《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》导学案答案说课讲解
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案(完美修改)
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、研究思路1、筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时或其他微生物生长。
(2)选择培养基：在微生物学中，将允许种类的微生物生长，同时或其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。
（3）尿素可以为农作物提供肥，但是只有被分解成之后，才能被植物吸收利用。
（4）以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象，要达到的两个主要目的是：①；②。
（5）PCR（）是一种在体外将。
此项技术的自动化，但是在合成的过程中需要在93℃的条件下，所以要求使用耐高温的2、统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有和。
（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。
为了保证结果准确，一般设置个平板，选择菌落数在的平板进行计数，并取。
统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。
3、设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中对实验结果的影响，提高实验结果的。
二、实验设计实验设计包括，所需、、用具和药品，具体的以及时间安排等的综合考虑和安排。
关于土壤中某细菌的分离与计数实验操作步骤如下：1．取样：从肥沃、湿润的土壤中取样。
应先 3 cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的中。
2．制备：准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基3．样品的和微生物的与观察4．细菌的计数当菌落数目稳定时，选取菌落数在的平板进行计数。
在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。
三、结果分析与评价1、对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助的方法。
2、在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的将尿素分解成了。
氨会使培养基的碱性，PH 。
因此，我们可以通过检测培养基变化来判断该化学反应是否发生。
选修1_课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 导学案及答案
公式：观察到的红细胞平均数∶观察到的细菌平均数＝红细胞含量∶细菌含量
1．4采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于。通过统计，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。
〖思考3〗从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法
8．实验过程
1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。
2）应在火焰旁称取土壤g。将称好的土样倒入盛有mL无菌水的中，塞好棉塞。
3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在旁进行。
4）实验时要对培养皿作好标记。注明等。
5）为了提高效率，在作时更加有条不紊，应当。
〖思考9〗在研究未知微生物时务必规范操作，以防被感染，实验后一定要洗手。
D．涂布了一个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233
3．在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能有（）
①由于土样不同②由于培养基污染③由于操作失误④没有设置对照
A．①②③B．②③④C．①③④D．①②④
是。
〖思考4〗利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的
关键是。
〖思考5〗第位同学的结果接近真实值。你认为这两位同学的实验需要改进的操作是。
1．5统计的菌落数比活菌的实际数目。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是菌落。因此，统计结果一般用来表示。
1．6设置对照的主要目的是。
1．7对照实验是指除了的条件外，其他条件都的实验。满足该条件的称为，未满足该条件的称为组。
A．2.34×108B．2.34×109C．234D．23.4
高中生物专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学案含解析新人教版选修1
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、研究思路1．筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。
(2)选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
2．统计菌落数目(1)活菌计数法：常用稀释涂布平板法。
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②计算公式：每克样品中的菌株数＝(C ÷V )×M 。
C ：代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。
V ：代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)。
M ：代表稀释倍数。
③统计方法：为了保证结果准确，一般设置3～5个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取其平均值。
(2)显微镜直接计数法：在显微镜下直接观察和计数微生物的数量。
3．设置对照(1)对照实验：指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。
