2011开题报告书
2011建筑学专业毕业设计开题报告二介绍
毕业设计(论文)开题报告课题名称院（系）建筑学院专业建筑学专业姓名学号起讫日期指导教师2011年03月02日开题报告填写要求1．开题报告（含“文献综述”）作为毕业设计（论文）答辩委员会对学生答辩资格审查的依据材料之一。
此报告应在指导教师指导下，由学生在毕业设计（论文）工作前期内完成，经指导教师签署意见及所在专业审查后生效；2．开题报告内容必须用黑墨水笔工整书写或按教务处统一设计的电子文档标准格式（可从教务处网页上下载）打印，禁止打印在其它纸上后剪贴，完成后应及时交给指导教师签署意见；3．“文献综述”应按论文的格式成文，并直接书写（或打印）在本开题报告第一栏目内，学生写文献综述的参考文献应不少于15篇（不包括辞典、手册）；4．有关年月日等日期的填写，应当按照国标GB/T7408—94《数据元和交换格式、信息交换、日期和时间表示法》规定的要求，一律用阿拉伯数字书写。
如“2004年4月26日”或“2004-04-26”。
毕业设计（论文）开题报告建筑高度：不超过24米4.设计依据1.《成都市规划管理技术要求》2.《民用建筑设计通则》3.《办公建筑设计规范》4.《建筑设计防火规范》5.《公共建筑节能设计标准》5.设计要求1.布局合理、功能满足使用要求、设施齐备、交通便捷、环境优美、采光通风良好；2．立面造型现代感强，能体现出建筑功能特征；3．机动车停车710辆，90％为地下停车；4．绿化率：不小于20％，应将不小于绿地率的30％绿地设置为集中绿地，其中应将不小于规定集中绿地的50％临道路设置；5．设由于用地在双流机场附近，建筑高度不得超过24米；6．规划方案应考虑建筑群体的空间布局，参考城市对该地块的用地和建筑要求。
6.生态设计要求合理地开发坡地的前提下，研究建筑形态构成和空间建构的新途径、新方法，力争创造一个健康、良好和可持续发展的的建筑环境。
7.方案要求1.通过课题研究，收集必要的原始数据和勘测设计资料，综合考虑总体规划、基地环境、功能要求、建筑经济以及建筑艺术等多方面的问题，进行设计并绘制成图纸。
2011开题报告
题目：离子液体的合成及在有机物电化学
分析中应用研究
学院：化学化工学院
专业：化学工程与工艺班级：化工0701学号：200706010126学生姓名：赵永彬
导师姓名：陈立新
完成日期：2011 年 3月 18日
开题报告填写要求
1．开题报告（含“文献综述”）作为毕业设计（论文）答辩委员会对学生答辩资格审查的依据材料之一。
此报告应在指导教师指导下，由学生在毕业设计（论文）工作前期内完成，经指导教师签署意见及所在专业审查后生效。
2．开题报告内容必须用黑墨水笔工整书写或按此电子文档标准格式（可从教务处网页上下载）打印，禁止打印在其它纸上后剪贴，完成后应及时交给指导教师签署意见。
3．“文献综述”应按论文的格式成文，并直接书写（或打印）在本开题报告第一栏目内，学生写文献综述的参考文献应不少于10篇（不包括辞典、手册），其中至少应包括1篇外文资料；对于重要的参考文献应附原件复印件，作为附件装订在开题报告的最后。
4．统一用A4纸，并装订单独成册，随《毕业设计（论文）说明书》等资料装入文件袋中。
2011开题报告要求和格式推荐参考书籍
文献检索的范围：高强钢冷冲压开题报告的内容一、研究意义、国内外研究现状及发展趋势，附主要参考文献目录（主要论述冷冲压工艺、模具以及数值模拟）可以在网上搜索1）研究意义2）国内外研究现状3）未来发展趋势二、设计题目及要求1）毕业设计题目：$$$$$$$工艺及三维模具设计2）毕业设计要求：1.一套模具装配图A0一张；2.其他的零件图A03张；3.两万字设计说明书一份；4.外文翻译5000汉字；5.开题报告3000字以上。
