有关带电颗粒向电极移动的迁移率必须相等二带电颗粒向电极移动的迁移率必须相同等电聚焦电泳中最关键的问题是〔〕电渗作用B.电荷效应C.扩散作用分子筛作用E.吸附作用生物芯片技术是在哪一方面应用技术根底上开展起来的〔〕核酸的测序B.基因诊断C.基因表达差异分析D.外源微生物的鉴定E.药物的筛选国际推荐的血清〔浆〕葡萄糖测定参考方法是〔〕A.福林一吴宪法B.邻甲苯胺法C.铁氰化钾法D.葡萄糖氧化酶法E.己糖激酶法pH对酶促反响没有影响的是〔〕A.酶蛋白的三级结构B.酶蛋白中必需基团的解离状况C.酶蛋白的一级结构D.底物的离解状态酶的生物学活性细胞内含量较多的核昔酸是.〔〕5,一AT3,一ATPC.3,一dATPD.3,一UTPE.3,一dUTP嘿吟核昔酸从头合成途径首先合成的是〔〕XMPB.IMPC.GMPD.AMPE.CMP嗓吟核昔酸合成的特点是〔〕A.先合成嘿吟碱,再与磷酸核糖结合B.先合成嗓岭碱,再与氨基甲酞磷酸结合在磷酸核糖焦磷酸的根底上逐步合成嚷吟核昔酸在氨基甲酞磷酸根底上逐步合成嗓岭核昔酸E.不耗能甲氨蝶岭可用于治疗白血病的原因是它可以直接〔〕抑制二氢叶酸复原酶B.抑制DNA的合成酶系的活性C.抑制蛋白质的分解低谢D.阻断蛋白质的合成代谢E.破坏DNA分子的结构痛风症是因为血中某种物质在关节、软组织处沉积,其成分为〔〕尿酸B.尿素C.胆固醇D.黄喋吟E.次黄嗓吟同型半胧氨酸和N5一甲基四氢叶酸反响生成蛋氨酸时所必需的维生素为〔〕叶酸B.二氢叶酸C.四氢叶酸D.维生素BitE.5一甲基四氢叶酸人体内黑色素来自哪个氨基酸〔〕A.PheB.TyrC.TrpD.HisE.Glu苯丙酮尿症的发生是由于〔〕A.苯丙酮酸氧化酶的缺乏B.酪氨酸经化酶的缺陷C.苯丙氨酸转氨酶的缺陷D.酪氨酸脱梭酶的缺陷E.苯丙氨酸经化酶的缺陷以下哪种反响障碍与白化病的发生有关〔〕A.酪氨酸一对经苯丙酮酸B.酪氨酸一酪胺C.多巴~黑色素D.色氨酸~色胺E.色氨酸}5一经色胺.降低血糖的激素是〔〕A.胰岛素B.胰高血糖素C.肾上腺素D.生长激素E.皮质醇胆固醇可转变为以下哪种维生素〔〕维生素AB.维生素DC.维生素K维生素EE.维生素C以下哪项不是水溶性维生素〔〕维生素B:B.维生素几C.维生素PPD.维生素氏E.维生素D.关于脂溶性维生素,下述哪项不对〔〕A.溶于有机溶剂B.在食物中与脂类共存‘C.随脂类一同吸收D.体内很少蓄积E.可与脂蛋白结合苯巴比妥治疗婴儿先天性黄疽的机制主要是〔〕A.诱导葡萄糖醛酸转移酶的生成B.使肝重量增加、体积增大C.肝血流量增多D.肝细胞摄取胆红素能力加强E.使Y蛋白的含量增加二、填空题1.由于发生变异所导致的疾病称为分子病。
医学分子生物学3篇
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医学分子生物学第一篇:医学分子生物学概述医学分子生物学是研究与医学相关的生物分子、生物分子相互作用和生物分子的生理、病理功能等方面的分子生物学研究领域。
它的研究内容包括:抗体、核酸、糖类、蛋白质等生物分子的结构、功能及代谢调控、信号转导、病理机制等及其在药理学、病理学、诊断学和治疗学中的应用。
医学分子生物学的研究重点是生物分子的病理功能以及应用相关。
通过对生物分子的结构和功能进行研究,可以揭示这些分子在疾病发生中的作用机制,以及开发新的诊断方法和治疗手段。
在现代医学中,医学分子生物学在病因、诊断、治疗、预防、基因工程等方面都发挥着重要作用。
医学分子生物学中应用广泛的技术包括基因工程、分子克隆、核酸杂交、蛋白质结晶、质谱分析、核磁共振、光谱分析、单细胞技术等。
这些技术的应用在医学分子生物学中,有助于研究生物分子的结构和功能。
综上所述,医学分子生物学是基于分子生物学的基础上应用在医学领域的一门交叉学科。
它的研究有助于揭示疾病发生的分子机制,同时推动医药科技的发展。
第二篇:医学分子生物学在疾病诊断中的应用医学分子生物学在疾病诊断中有着广泛的应用。