1.实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等)同时抑制或阻止其他微生物的生长。
2．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
3．测定微生物数量的常用方法有活菌计数法和显微镜直接计数法。
稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目，但统计结果往往比活菌的实际数目低。
4．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可用尿素作为唯一氮源的选择培养基分离能分解尿素的细菌。
5．鉴定分解尿素细菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，依据是否变红进行判断。
(2)主要目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
二、实验设计1．土壤取样从富含有机质、酸碱度接近中性且潮湿的土壤取样。
【人教版】高一生物选修一：2.2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》学案(含答案)
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．研究培养基对微生物的选择作用。
2．进行微生物数量的测定。
一、研究思路1．筛选菌株尿素是一种重要的农业____肥，但不能直接被农作物吸收利用，只有当土壤中的细菌将尿素分解成____之后，才能被植物利用。
土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成______。
（1）实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的______生长的条件（包括营养、______、pH等），同时______或______其他微生物生长。
（2）选择培养基：在微生物学中，将允许________的微生物生长，同时______或______其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
2．统计菌落数目统计的菌落数往往比活菌的实际数目____。
这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
因此，统计结果一般用________来表示。
（2）____________也是测定微生物数量的常用方法。
（3）细菌的数目还可以通过______法来测定。
例如，测定饮用水中大肠杆菌的数目，可将________的水过滤后，将滤膜放到________培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现____色，可以根据培养基上________的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。
3．设置对照（1）设置对照的主要目的是排除实验组中__________对实验结果的影响，提高实验结果的________。
（2）对照实验是指除了________的条件以外，其他条件都______的实验，其作用是比照实验组，排除任何其他可能原因的干扰，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。
二、实验设计实验设计包括对实验方案，所需仪器、材料，用具和药品，具体的________以及时间安排等的综合考虑和安排。
关于土壤中某样品细菌的分离与计数的实验操作步骤如下：1．土壤取样土壤中的微生物70%～90%是_____，绝大多数分布在距地表______ 的近____性土壤中。
土壤中分解尿素的细菌的分离计数导学案
班级，小组名：，姓名
图2－2－1
在直接计数中也需选择恰当的稀释度，也要求计数尽量准确，接近真实值，其方法：一是计数
中格中菌体数求平均值；二是计数每个中格内菌体数目时，遵循“计上不计下，计左不计右”的原则，防止边界个体的重复计数。
(3)计算公式：每毫升原液所含细菌数＝每小格平均细菌数×400
两种计数方法相比较，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活细菌数目低。
原因是：一方面由于两个或
多个细菌连在一起时，稀释涂布培养后只能观察到一个菌落；另一方面统计结果只是活细菌产生的菌落。
《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》导学案答案
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案答案一、研究培养基对微生物的选择作用1.筛选菌株(1)自然界中目的菌株的筛选①原理：根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
②实例：能产生耐高温的Taq DNA聚合酶的Taq细菌就是从热泉中筛选出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。
②实例：从土壤中筛选能分解尿素的细菌。
③方法：利用选择培养基进行微生物的筛选。
2.选择培养基(1)概念：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
(2)举例：筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培养基是以尿素为唯一氮源，按物理性质归类为固体培养基。
1.筛选分解尿素的细菌的选择培养基下面是本课题使用的培养基的配方，请分析并回答下列问题：KH2PO4 gNa2HPO4 gMgSO4·7H2O g葡萄糖 g尿素 g琼脂 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL(1)该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质答案碳源是葡萄糖，氮源是尿素。
(2)分离分解尿素的细菌的选择培养基是如何进行选择的答案该选择培养基的配方中，尿素是培养基中的唯一氮源，因此，只有能够利用尿素的微生物才能够生长。
(3)为什么只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长答案分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可将尿素分解成氨，从而为微生物提供氮源。
2.设计对照实验(1)如何设计对照实验验证该选择培养基的确筛选到了能分解尿素的细菌答案增设牛肉膏蛋白胨基础培养基并进行涂布平板操作，如果牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数，则说明选择培养基的确起到了筛选能分解尿素的细菌的作用。
