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实验十五 ABO血型鉴定
实验十五 ABO血型鉴定一、正定型法【目的】掌握用盐水介质法进行ABO血型系统(ABO group)正定型(direct typing)的原理、操作方法和结果判断。
【原理】用已知的IgM类特异抗体（标准血清）与被检红细胞在室温条件下、盐水介质中反应，根据红细胞是否出现凝集现象来测定被检红细胞膜上有无与血型抗体相对应的抗原，从而判断和鉴定被检者的血型。
【器材】1. 1.小试管、记号笔、蜡笔、试管架。
2. 2.尖滴管、胶吸头。
3. 3.吸管、吸耳球。
4. 4.载玻片或有凹槽的玻璃板或白瓷板。
5. 5.离心机。
6. 6.显微镜。
【试剂】1．标准抗A、抗B血清（商品）分为人血清ABO血型抗体和人ABO血型单克隆抗体，要求如下：（1）人血清ABO血型抗体：①特异性高。
②凝集效价：抗A不低于1∶128 ，抗B不低于1∶64。
③亲和力：反应开始15s内即出现凝集，3min时明显凝集，血凝块大于1mm2。
④稳定性高。
⑤已灭活补体。
（2）人ABO血型单克隆抗体：①特异性：抗A抗体特异凝集具有A型红细胞抗原的A1、A2、A1B、A2B；抗B抗体只凝集含B抗原的B和AB型红细胞。
②亲和力：以开始反应到出现凝集的时间表示抗血清的亲和力，国家标准是抗A对A1、A2、A2B分别为15s、30s、45s；抗B对B型红细胞为15s。
③凝集效价：国家标准是抗A1、抗B均大于1∶128。
④稳定性：较人血清抗体的稳定性低。
2．生理盐水。
【标本】抗凝静脉血或末梢血。
【操作】制备被检者5％红细胞生理盐水悬液：抗凝血离心或红细胞自然沉降后取试管下层的红细胞2滴于小试管中，加入生理盐水2ml，用尖滴管将红细胞与生理盐水充分混匀。
2 500r/min离心3 min 后弃去上清液，重复洗涤3次。
自管底吸取1滴压积红细胞加入19滴生理盐水中混匀，此即为5％的红细胞生理盐水悬液。
操作示意见图4-1。
图4-15％红细胞生理盐水悬液制备操作示意图1．玻片法（1）标记玻片或白瓷板：取洁净的载玻片或白瓷板1块，用蜡笔画出小格，标明抗A、抗B。
临床检验学课件ABO血型系统PPT课件
器官移植配型
ABO血型系统是输血前的重要检测项目， 通过鉴定血型，可以避免因血型不匹配引 发的输血反应，确保输血安全。
在器官移植中，供受体的ABO血型匹配是 确保移植成功的关键因素之一，通过ABO 血型系统检测可以降低排斥反应的风险。
新生儿溶血病诊断
遗传学研究
ABO血型系统检测对于新生儿溶血病的诊 断具有重要意义，能够及时发现并采取相 应治疗措施，保障母婴健康。
化学发光法
利用化学发光原理，通过 检测抗原抗体反应后的光 信号强度，确定血型。
ABO血型分型的临床意义
01
02
03
04
输血安全
通过ABO血型分型，确保输 血时血型匹配，避免因血型不
合引起的输血反应。
器官移植
供体和受体之间的ABO血型 匹配程度影响移植成功率及排
斥反应的发生率。
新生儿溶血病
新生儿溶血病的发生与母子 ABO血型不合有关，通过 ABO血型分型可早期发现并
亲子鉴定中的应用
ABO血型系统在亲子鉴定中具有重要作用，通过检测父母 和子女的ABO血型，可以初步判断是否存在亲生关系。
虽然ABO血型系统不能作为亲子鉴定的唯一依据，但可以 作为其他遗传标记的有力补充，提高亲子鉴定的准确性。
在疾病诊断中的应用
ABO血型系统与某些疾病的发生和发 展有关，例如某些肿瘤、糖尿病等。 通过对ABO血型的研究，有助于深入 了解这些疾病的发病机制和病理过程 。
血型与心血管疾病
ABO血型与心血管疾病的关系也受到 关注。研究表明，A型血的人患动脉粥 样硬化和心肌梗死的风险较高，而O 型血的人相对较低。
ABO血型系统的进化和起源研究
起源与进化
ABO血型系统的起源可以追溯到数百万年前，随着人类的进化，ABO血型系统的基因频率和分布在不 同人群中发生了变化。
血型鉴定基本知识
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16
