组织学技术与方法 ppt课件
合集下载
《组织学实验》课件2
展示实验中观察到的组织 切片，标注出细胞、组织 结构等重要特征。
染色结果
展示不同染色方法的染色 结果，如HE染色、免疫组 化染色等，并解释染色原 理和意义。
定量分析
展示实验中进行的定量分 析结果，如细胞计数、面 积测量等，并解释其意义 和应用。
结果分析方法
统计分析
介绍实验中使用的统计分 析方法，如t检验、方差分 析等，并解释其适用范围 和优缺点。
实验数据与图像分析
实验过程中，我们采用了高倍显微镜和图像分析软件对组织样本进行了观察和测量。通过 对图像的处理和分析，我们获得了细胞形态、组织结构以及相关定量数据，这些数据为实 验结论提供了有力支持。
实验结果可靠性验证
为了确保实验结果的可靠性，我们对样本进行了多次重复观察和测量。同时，我们还采用 了统计方法对实验数据进行了处理和分析，进一步验证了实验结果的可靠性。
拓展阅读材料推荐
材料1
作者X，标题X，来源X，年份X
材料3
作者Z，标题Z，来源Z，年份Z
材料2
作者Y，标题Y，来源Y，年份Y
材料4
作者U，标题U，来源U，年份U
THANK YOU
率。
其他辅助工具
如切片机、染色缸、显 微镜载物台等。
实验方法与步骤
01
02
03
04
准备组织切片
将组织固定、包埋、切片，得 到可用于观察的组织切片。
染色处理
将组织切片放入染色缸中，加 入染色剂进行染色处理。
显微镜观察
将染色后的组织切片放在显微 镜载物台上，调整显微镜焦距 ，观察组织结构和细胞形态。
记录与拍照
记录观察结果，并使用显微镜 配备的拍照功能拍摄组织切片
的图像。
染色结果
展示不同染色方法的染色 结果，如HE染色、免疫组 化染色等，并解释染色原 理和意义。
定量分析
展示实验中进行的定量分 析结果，如细胞计数、面 积测量等，并解释其意义 和应用。
结果分析方法
统计分析
介绍实验中使用的统计分 析方法，如t检验、方差分 析等，并解释其适用范围 和优缺点。
实验数据与图像分析
实验过程中，我们采用了高倍显微镜和图像分析软件对组织样本进行了观察和测量。通过 对图像的处理和分析，我们获得了细胞形态、组织结构以及相关定量数据，这些数据为实 验结论提供了有力支持。
实验结果可靠性验证
为了确保实验结果的可靠性，我们对样本进行了多次重复观察和测量。同时，我们还采用 了统计方法对实验数据进行了处理和分析，进一步验证了实验结果的可靠性。
拓展阅读材料推荐
材料1
作者X，标题X，来源X，年份X
材料3
作者Z，标题Z，来源Z，年份Z
材料2
作者Y，标题Y，来源Y，年份Y
材料4
作者U，标题U，来源U，年份U
THANK YOU
率。
其他辅助工具
如切片机、染色缸、显 微镜载物台等。
实验方法与步骤
01
02
03
04
准备组织切片
将组织固定、包埋、切片，得 到可用于观察的组织切片。
染色处理
将组织切片放入染色缸中，加 入染色剂进行染色处理。
显微镜观察
将染色后的组织切片放在显微 镜载物台上，调整显微镜焦距 ，观察组织结构和细胞形态。
记录与拍照
记录观察结果，并使用显微镜 配备的拍照功能拍摄组织切片
的图像。
专题3《植物的组织培养技术》1ppt课件
⑺种质保存：繁殖量大，省空间，保存时间长
potato
tomato
pomato 泡马豆
⑷突变育种：采用组织培养可以直接诱变和筛选出 具抗病、抗盐、高赖氨酸、高蛋白等优良性状的品种
⑸基因工程：基因工程主要研究DNA的转导，而基 因转导后必须通过组织培养途径才能实现植株再生
⑹生物制品：有些极其昂贵的生物制品，可以用大 规模培养植物细胞来直接生产
⑵器官培养：
将植物的器官如 胚、胚乳、珠心、 子房、根、茎、 叶、花和幼果的 部分组织接种在 无菌培养基上进 行培养。
⑶细胞和原生质体 培养：
细胞培养是将植 物的单个细胞分离出 来，并进行培养，而 原生质体培养是指将 植物细胞的细胞壁通 过机械、物理或化学 的方法去除，然后再 进行培养。
原球茎----主要是兰科植物在诱导时，分化出的原初植物形态，具 有完整植株的器官雏形，成苗容易。 胚状体-----由愈伤组织或表面形成的许多类似胚的突起，是初步 分化的幼小生命体，芽根有共同的维管束，是双极性结构，起源 于单细胞，无嵌合现象，结构完整，可直接形成小植株，成苗率 高，去分化难，再分化也很难。