三、制件图及工艺性分析（工艺分析，构思及初步见解，拟采用的设计方法和手段）附上制件图（最好是三维的图片）四、设计的重点和难点（你认为可能存在的难点）五.设计进度2011/3/21——2011/3/25 外文翻译开题报告2011/3/28——2011/4/1 工艺性分析，确定工艺方案2011/4/4——2011/4/15 设计草图，总装配图设计2011/4/18——2011/4/29 零件图设计2011/4/25——2011/5/21 三维造型设计与装配2011/5/23——2011/05/27 编写说明书2011/05/30——2011/06/3 检查整理文档及打印出图2011/06/6——2011/06/10 准备答辩开题报告格式：1．开题报告，要符合中文写作规范。
2.按A4页面设置（答辩前再切成16开）。
3.页面设置如下：上 4.3下 4.1左右 3.4装订：0页眉页角：3.44.每页要有页码并居中，字号：宋体小四，行距1.5倍。
5. 3000字以上，附上制件图并居中，所有的插图要有文字说明，要编号并居中。
6.页眉的文字说明可参考如下，可复制。
吉林大学本科生毕业设计开题报告????班刘￥￥（居中）7．自己认真检查，禁止错别字，如有不合格，打回自己检查修改。
8.要有题目“**件工艺及三维模具设计”，封面参考硕士论文封面。
毕业设计参考书籍：以冷冲模或冲压模具为关键词可以搜到很多书在图书馆，超星上也有很多书推荐书籍：现代冷冲模设计基础实例欧阳波仪编著/冲压手册王孝培冷冲模具设计李双义主编/冲压模具标准件选用与设计指南高军，李熹平，修大鹏等编著/冷冲压模具设计指导王芳编著工程图学/冲模设计与制造实用计算手册冷冲压技术问答（上、下）彭建生CA TIA方面：。
开题报告2011(DOC)
河南理工大学万方科技学院本科毕业（论文）设计开题报告JW—350型强制式搅拌机主要技术参数出料容量350〈L〉进料容量560〈L〉额定功率 5.5kw最大粒径40mm主轴转速35转/分外形尺寸Φ1300×1200混凝土搅拌机混凝土搅拌机，包括通过轴与传动机构连接的动力机构及由传动机构带动的滚筒，在滚筒筒体上装围绕滚筒筒体设置的齿圈，传动轴上设置与齿圈啮合的齿轮。
本实用新型结构简单、合理，采用齿轮、齿圈啮合后，可有效克服雨雾天气时，托轮和搅拌机滚筒之间的打滑现象；采用的传动机构又可进一步保证消除托轮和搅拌机滚筒之间的打滑现象。
搅拌机还可衩被分为：星式搅拌机防险搅拌机立式搅拌机混凝土搅拌机双轴搅拌机单轴搅拌机防滑混凝土搅拌机JS双卧轴混凝土搅拌机主要技术参数出料容量500〈L〉进料容量800〈L〉生产能力24—28m3/h骨料最大粒径60搅拌轴转36转/分搅拌叶片2×7搅拌电机型号Y180m—4 （B3）功率18.5kw卷扬电机型号YEZ1325—4 （B5）功率 5.5kw水泵电机型号50DWB20—8A功率0.75KW料斗提升速度18m/分外形尺寸运输3050×2300×2680工作4461×3050×5225整机重量4100kg卸料高度1500mm立式搅拌机搅拌机包括有电动机、搅拌筒、传动轴、搅拌桨叶，其中在传动轴上还松套有一反向搅拌桨叶，该反向搅拌桨叶的轴套通过链条与位于传动轴一侧的中间轴上端的链轮相连，与链轮同轴的被动齿轮则与固定在传动轴下端的主动齿轮相啮合。
本实用新型的两个搅拌桨叶是反向转动的，使得在搅拌过程中，原料能在两个搅拌桨叶之间形成对流，从而彻底解决了传统搅拌机对原料搅而不拌的问题。
新型搅拌机系换代产品，是化工和建材行业搅拌设备无可替代的产物，实现了正确“搅和拌”的问世，从而淘汰其它搅拌设备所以承但的重任。
它以其超常规的构思和精锐的技术含量，合理的设计水准，填补了国际空白。
2011 毕业设计开题报告
3.确定施工部署，施工组织设计的基本任务是根据国家对建设项目的工期要求，选择经济合理的施工方案，即确定施工顺序，选定施工方法和施工机械；确定施工进度，拟订措施，确定布置，合理组织全部生产活动等。
指导教师意见：
签名：
年月日
系
工
作
小
组
意
见负责人签名：年月日五、进行设计所需要的条件：
建筑物所处的工程地质条件、详细设计任务书、需要查阅的相关的设计规范、图集、需要参考的大量图书、教材如:房屋建筑学建筑制图结构力学混凝土结构原理混凝土结构设计高层结构砌体结构土力学基础工程钢结构施工技术施工组织与管理工程概预算等.