注意事项
• 1、所用器材必须干燥清洁、防止溶血，凝集和溶 血的意义一样。为避免交叉污染，建议使用一次 性器材。标准血清从冰箱取出后，应待其平衡至 室温后再用，用毕后应尽快放回冰箱保存。
• 2、加试剂顺序：一般先加血清，然后再加红细胞 悬液，以便核实是否漏加血清。
• 3、虽然IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以 4℃最强，医学教育网收集整理但为了防止冷凝集 现象干扰，一般在室温20℃～24℃内进行试验， 而37℃条件，可使反应减弱。
• 红细胞亚型抗原性弱，如抗A抗B标准血清效价低 时，易造成漏检或误定。如加用O型（抗A、B） 血清和反向定型，可避免此类错误。
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鉴定方法
• 玻片法凝集结果判断：红细胞呈均匀分布，无凝集颗粒， 镜下红细胞分散。在低倍镜下凝集程度强弱判断标准：
• ①呈一片或几片凝块，仅有少数单个游离红细胞为 （++++）。
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Thank you for your listening
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的检测。红细胞含A抗原的叫A型，含B抗
原的叫B型，含A和B抗原的叫AB型；不含
A、B抗原，而含H抗原的称O型。
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3
正常范围
• ABO血型分为A型、B型、O型、AB型。
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4
临床意义
• ABO血型鉴定主要用于： • 1、临床输血：当循环血量不足或大失血或
贫血需进行输血治疗，在输血前必须先选 择血型相同的供血者，再进行交叉配血， 完全相同后才能输血。 • 2、在皮肤、肾移植等器官移植的时候选择 ABO血型相符的供体。 • 3、不孕症和新生儿溶血症病因的分析。 • 4、亲子鉴定等。
ABO血型鉴定PPT课件
人体的血液是怎样产生的
• 血液是一种流体组织，充满于心血管系统中，在 心脏的推动下不断循环流动。每个人体内的血液， 都是自己体内产生的，不是由母体血液流入胎儿 血管先天带来的。骨髓是人体最重要的造血器官。 在正常情况下它不仅生成红细胞、粒细胞和血小 板，同时也生成淋巴细胞和单核细胞。骨髓每秒 钟可造出1700万个血细胞。人体血液中所有不同 的血细胞，都是来自于肝脏、骨髓和胸腺里的始 祖细胞——多能干细胞及由此移行的定向干细胞。 这就是人体血液产生的基本道理。
输血概况
谁是第一个把人血输给人的？
目前公认的是英国妇产科医生Blundell（布伦德尔 ）。他在 1817—1818年作了大量实验，并于 1818年12月22日在伦 敦举行的内科学会上作了输血报告，引起了医学界的轰动 。还首创了重力输血器，利用重力来作输血时的推动力， 这种输血方法一直沿用了100年左右。
四、实验步骤
实验步骤
取干净载玻片
滴加定型剂
取血
消毒
取血
观察
记录结果
消毒 消毒
①
②
抗A
抗B
③用70－75％的酒精消毒取血部 位
消毒取血部位
④用针扎一下消毒部位，使血冒出，立 即滴一滴血液在抗A或B上。
抗A
抗B
⑤再用70－75％的酒精擦洗消毒刚用针扎的部 位，然后再取一滴血液于抗B或A上。
抗A
我国汉族人口总的血型比例顺序为： O(34.11%)﹥ B(28.98%)﹥A(28.29%)﹥AB(8.69%)。
Rh血型在我国99％以上是Rh阳性，在我国汉族人群中Rh血型阴性的仅占 0.3%左右。白种人Rh阴性约占15％，黑种人约占4％。
ＡＢＯ血型系统是如何定型的？
最新ABO、Rh(D)血型鉴定PPT课件
缺点：
1、只能检测出完全抗体（抗-A、抗-B）引起的血 型不合，对免疫性抗体引起的血型不合不能检出， 有输血史或不明输血史及妊娠史不能用该法。
