核酸基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在结核病和非结核分枝杆菌病诊断专家共识要点
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱随着科技的不断进步,飞行时间质谱技术已经成为了许多领域中不可或缺的分析方法。
其中,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF)更是在生物医学研究、食品安全检测、环境污染监测等领域中得到了广泛的应用。
一、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术的基本原理MALDI-TOF技术是一种利用基质辅助激光解吸电离的质谱技术。
其基本原理是:先将待检样品与一种辅助基质混合,然后将混合物均匀地涂在一个金属板上,待基质干燥后,用紫外激光照射样品,使其与基质分子共同激发。
这样,样品分子就会与基质分子形成一个复合物,并在激光的作用下被解吸电离。
接着,离子会被加速器加速并飞行到一个离子探测器中,最后形成质谱图。
二、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术的应用1、生物医学研究MALDI-TOF技术在生物医学研究中的应用非常广泛。
它可以用于蛋白质分析、肽类分析、糖类分析等。
例如,在蛋白质分析方面,MALDI-TOF技术可以用于检测蛋白质的分子量、序列、修饰以及配体结合情况等。
这对于研究蛋白质功能及其在疾病中的作用有着非常重要的意义。
2、食品安全检测食品安全一直是人们关注的焦点之一。
MALDI-TOF技术可以用于检测食品中的各种成分,如蛋白质、糖类、脂类等。
这些成分的分析可以帮助人们了解食品的营养价值和质量安全情况,从而保障人们的健康。
3、环境污染监测环境污染是一个全球性问题,而MALDI-TOF技术可以用于检测环境中的各种化合物,如有机物、无机物等。
这些化合物的分析可以帮助人们了解环境的污染状况,从而采取相应的措施进行治理。
三、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术的优缺点1、优点(1)灵敏度高:MALDI-TOF技术的灵敏度可以达到非常高的水平,可以检测到非常微量的化合物。
(2)分析速度快:MALDI-TOF技术的分析速度非常快,可以在几分钟内得到样品的分析结果。
(3)适用范围广:MALDI-TOF技术可以用于分析各种化合物,包括有机物、无机物、生物大分子等。
基质辅助激光解吸电离-串联飞行时间质谱仪
基质辅助激光解吸电离-串联飞行时间质谱仪
基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)是一种高分辨率、高灵敏度的质谱仪设备,用于分析生物大分子和有机化合物。
该技术利用基质辅助激光解吸(MALDI)方法,将样品与基质混合施加于样品板上,在激光的作用下分子产生共振激发,然后通过电离和加速器分析,最终实现质谱分析的目的。
这种质谱仪广泛应用于各个领域,如蛋白质组学、药物发现和制造、食品科学、环境检测等。
它具有快速、高灵敏度、高分辨率、低检测限、高通量等优点,可以分析极微量的生物分子,如蛋白质、肽、核酸、糖类等,甚至可以分析非挥发性和热不稳定的分子。
MALDI-TOF-MS质谱仪的主要部件包括激光系统、样品载体、离子源、加速器、飞行时间质量分析器和数据采集系统等。
它可以通过不同的模式实现离子的分析,如正离子模式、负离子模式、反向相模式、碎片模式等。
此外,MALDI-TOF-MS 还可以通过结合其他分析技术,如气相色谱、液相色谱等,来增强其分析能力。
总之,MALDI-TOF-MS技术已经成为一种不可替代的分析手段,为生物、医药、食品、环境等领域的研究和应用带来了很大的便利。
质谱技术在微生物鉴定和检测中的应用
《质谱技术在微生物鉴定和检测中的应用》摘要:质谱技术(Mass Spectrometry, MS)是一种根据离子产生的质量图谱来确定样品中分子组成的分析技术。
质谱法不仅可以对传统的目标分析物进行定性和定量分析,还可以用于细菌的快速准确鉴定。
基质辅助激光解吸电离飞行时间(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization-Time of Flight, MALDI-TOF)质谱仪由于能快速准确地鉴定革兰氏阴性菌和阳性菌的种类,因此是生物学中最常用的质谱仪之一。
质谱法鉴定微生物是以鉴定每个物种的特征光谱为基础的,然后与仪器内的大型数据库进行匹配。
本综述阐述了细菌鉴定面临的挑战和机遇,特别是在微生物学领域中使用MALDI-TOF MS来鉴定微生物和分析抗菌药敏感性。
关键词:质谱技术;MALDI-TOF;特征光谱;细菌鉴定;抗菌药敏感试验质谱(MS)法通过分析电离分子的质荷比(m/z)来对分子进行定性定量分析。
质谱仪扫描的特征图谱可以确定样品内不同分子的组成,并且能够直接分析任何可电离的生物分子。
