糖化血红蛋白定量测定试剂盒标准操作程序

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PDQ PLus糖化血红蛋白标准操作程序

1 目的PDQ PLus TM用于体外诊断，定量检测全血中糖化血红蛋白含量。

2 范围糖化血红蛋白的含量检测。

3 职责3.1 生化实验室的检测人员负责糖化血红蛋白含量检测。

3.2质量监督员负责监督检测是否按照程序文件和作业指导书中检验过程的要求进行。

4 原理高压液相亲和层析：PDQ PLusTM采用了高压液相亲和层析将糖化血红蛋白分离出来，然后根据415nm 波长的吸光度的变化生成层析图，并记录和保存在内置的计算机里，仪器内置的软件程序会自动分析层析图并通过打印机输出结果。

5 标本采集、运输、保存静脉血或末梢血，推荐使用EDTA钾盐或肝素氨做抗凝剂。

在-20℃保存稳定6个月，5℃保存稳定2周，25℃保存稳定1周。

冷藏标本应放置至室温，混匀后操作，避免反复冻融。

注意：所有全血标本在分析前要完全混匀。

6 标本拒收标准6.1 不合格标签，包括没有标签，或标本信息不全，或编号错误。

6.2 未使用正确的容器。

6.3 凝结（如EDTA采血管）。

6.4 容量不足。

6.5 未能正确运送。

6.6 受污染。

6.7 检测申请不完全。

7 试剂及仪器设备普莱默斯糖化血红蛋白检测试剂，PDQ PLus TM糖化血红蛋白检测仪。

7.1 包装规格7.2 试剂成份试剂成份：5%酒精、磷酸盐缓冲液、蒸馏水、清洗液、0.001%叠氮化钠、羟基盐等。

7.3 试剂准备标本预处理：稀释模式：30μl的全血与3000μl稀释液混合（1：100），避免起泡沫。

室温孵育5分钟。

全血模式：标本不凝血、足量7.4 试剂储藏和稳定期未处理的标本：密闭保存2-4℃，稳定7天7.5 仪器设备PDQ PLus TM糖化血红蛋白检测仪8 操作步骤按仪器操作说明书输入正确的实验参数和试剂使用通道代号。

具体操作步骤参照PDQ 日常操作规程。

9 结果判断与分析对超出可报告范围的结果,可用稀释液稀释样品，再重新测定，结果乘以稀释倍数。

报告发出时必须经过双重审核，一人测试结果，另一人负责复核结果。

糖化血红蛋白测定仪器使用方法

糖化血红蛋白测定仪器使用方法
糖化血红蛋白测定仪器的使用方法如下：
1. 准备工作：将糖化血红蛋白测定仪器放置在水平稳定的工作台上，并接通电源。

2. 校准仪器：根据仪器使用说明书的指导，进行仪器的校准。

校准可以确保仪器的准确度和可靠性。

3. 样品处理：将采集的血样加入预先提供的试剂中，按照指定的比例混匀。

待混合液稳定后，取出一定量样品。

4. 操作仪器：将取出的样品加入仪器提供的测试池中，确保样品完全覆盖测试池。

按下开始/测试按钮启动测试程序。

5. 等待结果：在仪器显示屏上，可以观察到样品的测试进度。

等待一定时间后，仪器会自动显示测试结果。

6. 计算结果：根据仪器提供的测试结果，可以计算出血液中的糖化血红蛋白含量。

根据仪器使用说明书，进行相应的计算和解释。

7. 清洁和维护：测试结束后，及时清洁仪器的测试池和其他零部件，保证仪器的正常使用和长寿命。

需要注意的是，具体的操作步骤可能会因不同型号的糖化血红
蛋白测定仪器而有所不同。

在使用仪器前，应仔细阅读仪器的使用说明书，并按照说明书的指导进行操作。

艾威德糖化血红蛋白(HbA1c)测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）说明书

糖化血红蛋白(HbA1c)测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）说明书【产品名称】糖化血红蛋白(HbA1c)测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）【包装规格】a)试剂1：1×30mL；试剂2a：1×9.5mL；试剂2b：1×0.5mL；试剂3：2×50mLb)试剂1：2×30mL；试剂2a：2×9.5mL；试剂2b：2×0.5mL；试剂3：4×50mL【预期用途】用于体外定量测定人体血中糖化血红蛋白的含量。

HbA1c主要用于糖尿病的长期控制评价和治疗监测，可提示测试前30～90天的平均血糖水平。

测定糖化血红蛋白常用于糖尿病等病症的辅助诊断[1]。

【检验原理】HbA1c的测定是利用抗原、抗体反应直接测定总Hb中HbA1c的百分含量的方法。

样品中总Hb和HbA1c与胶乳有相同的非特异性吸附而固相化，当加入HbA1c的特异性单克隆抗体后形成胶乳-HbA1c-鼠抗人HbA1c单克隆抗体的复合物，此复合物由于羊抗鼠抗体而形成凝集，凝集量因胶乳表面固相化的HbA1c量的不同而不同。