通过对一些特定分子的检测,可以实现对许多疾病的早期诊断和治疗。
例如,在DNA水平上,PCR(聚合酶链式反应)等技术的应用可以实现对基因突变等遗传疾病的分子诊断。
在蛋白质水平上,ELISA(酶联免疫吸附试验)、Western blotting(免疫印迹法)等技术的应用则可以实现对许多蛋白质的检测,如抗体、酶、HIV蛋白质等。
在临床上,医学分子生物学的应用可以实现对很多疾病的早期诊断,如早期癌症的诊断。
此外,医学分子生物学还可以用于监测治疗和预测疾病的预后,如对病毒感染的监测等。
同时,医学分子生物学也为疾病的治疗提供了更多的选择,如对特定分子靶点的药物设计和开发,如抗体药物、蛋白质药物等。
这些药物可以更加精准地治疗疾病,减少不必要的副作用和治疗成本。
综上所述,医学分子生物学在疾病诊断中的应用有着广泛的发展前景。
(完整word)分子生物学检验完整版
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1病原生物基因组在医学上有何应用?详见书P3a菌种鉴定b确定病毒感染和病毒载量c病毒分析d细菌耐药监测和分子流行病学调查2什么是原癌基因,原癌基因有什么特性,原癌基因可以分为哪些种类以及原癌基因常见的激活机制有哪些?原癌基因是指人类或其他动物细胞(以及致癌病毒)固有的一类基因,能诱导细胞正常转化并使之获得新生物特征的基因总称.特性:进化上高度保守,负责调控正常细胞生命活动,可以转化为癌基因。
功能分类:生长因子,生长因子受体,信号转导蛋白,核调节蛋白,细胞周期调节蛋白,抑制凋亡蛋白激活机制:插入激活,基因重排,基因点突变,基因扩增,基因转录改变3试述Down综合征(21三体综合征)的主要临床特征及核型。
临床特征:生长发育障碍,智力低.呆滞面容,又称伸舌样痴呆。
40%患者有先天性心脏畸形。
肌张力低,50%患者有贯通手,男患者无生育能力,女患者少数有生育能力,遗传风险高。
核型:92。
5%患者游离型:核型为47,XX(XY),+212.5%患者为嵌合型:46,XX(XY)/47,XX(XY),+215%患者为易位型:46,XX(XY),-14,+t(14q21q)4简述淋球菌感染的主要传统实验室诊断方法及其主要特点,对比分析分子生物学方法的优势1直接涂片染镜检:敏感度和特异性差,不能用于确诊。
2分离培养法:诊断NG感染的金标准,但是其对标本和培养及营养要求高,培养周期长,出报告慢,难以满足临床要求。
3免疫学法:分泌物标本中的非特异性反应严重以及抗体法间的稳定性和条件限制,推广受限.分子生物学的优点:敏感,特异,可直接从了临床标本中检出含量很低的病原菌,适应于快速检测5、在单基因遗传病的分子生物学检验中,点突变检测常用方法有哪些?1异源双链分析法(HA)2突变体富集PCR法3变性梯度凝胶电泳法4化学切割错配法5等位基因特异性寡核苷酸分析法6DNA 芯片技术7连接酶链反应8等位基因特异性扩增法9RNA酶A切割法10染色体原位杂交11荧光原位杂交技术6、简述白假丝酵母菌的分子生物学检验方法白假丝酵母菌分子生物学检验主要包括白假丝酵母菌特异性核酸(DNA RNA)的检测、基因分型和耐药基因分析等。
医学分子生物学
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医学分子生物学
Yingzi Kang Ph.D Dept. of biochemistry, Tianjin Medical University
基本内容
第二篇 蛋白质
第四篇 细胞增 殖、分化与细胞 凋亡的分子机制
第一篇 基因
第三篇 细胞信 号转导的分子机 制(略)
第五篇 分子生 物学实验技术
cDNA芯片为杂交检测的一个发展。
核苷酸序列分析 (sequencing)
测序分析是基因研究中最精确的分析,所以又称为一级结构分析。 一级结构的了解是进一步分析基因结构和功能关系的前提,同时 对基因表达、调控的研究也是非常重要的。
