基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometer,MALDI-TOF MS)是一种常用的质谱仪,用于分析生物大分子(如蛋白质、肽段、核酸等)的质量和结构。
MALDI-TOF MS利用基质辅助激光解吸电离(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization)技术将待测样品与一种辅助基质混合,并将其固化在一个固体基质上。
然后,激光脉冲照射样品-基质混合物,激发基质分子中的光吸收和能量转移,从而促使样品中的分子以离子形式释放出来。
这些离子被加速器加速,然后根据它们的质量-电荷比(m/z)通过时间-of-flight (TOF)进行分离和检测。
MALDI-TOF MS具有以下特点和优势:
高灵敏度:能够检测到极低浓度的样品。
高分辨率:能够分辨具有相似质量的离子。
宽质量范围:能够检测从小分子到大分子的广泛质量范围。
快速分析:样品的分析过程通常很快,可以在几秒钟到几分钟内得到结果。
不需要事先纯化样品:适用于复杂混合物的直接分析。
广泛应用:在生物医学、生物化学、蛋白质组学、药物发现等领域有广泛的应用。
MALDI-TOF MS在生物大分子分析和结构鉴定方面具有重要的应用价值,对于研究生物分子的功能、相互作用和变化等提供了强大的工具。
基质辅助激光解吸电离-串联飞行时间质谱仪
基质辅助激光解吸电离-串联飞行时间质谱仪
基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)是一种高分辨率、高灵敏度的质谱仪设备,用于分析生物大分子和有机化合物。
该技术利用基质辅助激光解吸(MALDI)方法,将样品与基质混合施加于样品板上,在激光的作用下分子产生共振激发,然后通过电离和加速器分析,最终实现质谱分析的目的。
这种质谱仪广泛应用于各个领域,如蛋白质组学、药物发现和制造、食品科学、环境检测等。
它具有快速、高灵敏度、高分辨率、低检测限、高通量等优点,可以分析极微量的生物分子,如蛋白质、肽、核酸、糖类等,甚至可以分析非挥发性和热不稳定的分子。
MALDI-TOF-MS质谱仪的主要部件包括激光系统、样品载体、离子源、加速器、飞行时间质量分析器和数据采集系统等。
它可以通过不同的模式实现离子的分析,如正离子模式、负离子模式、反向相模式、碎片模式等。
此外,MALDI-TOF-MS 还可以通过结合其他分析技术,如气相色谱、液相色谱等,来增强其分析能力。
总之,MALDI-TOF-MS技术已经成为一种不可替代的分析手段,为生物、医药、食品、环境等领域的研究和应用带来了很大的便利。
核酸基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在结核病和非结核分枝杆菌病诊断专家共识要点
核酸基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在结核病和非结核分枝杆菌病诊断专家共识要点核酸基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)在结核病和非结核分枝杆菌病(Nontuberculous Mycobacteria, NTM)的诊断中起到了重要的作用。
本文将总结核酸基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在结核病和NTM病诊断方面的专家共识要点。
1.技术原理:MALDI-TOFMS技术通过将分离的菌落直接吸附于基质上,并利用激光解吸和电离的原理对蛋白质进行检测和鉴定。
通过将分子的质荷比与已知数据库中的蛋白质质谱图进行比对,可以快速准确地确定菌株的物种和亚型。
2.结核病诊断:MALDI-TOFMS技术可以用于结核分枝杆菌的识别和鉴定。
结核分枝杆菌是引起结核病的主要致病菌株,通过MALDI-TOFMS技术可以快速准确地识别结核分枝杆菌,有助于早期诊断和治疗。
3.NTM病诊断:NTM是引起非结核分枝杆菌病的致病菌株,与结核分枝杆菌相比,NTM种类繁多,且具有耐药性。
传统的方法对于鉴定NTM菌株的种类和亚型耗时且复杂,而MALDI-TOFMS技术具有快速、准确的优势,可用于鉴定不同种类和亚型的NTM菌株,为临床诊断和治疗提供参考。
4.技术优势:MALDI-TOFMS技术具有快速、高效、准确、经济的特点,可以在几分钟内完成对菌株的鉴定,有效缩短了传统培养方法所需的时间。
此外,该技术还可以对菌株进行分子分型,有助于了解疫情传播链及菌株耐药性情况。
5.限制和挑战:MALDI-TOFMS技术在结核病和NTM病的诊断中存在一定的限制和挑战,例如对于一些高度相似的菌株进行区分可能存在困难,同时对于未知菌株的鉴定可能不够准确。
此外,建立完善的蛋白质数据库也是技术推广和应用的重要挑战。
综上所述,核酸基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在结核病和NTM病的诊断中具有显著的优势和价值,可以快速准确地鉴定不同种类和亚型的致病菌株,为临床诊断和治疗提供重要依据。
jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱
jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱是一种先进的质谱技术,它结合了基质辅助激光解吸电离(MALDI)和飞行时间质谱(TOF-MS)两种技术的优势,能够在分析生物大分子和其他复杂样品时提供高灵敏度和高分辨率的数据。
在MALDI-TOF-MS中,样品与基质混合后通过激光辅助电离,产生一系列的离子,这些离子在一个电场中被加速到一定能量后,根据其质荷比分别飞行到检测器,通常基于TOF-MS的仪器会有高质量的检测结果。