通过测定其吸光度并与HbA1c百分浓度的标准曲线比较后即可求出样品中HbA1c所占Hb的百分比含量。

【主要组成成分】试剂1主要组分缓冲液15mmol/L胶乳0.13%试剂2a主要组分缓冲液15mmol/L试剂2b主要组分羊抗鼠抗体0.08mg/mL鼠抗人单克隆抗体0.05mg/mL试剂3主要组分溶血剂0.5%注：不同批号试剂盒中各组分未经试验不可互换。

【储存条件及有效期】1.试剂原包装在2～8℃储存，有效期为18个月，生产日期、有效期见标签。

2.开口后的试剂在仪器仓中（2～8℃）可稳定30天。

【适用仪器】艾威德AS-420/AS-660/AS-1200；日立HITACHI7020型/7060型/7180型/7600型/LABOSPECT008AS型；贝克曼AU400/AU480/AU640/AU680/ AU2700/AU5400/AU5800/AU5811/AU5821；佳能TBA-FX8/TBA-120FR/ TBA-2000FR；罗氏cobas8000c702/cobas8000c701/cobas8000c502；西门子SIEMENS ADVIA1800/ADVIA2400；雅培ABBOTT ARCHITECT c8000/ARCHITECT c16000/ARCHITECT ci8200；西森美康SYSMEX BM6010/C；科华KHB卓越310/卓越330/卓越400/卓越450/ZY-1200/ZY-1280；迪瑞CS-240/CS-T300/CS-300B/CS-380/CS-400A/CS-400B/CS-600A/ CS-600B/CS-800A/CS-800B/CS-1200/CS-1200ISE/CS-1300B/CS-1400；迈瑞MINDRAY BS-220/BS-330/BS-350E/BS-380/BS-390/BS-400/BS-430/BS-600/ BS-800/BS-2000M；颐兰贝ES-200/ES-380/ES-480；赛诺迈德SUNMATIK-9050型；雷杜Chemray420；英诺华D280；特康TC6010L；锦瑞GS400；普康6066。

GLU文档,糖化血红蛋白(HbA1c)检测标准操作规程

1、方法依据：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司葡萄糖（GLU）测定试剂盒（葡萄糖氧化酶法）测定方法2、适用范围：适用于人血清、血浆葡萄糖的测定。

3、试剂仪器：3.1 试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。

3.2未开启的试剂盒避光保存于无腐蚀性气体和通风良好的室内，在2℃～8℃有效期为一年。

试剂开瓶后2℃～8℃避光保存可稳定1个月。

试剂不可冰冻。

3.3 仪器：迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪.4、操作程序4.1方法原理葡萄糖被葡萄糖氧化酶氧化后生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，与4-氨基安替比林和对羟基苯甲酸钠缩合，生成醌系色素，通过测定此反应的吸光度可求得葡萄糖的含量。

4.2样本要求空腹血清或血浆。

如血浆在采集30分钟内分离，保存在2℃～8℃可稳定24小时。

4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”。

4.3.2 校准：4.3.2.1 标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱中取出，复溶到室温后上机检测。

