软骨组织工程的基础和临床应用研究

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 软骨组织工程的基础和临床应用研究上海第二医科大学硕士学位论文软骨组织工程的基础和临床应用研究姓名：

张艳申请学位级别：

硕士专业：

整形外科指导教师：

曹谊林 2003.5.1 圭塑塑三匡型盔堂竺！堡堡主婴塑圭生些堡塞一ＨＣＣＨＡＣＴＥＭＦＢＳＰＢＳＧＡＧＴＧＦＢ１ｂＦＧＦＩＧＦＲＡＲｓＤＡＢＤＭＳ０ＥＣＭＨＭＧＲＴ．ＰＣＲＡｂｂｒｅｖｉａｔｉｏｎＨｕｍａｎｃｏｓｔａｌｃｈｏｎｄｒｏｃｙｔｅｓＨｕｍａｎａｕｒｉｃｕｌａｒｃｈｏｎｄｒｏｃｙｔｅｓＴｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅＦｅｔａｌｂｏｖｉｎｅｓｅｒｌｌｌｌｌＰｈｏｓｐｈａｔｅｂｕｆｆｅｒｅｄｓａｌｉｎｅＧｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎｔｏｒｂｅｔａｌｈｆａｃｔｏｒｈｆａｃｔｏｒｅｐｔｏｒｓｄｉｎｅｘｉｄｅｔ＂ｍａｔｒｉｘｏｕｐｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎＴｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇ

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【方法】细胞来源于小耳畸形病人残余耳软骨和雕刻耳软骨支架后多余肋软骨碎片，实验分３部分，第一部分：

通过细胞计数，倒置相差显微镜观察，阿利新兰法，免疫组化，ＲＴＰＣＲ比较人耳（弹性率耳软骨是肋软骨得率的３．４倍；细胞形态上两者均随老化向类成纤维样形态转化，耳软骨细胞在第三代而肋软骨在第四代大部分转软骨）、肋软骨（透明软骨）细胞的体外获得率及原代至第５代的细胞增殖，细胞形态和细胞外基质分泌的不同之处，研究人软骨细胞体外生长代谢及功能老化规律。

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 第二部分：

在以上研究基础上，取第一代及第四代人肋软骨细胞采用ＤＮＡ微阵矩分析人软骨细胞体外老化过程中基因表达水平的变化。

第三部分：

以体外培养功能良好的耳或肋软骨细胞，按细胞浓度５０Ｘ１０４／ｍｌ和３０％Ｐｌｕｒｏｎｉｃ－Ｆ１２７／ＨａｍｓＦ－１２混匀注入人耳后皮下或耳屏部位，记录注射量。

３－６个月后在小耳畸形病人二期手术时部分取材，进行大体观察，组织块透射电子显微镜检查，组织学染色，及ＩＩ胶原免疫组化染色，对再生的软骨组织进行评价。

［结果】第～部分：

不同类型的人软骨细胞比较：

软骨细胞消化后得变为类成纤维样长梭形；两类细胞增殖能力随细胞老化丽下降；在糖胺多糖（ＧＡＧｓ）的表达水平上肋软骨细胞每代的ＧＡＧｓ含量均高于耳软骨细胞，两者间有显著性差异（Ｐ＜０．０５），但两者均随细胞的传代而减少，下降趋势具有显著相关性（Ｐ＜０．０５），在第四代后处于较低水平；软骨细胞特征性表型ＩＩ胶原在蛋白水平定性观察人肋软...

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