– mitosis and chromosome replication compete with virus replication
– high auxin in meristem inhibits virus replication
– a virus “inactivating” system has greatest activity in meristem
再分化：经脱分化的组织或细胞在一定的培养 条件下可有转变为各种不同细胞类型的能力。
4.植物组织培养分类
➢按材料的类别分
愈伤组织培养 细 胞 培养 器 官 培养 原生质体培养
potato
tomato
pomato 泡马豆
⑷突变育种：采用组织培养可以直接诱变和筛选出 具抗病、抗盐、高赖氨酸、高蛋白等优良性状的品种
⑸基因工程：基因工程主要研究DNA的转导，而基 因转导后必须通过组织培养途径才能实现植株再生
⑹生物制品：有些极其昂贵的生物制品，可以用大 规模培养植物细胞来直接生产
⑵器官培养：
将植物的器官如 胚、胚乳、珠心、 子房、根、茎、 叶、花和幼果的 部分组织接种在 无菌培养基上进 行培养。
⑶细胞和原生质体 培养：
细胞培养是将植 物的单个细胞分离出 来，并进行培养，而 原生质体培养是指将 植物细胞的细胞壁通 过机械、物理或化学 的方法去除，然后再 进行培养。
原球茎----主要是兰科植物在诱导时，分化出的原初植物形态，具 有完整植株的器官雏形，成苗容易。 胚状体-----由愈伤组织或表面形成的许多类似胚的突起，是初步 分化的幼小生命体，芽根有共同的维管束，是双极性结构，起源 于单细胞，无嵌合现象，结构完整，可直接形成小植株，成苗率 高，去分化难，再分化也很难。
– mitosis and chromosome replication compete with virus replication
– high auxin in meristem inhibits virus replication
– a virus “inactivating” system has greatest activity in meristem
再分化：经脱分化的组织或细胞在一定的培养 条件下可有转变为各种不同细胞类型的能力。
4.植物组织培养分类
➢按材料的类别分
愈伤组织培养 细 胞 培养 器 官 培养 原生质体培养
组织化学技术教程PPT课件
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
案例一：乳腺癌组织化学染色分析
总结词
乳腺癌组织化学染色分析是研究乳腺癌的重要手段， 通过染色技术观察癌细胞形态和组织结构变化，有助 于诊断和预后评估。
详细描述
乳腺癌是一种常见的恶性肿瘤，组织化学染色分析可 以帮助医生了解癌细胞的分化程度、恶性程度以及转 移情况。在染色过程中，常用的染色方法包括HE染色 、免疫组化染色和特殊染色等。通过观察癌细胞核增 大、核沟、核沟蛋自质等特征，可以判断癌细胞的恶 性程度和分化程度。此外，组织化学染色还可以用于 检测癌细胞转移和浸润的情况，为临床治疗提供依据 。
组织化学技术教程
目录
• 组织化学技术概述 • 组织化学技术的基本原理 • 组织化学技术的实际应用 • 组织化学技术的挑战与未来发展 • 案例分析
01 组织化学技术概述
定义与特点
定义
组织化学技术是一种利用化学反应来 检测组织或细胞内特定化学物质的方 法。
特点
高灵敏度、高特异性、可定量分析、 可定位分析等。
20世纪初
随着新技术的不断涌现，组织 化学技术得到迅速发展，并逐 渐应用于医学领域。
20世纪中叶
随着免疫组织化学和原位杂交 技术的出现，组织化学技术进 入了一个新的发展阶段。
21世纪
随着Байду номын сангаас白质组学和基因组学研究 的深入，组织化学技术在生命科
学领域的应用越来越广泛。
02 组织化学技术的基本原理
组织样本的获取
解决方案
针对这些挑战，可以采取优化实验条件、改进抗体标记技术、发展新型荧光染料 和探针等措施，提高检测的灵敏度和特异性。同时，加强样本处理和数据分析方 法的研究，提高实验结果的可靠性和可重复性。
