乳酸脱氢酶测定SOP_LDH临床意义_检验科生化项目SOP
乳酸脱氢酶（LDH）测定-标准操作程序
三级文件标准操作程序第2页共3页生效日期：目的：建立乳酸脱氢酶（LDH）测定标准操作规程。
范围：适用于乳酸脱氢酶（LDH）测定的标准操作。
职责：生化部检验人员对本规程的实施负责。
规程：1 测定方法：乳酸脱氢酶在催化乳酸生成丙酮酸的同时将NAD+还原成NADH。
通过测定NADH在340nm处吸光度增加的速度可求得乳酸脱氢酶的活力。
LDHL-乳酸+ NAD+─────→丙酮酸+ NADH + H+2 仪器设备GS200全自动生化分析仪3 试剂3.1 乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒，包括试剂1（R-1）、试剂2(R-2)。
试剂成份含量R-1 L-乳酸锂≥76mmol/LR-2 NAD+≥31mmol/l3.2 分析用人基质质控血清（RANDOX）、血清3.3 试剂稳定性与贮存乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒在2-8℃避光保存可稳定一年；试剂R-1、R-2开启后在2-8℃避光保存可稳定一个月。
3.4 样本稳定性与贮存3.4.1 分析用人基质质控血清：该血清自生产之日起，在2-8℃下保持可稳定4年；该血清一旦复融，在25℃下可稳定24小时，在2-8℃下可稳定7天，在-20℃可稳定1个月。
3.4.2 待测血清：2-8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月。
样本不可反复冻融。
不可使用已被污染的样本。
4 操作步骤4.1 打开全自动生化仪，按照GS200全自动生化分析仪操作维护保养程序，完成普三级文件准操作程序第3页共3页生效日期：通测试流程。
4.2 检验方法分析方法：速率A；主波长：340nm；副波长：405nm；样品量：8.0ul；R-1：320ul，R-2：80ul；校准方式：K因子；反应方向：上升；测定温度：37℃。
样本与R-1混匀后反应5分钟，加入R-2混合后延迟53秒，测定104秒。
样本8.0ul 主波长340nmR-1 320ul R-2 80ul 副波长405nm测光测光K=81990 5 6 8 min4.3 计算△A/min×Vt×1000ALT（U/L）= ─────────────6.22×Vs×d△A/min = 每分钟吸光度变化率Vt = 反应液总体积（ml）1000 =U/ml到U/L的转换系数 6.22 = NADH的毫摩尔吸光系数Vs = 样本体积（ml） d = 比色杯光径（cm）5 检验结果的解释抗坏血酸≤50mg/dl、游离胆红素≤684umol/L（40mg/dl），结合胆红素≤855umol/L （50mg/dl）、乳糜微粒≤2500浊度单位对测定无影响。
生化检验项目及临床意义
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------生化检验项目及临床意义一、肝功能检查 1 丙氨酸氨基转移酶（ALT）正常参考值：040IU/L 临床意义：对肝实质病变的诊断及病程变化的观察有重要意义。
注意事项：空腹采血，标本应避免溶血，严重黄疸及浑浊血清也可使结果升高，血清不宜冰冻保存。
2 天门冬氨酸氨基转移酶（AST）正常参考值：040 IU/L 临床意义：急性心肌梗死时升高。
肝病及其它脏器炎症时也常升高。
注意事项：标本应避免溶血，血清不宜冰冻保存。
3 总蛋白（TP）正常参考值：6085 g/L 临床意义：了解体内蛋白质代谢的一般情况。
对肝、肾损害，多发性骨髓瘤等有一定的诊断、鉴别意义。
总蛋白升高常见于高度脱水、休克、慢性肾上腺皮质机能减退等造成的血液浓缩而致；总蛋白降低常见于营养不良和消耗增加（如严重结核病、甲亢、恶性肿瘤及慢性肠道疾病等），合成障碍（如1 / 25肝硬化）蛋白丢失（如肾病综合症、溃疡性结肠炎、烧伤及失血等）。
注意事项：空腹采血，标本应避免溶血。
4 白蛋白（ALB）正常参考值：3555 g/L 临床意义：白蛋白的生理功能广泛，包括营养价值；有效胶体渗透压的保持；血清钙、未结合胆红素、游离脂肪酸、药物、以及甲状腺激素的运输。
白蛋白的多种生理功能使其成为检测肝脏疾病的重要指标。
白蛋白增高常见于严重失水而导致血浆浓缩，使其白蛋白浓度上升。
白蛋白降低基本与总蛋白相同，特别是肝脏、肾脏疾病更为明显。
注意事项：空腹采血，标本应避免溶血。
5 球蛋白（GLB）正常参考值：20-30 g/L 临床意义：球蛋白升高常见于肝硬化、红斑狼疮、硬皮病、风湿及类风湿性关节炎、结核、疟疾、黑热病、血吸虫病、麻风、骨髓瘤、淋巴瘤等。
SOP标准操作程序-LDH
SOP标准操作程序LDH 乳酸脱氢酶（货号：OSR6127，OSR6227）实验原理：在心肌损伤、肝脏疾病、巨细胞贫血、肺栓塞、恶性脓包、皮肤炭疽、肌营养不良等疾病中测定LDH（EC 1.1.1.27）。