针对这一主题,我们将深入探讨jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱的原理、应用及优势,并探讨其在生物医学研究、生物技术领域的重要意义。
我们将对该技术的未来发展和趋势进行分析和展望,以帮助您更全面地了解jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱。
理解jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱的原理对于深入探讨这一主题至关重要。
这种技术利用了MALDI和TOF-MS两种技术的优势,MALDI能够提高大分子的离子化率,TOF-MS能够提供高分辨率和高灵敏度的分析结果。
jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱可以在保证数据质量的提高分析的速度和效率。
我们将深入探讨jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱在生物医学研究和生物技术领域的应用。
这种技术在生物医学研究中可以用于蛋白质组学和代谢组学的分析,能够帮助科学家更好地理解疾病的发病机制、开发新的药物或者诊断方法。
在生物技术领域,jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱也能够用于生物药物的质量控制和分析,可以提高生物药品的质量和安全性。
我们还将重点分析jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱的优势,比如高分辨率、高灵敏度、高通量等特点,以及与其他质谱技术的比较。
这可以帮助您更好地了解jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱在分析复杂样品时的优势和局限性。
通过对jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱的未来发展和趋势进行分析和展望,我们可以帮助您更好地把握这一技术的发展方向和未来的应用前景,为您在相关领域的研究和应用提供更多的启发和帮助。
邻苯二甲酸为基质用于基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱测定小分子物质
( 1 . S c h o o l o f L i f e S c i e n c e , N a n j i n g N o r m a l U n i v e r s i t y , N a n j i n g 2 1 0 0 2 3 , C h i n a )
[ 摘要] 以邻苯二 甲酸为基质对多 巴胺 ( 1 5 3 . 0 8 D a ) 进行基 质辅助激光 解吸/ 电离飞行 时间质谱 ( MA L D I T O F —
T O F MS ) 分 析. 结果表 明 , 邻苯二 甲酸作 为基质可以有效解 吸 电离 多 巴胺 , 基质 干扰 峰明显减 少 , 产 生 出了分辨
( 2 . An a l y s i s a n d T e s t i n g C e n t e r , N a n j i n g N o r ma l U n i v e s r i t y , N a n j i n g 2 1 0 0 2 3 , C h i n a )
M a t r i x - - As s i s t e d La s e r De s o r pt i o n /I o ni z a t i o n Ti me - - o f - Fl i g h t Ma s s Spe c t r o mc Ac i d Ma t r i x f o r S ma l l Mo l e c u l e An a l y s i s
d i s p l a y e d a t l e st a t w o a d v a n t a g e s . F i r s t , i t wa s p o s s i b l e t o a v o i d l o w ma s s c h e mi c a l n o i s e a r i s i n g f r o m t h e ma t ix r i n p o s i t i v e — i o n mo d e . S e c o n d, p h t h li a c a c i d c o u l d b e u s e d c o n v e n t i o n ll a y d u e t o t h e l o w c o s t . T h e MAL DI — T OF — MS a n ly a s i s o f d o p a mi n e d e mo n s t r a t e d t h a t t h e ma t i r x ma t e ia r l b a s e d o n p h t h li a c a c i d y i e l d e d s p e c t r a w i t h mi n i ma l c h e mi c l a n o i s e
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法检测2型糖尿病患者visfatin基因多态性
余的 dT N P将被去磷 酸消化掉 , 反应体系包括 15 L .3t z
12 临床 资料 的 收 集 和 生化 指 标 的 测 定 .
△通信 作 者 。 E— i: e e16 @ yh .o1e ma w i n9 7 a u en.l l r l
及 0 1I o t a . L H t a T q酶 ( i e ) 合在 一起 。P R L Sr Qa n 混 g C
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分析 。
1 35 等 位 基 因判 别 . .