(2)如何设计对照实验验证所用的选择培养基没有受到污染答案设置一个未涂布平板的能筛选分解尿素的细菌的选择培养基。
归纳总结选择培养基的分类(1)利用营养缺陷型选择培养基进行的选择培养：通过控制培养基的营养成分，使营养缺陷型微生物不能正常生长。
实验03土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
专题03土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、实验原理：（1）土壤中的细菌之所以能分解尿素是因为它们能合成尿酶。
（2）配置以尿素为唯一氮源的培养基，能够在这个培养基上生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
二、操作步骤：(1)土壤取样①土壤要求：酸碱度接近中性且潮湿。
②取样部位：距地表约3～8 cm的土壤层。
(2)样品的稀释测定土壤中细菌的数量，一般选用1×104、1×105和1×106倍稀释的稀释液进行平板培养，当第一次做这个实验时可以将稀释的范围放宽一点。
(3)微生物的培养与观察①培养：根据不同微生物的需要，控制适宜的培养温度和培养时间。
细菌一般在30～37 ℃的温度下培养1～2 d。
②观察a．观察方法：每隔24 h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
b．记录菌落的特征：包括菌落的形状、大小和颜色等。
2、灭菌培养基：高压蒸汽灭菌法3、培养皿灭菌：干热灭菌法三、操作提示(1)无菌操作①取土样的用具在使用前都需要灭菌。
②实验操作均应在酒精灯火焰旁进行。
(2)做好标记：本实验使用的平板和试管较多，为避免混淆，最好在使用前做好标记。
例如，在标记培养皿时应该注明组别、培养日期和平板上培养样品的稀释度等。
(3)制定计划：对于耗时较长的生物实验，需要事先规划时间，以便提高实验效率，在操作时有条不紊。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数操作中需注意的问题(1)为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
(2)恰当的稀释度是成功统计菌落数目的关键。
(3)为增强实验说服力与准确性，设计实验时，需要涂布至少三个平板作为重复组，目的是排除实验中偶然因素对实验结果的影响。
(4)分析实验结果时，要考虑重复组结果是否接近，如果相差太大，意味着操作有误，需重新实验。
(5)为防止培养时间不足导致菌落遗漏，在菌落计数时，每隔24 h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
土壤中分解尿素的细菌的分离和计数导学案
． 尿素 1.0g
_____________指示剂，尿素被分解后指示剂变 __________色。
琼脂
15.0g
自来水 科目：生物 编号： 第1 页 共2页
定容至 1000mL
6
导
【学习难点】 对分解尿素的细菌的计数。
【预习案】
学
1、选择培养基的概念。 2、统计菌落的方法有哪些？ 3、土壤中某样品细菌的分离与计数实验操作流程是：
【当堂检测】
1、下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是 ( ) A．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水
案 装
B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水 4、设置对照实验的目的是什么？ C．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水
【探究案】
1、筛选菌株的原理及方法是？
D．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水； 2、下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方：
阜南一中博雅 1+1 高效课堂导学案
编制人：刘维康 审核人：
领导签字：
编号:
时间：
年
月
日
小组：_____
姓名：______ 组内评价：______
教师评价：_______
课题 2
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
4、 如何判断培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落？怎样对分离出的菌种作进一 步的鉴定？
【学习目标】 1．研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。 2．能利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。 【学习重点】 对土样的选取和选择培养基的配制。 5、在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时，A 同学从对应的 10 倍培养基中筛选出 的大约 230 个菌落，但是其他在同样的稀释度下只选择出大约 100 个菌落。试分析原因并探究方案， 根据结果得出结论。
2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案答案
2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
一、
1.不能氨脲酶
2.（1）从土壤中分离出能够分解尿素的细菌
（2）统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌
二、
（一）
1.目的菌株生存环境环境淘汰
2.有利于目的营养、温度、PH 抑制或阻止
3.
4.（1）特定种类的抑制或阻止选择培养基筛选微生物
（3）化学物质淘汰青霉素营养成分尿素培养条件选择培养基只有能够以尿素作为氮源葡萄糖、尿素尿素凝固剂脲酶
（二）
1.活稀释涂布平板法
2.稀释度样品稀释液中的一个活菌平板上的菌落数30-300 显微镜直接计数法
3.（C÷V）× M （C:某一稀释度下平板上生长的平均菌落数；V：代表涂布平板时所用的
稀释液的体积（ml）；M代表稀释倍数）
4.低两个或多个细胞连在一起一个菌落菌落数重复组平均值同一三个或三个以上平均数
2 第一位同学重复实验组操作有误，需重新实验重新实验恰当的稀释度菌落数
（三）
实验组中非测试因素实验结果土样实验操作培养基培养基杂菌污染
三、
1.实验方案所需仪器、材料、用具和药品具体的实施步骤时间安排
2.
