网织红细胞计数的定义
10-网织红细胞计数
10-网织红细胞计数B D I S R e t i c-C O U N T（T h i a z o l e O r a n g e）Catalog No. 349204简介早期红细胞细胞核丢失后，胞浆内仍残留有细胞器（如核糖体、线粒体），这样的早期红细胞就是网织红细胞，它有别于不含细胞器的成熟红细胞。
这些细胞器富含核酸物质（RNA和DNA），而在成熟红细胞中不含有此种物质。
正常人（非贫血者）中，网织红细胞在骨髓中三天成熟，第四天出现在外周循环血中。
网织红细胞计数可以评估红细胞造血系统活性，但是如果网织红细胞的骨髓成熟时间缩短而循环血成熟时间延长，这种评估方法就会有误差。
这时，外周血相中一至三天的网织红细胞（“漂移”网织红细胞）也会被当做第四天网织红细胞而计算在内。
如遇此种情况，应当对“漂移”网织红细胞做修正（修正公式见流式细胞仪分析一节）。
BD公司生产的Retic-COUNT试剂主要成分为噻唑橙（TO），与丫啶橙（AO）的作用类似。
TO 与DNA碱基对以1:2的比例结合，分解常数、正电荷数和膜通透性与AO相近。
Retic-COUNT试剂既可与DNA结合，也可与RAN结合，形成的荧光-核酸复合物，吸收光谱为475nm，荧光发射光谱为530nm，因此，适合在安装了488nm激光的流式细胞仪上使用，如FACSCalibur，FACSort，FACScan等。
网织红细胞计数的传统方法是使用新亚甲基蓝染料，染色涂片后，光镜下计数。
但此方法费时，且由于只计数1000个细胞，因而存在固有的取样误差。
使用Retic-COUNT流式细胞术方法进行网织红细胞计数，与传统的新亚甲基蓝方法相比，存在很多优势。
使用流式细胞术，可以检测上万个细胞，具有很好的取样精确性。
由于使用的是细胞悬液，可以消除涂片时的分布误差。
同时，它还具有省时、操作简便等优点。
另外，由于可以使用配套的Retic-COUNT自动软件，不需要做阴性对照，还可以减少操作的变异性。
网织红细胞计数的定义
网织红细胞（reticulocyte）是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞。
因其质内尚存留多少不等的嗜碱物质，RNA，经煌焦油蓝，新亚甲蓝活体染色法染色后，嗜碱物质凝聚成颗粒，其颗粒又可联缀成线，而构成网织状，此种红细胞即网织红细胞，仍于骨髓内停留一定时间，然后再释放入血流医学|教育网搜集整理。
因此骨髓中的网织红细胞数，不但比外周血约高3倍。
而且亦较幼稚。
网状结构愈多，表示该细胞越幼稚，有人将其分成一、二、三、和四级。
即当红细胞内几乎被网织物充满者为一级，而红细胞内含网织物极少（上个或几个颗粒）者为四级。
通常网织红细胞比成熟红细胞稍大，直径为8-9.5μm.。
临检--网织红细胞计数(Ret)
网织红细胞计数（Ret）【定义】网织红细胞是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞，属于尚未完全成熟的红细胞，其胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸（RNA），经活体染色后，嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒，颗粒与颗粒连缀成线，线连接成网，故而得名。
【分型】根据网织红细胞发育阶段分为4型，分别是：Ⅰ型（丝球型）：红细胞充满网状物，见于骨髓。
Ⅱ型（网型）：红细胞网状物结构松散，见于骨髓。
Ⅲ型（破网型）：红细胞网状物结构稀少，呈不规则枝点状排列，见于外周血。
Ⅳ型（点粒型）：红细胞内为分散的细颗粒、短丝状网状物，见于外周血。
【检测原理】1.普通光学显微镜法2.网织细胞计数仪法和血液分析仪法【操作方法】1.显微镜试管法操作（1）加染液：于试管中加入10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液2滴，再加新鲜血2滴，立即混匀，置37℃下15～20min。
（2）制片：取1小滴制成薄血涂片，自然干燥。