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广东医学
21 0 1年 1月 第 3 2卷第 2期
个 循环 ; 后 7  ̄ i 。在 终 止 反 应 物 中加 入 6 mg 最 2C 3r n a
阳 离子 交 换 树 脂 ( eu nm) 盐 , 合 后 加 入 2 I Sq eo 脱 混 5
水悬 浮。
13 4 样 本 分 析 ..
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 技术的主要特点是,先通过PCR扩增目标序列,然后加入snp序列特异延伸引物,在SNP 位点上,延伸1个碱基。
将制备的样品分析物与芯片基质共结晶,将该晶体放入质谱仪的真空管, 而后用瞬时纳秒(10-9s) 强激光激发,由于基质分子经辐射所吸收的能量,导致能量蓄积并迅速产热,从而使基质晶体升华,核酸分子就会解吸附并转变为亚稳态离子,产生的离子多为单电荷离子,这些单电荷离子在加速电场中获得相同的动能,进而在一非电场漂移区内按照其质荷比率加以分离,在真空小管中飞行到达检测器。
MALDI产生的离子常用飞行时间(Time-of-Flight,TOF)检测器来检测,离子质量越小,就越快到达。
理论上讲,只要飞行管的长度足够,TOF检测器可检测分子的质量数是没有上限的。
MassARRAY SNP 检测的质谱范围为5000 to 8500 Da。
主要用途: 1.对生物大分子物质分子量的测定; 2.对蛋白质进行高通量的鉴定; 3.对有机小分子化合物分子量的测定; 4.对寡核苷酸的分析; 5.对基因的单核苷酸多态性的分析仪器类别:0303071402 /仪器仪表/成份分析仪器/质谱仪指标信息: 1.质量数测定范围最高可达40万Da以上; 2.检测灵敏度范围:10-15~10-18摩尔; 3.质量准确度可达5ppm; 4.分辨率右达2万。
附件信息:配有源后衰变装置,可对多肽、蛋白质的序列进行分析机组简介:基质辅助激光角吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS Reflex Ⅲ):具有操作简单、快速、谱图直观、能耐受一定浓度的盐和去垢剂等特点,特别适合于混合多肽、蛋白、寡核苷酸的精确质量数测定,其测定质量数范围最高可达40万Da以上,灵敏度可达10-15~10-18摩尔,质量准确度5ppm。
配有源后衰变(post-sourc e decay, PSD)装置,计算机自动联机检索系统。
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱微生物鉴定系统性能验证方案的建立
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱微生物鉴定系统性能验证方案的建立徐蓉;慎慧;黄媛媛;何丽华;倪丽君;郭建;吴文娟【摘要】目的建立基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF MS)在常规临床微生物鉴定中的性能验证方法,指导临床实验室规范微生物鉴定程序.方法选取标准菌株、质控菌株和临床菌株共115株,包含革兰阳/阴性球菌30株、革兰阳/阴性杆菌31株、真菌30株,厌氧菌、苛养菌各12株,所有菌株均经Vitek Compact鉴定和/或细菌16S rDNA、真菌ITS DNA测序分析验证.任意选择3种MALDI-TOF MS微生物鉴定系统厦门质谱、布鲁克质谱、安图质谱,采用检测系统推荐方法进行菌株鉴定,进行准确度验证试验.精密度验证:选取标准菌株和临床菌株10株,1位操作者使用3个检测系统对10株菌株分别进行质谱鉴定3次,连续鉴定3 d;3位操作者使用3个检测系统对10株菌株每d分别进行质谱鉴定3次,连续鉴定3 d,从而验证鉴定结果的重复性.结果厦门质谱、布鲁克质谱、安图质谱对标准/质控菌株(除外厌氧菌)的鉴定符合率为100%;对临床菌株的属水平鉴定符合率为100%;对革兰阴/阳性杆菌的种水平鉴定符合率分别为100%、100%、96.77%;对革兰阳性球菌的种水平鉴定符合率分别为96.67%、96.67%、100%;对真菌的种水平鉴定符合率均为90%一致;对苛养菌的种水平鉴定符合率均为100%;对厌氧菌鉴定符合率为91.67%种水平一致.精密度验证试验结果重复性100%.结论 3种MALDI-TOF MS系统在革兰阳/阴性球菌、革兰阳/阴性杆菌、真菌、苛养菌鉴定的准确度和精密度符合要求,验证通过.本文建立的微生物鉴定质谱仪性能验证方案可满足综合性医院临床微生物实验室常规鉴定基本要求.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2018(036)010【总页数】5页(P783-787)【关键词】基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱;性能验证;微生物鉴定【作者】徐蓉;慎慧;黄媛媛;何丽华;倪丽君;郭建;吴文娟【作者单位】上海市临床检验中心临床微生物室,上海200126;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123【正文语种】中文【中图分类】R446.520世纪90年代末,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)成功应用于微生物菌种鉴定并得到迅猛发展。