4.3.2.2 校准程序：首次使用校准。

当有以下情况时需重新校准：1）换试剂批号或出现质控漂移时；2）当仪器做完保养后；3）仪器进行零件更换时。

每次试验前用准备好的校准品进行校准，校准通过后进行检测。

4.3.2.3 质控：在标本开始之前做质控，质控通过后方能进行标本的检测。

4.3.3 测试基本参数4.4参考范围3.33～6.11 mmol/L（60～110 mg/dL）（注：各实验室应有自己的参考范围。

）4.5 方法评价线性范围：0.3～28 mmol/L。

样本中含量超出可报告范围，请用生理盐水稀释后测定，结果乘以稀释倍数。

反应曲线异常时应进行重复测定确认。

精密度：批内CV ≤ 3.0%批间CV ≤ 5.0%分析灵敏度：本试剂盒的检测低限不高于0.3 mmol/L。

BIO-RADD10糖化血红蛋白检测系统标准操作规程

BIO-RAD D-10糖化血红蛋白检测系统标准操作规程（一）BIO-RAD D-10糖化血红蛋白检测系统开/关机程序1 开机前准备1.1 检查并打开电源开关。

1.2 检查室温是否在15到30摄氏度之间。

1.3 检查外部废物罐水平1.3.1保证废物罐有充足的空间容纳下一次运行所产生的废物。

1.4检查压力。

1.4.1 从MAINTAIN界面,选择50%缓冲液2并设定流速为1.5ML/min;按开始泵按钮。

1.4.2 监测系统压力3到4分钟.假如压力波动不超过5%,记录系统压力在日期日志上。

1.5 检查泄漏情况:当泵在运行时,打开前下部棉班并用眼观察隔舱是否有液体漏出。

1.6 检查打印纸张的供应。

1.7 检查缓冲液和清洗/稀释溶液水平。

1.8 在LOTINFO界面检查剩余的管注射数,假如注射数剩余不足要更换管。

2 开机2.1检查并打开电源开关。

3 分析前准备3.1在启动程序过程中,操作人员检查:缓冲液1水平充足?缓冲液2水平充足?清洗/稀释溶剂水平充足?废物水平,是否要处理?是否要校正?管支持器温度设定?内部废物环路被封?3.2 在开始运行之前,系统必须处于等待状态.选择运行界面标签来接触运行界面.按启动按纽来初始化启动程序.在进行另外别的操作之前允许系统完成5分钟的启动程序.当启动程序完成系统打印一个日期报告。

3.3在开始启动程序时,一声滴答声被听到.状态栏提示系统正处于运行状态并显示当前操作所剩余时间。

3.4 一旦启动程序完成系统会进入等待状。

4 关机4.1 关闭系统电源4.2 紧急关机在系统必须立即被关闭的事件中,操作者必须评估迫切性并执行以下操作之一:4.2.1停止当前运行,允许系统去完成当前操作,按关闭按钮并等信息提示可以安全地去关系统.关上电源并拔掉电源线.本方法应只用于必要时。

4.3 长时间关机4.3.1 假如D-10将要被长时间关闭超过2星期,依照以下程序来保证系统仍旧处于最佳操作状态。

糖化血清蛋白（GSP）测定试剂盒（果糖胺法）

糖化血清蛋白（GSP）测定试剂盒说明书
（果糖胺法）一、原理：
血清葡萄糖能与白蛋白及其它血清蛋白分子N末端的氨基发生非酶促糖化反应，形成高分子酮胺结构。

此酮胺结构能在碱性环境中与硝基四氮唑蓝NBT 发生还原反应，生成甲月替，并以果糖胺DMF为标准参照物进行比色反应。

二、50管试剂盒组成与配制
1、2mmol/LDMF标准液：0.5ml×2瓶，-20℃保存。

2、牛血清白蛋白：0.5ml×2瓶，-20℃保存。

3、NBT显色剂：60ml×2瓶，避光4℃保存。

4、稳定剂：6ml×1瓶，室温保存。

（如凝固，请水浴加热至透明后再用。

）
三、血清中GSP的检测
混匀，37℃水浴15min。

混匀，530nm，1cm光径，空白管调零，比色。

五、计算公式：
测定管吸光度
×标准液浓度（2mmol/L）=GSPmmol/L
标准管吸光度−标准管吸光度
测定管吸光度
×标准管浓度（2mmol/L）×分子量（249）÷1000=GSPmg/L
标准管吸光度
本试剂盒仅用于科研。

