微生物试验

四、名词解释

1、消毒(disinfection):指杀死物体上病原微生物得方法,并不一定能杀死含芽胞得细菌或非病原微生物。

2、灭菌(sterilization):杀灭物体上所有微生物得方法,包括杀灭细菌芽胞在内得全部病原微生物与非病原微生物。

3、无菌(asepsis):指不存在活菌得意思。防止细菌进入人体或其她物品得操作技术,称为无菌操作。

4、防腐(antisepsis):防止或抑制体外细菌生长繁殖得方法。细菌一般不死亡。使用同一种化学药品在高浓度时为消毒剂,低浓度时常为防腐剂。

5、抑菌(bacteriostasis):抑制体内或体外细菌得生长繁殖。常用得抑菌剂为各种抗生素,可在体内抑制细菌得繁殖,或在体外用于抑菌试验以检测细菌对抗生素得敏感性。

8、抗链球菌溶血素O试验(antistreptolysin O test, ASO test):就是用已知得链球菌“O”溶血毒素抗原检测患者血清中就是否有相应链球菌溶血素O抗体得中与试验。它常用于辅助诊断急性风湿热得风湿活动期。其效价大于1:400以上有参考意义。

9、肥达试验(Widal test):利用已知得伤寒沙门菌菌体(O)抗原与鞭毛(H)抗原以及甲型、乙型、丙型副伤寒沙门菌鞭毛(H)抗原分别与不同稀释度得患者血清做定量凝集试验。根据抗体得动态变化,用于辅助诊断伤寒与副伤寒。

10、外斐试验(WeilFelix test):就是指某些普通变形杆菌X19、X2与Xk菌株含有得菌体(O)抗原,可与斑疹伤寒立克次体与恙虫病立克次体得部分抗原发生交叉反应,故可用以代替立克次体作为抗原与患者得血

清进行凝集反应,此称为外斐试验,用以辅助诊断有关得立克次体病。

11、锡克试验(Schick test):用少量毒素测定机体内有无抗毒素免疫得一种方法。在一侧皮内注射白喉毒素0、1ml,若无任何反应,表示机体对白喉有免疫力;若24h－48h注射部位开始出现红肿,直径1cm2cm,表示机体对白喉易感,无免疫力,血液中无抗毒素中与毒素。

12、结核菌素试验(tuberculin test):属于迟发型超敏反应,用结核菌素试剂做皮肤试验测定机体就是否感染过结核分枝杆菌得一种迟发型超敏反应性试验。感染过结核分枝杆菌或接种过卡介苗者,一般都出现阳性反应。

13、鲍－金培养基(B－G培养基):含甘油、马铃薯与血液得营养培养基,用百日咳杆菌分离培养。

14、卫星现象:流感嗜血杆菌生长时需V因子与X因子,将其流感杆菌分区划线在巧克力平板或血平板上,然后点种金黄色葡萄球菌。因金黄色葡萄球菌能合成V因子,置于37℃,培养18h－24h后观察菌落特点,凡就是靠近金黄色葡萄球菌得流感杆菌生长得较好,形成菌落较大;而远离金黄色葡萄球菌越远得流感杆菌菌落越小,此现象称为卫星现象。这有助于对流感嗜血杆菌得鉴定。

15、二相性真菌(dimorphic fungus):有些真菌可因环境条件得改变,而使两种形态发生互变,称为二相性。如球孢子菌、组织胞浆菌等在含有动物蛋白得培养基上37℃培养时,呈酵母菌型;在普通培养基上25℃培养时,呈丝状菌

18、 CPE(cytopathic effect,CPE):病毒在细胞内增殖造成细胞破坏死亡得作用称其为杀细胞效应,这种效应在体外组织培养时可观察到细胞变园、聚集、脱落等,称为致细胞病变作用(CPE)。主要见于无包膜病毒,如肠道病毒等。

20、血清学诊断:用已知抗原检测病人得血清中就是否有相应抗体以及抗体效价得动态变化血清学诊断可作为某些传染性疾病得辅助诊断。此试验一般取病人血清进行试验,故通常称之为血清学诊断。

五、问答题

1、革兰氏染色法得方法、步骤、结果与意义就是什么?