高效液相色谱-基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱分离鉴定牛乳铁蛋白素
S p rto n t Uo o ielcoe rcnb ih e aaina ie e t fb vn t frii yhg d f a dni i O a
pr r ac qi c m t h-a i- s t ef m ne i d  ̄ a o lu o y tx s s d m r a ie
时 间
摘 要 : 立 了高 效 液 相 色 谱 一 质 辅 助 激 光解 吸 电离 串联 飞 行 时 间 质 谱 ( L I OF T F MS 分 离 鉴 定 牛 乳 铁 蛋 建 基 MA D — T /O )
白素 ( o i e lcoe r i L c B) b vn tf r c a i n, fi 的方 法 。采 用 胃蛋 白酶 酶 解 牛 乳 铁 蛋 白 , 解 液 离 心 后 取 上 清 液 , 过 离 子 交 n 酶 经
f r i w a dr l z d b ps n a d he s pa a ed b o xc ng hr m a og a y a e e rn s hy o y e y pe i n t n e r t y i n e ha e c o t r ph nd r —
换 色 谱 、 相 液 相 色 谱 、 析 等 技 术 分 离 , 分 离 得 到 的 目标 产 物 进 行 抗 菌 活 性 分 析 、 白 含 量 测 定 和 MA D — 反 透 对 蛋 LI T /O OF T FMS鉴 定 。分 离 得 到 高 活性 的 Lcn 其 相 对 分 子 质 量 为 314 8 , 白含 量 为 1 .0p / 。 本 方 法 fiB, 2 .9 蛋 8 2  ̄ mL g 具 有 精度 高 、 析 速 度快 和分 辨能 力 强 等 优 点 , 其 他 传 统 的分 析 鉴 定 Lcn 分 是 fiB方 法 所 无 法 比拟 的 , 进 一 步 研 究 为
基质辅助激光解析电离飞行时间质谱MALDI-TOF-MS
基质辅助激光解析电离飞⾏时间质谱MALDI-TOF-MS MALDI-TOF-MS(基质辅助激光解析电离飞⾏时间质谱)是近年来发展起来的⼀种新型的简单⾼效软电离⽣物质谱仪。
质谱分析法主要是通过对样品的离⼦的质荷⽐的分析⽽实现对样品进⾏定性和定量的⼀种⽅法。
因此,质谱仪都必须有电离装置把样品电离为离⼦,有质量分析装置把不同质荷⽐的离⼦分开,经检测器检测之后可以得到样品的质谱图,由于有机样品,⽆机样品和同位素样品等具有不同形态、性质和不同的分析要求,所以,所⽤的电离装置、质量分析装置和检测装置有所不同。
但是,不管是哪种类型的质谱仪,其基本组成是相同的。
都包括离⼦源、质量分析器、检测器和真空系统。
以某种⽅式使⼀个有机分⼦电离、裂解,然后按质荷⽐(m/z)⼤⼩把⽣成的各种离⼦分离,检测它们的强度,并将离⼦按其质荷⽐⼤⼩排列成谱,这种分析研究的⽅法叫做质谱图,质谱的最⼤⽤途之⼀是可以测定未知物的分⼦量(质谱能通过检测分⼦离⼦的质荷⽐获得分⼦量),并可以确定化合物的分⼦式(可通过碎⽚离⼦的质荷⽐的强度推测有机物的结构。
这相当于⼀个精巧的花瓶被打碎了,如果我们仔细地收集和归属这些碎⽚,然后将碎⽚拼构起来,就可以使花瓶复原。
花瓶好⽐有机物的分⼦,打碎花瓶犹如使分⼦电离、裂解。
收集和归属碎⽚就像是按质荷⽐分离、记录离⼦。
⽽将碎⽚重拼花瓶的过程,相当于通过解析谱图得到有机物结构的过程。
由于各种有机物都有其特定的、可以重复的质谱图,⽽且⼈们对质谱裂解过程的研究中已经发现了⼀些普遍适⽤的裂解规律,这为质谱⽤于有机物结构分析提供了可靠的基础)。
飞⾏时间质谱仪Time of Flight Mass Spectrometer (TOF) 是⼀种很常⽤的质谱仪。
这种质谱仪的质量分析器是⼀个离⼦漂移管。
由离⼦源产⽣的离⼦加速后进⼊⽆场漂移管,并以恒定速度飞向离⼦接收器。
离⼦质量越⼤,到达接收器所⽤时间越长,离⼦质量越⼩,到达接收器所⽤时间越短,根据这⼀原理,可以把不同质量的离⼦按m/z值⼤⼩进⾏分离。
应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术鉴定临床常见厌氧菌
法 收 集 从 临床 标 本 培 养 分 离 的厌 氧 菌 5 6株 , 运 用 MAL DI — T 0F MS技 术 对 其 进 行 鉴 定 , 同 时运 用 Vi t k e 3 2 AN I 鉴 定卡及 】 6 S r R NA 基 因序 列 法 分 别 进 行 鉴 定 , 将 三 者 的 结 果进 行 比 较 。结 果 5 6株 厌 氧 菌 中有 4 1 株采 用 MA I D I — T OF MS技 术 鉴 定 至 种 的