糖化血红蛋白的SOP

糖化血红蛋白检测的SOP预期用途适用于体外定量检测人手指末梢血、静脉全血样本中的糖化血红蛋白的浓度。

检验原理糖化血红蛋白检测试剂盒是硼酸亲和色谱层析法。

试剂盒由层析器、R1试剂、R2试剂组成。

R1试剂包括专门裂解红细胞和沉淀血红蛋白及一种结合糖化血红蛋白的蓝色硼酸共轭物。

当血液加至R1试剂中时，红细胞裂解，并且所有的血红蛋白沉淀，硼酸共轭物与糖化血红蛋白的顺式二醇配合物相结合。

一定量的反应混合物加入到层析器，所有沉淀的血红蛋白与糖化血红蛋白结合或未结合的硼酸共轭物残留到层析器膜上。

任何未结合的硼化物通过R2试剂移除。

该沉淀通过使用分析仪分别检测蓝色（糖化血红蛋白）和红色（总血红蛋白）的颜色强度进行定量分析，从而测定血液样本中糖化血红蛋白的百分比。

样本要求：加了抗凝剂（EDTA、肝素、柠檬酸钠）的样本可在2-8℃保存7天，不能用血红蛋白裂解的样本。

不能冻融。

没有添加抗凝剂的手指末梢血和静脉全血样本采样后要立即检测。

检验方法在检测之前所有的检测试剂应平衡至室温。

分析仪内置定标曲线，测试前不需要定标。

A采集5ul的全血样本至R1试管中，混合均匀，至少反应2分钟，最多不能超过3分钟。

B待全血样本与R1反应完毕后，再次摇晃该试管以便组分充分混合。

打开试管吸取25ul的混合物，加入到层析器中。

注意过程中不要触碰到层析器中的滤膜，也不能让样本有气泡产生。

C当步骤2中的混合物被层析器完全吸收后，再取25ul的R2试剂滴到层吸器上，反应大约10秒。

D待R2试剂被完全吸收后，把层析器放到托盘上，用分析仪进行分析。

E分析仪在每次开机时有自动校准功能，校准成功才能开展上述试验。

参考区间参考区间为：4.3-6.0％检验结果的解释血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物是糖化血红蛋白，血糖和血红蛋白的结合生成糖化血红蛋白是不可逆反应，并与血糖浓度成正比，且保持120天左右，所以可以观测到120天之前的血糖浓度。

糖化血红蛋白测试通常可以反应患者近8至12周的血糖控制情况。

糖化血红蛋白液相色谱仪操作流程

糖化血红蛋白液相色谱仪操作流程1.首先确保糖化血红蛋白检测试剂盒中的所有试剂和标准品未过期。

First, ensure that all reagents and standards in the glycated hemoglobin test kit have not expired.2.打开色谱仪仪器，按照仪器说明书的指示进行初始化操作。

Turn on the chromatograph instrument and follow the instructions in the instrument manual for initialization.3.准备样本，使用吸管或自动吸取器将糖化血红蛋白样本吸取到专用的色谱仪样本瓶中。

Prepare the sample by using a pipette or automatic sampler to draw the glycated hemoglobin sample into the dedicated chromatograph sample bottle.4.加入适量的样本稀释液到样本瓶中，混匀使样本充分溶解。

Add an appropriate amount of sample diluent to the sample bottle, mix well to fully dissolve the sample.5.根据试剂盒说明书，加入相应的试剂到样本中，并混匀。

According to the kit instructions, add the corresponding reagent to the sample and mix well.6.载入样本瓶到色谱仪的样本架上，并关闭样本瓶盖。

Load the sample bottle onto the sample rack of the chromatograph and close the sample bottle cap.7.打开色谱仪的软件，设定分析方法和参数，包括流速、柱温等。

HbA1C操作SOP

A3:糖化血红蛋白（HbA1c）测定(免疫荧光干式定量法) A3.1首页内容XX医院检验科操作规程文件号：XXXX第1版共4页20XX年X月X日起实施本规程每2年复审一次复审日期：20XX年XX月XX日复审人：XXX(签名)规程编写者：XXX，XXX审批者：XXX批准日期：20XX年X月X日文件分发部门和/或个人：医务科：保管者：XXX(签名)院长办公室：保管者：XXX(签名)院档案室：保管者：XXX(签名)检验科：主任：XXX(签名)检验科XX检验室：XXX(签名)A3．2检测原理糖化血红蛋白检测试剂盒采用的是免疫荧光定量测试技术，干化学层析法。

即将检测缓冲液与加入了溶血缓冲液后的全血混匀，荧光标记的抗HbA1c抗体与血样中的HbA1c结合，当该样本混合液加入到反应板的加样孔后，检测抗体（荧光标记抗体）与样本中的HbA1c和固相在反应板上的糖化血红蛋白竞争性地结合。

荧光信号强度与HbA1c的量成反比。

A3.3标本要求A3.3.1 使用人的全血样本来进行测定。

A3.3.2 所有的血液样本在使用之前必须放在常温下，并且要保证样本均质性。

A3.3.3 新鲜血样本必须在收集后的24小时内使用。

A3.4试剂A3.4.1 每个试剂均购自XX公司。

1) 反应板 25T/盒2) ID芯片 1个/盒3) 溶血缓冲液 25管/盒4）检测缓冲液 1瓶/盒A3.4.2 试剂准备从冰箱中取出溶血缓冲液和检测缓冲液后需要在室温环境中放置10分钟，使其恢复至室温后方可使用。

糖化血红蛋白（HbAlc）检测试剂盒的反应板在密封情况下存放在4～30℃的密封袋内，可稳定15个月（如果存放在2～8℃环境中的反应板，需要在室温环境中放置10分钟，使其恢复至室温后方可使用）。