主要方法是sanger提出的酶法(末端终止法)和Maxam、 Gilbert提出的化学降解法。
生物大分子结构研究概念:应用物理学和化学研究核酸大分子结构和功能。
基因与基因组的概念
1
基因是生物体的遗传物 质,一般是指与生物体 某些性状有关的核酸 (结构基因),以及负 责调节控制基因活动的 调控基因。
2
生物体内全部基因称为 基因组(genome), 包括了任何染色体体内 中的任何一个基因,是 一个很庞大的范围。
其他载体:λ噬菌体、粘粒、病毒等
基因研究的几种重要分析方法
01
限制性内切 酶酶谱分析
02
核酸分子杂 交
03
核苷酸序列 分析
限制性内切酶谱
利用内切酶的功能对基因组或单个基因进行酶切,经过多 种酶(至少三个)的多个切点的反复比较,可以得到某一 基因的酶切图谱。
如在某些疾病(特别是遗传病)时,基因结构或碱基序列 发生变化(突变、缺失、插入),此时酶切图谱会有改变。 利用限制性片段长度多态性(RFLP)进行分析。
分子生物学,绪论,1(Word最新版)
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分子生物学,绪论,1通过整理的分子生物学,绪论,1相关文档,渴望对大家有所扶植,感谢观看!绪论一、医学分子生物学的概念分子生物学(molecular biology)是在分子水平探讨生命现象的科学,以探讨生命现象的本质为目的,通过对生物大分子核酸、蛋白质等结构、功能及相互作用等的探讨来阐明生命的分子基础,探讨生命的奇异。
医学分子生物学是利用分子生物学的理论与技术,从分子水平探讨疾病的发生发展机制,疾病的预料与风险评价,疾病的临床诊断与治疗,疾病的预防与限制的科学。
目前,分子生物学是生命科学中发展最快的领域,并且与诸多学科有着广泛的交叉与渗透,它是生命科学的前沿学科。
二、医学分子生物学探讨内容医学分子生物学探讨的主要内容有:① 生物大分子的结构与功能及分子间的相互作用。
主要探讨核酸、蛋白质、酶的结构与功能及蛋白质与蛋白质、核酸与核酸、核酸与蛋白质、核酸与其它生物大分子之间的相互作用。
② 基因与基因组。
③ 遗传信息的传递、表达与调控。
④ 细胞的增殖与分化:包括癌基因与抑癌基因、肽类生长因子、细胞周期及其调控的分子机理等。
⑤细胞通讯与细胞内信号传导。
⑥ 分子生物学技术:主要包括分子杂交技术、聚合酶链反应技术、基因工程与蛋白质工程等。
⑦ 基因与疾病。
⑧基因诊断与基因治疗。
三、分子生物学的发展史分子生物学的重大发觉构成了分子生物学的发展历程。
尤其是20世纪50年头,Watson 和Crick提出的DNA 双螺旋结构,标记着现代分子生物学的兴起,为揭开人类生命现象的本质,探究疾病现象,实现特性化医学奠定了基础。
1944年,Oswald T. Avery等进行了肺炎双球菌转化试验,证明白遗传物质是DNA。
1953年,Watson和Crick发觉了DNA的二级结构—双螺旋结构。
1954年,Crick提出了遗传信息传递的“中心法则”。
1958年,Meselson和Stahl用试验证明白DNA半保留复制模型。
1967年,在大肠杆菌中发觉了DNA连接酶。
医学分子生物学
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利用各种方法将外源基因导入细胞内,以观察其对细胞生长、分化、凋亡等 过程的影响,同时也可以用于基因治疗和药物筛选等。
生物信息学分析
数据挖掘
对大规模的基因组、蛋白质组等数据进行挖掘和分析,发现其中的模式、规律和 潜在生物标志物等。
预测模型
基于大量数据,建立预测模型,如疾病预测模型、药物作用预测模型等,为医学 研究和诊断提供参考。
医学分子生物学的研究内容与意义