FENN[1]和TANAKA[2]在MS的基础上,分别建立了电喷雾电离(Electrospray Ionization,ESI)技术和基质辅助激光解吸电离(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization,MALDI)技术。
MALDI最大的优势在于不需要复杂的预分析,就可以直接对样品与化学基质混合后产生的离子进行分析。
离子飞行时间(TOF)是指用探测器精确测量离子到达飞行管末端所花费的时间。
基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱技术是将MALDI技术和TOF技术整合在一起的一种技术。
自从关于MALDI-TOF技术的构想诞生以来,因其快速、高通量、低成本和高效的优点,该技术已经彻底改变了微生物实验室中鉴定微生物的方法。
MALDI-TOF MS的主要优点之一是节省时间,因为细菌鉴定不再需要经过24~48 h,只需不到一小时即可完成。
jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱
jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱是一种先进的质谱技术,它结合了基质辅助激光解吸电离(MALDI)和飞行时间质谱(TOF-MS)两种技术的优势,能够在分析生物大分子和其他复杂样品时提供高灵敏度和高分辨率的数据。
在MALDI-TOF-MS中,样品与基质混合后通过激光辅助电离,产生一系列的离子,这些离子在一个电场中被加速到一定能量后,根据其质荷比分别飞行到检测器,通常基于TOF-MS的仪器会有高质量的检测结果。
针对这一主题,我们将深入探讨jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱的原理、应用及优势,并探讨其在生物医学研究、生物技术领域的重要意义。
我们将对该技术的未来发展和趋势进行分析和展望,以帮助您更全面地了解jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱。
理解jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱的原理对于深入探讨这一主题至关重要。
这种技术利用了MALDI和TOF-MS两种技术的优势,MALDI能够提高大分子的离子化率,TOF-MS能够提供高分辨率和高灵敏度的分析结果。
jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱可以在保证数据质量的提高分析的速度和效率。
我们将深入探讨jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱在生物医学研究和生物技术领域的应用。
这种技术在生物医学研究中可以用于蛋白质组学和代谢组学的分析,能够帮助科学家更好地理解疾病的发病机制、开发新的药物或者诊断方法。
在生物技术领域,jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱也能够用于生物药物的质量控制和分析,可以提高生物药品的质量和安全性。
我们还将重点分析jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱的优势,比如高分辨率、高灵敏度、高通量等特点,以及与其他质谱技术的比较。
这可以帮助您更好地了解jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱在分析复杂样品时的优势和局限性。
通过对jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱的未来发展和趋势进行分析和展望,我们可以帮助您更好地把握这一技术的发展方向和未来的应用前景,为您在相关领域的研究和应用提供更多的启发和帮助。
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 技术的主要特点是,先通过PCR扩增目标序列,然后加入snp序列特异延伸引物,在SNP 位点上,延伸1个碱基。
将制备的样品分析物与芯片基质共结晶,将该晶体放入质谱仪的真空管, 而后用瞬时纳秒(10-9s) 强激光激发,由于基质分子经辐射所吸收的能量,导致能量蓄积并迅速产热,从而使基质晶体升华,核酸分子就会解吸附并转变为亚稳态离子,产生的离子多为单电荷离子,这些单电荷离子在加速电场中获得相同的动能,进而在一非电场漂移区内按照其质荷比率加以分离,在真空小管中飞行到达检测器。
MALDI产生的离子常用飞行时间(Time-of-Flight,TOF)检测器来检测,离子质量越小,就越快到达。
理论上讲,只要飞行管的长度足够,TOF检测器可检测分子的质量数是没有上限的。
MassARRAY SNP 检测的质谱范围为5000 to 8500 Da。