测定LDH并结合测定CK肌酸激酶及同功酶能确诊急性心肌梗塞。
方法学：Olympus公司LDH的测定方法采用的是改良Wacker法，反应方向中乳酸转化为丙酮酸。
乳酸与N A D在LDH作用下转化为丙酮酸与NADH。
NADH在340nm下有强吸收，但NAD没有吸收。
在340/380nm下测定吸光度的变化可以测定标本中LDH的活性。
LDH乳酸+NAD-------------﹥丙酮酸+NADH+H标本：病人准备：无特殊要求。
类型：无溶血的血清或肝素化的血浆。
凝固后尽快分离血清，尽量避免溶血。
标本准备：各种不同的研究表明，LDH在不同温度下稳定性各不相同。
尽管结论各不一致，但比较一致认为心脏同功酶比肝脏同功酶更加稳定。
在任何性情况下，标本收集贮存要有合适的操作程序使结果一致。
最好不要放在冰箱或冰冻，在室温应尽快测定。
仪器与材料:仪器：奥林巴斯AU640生化分析仪材料：奥林巴斯AU640乳酸脱氢酶（LDH）参与反应成份的最终浓度：AMP缓冲液（PH 8.9）230 mmol/LL-乳酸70 mmol/LNAD 10 mmol/L其中含有稳定剂与保护剂。
注意：1.此试剂为体外诊断用。
2.不要入口，吞下有害。
保护剂为叠氮钠，与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，如果排向下水道请用大量的水冲洗。
试验用试管的直径在12～16mm。
试剂准备：奥林巴斯AU640的LDH试剂是即开即用的。
无需特殊准备。
执行参数（性能参数）：以下数据是根据奥林巴斯AU640 LDH试剂已经建立的程序。
重复性：重复性的评估是根据NCCLS推荐的典型方法，AU640批内重复性小于3%，总不方法学比较：奥林巴斯AU640 LDH（方法1）与其它奥林巴斯分析仪器（方法2），共同做182个病人标本。
乳酸脱氢酶(LDH)法操作说明
乳酸脱氢酶(LDH)法操作说明乳酸脱氢酶（LDH）法操作说明操作简介：乳酸脱氢酶（LDH）法是一种常用的生物化学分析方法。
本文将详细介绍使用乳酸脱氢酶法进行实验操作的步骤。
材料准备：1. 乳酸脱氢酶试剂盒2. 样品溶液3. 乳酸标准品4. 实验用试管和显微管操作步骤：1. 样品制备- 将待测样品装入实验用试管中。
每个样品应分别装入不同的试管，以避免交叉污染。
- 若样品过浓稀，需要进行适当的稀释，确保样品浓度在测试范围内。
2. 标准曲线制备- 准备不同浓度的乳酸标准品溶液，浓度范围可根据实验要求而定。
- 将不同浓度的标准品溶液分别装入实验用试管中。
3. 试剂添加- 分别向样品管和标准品管中加入相同体积的乳酸脱氢酶试剂，充分混匀。
4. 反应温育- 将所有试管置于恒温水浴中，温度设定为适合乳酸脱氢酶反应的温度（一般为37°C）。
- 在设定的反应温度下，将试管保持在水浴中反应一段时间（时间根据实验要求而定）。
5. 反应终止- 在反应时间结束后，以适当的方法终止反应。
常见的终止方式是添加酸性试剂或采用其他合适的方法。
6. 测定乳酸脱氢酶活性- 使用光度计、分光光度计或其他合适的仪器，测定样品和标准品反应后产生的光吸收值。
吸收值与乳酸脱氢酶活性成正比。
- 通过标准曲线，将样品的吸收值转化为对应的乳酸脱氢酶活性。
注意事项：1. 本实验操作需要严格按照实验室安全操作规范进行，避免任何可能导致个人受伤或污染的行为。
2. 实验过程中的试剂、标样和废液等应按照实验室规定的方法处理，不得随意丢弃。
3. 在操作过程中，保持实验器材和试剂的洁净，尽量避免外界因素对实验结果的影响。
4. 操作时需注意避免交叉污染，尤其是样品的装管和试剂的配比过程。
5. 样品和标准品的选择要合适，浓度范围应覆盖实验要求。
6. 温育过程中，确保试管能均匀受热，并避免发生温度不稳定的情况。
总结：乳酸脱氢酶（LDH）法是一种可靠的生物化学分析方法，适用于乳酸脱氢酶活性的测定。
乳酸脱氢酶(LDH)测定操作规程(SOP)
乳酸脱氢酶(LDH)测定操作规程（SOP）一、用途本产品用于体外定量测定血清、血浆样品中乳酸脱氢酶（LDH）的活性。
二、临床意义（一）概述乳酸脱氢酶（LDH），又称L－乳酸－NAD+氧化还原酶，酶编号为EC 1.1.1.27，分子量约为34000道尔顿。
LDH是一种细胞质酶，存在于所有组织细胞中。
由于组织中的LDH 浓度比血浆高约500倍，即使组织的轻微损伤也将导致血清中活性的明显增高，在肝、心肌、骨骼肌和肾中发现高度组织特异性活性的酶。
（二）临床意义乳酸脱氢酶增高主要见于心肌梗死、肝炎、肺梗死、某些恶性肿瘤、白血病等。
某些肿瘤转移所致的胸腹水中乳酸脱氢酶活力往往升高。
目前，常用于心肌梗死、肝病和某些恶性肿瘤的辅助诊断。
（三）医学决定水平170U／L:此值在参考范围以内，等于或低于此值可排除许多与LDH升高有关的疾病，而考虑其他的诊断。
此值还可作为病人自身的对照，用来与以前或将来的测定值作比较。