A3.4.3 试剂性能可接受性按测定项目资料手册中质量控制章节所规定内容进行质量控制。

结果必须在实验室规定的可接受范围内。

A3.4.4 超过失效期的试剂不可使用。

A3.5仪器A3.5.1 使用韩国BODITECH MED Inc.公司的i-CHROMA Reader免疫荧光分析仪。

糖化血红蛋白(HbA1c)测定标准操作程序SOP文件

溶血后的稳定时间：2-8℃24小时
-20℃6月
再使用前将溶血剂放入室温稳定15分钟。
3.2.2 EDTA/肝素抗凝血：
将抗凝全血混匀避免形成泡沫。取血液10ul，加入溶血剂1000ul。当血液从红色变为棕榈色后即可使用（大约1-2分钟）。
溶血后的稳定时间：15-25℃4小时
2-8℃24小时
-20℃6月
R2：打开后机上稳定28天
R4：打开后机上稳定28天
准备：直接使用。
4.2校准物
来源：ROCHE配套校准物,符合WHO标准,具体如下：
S1：0.9％的NaCl
S2－5:定标液3a-d
贮存条件：15-25℃8小时
2-8℃2天
-20℃3月
定标液复溶后，如果不再使用，应该立即进行冰冻。
准备：打开小瓶的时候要小心，避免损失干粉，准确加入2.0ml蒸馏水或者去离子水。小心混匀，避免形成泡沫，使用前稳定30分钟。
定标频率：A试剂批号更换后B由质控结果决定
4.3质控物
来源：罗氏糖化血红蛋白专用质控品
其它适合的质控品
贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。
准备：直接使用。
质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。
5仪器
ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。
6上机操作
见仪器作业指导书，参数设置见附表。
7参考范围
公式1：2.9-4.6%
公式2：4.8-6.0%
公式参见注意事项。
8线性范围
本法线性范围为0.2g/dl～定标液的最高浓度，不准确度允许范围 ±7%，不精密度CV=4.3%，灵敏度0.2g/dl。

BIO-RADD10糖化血红蛋白检测系统标准操作规程

BIO-RAD D-10糖化血红蛋白检测系统标准操作规程（一）BIO-RAD D-10糖化血红蛋白检测系统开/关机程序1 开机前准备1.1 检查并打开电源开关。

1.2 检查室温是否在15到30摄氏度之间。

1.3 检查外部废物罐水平1.3.1保证废物罐有充足的空间容纳下一次运行所产生的废物。

1.4检查压力。

1.4.1 从MAINTAIN界面,选择50%缓冲液2并设定流速为1.5ML/min;按开始泵按钮。

1.4.2 监测系统压力3到4分钟.假如压力波动不超过5%,记录系统压力在日期日志上。

1.5 检查泄漏情况:当泵在运行时,打开前下部棉班并用眼观察隔舱是否有液体漏出。

1.6 检查打印纸张的供应。

1.7 检查缓冲液和清洗/稀释溶液水平。

1.8 在LOTINFO界面检查剩余的管注射数,假如注射数剩余不足要更换管。

2 开机2.1检查并打开电源开关。

3.3在开始启动程序时,一声滴答声被听到.状态栏提示系统正处于运行状态并显示当前操作所剩余时间。

3.4 一旦启动程序完成系统会进入等待状。

4.3 长时间关机4.3.1 假如D-10将要被长时间关闭超过2星期,依照以下程序来保证系统仍旧处于最佳操作状态。

糖化血红蛋白操作程序

糖化血红蛋白操作程序一、检测方法离子交换层析法二、方法学原理H50采用基于离子交换的高效液相色谱检测原理，测量血红蛋白色谱图，计算相关参数。

基于高效离子交换的液相色谱检测原理，测量时先将含有各种血红蛋白的血液样本载入层析柱，在选定的低离子强度缓冲液及pH条件下，血液样本中的HbA1c几乎不带正电荷，首先被洗脱；血液样本中的HbA0带正电荷，用高离子强度的洗脱液最后洗脱出来，得到相应的血红蛋白层析谱，然后算出HbA1c峰值和总Hb的比值。

三、试剂品牌、包装规格、内含物3.1试剂品牌：迈瑞3.2试剂成分和规格3.2.1：离子交换层析柱：规格：1*13.2.2糖化血红蛋白溶血剂：磷酸缓冲液规格：2L*33.2.3糖化血红蛋白洗脱液A：琥珀酸缓冲液规格：900ml*43.2.4糖化血红蛋白洗脱液B：磷酸缓冲液规格100ml*23.3储存温度：2℃—30℃3.4开瓶有效期：100day。

四、仪器品牌、型号品牌型号：迈瑞H-50五、操作程序5.1开机程序5.1.1按主机上的电源开关，接通电源；5.1.2仪器自动执行一项自检操作，包括系统检查、关机检查和机械初始化。

整个过程约持续15分钟；5.1.3系统自检完成后，弹出登录对话框。

在对话框中输入用户名和密码后，点击“登陆”；5.1.4“液路初始化”完成后进入主界面，进行样本分析；5.2质控程序5.2.1容器类型1.使用离心管或微量杯，分别使用各自的适配器，放入质控品试管架，试管架上部有CRL标贴。