主要用途: 1.对生物大分子物质分子量的测定; 2.对蛋白质进行高通量的鉴定; 3.对有机小分子化合物分子量的测定; 4.对寡核苷酸的分析; 5.对基因的单核苷酸多态性的分析仪器类别:0303071402 /仪器仪表/成份分析仪器/质谱仪指标信息: 1.质量数测定范围最高可达40万Da以上; 2.检测灵敏度范围:10-15~10-18摩尔; 3.质量准确度可达5ppm; 4.分辨率右达2万。
附件信息:配有源后衰变装置,可对多肽、蛋白质的序列进行分析机组简介:基质辅助激光角吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS Reflex Ⅲ):具有操作简单、快速、谱图直观、能耐受一定浓度的盐和去垢剂等特点,特别适合于混合多肽、蛋白、寡核苷酸的精确质量数测定,其测定质量数范围最高可达40万Da以上,灵敏度可达10-15~10-18摩尔,质量准确度5ppm。
配有源后衰变(post-sourc e decay, PSD)装置,计算机自动联机检索系统。
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱微生物鉴定系统性能验证方案的建立
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱微生物鉴定系统性能验证方案的建立徐蓉;慎慧;黄媛媛;何丽华;倪丽君;郭建;吴文娟【摘要】目的建立基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF MS)在常规临床微生物鉴定中的性能验证方法,指导临床实验室规范微生物鉴定程序.方法选取标准菌株、质控菌株和临床菌株共115株,包含革兰阳/阴性球菌30株、革兰阳/阴性杆菌31株、真菌30株,厌氧菌、苛养菌各12株,所有菌株均经Vitek Compact鉴定和/或细菌16S rDNA、真菌ITS DNA测序分析验证.任意选择3种MALDI-TOF MS微生物鉴定系统厦门质谱、布鲁克质谱、安图质谱,采用检测系统推荐方法进行菌株鉴定,进行准确度验证试验.精密度验证:选取标准菌株和临床菌株10株,1位操作者使用3个检测系统对10株菌株分别进行质谱鉴定3次,连续鉴定3 d;3位操作者使用3个检测系统对10株菌株每d分别进行质谱鉴定3次,连续鉴定3 d,从而验证鉴定结果的重复性.结果厦门质谱、布鲁克质谱、安图质谱对标准/质控菌株(除外厌氧菌)的鉴定符合率为100%;对临床菌株的属水平鉴定符合率为100%;对革兰阴/阳性杆菌的种水平鉴定符合率分别为100%、100%、96.77%;对革兰阳性球菌的种水平鉴定符合率分别为96.67%、96.67%、100%;对真菌的种水平鉴定符合率均为90%一致;对苛养菌的种水平鉴定符合率均为100%;对厌氧菌鉴定符合率为91.67%种水平一致.精密度验证试验结果重复性100%.结论 3种MALDI-TOF MS系统在革兰阳/阴性球菌、革兰阳/阴性杆菌、真菌、苛养菌鉴定的准确度和精密度符合要求,验证通过.本文建立的微生物鉴定质谱仪性能验证方案可满足综合性医院临床微生物实验室常规鉴定基本要求.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2018(036)010【总页数】5页(P783-787)【关键词】基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱;性能验证;微生物鉴定【作者】徐蓉;慎慧;黄媛媛;何丽华;倪丽君;郭建;吴文娟【作者单位】上海市临床检验中心临床微生物室,上海200126;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123【正文语种】中文【中图分类】R446.520世纪90年代末,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)成功应用于微生物菌种鉴定并得到迅猛发展。
基质辅助激光解吸附飞行时间质谱
基质辅助激光解吸附飞行时间质谱
一、什么是基质辅助激光解吸附飞行时间质谱
嘿,同学们!今天咱们来聊聊这个听起来超级高大上的“基质辅助激光解吸附飞行时间质谱”。
简单来说,它就是一种超级厉害的分析化学技术啦。
它可以把咱们要研究的那些小分子、大分子啥的,通过激光照射,让它们从基质里飞出来,然后根据它们飞行的时间来测定分子量。
是不是有点像让这些分子来一场“飞行比赛”,然后根据它们到达终点的时间来判断它们的大小呢?
二、基质辅助激光解吸附飞行时间质谱的工作原理
这部分可就有点复杂啦,不过别怕,我尽量说得简单点。
首先呢,咱们得有个样品,把它和特殊的基质混合在一起。
然后用激光去照射这个混合物,激光的能量会让样品分子从基质里解脱出来,变成带电的离子。
这些带电离子就会在电场里飞起来,就像飞机在跑道上起飞一样。
因为不同分子量的离子飞行速度不一样,所以通过测量它们飞行到探测器的时间,就能算出它们的分子量啦。
三、基质辅助激光解吸附飞行时间质谱的应用
这玩意儿的用处可多啦!