3.3-8 有机质中表层土天然培养基稀释度不同30-300 适于计数104、105、106103、
104、105102、103、104放宽30-37℃25-28℃3-4d 24h 稳定培养时间不足菌落的形状
4.灭菌火焰10g 90ml 锥形瓶火焰培养皿培养基类型、培养时间、稀释度、培养物事
先规划致病微生物
四、
1.生物化学
2.增强升高PH
3.尿素酚红红分解尿素伊红美蓝鉴别性黑三。
高中生物土壤中分解尿素细菌的分离与计数导学案
土壤中分解尿素细菌的分离与计数一、学习目标：1.研究培养基对微生物的选择作用。
2.进行微生物数量的测定。
二、自主学习一、研究思路1．筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理人为提供有利于________________生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时________或________其他微生物生长。
(2)选择培养基在微生物学中，将允许__________种类的微生物生长，同时________或________其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
(3)分离分解尿素的细菌的选择培养基①在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是____________，提供氮源的是________，琼脂的作用是凝固剂。
②该培养基对微生物具有选择作用。
其选择机制是________________________________才能在该培养基上生长。
③土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们体内能合成________，将尿素分解的反应式是______________________________________________________。
Taq细菌能忍受93℃左右的高温，是在美国黄石国家公园的一个热泉中发现的，这说明，在寻找目的菌株时，要根据____________________________________________。
2．统计菌落数目的方法(1)稀释涂布平板法(也叫活菌计数法)①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的____________，通过统计平板上的________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②操作第一，设置重复组，增强实验的说服力与准确性。
将待测样品经一系列10倍稀释，然后选择________稀释度的菌液，分别取0.1 mL接种到已制备好的平板上，然后用无菌涂布器将菌液涂布整个平板表面，放在适宜的温度下培养并计算菌落数。
为使结果接近真实值，可将同一稀释度涂布到三个或三个以上的平板上，培养并计算出__________。
人教版高中生物选修一专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学案含解析
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、研究思路1．筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。
(2)选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
2．统计菌落数目(1)活菌计数法：常用稀释涂布平板法。
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②计算公式：每克样品中的菌株数＝(C ÷V )×M 。
C ：代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。
V ：代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)。
M ：代表稀释倍数。
③统计方法：为了保证结果准确，一般设置3～5个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取其平均值。
.1.实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等)同时抑制或阻止其他微生物的生长。
2．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
3．测定微生物数量的常用方法有活菌计数法和显微镜直接计数法。
稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目，但统计结果往往比活菌的实际数目低。
4．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可用尿素作为唯一氮源的选择培养基分离能分解尿素的细菌。
5．鉴定分解尿素细菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，依据是否变红进行判断。
(2)显微镜直接计数法：在显微镜下直接观察和计数微生物的数量。
3．设置对照(1)对照实验：指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。
(2)主要目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