（3）观察：在低倍镜下选择红细胞分布均匀的部位进行观察。
（4）计数：在油镜下计数至少1000个红细胞中网织红细胞数。
（5）计算：网织红细胞分数=（计数的网织红细胞数）/1O00，网织红细胞绝对值（×109/L）=红细胞数×1012/L×网织红细胞分数。
2.显微镜法注意事项（1）网织红细胞必须活体染色，WH0推荐使用新亚甲蓝染液，其染色力强且稳定。
煌焦油蓝染液操作简单、费用低廉，但易产生沉淀、工作效率不高、精度差。
染液与血液比例以1:1为宜，严重贫血时，可适量增加血量。
（2）为提高网织红细胞计数精度和速度，ICSH推荐使用Miller窥盘，方法是将Miller 窥盘置于目镜内，选择红细胞散在且分布均匀的部位（3）用小方格（A）计数红细胞，大方格（B）计数网织红细胞，按下式计算：（4）注意鉴别网织红细胞与HbH包涵体。
Ret为蓝绿色网状或点粒状物质，分布不均，HbH包涵体为蓝绿色圆形小体，均匀散布于整个红细胞内。
网织红细胞计数
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3．作为病情观察的指标
溶血性贫血及失血性贫血，治疗过程中 连续观察网织红细胞计数，可作为判断 病情变化的参考指标。 如治疗后网织红细胞逐渐降低，表示溶 血或出血已得到控制。 如网织红细胞持续不减低，甚至更增高， 表示病情未得以控制，甚至加重。
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四、红细胞沉降率测定
红细胞沉降率（ESR），简称血沉率 指红细胞在一定条件下沉降的速率。 正常情况下，红细胞在血浆中具有相对 的悬浮稳定性，沉降极其缓慢。 在病理情况下，血沉率可明显增快。
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临床意义
2．血细胞比容减低 见于各种贫血。 不同类型的贫血，红细胞体积大小不同， 故血细胞比容的减少与红细胞数量减少 并不—定成正比。 因此必须将红细胞数、血红蛋白量和血 细胞比容三者结合起来，计算红细胞各 项平均值才有参考意义。
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(二)红细胞平均值的计算
1．平均红细胞容积(MCV) 指每个红细胞的平均体积，以飞升（ fl ）为单 位。
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参考值
魏氏(Westergoen)法： 成年男性0~15mm/1小时末
成年女性0~20mm/1小时末
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临床意义
(一)生理性变化 12岁以下的儿童血沉略快。 妇女月经期血沉略增快，可能与子宫内膜破损 及出血有关。 妊娠3个月以后至分娩后3周血沉快，与生理性 贫血及纤维蛋白原含量增加等有关。 老年人血浆纤维蛋白原含量增加血沉加快。 高原地区居民红细胞增多，血沉低于平原地区。
网织红细胞计数操作规程
网织红细胞计数操作规程目的：本实验旨在规范网织红细胞计数的标准操作，以确保实验数据的准确性。
原理：网织红细胞是未完全成熟的红细胞，其包体较一般红细胞稍大，胞浆中尚有嗜碱性残留物质，可被煌焦油蓝等染成蓝色颗粒状、线状及网状结构物。
网织红细胞的数量可用百分率或每立方毫米血液中的绝对值数来表示。
材料：煌焦油蓝（灿烂甲酚蓝）、枸橼酸钠、生理盐水、香柏油、载物片（玻璃片）、推片（磨去边的玻璃片）、试管（2ml）、毛细吸管或枪头（200微升）、光学显微镜。
操作规程：染色液配制：将煌焦油蓝0.4g和3.5%枸橼酸钠20ml研磨溶解后加入生理盐水至100ml，过滤备用。
室温下可保存6个月。
血膜片制备：1.染色：取试管一支，用毛细管或枪头于其中加入染液2～5滴，然后再加入新鲜血液1滴轻摇混合，染色10～15min。
2.制片：取载物片一片，用毛细管或枪头吸取血液染色液1小滴于载物片上，并用推片约45度角推制成舌型血膜片，自然干燥备用。
3.观察：用显微镜观察，取血膜片滴入香柏油1滴，将血膜片置于显微镜载物台，用油镜观察网织红细胞。
