Ezrin蛋白表达与青海汉族和回族胃癌易感性关系研究_苏占海

苏占海 1，王荣华 2，杨生玺 3，侯成荣 3，陈 娟 4，孟 楠 4
（青海大学 １．医学院生物教研室 基础医学研究中心；２．附属医院 肿瘤放疗科； ３．医学院生物教研室；４．医学院临床医学系，青海 西宁 ８１０００１）
摘要：目的 研究 ezrin 蛋白表达与青海汉族、回族胃癌易感性关系；同时研究 ezrin 对胃癌细胞形态、骨架
和增殖的影响。方法 利用免疫组化对正常胃黏膜组织和胃癌组织进行 ezrin 蛋白表达检测，用 Western blot
蛋白印迹法检测两者 ezrin 蛋白表达水平，同时利用细胞转染及免疫荧光标记方法检测 ezrin 对胃癌细胞骨架
调节的作用，而细胞增殖则用 MTT 方法进行检测分析。结果 ezrin 蛋白在青海汉族、回族胃癌组织中表达比
收稿日期：２０１２－１０－０３
*基金项目：国家自然基金（Ｎｏ：８１１６０２５９）；青海省科技厅项目基金（Ｎｏ：２０１０－Ｚ－７２１）
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中国现代医学杂志
第 ２３ 卷
ezrin is associated with differentiation grade, lymph node metastasis, and histological type of gastric cancer in both Han- and Hui (muslim)- ethnics. Through Western blot analysis, it shows ezrin protein expression in normal gastric mucosa is lower than gastric cancer. Furthermore, the protein expression level of ezrin is not related with Han- or Hui (muslim)-ethnic, that means that ezrin expression in gastric cancer is not associated with ethnic speicificity. Ezrin induces cell morphological change, more polarization and microvilli development, and meanwhile it inhibits cell proliferation.【Conclusions】The expression of ezrin protein is higher in gastric cancer than normal gastric mu－ cosa, and it is also associated with the differentiation grade, lymph node metastasis, and histological type of gastric cancer in both Han- and Hui (muslim)-ethnic groups of Qinghai Province. Ezrin protein expression is not related with the ethnic Han- or Hui (muslim)-ethnic in Qinghai Province. Compared with the control, ezrin stimulates cell morphological change, cytoskeleton remodeling and microvilli development, it indicates that ezrin protein is involved with gastric cancer development and metastasis.
第 ２３ 卷第 ２７ 期 ２０１３ 年 ９ 月
中国现代医学杂志 China Journal of Modern Medicine
Vol. 23 No.27 Sep. 2013
文章编号： 1005-8982（2013）27-0047-07
·临床论著·
Ｅｚｒｉｎ 蛋白表达与青海汉族和 回族胃癌易感性关系研究*
发现 ezrin 对细胞骨架、细胞形态及细微结构的调节起重要作用，同时 MTT 检测发现，ezrin 转染的胃癌细胞增
殖受到一定抑制。结论 ezrin 蛋白在青海汉族和回族胃癌组织中表达水平比正常胃癌组织高，同时与胃癌分
化程度、组织学分型和淋巴结转移有关；ezrin 蛋白表达水平与汉族、回族不同民族无关。由于 ezrin 转染细胞在
Key words: ezrin protein; gastric cancer; susceptibility; Han-and Hui-ethnic; cytoskeleton
全世界范围内，胃癌是严重威胁健康的恶性肿 瘤之一。在我国，胃癌发病率高达 ３５％，同时每年有 近 １ 千 ６ 百万患者死于胃癌。青海省属于胃癌高发 地区，根据统计，胃癌发病率在全国占居首位，严重 威胁到当地各族群众的健康［１］。胃癌除了恶性增殖 外，还具有向周围细胞或组织侵袭的特点，而这一过 程与细胞极化、细胞骨架重组有密切关系，但是其具 体分子机制目前并未被彻底阐明清楚。有研究表明， ｅｚｒｉｎ（埃兹）蛋白参与细胞极化、细胞骨架重组和细 胞移动，并与肿瘤侵袭有关［２－３］。
细胞形态、骨架和微绒毛等结构方面比对照组变化大，提示 Ezrin 蛋白与胃癌转染及侵移有关。
关键词：ezrin；胃癌；易感性；汉族和回族；细胞骨架
中图分类号：R735.2
文献标识码：A
Relationship between the susceptibility and Ezrin protein expression in gastric cancer and normal gastric mucosa of