01组织学绪论PPT课件
7.细胞培养术（cell culture） • 把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件 下进行培养；培养组织块或器官则称组织培 养术或器官培养术。 • 用于研究细胞、组织的代谢、增殖、分化、 形态和功能变化，各种理化因子对活细胞的 影响。 • 培养条件：营养、生长因子、pH值、渗透压 O2和CO2浓度、温度，控制污染。 • 用相差显微镜观察。
扫描电镜图，血细胞
3.组织化学和细胞化学术
组织化学(histochemistry)和细胞化学 (cytochemistry)术是用化学或物理反应原理 显示组织或细胞内某种化学成分，并对其 进行定位、定量及其相关功能的研究。将 该技术应用于游离细胞的样品，则称细胞 化学术。
组织化学术: 组织中的某种结构成分与所加试剂发生化 学反应、并呈现某种颜色,在显微镜下可观察到
体外培养的平滑肌细胞 （免疫组织化学染色显示肌动蛋白）
8. 组织工程（tissue engineering） 将组织学和材料学相结合，利用组织细胞
培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技 术。
正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨 骼肌、血管、角膜等；其中以组织工程皮肤 较为成功，已成为商品用于治疗烧伤、皮肤 静脉性溃疡等疾病。
1）普通光学显微镜切片标本的制备方法
• 石蜡切片术(paraffin section): 取材、 固定、脱水、包埋、切片、脱蜡和 染色、封片。
苏木精-伊红染色法 (hematoxylin-eosin staining, HE染色法)：
嗜碱性(basophilia):苏木精为碱性染料,可使 细胞核内的染色质和胞质内的核糖体等结 构染成紫蓝色, 易被碱性染料着色的性质称 为嗜碱性。 嗜酸性(acidophilia):伊红为酸性染料,使细胞 质和细胞外基质中的成分染成粉红色,易被 酸性染料着色的性质称为嗜酸性。 中性
信息组织学第9章信息组织技术.ppt
9.1.4 密码(续)
3．密码三要素 1)明文： 通信双方要传递信息的真实内容 2)密钥： 加密算法或变换规则 3)密文： 替代匹配明文在通信过程中使第三方无 法解读的一种特殊的语言。
9.2 自动分词与标引技术
9.2.1 自动分词 目前常用的汉语分词技术有： (1)词典分词法：
扫描文本，将读出的信息与计算机内的词典按匹配 标准匹配。 (2)切分标记法：
9.1.3 条形码(续)
3．条形码设计的注意事项 6)条码的连续性与非连续性： 7)条码的长度： 8)条码识读的方向性：
单向与双向 9)条码的纠错能力：
具有自校验功能
9.1.4 密码
2．密码的类型 1)替代密码： 2)伪文密码： 3)隐式密码： 4)移置密码： 5)公开密钥密码和仿真密码：
9.1.4 密码(续)
第九章 信息组织技术
组织技术包含的种类很多，本章主要介绍一般性 的信息组织技术，如代码和编码技术、分词和标引技 术、数据库技术、数据仓库技术，以及适合于数字资 源组织的超文本技术和用于构建数字空间的虚拟现实 技术。
9.1 代码与编码技术
9.1.1 代码 1．代码的概念
代码是符号的一种，它与语言文字、图形、数字符 号一样，可以用来代表或描述特定的信息，它不是通常 的符号，而是指那些为便于信息组织、传播、存贮检索 和加工处理而设计的非常规的符号。
9.1.3 条形码(续)
1．条形码发展概论 2．条形码技术的特点 (1)信息输入速度快 (2)信息输入准确性高 (3)信息的保持性高 (4)信息采集量大
9.1.3 条形码(续)
3．条形码设计的注意事项 (1)条码字符集：
代码可用的全部字符的集合 (2)条码符号的密度：
《组织学技术》课件
萌芽
19世纪中叶， 组织学技术逐
渐成熟
20世纪初，组 织学技术开始 应用于医学领
域
20世纪中叶， 组织学技术在 医学领域得到
广泛应用