4.计数：取计数器在油镜下检查计数红细胞，即计数红细胞中网织红细胞的数量，检查计数1000个红细胞中网织红细胞的数量，并得出千分率再除以10即为百分率。
计算公式：百分率=1000个红细胞中网织红细胞的数量/1000注意事项：1.载物片使用前必须经过酸或碱液浸泡脱脂处理后方可使用。
2.血膜片制备需要反复练推片，熟练推制血膜片的技巧。
3.血膜片的厚薄要适中，过厚或过薄均无法进行观察。
4.室温过低时，血液染色时间要适当延长，以确保细胞着色更充分。
5.血膜片需在3天内检查计数，否则其网状结构会褪色，不易观察清晰。
10-网织红细胞计数
10-网织红细胞计数B D I S R et i c-C O U N T（Thi azol e O r ange）Catalog No. 349204简介早期红细胞细胞核丢失后，胞浆内仍残留有细胞器（如核糖体、线粒体），这样的早期红细胞就是网织红细胞，它有别于不含细胞器的成熟红细胞。
这些细胞器富含核酸物质（RNA和DNA），而在成熟红细胞中不含有此种物质。
正常人（非贫血者）中，网织红细胞在骨髓中三天成熟，第四天出现在外周循环血中。
网织红细胞计数可以评估红细胞造血系统活性，但是如果网织红细胞的骨髓成熟时间缩短而循环血成熟时间延长，这种评估方法就会有误差。
这时，外周血相中一至三天的网织红细胞（“漂移”网织红细胞）也会被当做第四天网织红细胞而计算在内。
如遇此种情况，应当对“漂移”网织红细胞做修正（修正公式见流式细胞仪分析一节）。
BD公司生产的Retic-COUNT试剂主要成分为噻唑橙（TO），与丫啶橙（AO）的作用类似。
TO 与DNA碱基对以1:2的比例结合，分解常数、正电荷数和膜通透性与AO相近。
Retic-COUNT试剂既可与DNA结合，也可与RAN结合，形成的荧光-核酸复合物，吸收光谱为475nm，荧光发射光谱为530nm，因此，适合在安装了488nm激光的流式细胞仪上使用，如FACSCalibur，FACSort，FACScan等。
网织红细胞计数的传统方法是使用新亚甲基蓝染料，染色涂片后，光镜下计数。
但此方法费时，且由于只计数1000个细胞，因而存在固有的取样误差。
使用Retic-COUNT流式细胞术方法进行网织红细胞计数，与传统的新亚甲基蓝方法相比，存在很多优势。
使用流式细胞术，可以检测上万个细胞，具有很好的取样精确性。
由于使用的是细胞悬液，可以消除涂片时的分布误差。
同时，它还具有省时、操作简便等优点。
另外，由于可以使用配套的Retic-COUNT自动软件，不需要做阴性对照，还可以减少操作的变异性。
(三)网织红细胞计数
（2）评价疗效
网织红细胞反应： 网织红细胞反应：IDA或巨幼细胞贫血分别 或巨幼细胞贫血分别 给予铁剂、维生素B 或叶酸治疗2~3d后，网织 给予铁剂、维生素 12或叶酸治疗 后 红细胞计数值开始上升， 达到最高(10% 红细胞计数值开始上升，7~10d达到最高 达到最高 左右)；两周以后逐渐降至正常水平，红细胞、 左右 ；两周以后逐渐降至正常水平，红细胞、 血红蛋白开始升高。 血红蛋白开始升高。 骨髓移植、 治疗后： 骨髓移植、EPO治疗后：若骨髓开始恢复造 治疗后 血功能， 升高， 血功能，RMI升高，网织红细胞计数值上升。 升高 网织红细胞计数值上升。
六、参考值
成人： 成人：0.005-0.015（0.5%-1.5%） （ ） 新生儿： 新生儿：0.02-0.06（2%-6%） （ ） 儿童： 儿童：0.005-0.075（0.5%-7.5%） （ ） 成人绝对值（ 成人绝对值（24-84） ×109/L ）
七、临床意义
（1）评价骨髓增生能力，判断贫血类型 ）评价骨髓增生能力， 再障时 明显降低。绝对值低于 × 再障时，明显降低。绝对值低于5×109/L可 可 做为急性再障的辅助诊断指标。 做为急性再障的辅助诊断指标。 失血、多数溶血性贫血患者网织红细胞可明 失血、多数溶血性贫血患者网织红细胞可明 溶血性贫血 显高于正常。 显高于正常。 营养不良性贫血在治疗前网织红细胞可保持 营养不良性贫血在治疗前网织红细胞可保持 正常、轻度升高或降低。 正常、轻度升高或降低。