二、实验设计1．土壤取样从富含有机质、酸碱度接近中性且潮湿的土壤取样。
高中生物 土壤中分解尿素细菌的分离与计数导学案 新人教版选修1
高中生物土壤中分解尿素细菌的分离与计数导学案新人教版选修1【学习目标】XXXXX：1、巩固培养基对微生物进行选择的原理；巩固统计微生物数量的方法2、能进行实验设计与操作，并对实验结果进行分析与评价3、领悟生物与环境相适应的观点，体会微生物分离计数过程的严谨性、科学性。
【使用说明及学法指导】1、先回忆教材内容，构建知识流程图；通过导学案，完善知识系统。
2、本节重难点：学会统计微生物数量的方法，能进行实验设计与操作，并对实验结果进行分析与评价。
进一步形成无菌技术的意识。
基础回顾一、植物能够利用的氮元素主要以什么形式存在，农田施用尿素能直接被农作物吸收吗？二、筛选菌株的思路。
渗透生物与环境相适应的观点。
1、PCR技术需要什么酶，从什么生物中提取，从哪里获得？这提示我们，到自然界中筛选目的菌株需要怎么做？2、实验室中如何进行目的菌株的筛选？什么是选择培养基？对于尿素分解菌的培养基要注意些什么？三、分离与计数1、要分离微生物你如何选择所用的培养基类型和接种方法2、微生物的计数方法有几种？统计菌落数目是什么方法？菌落计数要注意些什么要求？四、分离与计数的实验流程设计，各步骤中你认为要注意哪些小知识。
五、实验的计划性1、做好标记：2、制定计划：能力提升一、请结合P24的三则资料设计表格，比较与几种微生物有关的数据。
二、如果知道尿素分解菌的稀释倍数为104~6设置对照：你如何设置对照，能达到什么目的，一共需要几个平板？三、（联系课题三）1、土壤中分解尿素细菌的分离与计数实验中如何鉴定分离到的细菌是分解尿素的细菌呢，这与纤维素分解菌的鉴定方法有区别吗？2、本实验中为什么没有使用液体培养基进行选择培养？四、（联系课题一）你认为如何进行无菌操作？课后练习：一、选择题1、可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是()。
A、以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B、以尿素为唯一氮源的培养基中加二苯胺试剂C、以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D、以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂2、关于微生物的培养,下列叙述错误的是()。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案一、学习目标1、了解从土壤中分离分解尿素的细菌的原理和方法。
2、掌握无菌操作技术和微生物培养的基本操作。
3、学会利用选择培养基分离微生物，并能对其进行计数。
二、学习重难点1、重点（1）从土壤中分离分解尿素的细菌的原理和方法。
（2）微生物培养的基本操作和无菌技术。
2、难点（1）选择培养基的配制和作用原理。
（2）微生物的计数方法和误差分析。
三、知识回顾1、培养基的类型和作用按物理性质可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。
按用途可分为选择培养基和鉴别培养基。
2、无菌技术包括消毒和灭菌。
消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）；灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
3、微生物的接种方法平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
四、新课导入在农业生产中，尿素是一种常用的氮肥。
但尿素不能直接被农作物吸收利用，需要土壤中的细菌将其分解为氨，才能被植物吸收。
那么，如何从土壤中分离出能够分解尿素的细菌呢？这就是我们今天要学习的内容。
五、实验原理1、土壤中含有大量的微生物，其中就包括能够分解尿素的细菌。
这些细菌能够产生脲酶，将尿素分解为氨和二氧化碳。
2、在以尿素为唯一氮源的培养基上，只有能够产生脲酶的细菌才能生长繁殖，其他微生物则不能生长。
六、实验材料和用具1、实验材料土壤样品：从富含腐殖质的土壤中采集。
培养基：尿素固体培养基（尿素 10g、葡萄糖 05g、NaCl 05g、KH2PO4 02g、琼脂 20g、蒸馏水 100mL）。
2、实验用具无菌操作台、高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱、涂布器、移液管、显微镜等。
七、实验步骤1、土壤样品的采集在富含腐殖质的土壤中，用无菌小铲铲取表层土 5~10g，装入无菌信封中。
《土壤中分解尿素的细菌的分离以及计数》导教案答案
可编写可改正土壤中分解尿素的细菌的分别与计数导教案答案一、研究培育基对微生物的选择作用挑选菌株自然界中目的菌株的挑选①原理：依据目的菌株对生计环境的要求，到相应的环境中去找寻。
②实例：能产生耐高温的TaqDNA聚合酶的Taq细菌就是从热泉中挑选出来的。
实验室中目的菌株的挑选①原理：人为供给有益于目的菌株生长的条件(包含营养、温度、pH等)，同时克制或阻挡其他微生物生长。
②实例：从土壤中挑选能分解尿素的细菌。
③方法：利用选择培育基进行微生物的挑选。
选择培育基观点：同意特定种类的微生物生长，同时克制或阻挡其余种类微生物生长的培育基。
(2)举例：挑选土壤中分解尿素的细菌的选择培育基是以尿素为独一氮源，按物理性质归类为固体培育基。