还需计算机作为重要的辅助工具,CAD软件天正软件,PKPM结构系列软件
2.预期目标：
3.完成期限和预期进度：
三、设计的研究重点及难点
1.设计重点研究:
2.难点:
四、设计研究的方法及步骤：
1.研究的方法：
利用计算机软件：CAD、天正、PKPM绘制建筑图和结构内力计算。
2.步骤：
1.建筑方案设计，建筑施工图的绘制，包括建筑说明，总平面图，各层建筑平面图，屋顶平面图，主立面，侧立面图，剖面图，节点详图，门窗表等。
湖南科技大学
毕业设计开题报告
题目**（各自命名）宾馆设计
学生姓名
学号
专业班级07级建筑工程*班
指导老师
2011年3月24日
论文（设计）题目
**（各自命名）宾馆设计
一、设计依据及研究意义：
1.毕业设计的依据：
开题报告2011[1].11.6-10
![开题报告2011[1].11.6-10](https://img.taocdn.com/s3/m/8536500a52ea551810a68729.png)
毕业设计（论文）开题报告1 选题的背景和意义为贯彻落实党的十六大精神，实践"三个代表"重要思想，切实推进教育创新，深化教学改革，促进现代信息技术在教学中的应用，共享优质教学资源，进一步促进教授上讲台，全面提高教育教学质量，造就数以千万计的专门人才和一大批拔尖创新人才，提升我国高等教育的综合实力和国际竞争能力，教育部决定在全国高等学校(包括高职高专院校)中启动高等学校教学质量与教学改革工程精品课程建设工作。
为了响应号召，各个高校纷纷开设精品课程。
因此，对精品课程的质量评估显得尤为重要，各种质量评估法应运而生。
1.1 选题的背景“九五”期间我国高等教育改革经历了办学体制改革、管理体制改革、投资体制改革、招生就业制度改革、专业改革、教学内容与课程体系改革等一系列从宏观到微观的改革过程，极大地推动了高等教育事业的历史发展进程，对我国的国民经济建设和社会进步产生了重大影响。
其中，教学内容与课程体系改革是这个历史进程中的重要一环，也是高教改革深入发展的重要标志之一。
当前人们普遍认为，高等学校是否拥有一大批高水平的反映学科前沿的基础理论和专业知识的主干课程，是衡量学校的学术水平、教学水平和教育质量高低的重要标志。
课程作为教学工作最基本的要素，是学校办学最重要的支撑条件之一。
质量是高等学校办学的生命线，为了进一步提高人才培养质量，推进教育创新，教育部在贯彻落实2001年4号文件《关于加强高等学校本科教学工作提高教学质量的意见》的基础上，实施了《高等学校教学质量与教学改革工程》，在持续、健康、协调发展高等教育的同时，把提高质量摆在了更加突出的地位。
同时从2003年4月份开始，作为《质量工程》的先期启动项目，在全国范围内开展各高校的精品课程建设。
旨在通过精品课程建设，推动优质教育资源的共享，使学生得到最好的教育，从而全面提高教学质量。
精品课程是具有一流教师队伍、一流教学内容、一流教学方法、一流教材、一流教学管理等特点的示范性课程。
开题报告2011模板
本文通过分析总结基于不同分类体系的电子商务模式,以价值链的分类体系为基准,将电子商务模式分为网上商店/服务、网络经纪商、价值链服务商三类共12种.从信息的横向价值链、纵向价值链和信息内容三个维度对上述电子商务模式进行了分析和比较,并在分析价值链发展机制的基础上,引入知识价值链对电子商务模式的发展趋势作了探讨与研究.。
06级电子商务
设计（论文）题目
中小企业B2C电子商务盈利模式分析
指导教师
曹萌
一、设计（论文）选题的依据（选题的目的和意义、该选题在国内外的研究现状及发展趋势等）
电子商务是伴随着信息经济的脚步，在２０世纪９０年代兴起于美国、欧洲等发达国家的一个新概念。作为全球经济的一分子的中国参与全球的电子商务也已是时不我待，只争朝夕。电子商务其实是一种商务活动的新形式，它通过采用现代信息技术手段，以数字化通信网络和计算机装置代替传统交易过程中纸介质信息载体的存储、传递、统计、发布等环节，从而实现商品和服务交易以及交易管理等活动的全过程无纸化，并达到高效率、低成本、数字化、网络化、全球化等目的。