（3）放、化疗监测 机体接受放、化疗后，如出现骨髓抑制， 机体接受放、化疗后，如出现骨髓抑制， 早期HFR和MFR降低，然后才检测到网织 降低， 早期 和 降低 红细胞的降低。而停止放、化疗， 红细胞的降低。而停止放、化疗，骨髓功 能恢复后，又见上述指标依次上升。 能恢复后，又见上述指标依次上升。可指 导临床医师适时调整治疗方案， 导临床医师适时调整治疗方案，避免造成 严重的骨髓抑制。 严重的骨髓抑制。
网织红细胞计数
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手工法
魏氏法、温氏法、ζ血沉率及潘氏法, 检测原理相似。 差别在于抗凝剂、用血量、血沉管规 格、观察时间的不同，故各种方法的参 考值不同。 ICSH推荐魏氏法为血沉测定参考方法
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魏氏法
将枸橼酸钠抗凝血吸入
10mm
特制血沉管内，垂直立 ESR：10mm/h 于室温中，1h末读取红
细胞层下沉的距离，用
Ⅳ点粒型
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对网织红细胞的描述
是晚幼红细胞脱核后的未完全成熟的红细胞 体积比成熟红细胞体积稍大 胞浆内残存有正常核糖核酸(RNA) 具有合成血红蛋白的能力 核糖核酸越多，网织红细胞越幼稚 外周血中主要是Ⅳ型网织红细胞 网织红细胞经瑞氏染色为嗜多色性红细胞 存在于骨髓与外周血中
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网织红细胞计数（Ret）
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毫米（mm）数值报告。
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魏氏血沉测定
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自动血沉仪法
抗凝血液静置后，红细胞下降，红细胞 与血浆分离，其界面随时间而下移。血 沉仪用光电比浊法、红外线扫描法或摄 影法定时扫描红细胞与血浆界面位置， 得到血沉值并显示红细胞沉降高度H与 对应时间t相关的H-t曲线。
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方法学评价
方法 优点
缺点
魏氏法 国内规范方法， 测定血沉某时刻最
贫血→RBC总面积减少，ESR↑ RBC增多，ESR ↓ RBC直径愈大，ESR ↑ 球形RBC增多，ESR↓
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其他因素
血沉管位置 血沉管倾斜，血沉增快
温度 温度＞25℃，血沉增快，结 果应校正
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质量保证（魏氏法）
抗凝剂用量准确：枸橼酸钠（109mmol/L） 与血液之比（1：4）。
网织红细胞数 100%
1000
2018年(三)网织红细胞计数-2019年医学文档资料
目前，FCM检测网织红细胞主要用于 1）预测骨髓移植的效果； 2）解释各种红系增长低下性贫血的 发病原因; 3）评价某些新的重组生物制剂的治 疗效果。
三、操作步骤
1. 染色：于载玻片的一端加煌焦油蓝 酒精溶液1滴，任其自然凉干后备用， 取末梢血或抗凝血一滴，于已干燥的 染料上，用推片角混匀后，将两玻片 盖合（玻片法）；试管法取染液2滴入 试管，加血2滴混匀，封闭好，待15 分钟以上时间， 2. 推片：取混合液1小滴于载玻片的 一端，推制成薄而均匀的血膜，
（3）放、化疗监测 机体接受放、化疗后，如出现骨髓抑制，早期HFR和 MFR降低，然后才检测到网织红细胞的降低。而停止放、 化疗，骨髓功能恢复后，又见上述指标依次上升。可指导 临床医师适时调整治疗方案，避免造成严重的骨髓抑制。
网织红生成指数（Reticulocyte production index,RPI）