300U／L：高于此水平时，应考虑到可能引起LDH升高的各种疾病，如心肌梗塞、肝病变、传染性单核细胞增多症、进行性肌营养不良等。
因此，应作其他各种试验，以作出明确诊断。
血清溶血可使测定值增高，应予以注意。
500U／L：高于此值，常见于巨幼细胞性溶血，急性白血病、慢性粒细胞性白血病、转移癌和肝昏迷等，此时应作其他多种检测来作出正确诊断。
三、检验原理L-乳酸＋NAD+−−LDH丙酮酸＋NADH＋H+−→NADH的生成速率与样品中LDH活性成正比，在340nm波长处，通过连续监测吸光度的上升速率(△A／min)，即可计算出样品中LDH的活性。
四、样品血液样品原则上采集晨起空腹血（禁食12小时）；患者处于平静、休息状态，减少患者由于运动、饮食带来的影响；静脉采血时患者应取坐位或卧位；止血带使用后1分钟内采血，回血后立即松开；正确使用抗凝剂；防止溶血；防止过失性采样。
样品运送过程中应防止过度振荡、防止样品容器的破损、防止样品被污染、防止样品及唯一性标志的丢失和混淆，防止样品对环境的污染、水分蒸发。
血清乳酸脱氢酶(LDH)的临床意义
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血清乳酸脱氢酶（LDH）的临床意义升高：急性心肌炎发作后来2－48小时开始升高，2－4天可达高峰8－9天恢复正常。
另外，肝脏疾病、恶性肿瘤可引起LDH增高。
1.用于AMI和亚急性MI的辅助诊断：
2.由于LD特异性低，通常可用于观察是否存在组织、器官损伤。
如LD持续正常，可除外组织、器官损伤；如LD总酶活性升高，可能有组织、器官损伤，常用于广泛性癌症化疗时的监测。
3.各种疾病的急性时相、（巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、恶性贫血）、心肺疾患（AMI、肺梗塞）、肝胆疾患（肝炎、肝硬化、阻塞性黄疸、心力衰竭和心包炎时肝淤血）、恶性肿瘤、肾疾患、脑血管病变、肌病、休克等LD及其病变部位相应优势的同工酶含量均可增高。
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1。
乳酸脱氢酶检测意义
乳酸脱氢酶检测意义1.引言1.1 概述乳酸脱氢酶（Lactate Dehydrogenase，简称LDH）是一种重要的酶类蛋白质，在细胞内广泛存在，并参与多种生物化学反应。
LDH主要在细胞质和线粒体中发挥作用，参与葡萄糖代谢过程中乳酸的生成和氧化。
乳酸脱氢酶检测是临床常用的一种生化指标，通过检测体内乳酸脱氢酶活性的改变，我们可以了解到人体细胞和组织的代谢状态以及某些疾病的情况。
乳酸脱氢酶检测在临床上应用广泛，特别是在心肌梗死、肝脏疾病和恶性肿瘤等疾病的早期诊断和治疗过程中起到了重要的作用。
乳酸脱氢酶活性的改变可以作为判断心肌梗死程度的重要指标之一，其升高与心肌梗死相关酶的释放密切相关。
此外，肝脏疾病也是乳酸脱氢酶活性异常的常见原因之一，乳酸脱氢酶检测可以帮助早期发现肝功能异常，并进行治疗。
此外，某些恶性肿瘤患者体内乳酸脱氢酶活性也会显著升高，因此乳酸脱氢酶检测也可作为恶性肿瘤的辅助诊断指标。
总之，乳酸脱氢酶检测在临床诊断和治疗中具有重要的意义。
通过监测乳酸脱氢酶活性的变化，我们可以及早发现和诊断一些疾病，提高治疗效果，降低患者的风险。
未来，随着科学技术的进步和研究的不断深入，乳酸脱氢酶检测在临床应用中的价值还将不断被发掘和扩大。
1.2文章结构文章结构部分的内容可以从以下角度进行撰写：文章结构的设计是为了使得读者能够清晰地理解整篇文章的内容，同时也是为了保证文章的逻辑性和连贯性。
本篇文章的结构包括引言、正文和结论三个部分。
引言部分是整篇文章的开端，主要介绍了乳酸脱氢酶检测的背景和意义，引起读者的兴趣，使其了解为什么乳酸脱氢酶检测是一个重要的话题。
在引言的最后，也可以提出一些问题或者预告一下后续的内容，引导读者进入正文部分。
正文部分是本文的核心部分，展开了乳酸脱氢酶的作用和乳酸脱氢酶检测的意义。
在2.1节中，可以详细介绍乳酸脱氢酶的作用机制和在生物体内的分布情况，以及其对于乳酸代谢和能量供应的重要性。
乳酸脱氢酶LDH乳酸法作业指导书
乳酸脱氢酶LDH乳酸法作业指导书
1、前言
试验名称：乳酸脱氢酶测定，英文名称：LDH，
本文件适用于安阳鼎城糖尿病医院检验科生化实验室，目的是指导工作人员正确的在全自动生化分析仪上测定血清、血浆样本中的乳酸脱氢酶活力，以保证测定结果的准确可靠。
本试验用体外定量测定人血清或血浆样本中乳酸脱氢酶的活力。
LDH广泛存在于人各组织，以肝、心肌、肾、骨骼肌、胰腺和肺最多，组织中酶活力约比血清中高1000倍，所以少量组织损伤即可引起血清LDH升高。
但其特异差，在心肌梗塞的诊断中LDH出现较CK晚，阳性率也较低，但维持时间长。
因此仍将此酶与CK、CK－MB、AST、α-HBDH同时测定做为心肌梗塞的诊断和监控的指标。
2、测定原理