华中科技大学文华学院
毕业论文（设计）开题报告
题目：中小企业B2C电子商务盈利模式分析
学部（系）：经管学部
专业班级：电子商务2班
学生姓名：肖莎
******
（职称）：
完成日期：2008年11月6日
华中科技大学文华学院
学生毕业设计（论文）开题报告
学生姓名
肖莎
学号
060474021217
学部（系）
经管学部
专业年级
几种不同企业间电子商务模式，不管采用技术如何不同，但共同之处是通过网络实现企业间交易的实现，实现企业间信息流、资金流和物流的高效率畅通和自动化进行，只是不同模式对信息流、资金流和物流支持的方式不同和支持程度不同。
开题报告(wangqi)
对于海外华人女作家陈谦的作品，国内外都有研究。 首先，国外方面：由于陈谦的小说数量不多，受到的关注也并不多。在国 外北美的华人评论圈常常也只有在对新移民女性作家的总体评述里才提到陈谦 及其小说。另外，可检索到一篇华裔美国人苏炜的《三个女人一台戏——读“海 外知性女作家丛书》 ，这篇文章将陈谦与另两位海外华人女作家并列而谈，对于 其创作超越以往“留学生文学”或者“新移民文学”那些表面化的类型特征的 地方，如选材视角、人文关怀、叙述切入点等作了深入研究，并指出了不足之 处。 其次，国内方面：可分为四类： 第一类研究陈谦小说中硅谷丽人的爱情故事这一主题，认为作者通过故事 的讲述思考诸多导致爱情幻灭的因素，从而揭示平常、平凡和平淡就是当下爱 情实在的真义，如郑孝芬的《爱情是人生复杂的境遇——美国华文作家陈谦小 说论》 。 第二类以《望断雁南飞》中南雁的形象为例分析作家潜在的对于女性个体 情感旨归与生命诉求的表达欲求，如刘桂茹的《深度激情的生命诉求——旅美 作家陈谦小说论》 。 也有学者认为，爱情只是陈谦的小说文本中显在的探索符码，而它们真正 的魅力在于一种“寻找的激情” ，展现了现代人的追寻自我传奇和想要飞翔的激 情的梦想， 从而展现了文学超越世俗的向上追问的引导性力量。 如解孝娟的 《寻 找的激情——论陈谦的小说创作》 。 另外，有评论家将仅注意力集中在中篇小说《特雷莎的流氓犯》上，探寻 其主题意蕴的多重性以及在文学史中的意义。
5．指导教师审阅意见 指导教师审阅意见
指导教师(签字)： 指导教师
年
月
日
6．指导小组意见
指导小组组长(签字)： 指导小组组长 年 月 日
2．
本选题的研究价值和本论文的创新点
本选题的研究价值：陈谦自上世纪 90 年代中后期开始发表作品，她并不高 产，远不如严歌苓、张翎等海外作家名气大，但她的作品在新移民作家群里有 自己的存在价值，无论在语言或思想性上都很耐人寻味。陈谦致力于描写双重 经验中移民女性的生存状态及情感困顿，对女性的心里悲剧进行理性的审视， 显示了对生存哲学的独到理解，以及对生命意识的执着姿态。她的创作提供了 另一种想象华人女性的可能。 然而在国内能检索到的期刊里，评论陈谦小说者寥寥无几。而且这些评论 家往往将注意力集中于其作品中硅谷丽人的爱情故事这一主题上，或指出作家 潜在的对于女性个体情感旨归与生命诉求的表达欲求，或是就单篇作品的多重 性主题意蕴作简要研究。但研究还有待深入。 本论文旨在分析陈谦作品中女性的具有普遍性意义的“强势”与“弱势” 的双重形象，以及造成这种双重形象的原因，从而揭示出作者的创作心态。这 就是本论文的价值所在。 本论文的创新点：由于研究陈谦的作品不多，也不够深入。评论家往往着 眼于一小个方面简要评论。而本论文则针对陈谦在整个海外华人文学中的位置 以及她作品中的大背景、女性形象、女性性格特征、深层内涵，进行全面系统 的研究，并做出总结。这就是本论文的创新点。
湖南科技大学2011届毕业设计(论文)开题报告
湖南科技大学2011届毕业设计（论文）开题报告