RPI=病人网织红细胞（%）/2 * 病人HCT/正常人HCT（男 0.45，女0.40） 临床应用： ＞3提示溶血性贫血或急性失血性贫血；
八、思考题
一溶血性贫血患者，红细胞计数 2.6x1012/L，血细胞比容0.29，网织红 细胞计数相对值为35%，如何报告网织 红细胞检测结果？
外周血网织红细胞计数（百分数和绝对 值）是一反映骨髓红系增生活性的常用 指标。许多学者先后提出应用FCM和不 同的RNA特异性荧光染料自动计数网织 红细胞的方法，如派若宁Y、AO、溴化 乙啶、thiazole orange等。 目前最普遍应用的是 thiazoie orange 染色法，这种特异性RNA 的激 发波（488nm）测量的特点，与人工计
Miller窥盘
将Miller窥盘放在显微镜目镜 中,通过窥盘中大小方格间的9 比1比例关系计算RBC数和Ret 数。
网织红细胞的临床意义
网织红细胞的临床意义网织红细胞计数（尤其是网织红细胞绝对值）是反映骨髓造血功能的重要指标。
正常情况下，骨髓中网织红细胞均值为150×109／L，血液中为65×109/L。
当骨髓Ret增多，外周血减少时，提示释放障碍；骨髓和外周血Ret均增加，提示为释放增加。
从网织红细胞成熟类型获得红细胞生成活性的其他信息，正常时，外周血网织红细胞中Ⅲ型约占20%～30%，Ⅳ型约占70%～80%，若骨髓增生明显，可出现Ⅰ型和Ⅱ型Ret。
1、判断骨髓红细胞造血情况（1）增多：见于①溶血性贫血：溶血时大量网织红细胞进入血循环，Ret可达6%～8%，急性溶血时，可达约20%，甚至50%以上，绝对值超过100×109／L。
急性失血后，5～10d网织红细胞达高峰，2周后恢复正常。
②放疗、化疗后：恢复造血时，Ret短暂和迅速增高，是骨髓恢复较敏感的指标。
③红系无效造血：骨髓中红系增生活跃，外周血网织红细胞计数正常或轻度增高。
（2）减少：见于再生障碍性贫血、溶血性贫血再障危象。
典型再生障碍性贫血诊断标准之一是Ret计数常低于，绝对值低于15×10 9／L。
2、观察贫血疗效缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血患者治疗前，Ret仅轻度增高（也可正常或减少），给予铁剂或维生素B12、叶酸治疗后，用药3～5天后，Ret开始上升，7～10天达高峰，2周左右，Ret逐渐下降，表明治疗有效医学*教育*网整理。
3、骨髓移植后监测骨髓移植后第21天，如Ret大于15×109／L，表示无移植并发症；小于15×109／L，伴嗜中性粒细胞和血小板增高，可能为骨髓移植失败。
4、网织红细胞生成指数（RPI）是网织红细胞生成相当于正常人的倍数。
不同生理、病理情况下，Ret从骨髓释放人外周血所需时间不同，故Ret计数值不能确切反映骨髓红细胞系统造血功能，还应考虑Ret生存期限。
一、网织红细胞(Ret)计数
优点：操作简单、快速，同时可获得多项血细胞参数。 缺点： ①不同的仪器使用的溶血素不同，形成不同的Hb 衍生物，某些溶血剂形成的衍生物稳定性差，故应严 格控制溶血剂的加入量及溶血时间。 ②有些溶血剂虽加入KCN,但衍生物并不是HiCN,而 是氰化血红蛋白仪器需经过校正后才能进行Hb测定。 ③ 低色素性贫血、某些肝病等，由于RBC具有抵 抗溶血剂的作用，导致RBC溶血不完全而影响Hb测定。
本试剂中含有少量KCN，废液必须无害化处理。
废液处理：用水按1:1稀释,再按每升液体加35ml次氯 酸钠，充分混匀，敞开容器口，过夜，使CN-氧化成N2 和CO2 ↑，或水解成CO32-和NH4+，然后倒入下水道。
【方法学评价】
1.氰化高铁血红蛋白（ HiCN ）法：
特点： ①WHO和ICSH推荐的标准方法，
5.Hb功能 运输O2和CO2,结合可逆。1分子Hb结合1分子O2 ，在标准 状况下，每克Hb能结合1.39 ml O2 。
。
血红蛋白测定
• 测定血液中各种血红蛋白的总浓度。 • 方法有多种
血红蛋白计法 氰化高铁血红蛋白法（HiCN） 十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法（SLS-Hb） 其他方法