水平( 分值 大 于 或 等 于 2 . 0 ) , 1 1 株鉴 定至属的水平( 分值 为 1 . 7 ~2 . O ) , 4株 无 可 靠 结 果 ( 分值 小于 1 . 7 ) 。M A L D I - T OF MS和 1 6 S
r RNA基 因序 列 法 鉴 定 结 果 一 致 的 占 9 4 . 6 ( 5 3 / 5 6 ) , 不一 致的 占 5 . 6 ( 3 / 5 6 ) 。MAL D I — T OF MS与 Vi t k e 3 2 AN I 鉴 定 卡 的 鉴 定结果一致 的占 8 O . 4 ( 4 5 / 5 6 ) , 不一致 的 占 1 9 . 6 ( 1 1 / 5 6 ) 。结 论 MAL D I — T OF MS与 1 6 S r R NA 基 因序 列 法 鉴 定 的 符 合 率
国际检验 医学杂 志 2 0 1 4年 2 月第3 5 卷第 3 期 I n t J L a b Me d , F e b r u a r y 2 0 1 4 , Vo 1 . 3 5 , No . 3
・ 32 7 ・
・
检验 技 术与方 法 ・
应 用 基质 辅 助激 光解 吸 电离 飞行 时 间质 谱 技 术 鉴定 临床 常见 厌 氧 菌
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临床微生物鉴定中的应用
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临床微生物鉴定中的应用林豪芸;吴文苑【摘要】In recent years ,matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) is a new organic soft ionization mass spectrometry which can identify and classify microorganism by directly using the sam-ple itself or cultivate colonies on petri dish in a few minutes .This new and simple method reduces the cost of consumables and the time of diagnosis greatly .Its reliability and accuracy have been shown in many studies and different system devices have al-ready been on the market .In the near future ,MALDI-TOF MS will have a broader prospect .This mass spectrometry will be-come an effective and fast microbial identification technology to replace the conventional method .In this article ,we will review the principles of MALDI-TOF MS ,its development and application ,its advantages and shortcomings which compared with tra-ditional methods at the present stage ,and the emphasis will focus on the application characteristics of MALDI-TOF MS in mi-crobial systems .%基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption /ionization time-of-flight mass spectrom-etry ,MALDI-TOF MS)技术是近年发展起来的一种软电离新型有机质谱,它可以在几分钟内直接对平皿中或标本中的菌落进行鉴定。
基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱仪
《基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱仪的应用与发展》一、引言基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)是一种高级的质谱分析技术,它已经广泛应用于生物医学、化学和环境科学领域。
本文将从技术原理、应用前景以及发展趋势等方面进行深入探讨,以期为读者提供全面的了解。
二、基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱仪原理MALDI-TOF MS技术是将分析物作为样品与基质混合,并通过激光脉冲进行标记,然后通过电离作用形成离子。