在生物医药领域,它可以帮助咱们分析蛋白质、多肽的结构和分子量,对于研究疾病的发生机制和开发新药那可是相当重要。
在食品安全检测方面,它能检测出食品中的有害污染物,保障咱们吃得健康。
还有在环境监测中,它可以检测出环境中的微量有害物质,让咱们的地球更干净、更美好。
基质辅助激光解吸附飞行时间质谱是个超级厉害的工具,为咱们的科学研究和生活带来了很多便利和帮助!同学们,是不是觉得很神奇呀?。
基质辅助激光解吸电离质谱成像
基质辅助激光解吸电离质谱成像
基质辅助激光解吸电离质谱成像(MALDI-MSI)是一种高分辨率、高通量的成像技术,可以用于生物分子的定量和空间分布分析。
下面
是对该技术的详细介绍。
一、技术原理
MALDI-MSI技术是基于质谱原理的。
它通过将化合物固定在载体(基质)上,在基质表面上形成分子晶体,并通过激光辐射质量分析仪来
直接探测和成像物质分布。
基质能够增强分子的解离和电离,提高其
探测灵敏度和选择性。
二、技术应用
MALDI-MSI技术在生物学、药物学、神经科学、环境科学等领域广泛
应用。
它可以用于定性和定量分析,分析蛋白质、代谢物、脂质、药
物等分子在不同组织、细胞类型中的分布情况,并可以实现组织学和
化学图像的叠加。
三、技术优势
MALDI-MSI技术具有成像精度高、高通量、无需前处理、样本保留完
整性、可追溯性等优势。
同时,它能够探测到微量、低丰度、小分子
等难以被其他技术检测到的化合物,为疾病诊断和药物研发提供了新
的手段。
四、技术挑战
MALDI-MSI技术在分子图像质量、信号噪声比、质量信号比、基质优化等方面还存在挑战。
此外,技术成本较高、仪器复杂、数据处理困难等也是技术发展的难点。
五、技术前景
随着技术的不断优化和应用范围的扩大,MALDI-MSI技术将成为疾病诊断、药物研发、农业、食品安全等多个领域的重要工具。
同时,基质辅助激光解吸电离质谱成像也将成为质谱技术中必不可少的一项技术。
纳米材料辅助负离子激光解吸电离-飞行时间质谱分析小分子研究进展
纳米材料辅助负离子激光解吸电离-飞行时间质谱分析小分子研究进展张晓娜;牛家华;卢明华;蔡宗苇【摘要】基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)作为一种软电离质谱技术,目前已被广泛用于蛋白质、多肽、核酸、聚合物等大分子分析.由于传统有机化合物基质在低相对分子质量(小于700 Da)区域的干扰,该技术在小分子物质分析方面受到很大限制.为克服传统有机化合物基质在低相对分子质量区域的干扰,近年来以纳米材料为代表的无机基质材料备受关注.相对传统有机化合物基质或纳米材料正离子模式,基于纳米材料的负离子激光解吸电离(LDI)有效避免了正离子模式下一种化合物会产生多种加合物的问题,具有图谱简单易于解析、灵敏度高、重现性好等优点.该文综述了近5年来纳米材料负离子LDI-TOF MS技术在小分子分析方面的研究进展,以期拓展该技术在小分子分析方面的应用.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2016(034)011【总页数】5页(P1017-1021)【关键词】纳米材料;激光解吸电离;飞行时间质谱;小分子;综述【作者】张晓娜;牛家华;卢明华;蔡宗苇【作者单位】河南大学化学化工学院,河南开封475004;河南大学化学化工学院,河南开封475004;河南大学化学化工学院,河南开封475004;环境与生物分析国家重点实验室,香港浸会大学化学系,香港999077【正文语种】中文【中图分类】O658基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)作为一种软电离质谱技术,目前已被广泛用于蛋白质、多肽、核酸、聚合物等大分子分析。
由于具有分析速度快、灵敏度高、样品需求量少、样品制备简单和对样品纯度要求不高等优点,该技术已成为现代分析特别是生物分析领域不可或缺的研究工具。
传统MALDI-TOF MS中常用的基质是有机小分子化合物(例如2,5-二羟基苯甲酸(DHB)、芥子酸(SA)、α-氰基-4-羟基肉桂酸(CHCA)等),基质与被分析物形成共结晶,通过在分析过程中吸收激光能量再传递给被分析物的形式激发被分析物。
一、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪操作规程
一、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪操作规程一. 开机 1. 开主机总电源至ON。
2. 开主机正面有钥匙的开关至ON顺时针。
3. 开计算机及显示器启动FlexControl软件。
4. 等待源高真空达到3×10-6mbar如达不到该数值检查是否有漏气发生。
5. 进入日常操作。
二. 关机1将靶退出。
2在FlexControl界面的Spectrometer关掉高压按“OFF”。
3关闭所使用的软件关闭计算机。
4关主机正面有钥匙的开关至OFF逆时针。