2.仪器会自动识别试管架，采用预稀释模式测量。

5.2.2质控品样本液的制备5.2.2.1厂家质控1.对于新开瓶质控品，首先将其自2~8℃冰箱中取出；2.轻敲瓶盖，确保冻干样品全部散落在瓶底，小心地打开瓶盖和橡皮塞，使瓶盖朝上，当心瓶盖上黏附的冰冻粉末被风吹下造成内容物的损失；3.获取2mL糖化血红蛋白溶血剂，缓慢注入两个水平的质控品瓶中，仔细盖上橡皮塞后，轻缓翻转小瓶10秒进行混匀，然后避光放置约2-3分钟（期间轻缓翻转小瓶，确保内容物完全溶解，翻转过程避免产生泡沫）；4.待其完全复溶后混匀，可用移液器分别取两个水平的质控品各200ul置于两个预稀释样本杯或1.5ml EP管中（剩余的质控品可置于2～8℃低温下保存14天，使用前从低温环境下取出即可直接使用），每一瓶质控品开瓶后均需在瓶身上记录开瓶日期，5.每一批质控品开瓶后第一次使用时均需在仪器上录入质控品试剂的参考值、批号和有效期：点击“质控”菜单→“设定”→选择新的文件号→点击“编辑”→选择质控水平、参考值类型，偏差限格式，输入批号、有效期、参考值和偏差限，每个水平质控建立一个相对应的文件夹并勾选“在用”列，仪器后续质控测试将默认保存在该文件夹中直到有效期失效。

糖化血红蛋白操作规程

糖化血红蛋白定量测定操作程序
（1）加入5ul全血标本于处理管内﹑混匀，室温放置2―3分钟。

（2）混匀，取25ul垂直加样于反应板加样孔内，待椮透。

（3）加入25ul洗涤液，待椮透。

（4）在5分钟以内用NycoCard Reader Ⅱ定量检测结果。

（5）取下检测笔（Pen）的笔帽，将其插入笔架中。

（6）按下“on”键，开机，仪器进行自身散射光调整（Adjusting），该过程约需要15秒钟左右的时间，等待。

（7）听到“嘀”一声，提示散射光调整结束。

仪器自动进入下一程序，进行调零（calibrate），按下确认键（enter），仪器
提示打开调零白板（open lid），放上检测笔（place pen）按下，仪器自动检测，等待（calibrating,wait……），听
到“嘀”一声，提示调零结束。

（8）仪器自动进入下一个程序，等待选择检测项目（enter test）按下确认键（enter），利用“on”键进行项目的选择。

确定
检测项目，按下确认键（enter），进行确认。

此时即可进行
检测。

（9）检测结束，按下退出键（quit），进入关机（off）菜单，按下确认键（enter），关机。

或10分钟内不进行任何操作，
仪器将自动关机。

（10）正常参考值：4.5-6.3%。

糖化血红蛋白检测的SOP

糖化血红蛋白检测的SOP【目的】：用于评定糖尿病的控制程度【该SOP变动程序】：本标准操作程序的改动可有任一使用本sop的工作人员提出，并报告经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。

【检验的适用证】：本试验适用于糖尿病病人【仪器与试剂】1. 仪器：离子交换层析柱2. 试剂：2.1阳离子交换树脂缓冲液：PH6.9，8mg/dl;2.2GHB溶血试剂：氰化钾（含表面活性剂）10Mm；2.3GHB标准液：冻干2.4血清分离器：40枚【操作程序】实验温度：21-24C测定波长：415nm1、操作方法（1）收集静脉血、加入EDTA抗凝。