21世纪初，组织 学技术在医学领 域得到进一步发 展，如免疫组织 化学、分子生物 学等新技术的应
用
材料科学领域：用于材料结 构分析、材料性能测试等
生物技术领域：用于基因克隆、 基因表达分析、蛋白质组学研 究等
PART FIVE
病理诊断：通过组织学技术对病变组织进行观察和分析，为疾病的诊断提供依据 肿瘤研究：通过组织学技术对肿瘤组织进行研究，了解肿瘤的发生、发展和转移机制 药物研发：通过组织学技术对药物作用机制进行研究，为药物的研发提供依据 疾病预防：通过组织学技术对疾病易感人群进行筛查，为疾病的预防提供依据
单细胞组 织学：研 究单个细 胞，揭示 细胞间的 相互作用 和功能
组织学大数 据：利用大 数据技术进 行组织学研 究，提高研 究效率和准 确性
组织学人工 智能：利用 人工智能技 术进行组织 学研究，提 高研究效率 和准确性
组织学与临 床医学的结 合：将组织 学研究与临 床医学相结 合，提高疾 病的诊断和 治疗水平
医学领域：用于病理诊断、肿 瘤诊断、细胞生物学研究等
环境科学领域：用于环境污 染物检测、环境监测等
农业科学领域：用于植物病 理学研究、植物育种等
食品科学领域：用于食品安 全检测、食品成分分析等
PART THREE
组织学技术的定义：研究组织结构 和功能的科学
组织学技术的应用：在医学、生物 学、病理学等领域有广泛应用
分析：根据观察结果进行分析和判断
样本采集：确保样本新鲜，避免污染
固定：选择合适的固定剂，避免组织变 形
19世纪中叶， 组织学技术逐
渐成熟
20世纪初，组 织学技术开始 应用于医学领
域
20世纪中叶， 组织学技术在 医学领域得到
广泛应用
21世纪初，组织 学技术在医学领 域得到进一步发 展，如免疫组织 化学、分子生物 学等新技术的应
用
材料科学领域：用于材料结 构分析、材料性能测试等
生物技术领域：用于基因克隆、 基因表达分析、蛋白质组学研 究等
PART FIVE
病理诊断：通过组织学技术对病变组织进行观察和分析，为疾病的诊断提供依据 肿瘤研究：通过组织学技术对肿瘤组织进行研究，了解肿瘤的发生、发展和转移机制 药物研发：通过组织学技术对药物作用机制进行研究，为药物的研发提供依据 疾病预防：通过组织学技术对疾病易感人群进行筛查，为疾病的预防提供依据
单细胞组 织学：研 究单个细 胞，揭示 细胞间的 相互作用 和功能
组织学大数 据：利用大 数据技术进 行组织学研 究，提高研 究效率和准 确性
组织学人工 智能：利用 人工智能技 术进行组织 学研究，提 高研究效率 和准确性
组织学与临 床医学的结 合：将组织 学研究与临 床医学相结 合，提高疾 病的诊断和 治疗水平
医学领域：用于病理诊断、肿 瘤诊断、细胞生物学研究等
环境科学领域：用于环境污 染物检测、环境监测等
农业科学领域：用于植物病 理学研究、植物育种等
食品科学领域：用于食品安 全检测、食品成分分析等
PART THREE
组织学技术的定义：研究组织结构 和功能的科学
组织学技术的应用：在医学、生物 学、病理学等领域有广泛应用
分析：根据观察结果进行分析和判断
样本采集：确保样本新鲜，避免污染
固定：选择合适的固定剂，避免组织变 形
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
• 取材时要注明取材时间、组织名称、固定液名 称、组织块数量，以备查。
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
15
2.各种因素对组织标本的取材的影响
•
如各种内窥镜钳取的组织，常因过度挤压
而变形，严重者组织结构被破坏。大组织标本
病变分布广泛，抗原在组织中分布不均一，常
出现人为的组织取材不准确。为了避免上述缺
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
14
• 取材的先后：应根据动物死后组织结构改变的 速度的快慢而定。首先打开腹腔，取出消化管， 因为消化管在血液循环停止后，黏膜很快发生 自溶现象；其次为肝脏、脾脏等多血器官及神 经组织；再其次才是其他脏器。
• 取材的大小：切取的组织块应小而薄，大小一 般以2cm×1.5cm×0.3cm为好，但有些特殊要 求的可视情况而定。