2、本实验中的生理盐水对血清（浆）中的抗体有 稀释作用，易导致配血结果假阴性。
3、易受冷凝集素的干扰。
聚凝胺配血法 1、在盐水配血法操作完后，主、次侧加入低离子强度
2.从“切合题目”的角度分析本诗，恰当的一项 是（ ）。 A.第一、二句中的“西山”“南浦”切合“野” 字。 B.第三、四句“海内”“天涯”切合“野望“二 字。 C.第五、六句中的“迟暮”“涓埃”切合“望 “字。 D.第七句中的“出郊”“极目”切合“野望”二 字。
(三)阅读下面一首唐诗，完成选择题。 题李凝幽居 贾岛
细胞、吸管、玻片等
方法：正定型和反定型 原理：正定型是检测红细胞表面的抗原，用标
准抗A和抗B分型血清测定红细胞上有无相应 的A抗原或（和）B抗原；反定型是检测血清 （浆）中的抗体，用标准A型细胞和B型细胞 测定血清中有无相应的抗A和（或）抗B抗体。
Rh(D)血型定型
目的：鉴定红细胞表面是否含有D抗原。 适用范围：受血者、献血者Rh(D)血型鉴定 使用器材和材料：Rh抗(-D)标准血清、吸管、玻片等
无 凝 集
3400r/ min，
各加重悬
开
红 细
液2滴， 胞
离心 10S。
轻摇试管，
均 匀
观察结果。 散
凝 集 红 细 胞 凝 集 成 团
不畏浮云遮望眼 自缘身在最高层
诗歌鉴赏选择题解法探究
三台中学补习中心 李俊科
教学目标
1、了解高考诗歌鉴赏客观题的设题角度 （考什么?） 。 2、探究高考诗歌鉴赏客观题的设题陷阱
ABO血型和MN血型鉴定ppt课件
操作技术要求较低： 凝胶试验的操作主要是简单的加样和判读，孵育、 离心过程都有专门的设备。其中能被人为改变的 因素较少。
无需洗涤的抗球蛋白试验：
.
24
缺点
不能做反定型
凝胶试验方法成本较高，需要特殊设备。 高度敏感有时也会造成不便。
.
25
MN血型鉴定
试剂
抗M、抗N试剂血清 M型、N型、MN型红细胞 受检者红细胞悬液
.
6
ABO血型鉴定
原理： 根据ABO血型的分型原则及其独特的性质，利
用凝集试验技术通过正定型（红细胞定型）和反定 型（血清定型）两组试验可准确鉴定ABO血型。 试剂： 抗A、抗B 试剂血清 A型、B型和O型试剂红细胞悬液 2-3 %受检者红细胞悬液和血清或全血
.
7
ABO血型鉴定
方法： 玻片法 不适于血清抗体鉴定 试管法 正定型、反定型
.
31
完成便判定反应结果，可使阳性结果误报成阴性结
果，造成假阴性。所以玻片法血型鉴定要严格规定
观察结果的时间
.
19
凝胶试验使用的试剂和器材
.
20
.
21
凝胶技术
.
22
凝胶法鉴定ABO血型
.
23
优点：
敏感： 在凝胶试验中常能发现其它试验不易发现的问题。
结果可保存： 凝胶试验的结果可在冰箱中保存数日，并且较容 易被拍成照片。
存在相应抗原；如受检者血清与试剂红细胞发生凝集
，说明血清中存在相应的抗体；如不发生凝集，说明
不存在相应抗体。
.
15
为什么ABO血型鉴定应采用“正反定型”两种方法？
因为 ABO 血型鉴定,主要依据受检者红细胞与 抗A 、抗B 试剂血清反应结果确定,此法称正定型法； 也可通过受检者的血清与A型、B型和O型试剂红细 胞反应结果确定,此法称反定型法，同时采用正反定 型法,并互相核对其结果是否一致是一个可靠的血型 鉴定法。
无需洗涤的抗球蛋白试验：
.
24
缺点
不能做反定型
凝胶试验方法成本较高，需要特殊设备。 高度敏感有时也会造成不便。
.
25
MN血型鉴定
试剂
抗M、抗N试剂血清 M型、N型、MN型红细胞 受检者红细胞悬液
.
6
ABO血型鉴定
原理： 根据ABO血型的分型原则及其独特的性质，利
用凝集试验技术通过正定型（红细胞定型）和反定 型（血清定型）两组试验可准确鉴定ABO血型。 试剂： 抗A、抗B 试剂血清 A型、B型和O型试剂红细胞悬液 2-3 %受检者红细胞悬液和血清或全血
.
7
ABO血型鉴定
方法： 玻片法 不适于血清抗体鉴定 试管法 正定型、反定型
.
31
完成便判定反应结果，可使阳性结果误报成阴性结
果，造成假阴性。所以玻片法血型鉴定要严格规定
观察结果的时间
.