• 研究内容 • 基因组与基因组学:研究基因组结构与功能,揭示基因表达调控机制。 • 转录组与转录组学:研究RNA种类、表达与调控,探索蛋白质翻译过程。 • 蛋白质组与蛋白质组学:分析蛋白质种类、结构与功能,揭示蛋白质相互作用网络。 • 生物信息学:运用计算机技术分析生物数据,挖掘生物分子网络与疾病关联的规律。 • 意义 • 揭示生命现象的本质:通过研究生物分子的结构与功能,揭示生命现象的本质与规律。 • 疾病诊断与治疗:通过研究疾病发生发展的分子机制,为疾病诊断与治疗提供新思路和新方法。 • 药物研发:基于生物分子的结构与功能研究,为新药研发提供理论依据和实验支持。
06
医学分子生物学研究的伦理 与法规
医学分子生物学研究的伦理问题
人类基因编辑的伦理问题
随着CRISPR/Cas9技术的发展,人类基因编辑成为可能,但直接在人类胚胎中进行基因编 辑仍然存在许多伦理争议,例如是否允许改变人类基因、是否应将基因改造后的胚胎植入 子宫等。
人体实验的伦理问题
在医学分子生物学研究中,常常需要进行人体实验,但人体实验必须遵循严格的伦理规范 ,确保受试者的权利和安全。例如,必须经过受试者知情同意,不能对受试者造成伤害等 。
医学分子生物学在肿瘤诊断与治疗中的应用
肿瘤基因检测
分子生物学总结完整版
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分子生物学总结完整版分子生物学是一门研究生物大分子,特别是核酸和蛋白质的结构、功能及其相互关系的科学。
它的发展为我们理解生命的奥秘提供了强大的工具和理论基础。
分子生物学的核心内容之一是对核酸,尤其是 DNA 的研究。
DNA 是遗传信息的携带者,它以双螺旋结构存在。
这种独特的结构使得DNA 能够稳定地储存遗传信息,同时又能通过碱基配对的方式进行复制,从而将遗传信息准确地传递给下一代。
DNA 的复制过程是一个高度精确和复杂的机制,涉及到多种酶和蛋白质的协同作用。
基因是 DNA 上具有特定功能的片段。
基因的表达是指基因中的遗传信息被转录为 RNA,然后再翻译为蛋白质的过程。
转录是在 RNA 聚合酶的作用下,以 DNA 为模板合成 RNA 的过程。
而翻译则是在核糖体上,以 mRNA 为模板,按照密码子的规则合成蛋白质的过程。
在这个过程中,tRNA 起着重要的作用,它能够识别密码子并携带相应的氨基酸。
蛋白质是生命活动的主要执行者,其结构和功能的研究也是分子生物学的重要内容。
蛋白质的结构分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。
一级结构是指氨基酸的线性排列顺序,二级结构则包括α螺旋、β折叠等,三级结构是蛋白质的三维空间构象,四级结构是指多个亚基组成的蛋白质的整体结构。
蛋白质的功能与其结构密切相关,例如酶通过其特定的结构与底物结合并催化反应。
分子生物学技术的发展为研究带来了巨大的便利。
PCR 技术(聚合酶链式反应)能够快速扩增特定的 DNA 片段,在基因检测、疾病诊断等领域发挥了重要作用。
基因克隆技术使得我们能够获得大量特定的基因,为基因功能的研究和应用提供了基础。
DNA 测序技术的不断发展,让我们能够快速准确地测定 DNA 的序列,为基因组学的研究提供了有力支持。
在医学领域,分子生物学的应用非常广泛。
通过对疾病相关基因的研究,我们能够更好地理解疾病的发生机制,为疾病的诊断和治疗提供新的靶点和方法。
例如,在肿瘤研究中,发现了许多与肿瘤发生发展相关的基因,如癌基因和抑癌基因。
《分子生物学》word版
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第一章绪论1.分子生物学(Molecular Biology)是研究核酸、蛋白质等生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学,是人类从分子水平上真正揭示生物世界的奥秘,由被动地适应自然界转向主动地改造和重组自然界的基础学科。