（2）根据样品数取试管若干，分别吸取400μl溶血剂加入各试管中。

（3）分别吸取80μl标准或样本放入上述各试管中，混合均匀。

（4）放置5～10min，则制成了血红蛋白样本A3。

2、糖化血红蛋白的制备及测定（1）根据样品的数量，取干净的试管若干，分别吸取3.0ml阳离子树脂，放入各管中。

（2）向上述试管中分别加入已预备的100μl血红蛋白样本（A3）。

将层析柱插入试管中，使得橡皮塞高于液面至少1cm。

（3）充分摇荡试管混合5～10min（最好使用涡旋摇荡器，如果没有则需剧烈摇荡20min。

（4）然后慢慢推动层析柱进入试管，直到糖化血红蛋白提取完全。

（5）上清液倒入另一支试管或直接倒入比色杯进行比色。

（6）以蒸馏水作空白在415nm调零。

（7）读取并记录标准，样品吸光度值。

3、总血红蛋白测定（1）根据样品数量取试管若干，分别加入5.0ml蒸馏水。

（2）加入20μl血红蛋白样本（A3）。

混合均匀。

（3）以蒸馏水作空白在415nm调零。

（4）读取并记录各管吸光度值。

4、参考值范围及报告单糖化血红蛋白GHB（%）=糖化血红蛋白吸光度/总血红蛋白吸光度×10（正常值范围4.0%～6%）。

【糖化血红蛋白测定注意事项】1.树脂缓冲液在使用前至少振摇10次加以混匀，每加5管反应摇匀一次；2.全血标本的血红蛋白大于18g/dl时，应将标本用蒸馏水按1：1稀释，结果乘以2；3.请勿使用塑料试管4.请使用13X100mm玻璃试管，以免因试管太小，血清分离器无法插入或因试管内劲太大，上清液无法进入血清分离器。

糖化血红蛋白仪SOP(标准操作流程)

NycoCard ReaderⅡ糖化血红蛋白检测仪SOP第一步：取下检测笔（Pen）的盖帽，将其插入笔架中。

第二步：按下ON/Select键开机，屏幕显示“Adjusting……（自行调整）”，此过程不要触动笔。

发出一声鸣叫表示调整正确，然后出现“Calibrate（校正）”；两声鸣叫表示调整错误并显示“Adjust error”。

该过程约需要30秒左右的时间，请等待。

第三步：按下 Enter 键，当显示信息“Place pen…”时将笔从插孔中取下，放在白板上进行校正，发出一声鸣叫并出现“Enter test”字样说明校正完毕。

第四步：按下 Enter 键，会出现“Test：D-Dimer New”。

[ 此时按下Select键，会依次出现“CRP wholeblood （全血CRP）”、“CRP serum/plasma（血清CRP）”、“HbA1c（糖化血红蛋白）”等项目。

]第五步：选定所检测的项目后，按下Enter键，即可进行测试。

第六步：测试完毕，同时按下Enter＋Quit 键关机。

或10分钟之内不进行任何操作，仪器将自动关机。

糖化血红蛋白SOP第一步：沉淀血红蛋白：将5μl 全血添加到装有R 1 / 试剂的离心管内，混匀。

静置2 分钟，最多3 分钟。

第二步：加样本：再次混匀以便得到均匀的悬浮液, 用加样器准确向检测卡孔内添加2 5μl 悬浮液，让反应混合物充分浸润薄膜约10 秒钟。

第三步：加R2/ 洗液：向反应孔内添加25μl R 2/ 洗液。

让洗液充分浸润薄膜10 秒钟。

第四步：读数：5 分钟之内，利用读数仪读取结果。

参考值：4.5%——6.3%D - 二聚体SOP第一步：预清洗：吸取5 0μl R 2/ 洗涤液加入T D / 检测卡反应孔内，让洗涤液充分浸润孔内薄膜，注意勿使加样头触及反应孔膜。

第二步：加样本：向反应孔内加入5 0μl 柠檬酸盐抗凝的无血小板血浆样本质控品，样本应在5 0 秒内渗入孔内。

糖化血红蛋白(HbA1c)测定标准操作程序SOP文件

ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-25
糖化血红蛋白（HbA1c）测定
版序：ABCD
页码：第1页，共3页
1测定方法
免疫抑制比浊法
2测定原理
标本中的HbA1c与anti- HbA1c抗体发生反应，形成可溶性的抗原-抗体复合物。因为在HBA1C分子上只有一个特异性的HbA1c抗体的结合位点，所以不能形成凝集反应。过量的抗HbA1c抗体与试剂中的多半抗原反应形成不可溶的抗体-多半抗原复合物，可以通过浊度进行检测，然后在另外一个通道中检测血红蛋白的浓度。
糖化血红蛋白（HbA1c）测定
版序：ABCD
页码：第3页，共3页
9注意事项
9.1血清标本出现溶血、脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。
9.2仅应用于体外诊断。
9.3计算公式：
公式1：糖化血红蛋白的浓度以%形式报告。
%HBA1C=HbA1c(g/dl)÷Hb(g/dl)×100
公式2：经DCCT研究与HPLC相关好。
3标本
3.1标本收集：
毛细血管血及肝素/EDTA抗凝血浆，处理方法见标本准备。
稳定性：15－25℃3天
2-8℃7天
-20℃6月
3.2标本准备：
3.2.1毛细血管血：
使用一次性的毛细血管采取毛细血管血液，将该血液与溶血剂进行1：100倍配比（例如20ul毛细血管血液配比2000ul溶血剂）。小心混匀后使用。当血液从红色变为棕榈色后即可使用（大约1-2分钟）。
溶血后的稳定时间：2-8℃24小时
-20℃6月
再使用前将溶血剂放入室温稳定15分钟。
3.2.2 EDTA/肝素抗凝血：
将抗凝全血混匀避免形成泡沫。取血液10ul，加入溶血剂1000ul。当血液从红色变为棕榈色后即可使用（大约1-2分钟）。