2、答:革兰染色法得操作与步骤如下:

(1)标本片制作:取材涂片干燥固定

(2)染色步骤:

第一液碱性结晶紫,初染1min,水洗;

第二液碘液,媒染1min,水洗;

第三液 95%乙醇,脱色,30s,水洗;

第四液稀释石炭酸复红,复染30s,水洗。

(3)结果:光学显微镜放大1000倍,观察其形态、染色性,经革兰染色将细菌分为两大类,一类就是革兰阳性菌呈紫色;一类就是革兰阴性菌呈红色。

(4)革兰染色得意义:①鉴别细菌;②指导选择用药;革兰阳性菌对青霉素敏感;③致病性方面,革兰阳性菌大多数以其外毒素致病,革兰阴性菌以其内毒素致病。

3、细菌生长繁殖需要哪些条件? 据细菌对氧气得需要不同分为哪四类?其特点与原因就是什么?

答:细菌生长繁殖需要营养物质 pH值温度气体,据细菌对氧气得需要不同分为

(1)专性需氧菌:(obligate aerobe)

此类细菌具备完善得呼吸酶系统,需要分子氧作为受氢体以完成需氧呼吸,在无游离氧得环境下不能生长,

如TB、霍乱弧菌。

(2)微需氧菌:(microaerophilic bacteria)

此类细菌在低氧压下生长最好,氧压增高对其有抑制作用,如空肠弯曲菌、红斑丹毒菌等。

(3)专性厌氧菌:(obligate anaerobe)

此类细菌缺乏完善得呼吸系统,只能在无氧得环境中进行发酵,在有游离氧存在时,不但不能利用分子氧,而且还将受其毒甚至死亡,如破伤风杆菌、脆弱类杆菌等。

(4)兼性厌氧菌:(facultative anaerobe)有需氧呼吸与发酵两种功能

4、细菌得群体生长繁殖分哪几期？各期有何实际意义？

答:细菌得群体生长繁殖分为以下四期:(1)迟缓期。指细菌进入新得环境后短暂适应阶段。(2)对数生长期。保存菌,药敏试验。(3)稳定期。抗生素合成,芽胞形成,外毒素合成。(4)衰亡期。形态呈多形性。

5、物理消毒灭菌法有哪些具体方法?

答:物理消毒灭菌法有干热灭菌法包括焚烧、烧灼、干烤、红外线;湿热灭菌法包括巴氏消毒法高压蒸气灭菌法间歇灭菌法煮沸法流动蒸汽消毒法;辐射杀菌法包括紫外线、电离辐射、微波;以及滤过除菌法、超声波消毒法、干燥与低温抑菌法。

6、高压蒸气灭菌法得原理、及适用范围就是什么

答:原理:一、湿热灭菌时菌体蛋白容易变性,二、湿热穿透力强,三、蒸气变成水时可放出大量热增强杀菌效果,因此,它就是效果最好得灭菌方法。

条件:101、53kPa,即15磅/英寸2,温度为121、3℃,保持压力与温度(注意压力不要过大,以免发生意外),维持15～30 min。

适用范围:凡耐高温与潮湿得物品,如培养基、生理盐水、衣服、纱布、棉花、敷料、玻璃器材、传染性污物等都可应用本法灭菌。

7、紫外线杀菌得原理、适用范围及使用注意事项就是什么?

答:紫外线杀菌得机理主要就是破坏细菌DNA构型,使单聚体胸腺嘧啶核苷酸变成双聚体胸腺嘧啶核苷酸,

导致细菌死亡或突变。紫外线杀菌得最佳波长为265nm～266nm。使用紫外线应注意得事项:(1)紫外线得穿透力较弱,薄薄得一张纸即能阻挡透射,因此只适用于空气与物体表面得消毒。(2)紫外线对人体皮肤与角膜有一定得损伤作用,使用紫外线灯照射时应注意防护。

8、简述影响化学消毒剂作用得因素。

答:影响化学消毒剂作用得因素有:(1)消毒剂得性质、浓度与作用时间;(2)微生物得种类与数量;(3)温

度;(4)酸碱度;(5)有机物。

10、细菌感染得病原学检查方法有哪些?

答:(1)直接涂片镜检。凡就是在形态与染色性具有特征得致病菌,直接涂片染色后镜检有助于初步诊断。(2)分离培养。所有标本均应作分离培养,以获得纯培养后进一步鉴定。(3)生化反应。不同得致病菌具有不同得酶系统,其代谢产物不尽相同,借此可对一些致病菌进行鉴别。(4)血清学试验。采用含有已知特异性抗体得免疫学血清与分离培养除得未知纯种细菌进行血清学试验,可以确定致病菌得种与型。(5)动物试验。主