血红蛋白计法
【正常参考值】
成人男： 120～160 g/L 成人女: 110～150 g/L 新生儿: 170～200 g/L
【临床意义】
贫血诊断优于RBC. Hb<120 g/L, （女，110 ）轻度， Hb<90 g/L, 中度 Hb<60 g/L, 重度 Hb<30 g/L, 极重度
【质量控制】
1.技术误差：稀释倍数尽量准确，分光光度计波、比色杯 光径要经常校正，以减少技术误差。 2.HiCN转化液：应置棕色瓶中，不得使用塑料容器，以防 CN-丢失。 3. HiCN参考液：是制备标准曲线、计算K值、校正仪器及 其他测定方法的关键物质，ICSH公布严格的 规格和制备方法。国产标准品已有供应
【2017年整理】网织红细胞计数
网织红细胞计数网织红细胞是未完全成熟的红细胞。
红细胞由骨髓进入外周血，需24-48h合成最后20％的血红蛋白，残余的嗜碱性物质才能完全消失，成为成熟的红细胞。
将其分为五型：花冠型、丝球型、网型、破网型、点粒型。
●仪器型号：Sysmex XE-2100型多项目自动血球分析装置●检测原理：一份血液样品经过吸液和定量、稀释至指定的稀释比，并进行染色。
然后将该样品送入流动的池中。
一个半导体激光束通过流动池照射到细胞上。
前向散射光由光二极管接收，侧面的散射光和侧面的荧光则由光点信增管（PMT）接收。
光信号被转化为电脉冲，从而可以得到有关血液细胞的信息。
⑴前向散射光和侧向散射光：当光通路中存在诸如粒子之类的障碍物时，该光束就在每个障碍物的不同方向上产生出散射光。
通过检测散射光，可以得到有关细胞体积大小和材质的信息。
与此同时，当一束激光照射到血细胞颗粒上时，就产生光散射。
散射光的强度，取决于颗粒直径和观察角度这样的因素。
对前向散射光进行检测，提供有关血液细胞体积大小的信息；同时对侧向散射光进行检测，提供有关细胞内部的信息。
⑵侧向荧光：当光照射到经过荧光染色的血液细胞上时，就产生比入射光波长更长的光。
随着染色集团浓度的增加，荧光强度也增加。
通过测●试剂：⑴CELLPACK（EPK）⑵RET SEARCHⅡ（RED）●标本吸入量：⑴手工模式130lμ⑵自动进样器模式200lμ●静脉血采血方法：抽取病人静脉血2ml，于EDTA二钾抗凝的真空采血管中（1.5mgEDTA-K2／ML）24小时室温保存。
●操作步骤：⑴当机器经过电源接通和一系列自检无误后，在机器左上放状态栏显示“READY”及确认“READY LED”（准备状态灯）呈绿色时，机器进入准备测量状态。
⑵要在允许空白值内：WBC RBC HGB PLT0.3⨯109/L 0.02⨯1012/L 1g/L 10⨯109/L⑶检测质控数值合格。
⑷标本的测量：手工模式：在准备测量状态下，按下屏幕最上一行数字键输入标本的编号，按吸液管放进待测标本试管中并按下开始键。
网织红细胞计数及临床意义
网织红细胞计数及临床意义一、概述1、网织红细胞（reticulocyte，Ret，RET）是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡细胞略大于成熟红细胞(直径8.0～9.5μm)，其胞质中残存的嗜碱性物质RNA经碱性染料（如煌焦油蓝、新亚甲蓝等）活体染色后，形成蓝色或紫色的点粒状或丝网状沉淀物。
2、网织红细胞自骨髓释放到外周血液后仍具有合成血红蛋白的能力，约1～2天后，过渡为成熟红细胞ICSH将网织红细胞分为4型（网织红细胞分型及特征）。
二、检测方法与原理1、普通显微镜法：网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，其胞质内尚有嗜碱性的RNA物质，经新亚甲蓝或煌焦油蓝活体染色后呈浅蓝或深蓝色网状结构。
2、血液分析仪法：特殊染料与网织红细胞中RNA结合后进行RNA定量，可精确计数网织红细胞占红细胞的百分数(Ret%)，并可根据RNA含量将网织红细胞分类及计算网织红细胞其他参数。
（一）普通显微镜法1、染色液①新亚甲蓝枸橼酸氯化钠染色液：新亚甲蓝0.1g溶于100ml枸橼酸氯化钠溶液内(1体积30g/L枸橼酸钠溶液与4 体积9.0g/L氯化钠溶液混合)，充分混匀，待染料溶解后过滤。