注：
1、开题报告是本科生毕业设计（论文）的一个重要组成部分。
学生应根据毕业设计（论文）任务书的要求和文献调研结果，在开始撰写论文之前写出开题报告。
2、参考文献按下列格式（A为期刊，B为专著）
A：[序号]、作者（外文姓前名后，名缩写，不加缩写点，3人以上作者只写前3人，后用“等”代替。
）题名、期刊名（外文可缩写，不加缩写点）年份、卷号（期号）：起止页码。
B：[序号]、作者、书名、版次、（初版不写）、出版地、出版单位、出版时间、页码。
3、表中各项可加附页。
2011届毕业论文开题报告模版
算不合理的关键因素。变动成本法能够真实反映企业的成本
核算状况，提供科学的成本资料，满足企业短期经营决策和管
理要求，从而在实务中得到了广泛运用和发展。
在会计实务中,作为会计两大分支之一的管理会计发挥
着不可估量的作用，管理会计渗透在企业的方方面面，它根据
以更好地指导会计实践。
2。研究意义
变动成本法的优点主要表现在以下几方面：
1。促使管理者重视市场，避免盲目生产企业管理者必须事先预定目标利润,而实现目标利润的关键在于销售目标的实现。在变动成本法下，固定成本作为期间成本直接计入当期损益，不必随存货递延到下一期,所以税前利润与销售量是同方向的变化关系，从而有利于促使企业管理部门树立市场观念，努力开发市场，重视销售，以销定产，减少或避免因盲目生产给企业带来的经济损失。
10分
指导教师签名：年月日
六、系审核意见
系主任签名：
年月日
八、学院毕业设计（论文)指导小组意见
签名：
年月日
经济与管理学院
本科毕业论文开题报告
论文题目完全成本法和变动成本法选择的影响分析
学生姓名黄河波
班级/学号08110132/0811013210
专业会计学
论文起止日期指导教师_戴佳君_201年2月制一、研究目的和意义
1.研究目的
在市场竞争日益激烈的今天，企业为了求得长期的生存
和发展,不断增加技术投入和加强内部管理,致使企业固定性
第二种观点是采用“双轨制”.即企业在完全成本法的核算资料之外，另外设一套变动成本法的核算系统，提供两套平行的成本核算资料，以分别满足不同的需要。这种方法技术上比较简单，但工作量非常大，易造成人、财、物的浪费，所以往往不被企业接受。
开题报告书
黄淮学院2011届本科毕业论文（设计）开题报告系（院）：音乐系专业（专业方向）：音乐学论文（设计）题目论贝多芬早期钢琴奏鸣曲快板乐章的艺术特色——以《悲怆》第三乐章为例指导教师李立职称副教授学历本科学生姓名杜加红学号0730110129 班级0701 一、研究目的（选题的理论意义和实践意义）路德维希·范·贝多芬（Ludwig Van Beethoven 1770-1827)，德国作曲家，他不仅是维也纳古典乐派的代表人物之一，同时他也是浪漫乐派的开拓者。
他的音乐代表了西方音乐的鼎盛和辉煌。
贝多芬1770年12月16日出生在莱茵河畔波恩的一个音乐世家，他的祖父和父亲均供职于科隆选帝侯。
贝多芬的父亲为了使贝多芬成为莫扎特式的音乐神童，在他四岁时就逼着他学习小提琴和钢琴。
贝多芬十二岁时就担任了宫廷剧场首席小提琴师和教堂助理风琴师。
在他第一个音乐老师聂耶菲的劝说下，贝多芬于1787年到维也纳向莫扎特学习作曲，后因故返回家乡，1792年在海顿的帮助下第二次去维也纳进修。
期间他向很多音乐家学习，艺术上进步神速。
1795年首次公演后，立刻获得了卓越钢琴家和作曲家的声望。
贝多芬一生创作了九部交响曲，十一部管弦乐序曲，三十二首钢琴奏鸣曲，五部钢琴协奏曲，一部提琴协奏曲，五首小提琴奏鸣曲，十首小提琴奏鸣曲，一部清唱剧，一部歌剧，两部弥撒曲以及大量的戏剧配乐和室内乐作品。
在贝多芬的音乐创作中，钢琴奏鸣曲占据了很重要的地位。
同时贝多芬对钢琴奏鸣曲的发展也作出了巨大的贡献。
他把奏鸣曲放在和交响曲一样重要的地位上。
钢琴奏鸣曲在贝多芬那里成了艺术表现的一种重要手段，他把自己的情感和思想倾注到钢琴奏鸣曲的创作中，并通过这种形式来大胆的表达自己对社会，对时代的认识。