制作光镜组织学标本最常用的方法是 石蜡包埋切片法,即用石蜡把组织块包起 来，使组织变硬，便于切薄。其主要步 骤如下：
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
5
1.取材、固定
取材一般在动物死后2小时以内取。 将取下的新鲜的组织块迅速投入固定液 中进行固定。固定液的种类很多，常用 的有：福尔马林、酒精、丙酮及一些混 合固定液。固定的目的在于使组织中的 蛋白质迅速凝固，以停止其死亡前的变 化，从而保持标本的结构接近于其生前 的正常状态。
用固定液固定进行脱水、浸蜡、包埋、石蜡切片。
如不能迅速制片，可贮存于 -196℃液氮罐内或-80℃
冰箱内备用。
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
17
二、细胞和组织的固定
• 为了更好的保持细胞和组织原有的
形态结构，防止组织自溶，有必要对细 胞和组织进行固定。固定的作用不仅是 使细胞内蛋白质凝固，终止或抑制外源 性和内源性酶活性，更重要的是最大限 度的保存细胞和组织的抗原性，使水溶 性抗原转变为非水溶性抗原，防止抗原 弥散。
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
18
（一）、固定剂
1．醛类固定剂（单纯固定剂）双功能交联剂，其作用是使组织 之间相互交联，保存抗原于原位，其特点是对组织穿透性强， 收缩性小。有人认为它对IgM、IgA、J链、K链和λ链的标记 效果良好，背景清晰，是常用的固定剂。
（1）10%钙-福尔马林液 （40%甲醛10ml，饱和碳酸钙水溶液90ml）。
点，组织取材时应注意：①活检钳的刃口必须
锋利，以免组织受挤压；②取材部位必须是主要Leabharlann 变区；③必须取病灶与正常组织交界区；
④必要时取远距病灶区的正常组织作对照。
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
16
3.取材后的处理
•
为充分保存组织的抗原性，标本离体后应立即
作处理，或立即速冻成冻块进行冰冻切片，或立即
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
组织学切片标本制作技术简介
组织学技术与方法
组织学与胚胎学的研究技术
常用技术 [1].石蜡切片(paraffin sectioning)术 取材固定→脱水包埋→切片染色→封片 [2].冰冻切片(freezing sectioning) 取材→速冻→冰冻切片→染色→封固 [3].其他:涂片-血液、磨片-牙、铺片-CT等。
精品资料
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
6
2.脱水、透明、浸蜡
固定后的组织用水冲洗后，组织中
充满水分，妨碍石蜡的侵入，必须用不
同浓度的酒精将组织中的水分脱净，这
一过程称为脱水。脱水后组织中含有酒
精，仍不能与石蜡相融，要用二甲苯或
氯仿替代酒精，组织经过二甲苯后呈现
透明状态，这一过程称为透明。把透明
包埋器
蜡块
2021/3/3
粘好的 木块
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
载玻 片
8
4.染色、封固
贴好的切片，经过脱蜡、酒精侵水等过程后，即可进行染色。常 用的染色方法是苏木素伊红染色法（Hematoxylin Eosin stain），简称Ｈ&
Ｅ染色法。苏木素是一种碱性染料，可使组织细胞中的酸性物质（ 又称嗜碱性物质）染成紫蓝色，如细胞核中的染色质等；伊红是一 种酸性染料，可使组织细胞中的碱性物质（又称嗜酸性物质）染成 红色，如多数细胞的细胞质、核仁等在H&E染色的切片中均呈红色
后的组织块投入融化的石蜡中浸润，使
组织内的空隙充满石蜡，产生一定的硬
度，这叫浸蜡。
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
7
3 .包埋、切片 浸蜡后，把组织块放入装有溶化的固体石蜡的包埋器中，待