本试验测定原理以IFCC推荐的方法为基础，实验分两步进行测定原理如下：
L-乳酸+ NAD+LDH丙酮酸+ NADH
在上述反应中NADH生成的速率与LDH的活性相关，监测340nm波长处吸光度的变化，即可计算出样本中LDH的活性。
血清乳酸脱氢酶(LDH)—生化检测项目
血清乳酸脱氢酶（LDH）
一、检测原理
LDH催化L-乳酸氧化成丙酮酸，同时NAD还原成NADH+，引起340nm吸光度的升高，与样品中LDH的活性成正比。
二、参考区间
血清：109—245U/L
三、临床意义
1、乳酸脱氢酶，属于糖酵解酶的一种，可以在人体的血液、骨骼以及心脏大量存在。
2、乳酸脱氢酶的临床意义较大，可以作为诊断心肌疾病、慢性肝炎以及肝癌等病症的诊断依据。
3、乳酸脱氢酶有5种同工酶的形式，即LDH1、LDH2、LDH3、LDH4和LDH5，在人体的心肌、肾脏以及红细胞中LDH1、LDH2含量比较高，这两项升高常见于心肌炎、心肌梗死、恶性贫血、急性肾皮质坏死。
肝脏和横纹肌以LDH
4、LDH5为主，当升高的时候常见于肝硬化、肝炎以及骨骼肌的损伤等，
LDH3在胰腺、脾脏、甲状腺、肾上腺当中较多，当异常升高时常见于胰腺癌等疾病。
4、血清LDH活性检测可判断白血病的疗效和转归。
LDH文档,乳酸脱氢酶测定试剂盒(LDH)检测标准操作规程
1、方法依据：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒（IFCC法）测定方法2、适用范围：适用于人血清或血浆乳酸脱氢酶(LDH)的测定。
3、试剂仪器：3.1 试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。
3.2未开启的试剂盒避光保存于2℃～8℃有效期为一年。
试剂开瓶后应避光保存，在2℃～8℃可稳定30天。
试剂不可冰冻。
3.3 仪器：迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪.4、操作程序4.1方法原理LDH 催化乳酸氧化为丙酮酸，同时将NAD+还原为NADH，NADH 的生成速率与标本中乳酸脱氢酶的活性成正比。
LDH乳酸+ NAD+ + H2O 丙酮酸+ NADH + H+4.2样本要求新鲜血清、肝素抗凝或EDTA抗凝血浆样本，采集后及时测定，应避免溶血和污染。
4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”。
4.3.2 校准：4.3.2.1 标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱中取出，复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2 校准程序：首次使用校准。
当有以下情况时需重新校准：1）换试剂批号或出现质控漂移时；2）当仪器做完保养后；3）仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行校准，校准通过后进行检测。
4.3.2.3 质控：在标本开始之前做质控，质控通过后方能进行标本的检测。
4.3.3 测试基本参数4.4参考范围115～220 U/L （注：各实验室应有自己的参考范围。
）4.5 方法评价线性范围：4～1000U/L内。
当样本测定值超过上限时，应将样本用生理盐水稀释，重新测定，结果乘以稀释倍数。
精密度：批内变异系数：≤ 3.0%；批间变异系数：≤5.0%。
分析灵敏度：本试剂盒的检测低限不高于4 U/L。
血清乳酸脱氢酶LDH速率法测定-检验科生化室作业书
血清乳酸脱氢酶LDH速率法测定1.实验原理VITROSLDH试剂是一种干燥，多涂层的，在聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。
本法测LDH采用丙酮酸和NADH作底物以产生乳酸和NAD+。
将一滴10ul的患者样品滴于干片上，样品就被分布层均匀地分布并渗透到下面的试剂层。
乳酸脱氢酶催化丙酮酸和NADH生成乳酸和NAD+。
用反射强度变化测出NADH的氧化率，再将其转化成乳酸脱氢酶的活力。
测定方式：速率法波长：340nm测试时间和温度：37℃约5分钟反应过程：LDH丙酮酸+NADH+H+———————→乳酸+NAD2.标本：2.1病人准备：无特殊。
2.2样品类型：血清；肝素锂/钠抗凝血浆。
2.3标本采集与处理：Vitros测试血清和血浆的结果是一致的。
而其它一些方法由于在低速离心时血浆中血小板造成的污染，会使血清和血浆的测试结果有明显差异。
由于VitrosLDH干片对完整血小板内的LDH不敏感，因此对比方法的LDH结果会与Vitros肝素抗凝血浆的测试结果不一致。
样品采集后1小时内离心，然后吸出血清。
处理样品时要将其当成生物污染品。
3.标本的存放：血清、血浆室温下最多2天；不可冷冻保存。