5关主机总电源至OFF。
三日常操作1 打开FlexControl 进入仪器控制界面。
2 确认真空度为10-7mbar或稍低。
3 通过界面Carrier▲或主机正面的Load EJECT开关将样品靶放入仪器等待约2分钟调整好靶位。
在此过程中不应操作软件或硬件以确保仪器通讯畅通。
4 根据测量目的选择测量方法⑴分子量测定根据分子量大小选择相应的线性测量方法和仪器校正方法。
2 肽质量指纹谱测量根据所需测量的肽谱范围选择相应的反射测量方法和仪器校正方法。
⑶根据需要选择正离子或负离子测量方法和仪器校正方法。
⑷如果进行串联质谱分析则选择LIFT方法。
5 选择适当的仪器参数6 测量⑴手动测量a 选择好待测样品的靶位及相应参数后按Start开始测量。
b 根据图谱的质量按Add添加或按Clear Sum删除图谱。
c 按Save As保存图谱。
注在测量过程中可随时调整激光能量和靶位置以获得最佳信噪比和分辨率。
⑵自动测量a 按菜单AutoXecute再按Select选择一个Sequence文件名。
b 按Edit编辑待测样品用Sample position 的Sample依次选定靶位?蟀碅dd添加到Edit AutoXecute Sequence中。
c 按AutoXecute Method选择Calibration 或样品测量方法。
d 按Edit设定激光能量、靶位移动、累加方法等参数并保存该参数。
应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术鉴定临床常见厌氧菌
法 收 集 从 临床 标 本 培 养 分 离 的厌 氧 菌 5 6株 , 运 用 MAL DI — T 0F MS技 术 对 其 进 行 鉴 定 , 同 时运 用 Vi t k e 3 2 AN I 鉴 定卡及 】 6 S r R NA 基 因序 列 法 分 别 进 行 鉴 定 , 将 三 者 的 结 果进 行 比 较 。结 果 5 6株 厌 氧 菌 中有 4 1 株采 用 MA I D I — T OF MS技 术 鉴 定 至 种 的
水平( 分值 大 于 或 等 于 2 . 0 ) , 1 1 株鉴 定至属的水平( 分值 为 1 . 7 ~2 . O ) , 4株 无 可 靠 结 果 ( 分值 小于 1 . 7 ) 。M A L D I - T OF MS和 1 6 S
r RNA基 因序 列 法 鉴 定 结 果 一 致 的 占 9 4 . 6 ( 5 3 / 5 6 ) , 不一 致的 占 5 . 6 ( 3 / 5 6 ) 。MAL D I — T OF MS与 Vi t k e 3 2 AN I 鉴 定 卡 的 鉴 定结果一致 的占 8 O . 4 ( 4 5 / 5 6 ) , 不一致 的 占 1 9 . 6 ( 1 1 / 5 6 ) 。结 论 MAL D I — T OF MS与 1 6 S r R NA 基 因序 列 法 鉴 定 的 符 合 率
国际检验 医学杂 志 2 0 1 4年 2 月第3 5 卷第 3 期 I n t J L a b Me d , F e b r u a r y 2 0 1 4 , Vo 1 . 3 5 , No . 3
・ 32 7 ・
・
检验 技 术与方 法 ・
应 用 基质 辅 助激 光解 吸 电离 飞行 时 间质 谱 技 术 鉴定 临床 常见 厌 氧 菌
(完整版)MALDI-TOFMS病原体鉴定质量保证专家共识
MALDI-TOF MS病原体鉴定质量保证专家共识基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)作为一种新兴的软电离质谱技术,由于其具有快速、准确、灵敏、自动化及高通量等检测特点,已成为一项革命性病原体快速鉴定技术被用于临床微生物实验室,并将逐步取代常规病原体生化鉴定方法。
任何新兴技术应用于临床都需要建立规范的质量保证体系,以确保检测质量。
本专家共识将对开展MALDI-TOF MS用于病原体鉴定的设施与安全要求、人员培训与能力评估、MALDI-TOF MS病原体鉴定过程的质量控制、检验程序性能验证等进行建议。
设施与安全要求1.风险评估:拟开展MALDI-TOF MS病原体检测的实验室需在风险评估基础上建立有效的安全防护策略,包括设备的使用、化学试剂的安全使用和处理丢弃、感染性病原体和被污染材料的处置等。
风险评估包含确定工作流程和鉴定步骤中可能发生的化学和生物危害,以及降低风险的方法。
2.安全防护:任何操作临床病原体样本或病原体的实验活动至少需要在二级生物安全实验室(BSL-2)中进行。
MALDI-TOF MS应安置在二级生物安全实验室内,同时使用MALDI-TOF MS检测临床病原体样本时除了需考虑生物危害的风险外还要注意化学试剂的潜在风险。
人员培训与能力评估各实验室应具备MALDI-TOF MS检测过程中涉及的所有操作人员的初次培训和定期能力评估的程序文件,对涉及的所有操作人员应进行初次和定期(至少6个月一次)的培训以及能力评估,培训考核需遵循制造商的使用手册或实验室的标准操作规程,培训的内容包括原理方法、信息技术、仪器维护、结果报告与解释等方面。