这些离子在电场作用下被加速并以不同的速度飞行,最终通过飞行时间差异进行质量分析。
其原理简单清晰,可以快速、高效地进行多种样品的分析,是一种十分有价值的质谱分析技术。
三、基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱仪的应用1. 生物医学应用MALDI-TOF MS在生物医学领域的应用十分广泛,例如生物分子的鉴定和定量分析、蛋白质组学和代谢组学等研究。
其快速、高灵敏度的特点,使得它在疾病诊断、药物研发以及生物标记物检测等方面有着不可替代的地位。
2. 化学应用在化学领域,MALDI-TOF MS被广泛应用于高分子聚合物、药物分析、环境污染物检测等方面。
其高分辨率和高灵敏度的优势,为化学研究提供了重要的数据支持。
3. 环境科学应用在环境科学领域,MALDI-TOF MS技术可以用于大气、水体和土壤等环境中微量有机物和无机物的检测和分析,为环境监测和治理提供了重要的技术手段。
四、基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱仪的发展趋势随着科学技术的不断发展,MALDI-TOF MS技术也在不断完善和创新。
未来,我们可以预见到以下几个发展趋势:1. 提高分辨率和灵敏度:随着技术的进步,MALDI-TOF MS分辨率和灵敏度将不断提高,为更加精准的分析提供可能。
2. 多样化样品分析:未来的MALDI-TOF MS技术将可以处理更多种类的样品,包括生物分子、有机物、无机物等,从而更全面地应用于各个领域。
基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法
基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分的内容:基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法(MALDI-TOF MS)是一种重要的分析技术,广泛应用于生物大分子的定性和定量分析。
该技术的核心原理是利用基质分子将待测样品转化为易于电离的形式,然后通过激光瞬间加热样品,使其产生脱附电离。
接着,离子将通过飞行时间质谱仪进行质量分析,最终得到样品中分子的质谱图谱。
基质辅助激光解吸电离方法具有许多优势。
首先,它可以高效地电离生物大分子,包括蛋白质、核酸和糖类等。
其次,该方法能够在非破坏性条件下进行样品分析,使得样品的原始化学特性能够得到保留。
此外,MALDI-TOF MS还具备高灵敏度、高分辨率和高通量等特点,使其成为生命科学研究和临床诊断领域的重要工具。
然而,基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法也存在一定的局限性。
首先,基质的选择对分析结果有重要影响,不同的基质适用于不同类型的待测分子。
其次,样品含有的杂质可能干扰质谱图谱的分析,因此需要进行样品前处理。
此外,对于高分子量的生物大分子,其离子化效率相对较低,因此需要使用较高能量的激光。
本文将着重介绍基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法的原理、应用领域、优势和局限性,以及实验方法和步骤。
通过对该技术的深入了解,可以更好地理解和应用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法在生命科学和医学领域的潜力,为该领域的进一步研究和应用提供参考依据。
1.2文章结构文章结构部分的内容可以按照如下方式编写:文章结构:本文将按照以下结构来展开对基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法的研究和应用进行探讨:首先,在引言部分概述了基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法的背景和研究意义,以及文章将要讲述的内容。
接着,正文部分将从两个方面对基质辅助激光解吸电离进行探讨,即原理和应用领域。
在原理部分,将介绍基质辅助激光解吸电离的工作原理和相关理论基础;而在应用领域部分,将探讨基质辅助激光解吸电离在不同领域中的具体应用情况和研究进展。
医用质谱仪 第2部分:基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪》
医用质谱仪第2部分:基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪》1. 引言1.1 概述本文旨在探讨医用质谱仪的新技术——基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪。
随着科学技术的快速发展,医学领域对高效、准确的分析方法需求日益增长。
由于能够提供高分辨率和灵敏度的特点,质谱仪在医学研究中扮演着至关重要的角色。
并且,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪作为一种新型的质谱仪技术,具有很大的潜力来改善医学检测和诊断领域。