4.标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。
5.标本拒收的标准：污染、溶血标本不能使用。
6.试验材料：6.1测试AST所需的物品包括：Vitros化学定标物Kit3；Vitros特制质控液；Vitros7%BSA稀释液。
强生厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。
6.1.1试剂组成：干片成分：反应成份是NADH和丙酮酸钠。
其它成份有聚合物颗粒，粘合剂，缓冲剂，表面活性剂，聚合物交叉连接剂和稳定剂。
干片标记：试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。
6.1.2试剂准备从冰箱中取出干片盒，在将干片盒打开封装并装入仪器内的干片储藏器之前必须使其达到室温状态18～28℃。
血清乳酸脱氢酶（LDH）活性测定及意义
血清乳酸脱氢酶（LDH）活性测定及意义
乳酸脱氢酶是体内能量代谢过程中的一个重要的酶。
此酶几乎存在于所有组织中，以肝、肾、心肌、骨骼肌、胰腺和肺中为最多。
这些组织中的LDH的活力比血清中高得多。
所以当少量组织坏死时，该酶即释放血而使其他血液中的活力升高。
测定此酶常用于对心梗、肝病和某些恶性肿瘤的辅助诊断。
1．正常参考值
速率法（LDH-L法）：100～240 U/L
比色法：190～310 U/L
2．临床意义：
①心肌梗塞：心肌梗塞后9～20h开始上升，36～60h达到高峰，持续6～10天恢复正
常（比AST、CK持续时间长），因此可作为急性心肌梗塞后期的辅助诊断指标。
②肝脏疾病：急性肝炎，慢性活动性肝炎，肝癌，肝硬化，阻塞性黄疸等。
肿瘤转移
所致的胸腹水中LDH往往也升高。
③血液病：如白血病、贫血、恶性淋巴瘤等，LDH升高。
④骨骼肌损伤、进行性肌萎缩、肺梗塞等。
⑤恶性肿瘤转移所致胸、腹水中乳酸脱氢酶活力往往升高。
⑥正常新生儿LDH水平很高，可达775～2000U/L，满月后为180～430 U/L，以后随
年龄增长逐渐降低，12岁后趋于恒定。
由于测定LD的特异性较差，目前临床上多同时测定乳酸脱氢酶同工酶来判断其组织来源，用于心肌梗塞、肿瘤、肝病等的诊断。
血清乳酸脱氢酶DGKC推荐方法测定-检验科生化室作业书
血清乳酸脱氢酶DGKC推荐方法测定实验原理德国临床化学学会(DGKC)推荐的连续监测法[3]。
LDH催化乳酸氧化为丙酮酸，同时将NAD+还原为NADH，NADH的生成速率与标本中乳酸脱氢酶的活力成正比。
LDHL-乳酸+NAD+丙酮酸+NADH+H+2.标本：2.1病人准备：无特殊。
2.2类型：血清，肝素或EDTA血浆。
3.标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<8%；15～25℃保存：<2%。
4.标本运输：常温条件下保存运输。
5.标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。
6.实验材料6.1试剂申能LDH测定试剂盒（14132071701试剂1（6×64ml），试剂2（6×16ml）6.1.1试剂组成试剂1（R1）：N-甲基-右旋糖酐缓冲液325mmol/LL-乳酸50mmol/L试剂2（R2）：NAD+10mmol/L6.1.2试剂准备试剂为即用式。
6.1.3试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4变质指示当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.5注意事项试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂。
6.2校准品使用DiaSys公司提供的TruCalU校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
6.3质控品具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
7.仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪8.操作步骤8.1项目基本参数：参见AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件9.检验结果的判断与分析10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
生化全套检测的项目及临床意义——检验科宣传资料
“血液生化全套”检查项目及临床意义生化全套检查就是指用生物或化学的方法来对人进行身体检查，生化全套检查内容包括：肝功能（总蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比，总胆红素、直接、间接胆红素，转氨酶）；血脂（总胆固醇，甘油三酯，高、低密度脂蛋白，载脂蛋白）；空腹血糖；肾功能（肌酐、尿素氮）；尿酸；乳酸脱氢酶；肌酸肌酶等。