石蜡凝固后，组织块便被包埋在里面，成为蜡块，这一过程称 为包埋。把包埋好的蜡块修好，粘在木块上，便可放到切片机 上，切成5—6μm厚的薄片，然后贴在干净的载玻片上，置于 60℃左右的温箱内烤干。
13
一、组织标本的取材
• 1. 来源： 组织标本主要取之于活组织检查标 本、手术切除标本、动物模型标本以及尸体解 剖标本等。前三者均为新鲜组织，后者是机体 死亡2h以上的组织，可能有不同程度的自溶， 其抗原可能有变性消失，严重弥散现象，因此， 尸检组织应尽快固定处理，以免影响免疫组化 标记效果。但有些较稳定性抗原，如HBsAg、 HBcAg等在尸检标本中，抗原显示仍较好。
组织标本
9
显 微 镜 模 式 图
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
10
德国莱卡手动切片机
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
11
苏木素伊红染色法（Hematoxylin Eosin stain）
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
12
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
，很易跟细胞核区别。另外，还有硝酸银染色、三色或多色染色等 ，在此不作介绍。染色后，经酒精脱水、二甲苯透明，即可封固。 封固时,在切片标本上滴一滴树胶，盖上盖玻片，干后即成为既可
以在镜下观察又能够长期保存的标本。
标签
载玻片 盖玻片
三、切202片1/3/观3 察:
HE染色、封固后的切片
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
15
2.各种因素对组织标本的取材的影响
•
如各种内窥镜钳取的组织，常因过度挤压
而变形，严重者组织结构被破坏。大组织标本
病变分布广泛，抗原在组织中分布不均一，常
出现人为的组织取材不准确。为了避免上述缺
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
14
• 取材的先后：应根据动物死后组织结构改变的 速度的快慢而定。首先打开腹腔，取出消化管， 因为消化管在血液循环停止后，黏膜很快发生 自溶现象；其次为肝脏、脾脏等多血器官及神 经组织；再其次才是其他脏器。
• 取材的大小：切取的组织块应小而薄，大小一 般以2cm×1.5cm×0.3cm为好，但有些特殊要 求的可视情况而定。
制作光镜组织学标本最常用的方法是 石蜡包埋切片法,即用石蜡把组织块包起 来，使组织变硬，便于切薄。其主要步 骤如下：
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
5
1.取材、固定
取材一般在动物死后2小时以内取。 将取下的新鲜的组织块迅速投入固定液 中进行固定。固定液的种类很多，常用 的有：福尔马林、酒精、丙酮及一些混 合固定液。固定的目的在于使组织中的 蛋白质迅速凝固，以停止其死亡前的变 化，从而保持标本的结构接近于其生前 的正常状态。
用固定液固定进行脱水、浸蜡、包埋、石蜡切片。
如不能迅速制片，可贮存于 -196℃液氮罐内或-80℃
冰箱内备用。
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
17
二、细胞和组织的固定
• 为了更好的保持细胞和组织原有的
形态结构，防止组织自溶，有必要对细 胞和组织进行固定。固定的作用不仅是 使细胞内蛋白质凝固，终止或抑制外源 性和内源性酶活性，更重要的是最大限 度的保存细胞和组织的抗原性，使水溶 性抗原转变为非水溶性抗原，防止抗原 弥散。
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
18
（一）、固定剂
1．醛类固定剂（单纯固定剂）双功能交联剂，其作用是使组织 之间相互交联，保存抗原于原位，其特点是对组织穿透性强， 收缩性小。有人认为它对IgM、IgA、J链、K链和λ链的标记 效果良好，背景清晰，是常用的固定剂。