狭义的概念偏重于核酸(基因)的分子生物学,主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制过程。
也涉及与这些过程相关的蛋白质与酶的结构与功能的研究2.功能基因组学(Functional Genomics or post—Genomics)基因的识别与鉴定基因功能信息的提取与证实基因表达谱的绘制 (microarray)蛋白质水平上基因互作的探测3.蛋白质组学(Proteome)1994年由Wilkins等提出蛋白质组的概念:一个基因组所表达的全部蛋白质。
基因组----固定蛋白质组----动态4.生物信息学(Bioinformatics) 生物大分子的结构与功能信息通过计算机语言到分辨,提取,分析,比较,预测生物信息。
第三章核酸的结构与功能1.DNA 的一级结构:DNA分子中各脱氧核苷酸之间的连接方式(3´-5´磷酸二酯键)和排列顺序叫做DNA 的一级结构,简称为碱基序列。
一级结构的走向的规定为5´→3´。
不同的DNA分子具有不同的核苷酸排列顺序,因此携带有不同的遗传信息。
Chargaff首先注意到DNA碱基组成的某些规律性,在1950年总结出DNA碱基组成的规律:·腺嘌呤和胸腺嘧啶的摩尔数相等,即 A=T。
·鸟嘌呤和胞腺嘧啶的摩尔数也相等,即G=C。
·含氨基的碱基总数等于含酮基碱基总数,即A+C=G+T。
·嘌呤的总数等于嘧啶的总数,即A+G=C+T。
2.DNA的双螺旋模型特点:a. 两条反向平行的多聚核苷酸链沿一个假设的中心轴右旋相互盘绕而形成。
b. 磷酸和脱氧核糖单位作为不变的骨架组成位于外侧,作为可变成分的碱基位于内侧,链间碱基按A—T,G—C配对(碱基配对原则,Chargaff定律)c.右手反平行双螺旋,d.主链位于螺旋外侧,碱基位于内侧两条链e.间存在碱基互补f.螺旋的螺距为3.4nm,直径为2nm,g.螺旋的稳定因素为氢键和碱基堆砌力3.DNA的双螺旋结构稳定因素:·氢键·碱基堆集力·正负电荷的作用发夹(hairpin):当同一个核酸分子中一段碱基序列附近紧接着一段它的互补序列时,核酸连有可能自身回折配对产生一个反平行的双螺旋结构4.凸环(bulge loop):当互补序列在分子中距离较远时,形成双链区域时产生较大的单链环,如果两个可能的互补序列中的一个包含一段不配对的多余序列时产生凸环。
分子生物学(完美版)
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分子生物学绪论一、学科定义分子生物学是在分子水平研究生物结构和功能,研究生命现象的物质基础和揭示生命过程的基本活动规律的学科。
主要是指遗传、生殖、生长和发育等生命基本特征的分子机理的阐明,从而为利用和改造生物奠定理论基础和提供新的手段。
二、研究对象、主要内容1. 对象:从广义的讲:蛋白质及核酸等所有生物大分子结构和功能的研究都属于分子生物学的范畴。
2. 主要内容我们学习的基础分子生物学主要包括以下内容:DNA 、染色体及基因组(分子生物学的物质基础)DNA 的复制与修复(遗传信息的世代传递,确保其精确的机制) 基因重组(生物变异与进化)RNA 的生物合成(遗传信息传递中的转录过程,转录后的加工) 蛋白质的生物合成(遗传信息传递中的翻译过程,遗传密码子)基因表达调控(基因的时序表达;3~4万个蛋白质编码基因是否意味着只有3万种蛋白质) DNA 操作技术(分子生物学发展的基础、工具)三、发展简史1.理论基础阶段分子生物学是一门深层的理论与实验科学,它必须在自然科学发展到一定的深度后才逐渐形成。
尤其得益于细胞学、遗传学和生物化学的发展。
2.形成发展阶段由于核酸化学的发展,1953年美国科学家Watson 和英国科学家Crick 在前人的基础上(Chargaff, Wilkins 及Franklin 等),提出了DNA 的双螺旋结构模型,为充分揭示遗传信息的传递规律铺平了道路(即本课程中第二章的基础)。