肿瘤发生、发展过程中，发现 ｅｚｒｉｎ 蛋白也参与其中， 如在前列腺上皮瘤组织中有较高表达，而正常前列 腺组织中表达较低或无表达。此外在子宫瘤、神经胶 质瘤、浸润性乳腺癌、食管鳞状癌、黑色素瘤等肿瘤 组织中，均发现相对于正常组织，ｅｚｒｉｎ 蛋白在肿瘤 组织中具有高表达特点［１０－１２］。但青海汉族和回族胃 癌组织中 ｅｚｒｉｎ 蛋白表达特点及是否具有民族特异 性，未见报道。本研究拟利用免疫组化方法，探讨青 海汉族和回族胃癌组织中 ｅｚｒｉｎ 蛋白表达特点，以及 ｅｚｒｉｎ 对胃癌细胞骨架、形态和增殖的影响，为进一 步阐明胃癌在青海地区高发原因及机制提供重要的 实验依据。
ｅｚｒｉｎ 蛋白首次于 １９８１ 年被发现在小鸡小肠微 绒毛细胞骨架成分中起主要作用，在连接质膜与细 胞骨架方面 ｅｚｒｉｎ 蛋白起重要作用。因 ｅｚｒｉｎ（埃兹蛋 白）、ｒａｄｘｉｎ（根蛋白）、ｍｏｅｓｉｎ（膜突蛋白）和 ｍｅｒｌｉｎ（默 林蛋白）在其 Ｎ 端有一保守结构，被称为 ＦＥＲＭ 结 构 域 （ｆｏｕｒ－ｐｏｉｎｔ－ｏｎｅ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎ ｏｆ ｅｚｒｉｎ／ｒａｄｉｘ－ ｉｎ／ｍｏｅｓｉｎ ｄｏｍａｉｎ），因此 ｅｚｒｉｎ 和 ｒａｄｘｉｎ、ｍｏｅｓｉｎ、ｍｅｒ－ ｌｉｎ 蛋白同属于 ４．１ 蛋白家族（４．１ ｐｒｏｔｅｉｎ ｆａｍｉｌｙ）［４－７］。 ｅｚｒｉｎ 参与控制细胞形态、黏附、细胞极化、细胞运动 和细胞骨架重组、细胞增殖以及调节细胞内其他信 号途径，并且通过 Ｒｈｏ，ｃｄｃ４２ 和 Ｒａｃ 家族成员的结 合，进一步影响其他细胞内与细胞骨架、增殖等有关 的信号途径 。 ［８－９］ 近年来，研究发现，ｅｚｒｉｎ 蛋白在小 肠、胃、肺部、胰腺、淋巴结和骨髓中表达较高，而在 心脏、脑、睾丸等组织中表达水平相对较低。在肿瘤 细胞及组织中，发现 ｅｚｒｉｎ 蛋白多分布于包浆和质膜 附近，且在肿瘤中表达相对较高，提示 ｅｚｒｉｎ 蛋白与 肿瘤的发生、侵袭、扩散等行为有关。ｅｚｒｉｎ 自身功能 的调节在于其 Ｔ５６７ 位置氨基酸的磷酸化 ／ 去磷酸 化来实现，同时它还通过与其他 ４．１ 蛋白家族成员 相互整合，来共同参与细胞行为与功能的实现。在
Medicine, Qinghai University, Xining, Qinhai 810001, P.R.China)
Abstract: 【Objective】To explore the relationship between the susceptibility and ezrin protein expression in gastric cancer of Qinghai Han- and Hui (muslim)-ethnic group. Meanwhile, we want to investigate the influences of ezrin on the cell morphology, cell polarization and cell proliferation of gastric cancer. 【Methods】Immunohisto－ chemicial staining is used to detect the expression of ezrin protein in normal gastric mucosa and gastric cancer tis－ sues. Western blot is used to detect the ezrin expression level in both normal and gastric cancer tissues. Cell trans－ fection and immunwk.baidu.comfluorescent staining are used to observer the cell morphology change and cell polarization. Cell proliferation is analyzed by MTT method. 【Results】Ezrin protein expression is much higher in the gastric cancer than normal gastric mucosa in both Han- and Hui-ethnic patients of Qinghai Province, and the expression level of
１ 材料与方法
１．１ 胃癌组织和正常胃黏膜组织 收集 ２００９ 年初 ￣２０１１ 年末青海省人民医院、
青海大学附属医院、青海省西宁市回族医院胃癌患 者手术标本，其中收集 ４８ 例汉族胃癌组织和 ４３ 例 正常胃黏膜组织；４４ 例回族胃癌组织和 ４１ 例正常 胃黏膜组织。术后病理检查按 ＷＨＯ（２００４）分类标准 进行。 １．２ 试剂和仪器
Qinghai Han-and Hui (muslim)-Chinese*
SU Zhan-hai1, WANG Rong-hua2, YANG Sheng-xi3, HOU Cheng-rong3, CHEN Juan4, MENG Nan4
(1.Department of Biology, Basic Medical Science Research Center; 2.Department of Cancer Radiation Oncology, the Affiliated Hospital; 3.Department of Biology; 4.Department of Clinical
正常胃黏膜组织中高，具有显著性差异；同时ezrin 蛋白表达水平与青海汉族、回族胃癌分化程度、淋巴结转移
以及组织学分型有关，而和年龄、性别无关。此外，ezrin 蛋白表达水平与青海汉族、回族民族无关，即无民族特
异性。蛋白印迹法检测结果显示，肿瘤组织中 ezrin 蛋白表达水平比正常组织中较高。而细胞免疫荧光检测中，