（1）10%钙-福尔马林液 （40%甲醛10ml，饱和碳酸钙水溶液90ml）。
点，组织取材时应注意：①活检钳的刃口必须
锋利，以免组织受挤压；②取材部位必须是主要Leabharlann 变区；③必须取病灶与正常组织交界区；
④必要时取远距病灶区的正常组织作对照。
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
16
3.取材后的处理
•
为充分保存组织的抗原性，标本离体后应立即
作处理，或立即速冻成冻块进行冰冻切片，或立即
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
组织学切片标本制作技术简介
组织学技术与方法
组织学与胚胎学的研究技术
常用技术 [1].石蜡切片(paraffin sectioning)术 取材固定→脱水包埋→切片染色→封片 [2].冰冻切片(freezing sectioning) 取材→速冻→冰冻切片→染色→封固 [3].其他:涂片-血液、磨片-牙、铺片-CT等。
精品资料
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
6
2.脱水、透明、浸蜡
固定后的组织用水冲洗后，组织中
充满水分，妨碍石蜡的侵入，必须用不
同浓度的酒精将组织中的水分脱净，这
一过程称为脱水。脱水后组织中含有酒
精，仍不能与石蜡相融，要用二甲苯或
氯仿替代酒精，组织经过二甲苯后呈现
透明状态，这一过程称为透明。把透明
包埋器
蜡块
2021/3/3
粘好的 木块
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
载玻 片
8
4.染色、封固
贴好的切片，经过脱蜡、酒精侵水等过程后，即可进行染色。常 用的染色方法是苏木素伊红染色法（Hematoxylin Eosin stain），简称Ｈ&
Ｅ染色法。苏木素是一种碱性染料，可使组织细胞中的酸性物质（ 又称嗜碱性物质）染成紫蓝色，如细胞核中的染色质等；伊红是一 种酸性染料，可使组织细胞中的碱性物质（又称嗜酸性物质）染成 红色，如多数细胞的细胞质、核仁等在H&E染色的切片中均呈红色
后的组织块投入融化的石蜡中浸润，使
组织内的空隙充满石蜡，产生一定的硬
度，这叫浸蜡。
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
7
3 .包埋、切片 浸蜡后，把组织块放入装有溶化的固体石蜡的包埋器中，待
石蜡凝固后，组织块便被包埋在里面，成为蜡块，这一过程称 为包埋。把包埋好的蜡块修好，粘在木块上，便可放到切片机 上，切成5—6μm厚的薄片，然后贴在干净的载玻片上，置于 60℃左右的温箱内烤干。
13
一、组织标本的取材
• 1. 来源： 组织标本主要取之于活组织检查标 本、手术切除标本、动物模型标本以及尸体解 剖标本等。前三者均为新鲜组织，后者是机体 死亡2h以上的组织，可能有不同程度的自溶， 其抗原可能有变性消失，严重弥散现象，因此， 尸检组织应尽快固定处理，以免影响免疫组化 标记效果。但有些较稳定性抗原，如HBsAg、 HBcAg等在尸检标本中，抗原显示仍较好。
组织标本
9
显 微 镜 模 式 图
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
10
德国莱卡手动切片机
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
11
苏木素伊红染色法（Hematoxylin Eosin stain）
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
12
2021/3/3
宁夏医科大学组胚（研究生课程）
，很易跟细胞核区别。另外，还有硝酸银染色、三色或多色染色等 ，在此不作介绍。染色后，经酒精脱水、二甲苯透明，即可封固。 封固时,在切片标本上滴一滴树胶，盖上盖玻片，干后即成为既可
以在镜下观察又能够长期保存的标本。
标签
载玻片 盖玻片
三、切202片1/3/观3 察:
HE染色、封固后的切片
宁夏医科大学组胚（研究生课程）