挑选分解尿素的细菌的选择培育基下边是本课题使用的培育基的配方，请剖析并回答以下问题：KH2PO4 gNa2HPO4 gMgSO4·7H2O g葡萄糖g尿素g琼脂g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL 1可编写可改正该培育基的配方中，为微生物的生长供给碳源和氮源的分别是什么物质答案碳源是葡萄糖，氮源是尿素。
分别分解尿素的细菌的选择培育基是怎样进行选择的答案该选择培育基的配方中，尿素是培育基中的独一氮源，所以，只有能够利用尿素的微生物才能够生长。
为何只有能分解尿素的微生物才能在该培育基上生长答案分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可将尿素分解成氨，进而为微生物供给氮源。
设计比较实验怎样设计比较实验考证该选择培育基确实挑选到了能分解尿素的细菌答案增设牛肉膏蛋白胨基础培育基并进行涂布平板操作，假如牛肉膏蛋白胨培育基上的菌落数显然多于选择培育基上的菌落数，则说明选择培育基确实起到了挑选能分解尿素的细菌的作用。
怎样设计比较实验考证所用的选择培育基没有遇到污染答案设置一个未涂布平板的能挑选分解尿素的细菌的选择培育基。
概括总结选择培育基的分类(1)利用营养缺点型选择培育基进行的选择培育：经过控制培育基的营养成分，使营养缺点型微生物不可以正常生长。
生物：2..2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》教案(4)(新人教版选修1)
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数【导学诱思】1．尿素只有被分解成之后，才能被植物吸收利用。
2．以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象，要达到的两个主要目的是：⑴ ；⑵ 。
BBqP5KvPU83．PCR< ）是一种在体外将。
此项技术的自动化，要求使用耐高温的DNA聚合酶。
BBqP5KvPU8思考：怎样找耐高温的酶呢？4．实验室中微生物的筛选应用的原理是：人为提供有利于生长的条件<包括等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
BBqP5KvPU85．选择培养基是指。
BBqP5KvPU86．常用来统计样品中活菌数目的方法是。
即当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确，一般选择菌落数在BBqP5KvPU8的平板进行计数。
另外，也是测定微生物数量的常用方法。
7．比较教材中两位同学的操作方法，哪位同学的结果接近真实值？你认为这两位同学的实验需要改进呢？如需要，如何改进？BBqP5KvPU88．一般来说，统计的菌落数往往比活菌的实际数目。
这是因为。
因此，统计结果一般用而不是活菌数来表示。
9．设置对照实验的主要目的是，提高实验结果的可信度。
BBqP5KvPU810．对照实验是。
11．实验设计包括的内容有：、、和，具体的实验步骤以及时间安排等的综合考虑和安排。
BBqP5KvPU812．不同种类的微生物，往往需要不同的培养和培养。
在实验过程中，一般每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以BBqP5KvPU8。
13．无菌操作应注意什么问题？⑴⑵⑶14．在进行多组实验过程中，应注意做好标记，其目的是。
思考：应标记哪些内容？怎样操作更有利于实验的进行？15．对所需的微生物进行初步筛选，只是分离纯化菌种的第一步，要对分离的菌种进行一步的鉴定，还需要借助的方法。
BBqP5KvPU8思考：有哪些方法可以对菌种进行鉴定？【疑难点拨】1．选择培养基选择培养基的含义是：在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。
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土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案答案一、研究培养基对微生物的选择作用1.筛选菌株(1)自然界中目的菌株的筛选①原理：根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
②实例：能产生耐高温的Taq DNA聚合酶的Taq细菌就是从热泉中筛选出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。
②实例：从土壤中筛选能分解尿素的细菌。
③方法：利用选择培养基进行微生物的筛选。
2.选择培养基(1)概念：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
(2)举例：筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培养基是以尿素为唯一氮源，按物理性质归类为固体培养基。
1.筛选分解尿素的细菌的选择培养基下面是本课题使用的培养基的配方，请分析并回答下列问题：KH2PO4 1.4 gNa2HPO4 2.1 gMgSO4·7H2O 0.2 g葡萄糖10.0 g尿素 1.0 g琼脂15.0 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL(1)该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？答案碳源是葡萄糖，氮源是尿素。
(2)分离分解尿素的细菌的选择培养基是如何进行选择的？答案该选择培养基的配方中，尿素是培养基中的唯一氮源，因此，只有能够利用尿素的微生物才能够生长。