此外,还应采用一组形态和生化特征典型的菌株对培训者进行人员比对和/或考核,以确保所有操作者鉴定结果的一致性。
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临床微生物鉴定中的应用
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临床微生物鉴定中的应用林豪芸;吴文苑【摘要】In recent years ,matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) is a new organic soft ionization mass spectrometry which can identify and classify microorganism by directly using the sam-ple itself or cultivate colonies on petri dish in a few minutes .This new and simple method reduces the cost of consumables and the time of diagnosis greatly .Its reliability and accuracy have been shown in many studies and different system devices have al-ready been on the market .In the near future ,MALDI-TOF MS will have a broader prospect .This mass spectrometry will be-come an effective and fast microbial identification technology to replace the conventional method .In this article ,we will review the principles of MALDI-TOF MS ,its development and application ,its advantages and shortcomings which compared with tra-ditional methods at the present stage ,and the emphasis will focus on the application characteristics of MALDI-TOF MS in mi-crobial systems .%基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption /ionization time-of-flight mass spectrom-etry ,MALDI-TOF MS)技术是近年发展起来的一种软电离新型有机质谱,它可以在几分钟内直接对平皿中或标本中的菌落进行鉴定。
基质辅助激光解吸电离技术
基质辅助激光解吸电离技术基质辅助激光解吸电离技术(MALDI-TOF)是一种高效、快速、准确的质谱分析技术,被广泛应用于生物医学领域。
本文将详细介绍MALDI-TOF技术的原理、应用以及未来的发展方向。
一、基质辅助激光解吸电离技术的原理基质辅助激光解吸电离技术是一种将大分子物质转化为带电离子的方法。
其基本原理是将待测样品与辅助基质混合,形成一个固体混合物。
然后,利用激光脉冲将混合物加热,使其蒸发并使基质与待测分子分离。
在蒸发过程中,由于基质的吸收作用,待测分子被保护,并得到了充分的电离。
最后,通过飞行时间法(TOF)测量离子的质量和离子信号的强度,从而得到待测分子的质谱图。
1. 蛋白质分析:MALDI-TOF技术在蛋白质分析领域具有广泛的应用。
通过该技术,可以快速、准确地鉴定蛋白质样品。
这对于生物医学研究、临床诊断和药物研发都具有重要意义。
2. 生物大分子研究:MALDI-TOF技术可以用于研究生物大分子的结构和功能,如核酸、多肽等。
通过质谱图的分析,可以揭示生物大分子之间的相互作用以及其在生物体内的功能。
3. 微生物鉴定:MALDI-TOF技术可以用于微生物的鉴定和分类。
通过对微生物样品进行质谱分析,可以快速确定微生物的种属和菌株,并且具有高度的准确性和可靠性。
4. 药物代谢研究:MALDI-TOF技术可以用于药物代谢产物的鉴定和定量分析。
通过质谱图的比对和分析,可以了解药物在体内的代谢途径和代谢产物的结构。
5. 化学分析:除了生物医学领域,MALDI-TOF技术还可以应用于化学分析领域。
它可以用于分析有机化合物、高分子材料等,具有高灵敏度和高分辨率的优势。
三、基质辅助激光解吸电离技术的未来发展随着科学技术的不断进步,基质辅助激光解吸电离技术在未来有望实现更高的分辨率和更广泛的应用。
