厌氧培养的原理

一、厌氧培养的原理

厌氧培养的原理有两方面：一是除去与培养基接触的空气中的氧气；二是增强培养基的还原能力，达到吸收容量中的氧气的目的，是微生物处于无氧的环境中。

二、实验器材

菌种：魏氏梭菌

培养基：卵黄琼脂培养基、疱肉培养基

仪器：恒温水是培养箱、干燥器、真空泵、玻璃平皿、无菌脱脂棉、透明胶三、实验内容及方法

取疱肉培养基试剂管煮沸10——15分钟，感触其溶解的氧气，取出，并迅速冷却，切勿摇动，并按下列步骤操作：

1、接种样品均质液1——2ml或10ml，置于恒温30.C的培养箱内培养五天。若无异常现象可再培养十天。若产生混浊并散发奇臭怪味或发酵形成消化肉渣（底部出现黑色沉淀）的即为疱肉培养基试管呈阳性，咋可待用。

2、从阳性疱肉培养基试管中挑出菌种（菌株），划线于卵黄琼脂平板待用。

3、将上述处理后的平板至于干燥器内，在干燥器上涂一层凡士林使其密封，用真空泵抽成真空，立刻关闭干燥器活塞

4、在干燥器底部预先装2.0克焦性没食子酸粉末，并斜置一烧杯，其中装有200ml20%KOH溶液，当抽气完毕关闭干燥器的活塞后，轻轻摇动干燥器，使烧杯倾斜使焦性没食子酸粉末与KOH溶液互相混合，此时容器中的氧便被吸收

5、在干净的玻璃平皿底面上预先称取1g焦性没食子酸，盖上一块无菌脱脂棉，加入10%NAOH1ml，使其缓慢均匀地流入脱脂棉的四周及中心，待脱脂棉呈棕色时，迅速将待用划线卵黄琼脂培养基扣紧，接口处用宽透明胶带贴数圈（不得有气泡，保证平整）

6、将干燥皿、干燥器放入恒温37.C的培养箱培养24小时即可。

四、实验结果

观察菌是否生长