(3)为什么只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长？答案分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可将尿素分解成氨，从而为微生物提供氮源。
2.设计对照实验(1)如何设计对照实验验证该选择培养基的确筛选到了能分解尿素的细菌？答案增设牛肉膏蛋白胨基础培养基并进行涂布平板操作，如果牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数，则说明选择培养基的确起到了筛选能分解尿素的细菌的作用。
(2)如何设计对照实验验证所用的选择培养基没有受到污染？答案设置一个未涂布平板的能筛选分解尿素的细菌的选择培养基。
归纳总结选择培养基的分类(1)利用营养缺陷型选择培养基进行的选择培养：通过控制培养基的营养成分，使营养缺陷型微生物不能正常生长。
(2)利用化学物质进行的选择培养：在完全培养基中加入某些化学物质，利用加入的化学物质抑制某些微生物的生长，同时选择所需的微生物。
(3)利用培养条件进行的选择培养：改变微生物的培养条件(如高温、特殊pH等)，筛选特定微生物。
1.下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是()A.用全营养牛肉膏蛋白胨培养基筛选大肠杆菌B.用高NaCl的培养基筛选抗盐突变菌株C.含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的菌株D.利用高温条件筛选耐热的Taq细菌答案 A解析全营养牛肉膏蛋白胨培养基常用于大肠杆菌的培养，该培养基对微生物无选择作用，A项错误；抗盐突变菌株具有耐高盐的能力，因此可以利用高NaCl的选择培养基进行选择培养，B项正确；分解尿素的菌株能将尿素分解成氨，使培养基pH升高，因此可以利用含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的菌株，C项正确；利用高温条件可以筛选耐热的Taq细菌，D项正确。
2.下表是微生物培养基的成分。
下列有关说法错误的是()编号①②③④⑤成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量/g 0.4 4.0 0.5 0.5 100 mLA.此培养基可用来培养自养型微生物B.此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源C.若除去①，此培养基可培养圆褐固氮菌D.培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源、氮源和生长因子答案 C解析分析题表可知，该培养基成分中含有水、无机盐、氮源，但不含含碳有机物，可用来培养自养型微生物，A、B项正确；圆褐固氮菌同化类型为异养型，培养基中必须存在含碳有机物，所以该培养基不能用来培养圆褐固氮菌，C项错误。
方法技巧选择培养基的常见类型(1)分离微生物所用的选择培养基一定是固体培养基，因为菌落只能在固体培养基上形成。
(2)常见的选择培养基①加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。
②加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。
③无氮源培养基可以分离固氮微生物。
④以石油为唯一碳源的培养基，可以分离能消除石油污染的微生物。
⑤将培养基放在高温环境中培养，可以分离耐高温的微生物。
二、进行微生物数量的测定1.统计菌落数目(1)方法：统计样品中微生物数量的方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。
常用来统计活菌数目的方法是稀释涂布平板法。
(2)统计依据：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
(3)操作①设置重复组，增强实验的说服力与准确性。
②为保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
③统计的菌落数往往比活菌实际数目低。
(4)计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。
2.设置对照(1)对照实验：是指除了被测试条件以外，其他条件都相同的实验。
(2)主要目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
例如，为了确认培养基是否被杂菌污染，需以不进行接种的培养基培养作为空白对照。
3.实验操作流程(1)土壤取样①取样原因：土壤有“微生物的天然培养基”之称，同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。
②土壤要求：富含有机质，pH接近中性且潮湿。
③取样部位：距地表约3～8 cm的土壤层。
(2)样品稀释①稀释原因：样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落数目。
②稀释标准：选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30～300之间，便于计数。
(3)微生物的培养与观察①培养：根据不同微生物的需要，控制适宜的培养温度和培养时间。
②观察a.观察方法：每隔24 h统计一次菌落数目，最后选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
