HPV检测目的及最佳检测技巧

2015最新CFDA指导原则以服务临床为最终目的
2015年CFDA新的指导原则，从临床目的出发，精确注册标准要求
阳性判 断值
设定与临床 风险相关的 阳性判断标 准Cutoff
临床敏
以CIN2+为 临床终点的 敏感度和特 异度
• 初筛
感度、
特异度
临床适 应症
• 联合筛查 • ASCUS分 流
一项检测技术，要想满足以上要求，必须基于长时间大量的临床验证才能实现
最强的致癌型别，几 个致癌位点已经明确 充足流行病学证据证 实会导致宫颈癌 缺乏宫颈癌流行病学 证据，但从致癌机制 上有强的证据支持
2009 WHO IARC Special Report Policy A review of human carcinogens Part B
HPV检测的目的是什么？
1个HIV/HBV = AIDS/HBV 1个HPV ≠ CIN或宫颈癌
专家对HPV检测是否要临床验证如何看待？
（80-90%的女性HPV感染是一过性的，可在6-24个月通过自体免疫清除）
高危型HPV持续感会导致宫颈癌 从HPV感染到宫颈癌，一般需要10－20年 一过性的感染会自身清除
高分析敏感度
检测与临床无关的病毒 水平（假阳性）
HPV病毒检测的目的 及最佳检测方法
主要内容
1、HPV检测的目的是什么？
2、HPV检查的最佳方法？
3、德同产品介绍
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HPV检测的目的是什么？
■ 只是为了查有没有HPV病毒感染？
■ 是为了查HPV感染型别，检测型别越多越好？ ■ 是为了发现已经存在的CIN2+病变和预CIN2+ 的
风险人群？
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HPV检测的目的是什么？
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HPV检测的目的是什么？
2015年CFDA针对HPV检测试剂阳性判断值的规定：临床灵敏度特异度的Cutoff值
不再是单纯的病毒检测，而是强调“临床”，不再是制造商说了算，而是临 床说了算 阳性判断标准是要获得理想临床敏感度和特异度的临界值，制造商不能仅凭 简单的病毒检测数据来制定，建议使用ROC曲线的方式进行评估，这需要大 量临床检测数据才能最终找到理想的临界值
另外最多可包含5种不确 定风险的HPV型别
• 可包含不确定其风险的“中等风险型”5种：HPV26、 53、66、73、82
HPV检测型别太少的产品如只检测5种型别、2种型别（如HPV16/18）等，将 不能再注册
HPV检测的目的是什么？
中国CFDA明确限制低危型HPV检测
不能盲目的追求过多的HPV检测型别
恢复阶段：免疫响应 早期感染会自身清除
Snijders et al. Journal of Pathology 2003; 201:1-6
HPV检测的目的是什么？
HPV病毒含量与临床病变的关系
进展为高级病变
CIN病变
无CIN病变
HPV检测的目的是什么？
WHO指南对于HPVCutoff有明确推荐检测阳性判断值
阳性判断值（Cutoff）的设定，在2013年的WHO宫颈癌筛查和管理 指南中是有具体建议的，其推荐高危型HPV 检测cut-off 值≥1.0 pg/ml
HPV检测的目的是什么？
WHO guidelines for screening and treatment of precancerous lesions for cervical cancer prevention. © World Health Organization 2013
不建议将低危型HPV检测用于宫颈癌筛查
• 如申报的宫颈癌相关HPV核酸检测产品涉及上述18种以
限制申报其他型HPV
外的其他HPV基因型，则需提出明确理由和依据 • 且应得到国际有关权威机构的文献支持。
• 不建议将低危型HPV检测用于宫颈癌筛查
限制申报低危型HPV
• 若申请人提出低危型HPV检测相关产品注册，则应详细解 释其临床意义和适应症，并提供充分的证据 。
杂交捕获技术 （HPV检测的金标准）
产品
德国凯杰的：HC2 杭州德同的：DH2、DH3
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HPV检查的最佳方法
杂交捕获技术 的三大优势：
1、独特的探针技术：14 种全长 8000RNA 探针，避免因 区域片段（如 L1 区）丢失造成的假阴性 2、无需DNA提取，无需核酸扩增，有效避免因环境因素造 成的假阳性
HPV检测的目的是什么？
答案：
■只是为了查有没有HPV病毒感染？NO
■是为了查HPV感染型别，检测型别越多越好？NO ■是为了发现已经存在的CIN2+病变和预CIN2+ 的风险
人群？
yes
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主要内容
1、HPV检测的目的是什么？
2、HPV检查的最佳方法？
3、德同产品介绍
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HPV检查的最佳方法
HPV DNA检测技术分类
直接核酸检测（无需PCR实验室） • 杂交捕获技术 （HC2、DH1、DH2、DH3）
• 酶切信号放大法 （Cervista）
核酸扩增后检测——PCR类技术（需PCR实验室） • 膜杂交法
•
• Fra Baidu bibliotek •
基因芯片法
反向点杂交法 流式荧光杂交法 荧光探针法
HPV检查的最佳方法
HPV检查的最佳方法
HPV检测的目的是什么？
2015年欧洲IPV大会：宫颈癌筛查HPV检测目的
HPV检测不是为了检测病毒，不是一过性感染，而是检测感染病毒后的进展风险 HPV检测需要关注临床敏感度，最大化的保护低风险人群，最大化的辨别高风险人群
2015 IPV Conference，Mark. Stoler
HPV检测的目的是什么？ 2016年CSCCP会议
2015年中国CFDA明确HPV检测型范围
• 高危型13种：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、
宫颈癌相关检测必须包 含13种高危HPV型别
52、56、58、59、68 • 若可检测的HPV基因型别不能涵盖上述13种高危型，则 可能造成阴性预期值无法达到临床要求，因此不能用于 宫颈癌筛查。-------不能少！！！
HPV检测不是仅仅为了检出HPV感染，而是为了发现已经存在的CIN2+病变和预测 CIN2+的风险； 对于HPV检测来说，最重要的是临床灵敏度和阴性预测值
WHO / IRAC 明确检测13种HPV
从流行病学和致癌机制证据方面，WHO/IRAC 明确检测13种HPV型别： HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68