分子生物学的研究对生命科学的发展起着巨大的推动作用,受到国际科学界的高度重视,据统计从1910年到2001年,约50多人次科学家荣获诺贝尔化学奖及生理医学奖。
3.未来发展阶段就基因组研究来说,它遵循的基本思路是:基因组→转录组→蛋白质组。
四、分子生物学在生命科学中的位置1.分子生物学是从生物化学发展出来的一门科学。
2.分子生物学与微生物关系密切,曾认为分子生物学主要是E.coli 的分子生物学。
3.与遗传学的关系,均涉及到遗传信息的载体及传递过程,为相辅相成的学科。
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医学分子生物学名词解释:结构基因(structural genes):可被转录形成 mRNA,并转译成多肽链,构成各种结构蛋白质,催化各种生化反应的酶和激素等。
ORF 开放阅读框架( open reading frame,ORF ):是指DNA链上,由蛋白质合成的起始密码开始,到终止密码为止的一个连续编码。
C值(C-value):一种生物体单倍体基因组DNA的总量,用以衡量基因组的大小。
C值矛盾/ C值悖论:C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。
基因组(genome):是指生物体全套遗传信息,包括所有基因和基因间的区域重叠基因是指同一段DNA片段能够参与编码两种甚至两种以上的蛋白质分子。
SNP单核苷酸多态性(singl e nucleotid e polymorphism)是由基因组DNA上的单个碱基的变异引起的DNA序列多态性。
是人群中个体差异最具代表性的DNA多态性,相当一部分还直接或间接与个体的表型差异、对疾病的易感性或抵抗能力、对药物的反应性等相关。
SNP被认为是一种能稳定遗传的早期突变蛋白质组(proteomics):指应用各种技术手段来研究蛋白质组的一门新兴科学,其目的是从整体的角度分析细胞内动态变化的蛋白质组成成份、表达水平与修饰状态,了解蛋白质之间的相互作用与联系,揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律.质谱技术mass spectrometry,MS样品分子离子化后,根据不同离子间质核比(m/z)的差异来分离并确定分子量开放阅读框=ORF基因工程又称为重组DNA技术,是指将外源基因通过体外重组后导入受体细胞,并使其能在受体细胞内复制和表达的技术。
限制性核酸内切酶(restriction endonuclease, RE)是一类能识别和切割双链DNA特定核苷酸序列的核酸水解酶。
逆转录酶依赖RNA的DNA聚合酶,它以RNA为模板、4种dNTP为底物,催化合成DNA,其功能主要有:1)逆转录作用;2)核酸酶H的水解作用;3)依赖DNA的DNA聚合酶作用。
粘性末端被限制酶切割后突出的部分就是粘性末端(来自360问答)载体vector指能携带外源DNA片段导入宿主细胞进行扩增或表达的工具。
载体的本质为DNA。
多克隆位点载体上具有多个限制酶的单一切点(即在载体的其他部位无这些酶的相同切点)称为多克隆位点报告基因(reporter gene):是指处于待测基因下游并通过转录和表达水平来反映上游待测基因功能的基因,又称报道基因。
转化以质粒DNA或以它为载体构建的重组子导入细菌的过程称为转化(transformation)感受态细胞细胞膜结构改变、通透性增加并具有摄取外源DNA能力的细胞称谓感受态细胞(competent cell)。
碱裂解法在NaOH提供的高pH(12.0~12.6)条件下,用强阳离子去垢剂SDS破坏细胞壁,裂解细胞,与NaOH共同使宿主细胞的蛋白质与染色体DNA发生变性,释放出质粒DNA。
核酸变性变性(denaturation):在某些理化因素的作用下,维系DNA分子二级结构的氢键和碱基堆积力受到破坏,DNA由双螺旋变成单链过程。