②煌焦油蓝生理盐水染色液：煌焦油蓝1.0g、枸橼酸钠0.4g、氯化钠0.85g，溶于双蒸馏水100ml中，过滤后备用。
2、操作①在小试管中加入染色液2滴；再加人静脉血（或末梢血)2滴，混后放置37℃恒温水箱中。
②10分钟后取1滴混悬液制成涂片③在油镜下直接观察1000个红细胞中Ret数。
或以Miller 窥盘计数法计数：Miler窥盘为一个厚为1mm、直径为19mm 的圆形玻片，玻片上用微细刻线画出两个正方形格子，大方格B面积为小方格A的9倍。
置于目镜内，计数小方格内红细胞数(将小方格内数得红细胞数乘以9，折算成一个大方格内的红细胞数)和大方格内的Ret数。
（窥盘结构）3、结果计算①直接观察法：网织红细胞比例=计数1000个红细胞中的网织红细胞数/1000②窥盘计数法：网织红细胞比例=大方格内网织红细胞数/（小方格内红细胞数×9）③网织红细胞绝对数(个/L)=网织红细胞百分数x红细胞数/L④网织红细胞生成指数(RPI)：RPI=（网织红细胞百分数/2）×(患者血细胞比容/0.45)三、参考区间1、网织红细胞比例：成年人：0.005～0.015新生儿：0.03～0.06；儿童：0.005～0.0152、网织红细胞绝对数成年人：（24～84）×10%/L四、注意事项1、标本应在4小时内进行处理。
网织红细胞计数——贫血性疾病的“金探针”
网织红细胞计数——贫血性疾病的“金探针”生活中部分家长肯定都经历过，怀疑孩子贫血，前往医院进行检查诊治时，医生都要求为孩子做网织红细胞计数，而此时很多家长便会有疑惑，贫血做个血常规不是就可以检查出来，为什么要做网织红细胞计数，这项检查的目的和临床意义是什么，万一对孩子身体造成伤害影响孩子成长发育该怎么办。
其实网织红细胞计数是诊断贫血性疾病的主要检查项目，重要性胜过血常规，现代临床医学也普遍认为网织红细胞计数，就是贫血性疾病的“金探针”；本文将对网织红细胞计数做全方位科普，以期更多的人了解该检查项目的实质性价值，最大限度消除人们对该项检查的误解和认知。
1、网织红细胞定义内容网织红细胞即人体内未彻底成熟的红细胞，多处于晚幼红细胞和成熟红细胞之间；同时网织红细胞也可看作是自晚幼红细胞离核而来，细胞质内还留有一些碱性RNA物质，若通过煌焦油蓝染色液行活体染色后，便可呈现清楚网状形态，故称网织红细胞；而正常情况下网织红细胞继续成熟，带RNA物质完全消失其便会转化为为成熟的红细胞。
2、网织红细胞和网织红细胞计数的区别网织红细胞和网织红细胞计数两者的区别其实也比较明显，网织红细胞指代此类细胞形态特质；网织红细胞计数主要按照其占外周红细胞（RBC）百分数来进行统计，所以网织红细胞计数检测结果往往更易随人体贫血程度的变化而发生改变。
而结合实际来看网织红细胞计数是清晰反映人体骨髓造血功能的重要依据，比如网织红细胞较多说明体内骨髓红系增生明显，患者可能会因此而患上溶血性贫血、急性失血性贫血、缺铁性贫血等疾病；若红细胞低于正常水平，即体内骨髓造血功能下降，患者发生再生障碍性贫血、骨髓病性贫血等疾病风险便会呈直线上升。
总结起来，其实两者区别主要体现在网织红细胞即人体红细胞未成熟期的过度细胞，可以反映骨髓红系造血功能，十分有利于相关贫血性疾病的判断；网织红细胞计数则可对贫血性疾病患者病情程度做实时分析。
起初医学界也对网织红细胞百分比或者绝对值表述提出了诸多疑问，医学界普遍认为贫血时人体骨髓生成红细胞增多，大量未成熟细胞会释放至血液内，这部分网织红细胞在外周血中成熟往往需要两天，而正常生理情况下骨髓释放至外周血网织红细胞，在血流中1天以后细胞质上的RNA便会消失；但随着Finch指出贫血时，计数得出网织红细胞生成指数，便可明确受检者网织红细胞生成对比正常人水平的具体差距，以此使网织红细胞计数的临床应用实效性可以充分得以体现。
《网织红细胞计数》课件
网织红细胞计数的步骤
1
血液采集
从患者的静脉或指尖采集一定量的血液样本。
2
染色
将采集的血液样本进行特殊染色，使网织红细胞能够更容易被观察和计数。
3
计数与分析
使用显微镜或自动计数器计算网织红细胞的数量，并进行结果分析。
网织红细胞计数的意义
1 评估骨髓功能