不同的医院，生化全套检查的项目会有差别，但大致的项目不会相差太大。
1.血清丙氨酸氨基转移酶（ALT或GPT）测定的临床意义：升高：常见于急慢性肝炎、药物性肝损害、脂肪肝、肝硬化、心肌梗塞、心肌炎及胆道疾病等。
2.血清天冬氨酸氨基转移酶（AST或GOT）测定的临床意义：升高：常见于心肌梗塞发病期、急慢性肝炎、中毒性肝炎、心功能不全、皮肌炎等。
3.血清总蛋白测定的临床意义：增高：常见于高度脱水症（如腹泻，呕吐，休克，高热）及多发性骨髓瘤。
降低：常见于恶性肿瘤，重症结核，营养及吸收障碍，肝硬化、肾病综合征，溃疡性结肠炎，烧伤，失血等。
4.血清白蛋白测定的临床意义：增高：常见于严重失水导致血浆浓缩，使白蛋白浓度上升。
降低：基本与总蛋白相同，特别是肝脏病，肾脏疾病更为明显。
5.血清碱性磷酸酶（ALP）测定的临床意义：升高：常见于肝癌、肝硬化、阻塞性黄疸、急慢性黄疸型肝炎、骨细胞瘤、骨转移癌、骨折恢复期。
另外，少年儿童在生长发育期骨胳系统活跃，可使ALP增高。
注意：使用不同绶冲液，结果可出现明显差异。
6.血清r-谷氨酰基转移酶（GGT或r－GT）测定的临床意义：升高：常见于原发性或转移性肝癌、急性肝炎、慢性肝炎活动期肝硬化、急性胰腺炎及心力衰竭等。
7.血清总胆红质测定的临床意义：增高：肝脏疾病，肝外疾病，原发性胆汁性肝硬化溶血性黄疸急性黄疸性肝炎新生儿黄疸慢性活动期肝炎闭塞性黄疸病毒性肝炎胆石症阻塞性黄疸胰头癌肝硬化输血错误8.血清直接胆红素测定临床意义:增高：常见于阻塞性黄疸，肝癌，胰头癌，胆石症等。
乳酸脱氢酶(LDH)法操作说明
LDH法细胞毒性检测：原理：乳酸脱氢酶在胞浆内含量丰富,正常时不能通过细胞膜,当细胞受损或死亡时可释放到细胞外,所以细胞死亡数目与细胞培养上清中LDH活性成正比,用比色法测定实验孔LDH 活性,并与靶细胞对照孔进行比较,可计算效应细胞对靶细胞的杀伤百分率LDH（乳酸脱氢酶）是一种极为稳定的细胞质酶，存在于正常细胞的胞质中，一旦细胞膜受损，LDH 即被释放到细胞外； LDH催化乳酸形成丙酮酸盐，和INT（四唑盐类）反应转化成红色甲臢化合物，可通过酶标仪进行检测。
颜色形成的量与裂解细胞的数目成正比。
应用一个96-孔平板读数计收集可见光波长的吸收值数据。
这个分析可用于测量在细胞介导的细胞毒性分析中细胞膜的完整性，这种情况下目标细胞被效应细胞裂解，可判断细胞受损的程度。
乳酸脱氢酶（LDH）在胞质内含量非常丰富，细胞处于正常状态下其不能通过细胞膜，但当细胞受到损伤或死亡时便可释放到细胞外，此时细胞培养液中 LDH 的活性与细胞的死亡数目呈正比，通过用比色法测定并与靶细胞对照孔的 LDH 活性进行比较，可计算出效应细胞对靶细胞的杀伤百分数。
该实验方法操作简便、快速，可应用于 CTL 和 NK 细胞活性测定及药物、化学物质或放射所引起的细胞毒性，目前已有 LDH 法测定 CTL 活性的试剂盒。
同时设4个对照:靶细胞最大释放组、体积校正对照组、背景对照组和自然释放组按5∶1、10∶1、20∶1（效应细胞∶靶细胞）细胞过度生长、密度过高、离心速度过大、培养箱内外温差过大等因素会造成细胞自然释放乳酸脱氢酶操作流程：设立效应细胞孔（不同浓度的效应细胞设立效应细胞自发释放组）：50μl效应细胞+50μl培养基实验组：靶细胞不变，改变效应细胞：50μl效应细胞+50μl靶细胞设立靶细胞自发释放组：50μl靶细胞+50μl培养基设立靶细胞最大释放组：50μl靶细胞+50μl培养基+10μl裂解液（10×）设立体积校正对照组：100μl培养基+10μl裂解液（10×）设立背景对照组：100μl培养基250g离心4分钟37℃孵育4小时离心前45分钟添加裂解液（10×）至靶细胞最大释放组250g离心4分钟取上清50μl转移至另一孔板（可选）于独立的孔中加50μl LDH阳性对照（1：5000）于每孔中添加50μl再次稀释的底物混合物室温避光孵育30分钟添加50μl终止溶液490nm测吸收值1.靶细胞接种数目的优化1.1.设立检测板1.1.1.准备靶细胞：调整细胞浓度0, 5,000, 10,000, 20,000/100μl，使用与细胞毒分析相同的培养基及孔板终体积。
脑脊液生化乳酸脱氢酶 生化法
脑脊液生化乳酸脱氢酶生化法1. 脑脊液生化乳酸脱氢酶（LDH）是一种重要的生化指标，它在临床诊断和疾病监测中具有很高的价值。
脑脊液是由脑室系统分泌的，主要是通过脑脊液循环而进入脊髓和大脑皮质脑脊液围绕着大脑和脊髓，起着保护和支撑作用。
脑脊液的生化指标对于了解脑脊液循环和神经系统健康状况具有重要意义。
2. 对脑脊液生化乳酸脱氢酶的检测可以帮助我们了解神经系统的代谢情况，并且可以在很多疾病的诊断和治疗中提供重要的参考依据。
其中，乳酸脱氢酶是一种重要的生化酶，它参与乳酸的代谢过程，特别是在神经系统的能量代谢中具有关键的作用。