以下是一些可能的发展方向:1. 更高的分辨率:研究人员正在努力改进MALDI-TOF技术的分辨率,以便更精确地分析复杂样品。
基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法
基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分的内容:基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法(MALDI-TOF MS)是一种重要的分析技术,广泛应用于生物大分子的定性和定量分析。
该技术的核心原理是利用基质分子将待测样品转化为易于电离的形式,然后通过激光瞬间加热样品,使其产生脱附电离。
接着,离子将通过飞行时间质谱仪进行质量分析,最终得到样品中分子的质谱图谱。
基质辅助激光解吸电离方法具有许多优势。
首先,它可以高效地电离生物大分子,包括蛋白质、核酸和糖类等。
其次,该方法能够在非破坏性条件下进行样品分析,使得样品的原始化学特性能够得到保留。
此外,MALDI-TOF MS还具备高灵敏度、高分辨率和高通量等特点,使其成为生命科学研究和临床诊断领域的重要工具。
然而,基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法也存在一定的局限性。
首先,基质的选择对分析结果有重要影响,不同的基质适用于不同类型的待测分子。
其次,样品含有的杂质可能干扰质谱图谱的分析,因此需要进行样品前处理。
此外,对于高分子量的生物大分子,其离子化效率相对较低,因此需要使用较高能量的激光。
本文将着重介绍基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法的原理、应用领域、优势和局限性,以及实验方法和步骤。
通过对该技术的深入了解,可以更好地理解和应用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法在生命科学和医学领域的潜力,为该领域的进一步研究和应用提供参考依据。
1.2文章结构文章结构部分的内容可以按照如下方式编写:文章结构:本文将按照以下结构来展开对基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法的研究和应用进行探讨:首先,在引言部分概述了基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法的背景和研究意义,以及文章将要讲述的内容。
接着,正文部分将从两个方面对基质辅助激光解吸电离进行探讨,即原理和应用领域。
在原理部分,将介绍基质辅助激光解吸电离的工作原理和相关理论基础;而在应用领域部分,将探讨基质辅助激光解吸电离在不同领域中的具体应用情况和研究进展。
最新中国核酸质谱应用专家共识
最新中国核酸质谱应用专家共识基因检测在遗传性、感染性及肿瘤等疾病的辅助诊断、用药指导等方面起到举足轻重的作用。
该领域检测方法众多,不同技术的优势及不足明显。
例如:荧光定量PCR 检测速度快,但是通量有限,无法方便快捷地满足临床对于多基因的数十个至数百个位点检测的需求,而高通量测序虽然通量极高,但其成本、耗时、人员需求等也不适用于此类检测。
因此,亟需新的技术平台来填补该项空白。
20世纪80年代出现的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MA1DI-TOFMS)打破了以往质谱仅可进行小分子物质分析的传统,使得核酸、蛋白质等生物大分子也可应用质谱进行研究,极大推进了基因组学、蛋白质组学的发展,并且给生物领域及医学领域带来了革命性的突破,由此其奠基人田中耕一和约翰贝内特芬恩于2002年获得诺贝尔化学奖,美国食品药品监督管理局(FDA)于2014年批准MA1DI-TO F MS可用于临床核酸检测。
本共识将通过介绍MA1DI-TO F MS的原理、基因检测原理及应用等方面内容,提高该平台在中国临床实验室中的认知程度。
一、MA1DI-ToFMS原理质谱技术的基本原理是通过样品离子化,产生不同质荷比的离子,然后再经过质量分析器测定该样品中不同种类离子的分子量,并按照从小到大的顺序依次排列从而得到一幅质量图谱。
质谱仪器平台虽然种类众多,但可以通过样品进样方式、离子源、质量分析器等方面进行简易分类。
其中,MA1DI-TO F MS采用的是样品与基质混合进样,激光解吸方式电离以及飞行时间方法进行质量分析。
目前仪器灵敏度达到500fmo1,采用标准样品牛血清白蛋白(BSA)进行测定,分辨率达到50以上。
1 .基质:MA1DI-TO F MS需要基质参与电离的过程,基质多为具有很强激光能量吸收能力的有机酸,其主要作用为增强样品对激光的吸收,并在一定程度上降低激光对样品的破坏。
基因检测所选用的基质通常为羟基毗咤甲酸(HPA)o2 .离子源工作原理:样品与基质混合结晶后,在激光的照射下基质迅速蒸发,基质和样品分子间的作用力快速削弱,使得样品分子被释放出来。