为了达到这一目的，他要求钢琴奏鸣曲具有更宽泛、更有戏剧性的音乐效果。
因此，他不仅扩大了钢琴的演奏音域，增强了力度的对比，提高了手指的技巧，而且还加强了奏鸣曲式结构内部的对比因素，扩大了展开部的矛盾冲突和发展的动力，使得他的钢琴奏鸣曲远远的超过了前人，并创造了属于他自己的独特音乐风格。
硕士开题报告(2011版)
山东中医药大学硕士研究生学位论文开题报告
论文题目：
学号
年级
研究生姓名
导师姓名及职称
学科专业
研究方向
所属院所
拟授学位
二O 年月日填
说明
1.开题报告在本专业教研室（科）范围内举行，须成立开题考核小组，于第四学期4月底之前完成，开题时间和论文答辩时间必须间隔1年以上。
2.本表一式三份（可复印），教研室、所属学院（所）、研究生处各一份，原件交所属学院（所）存档。
3.本表用蓝黑或黑色钢笔填写或打印（不能打印表后粘贴），字迹要工整。
4.根据需要可自行加页，双面打印。
山东中医药大学研究生处
-1-
-2-
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-6-。
2011年秦安振开题报告
甘肃农业大学
硕（博）士研究生论文开题报告
所在院系农学院
学科专业作物栽培学与耕作学
学位级别博士
学生姓名秦安振
入学时间2007年9月
导师姓名黄高宝，柴强
课题名称不同间作模式的土壤
呼吸差异及其机理
甘肃农业大学研究生处制
2011年1月7日
一、立论依据（以下各项均可加页）
二、研究方案（以下各项均可加页）
Fig.1 Technology route design
4.2Experimental design
The experiment was a randomized block design with three replications in which
三、经费预算
注：预算支出科目按下列顺序填写：1、论文课题业务费2、实验材料费、3、仪器设备费四、论证委员会成员
五、论证意见
六、学院意见。
2011年洛阳市基础教育科研课题开题报告书
学会提出疑问，充分体现“让学生自主探索，成为学习主人”这一新课标基本理念。在以往的课堂教学中，虽然教师也提出问题，但学生总是被动接受思考，他们在问题面前难免有被“审”的感受。反之，如果让学生也有机会成为“问”的主体，那么，学生的自主意识和学习积极性将大大激发。
四、重点问题：
学策略体系，这是本课题研究的最重要方法。
文献分析法：作为学习理论、收集信息的主要方法，其中信息资料主要来源于教育理论书籍、报刊杂志以及网络下载的相关资料等。通过这些资料信息的分析与研究，可达到准确地界定课题研究的价值性、可行性及关键概念的内涵与外涵，并制定研究目标与实施方案等目的。
调查法：主要调查本校在该课题研究之初，数学课堂提问的现状、师生理解情况以及对研究过程中、研究之后的状况进行详细跟踪调查，为研究的顺利进行提供事实性依据。在实验前期、后期采用问卷、观察等方法进行调查，为研究提供依据。
三、基本内容：1.小学数学课堂教学中教师提问的现状调查及其分析。
“随堂听课与教研活动”中对提问进行专项调查，主要统计提问的参与率和
提问的覆盖率。借助课堂的提问率和提问覆盖率定量描述学生的课堂学习行为。
第8列
第7列
第6列
第5列
第4列
第3列
第2列
第1列
教室
前门
第1行
第2行
第3行
第4行
第5行
第6行
第7行
第8行
主
要
参
与
者
姓名
性别
年龄
专业职称
学科专业
学历学位
工作单位
王燕华
女
37
小学一级
中文
本科
新安县西关小学
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[19]吴鹏，刘映峰，梁东辉，陈允钦；提高人外周血单核细胞分离率的方法探究，实用医学杂志2008年第24卷第5期.