通过检测这一酶的水平，我们可以了解神经系统的能量代谢情况，从而帮助诊断和治疗相关的疾病。
3. 在临床实践中，脑脊液生化乳酸脱氢酶的测定通常是通过生化分析来完成的。
这种方法可以明确地测定乳酸脱氢酶酶的活性和水平，为临床医生提供重要的信息。
通过生化方法测定脑脊液生化乳酸脱氢酶，可以帮助我们更好地了解神经系统的代谢情况，以及可能存在的疾病状态。
生化法是一种非常有效的方法来评估乳酸脱氢酶水平，从而帮助我们更好地了解神经系统的健康状况。
4. 作为一个重要的生化指标，脑脊液生化乳酸脱氢酶的变化可以反映出神经系统的代谢情况，对于疾病的诊断和治疗具有重要的指导意义。
在临床实践中，我们应该重视脑脊液生化乳酸脱氢酶的检测，并结合临床病史和其他检查结果，全面评估患者的神经系统健康状况。
也应该不断完善和提高相关的检测方法，以更好地服务于临床医学的实践。
总结：脑脊液生化乳酸脱氢酶是神经系统代谢情况的重要指标，在临床诊断和疾病监测中具有很高的价值。
通过生化方法测定脑脊液生化乳酸脱氢酶，可以帮助我们更好地了解神经系统的健康状况，对于疾病的诊断和治疗具有重要的指导意义。
脑脊液生化乳酸脱氢酶的检测和评估尤为重要，对于提高神经系统健康水平和服务于临床医学的实践具有重要的意义。
脑脊液生化乳酸脱氢酶（LDH）作为神经系统代谢情况的重要指标，在临床诊断和疾病监测中具有关键的价值。
血清乳酸脱氢酶LDH测定
血清乳酸脱氢酶LDH测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理LDH催化乳酸氧化为丙酮酸，同时将NAD+还原为NADH，LDHNADH的生成速率与标本中乳酸脱氢酶的活力成正比。
L-乳酸 + NAD+丙酮酸 + NADH + H+3 标本：3.1 病人准备：无特殊。
3.2 类型：血清或EDTA血浆。
3.3 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<8%；15～25℃保存：<2%。
3.4 标本运输：常温条件下保存运输。
3.5 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。
4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司LDH试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成氯化钾 190mmol/L 试剂1（R1）乳酸62.5mmol/LTris缓冲液 100mmol/L试剂2（R2）NAD+ 30mmol/L Tris缓冲液 100mmol/L 4.1.2试剂准备试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂（盒）自生产之日起有效期为12个月。
试剂1 与试剂2 启用后，在2～10℃避光的条件下可稳定14天。
4.1.4 变质指示当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
4.1.5 注意事项试剂中含叠氮钠为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂。
4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的LDH校准品对自动分析仪进行校准。
4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。
6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。
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10参考文献
[1]西门子医学诊断产品（上海）有限公司乳酸脱氢酶（LDH）测定试剂说明书。
[2]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006：416~417。
编写：审核：批准：
7性能参数
本法线性范围为0~600U/L,对于超过测定线性范围的结果，用酶稀释液对标本进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。
8生物参考区间
100~190U/L。
9临床意义
LDH在组织中的活性比血清中高得多，所以当少量组织坏死时，该酶即释放入血而使其在血液中的活性升高。测定此酶常用于心梗、肝病和某些恶性肿瘤的辅助诊断。心肌梗塞病人发病48h后，血清LDH达到峰值，且增高持续时间可达10d。此外进行性肌萎缩、恶性肿瘤、肝炎、溶血性疾病等，LDH亦可增高。
空腹采不抗凝静脉血2~3ml。
2.2标本保存
应及时送检，室温可保存7d,不可冷冻。
2.3注意事项
推荐选用血清。不应使用含有EDTA、氟化钠或草酸钾的采血管。标本应避免溶血、脂血、黄疸。