1.2 医用质谱仪简介医用质谱仪是一种利用精密仪器对物体中的化合物或化学组成进行分析和检测的设备。
其工作原理基于将样品中的化合物通过不同的离子化方式转变为离子后,再根据其质量-荷比(m/z)比值测定其相对含量或结构信息。
医用质谱仪常被应用于药物研发、生物医学研究、临床分析和环境监测等领域。
1.3 研究背景随着人们对疾病诊断和治疗的需求不断增加,医学领域对于高灵敏度、特异性和快速的检测方法的需求也在不断增长。
传统的质谱仪技术存在着一些局限性,如样品制备复杂、分辨率有限以及对高灵敏度样品的应用受到限制等。
为了克服这些问题,科学家们开发出了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪这一新技术。
本文将重点介绍基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪的原理、应用范围和优势,并对其技术发展历程进行探讨。
通过实验数据的分析与讨论,我们将认识到该技术在医学领域中所展示出来的巨大潜力,并提供对未来发展方向的展望。
尤其是结合可持续发展理念,我们还将提出有关该技术在环境友好型方面的建议。
2. 正文:2.1 基质辅助激光解吸电离技术原理:基质辅助激光解吸电离(MALDI)是一种常用于医用质谱仪的重要技术。
它利用基质分子与待测样品分子相互作用,通过激光脉冲将基质分子和待测样品分子一起从固体表面解吸。
随后,脱落的分析物被基质分子带上,形成一个溶液中的复合物。
接着,激光瞬间加热复合物,使其发生飞行时间电离,并在高电场下进入飞行管道进行飞行时间测量。
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基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱
在寡糖结构分析中的应用
项目完成单位:国家生物医学分析中心
项目完成人:刘炳玉谷苗桑志红王鸿丽刘峰魏开华杨松成
1.前言
寡糖和多糖具有调节抗体水平、增强免疫功能、抗肿瘤、抗感染等作用,在肝炎、风湿病和爱滋病等重大疾病诊疗上应用价值大。
它还具有抗消化性溃疡、降血糖、降血脂、抗血栓、抗辐射、抗毒物损伤、抗晕、祛痰镇咳、诱导干扰素产生、促进血功能恢复以及促进蛋白质和核酸的生物合成等方面的生物活性,在国内外(尤其我国传统医学中)应用十分广泛。
糖类化合物结构比蛋白质和核酸复杂得多,包括单糖及其衍生物、寡糖、多糖、复合多糖和糖苷类,糖链由含多元羟基并顺反异构环状己或戊糖通过苷键连接而成,各单糖有五个手性碳且连接位置和构型多种多样。
要阐明一种糖结构,必须了解: (1) 分子量;(2) 单糖残基组成; (3) 单糖残基间的顺序; (4) 单糖残基在糖苷键中的位置; (5) 环状结构的类型; (6) 糖苷键的构型。
糖的组成复杂,结构相似,没有显色基团,难以不经衍生就进行光谱、色谱分析,但质谱不受此影响。
早期研究糖结构的质谱方法主要是快原子轰击电离质谱(FAB-MS),可以显示碎片离子,但有时候检测不到分子离子峰,而且,FAB-MS的分子量范围小、灵敏度不高[1]。
以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS) 和电喷雾质谱(ESI-MS)为代表的生物质谱打开了质谱分析研究生物大分子的新领域,并很快发展成为能在多个层次上分析研究生物分子的生物质谱学(Biological Mass Spectrometry , BMS) [2-4]。
近年来,ESI-MS已在糖的结构分析中显示出强大的生命力。
它无需衍生化就能确定寡糖的结构、聚合度及组成,并能精确测定糖蛋白的分子量及其中寡糖的序列及结构均一性,还能区分寡糖是O一还是N-连接的,常被用于糖型(glycoform)的分析[5]。
但是,ESI-MS受样品中的无机盐和溶剂中干扰物的影响比较大,常导致其表观灵敏度不高。
相反,MALDI-TOF-MS的干扰物忍受力要比ESI-MS强得多,它的表观灵敏度比ESI-MS高;MALDI-TOF-MS的图谱因为没有ESI-MS中的多电荷特性而更容易解析。
另外,MALDI-TOF-MS的样品制备以及仪器调节也比ESI-MS系统简单。
因此,MALDI-TOF-MS成为当前研究蛋白质等生物大分子的首选技术。
Hillenkamp等[6]人报道了用MALDI-TOF-MS精确地测定ng级的葡聚糖,分子量达7000 u。
另外,源后裂解技术
(PSD) 通过将侧链或骨架打断,从碎片的质量数分布可推测母离子的结构,主要用于糖链结构以及取代基种类、取代位置、分布情况以及取代数量等情况的研究[7-8]。
2. 材料与方法
2.1 材料
糖样本SXY1306系列,SXY1572系列,SXY13000系列。
“酸水解及GC法”定性分析单糖组成,LC分析表明相对纯度大于97%。
基质α-氰基-4-羟基肉桂酸(α-CCA)、芥子酸(SA)、2,5-二羟基苯甲酸(DHB)均购自Bruker 公司。
三氟乙酸(TFA)、乙腈(ACN)均为美国进口试剂。
实验用水为MilliQ处理后的水。