19
凝胶试验使用的试剂和器材
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20
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21
凝胶技术
.
22
凝胶法鉴定ABO血型
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23
优点：
敏感： 在凝胶试验中常能发现其它试验不易发现的问题。
结果可保存： 凝胶试验的结果可在冰箱中保存数日，并且较容 易被拍成照片。
存在相应抗原；如受检者血清与试剂红细胞发生凝集
，说明血清中存在相应的抗体；如不发生凝集，说明
不存在相应抗体。
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15
为什么ABO血型鉴定应采用“正反定型”两种方法？
因为 ABO 血型鉴定,主要依据受检者红细胞与 抗A 、抗B 试剂血清反应结果确定,此法称正定型法； 也可通过受检者的血清与A型、B型和O型试剂红细 胞反应结果确定,此法称反定型法，同时采用正反定 型法,并互相核对其结果是否一致是一个可靠的血型 鉴定法。
ABO血型和MN血型鉴定课件
抗体亲和力测定
•ABO血型和MN血型鉴定
•4
血清标本
抗凝或不抗凝血标本→37℃水浴箱→竹签使血块与 试管壁分离→离心→将血清吸至干净试管待用
•ABO血型和MN血型鉴定
•5
ABO血型鉴定
• 原理： 根据ABO血型的分型原则及其独特的性质，利
用凝集试验技术通过正定型（红细胞定型）和反定 型（血清定型）两组试验可准确鉴定ABO血型。 • 试剂： 抗A、抗B 试剂血清 A型、B型和O型试剂红细胞悬液 2-3 %受检者红细胞悬液和血清或全血
•16
为什么红细胞悬液过浓或过淡均可出现假阴性反应结 果？
因为抗原、抗体在适当的比例下，反应最强。若 红细胞悬液过浓，则抗原过剩，抗体不足，每个红细 胞均只能吸收少量抗体，不足以形成凝集。若红细胞 悬液过淡，则红细胞间距离较大，不易集聚在一起， 不形成凝集。在实际血型鉴定时，玻片法用 5% 红细 胞悬液敏感性较强，并应在鉴定过程中不断摇动玻片 以促使其相互接触。试管法用 2% 浓度的红细胞悬液 敏感性较好，容易观察凝集。
•ABO血型和MN血型鉴定
•25
• 结果判读
MN血型结果判定
抗M
抗N
血型
被检红细胞 1 +
—
M
被检红细胞 2 —
+
N
被检红细胞 3 +
+
MN
M+N+红细胞
+
M- N+红细胞 —
M+N+红细胞
+
M+N- 红细胞
—
•ABO血型和MN血型鉴定
•26
，说明血清中存在相应的抗体；如不发生凝集，说明
不存在相应抗体。
ABO血型鉴定
• 2.临床上在输血前必须注意鉴定血型,进行交叉配血,以 确保安全输血。
第十七页，编辑于星期四：九点 四十分。
• 1．人体的血液是怎样产生的
• 2．血液有哪些功能
• 3．血液由哪些成分组成 • 4．造血需要哪些原料 • 5．血型
• 6．父母的血型与子女的血型关系
• 7．输血
• 8．血型与性格
第十八页，编辑于星期四：九点 四十分。
抗A
抗B
第十二页，编辑于星期四：九点 四十分。
⑤再用70－75％的酒精擦洗消毒刚用针扎的部位 ，然后再取一滴血液于抗B或A上。
抗A
抗B
第十三页，编辑于星期四：九点 四十分。
观察有无凝集，并按下表判定结果。
呈现均匀的淡红色时，表明不凝集，用“一”号表示。 在试剂里凝结成絮团状，形成鲜明的对比，表明凝集，用“十”号表示。
第十九页，编辑于星期四：九点 四十分。
血液有哪些功能
到目前为止，世界上还没有哪个国家能够人工制造血液 来代替人类自身血液的生理功能。人们之所以把血液看 作为生命的象征，就是在于血液对于维持人体生命所具 有的十分重要的功能。主要有以下几点。◆运功能。 ◆调节功能。 ◆防御功能。
◆维持酸碱平衡和渗透压的功能。
血型不相容的两人血液 混合,则红细胞可凝集成簇
含某种凝 集原的红 细胞
含相应凝集
+ 素的血清
红细胞凝集反应 (agglutination)
第六页，编辑于星期四：九点 四十分。