[10]《Cellular and Molecular Immunology细胞和分子免疫学（影印版）》5th ed, Abul K.北京大学医学出版社,2004
[11]5th ed, Richard A. Goldsby, Thomas J. Kindt, Barbara A. Osborne,W. H. Freeman and Company,New York,2006
B淋巴细胞分离采用方法：聚蔗糖-泛影葡胺(Ficoll-Hypaque)分离法
B淋巴细胞激活采用方法：用anti-CD40和IL-4激活
2.如何选取适合的实验材料：
人脐带血加肝素抗凝剂
3.采用合理的实验方法：
3.1用聚蔗糖-泛影葡胺(Ficoll-Hypaque)分离法可以成功地从人脐带血中提取单个核细胞(PBMC)
[3]李峰，杨旭宇，姚开泰，等理进展，2004，31（5）：464-469
[4]李峰，姚开泰，等．应用酵母双杂交系统筛选与NAP1相互作用的蛋白质．湖南文理学院学报（自科版）．2008，20（2）：52-59
[5]李峰.成人视网膜假定蛋白基因ARHP和鼻咽癌相关基因NAP1的克隆及功能研究.博士论文,中南大学2004.5
课题的主要内容（观点）、创新之处：
将分离得到的单个核细胞冷冻储藏或制成细胞悬液，用anti-CD40和IL-4激活培养得到B淋巴细胞，将B淋巴细胞与NAP1（FDC-SP）融合蛋白体外诱导培养，然后再进行相关实验的研究。
分离PBMC是一项常规工作，传统的是采用Ficoll密度梯度离心法，Ficoll是一种粘性强的液体，其比重为1.077，在一定离心力的作用下，比重大于淋巴细胞的红细胞及多核粒细胞等沉淀于分离液的底层，单个核细胞在分离液的界面上。操作时需将抗凝血作适当稀释，比较适用于少量血液的分离，在血量较多时要分成数管进行离心，十分不便，而且重复多次地开放性操作也增加了污染机会。
IL-4促进B细胞MHCⅡ类抗原、FcεRⅡ/CD23和CD40的表达，并增强B细胞提呈抗原能力，使免疫系统对小量抗原刺激发生免疫应答。增加FcεRⅡ/CD23(IgE Fc段低亲和力受体)的表达，并释放可溶性CD23(sCD23)/IgE结合因子(IgE-BF)，与mIgE阳性细胞结合并诱导其分化，可能与促进Ｂ细胞IgE的产生有关。
[20]陈政良1,朱锡华2;淋巴细胞识别与激活的双信号理论;1.第一军医大学免疫学教研室,广东广州510515 ;2.第三军医大学免疫学教研室,重庆400038.
指导教师意见：
签名：年月日
本科生毕业论文(设计)开题报告书
题目人外周血B淋巴细胞的分离与激活
学生姓名＿＿＿杨正＿＿
学号＿＿＿********＿
专业班级＿＿＿芙蓉生科0801班＿＿＿
指导老师＿＿李峰＿教授＿＿＿＿
2011年9月28日
论文（设计）题目
人外周血B淋巴细胞的分离与激活
课题目的、意义及相关研究动态：
课题目的：
通过本论文的实施，熟悉和掌握人外周血淋巴细胞提取的一般方法，完成人外周血淋巴细胞的提取、鉴定及激活。
2012-04-01---2012-05-15撰写论文和毕业论文答辩
主要参考文献与资料：
[1]周琳琳.学士学位论文.湖南文理学院.2010年
[2]Feng Li, Xu Y. Yang, Kai T. Yao, et.al. Identification and characterization of a novel nasopharyngeal carcinoma-associated peptide, NAP-1. Journal of Translational Medicine，2004,2(1):10
[15]北京医学院微生物学教研组编；实验免疫学[J]；北京：人民卫生出版社;1980,435-436
[16]王红祥，邵诗颖，李宾公，赵湜，唐晓琼，赵智刚，邹萍;人外周血内皮祖细胞的分离培养及鉴定，中国科学院上海冶金研究所;材料物理与化学(专业);2000年
[17]Nair SK, Snyder D , Rouse BT ,etal .Regression of tumors in mice vac 2 cinatedwith professional antigen - presenting cells pulsed with tumor extracts.Int J Cancer. 1997 ,70 :706.
设计方案：
分离B淋巴细胞
稀释血液：取抗凝脐带血5ml与等量Hanks液或RPMI1640充分混匀
配制离心分离液：吸取5ml淋巴细胞分层液置于刻度离心管中，
然后将离心管倾斜45℃角，用移液器将稀释的全血沿管壁缓慢加至分离液上面
（血液:Hanks液:淋巴细胞分离液的比例为1:1:1），应注意保持两者界面清晰
[6]李峰.激活的B淋巴细胞中NAP1（FDC-SP）特异性受体的分离与鉴定.湖南省自然科学基金课题
[7]《医学免疫学》金伯泉主编，人民卫生出版社，2008年
[8]《免疫学》周光炎主译，人民卫生出版社，2002年。译自Roitt I Immunology, 6th ed.
[9]《免疫学原理》周光炎主编，上海科学技术出版社，第1版，2007年.