b.菌落的特征：包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等。
(4)菌种鉴定①原理：细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，使培养基的碱性增强。
②方法：以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，若指示剂变红，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。
4.操作提示(1)无菌操作①取土样的用具在使用前都需要灭菌。
②实验操作均应在火焰旁进行。
(2)做好标记：本实验使用的平板和试管比较多，为避免混淆，使用前应标明培养基的种类、培养日期以及平板上培养样品的稀释度等。
(3)制定计划：对于耗时较长的生物实验，要事先制定计划，以便提高工作效率。
下面是土壤中尿素分解菌的分离与计数的实验流程示意图，请结合教材提供的资料分析回答下列问题：1.实验流程试写出分离土壤中分解尿素的细菌的实验流程(用文字和箭头表示)。
答案土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物培养→观察并记录结果→细菌计数。
2.统计菌落数目甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。
在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。
(1)甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230，该同学的统计结果是否真实可靠？为什么？答案不真实。
为增加实验的说服力与准确性，应设置重复实验，在同一稀释度下涂布3个平板，统计结果后计算平均值。
(2)乙同学在该浓度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学将21舍去，然后取平均值。
该同学对实验结果的处理是否合理？为什么？答案不合理。
微生物计数时，如果实验中出现重复实验的结果不一致的情况，应分析实验过程中可能的影响因素，找出差异的原因，而不能简单地舍弃后进行计数。
(3)某同学在三种稀释度下吸取0.1 mL的菌液涂布平板，统计菌落数，得到以下的数据，试计算1 g样品的活菌数。
平板平板1 平板2 平板3稀释度104320 360 356105212 234 28710621 23 18答案105的稀释度下取0.1 mL涂布的三个平板上的菌落数在30～300之间，计算其平均值为(212＋234＋287)/3≈244。
进一步可以换算出1 g样品中活菌数为(244÷0.1)×105＝2.44×108个。
(4)为什么统计的菌落数比活菌的实际数目低？答案当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
3.对照实验设计的分析分析教材P22“设置对照”中的实例，探讨下列问题：(1)在A同学确定自己操作无误的情况下，A同学得出的菌落数多于其他同学的原因可能有哪两种？答案可能是他选择的土壤样品不同于其他同学；也可能是培养基受到了污染或操作失误。
(2)如何设计对照实验帮助A同学排除上述两个可能影响实验结果的因素？答案①其他同学用与A同学一样的土样进行实验，如果结果与A同学一致，则证明A同学操作无误；如果结果不同，证明A同学存在操作失误或培养基的配制有问题；②将A同学配制的培养基在不加土样的情况下培养作为空白对照，以判断培养基是否受到污染。
4.微生物数量测定的实验设计(1)为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？答案土壤中各种微生物的数量是不同的，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离。
(2)本实验中应如何统计培养基上生长的菌落数？答案每隔24 h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
(3)实验中的无菌操作主要有哪些？答案①培养基、锥形瓶、试管、铲子、信封等，需要进行灭菌。
②称取土壤要在火焰旁进行。
③稀释土壤溶液的每一步操作都要在火焰旁进行。
归纳总结分离尿素分解菌操作中的注意事项(1)在实验操作中，每个步骤都要注意无菌操作，以防培养基被污染，影响实验效果。
(2)样品稀释液的最佳浓度为培养后每个平板上有30～300个菌落的浓度。
细菌一般选104、105、106倍稀释液进行培养，放线菌一般选103、104、105倍稀释液进行培养，真菌一般选102、103、104倍稀释液进行培养。
(3)为排除非测试因素(培养基)的干扰，实验需设置牛肉膏蛋白胨培养基进行空白对照。
(4)每一稀释倍数的菌液都至少要涂布3个平板，作为重复实验，求其平均值，若其中有菌落数与其他平板悬殊过大的，需要对该平板重新制作。
3.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。
据图分析下列叙述正确的是()A.4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数一定恰为5号的10倍B.5号试管的结果表明每克该土壤中的菌株数目为1.7×108个C.在用移液管吸取菌液进行梯度稀释时，可用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与无菌水充分混匀D.某一稀释度下至少涂3个平板，该实验方法统计得到的结果常会比实际活菌数目高答案 C4.自然界中的微生物往往是混杂生长的。