核酸复性复性(renaturation):指变性 DNA 在适当条件下,二条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象,它是变性的一种逆转过程核酸分子杂交(molecular hybridization):两条DNA链或两条RNA链或一条DNA链和一条RNA链按碱基互补的原则缔合成异质双链的过程称为分子杂交或核酸分子杂交。
融解温度( melting temperature,Tm):在热变性过程中,紫外吸收增加值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度或融解温度退火(annealing):热变性DNA一般经缓慢冷却后即可复性,此过程称之为“退火”。
核酸探针(nucleic acid probe):是指能与特定核苷酸序列发生特异性互补杂交,杂交后可用特殊方法检测的已知被标记的核酸分子。
Northern杂交Northern印迹(Northern blot)杂交是应用DNA探针检测特异mRNA的另一种膜上印迹技术Southern杂交一种经典的膜上检测DNA的杂交技术。
通常是指通过吸附或电泳方法将经凝胶电泳分离的DNA从胶上转移到固相载体上,再与特定的核酸探针反应从而达到检测或鉴定DNA的过程。
荧光原位杂交(fluorescence in-situ hybridization, FISH)是一种利用非放射性的荧光信号对原位杂交样本进行检测的技术。
PCR聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术:是利用针对目的DNA序列设计的一对特异引物,以目的DNA序列为模板,在耐热的DNA聚合酶作用下,经过多次“变性-复性-延伸反应”的循环过程,体外扩增目的DNA序列的技术。
巢式PCR:是指使用两对引物,外引物用于扩增含目的DNA片段的大片段,扩增产物作为内引物的模板进一步扩增目的DNA片段的技术。
逆转录PCR(反转录PCR,reverse transcription PCR,RT-PCR):是指在逆转录酶作用下,先将模板RNA逆转录为互补DNA(cDNA),再以cDNA为模板通过PCR进行DNA扩增的技术。
多重PCR该技术是在一个反应体系中加入多对引物,同时扩增出多个核酸片段,由于每对引物扩增的片段长度不同,可用电泳加以鉴别TD PCR根据引物Tm值,选定一个退火温度范围(跨越10-20℃的温度范围,引物Tm值在这个范围之内)。
在设置循环参数时,让退火温度从选定范围的最高温度开始,逐步降低退火温度(每次降低1-5℃),最后结束在选定范围的最低温度。
在每一个退火温度上循环2-5次。
荧光定量PCRFluorescence Quantitive Polymerase Chain Reaction,FQ-PCR)是通过对PCR 扩增反应每个循环结束时产物荧光信号的检测,对起始模板进行定量分析的技术。
问答题高等动物线粒体基因组的特点?1、母系遗传。
子代线粒体基因组来自母亲,父系的线粒体基因组在精卵结合时一般不能进入卵细胞。
因此,在子代个体发育过程中没有父母双方线粒体DNA的重组发生。
2、线粒体DNA损伤后不易修复,突变率较高,可能与衰老及某些疾病有关。
3、遗传密码与通用遗传密码存在差别,如UGA(终止密码子)编码Trp,AGA/AGG (Arg)为终止密码子,AUA(Ile)为起始密码子并编码Met。
真核生物与原核生物基因组的区别?1)真核生物基因分布在多个染色体上,而原核生物只一个染色体。
2)真核生物在基因组转录后的绝大部分前体RNA必须经过剪接过程才能形成成熟的mRNA,而原核生物的基因几乎不需要转录后加工。
3)真核生物细胞中DNA与组蛋白和大量非组蛋白结合,并有核膜将其与细胞质隔离,结果真核细胞的转录和翻译在时间上和空间上都是分离的,而原核细胞的基因转录和翻译是同步的。