糖化血红蛋白测定的标准操作程序

糖化血红蛋白（GHb ）测定的标准操作程序【应用范围】体外检测血清、血浆及糖化血红蛋白（GHb）测定。

【适用仪器】Olympus AU-27全自动生化分析仪。

【程序改变】严格遵循仪器、试剂说明书及校准品使用说明。

【方法学原理】本法是利用抗原抗体反应直接测定总Hb中HbA1c的百分含量的方法。

样品中总Hb中HbA1c与胶乳有相同的非特异性吸附而固相化，当加入HbA1c的特异性单克隆抗体后形成胶乳HbA1c-鼠抗人HbA1c单克隆抗体的复合物，此复合物由于羊抗鼠IgG抗体而形成凝集，凝集量因胶乳表面固相化的HbA1c量的不同而不同。

通过测定其吸光度并与HbA1c百分浓度的标准曲线比较后，可求出样品的HbA1c占总Hb的百分含量。

【试剂】1.成份：R1胶乳液：胶乳、甘氨酸缓冲液R-2A抗体1：羊抗鼠IgG抗体、甘氨酸缓冲液R-2B抗体2:鼠抗人HbA1c单克隆抗体、甘氨酸缓冲液溶血液：H2OHbA1c参比液：含5个浓度，分别约为0%，4%，8%，11%，14% （详见标示量）另售。

2.校准品：Electrollyte CAL 1、Electrollyte CAL 2.3.质控品：Randox Assayed Multiseral Level 2 and Level 3.【标本收集与准备】血清或血浆标本根据实验室标准采集程序采集标本，适用标本为血清或肝素抗凝血浆（肝素钠抗凝结果高0.5mmol/l），不可从正在静脉滴注手臂上采血，上机标本不能有凝块，样品采集后2天内离心标本，分离血清，血清或血浆标本室温保存4天,冷藏7天，冷冻保存6个月。

血清或血浆钠结果高于线性不建议稀释。

【操作步骤】1. 仪器测定参数设置2. 试剂准备：将准备好的试剂置仪器试剂盘中（8C ）。

3. 校准建议使用复合校准品对自动分析仪进行校准。

每批样品检测时，建议使用质量控制品进行内部质量控制。

校准物的准备：将校准物从冰箱取出，冻干校准物按说明书加入蒸馏水复溶，轻轻颠倒混匀3次，不可用力震摇，室温放置30分钟至完全溶解；液体校准物从冰箱取出，室温放置15分钟以平衡至室温。

JCCRM 423 糖化血红蛋白HbA1c测量标准物质(ReCCS)的使用

JCCRM 423 糖化血红蛋白HbA1c测量标准物质（ReCCS）的使用
JCCRM 423 糖化血红蛋白HbA1c测量标准物质（ReCCS）的使用说明
１.从冰箱中取出装有这种材料的玻璃小瓶。

让它们在室温下直立。

轻敲小瓶以收集底部的内容物。

取下铝盖。

请小心，因为它可能非常锋利。

2. 取下橡胶塞。

用微量移液器或注射器加入 0.2 ml 纯净水。

将橡皮塞牢固地放回小瓶上，轻轻将小瓶朝下翻转 10 次以混合内容物。

静置约 5 分钟，让内容物溶解。

3. 溶解于纯净水后，总血红蛋白浓度约为13g/dL，总体积为0.25ml。

如果没有，增加或减少水。

重要提示 1：将本参考物质溶解在 0.2 毫升水中后，切勿将其在室温下放置 5 小时以上。

该产品溶解后不能重新冷冻以备后用。

4. 测量前，使用 HbAlc 测量试剂说明书中的稀释液将产品稀释至合适的总血红蛋白浓度水平。

稀释后的制剂溶液不稳定，不能储存以备后用。

重要提示 2：稀释后的参考物质的稳定性取决于稀释液。

JCCRM 423 糖化血红蛋白HbA1c测量标准物质（ReCCS）仅用于体外诊断用途。

用于制备此标准品的原材料被证明对 HBs 抗原、HCV 抗体和 HIV 抗体没有反应性，但这绝不排除其感染性。

切勿用受伤的手触摸材料。

将本产品作为能够传播传染病的生物危害材料进行处理，并采取必要的预防措施，就像在微生物和生物医学实验室中处理生物安全 2 级的任何生物样本一样。