医用质谱仪 第2部分:基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪》
医用质谱仪第2部分:基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪》1. 引言1.1 概述本文旨在探讨医用质谱仪的新技术——基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪。
随着科学技术的快速发展,医学领域对高效、准确的分析方法需求日益增长。
由于能够提供高分辨率和灵敏度的特点,质谱仪在医学研究中扮演着至关重要的角色。
并且,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪作为一种新型的质谱仪技术,具有很大的潜力来改善医学检测和诊断领域。
1.2 医用质谱仪简介医用质谱仪是一种利用精密仪器对物体中的化合物或化学组成进行分析和检测的设备。
其工作原理基于将样品中的化合物通过不同的离子化方式转变为离子后,再根据其质量-荷比(m/z)比值测定其相对含量或结构信息。
医用质谱仪常被应用于药物研发、生物医学研究、临床分析和环境监测等领域。
1.3 研究背景随着人们对疾病诊断和治疗的需求不断增加,医学领域对于高灵敏度、特异性和快速的检测方法的需求也在不断增长。
传统的质谱仪技术存在着一些局限性,如样品制备复杂、分辨率有限以及对高灵敏度样品的应用受到限制等。
为了克服这些问题,科学家们开发出了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪这一新技术。
本文将重点介绍基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪的原理、应用范围和优势,并对其技术发展历程进行探讨。
通过实验数据的分析与讨论,我们将认识到该技术在医学领域中所展示出来的巨大潜力,并提供对未来发展方向的展望。
尤其是结合可持续发展理念,我们还将提出有关该技术在环境友好型方面的建议。
2. 正文:2.1 基质辅助激光解吸电离技术原理:基质辅助激光解吸电离(MALDI)是一种常用于医用质谱仪的重要技术。
它利用基质分子与待测样品分子相互作用,通过激光脉冲将基质分子和待测样品分子一起从固体表面解吸。
随后,脱落的分析物被基质分子带上,形成一个溶液中的复合物。
接着,激光瞬间加热复合物,使其发生飞行时间电离,并在高电场下进入飞行管道进行飞行时间测量。
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核酸基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在结核病和非结核分枝杆菌病诊断专家共识要点
核酸基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)在结
核病和非结核分枝杆菌病(Nontuberculous Mycobacteria, NTM)的诊断
中起到了重要的作用。
本文将总结核酸基质辅助激光解吸电离飞行时间质
谱技术在结核病和NTM病诊断方面的专家共识要点。
1.技术原理:MALDI-TOFMS技术通过将分离的菌落直接吸附于基质上,并利用激光解吸和电离的原理对蛋白质进行检测和鉴定。
通过将分子的质
荷比与已知数据库中的蛋白质质谱图进行比对,可以快速准确地确定菌株
的物种和亚型。
2.结核病诊断:MALDI-TOFMS技术可以用于结核分枝杆菌的识别和鉴定。
结核分枝杆菌是引起结核病的主要致病菌株,通过MALDI-TOFMS技术
可以快速准确地识别结核分枝杆菌,有助于早期诊断和治疗。
3.NTM病诊断:NTM是引起非结核分枝杆菌病的致病菌株,与结核分
枝杆菌相比,NTM种类繁多,且具有耐药性。
传统的方法对于鉴定NTM菌
株的种类和亚型耗时且复杂,而MALDI-TOFMS技术具有快速、准确的优势,可用于鉴定不同种类和亚型的NTM菌株,为临床诊断和治疗提供参考。
4.技术优势:MALDI-TOFMS技术具有快速、高效、准确、经济的特点,可以在几分钟内完成对菌株的鉴定,有效缩短了传统培养方法所需的时间。
此外,该技术还可以对菌株进行分子分型,有助于了解疫情传播链及菌株
耐药性情况。
5.限制和挑战:MALDI-TOFMS技术在结核病和NTM病的诊断中存在一
定的限制和挑战,例如对于一些高度相似的菌株进行区分可能存在困难,
同时对于未知菌株的鉴定可能不够准确。
此外,建立完善的蛋白质数据库也是技术推广和应用的重要挑战。
综上所述,核酸基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在结核病和NTM病的诊断中具有显著的优势和价值,可以快速准确地鉴定不同种类和亚型的致病菌株,为临床诊断和治疗提供重要依据。
然而,该技术仍面临一些限制和挑战,需要进一步加强研究和改进,以提高其应用的可靠性和准确性。