三、实验材料 消毒采血针
载玻片
消毒棉签 抗A、抗B血型定型试剂
75%乙醇
受检者血液
第七页，编辑于星期四：九点 四十分。
• 人的性格是人的一种行为表现，性格属于 精神范畴而不属于物质范畴。由于性格不 是遗传基因物质，因此不存在遗传性。人 的性格只是在人出生以后，受环境等诸多 因素潜移默化的影响而逐步形成的。同时 它又随人的年龄和环境的改变而有所变化， 并非“本性难移”，而是具有可塑性的。 因此无论从理论上或是事实上，都说明血 型与性格之间不存在任何必然性的联系。
第十七页，编辑于星期四：九点 四十分。
• 1．人体的血液是怎样产生的
• 2．血液有哪些功能
• 3．血液由哪些成分组成 • 4．造血需要哪些原料 • 5．血型
• 6．父母的血型与子女的血型关系
• 7．输血
• 8．血型与性格
第十八页，编辑于星期四：九点 四十分。
抗A
抗B
第十二页，编辑于星期四：九点 四十分。
⑤再用70－75％的酒精擦洗消毒刚用针扎的部位 ，然后再取一滴血液于抗B或A上。
抗A
抗B
第十三页，编辑于星期四：九点 四十分。
观察有无凝集，并按下表判定结果。
呈现均匀的淡红色时，表明不凝集，用“一”号表示。 在试剂里凝结成絮团状，形成鲜明的对比，表明凝集，用“十”号表示。
第十九页，编辑于星期四：九点 四十分。
血液有哪些功能
到目前为止，世界上还没有哪个国家能够人工制造血液 来代替人类自身血液的生理功能。人们之所以把血液看 作为生命的象征，就是在于血液对于维持人体生命所具 有的十分重要的功能。主要有以下几点。◆运功能。 ◆调节功能。 ◆防御功能。
◆维持酸碱平衡和渗透压的功能。
血型不相容的两人血液 混合,则红细胞可凝集成簇
含某种凝 集原的红 细胞
含相应凝集
+ 素的血清
红细胞凝集反应 (agglutination)
第六页，编辑于星期四：九点 四十分。
三、实验材料 消毒采血针
载玻片
消毒棉签 抗A、抗B血型定型试剂
75%乙醇
受检者血液
第七页，编辑于星期四：九点 四十分。
• 人的性格是人的一种行为表现，性格属于 精神范畴而不属于物质范畴。由于性格不 是遗传基因物质，因此不存在遗传性。人 的性格只是在人出生以后，受环境等诸多 因素潜移默化的影响而逐步形成的。同时 它又随人的年龄和环境的改变而有所变化， 并非“本性难移”，而是具有可塑性的。 因此无论从理论上或是事实上，都说明血 型与性格之间不存在任何必然性的联系。
(医学PPT课件)ABO亚型鉴定
ABx 4+ w 4+ 4+ w/0 0 0 w 0
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cisAB
cisAB是一种罕见的ABO亚型，人群中的发生率非常低，大约在170000 到580000之间。 最早出现起源于亲代与子代的ABO血型是遗传的矛盾， 按照ABO三复等位基因学说和孟德尔遗传定律，AB和O型的双亲不可能 生下AB型或O型的子代。
Aend 1+mf 0 1+mf 0 4+ 0/w 0 4+ 0
H
1、A3凝集细胞占60%；Aend凝集细胞占10%，Aend需多次离心
才能被发现。
2、出现mf时，要进行临床调查，了解患者是否是为白血病或骨
髓移植，如疑是疾病原因造成，应慎报亚型。
7
Ax、Ael和Am
抗血清
试剂红细胞
唾液
（分泌 -A -B -AB -A1 -H A1 A2 B O 型）
抗血清
试剂红细胞
唾液
（分泌 -A -B -AB -A1 -H A1 A2 B O 型）
A1 4+ 0 4+ 2+ W/0 0 0 4+ 0 A/H
A2 4+ 0 4+ 0 3+ 0/W 0 4+ 0 A/H
A int 4+ 0 4+ 2+ 3+ 0 0 4+ 0 A/H
1、如无抗-A1，A1和A2不需加以区分。
极少数人类个体的一条9号染色体上存在一个cisAB或B（A）
基因，它编码的酶具有双功能活性，可以同时催化A抗原和B抗 原的合成。 cisAB的A抗原接近正常，B 抗原较正常弱很多；B(A)的B抗原 接近正常，A抗原弱很多。
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