3试剂和设备
3.1试剂
采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。
3.1.1试剂组成
试剂船1~6孔为NAD1.23umol/L，片剂；7孔为L-乳酸盐15.3umol/L，三羟甲基氨基甲烷缓冲液，液体。
3.1.2试剂准备
直接使用。
3.1.3试剂保存
试剂2~8℃保存，有效期内稳定。
3.2质控品
美国BIORAD液体多项质控品。
3.3校准品
西门子校准品。
3.4仪器
SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max全自动生化分析系统。
4操作程序
4.1检测过程流程
签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。
5.2校准条件
在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。
5.3校准程序
主屏幕按F5:PROCESS CTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号Calibrator
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4.2样品签收
严格按照标本接收程序签收标本。
4.3标本处理
以2500~3000r/min,离心6~10min，分离血清上机测定。如不能及时检测，分离血清于2-8℃保存。
4.4标本检测
4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTER DATA，在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter，在Patient Name处选择性输入病人名字，按enter，在Sample No处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXT MODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXT PRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXT FLUID选择标本类型）。
Product和批号Lot，以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position，最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGN CUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN→F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。
6质量控制程序
4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。
4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOAD LIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。
4.4.4检验后标本保存
标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。
5校准程序
5.1校准品准备和储存
直接使用，2~8℃保存。
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1检测原理
测定由L-乳酸盐生成丙酮酸盐的氧化反应，同时伴有烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）的还原，生成还原的NADH导致340nm波长的吸光率发生变化，这种变化与乳酸脱氢酶的活性成正比。
L-乳酸盐+ NAD+丙酮酸盐+NADH + H+
2标本采集与处理
2.1采血方法
6.1质控品准备和储存
质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10~-70℃可保存到瓶身有效期，未开启2~8℃可保存90d,开启后2~8℃可保存30d。
6.2质控水平和分析批长度
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每24小至少Байду номын сангаас行一批，每批2个浓度水平。
6.3质控操作程序
与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXT PRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。