分离时先将分层液置试管底层，然后将肝素化全血以Hanks液或PBS液作适当稀释后，轻轻叠加在分层液上面，使两者形成一个清晰的界面。水平式离心后，离心管中会出现几个不同层次的液体和细胞带。红细胞和粒细胞密度大于分层液，同时因红细胞遇到Ficoll而凝集成串钱状而沉积于管底。血小板则因密度小而悬浮于血浆中，唯有与分层液密度相当的单个核细胞密集在血浆层和分层液的界面中，呈白膜状，吸取该层细胞，经洗涤、离心，重悬。本法分离单个核细胞纯度可达95％，淋巴细胞约占90％～95％，细胞获得率可达80％以上，其高低与室温有关，超过25℃时会影响细胞获得率。
激活B淋巴细胞
外周血B淋巴细胞的分离，用anti-CD40和IL-4激活B淋巴细胞
不同活化阶段的B淋巴细胞与稳定转染FDC-SP的小鼠成纤维细胞（L-cell）
共培养
流式细胞技术检测FDC-SP融合蛋白是否与B淋巴细胞结合
论文撰写提纲：
1.研究方案提出：
首先分离出B淋巴细胞然后再进行B淋巴细胞的激活
研究方法、设计方案或论文撰写提纲：
研究方法：
1.分离B淋巴细胞
高浓度的Ficoll溶液粘性高，易使细胞聚集，故通常使用60g/L的低浓度溶液，密度为1.020，添加比重为1.200的泛影葡胺（urografin）以增加密度。国外常用商品Isopaque或Hypaque，故又称Ficoll-Hypaque分层液，将适量340g/L泛影葡胺加入Ficoll溶液中即可配制成密度合适分层液。分离人外周淋巴细胞以密度为1.077±0.001的分层液最佳，因为人的红细胞密度为1.093，粒细胞密度为1.092，单个核细胞在1.076～1.090之间。
离心：在18℃～20℃下，用水平离心机以2000r/min离心20min。
离心后细胞分布（见图1、2），小心取出试管
吸取单个核细胞：用移液器轻轻插到中层呈白色雾状的淋巴细胞层，
沿管壁轻轻吸出此层细胞，移入另一支离心管中
洗涤单个核细胞用Hanks液洗涤细胞2次，每次离心1500r/min×10min
可去掉大部分混杂的血小板
[12]马树俊,邓鸿业,丁桂风,邓玉兰;人外周血两类单个核免疫抑制细胞的比较[J];北京大学学报(医学版);1983年02期
[13]叶本善;人脐带血淋巴细胞介导ADCC抗流感病毒感染细胞的能力[J];国际免疫学杂志;1984年06期
[14]聂慧芳，穆丽萍，刘宝庆，郝建珍;外周血单个核细胞冷冻保存配方的实验研究[A];中国输血1999年年会暨纪念ABO血型发现100周年学术交流论文专辑[C];1999年
2.激活B淋巴细胞
用含10％小牛血清的1640完全培养液(含RPMI1640,Herpes10mmol／L,青霉素、链霉素各100U／mL,10％小牛血清)调整细胞数2X10／mL,加入6孔板，每孔2mL，37℃5％C02培养箱培养6h，吸弃上清，用PBS轻洗2次，去除非粘附细胞，每孔加入含10%新鲜小牛血清的1640培养液2mL及细胞因子GM-CSF、IL-4(终浓度GM-CSF 100ng／mL，IL-4 50ng／mL)，置37℃5％CO2培养箱继续培养，每隔3d半量换液，加入全量细胞因子。每日在倒置相差显微镜下观察，培养7～10d收集细胞并鉴定。
3.2激活B淋巴细胞
用anti-CD40和IL-4激活B淋巴细胞
4.对实验结果进行合理的分析
完成期限和预期进度：
完成期限：
2012-05-15
毕业论文(设计)进度安排：
2011-9-20---2011-10-15收集资料，复习文献，撰写综述
2011-12-01---2012-03-30进行外周血B淋巴细胞的分离与激活实验
研究意义及相关研究动态：
淋巴细胞作为血液中白血胞的主要组成成分，是动物机体完成细胞免疫和体液免疫的重要基础，为抵抗外来侵害提供了完善的免疫防护机制。同时，淋巴细胞还具有寿命长，激活后可分裂、增殖的特性，因此很适合于离体培养，为免疫学研究带来极大的方便。另外，利用体外培养的淋巴细胞进行抗癌研究、爱滋病治疗、新药研制已屡见不鲜。
分离单个淋巴细胞技术是进行细胞免疫试验的重要技术之一，是进行各项细胞免疫检测的基础。分离所得的单个核细胞可满足许多实验需要，不仅用于淋巴细胞总数测定，还可以用于进一步纯化淋巴细胞，进行淋巴细胞分类鉴定及各种淋巴细胞功能测定。分离得到的人外周血单个核细胞，用anti-CD40和IL-4激活培养得到B淋巴细胞，激活的B淋巴细胞表面存在与NAP1相互作用配体。此实验为相关免疫学研究奠定了基础。