ABO血型鉴定与血涂片观察

实验材料与仪器
一次性医用采血针
酒精消毒棉球
抗A血清(蓝色)，抗B血清(黄色)
瑞氏染液
载玻片，wenku.baidu.com毒牙签
显微镜(带油镜，香柏油，擦镜纸，洗镜液)
红细胞 抗原
（表型）
血型鉴定原理
1、抗A血清含有使A型血凝集的抗体（B凝集素）， 抗B血清含有使B型血凝集的抗体（A凝集素）； 2、A型血：抗A血清凝集、抗B血清不凝集 B型血：抗A血清不凝集、抗B血清凝集 O型血：抗A血清、抗B血清均不凝集 AB型血：抗A血清、抗B血清均凝集 凝集
问题与思考
血细胞由红细胞、白细胞、血小板等组成，每种细 胞有什么特点和作用？
如何区别血液的凝集和凝固？其机理有何差别？
根据你的血型，判断你能接受何种血型并且能够给 何种血型供血？
O型血人又被称为“万能供血者”，试根据ABO血 型分型作出你对这一说法的理解。
注意事项
4. 染液不可过少，以防蒸发干燥，染料 沉着于血片上难冲洗干净； 5. 冲洗时应用流水将染液冲去，不能先 倒掉染液，以免染料沉着于血片上； 6. 染色时应注意保护血膜尾部细胞，不 能划掉，因为体积较大细胞常在此处 出现。
实验要求
1. 通过凝集反应判断自身血型； 2. 从显微镜下找到白细胞，并由老师检查； 3. 完成实验报告。 实验报告包括：实验目的、实验原理、实 验步骤、实验结果、讨论、思考题、引用 文献等 ※实验报告于最后一次实验完成后，装订 成册交到王英老师办公室。
酒 精 棉 球 消 毒 扎 取 无 名 指 采 血
血型鉴定
（5）用右手自无名指指腹下 端挤压，流出适量血液； （6）用第一根牙签蘸取少许 血液混于抗A血清，搅拌混 匀，将牙签放入垃圾桶； 再用另一根牙签蘸取血液 混于抗B血清（切记换牙 签！！）； （7）将此玻片静置与空闲处， 观察血液是否凝集；
血型鉴定
血液的组成
血浆 水、糖类、脂类、蛋白质和钾盐、钠 盐、钙盐的混合物。
血浆 55% 红细胞 45% 白细胞 0.1% 血小板 0.17%
血小板
红细胞
白细胞
血细胞的组成
红细胞 小淋巴细胞
血小板
嗜曙红细胞
嗜中性粒细胞 巨淋巴细胞
嗜碱性细胞 单核细胞
实验步骤
注意：有严重晕血史的同学请不要参 加实验，可到休息室休息，待放学后 离开！
血涂片制作
(11)用流水小心冲去染液， 待自然干燥后或用吸水 纸吸干，即可置血涂片 于显微镜下进行镜检、 照相； (12)镜检完毕请将载玻片 放入垃圾桶，将显微镜 收好、桌面擦拭干净。
请从低倍镜到高倍镜进行镜 检，并用手机或相机拍照， 将照片贴在实验报告上。
血细胞的组成
红细胞 小淋巴细胞
血小板
操作步骤（二）
6、将青蛙血涂片正确放置于载物台，将涂有 血细胞的一面朝上，用玻片夹固定； 7、缓慢调节粗准焦螺旋，将载物台调到最高； 8、双眼从目镜观察视野，将两个视野合并为 一个。缓缓调节粗准焦螺旋使载物台下降， 找到物像，配合细准焦螺旋将物像调节清晰； 9、使用物镜转换器胶轮，将10X或40X目镜 调节到位，配合粗细准焦螺旋和聚光镜、集 光镜亮度将视野调节清晰；
准备
（1）取三张载玻片，用吸 水纸将两面擦干，放于 白纸上； （2）取一张玻片，如图在 两端分别滴上抗A、抗B 血清，在白纸上标明； （3）取未用过的采血针， 检查包装是否破损、是 否干燥，检查牙签；
A B
第1张：血型鉴定
第2张：血涂片
第3张：血涂片推片
采血
（4）用酒精棉球将左手 无名指消毒，以穿刺 法，用一次性医用采 血针无名指指腹迅速 扎一下，取血； 注意：采血针、牙签、 棉花等请勿混用，以 免造成交叉感染，用 完即弃入垃圾桶中！
显微镜的结构
目镜 视度调节圈
瞳距调节拉板
物镜转换器
物镜
载物台 聚光镜 载物台左右推进螺旋 集光镜 焦距粗\微调螺旋
光源亮度调节手轮
操作步骤（一）
1、将凳子调节到合适的高度，保持桌面整洁； 2、手握镜柱将显微镜轻轻挪出，目镜筒与桌 边对齐，将镜罩拿下放于抽屉中，插上电源； 3、调节物镜转换器胶轮到4x物 镜（最短物镜），缓慢旋转粗准 焦螺旋，将载物台调到最低； 4、打开集光灯电源，将灯光调节到适当亮度， 将集光镜调节到最高； 5、将目镜调节到合适的瞳距，调节聚光镜轮 找到白亮的视野；
ABO血型鉴定、血涂片和 血细胞观察
邹方东
生命科学学院
实验目的
1. 2. 3. 4. 掌握光学显微镜的使用方法； 了解人体血液以及输血相关常识； 掌握ABO组成以及分型原则； 初步掌握血涂片制片的方法和练 习光学显微镜的常规使用。
第一节 显微镜的使用
•光学显微镜的构造 •显微镜的正确使用方法 •显微镜的保养 •油镜的使用与清洁（了解）
请问：上图是什么血型？？
血涂片制作
（8）取末捎血一滴置于玻片的 一端，左手持，载片上保留 下一薄层血膜载玻片，右手 以边缘平滑的推片的一端从 血滴前方后移接触血滴，待 血滴即沿推片散开。然后使 推片与载片夹角保持30-45度 平稳地向前移动；
血涂片制作 推 片 动 作
①
②
③
④
血涂片制作
(9) 血涂片制成后可手持 玻片在空气中挥动，使 血膜迅速干燥，以免血 细胞皱缩； (10) 将干燥后的血膜平放 在实验台上，加瑞氏染 液2-3滴,使覆盖整个血 膜，固定5-10min，注意 不要让染液干掉，如若 有干燥请覆以少量清水；
注意玻片的正确放置！
操作步骤（三）
10、将物镜调到4x，载物台调低，取出玻 片放于适当位置，用擦镜纸轻轻擦拭用过的 目镜与物镜；
11、关闭聚光灯，拔出插头，将载物台调高 后将线缆轻轻缠绕在显微镜柱上； 12、将目镜调节拉板调回，套上镜罩，将显 微镜轻轻放回。
第二节 ABO血型鉴定与血涂片制作 •ABO血型鉴定原理与 鉴定方法 •血涂片制作与观察 •红细胞、白细胞的识 别（照相）
嗜曙红细胞
嗜中性粒细胞 巨淋巴细胞
嗜碱性细胞 单核细胞
注意事项
1. 一张良好的血片,要求厚薄适宜,头体尾分 明,分布均匀,边缘整齐, 两侧留有空隙； 2. 血片制好后最好立即固定染色,以免细胞 变化影响观察； 3. 血膜未干透,细胞尚未牢固附在玻片上,在 染色过程中容易脱落,因此血膜必需充分 干燥；