网织红细胞计数可以帮助确定骨髓造血功能是否正常。
2 诊断贫血原因
异常的网织红细胞计数可以提示贫血的原因，如骨髓问题或失血。
3 监测贫血程度
通过网织红细胞计数异常
增高的计数
骨髓过度活跃或排除性贫血可能导致网织红细 胞计数增高。
降低的计数
骨髓功能抑制或慢性病等原因可能导致网织红 细胞计数降低。
如何解读网织红细胞计数结果
正常结果
正常网织红细胞计数范围表示骨 髓造血功能正常。
增高结果
高于正常范围的计数可能表示骨 髓过度活跃或排除性贫血。
降低结果
低于正常范围的计数可能表示骨 髓功能受抑制或慢性病等原因。
结论和要点
1 网织红细胞计数可评估骨髓功能和贫血类型。 2 异常计数可能指示骨髓问题或其他疾病。 3 解读计数结果需要综合临床病史和其他检查数据。
《网织红细胞计数》PPT 课件
通过介绍网织红细胞计数的基本概念，本课件将帮助您了解这一重要的血液 检测指标。
什么是网织红细胞计数
网织红细胞计数是指检测血液中网织红细胞的数量，网织红细胞是未成熟的 红细胞前体细胞，其计数可用于评估骨髓功能和贫血状态。
为什么进行网织红细胞计数
网织红细胞计数可以提供关于骨髓造血功能的信息，帮助诊断和监测贫血的原因，并评估贫血类型的严重程度。
网织红细胞名词解释
网织红细胞名词解释网织红细胞是一种在骨髓中产生的红细胞先驱细胞，在正常情况下，网织红细胞应该仅存在于骨髓中，而不会进入血液循环。
当骨髓出现异常时，网织红细胞就有可能进入血液中，形成“网织红细胞”（reticulocyte）阳性，是评估骨髓功能的重要指标之一。
在正常情况下，造血过程中的红细胞分化过程如下：幼红细胞-正常红细胞。
幼红细胞是红细胞发育的早期阶段，它们包含一些残存的内质网（reticulin）线索，所以称为网织红细胞。
网织红细胞的检测方法通常是通过染色法（包括新月状素蓝染色和METACHEM染色法）或免疫荧光法（利用抗网织红细胞抗体）来进行。
在染色法中，网织红细胞会呈现出明亮的蓝色或绿色，并且在显微镜下可见有细网状结构。
在免疫荧光法中，抗体与网织红细胞结合后，会发出荧光信号。
检测网织红细胞的目的是评估骨髓功能和判断贫血的原因。
正常情况下，网织红细胞在血液中含量很低，但当骨髓功能异常或红细胞的生产速度加快时，网织红细胞数量会增加。
因此，网织红细胞的测量可以作为评估红细胞生成能力的指标。
网织红细胞计数的结果越高，说明骨髓造血功能越活跃。
对于贫血的患者，网织红细胞计数能够帮助鉴别贫血的原因。
例如，对于铁缺乏性贫血，由于缺乏铁元素，骨髓的红细胞生成能力降低，网织红细胞的计数会相对较低。
而在溶血性贫血中，由于红细胞的寿命缩短，骨髓会加速产生红细胞以满足需求，从而导致网织红细胞计数升高。
此外，在骨髓增生异常综合征等疾病中，网织红细胞的计数也会显著增加。
总之，网织红细胞是一种在骨髓中产生的红细胞先驱细胞，在正常情况下应该仅存在于骨髓中。
网织红细胞的计数可以帮助评估骨髓功能和鉴别贫血的原因，是临床上重要的血液指标之一。
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网织红细胞（reticulocyte）是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞。
因其质内尚存留多少不等的嗜碱物质，RNA，经煌焦油蓝，新亚甲蓝活体染色法染色后，嗜碱物质凝聚成颗粒，其颗粒又可联缀成线，而构成网织状，此种红细胞即网织红细胞，仍于骨髓内停留一定时间，然后再释放入血流医学|教育网搜集整理。
因此骨髓中的网织红细胞数，不但比外周血约高3倍。
而且亦较幼稚。
网状结构愈多，表示该细胞越幼稚，有人将其分成一、二、三、和四级。
即当红细胞内几乎被网织物充满者为一级，而红细胞内含网织物极少（上个或几个颗粒）者为四级。
通常网织红细胞比成熟红细胞稍大，直径为8-9.5μm.
他们继
续往前走。
走到了沃野，他们决定停下。
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”
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”。