蛋白质的透析实验
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透析实验
—— 蛋白质的透析
实验原理
透析是膜技术的一种，利用透析膜可以选择性 的透过一定大小分子，从而将待分离纯化的物 质和杂质离子分离开。 透析膜是半透膜，蛋白质是大分子物质，它不 能透过透析膜，而小分子物质可以自由通过透 析膜与周围的缓冲溶液进行溶质交换，进入到 透析液中。
常见的透析有：蛋白质的透析和糖类的透析。
检查透析效果的方法：用1％ BaCl2检查 (NH4)2SO4，用1％AgNO3检查NaCl、KCl 等
操作步骤
装样 取一段透析袋 10~15cm ，将其 一端用棉绳扎死，由开口端加入约 5ml待透析的样品溶液（蛋白质氯化 钠溶液），开口端用棉绳扎死，放 入盛有蒸馏水的烧杯中，系于一横 放在烧杯的玻璃棒上。
操作步骤
透析 用磁力搅拌器搅拌促进溶液交 换。透析过程中需要更换洗脱溶液 数次（约15min一次），至达到透析 平衡为止（洗出液中无 Cl- ），约需 1h.
检查透析效果
检查氯离子：自烧杯中取水1~2ml，加10%硝 酸溶液数滴使之成酸性，再加入1%硝酸银1~2 滴，检查氯离子的存在。 检查蛋白质：从烧杯中取1~2ml，做双缩脲反 应，检查是否有蛋白质存在。 双缩脲反应：加10%氢氧化钠1ml，振荡摇匀， 再加1%硫酸铜溶液1滴，振荡，观察是否出现 粉红色。
注意事项
把需要透析的样品盛于透析袋内，袋内留有挤 去空气的空余部分，以防由于溶剂渗入造成样 品体积增加而引起透析袋胀破 为了获得较快的透析速度，常常采取一些措施 保持膜两侧浓度差具有最大差，如经常更换透 析外液，连续搅动外液。
Leabharlann Baidu
透析装置（原理图）
实验仪器
磁力搅拌器
器材与试剂
器材：透析袋 ，烧杯，玻璃棒，磁力搅拌 器，试管及试管架。 试剂：饱和氯化钠溶液，10%硝酸溶液， 1%硝酸银溶液，10%氢氧化钠溶液，1%硫 酸铜溶液。
操作步骤
透析袋的处理：一般是将透析袋剪成10～ 20cm的小段，在2％（W/V）NaHCO3和 1mmol/L的EDTA（pH8.0）中煮沸10min， 用蒸馏水彻底洗尽透析袋，然后放在 1mmol/L的EDTA（pH8.0）中煮沸10min， 用蒸馏水彻底洗尽透析袋，冷却后，存放 于4℃，从此时起取用透析袋，必须戴手 套
—— 蛋白质的透析
实验原理
透析是膜技术的一种，利用透析膜可以选择性 的透过一定大小分子，从而将待分离纯化的物 质和杂质离子分离开。 透析膜是半透膜，蛋白质是大分子物质，它不 能透过透析膜，而小分子物质可以自由通过透 析膜与周围的缓冲溶液进行溶质交换，进入到 透析液中。
常见的透析有：蛋白质的透析和糖类的透析。
检查透析效果的方法：用1％ BaCl2检查 (NH4)2SO4，用1％AgNO3检查NaCl、KCl 等
操作步骤
装样 取一段透析袋 10~15cm ，将其 一端用棉绳扎死，由开口端加入约 5ml待透析的样品溶液（蛋白质氯化 钠溶液），开口端用棉绳扎死，放 入盛有蒸馏水的烧杯中，系于一横 放在烧杯的玻璃棒上。
操作步骤
透析 用磁力搅拌器搅拌促进溶液交 换。透析过程中需要更换洗脱溶液 数次（约15min一次），至达到透析 平衡为止（洗出液中无 Cl- ），约需 1h.
检查透析效果
检查氯离子：自烧杯中取水1~2ml，加10%硝 酸溶液数滴使之成酸性，再加入1%硝酸银1~2 滴，检查氯离子的存在。 检查蛋白质：从烧杯中取1~2ml，做双缩脲反 应，检查是否有蛋白质存在。 双缩脲反应：加10%氢氧化钠1ml，振荡摇匀， 再加1%硫酸铜溶液1滴，振荡，观察是否出现 粉红色。
注意事项
把需要透析的样品盛于透析袋内，袋内留有挤 去空气的空余部分，以防由于溶剂渗入造成样 品体积增加而引起透析袋胀破 为了获得较快的透析速度，常常采取一些措施 保持膜两侧浓度差具有最大差，如经常更换透 析外液，连续搅动外液。
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透析装置（原理图）
实验仪器
磁力搅拌器
器材与试剂
器材：透析袋 ，烧杯，玻璃棒，磁力搅拌 器，试管及试管架。 试剂：饱和氯化钠溶液，10%硝酸溶液， 1%硝酸银溶液，10%氢氧化钠溶液，1%硫 酸铜溶液。
操作步骤
透析袋的处理：一般是将透析袋剪成10～ 20cm的小段，在2％（W/V）NaHCO3和 1mmol/L的EDTA（pH8.0）中煮沸10min， 用蒸馏水彻底洗尽透析袋，然后放在 1mmol/L的EDTA（pH8.0）中煮沸10min， 用蒸馏水彻底洗尽透析袋，冷却后，存放 于4℃，从此时起取用透析袋，必须戴手 套