限制性内切酶

用于DNA基因组物理图谱的组建；基因的定位和基因分离；DNA分子碱基 序列分析；比较相关的DNA分子和遗传工程。 限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是提高自身的防御能力. 限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNA。
ApaI （类型：Type II restriction enzyme ） 识别序列： 5'GGGCC^C 3‘ BamHI（类型：Type II restriction enzyme ） 识别序列： 5' G^GATCC 3' BglII （类型：Type II restriction enzyme ） 识别序列： 5' A^GATCT 3' EcoRI （类型：Type II restriction enzyme ） 识别序列： 5' G^AATTC 3' HindIII （类型：Type II restriction enzyme ） 识别序列： 5' A^AGCTT 3' KpnI （类型：Type II restriction enzyme ） 识别序列： 5' GGTAC^C 3' NcoI （类型：Type II restriction enzyme ） 识别序列： 5' C^CATGG 3' NdeI （类型：Type II restriction enzyme ） 识别序列： 5' CA^TATG 3' NheI （类型：Type II restriction enzyme ） 识别序列： 5' G^CTAGC 3' NotI （类型：Type II restriction enzyme ） 识别序列： 5' GC^GGCCGC 3' SacI （类型：Type II restriction enzyme ） 识别序列： 5' GAGCT^C 3' SalI （类型：Type II restriction enzyme ） 识别序列： 5' G^TCGAC 3' SphI （类型：Type II restriction enzyme ） 识别序列： 5' GCATG^C 3' XbaI （类型：Type II restriction enzyme ） 识别序列： 5' T^CTAGA 3' XhoI （类型：Type II restriction enzyme ） 识别序列： 5' C^TCGAG 3'
限制作用实际就是限制酶降解外源DNA ，维护宿主遗传稳定的保护机制。 甲基化是常见的修饰作用，可使腺嘌呤A和胞嘧啶C甲基化而受到保护。通 过甲基化作用达到识别自身遗传物质和外来遗传物质的目的。所以，能产 生防御病毒侵染的限制酶的细菌，其自身的基因组中可能有该酶识别的序 列，只是该识别序列或酶切位点被甲基化了。但并不是说一旦甲基化了， 所有限制酶都不能切割。大多数限制酶对DNA甲基化敏感，因此当限制酶 目标序列与甲基化位点重叠时，对酶切的影响有3种可能，即不影响、部分 影响、完全阻止。对甲基化DNA的切割能力是限制酶内在和不可预测的特 性，因此，为有效的切割DNA，必须同时考虑DNA甲基化和限制酶对该类 型甲基化的敏感性。另外，现在很多商业限制酶专门用于切割甲基化DNA 。
限制性内切酶
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限制性核酸内切酶是可以识别DNA的特异序列，并在识别位点 或其周围切割双链DNA的一类内切酶，简称限制酶。 根据限制酶的结构，辅因子的需求切位与作用方式，可将限制 酶分为三种类型，分别是第一型、第二型及第三型。 Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基 化的DNA的水解； Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解； III型限制性内切酶同时具有修饰及认知切割的作用。
第一型限制酶
同时具有修饰（modification）及识别切割（restriction）的作用；另有识别（ recognize)DNA上特定碱基序列的能力，通常其切割位（cleavage site）距离识别 位（recognition site）可达数千个碱基之远。例如：EcoB、EcoK。
第二型限制酶
基因工程的 基本流程
只具有识别切割的作用，修饰作用由其他酶进行。所识别的位置多为短的回 文序列（palindrome sequence）；所剪切的碱基序列通常即为所识别的序列 。是遗传工程上，实用性较高的限制酶种类。例如：EcoRI、HindⅢ。
第三型限制酶ห้องสมุดไป่ตู้
与第一型限制酶类似，同时具有修饰及识别切割的作用。可识别短的不对称序列 ，切割位与识别序列约距24-26个碱基对。例如：HinfⅢ。