乳酸脱氢酶测定SOP_LDH临床意义_检验科生化项目SOP

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血清LDH活力测定可判断白血病的疗效和转归。恶性贫血患者血清LDH总活力显著升高,其程度与贫血的程度成正比。经大量维生素B12治疗后,血清酶可迅速恢复正常。若治疗5d,血清酶活力降低,既可确定诊断,同时也说明药物剂量适当。
10参考文献
[1]西门子医学诊断产品(上海)有限公司乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂说明书。
乳酸脱氢酶测定
文件编号:
版本Hale Waihona Puke Baidu:
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1检测原理
测定由L-乳酸盐生成丙酮酸盐的氧化反应,同时伴有烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)的还原,生成还原的NADH导致340nm波长的吸光率发生变化,这种变化与乳酸脱氢酶的活性成正比。
L-乳酸盐+ NAD+丙酮酸盐+NADH + H+
2标本采集与处理
2.1采血方法
Product和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position,最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置,按F4:ASSIGN CUPS指定样品杯,校准液按顺序排列在样品架上,按F7:LOAD/RUN→F4:RUN或“RUN”运行键运行校准程序。
6质量控制程序
[2]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京:东南大学出版社,2006:416~417。
编写:审核:批准:
空腹采不抗凝静脉血2~3ml。
2.2标本保存
应及时送检,室温可保存7d,不可冷冻。
2.3注意事项
推荐选用血清。不应使用含有EDTA、氟化钠或草酸钾的采血管。标本应避免溶血、脂血、黄疸。
3试剂和设备
3.1试剂
采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。
3.1.1试剂组成
试剂船1~6孔为NAD1.23umol/L,片剂;7孔为L-乳酸盐15.3umol/L,三羟甲基氨基甲烷缓冲液,液体。
6.1质控品准备和储存
质控品为液体,可以直接使用。原包装质控品-10~-70℃可保存到瓶身有效期,未开启2~8℃可保存90d,开启后2~8℃可保存30d。
6.2质控水平和分析批长度
乳酸脱氢酶测定
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每24小至少进行一批,每批2个浓度水平。
6.3质控操作程序
与4.4标本检测步骤相同,只需要按F4:NEXT PRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。
7性能参数
本法线性范围为0~600U/L,对于超过测定线性范围的结果,用酶稀释液对标本进行稀释,输入稀释因子后再重新检测。
8生物参考区间
100~190U/L。
9临床意义
LDH在组织中的活性比血清中高得多,所以当少量组织坏死时,该酶即释放入血而使其在血液中的活性升高。测定此酶常用于心梗、肝病和某些恶性肿瘤的辅助诊断。心肌梗塞病人发病48h后,血清LDH达到峰值,且增高持续时间可达10d。此外进行性肌萎缩、恶性肿瘤、肝炎、溶血性疾病等,LDH亦可增高。
4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。
4.4.3运行:输入完毕后按F3:LOAD LIST,确认样品已经装载在样本盘上,按Run键,仪器开始进行样品检测。
4.4.4检验后标本保存
标本检验完成后用采血管原盖盖紧,保存于标本冷藏库内,按日期放好,保存期为7天。
5校准程序
5.1校准品准备和储存
直接使用,2~8℃保存。
乳酸脱氢酶测定
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4.2样品签收
严格按照标本接收程序签收标本。
4.3标本处理
以2500~3000r/min,离心6~10min,分离血清上机测定。如不能及时检测,分离血清于2-8℃保存。
4.4标本检测
4.4.1手工编排测试项目:样品按编号装入样品架,主屏幕按F1:ENTER DATA,在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号,按enter,在Patient Name处选择性输入病人名字,按enter,在Sample No处输入样品号,按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目,根据需要选择相应的按键改变Mode(按F7:MEXT MODE选择样品管类型)、Priority(按F4:NEXT PRIORITY选择样品的处理模式)、Fluid(按F8:NEXT FLUID选择标本类型)。
5.2校准条件
在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。
5.3校准程序
主屏幕按F5:PROCESS CTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP&RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator、校准液货号Calibrator
3.1.2试剂准备
直接使用。
3.1.3试剂保存
试剂2~8℃保存,有效期内稳定。
3.2质控品
美国BIORAD液体多项质控品。
3.3校准品
西门子校准品。
3.4仪器
SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max全自动生化分析系统。
4操作程序
4.1检测过程流程
签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。
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