2.2 仪器
德国Bruker 公司MALDI-TOF-MS(Autoflex);糖样本SXY1306和SXY1572系列(分子量小于2000U)用反射检测方式,飞行管长1.70M;SXY13000系列(分子量大于10000U)用线性检测方式;飞行管长1.22M;氮激光器波长337nm。
2.3 方法
样品:取各样品适量,用含/不含0.5% TFA溶剂溶解。
基质:将CCA、SA、DHB 分别溶于含/不含0.1% TFA 的50% 乙腈溶液中,制成饱和溶液,离心,取上清液。
点靶:取SXY1306系列和SXY1572系列各1u l,分别和1u l的CCA及DHB混合,取1u l 点于Scout384样品靶上;取SXY13000系列1u l,分别与1u l DHB、SA及CCA混合,取1u l 点于Scout384样品靶上,待自然干燥后置仪器中测定。
3. 结果与讨论
3.1 基质的筛选
采用负离子检测方式。
对于SXY1306系列和SXY1572系列(分子量小于2000U),重点比较DHB与CCA的差异;结果表明:两者在“灵敏度、准确度等”方面并无明显差异(图1 A ,B),这与大多数文献报道的略不同。
对于SXY13000系列(分子量大于10000U),重点比较SA与CCA的差异。
结果表明:SA的灵敏度明显优于CCA(图2)。
准确度上未发现明显差异。
3.2 检测方式
对于SXY1306系列和SXY1572系列,两种方式均可得到样品离子峰,但负离子方式比正离子方式的加成峰等杂峰少(图1C , D)。
另外,在正离子方式时,DHB比CCA略
好(加成峰等杂峰少)。
负离子方式时,两种基质无明显差异。
由此可见,正离子方式在检测小分子量的糖时,主要问题是产生一些基质等对样品的加成离子,使得谱图解析难点增加。
另外,正离子方式可能有助于产生一些寡糖碎片峰,这有利于寡糖结构解析。
关于“正离子方式下寡糖的源内裂解”问题正在进一步研究。
对于SXY13000系列,DHB,CCA,SA三种基质的正离子方式均未检测出样品离子峰。
说明,随着分子量的增加,糖链环和氧桥捕获氢离子的能力大大下降。
相反,负离子条件下,活泼氢仍可以较容易的被基质负离子夺走。
因此,正、负离子检测大分子量糖类时,可以部分反映出糖链的空间折叠情况。
3.3 制样方法
质谱的制样技术对分析结果有比较重要的影响。
传统的寡糖样品常在碱性条件下进行(如氨水体系,碳酸氢铵体系等),但实验观察到,碱性对于基质结晶有一定的负面影响(颗粒太大),而且也难以在正离子方式检测(通过正负离子检测确认分子离子峰是很有效的方法)。
因此,本项目探索的方法是:纯水体系(不加TFA、甲酸等酸化试剂)。
3.4 PSD技术研究寡糖结构
SXY1306系列和SXY1572系列样品,采用13步收集策略,对m/z1572等高丰度离子峰进行了PSD分析。
结果表明:负离子PSD比正离子方式的离子碎片少得多;而正离子方式下的PSD的碎片分析较复杂,需要专门的分析软件。
另外,对于寡糖,正离子方式中的加成离子的问题对于PSD分析并无影响。
A B
图1 基质对寡糖的MALDI-TOF-MS的影响(A)CCA 负离子(B)DHB负离子
(C)CCA 正离子(D)DHB 正离子C
D
参考文献
1 Yoko Ohashi, etc. Analysis of sugar epimers using mass spectrometry: N-acetyllactosamine-6,6′-disulfate and the 2′-epimer. Eur. J. Mass Spectrom.,2004,1:269 - 278
2 杨松成. 蛋白质组学中的有机质谱. 现代科学仪器,2000,5:9
3 赵晓光,薛燕,刘炳玉. MALDI-TOF质谱仪关键技术及进展. 现代仪器,2003,4:17
4 M. Karas, U. Bahr, A. Ingendoh, F. Hillenkamp, Introduction of MALDI-TOF. Angew. Chem. 1989, 101:805-806
5 刘翠平,方积年. 质谱技术在糖类结构分析中的应用. 分析化学,2001,29(6):716-720
6 B. Stahl, A. Linos, M. Karas, F. Hillenkamp, M. Steup. Analysis of fructans from higher plants by matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry. Analyt. Biochem. 1997,246:195-204
7 王杰,杨松成,吴胜明,王红霞,魏开华,张学敏. 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱源后衰变技术鉴定蛋白质. 药学学报,2004,39(8):627-630
8 Joseph Zaia. Mass spectrometry of oligosaccharides. Mass Spectrometry Reviews, 2004, 23:161– 227。