4)真核生物的基因是不连续的,中间存在不被翻译的内含子序列,而原核生物几乎每一个基因都是完整的连续的DNA片段。
何谓断裂基因,简述其基本性质?断裂基因:基因的编码序列在DNA上不是连续的,而是被不编码的序列隔开。
性质:1)外显子在基因中的排列顺序和它在成熟mRNA产物中的排列顺序是相同的,2)某种断裂基因在所有组织中都有相同的内含子成分,3)核基因的内含子的可读框通常含无义密码子,没有编码功能。
4)通常内含子上发生的突变不能影响蛋白质的结构,其突变对生物体没有影响;但也有例外。
简述SNP研究的意义?(来自百度)SNP的应用范围较微卫星标记更加宽广,对群体遗传学、制药业、法医学、癌症及遗传性疾病甚至进化的研究都产生不可估量的影响。
人们希望通过研究SNP图谱,更深刻的认识癌症、糖尿病、血管性疾病和某些精神性疾病等发病率高的多基因疾病的发病机制。
1、遗传病致病基因连锁定位。
2、SNP与药物遗传学和药物基因组学:个性化用药何谓蛋白质组学?请介绍目前蛋白质组学研究中最常用的基本技术流程并简述其原理?1、蛋白质组学(proteomics): 指应用各种技术手段来研究蛋白质组的一门新兴科学,其目的是从整体的角度分析细胞内动态变化的蛋白质组成成份、表达水平与修饰状态,了解蛋白质之间的相互作用与联系,揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律.2、基于凝胶的工作流程是目前使用的较为广泛的、发展最为成熟的工作流程:双向电泳的流程主要包括:1)样品制备;2)第一向等电聚焦;3)第二向SDS-PAGE;4)凝胶上蛋白的检测;5)蛋白的软件的检测。
3、双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)的原理:利用蛋白质的等电点与分子量差异分离之。
第一向:变性等电聚焦电泳,根据蛋白质的等电点进行分离;第二向:SDS聚丙烯酰胺电泳,根据蛋白质分子量进行分离。
简要介绍酵母双杂交技术的原理及其用途?酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid system)的原理:1、典型的真核转录因子都含有二个结构域: DNA结合结构域(DNA binding domain,DNA-BD)和转录激活结构域(activation domain,AD)。
2、二个结构域功能上相互独立又互相依赖,只有结合才具完整活性。
3、酵母双杂交系统利用杂交基因通过激活报道基因的表达探测蛋白-蛋白的相互作用。
用途(来自课本P42-43)1、利用酵母双杂交发现新的蛋白质和蛋白质功能2、利用酵母双杂交在细胞内研究抗原和抗体的相互作用3、利用酵母双杂交筛选药物的作用位点以及药物对蛋白质之间相互作用的影响4、利用酵母双杂交建立基因组蛋白连锁图简单介绍质粒及其在分子生物学研究中的应用?质粒(plasmid)是指细菌染色体以外的小分子环状双链DNA,能自我复制和表达其携带的遗传信息。
质粒克隆载体的主要用途:①用于保存和扩增< 2Kb目的DNA。
②构建cDNA文库。
③目的DNA的测序。
④作为核酸杂交时的探针来源。
作为克隆载体的质粒应具备哪些特点?(来自360问答)用作克隆载体的理想质粒一般具备下述特点:①具有松驰型复制子(如ColE1),复制子(replicon)是质粒自我增殖所必不可少的基本条件,并可协助维持使每个细胞含有一定数量的质粒拷贝。
②在复制子外存在几个单一的酶切位点(或多克隆位点),以便目的DNA片段插入。
③具有插入失活的筛选标记,理想的质粒载体应具有两种抗菌素抗性标志,如氨苄青霉素抗性基因(Ampr)和四环素抗性基因(Tetr)等,以便从平板中直接筛选阳性重组子。
④分子量相对较小和较高的拷贝数。
此外,质粒的缺点是容量较小,一般只能接受小于15kb的外来DNA,插入片段过大会导致重组子扩增速度减慢,甚至使插入片段失活。